الاستعدادات
تقييم نظام اختبار إليسا الجديد
"فيروس الروتا - مستضد - ELISA-BEST"
12 زيراكوفسكايا إي في ، 3 إغناتيف ج. إم ، 3 إنديكوفا آي إن ، 12 تيكونوفا إن.
1 FGUN SSC VB "ناقل" من Rospotrebnadzor ، مستوطنة Koltsovo ، منطقة نوفوسيبيرسك ؛
2 معهد البيولوجيا الكيميائية والطب الأساسي ، نوفوسيبيرسك ؛
3 المعهد الحكومي للتوحيد القياسي والتحكم في المنتجات البيولوجية الطبية الذي يحمل اسم V.I. L.A. Tarasevichag موسكو
يتم تقديم نتائج اختبار حساسية وخصوصية وإمكانية استنساخ مجموعة جديدة من الكواشف "الروتا - مستضد - IFA-BEST" التي تم تطويرها في JSC "Vector-Best" (نوفوسيبيرسك). تتيح البيانات التي تم الحصول عليها التنبؤ بمصداقية النتائج عند استخدام نظام الاختبار هذا لاكتشاف مستضد المجموعة A من فيروس الروتا في المواد السريرية.
الكلمات المفتاحية: نظام اختبار ELISA ، الكفاءة ، فيروس الروتا أ
تعد فيروسات الروتا المجموعة أ (عائلة Reoviridae ، جنس الفيروسة العجلية) السبب الأكثر شيوعًا لالتهاب المعدة والأمعاء الحاد لدى الأطفال الصغار في جميع أنحاء العالم. غالبًا ما يصاب البالغون الذين يعانون من ضعف في جهاز المناعة. عدوى الفيروسة العجلية (RVI) هي مرض شديد العدوى له طرق متعددة للانتقال. مصدر العدوى هو شخص مصاب بشكل واضح أو بدون أعراض للمرض ، وكذلك حامل للفيروس. بين الأطفال والبالغين ، يمكن أن يتجلى RVI في شكل حالات متفرقة ، وأمراض جماعية محلية ، وتفشي مرض منتشر على نطاق واسع. تتحقق آلية انتقال العدوى عن طريق الفم - البراز عن طريق الطعام (الحليب ومنتجات الألبان ، أغذية الأطفال) ، والمياه وطرق الاتصال المنزلية.
يعد تشخيص التهاب المعدة والأمعاء بفيروس الروتا من خلال الصورة السريرية ، خاصةً مع الاعتلال المتقطع ، صعبًا بعض الشيء ، لأن الأعراض المميزة لهذه العدوى تختلف قليلاً عن أعراض الالتهابات المعوية الحادة الأخرى (AEI) من مسببات مختلفة. يتم إجراء التشخيص التفريقي للمرضى المصابين بالتهاب المعدة والأمعاء بفيروس الروتا مع عدوى السموم الغذائية ومع مسببات الفيروسية الأخرى (فيروسات النوروفيروس والفيروسات النجمية والفيروسات الغدية والفيروسات التاجية وفيروسات كوكساكي المعوية و ECHO) والبكتيريا (السالمونيلا والزحار والكوليرا) المسببات. لسوء الحظ ، لا تقوم جميع المؤسسات الطبية المتخصصة في الاتحاد الروسي بتشخيص عدوى الفيروسة العجلية.
تهدف طرق التشخيص لـ RVI إلى اكتشاف الفيروسات الكاملة أو المستضد الفيروسي أو الحمض النووي الريبي الخاص بالفيروس في البراز. نهج واعد للكشف المباشر عن الفيروسات في كل من المواد السريرية والأشياء البيئية هو طريقة النسخ العكسي - تفاعل البلمرة المتسلسل (RT-PCR). في السنوات الأخيرة ، تم إنشاء أنظمة اختبار على أساس التطورات العلمية الحديثة مع مجموعة من الطرق المختلفة للكشف عن فيروسات الروتا: تعدد إرسال تفاعل البوليميراز المتسلسل مع تهجين - الكشف الفلوري عن منتجات التضخيم "عند نقطة النهاية" ؛ جهاز PCR المناعي القائم على نقطة النهاية (IPCR) مع الكشف في الوقت الفعلي ؛ RT-PCR الكمي مع الكشف في الوقت الحقيقي. تستخدم المعامل البحثية المجهر الإلكتروني للكشف السريع عن فيروسات الروتا. ومع ذلك ، فإن جميع الأساليب المذكورة أعلاه شاقة إلى حد ما وتتطلب أدوات باهظة الثمن وموظفين مؤهلين تأهيلاً عالياً. لذلك ، عند إجراء التشخيصات المخبرية في المستشفيات وفي العيادات الخارجية ، يتم إعطاء الأفضلية للطرق القائمة على اكتشاف المستضد الفيروسي في البراز باستخدام مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم (ELISA) مع الأجسام المضادة أحادية ومتعددة الأضداد لفيروسات الروتا. هذه الطريقة متاحة للمختبرات العملية ، وهي سهلة الإعداد وتتيح لك الحصول على نتيجة بسرعة.
الغرض من هذا العمل هو دراسة الكفاءة التشخيصية لمجموعة جديدة من الكواشف "الروتا - مستضد - IFA-BEST" التي تم تطويرها في JSC "Vector-Best" ، نوفوسيبيرسك.
^ سبتمبر وديسمبر
المواد والأساليب
كانت مادة الدراسة عبارة عن عينات من براز الأطفال الصغار الذين تم تشخيصهم بـ AEI وبدون مظاهر سريرية للعدوى المعوية ، والذين تم نقلهم إلى المستشفى في أقسام الالتهابات المعوية والتهابات الجهاز التنفسي في مستشفى مدينة الأطفال السريري رقم 3 ، نوفوسيبيرسك. تم جمع عينات البراز في عبوات بلاستيكية معقمة يمكن التخلص منها بحجم 2-3 مل عند إدخال المرضى إلى قسم المستشفى وتخزينها في -20 درجة مئوية لمدة 15 يومًا. تم إجراء تخزين أطول للمادة عند - 70 درجة مئوية.
تم اختبار لوحة مؤلفة من 104 عينة براز مبدئيًا لوجود مسببات أمراض OCI. منهم:
30 عينة تم فيها اكتشاف فيروسات روتا المجموعة A فقط بواسطة ELISA و RT-PCR ؛ أظهر التنميط الجيني بواسطة RT-PCR أن عينات البراز تحتوي على فيروسات روتا من النمط الجيني PG1 (18 عينة) ، PG2 (4 عينات) ، PG3 (3 عينات) ، PG4 (عينتان) ، PG4 (عينة واحدة) ، PG9 (عينة واحدة) ، PG3 (عينة واحدة) ؛
14 عينة ، تم فيها الكشف عن فيروسات نوروفيروس من النمط الجيني الثاني فقط بواسطة RT-PCR ، والذي تم تأكيده من خلال تحديد تسلسل النيوكليوتيدات 5 "- منطقة الجين القفيصة الموجودة على جينوم فيروسات النوروفيروس في منطقة 5085-5485 ح.
15 عينة تم فيها اكتشاف الفيروسات النجمية فقط بواسطة RT-PCR ، وهو ما تم تأكيده من خلال تحديد تسلسل النيوكليوتيدات 5 "- منطقة الجين القفيص الموجود في جينوم الفيروسات النجمية في منطقة 4526-4955 ن .15 عينة حيث تم اكتشاف فيروسات غدية فقط بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل ؛
30 عينة براز (سيطرة) مأخوذة من أطفال ليس لديهم مظاهر سريرية لعدوى معوية ، تم إدخالهم إلى المستشفى في قسم الجهاز التنفسي بالمستشفى ؛ لم يكشف التحليل الأولي عن مسببات الأمراض الفيروسية المذكورة أعلاه في هذه العينات.
تم اختبار العينات لوجود أو عدم وجود فيروسات عفن ونورو وفيروسي وغداني بواسطة RT-PCR باستخدام مجموعات تجارية "AmpliSens No go virus 1، 2 genotypes - 306/322" و "AmpliSens Astrovirus -165" المسجلة في الاتحاد الروسي ، "AmpliSense Adenovirus - 462" ، "AmpliSense Rotavirus - 290" (من إنتاج FGUN Central Research Institute of Epidemiology، RF). تم فحص العينات وفقًا لتعليمات استخدام مجموعات الكاشف ذات الصلة خلال فترة الصلاحية. تم التنميط الجيني للعينات الإيجابية لوجود الفيروس العجلي بواسطة RT-PCR. تم أيضًا تحديد وجود أو عدم وجود مستضد فيروس الروتا بواسطة ELISA باستخدام نظام اختبار تجاري IDEIA ™ Rotavirus ، (DakoCytomation ، المملكة المتحدة) وفقًا لتعليمات المجموعة.
عند اختبار مجموعة أدوات الكاشف Rota-virus-antigen-ELISA-BEST ، تم تشفير جميع العينات المذكورة أعلاه (104) واختبارها ثلاث مرات باستخدام مجموعة الاختبار. عند الانتهاء من الاختبارات تم فك تشفير العينات وتحليل النتائج.
نتائج ومناقشة
تم تقييم حساسية مجموعة أدوات الكاشف "الروتا- مستضد- ELISA-BEST" من خلال عدد مصادفات النتائج الإيجابية (٪) لعينات الاختبار باستخدام نظام الاختبار المختبَر والأدوية المرجعية. في الوقت نفسه ، تم الكشف عن أنه عند استخدام مجموعة الكاشف "فيروس الروتا - مستضد - ELISA-BEST" ، كانت جميع العينات الثلاثين ذات الوجود المؤكد لفيروس الروتا A إيجابية (الجدول 1). وبالتالي ، فإن حساسية مجموعة الاختبار للكشف عن فيروس الروتا A كانت 100٪. وتجدر الإشارة إلى أن اللوحة تضمنت عينات من سبعة أنماط وراثية مختلفة من الفيروسات العجلية ، وتم اكتشافها جميعًا بنجاح باستخدام مجموعة الكاشف "الروتا - المستضد - I FAB - EST".
تم تقييم خصوصية نظام الاختبار من خلال عدد مصادفات النتائج السلبية (٪) لعينات الاختبار باستخدام نظام الاختبار الذي تم اختباره مع الدراسات الأولية المقدمة. لتقييم الخصوصية ، تضمنت اللوحة المستخدمة 30 عينة لم يتم فيها اكتشاف مسببات الأمراض الفيروسية ، بالإضافة إلى 14 عينة تم فيها اكتشاف فيروسات نوروفيروس فقط من النمط الجيني الثاني باستخدام طريقة RT-PCR ، 15 عينة تم فيها استخدام طريقة RT-PCR تم اكتشاف الفيروسات النجمية فقط ؛ 15 عينة تم فيها اكتشاف فيروسات غدية فقط بواسطة تفاعل البوليميراز المتسلسل. تم تحديد أنه في 69 من أصل 74 عينة سالبة ، لم تتجاوز قيم الكثافة الضوئية أثناء الكشف باستخدام مجموعة كاشف فيروس الروتا-مستضد- ELISA-BEST لوجود فيروس الروتا A قيم الخلفية ، أي القيم تم الحصول عليها نتيجة قياس الكثافة الضوئية في عينات التحكم السلبية. أظهرت عينتان تحتويان على فيروسات نجمية ، وعينة واحدة - نوروفيروس من النمط الجيني الثاني ، وعينة واحدة - فيروسات غدية ، وعينتان لم يتم فيه اكتشاف أي من مسببات الأمراض الفيروسية المذكورة أعلاه ، مؤشرات كثافة بصرية إيجابية. وتجدر الإشارة إلى أنه في العينات التي لم يتم فيها اكتشاف مسببات الأمراض الفيروسية سابقًا ، تم تسجيل الإشارات الإيجابية فقط في واحدة من الدراسات المتكررة (الجدول 2). وهكذا ، كانت خصوصية مجموعة كاشف الفيروسة العجلية - المستضد - إليسا - أفضل 93.2٪.
في سياق الاختبارات ، تم تقييم إمكانية تكرار النتائج التي تم الحصول عليها باستخدام مجموعة اختبار الكواشف "فيروس الروتا - مستضد - ELISA-BEST" على المواد السريرية - تم فحص جميع العينات ثلاث مرات في تجارب مختلفة لتحديد التباين في النتائج . في جميع الحالات تقريبًا ، تم الحصول على نتائج مماثلة: كشف نظام الاختبار عن جميع العينات السلبية والإيجابية بنفس الطريقة. كان الاستثناء هو عينتان ، حيث لم يتم اكتشاف أي من مسببات الأمراض الفيروسية سابقًا: في إحدى النسخ المتماثلة لكلتا العينتين ، تجاوزت قيم الكثافة الضوئية ODcrit. وتجدر الإشارة إلى أن الفائض كان ضئيلاً (الجدول 2). وبالتالي ، كانت قابلية تكرار النتائج 98.8٪.
أظهرت نتائج الاختبارات أن مجموعة اختبار الكواشف "فيروس الروتا - مستضد - ELISA-BEST" في كفاءتها التشخيصية - النوعية والحساسية والتكاثر - يمكن مقارنتها بالتشخيصات المتاحة في الاتحاد الروسي.
باستخدام المجموعة المختبرة من الكواشف "Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST" للكشف عن مستضد المجموعة A من فيروس الروتا في المواد السريرية.
المؤلفات
1. بوجومولوف ب. // "الأمراض المعدية: التشخيص في حالات الطوارئ والعلاج والوقاية". - م. - 2007.
2. Vasiliev B.Ya. ، Vasil'eva RI ، Lobzin Yu.V. // "الأمراض المعوية الحادة. عدوى الفيروسات العجلية والفيروسات العجلية ". - S.-Pb. ، لان. - 2000.
3. Zhirakovskaya EV ، Tikunov A.Yu. ، Bodnev O.A. ، وآخرون // "BIOPreparations". - 2008 - رقم 2. - ص. 15-18.
4. Zhirakovskaya E.V.، Maleev V.V.، Bodnev A.C. وغيرها. // ZhMEI - 2008 - رقم 4. - مع. 12 - 16.
5. Ignatyuk TE ، Golutvin IA ، Nasikan NS ، وآخرون. // "أسئلة في علم الفيروسات". - 2003. - ق 48. - رقم 6. - ص. 1721.
6. Novikova H.A.، Fedorova O.F.، Epifanova NV، Chuprova A.B. // "أسئلة علم الفيروسات". - 2007. - 52. -3 - ص. 19-23.
7. Podkolzin A.T. ، Mukhina AA ، Shipulin GA et al. //
"أمراض معدية". - 2004. - ق 2. - رقم 4. - ص. 85-91.
8. Podkolzin AT و Fenske EB و Abramycheva N.Yu وآخرون // "الأرشيف العلاجي". - 2007. - ضد 79. - رقم 11. - ص. 10-16.
9. Sergevnin VI، Woldschmidt NB، Sarmometov EV، et al. // علم الأوبئة والأمراض المعدية. -2004.-№ 6.- ص. 17-20.
10.Sergevnin V.I. ، Woldschmidt NB ، Sarmometov E.V. ، et al. // النظافة والصرف الصحي. - 2007. - رقم 1. - ص. 56-58.
11. Arcangeletti MC، De Conto E، Pinardi F.، at al. // اكتا بيوميد. أتينيو. بارمينس. - 2005. -V. 76 (3). - ص 165-170.
12. جلادستون ب. ، إتوريزا-جومارا م ، راماني س ، في آل. // Epidemiol. تصيب. - 2008. V.136 (3). - ص 399-405.
13. مين بي إس ، نوهي جيه ، شين جي إتش ، أتال. // ج. فيرول. أساليب. -2006. - V. 137 (2). - ص 280 - 286.
14. سانتوس ن. ، هونما س. ، تيمينتسكي مدو C. ، في آل. // ج. كلين. ميكروبيول. - 2008. V. 46 (2). - ص 462 - 469.
15 Schets F. M.، van Wijnen J.H، Schijven J.F، at al. // تطبيق. بيئة. ميكروبيول. - 2008. - V. 74 (7). - ص 2069 - 2078.
16. Stockman L. J.، Staat M. A.، Holloway M.، at al. // جى كلين. ميكروبيول. - 2008. - V. 46 (5). - ص 1842 - 1843.
تقييم حساسية وخصوصية مجموعة كاشف "فيروس الروتا - مستضد - ELISA-BEST"
الجدول 1
عدد العينات عدد العينات نتائج الكشف مع المستحضرات المرجعية IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR نتائج الكشف مع مجموعة "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
تقييم خصوصية مجموعة الكاشف "فيروس الروتا - مستضد - ELISA-BEST" -
الجدول 2
PCR AmpliSens
فيروس روتا روتا روتا
0,443 1,306 0,676 0,418
مستضد فيروس الروتا - IFA - أفضل CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
سبتمبر
ديسمبر 2009
AmpliSens
روتا روتا روتا روتا روتا روتا روتا روتا روتا روتا
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0.150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
فيروس الروتا
أوبكريت 0.250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
مستضد ELISA-BEST "Vector-Best"
أوبكريت أوبكريت 0.263 0.251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
الفيروس الفلكي ، الفيروس الفلكي ، الفيروس الفلكي ، الفيروس الفلكي ، الفيروس الفلكي ، الفيروس الفلكي ، الفيروس النجمي ، الفيروس الفلكي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي ، الفيروس الغدي
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0.150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EecT"
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
ديسمبر 2009
PCR AmpliSens
Adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus إهمال الإهمال
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0.150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
فيروس الروتا - مستضد - IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
يعتبر علاج داء الديدان الطفيلية عند الأطفال أمرًا بالغ الأهمية ، لأن عواقب ذلك يمكن أن تكون تأخرًا في تطور العمليات الجسدية والعقلية والمرضية للأعضاء والأنظمة الداخلية ، وحتى الموت. بالإضافة إلى ذلك ، فإن تفشي الديدان الطفيلية معدي للغاية ، وهذا هو سبب انتشارها بسهولة في مؤسسات ما قبل المدرسة والمدارس. بناءً على ذلك ، من الواضح مدى أهمية علاج داء الديدان الطفيلية في الوقت المناسب عند الأطفال.
أولى علامات الديدان الطفيلية عند الأطفال
الديدان هي عوامل ممرضة مشروطة لجسم الإنسان ، والديدان التي يكون الإنسان مالكها النهائي. بالإضافة إلى ذلك ، في هذا الصدد ، لا يلعب عمر المالك أي دور ، ويمكن ملاحظة أنواع مختلفة من داء الديدان الطفيلية في كل من الأطفال والمرضى البالغين.
لماذا داء الديدان الطفيلية خطير على الطفل؟
كما ذكرنا سابقًا ، يمكن أن تسبب الديدان الطفيلية عند الأطفال أمراضًا وأمراضًا خطيرة ، مما يؤدي إلى تباطؤ النمو العقلي والبدني. يمكن أن تكون المضاعفات المحتملة لكل نوع من أنواع الديدان الطفيلية مختلفة تمامًا ، على سبيل المثال:
لذلك ، تتطلب داء الديدان الطفيلية للأطفال مزيدًا من الاهتمام والمساعدة الطبية في الوقت المناسب والمتابعة طويلة المدى من قبل أخصائي والوقاية.
الأعراض الرئيسية عند الأطفال
قد تختلف أعراض داء الديدان الطفيلية عند الطفل ، اعتمادًا على نوع الديدان:
1. تظهر الديدان المستديرة نفسها على الفور على أنها رد فعل تحسسي وحمى وغثيان لدى الطفل. عادة ما تكون المظاهر الأولى مشرقة ، لكنها تهدأ بسرعة. بعد ذلك يمكن ملاحظة الأعراض التالية: 
- المغص و dysbiosis وحديثي الولادة.
- عند الأطفال دون سن 1 سنة ، ألم في السرة ، مشاكل في البراز ، حساسية وأهبة ؛
- يعاني الأطفال الأكبر سنًا من مشاكل في النوم وسلوك مضطرب وكوابيس.
- يتميز الأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 3 و 7 سنوات بالغثيان والحمى والسعال وآلام البطن والطفح الجلدي.
2. داء السرميات ، العامل المسبب له هو الديدان الدبوسية ، يتجلى في صورة سريرية محو. وفقط بعد شهر واحد ، يمكن ملاحظة الأعراض التالية:
- عند الأطفال حديثي الولادة ، التهاب ، تورم واحمرار في فتحة الشرج ، رفض الأكل ، بكاء في الليل ، قلة الشهية.
- يتميز الأطفال الذين تقل أعمارهم عن سنة واحدة بنفس الأعراض ، وكذلك حكة شديدة في فتحة الشرج ليلاً (من الساعة 23.00 إلى 1.00) ، وتعاني الفتيات من التهاب في الأعضاء التناسلية ؛
- عند الأطفال الأكبر سنًا ، آلام في البطن بالقرب من السرة ، واضطراب في النوم ، وحكة في الأرداف.
3. يصعب التعرف على أعراض داء التوكسوكريات ، باستثناء انخفاض درجة حرارة الجسم وردود الفعل التحسسية (طفح جلدي ، خلايا ، حكة وتورم). بعد الإصابة بالعدوى ، قد يحدث سعال ، مما يؤدي إلى مزيد من الالتهاب الرئوي أو التهاب الشعب الهوائية ، وخاصة في المرضى الصغار. 
يشير داء الشعرينات إلى وجود علامات خفيفة عند الأطفال حديثي الولادة ، وإلا لوحظت العلامات التالية:
- حالة محمومة
- تورم في الوجه.
- ألم عضلي؛
- ردود فعل تحسسية
- قد يعاني الأطفال بعمر 5 سنوات فما فوق من تضخم اللوزتين والطحال والطفح الجلدي والتهاب الحلق.
يصعب تشخيص أعراض داء الديدان الطفيلية عند الأطفال بعمر سنتين أو أقل ، لأن الطفل لا يستطيع شرح سلوكه وحالته. لذلك ، بالنسبة لأي مظاهر غير نمطية وسلوك الطفل ، فمن الأفضل أن تظهر للطبيب.
ما هو أول شيء تفعله؟
تعد الديدان التي تم العثور عليها في براز الطفل من أهم أعراض المرض ، وبعد ذلك تحتاج إلى طلب المساعدة على الفور من الطبيب. لا يمكن أن يكون علاج الديدان الطفيلية ناجحًا بدون تشخيص يتم إجراؤه بشكل صحيح. يجب أن تكون طرق المسح في هذه الحالة معقدة ، بما في ذلك الإجراءات التالية: 
- أخذ تجريف من فتحة الشرج.
- دراسة براز الطفل
- فحص الدم؛
- خزعة العضلات في حالات نادرة مع داء الشعرينات المشتبه بها ؛
- فحص الدم المصلي
- الأشعة السينية والموجات فوق الصوتية والتصوير المقطعي.
- ELISA للكشف عن الأجسام المضادة في الدم.
طرق العلاج
يجب أن يكون علاج داء الديدان الطفيلية عند الأطفال شاملاً ومدروسًا جيدًا وموصوفًا بجرعات دقيقة وتكرار تناول الدواء. هذا يرجع إلى حقيقة أن الأدوية التي تحتوي على مكونات سامة تستخدم للتأثير المضاد للديدان ، مما يعني أن الاستخدام غير العقلاني يمكن أن يؤدي إلى آثار جانبية. بالإضافة إلى ذلك ، في المنزل ، العلاج الشعبي بالنباتات الطبية مناسب.
العلاجات الشعبية
يشمل العلاج الحديث بالعلاجات الشعبية لمثل هذه الأمراض للأطفال 4 طرق فعالة: 
يجب مناقشة أي طريقة علاج منزلي مع طبيبك مسبقًا. يجب أن نتذكر أن هناك موانع للأعشاب والعلاجات الشعبية في شكل التعصب الفردي.
العلاج من الإدمان
- مع داء المعوية وداء الصفر ، عادة ما يتم استخدام الأدوية مثل Pirantel و Mebendazole. يعتبر تناول Pirantel مناسبًا بجرعة 10 مجم من المادة لكل كيلوغرام من الوزن من الديدان الدبوسية ، و 5 مجم / كجم من الأسكاريس. يتم تناول ميبندازول مرتين في اليوم عند 50 مجم للأطفال الذين تتراوح أعمارهم بين 2-3 سنوات لمدة ثلاثة أيام متتالية ، ومرتين مقابل 100 مجم لمدة ثلاثة أيام متتالية للأطفال فوق سن 3 سنوات ، وبعد 3 أسابيع يتكرر العلاج.
- في حالة داء التوكسوكاريز ، يوصف ميبندازول بجرعة مختلفة - للأطفال بعمر سنتين وما فوق ، مرتين في اليوم ، 100 مجم لمدة 14-10 يومًا.
- يقبل علاج دودة الخنزير ميبندازول 5 ملغ لكل كيلوغرام من الوزن ، وبعد ذلك تقسم الجرعة إلى ثلاث جرعات في اليوم. مسار العلاج 1 أسبوع تحت إشراف دقيق من الطبيب.
الوقاية من داء الديدان الطفيلية
- غسل اليدين مباشرة بعد ملامسة الحيوانات ، وبعد الشارع وحفر الرمل ، والذهاب إلى المرحاض وقبل تناول الطعام ؛
- تناول الأطعمة النظيفة فقط ؛
- المعالجة الحرارية المناسبة للحوم والأسماك ؛
- شرب الماء المغلي
- مراعاة النظافة الشخصية والصرف الصحي ؛
- التخلص من الديدان العادية للحيوانات الأليفة ؛
- إجراء التخلص من الديدان الوقائية عند الأطفال من عمر سنتين فما فوق.
فحص الدم لعربات التوكسوكار
ملامح العدوى البشرية مع داء المقاريب
الناقلون للعدوى هم الكلاب ، وأقل القطط. يتم توزيع بيض التوكسوكارا مع براز الكلاب الضالة. بمجرد وصولهم إلى الأرض أو في الماء أو البقاء على فراء حيوان ، يتم إدخالهم في جسم صحي بطرق مختلفة.
رد فعل على التطفل
من المعروف من الإحصاءات الطبية أن البالغين أقل عرضة للإصابة بداء التوكسوكريات ، ما لم تكن مهنتهم معرضة للخطر. الأطفال أكثر عرضة للإصابة بعدوى.
الأعراض الأكثر شيوعًا لمرض التوكسوكارس:
- حمى بدون أي مرض.
- زيادة درجة الحرارة.
- زيادة وتخفيف الآلام في الرأس أو البطن.
- ظهور طفح جلدي لا يمكن القضاء عليه.
- انتفاخ الوجه.
- زيادة في مستوى الحمضات في الدم ، يكشف عنها تحليل عام.
لإجراء تشخيص دقيق ، يتم وصف اختبار مناعي لعربات التوكسوسار. إن وجود مركبات البروتين في الدم ، التي تحمل المعلومات الجينية للديدان الطفيلية (المستضدات) ، يثير مناعة لإنتاج الأجسام المضادة من فئة igg. هذه هي العلامة الأولى لعدوى داء المقارز.
التشخيصات الأولية
المرحلة الأولى من تاريخ المريض جماعي. قبل إرسال المريض لإجراء فحص دم لداء التوكسوكاريز ، من الضروري دراسة تاريخ المرض وإجراء فحص أولي.
التشخيص الأولي:
- دراسة الظروف المشددة التي يمكن أن تثير العدوى - العمل المحدد مع الحيوانات أو وجود حيوان أليف ، التنقيب في مناطق يحتمل أن تكون خطرة ، الأطفال يلعبون في الأماكن التي تمشي فيها الكلاب.
- الفحص البدني للمريض. فحص الجلد للغزو تحت الجلد بواسطة توكسوكارس والجفون ومقل العيون والجس.
- موعد فحص دم مفصل. أثناء الإصابة بداء التوكسوكريات ، هناك زيادة كبيرة في بعض المؤشرات - الحمضات (70-80 ٪) ، الخلايا الليمفاوية ، ESR. في حين أن مستوى الهيموجلوبين ينخفض بشكل ملحوظ.
- أخذ عينات من الكبد. مع الغزو الشديد ، يؤثر الحمل على الكبد ، والذي يتجلى في قفزة قوية في البيليروبين.
من المستحيل الحصول على تأكيد مباشر من غزو Toxocar باستخدام الاختبارات الروتينية (الدم ، الكوبروغرام ، اللطاخة). كما أن دراسة الاثني عشر ليست مفيدة ، حيث يصعب هجرة اليرقات.
بعد تلقي نتائج الفحص الأولي ، والتي تشير إلى وجود إصابة محتملة بعربات التوكسوكار ، وتمييز التشخيص المزعوم عن الأمراض ذات الأعراض المماثلة ، يتم تعيين المريض للخضوع لـ ELISA لمرض التوكسوكارس.
مقايسة الممتز المناعي المرتبط
الهدف الرئيسي من هذه الدراسة هو تأكيد وجود توكسوكارس في جسم الإنسان. تم العثور على الأجسام المضادة لهذه الديدان الطفيلية في بلازما الدم ، لذلك يتم أخذها من الوريد.
يتطلب تحليل توكسوسار بعض التحضير:
- لا تأكل الأطعمة الدسمة أو الثقيلة في اليوم السابق للعملية.
- لا تشرب المشروبات السكرية أو الغازية أو الكحولية خلال اليوم السابق لزيارة المختبر.
- خذ عينات على معدة فارغة.
- لا تتناول الأدوية في اليوم السابق واليوم الذي من المقرر إجراء الاختبار فيه.
وتجدر الإشارة إلى أن هذه الطريقة المفيدة للغاية للكشف عن الغزو قد تتأثر ببعض الظروف. قد تحدث نتيجة إيجابية خاطئة إذا كان المريض:
- أمراض الأورام.
- السل الرئوي.
- أمراض الكبد الحادة.
- متلازمة المناعة الذاتية.
- متلازمة الفوسفوليبيد.
- حمل.
في هذه الحالة ، لن يكون من الممكن الحصول على تحليل تأكيدي بنسبة 100٪ ، لأنه في ظل الظروف المذكورة ، ينتج نظام الدفاع أيضًا الغلوبولين المناعي (الأجسام المضادة). من الضروري إجراء تشخيصات إضافية وتمييز داء المقارز عن العوامل المذكورة.
يصل تركيز الغلوبولين المناعي (عيار) لفئة IgG إلى أقصى قيمة ممكنة بعد 2-3 أشهر من بداية الغزو. كلما زادت حدة العدوى ، ارتفع هذا الرقم.
نتائج ELISA
لإجراء التشخيص ، يتم دراسة المقايسة المناعية للإنزيم بعناية ، وتتم مقارنة النتائج التي تم الحصول عليها بالقيم المرجعية. المعيار هو عيار جسم مضاد 1: 100 مع مؤشر إيجابية أقل من 0.9.
القيم العددية للعناوين
يمكن أن تكون النتائج التي تم الحصول عليها سلبية أو إيجابية أو إيجابية بشكل ضعيف أو مشكوك فيها. يعتمد عدد التتر AT على شدة الغزو وعمر حدوثه.
فك تحليل:
- عيار AT يصل إلى 1: 100 - تكون النتيجة سالبة. لم يتم العثور على يرقات التوكسوكارا في جسم المريض.
- عيار يصل إلى 1: 400 - تكون النتيجة موجبة بشكل ضعيف. يعاني المريض من غزو ضعيف أو يتطور شكل العين من داء التوكسوبلازما. في بعض الحالات ، يتحدث المؤشر عن إصابة حديثة.
- عيار AT يصل إلى 1: 600 - تكون النتيجة موجبة. يعاني الشخص من شكل سريري من داء الديدان الطفيلية ، إذا تم اكتشافه ، يلزم العلاج الفوري.
- عيار AT يصل إلى 1: 800 - تكون النتيجة موجبة. إنه يتحدث عن غزو شديد ذات طبيعة تقدمية ونسبة عالية من احتمال تطور عملية مرضية للأعضاء الداخلية.
مع استثناءات نادرة ، تكشف دراسات ELISA عن شكل مهمل من الغزو مع مزيج من الديدان الطفيلية من أصل مختلف. في هذه الحالة ، يمكن أن يكون إجمالي الأجسام المضادة أعلى من 800: 1.
معامل الإيجابية
في مقايسة الممتز المناعي المرتبط بالإنزيم لمرض التوكسوكاريز مع عيار 1: 400 - 1: 600 للتمييز بين الغزو من العوامل الجانبية ، تتم مقارنة المؤشرات التي تم الحصول عليها مع القيمة المرجعية. عادة ما يسمى الفرق بين هذه الأرقام بالمؤشر أو معامل الإيجابية.
عادة ، في شكل ELISA الذي تم إجراؤه ، يقف أحد المؤشرات مقابل الآخر. الأول هو القاعدة ، والثاني يمكن أن يعني:
- حتى 0.9 - النتيجة سلبية. لم يتم العثور على يرقات التوكسوكارا.
- 0.9-1.1 - النتيجة مشكوك فيها. في هذه الحالة ، يتم تعيين التشخيصات المتكررة.
- 1.1-2.2 - النتيجة إيجابية بشكل ضعيف. الإنسان ناقل ذو غزو ضعيف.
- 2.2-4.2 - النتيجة إيجابية. يتطور داء القارص المعتدل لفترة طويلة.
- فوق 4.4 - تشير النتيجة إلى ذروة غزو الديدان الطفيلية أو داء الديدان الطفيلية الأخير.
قد يشير KP الناتج عن 4.4 والزيادة المكتشفة في فرط الحمضات بنسبة 10 ٪ إلى تطور شكل داء المقارز العيني ووجود أجسام مضادة للغزو المتبادل ، وإجمالي داء التوكسوكريات.
تعتمد الاستجابة المناعية والكثافة الضوئية للأجسام المضادة (معامل الإيجابية) على درجة الإصابة بمركبات التوكسوكار وموقعها. يسمح لنا أصغر عيار ومؤشر CP فقط بافتراض عدم وجود الديدان الطفيلية ، ولكن ليس لتأكيد ذلك.
لا يمكن استخدام المعلومات المقدمة كمصدر للتشخيص الذاتي أو العلاج الذاتي. يمكن لنتائج ELISA جنبًا إلى جنب مع الفحص الأولي أن تخبر أخصائيًا فقط عن وجود مشكلة. في مختبر Invitro ، يتم إجراء تشخيص للدم بدقة عالية ، وتكون نتيجة التحليل مصحوبة بتعليقات من المتخصصين حول معامل الإيجابية. هذا يساعد الطبيب بشكل كبير في إجراء تشخيص أكثر دقة.
عدد التحديدات 96 (48 في نسختين)
تنسيق قرص العمل: مجردة 12x8 ، كسر ثقب واحد.
الحساسية: 1.5 وحدة / مل.
نطاق القياس: 0-400 وحدة / مل.
حجم عينة الاختبار لا يزيد عن 25 ميكرولتر.
توحيد شروط إجراء تفاعل إنزيمي مع كروموجين في شاكر منظم حرارياً عند 37 درجة مئوية.
الطقم يشمل:
1. لوحة مخططة 12 × 8 آبار ، جاهزة للاستخدام - 1 قطعة.
2. عينات معايرة جاهزة للاستخدام (0-400 وحدة / مل) ملونة بكثافة متفاوتة حسب التركيز - 6 قوارير.
3. عينة التحكم - 1 زجاجة.
4. متقارن مكون واحد ، جاهز للاستخدام ، لا يحتاج إلى تخفيف - زجاجة واحدة.
5. محلول تخفيف المصل - 1 زجاجة.
6. الركيزة الكروموجينية ، المكون الواحد - محلول رباعي ميثيل بيزيدين زائد (TMB +) ، جاهز للاستخدام ، لا يحتاج إلى تخفيف - زجاجة واحدة.
7. عازلة محلول الفوسفات المالح مع توين - 2 قارورة.
8. وقف الكاشف ، جاهز للاستخدام - 1 زجاجة.
9. فيلم لختم القرص - 1 جهاز كمبيوتر.
10. استنسل لبناء رسم بياني للمعايرة - 1 جهاز كمبيوتر.
11. حمام الكاشف - 2 قطعة.
12. رؤوس ماصة لـ 5-200 ميكرولتر - 16 قطعة.
تغليف الجهاز اللوحي - كيس من خشب الساج بسحاب.
استقرار محلول العمل FST-T لمدة 5 أيام على الأقل عند درجة حرارة +2 ... 8 درجة مئوية.
قم بتخزين المجموعة عند درجة حرارة +2 ... 8 درجة مئوية. تاريخ انتهاء الصلاحية - سنة واحدة من تاريخ الإنتاج.
مسجل مع Roszdravnadzor.
الشركات المصنعة الروسية الرائدة في قطاع مجموعات الكواشف لتشخيص العدوى: - CJSC Vector-Best ، نوفوسيبيرسك ؛ - LLC NPO Diagnostic Systems، N. Novgorod؛ - CJSC "Ecolab" ، Electrogorsk ، منطقة موسكو. في مجال مجموعات الكواشف لتشخيص الأمراض غير المعدية والظروف الفسيولوجية: - LLC "Alkor-Bio" ، سانت بطرسبرغ ؛ - CJSC "Vector-Best" ، نوفوسيبيرسك ؛ - LLC "Hema-Medica" ، موسكو. في قطاع الكواشف للتشخيص المخبري للحساسية: - LLC "Alkor-Bio" ، سانت بطرسبرغ ؛ - CJSC "Vector-Best" ، نوفوسيبيرسك ؛ - LLC NPO Immunotex ، ستافروبول. إنتاج معدات المعامل: - ذ م م "بيكون ، موسكو
تقييم درجة الاستبدال المحتمل للواردات من خلال تسميات الاختبارات. تسميات التحليلات والوحدات مُعتمد للاستخدام في الترددات الراديوية المُنتجة في الترددات الراديوية درجة إمكانية استبدال الواردات علامات الأمراض المعدية٪ علامات الأمراض غير المعدية ومؤشرات الظروف الفسيولوجية٪ علامات الحساسية٪ الإجمالي:٪
تقييم درجة إحلال الواردات حسب حجم السوق لمنتجات أقراص ELISA السوقية. حجم السوق في الاتحاد الروسي ، مليون. حجم مبيعات الشركات المصنعة المحلية ، مليون فرك. نسبة استبدال الواردات علامات الأمراض المعدية٪ علامات الأمراض غير المعدية ومؤشرات الظروف الفسيولوجية٪ علامات الحساسية٪ المعدات 50051٪ الإجمالي:٪
تقييم درجة إحلال الواردات حسب حجم السوق للمنتجات للطرق الكيميائية المناعية ككل قطاعات السوق حجم السوق في الاتحاد الروسي ، مليون. حجم مبيعات الشركات المصنعة المحلية ، مليون فرك. نسبة استبدال الواردات علامات الأمراض المعدية٪ علامات الأمراض غير المعدية ومؤشرات الظروف الفسيولوجية٪ علامات الحساسية٪ المعدات٪ الإجمالي:٪
مشاكل الشركات المصنعة المحلية في الصناعة: أصبحت طريقة ELISA قديمة. هناك استبدال تدريجي للكواشف IF المحلية بإضاءة كيميائية مستوردة ؛ يحفز النظام الحالي للمشتريات العامة إما شراء أرخص السلع أو المنتجات المستوردة ذات الخصائص الفريدة ؛ أحد الأسباب الرئيسية لتخلف الشركات المصنعة المحلية للمعدات الأوتوماتيكية وتوطين إنتاج المنتجات المستوردة هو الحاجز الإداري الجمركي ؛ المشكلة الرئيسية في الآونة الأخيرة هي انهيار نظام تسجيل الدولة للمنتجات الجديدة في RZN. لقد توقف عملياً قبول المنتجات الجديدة في السوق ، ولا يزال المصنعون الأجانب الذين سجلوا سابقًا بقوائم طويلة يتمتعون بميزة على المنتجات المحلية ؛ السبب الرئيسي للتأخر التكنولوجي هو عدم القدرة على الحصول على الحق في إنتاج منتجات متوافقة مع المعدات الحديثة ؛ إن انخفاض درجة توحيد المنتجين المحليين وحروب الأسعار المستمرة فيما بينهم يجعل من المستحيل تطوير منتجات متقدمة والتنافس مع اللاعبين الرئيسيين على قدم المساواة ، بما في ذلك في الأسواق الخارجية.
الاقتراحات: إدخال إجراء غير تنافسي للمشتريات العامة للأجهزة الطبية في إطار لجنة الاتصالات الفدرالية ، متبوعًا بالنشر الموضعي. إن تحديد حدود التمويل على أساس متوسط سعر السوق سيعطي مزايا معينة للمنتجين المحليين ، وسيساعد على الحد من استهلاك الكواشف المستوردة باهظة الثمن ، والتحكم بشكل أكثر كفاءة في استخدام أموال الميزانية ؛ تشجيع توسيع وتوحيد الشركات المصنعة المحلية من أجل تركيز الموارد على تطوير المنتجات الحديثة ودخول السوق الدولية. إن إجراءات المشتريات العامة غير التنافسية ستترك بسرعة فقط الشركات المنافسة حقًا في السوق ؛ تخصيص أموال الدولة لتحفيز ، على أساس مبادئ الشراكة بين القطاعين العام والخاص ، على تطوير مجموعة من الاختبارات الكافية لضمان السلامة البيولوجية للبلد ؛ يجب أن تكون الامتيازات الجمركية للمكونات وليس للمنتجات النهائية ؛ مواءمة نظام التسجيل مع النظام الأوروبي ، حيث يتم تسجيل الأجهزة الطبية ذات المستوى المنخفض من المخاطر المحتملة على أساس إعلان المطابقة.
تحميل ...