Общий анализ синовиальной жидкости. Синовиальная жидкость: состав, свойства, лабораторные методы исследования. В норме СЖ представлена синовиальными покровными клетками

Процедура, которая носит название «исследование синовиальной жидкости», необходима для диагностики разнообразных дистрофических и воспалительных заболеваний суставов.

Синовиальная жидкость – это экссудат, который вырабатывает суставная оболочка, состоящая из соединительной ткани и выстилающая костные и хрящевые поверхности. Она выполняет в суставе следующие функции:

• локомоторную;
• метаболическую;
• барьерную;
• трофическую.

Суставная жидкость быстро реагирует на все воспалительные процессы, возникающие в сочленении, синовиальной оболочке и хрящевой ткани. Это вещество – один из важнейших суставных компонентов, который определяет морфофункциональное состояние сочленения.

В нормальном, здоровом суставе объем жидкости умеренный. Но при развитии некоторых суставных недугов образуется так называемый суставной выпот, который подлежит исследованию. Чаще других делают анализ образца синовиальной жидкости крупных сочленений (локтевых, коленных).

Получить синовиальную жидкость можно при помощи пункции. Важнейшим условием при взятии пункции является стерильность сустава.

Особенности диагностики синовиальной жидкости

В стандартный анализ образца синовиальной жидкости входит:

1. Макроскопический анализ пунктированной жидкости (цвет, объем, мутность, вязкость, муциновый сгусток).
2. Подсчет количества клеток.
3. Микроскопия нативного препарата.
4. Цитологический анализ окрашенного препарата.

У здорового человека синовиальная жидкость отличается светло-желтым (соломенным) цветом. Однако и при артрите, и при анкилозирующем спондилоартрите (болезнь Бехтерева) окраска исследуемой жидкости остается желтой. При воспалительных процессах цвет суставной жидкости может становиться другим, в зависимости от характерных изменений синовиальной оболочки.

При наличии псориатического или ревматоидного артрита окраска исследуемого экссудата может варьироваться от желтого до зеленого цвета. При травматических или бактериальных заболеваниях цвет синовиальной жидкости колеблется от бордового до коричневого.

Синовиальная жидкость здорового сустава прозрачная, но при наличии псориатического, ревматоидного или септического артрита наблюдается ее помутнение.

Характер вязкости зависит от:

1. уровня рН;
2. солевой концентрации;
3. присутствия вводимых ранее препаратов;
4. степени полимеризации гиалуроновой кислоты.

Повышенный уровень вязкости отмечается при:

• системной красной волчанке;
• различных травматических изменениях.

Снижение показателей вязкости наблюдается при:

1. синдроме Рейтера;
2. ревматизме;
3. артрозах;
4. анкилозирующем спондилоартрите;
5. разнообразных артритах (псориатическом, подагрическом, ревматоидном).

Одной из важнейших особенностей синовиальной жидкости является способность к продуцированию муцинового сгустка в результате смешивания с уксусной кислотой.

При этом наличие рыхлого сгустка свидетельствует о происходящих в суставах воспалительных процессах.

Главный анализ, определяющий патологию сочленения

Главным исследованием, диагностирующим ту или иную патологию, является микроскопический анализ образца синовиальной жидкости.

В первую очередь врачи уделяют внимание подсчету числа клеток в препарате. Нормой является до 200 клеток/мкл. Значительное увеличение числа клеток называется цитозом. Цитоз позволяет диагностировать дистрофические и воспалительные заболевания, четко оценивать развитие воспалительных процессов.

В период обостренной стадии течения любого вида артрита у пациента наблюдается ярко выраженный цитоз (число клеток колеблется от 30 000 до 50 000).

1. При микрокристаллических артритах у больного проявляется незначительный цитоз.
2. При синдроме Рейтера, псевдоподагре или псориатическом артрите цитоз носит умеренный характер (от 20 000 до 30 000 клеток).
3. Если содержание клеток превышает 50 000, у пациента диагностируют бактериальный артрит.

Тщательный анализ может выявить у больного наличие большого количества разнообразных кристаллов, но для диагностики важными являются только два их типа. При псевдоподагре у пациента присутствуют кристаллы дигидропирофосфата кальция, а наличие кристаллов урата натрия свидетельствует о подагре. Обнаружить эти отложения можно при помощи поляризационной микроскопии.

В здоровой синовиальной жидкостной присутствуют элементы крови (лимфоциты, моноциты, нейтрофилы) и разнообразные клетки ткани (гистиоциты, синовиоциты).

При воспалительных процессах в суставном экссудате можно обнаружить особую форму нейтрофилов – рагоциты. Такие клетки имеют ячеистую структуру, образованную за счет включения в цитоплазму иммунных комплексов. Наличие рагоцитов в основном свидетельствует о ревматоидном артрите.

Обнаружение в синовиальной жидкости мононуклеаров характерно для туберкулезных процессов, аллергических синовитов и артритов, развившихся на фоне новообразований.

Стоит отметить, что для воспалительных суставных заболеваний характерно повышение острофазовых показателей и уровня лактатдегидрогиназы.

Микроскопическое исследование мазка позволяет обнаружить грамположительные кокки, хламидии или гонококки. Нередко у пациентов выявляются грибковые бактерии. Чтобы точно определить характер инфекционного процесса и установить чувствительность к антибиотикам, медики делают посев синовиальной жидкости на патогенную микрофлору.

Проводить пункцию суставного экссудата можно только по предписанию врача-ревматолога. В заключении, видео в этой статье поднимет очень интересный вопрос протезирования синовиальной жидкости.

Благодаря достижениям современной лабораторной диагностики, стало возможным выявлять многие заболевания ещё до развития их характерных симптомов. Каждая болезнь приводит к попаданию в кровь каких-либо патологических веществ, которые обладают определённой активностью. При накоплении их в большом количестве происходит активация иммунитета – его клетки вырабатывают антитела, позволяющие быстрее уничтожить незнакомое вещество.

Аналогичные механизмы протекают и при ревматоидном артрите – хроническом аутоиммунном заболевании, приводящем к поражению суставов. Достаточно долго диагностика этой болезни основывалась лишь на подтверждении клинических симптомов с помощью анализа крови на ревматоидный фактор (РФ). Но этот показатель является не слишком специфичным, что затрудняет выявление патологии на ранних стадиях.

Изучение заболевания с точки зрения биохимии позволило разгадать один из механизмов – образование антител к циклическому цитруллинированному пептиду (АЦЦП). Увеличение их количества в анализе крови имеет место лишь при ревматоидном артрите, что обусловливает высокую специфичность исследования. Их повышенные показатели наблюдаются даже до возникновения внешних проявлений, что позволяет вовремя начать лечебные мероприятия.

Понятие

Чтобы понять технологию и смысл исследования, необходимо остановиться на патологических процессах, приводящих к повышению АЦЦП. В их основе лежит нормальная реакция иммунной системы на аномальные механизмы, происходящие в полости сустава:

• Цитруллин по строению является аминокислотой – в норме они формируют в организме человека все белковые структуры. Но такая структура не подходит для включения в состав основных тканей – если она обнаруживается антителами, то происходит её мгновенная утилизация.
• Разрушенные фрагменты становятся строительным материалом для новых нормальных аминокислот. Такое удаление не приводит к воспалительному процессу, так как оно происходит в условиях биологических жидкостей.
• При ревматоидном артрите же наблюдается нарушение работы одного из ферментов, обеспечивающих «обслуживание» суставной капсулы. В результате аминокислота цитруллин, находящаяся свободно в синовиальной жидкости, начинает прикрепляться к некоторым белкам оболочки, изменяя их структуру.
• Антитела, обнаруживающие совершенно новые для них структуры (циклические цитруллинированные пептиды), распознают их как чужеродные. Так как удалить белки из оболочки свободно не удаётся, то внутри суставной капсулы постепенно развивается воспалительный процесс.
• Так как патологические механизмы не прерываются, то в крови постепенно повышается количество АЦЦП. Этим путём организм пытается удалить непрерывно образующийся дефектный белок.

Небольшое количество подобных антител наблюдается в анализе и у здорового человека, но оно никогда не выходит за пределы допустимых значений.

Нормативы

Обследование проводится в рамках биохимического анализа, поэтому для диагностики отбирается небольшое количество крови из вены. Поэтому для этого требуется стандартная подготовка – приходить натощак, а также исключить курение минимум за два часа до сдачи. Результаты измеряются в единицах активности на миллилитр (Ед/мл):

1. В некоторых лабораториях нормой считаются показатели от 0,5 до 4,9 Ед/мл. При этом повышение количества АЦЦП выше 5 считается уже показателем патологии, даже если у пациента не имеется каких-либо симптомов поражения суставов.
2. Определённые лабораторные анализаторы имеют предел нормы до 17 Ед/мл. Поэтому после получения результатов анализа крови необходимо уточнить их значение врача. Иногда нормальные показатели указаны сразу в бланке, чтобы исключить диагностические ошибки при их оценке.
3. Обычно исследование на АЦЦП имеет разброс от 0,5 до 4500 Ед/мл, что создаёт запас для полноценного его определения при высокой активности ревматоидного артрита.

Несмотря на точность, анализ крайне редко проводится без какой-то причины – его значение велико в спорных случаях, когда требуется дифференциальная диагностика между несколькими болезнями.

Ревматоидный артрит

Определение АЦЦП в крови производится тогда, когда другие биохимические признаки ещё не проявили себя из-за низкой активности заболевания. Если скудные данные внешнего обследования всё же наталкивают врача на диагноз, то анализ даст ему положительный результат в следующих случаях:

• На ранней стадии заболевания (от 6 месяцев до 1 года), когда клинические и лабораторные проявления имеют слишком «общий» характер. В это время некоторые аутоиммунные заболевания, поражающие суставы, характеризуются очень похожим течением.
• При серонегативном артрите, когда основной показатель активности – ревматоидный фактор – практически не выявляется в крови в значимых количествах. При этом он очень важен для определения диагноза, поэтому обнаружение антител к цитруллинизированному пептиду в достаточном количестве позволяет подтвердить опасения.
• Для прогноза заболевания – доказано, что сочетание высоких значений АЦЦП в сочетании с другими выраженными признаками прогнозирует тяжёлое течение болезни.

Сейчас большинство лабораторий в крупных больницах широко применяют исследование в повседневной практике, хотя совсем недавно его можно было выполнить только платно.

Определение тяжести

В отличие от других биохимических признаков активности, АЦЦП при ревматоидном артрите имеет свои особенности, предсказывающие именно долговременный прогноз. Поэтому относительно этого анализа можно выдвинуть следующие утверждения:

• Если уже на ранних стадиях, когда ревматоидный фактор и СОЭ находятся в пределах нормы, а АЦЦП значительно увеличен, то следует ожидать быстрого ухудшения внешних проявлений болезни.
• Одинаково высокие значения антител к цитруллинизированному пептиду и РФ в период обострения обусловливает тяжёлое поражение суставов. Без срочного проведения лечения можно ожидать развития стойких осложнений, признаки которых сохранятся даже после снижения активности заболевания.
• При этом обнаружение АЦЦП не является критерием обострения, так как его колебания не зависят от количества поражённых суставов. Их количество может значительно увеличиваться и до развития симптомов, и никогда не опускается до нормы после их устранения на фоне терапии.

Уровень АЦЦП является своеобразным предвестником разрушения суставов – чем больше образуется антител, тем интенсивнее будет протекать воспаление в суставных оболочках.

Для лечения

Обнаружение повышенного уровня антител к цитруллинированному пептиду позволяет сразу же отнести человека в группу риска по развитию ревматоидного артрита. Это не означает мгновенное назначение сложных схем лечения, но требует проведения профилактических мер – исключения факторов риска. Также за пациентом периодически наблюдают, выполняя следующие мероприятия:

1. Регулярно оцениваются внешние проявления заболевания, а также лабораторные критерии его активности.
2. При повышении количества АЦЦП в сочетании даже с минимальными признаками поражения суставов сразу же требуется назначение стандартной терапии.
3. При этом не имеют значения показатели ревматоидного фактора и СОЭ, так как их нарастание наблюдается лишь при явных симптомах обострения.
4. Но при одновременном резком увеличении всех биохимических показателей нередко наблюдаются и тяжёлые симптомы артрита. Это служит сигналом для назначения высоких доз лекарств либо коррекции проводимого лечения на более эффективное.

При длительном течении заболевания АЦЦП теряет свою важность, так как его показатели незначительно изменяются при смене периодов обострения и ремиссии.

Дифференциальная диагностика

Наконец, одним из важных предназначений этого анализа при ревматоидном артрите является подтверждение диагноза. На раннем этапе развития аутоиммунные болезни с поражением суставов очень похожи, что нередко затрудняет правильный выбор препаратов. Поэтому появление АЦЦП в крови позволяет исключить следующие заболевания:

• Скандинавская форма анкилозирующего спондилоартрита, которая характеризуется симметричным поражением мелких суставов кистей и стоп.
• Псориатический артрит, который при высокой активности способен поражать не только крупные сочленения, но и давать симптомы, напоминающие развитие ревматоидного артрита.
• Системная красная волчанка, если она сопровождается только изолированным поражением суставов.

В некоторых случаях затруднения при диагностике могут возникать и при достаточно запущенных случаях болезни. Обычно такие ситуации развиваются с патологией, которая была определена с помощью небольшого числа критериев. А неправильный диагноз сразу же ведёт за собой неверное в корне лечение, поэтому ревматоидный артрит должен обязательно подтверждаться с помощью анализа на АЦЦП.

-->

Лечение избытка синовиальной жидкости в коленном суставе

Коленный сустав — сложный биомеханический комплекс, позволяющий человеку реализовывать важнейшие функции: опору, ходьбу, бег. Для нормального функционирования коленного сустава, а это большое количество «трущихся деталей», природа выработала специальную жидкость, которая поступает в суставную щель и служит в качестве смазки и демпфера для составных частей коленного сустава. Отсутствие этой смазки, как и её избыток, является патологией, вызывает болевые синдромы различной интенсивности и требует лечения.

• Причины скопления жидкости в коленном суставе
• Симптоматика скопления синовиальной жидкости
• Основные этапы лечения
• Народная медицина
  • Жидкость в коленном суставе: лечение народными средствами

Синовит коленного сустава — это избыток суставной жидкости, которая накапливается и может привести к воспалениям различного характера.

Причины скопления жидкости в коленном суставе

Существует несколько основных причин развития синовита колена, которые условно подразделяют на три группы:

Так, в процессе обострения ревматологических заболеваний происходит накопление экссудата, который вырабатывается оболочкой суставной капсулы в большом объёме из-за специфической реакции на заболевание.

К основным причинам, вызывающим патогенез коленного сустава и накопление синовиальной жидкости, относятся:

• Ревматоидный артрит колена;
• Гонартроз коленного сустава;
• Системная красная волчанка;
• Подагра;
• Полимиозит:
• Спондилит анкилозирующий.

Скопление синовиальной жидкости в колене может происходить вследствие проникновения в полость синовиальной сумки различных микроорганизмов. Пути их попадания различны: из внешней среды (в результате травматического воздействия), из близлежащих воспалительных источников (гнойные воспаления тканей или остеомиелит), крове- или лимфоток (системные септические инфекции).

Отдельно стоит упомянуть необычные аллергические реакции, которые могут привести к повышенному скоплению синовиальной жидкости. Однако, это крайне редкая причина развития синовита колена.

Симптоматика скопления синовиальной жидкости

Признаками развивающегося синовита коленного сустава являются:

• Опухлость колена. Особенно это заметно на фоне здорового колена.
• Повышение местной температуры и покраснение кожного покрова.
• Болезненное ощущение при попытке полностью согнуть колено.
• Болезненные ощущения при движениях ногой.

Все эти симптомы лишь сигнализируют о патологических изменениях в коленном суставе. Для точного диагностирования заболевания с выявлением этиологии и степени патогенеза этого недостаточно.

В любом случае при первых признаках скопления синовиальной жидкости необходима скорейшая консультация и дальнейшее лечение колена у профильного специалиста. Нередко происходит преуменьшение опасности заболевания, которое может привести к разрыву суставной капсулы, вызвать деформацию колена и заражение крови (сепсис). Это характерно при инфекционной природе возникновения синовита.

Для эффективного лечения заболевания необходимо, прежде всего, определить причину болезни, а также стадию и фазу патологии. Проведение визуального осмотра, пальпация колена, полный анамнез болезни и различные инструментальные методы обследования позволяют получить необходимые для лечения достоверные данные.

Применяются основные инструментальные методы исследования внутренних органов:

• Рентгенография коленного сустава;
• Ультразвуковое исследование (УЗИ);
• Магниторезонансная и компьютерная томография (МРТ/КТ);

При ярко выраженном синовите, когда очевидно скопление большого количества жидкости в суставной сумке, делается пункция и собранная жидкость отправляется на анализ с целью выявления инфекции.

В случаях тяжёлой патологии и нечёткого анамнеза проводят артроскопию коленного сустава (введение в повреждённый сустав артроскопа через микроразрез).

Основные этапы лечения

Как и всякое заболевание, синовит начинают лечить после точного диагностирования. На первом этапе проводят пункцию коленного сустава с целью удаления излишней жидкости. Затем проводят очистку суставной полости и после этого вводят специальные антибиотики, которые позволяют избежать возможного заражения.

Важным является снижение динамической и статической нагрузки на больное колено. Для этих целей используют фиксирующие повязки, которые обеспечивают неподвижность коленного сустава. Её необходимо делать после проведения пункции и носить порядка 5 — 7 дней.

Для снижения опасности рецидива заболевания проводят медикаментозное лечение. Для этого применяют парентеральное или пероральное введение нестероидных противовоспалительных препаратов направленного действия (НПВП). С целью повышения лечебной эффективности назначают использование различных мазей и гелей, обладающих разогревающим, раздражающим или противовоспалительным действиям. Они отлично справляются с различными симптомами заболевания (отеки и припухлости).

В некоторых случаях назначают применение антибиотиков. Причина — повторное инфицирование или неэффективность выбранных методов лечения. Для этого проводят исследование внутрисуставной жидкости на предмет определения возбудителя заболевания. В зависимости от результатов бактериального посева назначают антибиотики как широкого, так и узконаправленного спектра действия. Применяют внутримышечные или внутривенные инъекции.

Народная медицина

За многовековую историю народная медицина накопила разнообразные средства устранения главной симптоматики заболевания, которые успешно дополняют основную терапию болезни.

Как и применяемые медикаментозные препараты и мази, средства народной медицины обладают противовоспалительными, обезболивающими, антисептическими действиями, повышают иммунитет организма и резистентность сустава.

Жидкость в коленном суставе: лечение народными средствами

Существующие средства применяют внутрь или используют для наружного применения:

Все средства народной медицины стоит применять только как дополнительные терапевтические процедуры, усиливающие или дополняющие лечебный эффект основного курса лечения. Важно не только купировать симптомы заболевания, а полностью устранить причины недуга.

Общеклиническое исследование (анализ) жидкости из сустава включает в себя определение физико-химических свойств жидкости и микроскопическое исследование клеточных элементов.

Макроскопические характеристики синовиальной жидкости (цвет, степень мутности и вязкости) оценивают в проходящем свете. Вязкость оценивают по длине муциновой нити: длина нити, образованной каплей, выпущенной из шприца, в норме должна быть более 3 см. При воспалении вязкость снижается, соответственно длина нити уменьшается.

Манипуляцию производят в положении пациента сидя с рукой, опущенной вдоль туловища и лежащей на колене. Игла вводится спереди, конец ее направлен несколько вниз и латерально, по направлению к клювовидному отростку лопатки; игла продвигается кзади, по направлению к суставной поверхности лопатки. Возможна также пункция плечевого сустава через задний доступ.

Пациент сгибает руку в локтевом суставе под углом 60°, запястье находится в пронированном положении. Точка вкола иглы располагается на латеральной поверхности сустава, между латеральным надмыщелком плечевой кости и лучевой костью.

Коленный сустав и его околосуставные сумки могут пунктироваться в положении больного на спине, с разогнутой в коленном суставе нижней конечностью. Игла, обычно диаметром 0,8 мм, вводится с латеральной стороны непосредственно под каудальный край надколенника. В качестве альтернативы возможно введение иглы с медиальной стороны, также под каудальный край надколенника.

Макроскопические характеристики позволяют во многих случаях различать выпоты невоспалительные, воспалительные и инфекционные. Кроме того, возможно наличие крови в суставной жидкости. Вид выпота позволяет предположить определенное заболевание. Так называемые невоспалительные выпоты на самом деле соответствуют патологическим процессам, характеризующимся слабовыраженным или умеренным воспалением, например остеоартрозу.

Лабораторные исследования внутрисуставной жидкости включают подсчет клеток и оценку их качественного состава, микробиологическое исследование (при подозрении на инфекционный процесс), а также микроскопическое исследование нативного препарата на предмет выявления различных клеток и кристаллов. Тем не менее выбор определенного исследования зависит от предполагаемого диагноза.

Референтные показатели (нормальные) синовиальной жидкости

Исследование синовиальной жидкости играет важную роль в выяснении характера процесса в поражённом суставе.

Показания к пункции суставов: моноартрит неясной этиологии, неприятные ощущения в поражённом суставе (при установленном диагнозе), необходимость контроля эффективности лечения при инфекционном артрите, для дифференциальной диагностики артрита и артроза, поскольку от этого зависит выбор программы дальнейшего обследования и лечения больного.

Зачем выполнять анализ синовиальной жидкости?

В ситуациях первичной медицинской помощи данные анализа синовиальной жидкости (СЖ) позволяют определить специалиста, к которому следует направить пациента.

• Если невоспалительная СЖ – к ортопеду.
• Если воспалительная - к ревматологу.

Диагностическое значение анализа синовиальной жидкости

• Воспалительная или невоспалительная патология
• Воспаление кристаллическое или сепсис, или обострение
• Помощь при выявлении групп заболеваний на основе числа клеток и их типа
• Определение типа протезной недостаточности
• Прогностическое значение
• Ортопедическое вмешательство
• Стадия конкретного заболевания
• Мониторинг терапии. В частности, отказ от терапии моноклональными антителами.

На рис. 1 и 2 отражен алгоритм диагностики заболеваний суставов на основе данных анализа синовиальной жидкости

Патологические изменения в тканях, окружающих больной сустав, отражаются на объеме, клеточном составе и наличии твердых частиц в СЖ. Воспалительные заболевания суставов, различающиеся по этиологии, имеют характерные клеточные модели, которые могут быть распознаны и использованы в диагностике конкретного заболевания или группы заболеваний (рис.1, 2). Для того чтобы эти различия выявить необходимо правильно отобрать и правильно хранить СЖ, чтобы свести к минимуму аутолитические изменения и деградацию характерных Кл. В качестве антикоагулянта используют ЭДТА. Хранение при 4°С хорошо переносится СЖ и даёт превосходные диагностические результаты. Практически адекватные результаты могут быть получены до 48 часов от аспирации, но более длительное хранение даже при 4°С, как правило, позволяет идентифицировать только кристаллы и частицы. Большинство Кл подвергается лизису.

Цитологический анализ синовиальной жидкости

Тучные Кл, могут быть найдены при анализе СЖ большинства больных с заболеванием суставов, но чаще всего они наблюдаются при воспалительном артрите у пациентов с серонегативными спондилоартропатиями и при невоспалительных поражениях суставов, связанных с травмой.

Этот тип Кл часто обнаруживается при анализе СЖ пациентов с внутрисуставным кровоизлиянием или артрографии, а также при аллергической реакции на инъецированные препараты, такие как искусственная СЖ.

Анализ синовиальной жидкости в зависимости от результатов (внешнего вида, общего количества лейкоцитов и доли нейтрофилов, наличия или отсутствия крови и результатов бактериологического исследования) выделяет четыре основных класса синовиальной жидкости (СЖ). Характеристики СЖ широко варьируют и могут меняться в процессе лечения. Таким образом, при диагностике артрита класс СЖ служит лишь общим ориентиром.

Визуальный анализ синовиальной жидкости

Определенные характеристики СЖ позволяют клиницисту предположить причину . Прозрачность отражает плотность того или иного веще­ства в СЖ. Нормальная СЖ или СЖ пациента с остеоартрозом бесцветна и прозрачна. В отличие от этого при системной красной волчанке и нетяжелом ревматоидном артрите синовиальная жидкость полупрозрачна, а при инфек­ционном артрите - непрозпачна. В целом прозрачность воспалительной синовиальной жидкости зависит от количества лейкоцитов. Для анализа синовиальной жидкости пациента с артритом характерна ксантохромия, что связано с проникновением в СЖ эритроцитов из воспаленной синовиальной оболочки и распадом гема. Красная или кровянистая СЖ встре­чается при кровотечении, связанном с травмой, гемофилии, пигментном виллонодулярном синовите и других патологических процессах. К другим веществам, способным снижать прозрачность СЖ, относят липиды, кристаллы (такие, как ДПК, мононатриевая соль мочевой кислоты или гидроксиапатит) и накапливаю­щиеся продукты распада при деструктивных формах артрита (например, тяжелый ревматоидный артрит или артропатия Шарко).

В норме суставная жидкость вязкая благодаря присутствию гиалуроновой кис­лоты. При воспалительных артропатиях ферменты разрушают гиалуроновую кис­лоту, что приводит к снижению вязкости суставной жидкости. При выдавливании из шприца капли нормальной СЖ ее поверхностное натяжение таково, что шлейф или нить жидкости растягивается на 10 см перед обрывом капли. Чем сильнее воспаление в суставе, тем больше в нем воспалительных клеток и выше концен­трация активированных ферментов, разрушающих гиалуроновую кислоту. Нить воспалительной СЖ при этом растягивается не более чем на 5 см. Очень вязкую суставную жидкость, формирующую длинную нить, наблюдают при гипотиреозе. Кроме того, содержание гиалуроновой кислоты в синовиальной жидкости определить, добавив в нее несколько капель 2% раствора уксусной кислоты. В нормальной СЖ формируется стабильный нерастворимый белково-гиалуроновый комплекс, называемый муциновым сгустком. Воспалительная СЖ образует рыхлый муциновый сгусток, который легко фрагментируется, что отражает изменение струк­туры гиалуроновой кислоты.

Подсчет клеток

Количество лейкоцитов и их состав - одна из наиболее ценных характеристик анализа синовиальной жидкости. Нормальная синовиальная жидкость содержит менее 200 клеток/мм3. При невос­палительной артропатии количество лейкоцитов достигает 2000 клеток/мм3. При неинфекционных артритах число лейкоцитов широко варьирует: от 2000 до 100 000 клеток/мм3. Хотя при аутоиммунных артритах количество лей­коцитов обычно колеблется в пределах 2000-30 000 клеток, при ревматоидном артрите этот показатель нередко достигает 50 000 клеток/мм3 и выше. У пациентов с артри­том, вызванным кристаллами (например, при острой подагре), число лейкоци­тов обычно превышает 30 000 клеток/мм3, и 50 000-75 000 клеток/мм3 вполне закономерно. Чем ближе число лейкоцитов к 100 000 клеток/мм3, тем выше вероятность септического артрита. Несмотря на то, что у некоторых пациентов число лейкоцитов может превышать 10О 000 клеток/мм3 при кристаллических артропатиях, ревмтоидном артрите и даже при серонегативных артропатиях, при получении такого результата анализа синовиальной жидкости следует начинать эмпирическое лечение септического артрита, пока не получены микробиологические данные, исключающие инфекцию.

Количество лейкоцитов менее 100000 клеток не исключает возможной инфекции. У пациентов с хроническими воспалительными артритами (такими, как СКВ или псориатический артрит) повышен риск инфицирования сустава, во-первых, в связи со структурными порреждениями сустава вследствие хрони­ческого воспаления; во-вторых, из-за иммуносупрессивного действия препара­тов, которые применяются для лечения этих заболеваний. Более того, многие болезнь-модифицирующие препараты при таких заболеваниях (в частности, метотрексат, циклоспорин, лефлуномид, азатиоприн, циклофосфамид и дру­гие цитотоксические препараты) способны подавлять лейкоцитарный ответ на инфекцию и иллюзорно уменьшать число лейкоцитов в СЖ. По сравнению с бак­териальной инфекцией более вялотекущим процессам (таким, как туберкулез или грибковая инфекция) свойственно более низкое число лейкоцитов в анализе синовиальной жидкости; обычно Кровь в синовиальной жидкости

Наличие крови в суставе обычно обусловлено острой травмой. При выявлении гемартроза во время артроцентеза необходимо полностью эвакуировать кровя­нистую жидкость, чтобы предотвратить формирование синехий, уменьшающих объем движений в травмированном суставе. Гемартроз иногда обнаруживают при артропатии Шарко, что связано с хронической травмой пораженного сустава. При отсутствии травмы в анамнезе кровянистая СЖ может быть следствием трав­матичной аспирации. В таких ситуациях кровь в СЖ распределена неравномерно, и клиницист испытывает трудности при выполнении процедуры. Если пункция не была травматичной, но в анализе синовиальной жидкости получена кровь, необходимо исклю­чить несколько причин. Повторные гемартрозы часто возникают у пациентов с нарушениями коагуляционного гемостаза (такими, как гемофилия и болезнь фон Виллебранда), патологией тромбоцитов и у больных, принимающих антикоагу­лянты. СЖ пациентов с пигментным виллонодулярным синовитом всегда гемор­рагическая или ксантохромная. Пигментация связана с гемосидерином, который накапливается от повторных кровоизлияний в сустав. Геморрагическую СЖ часто обнаруживают у больных туберкулезом, а также у пациентов с местными или метастатическими опухолями. У пациентов с врожденными, метастатическими или геморрагическими заболеваниями (такими, как синдром Элерса-Данло, эластическая псевдоксантома, серповидноклеточная или цинга) иногда также развивается гемартроз.

Кристаллы

Хотя кристаллы в синовиальной жидкости можно идентифицировать и через несколько дней после ее получения, рекомендуют использовать свежие образцы, приготовленные сразу после аспирации. Для предотвращения свертывания СЖ перед исследовани­ем применяют только гепарин натрия и этилен-диамин-тетрауксусную кислоту, поскольку гепарин лития и оксалат кальция вызывают формирование двояко-преломляющих кристаллов, мешающих анализу. Кроме того, стекло с препаратом СЖ необходимо накрывать покровным стеклом, так как тальк, пыль и другие инородные тела могут напоминать кристаллы.

Полноценное исследование на наличие кристаллов требует поляризационной световой микроскопии с дополнительным красным компенсатором, хот кристаллы урата натрия можно увидеть и под обычным световым микроскопом. Нижняя поляризационная пластина (поляризатор), помещенная между источником света и исследуемым образцом, блокирует все световые волны, кроме тех. что колеблются в одном направлении. Вторая поляризационная пластина (анализатор) расположена между исследуемым препаратом и глазом исследо­вателя, под углом 90° к поляризатору. Свет не доходит до глаза исследователя, и в микроскоп он видит только темное поле. Двоякопреломляющий, или анизо­тропный, препарат преломляет световые волны, проходящие через поляризатор, таким образом, что они проходят через анализатор, и наблюдатель видит белые объекты на темном фоне. Если между поляризатором и анализатором поместить компенсатор первого порядка, фоновое поле становится красным, а двоякопреломляющие кристаллы - желтыми или голубыми, в зависимости от их особен­ностей и ориентации по отношению к оси медленных световых волн, проходящих через красный компенсатор.

Проходя через красный компенсатор, свет преломляется и раздваивается: две световые волны, быстрая и медленная, перпендикулярны друг другу. Сходное явление возникает при прохождении света через двоякопреломляющий кристалл. Анизотропные кристаллы урата натрия имеют игловидную форму. Колебания быстрой волны ориентированы вдоль их длинной оси. Если длинная ось кри­сталла урата натрия параллельна направлению медленной световой волны, про­шедшей сквозь красный компенсатор, возникает картина интерференции мед­ленных и быстрых колебаний с вычитанием цвета, что приводит к желтому цвету. Желтый кристалл, длинная ось которого параллельна медленной световой волне красного конденсатора, условно называют отрицательно двоякопреломляющим. Если медленная волна колебаний двоякопреломляющего кристалла параллельна его длинной оси. а длинная ось кристалла параллельна медленному лучу красного компенсатора, суммирующий эффект медленных-плюс-медленных колебаний приводит к голубому цвету. Голубой кристалл, длинная ось которого параллельна медленной световой волне красного компенсатора, условно называют положи­тельно двоякопреломляющим. Например, кристаллы ДПК - положительно двоякопреломляющие. При сильно выраженном свойстве двойного лучепреломления анизотропные кристаллы яркие и хорошо различимы, при слабом - кристаллы трудноразличимы и границы их стерты.

При идентификации кристаллов учитывают их форму и особенности двойного лучепреломления. Для игловидных кристаллов урата натрия характерна сильная отрицательная анизотропия. В отличие от них короткие ромбовидные кристал­лы ДПК обладают положительной анизотропией. Кристаллы оксалата кальция, наблюдаемые при первичном оксалозе или при хронической почечной недо­статочности, отличаются палочковидной или тетраэдрической формой и поло­жительным двойным лучепреломлением. Кристаллам холестерина свойственны плоская или коробкоподобная форма и зазубренные углы, они часто расположе­ны друг над другом. Сферулы с двойным лучепреломлением в форме мальтийско­го креста обычно представлены липидами. Однако предполагают, что некоторые формы уратов или апатитов также могут принимать подобную форму. Как правило, кристаллы гидроксиапатита трудно обнаружить в синовиальной жидклсти. отчасти вследствие отсутствия у них двойного лучепреломления. Тем не менее иногда они образуют достаточно крупные скопления, и их можно выявить окрашиванием ализариновым красным. Наконец, кристаллы глюкокортикоидных. препаратов, инъецированных в сустав с целью лечения, могут обладать свойствами двойного лучепреломления, что приводит к ошибочной интерпретации микроскопической картины неопытным специалистом.

Внутриклеточные кристаллы в анализе синовиальной жидкости свидетельствуют о кристаллической артропатии. Однако даже при выявлении кристаллов необходимо исключить сопутствую­щую инфекцию. Более того, у пациента может одновременно присутствовать несколько заболеваний, связанных с отложением кристаллов. Например, до 15% больных подагрой имеют также заболевание, обусловленное отложением кри­сталлов ДПК. Важно определить все варианты кристаллов, так как от этого зави­сит лечение. Больному хронической подагрой, как правило, необходима лишь гипоурикемическая терапия (и, возможно, колхицин профилактически). Однако лечение сочетания подагры и заболевания, связанного с отложением кристаллов ДПК, требует продолжительного приема нестероидных противовоспалительных препаратов (НПВП) на фоне непрерывной гипоурикемической терапии.

Попытки аспирации воспаленного сустава не всегда успешны. Например, труд­но пунктировать воспаленный первый плюснефаланговый сустав. Тем не менее, если при извлечении иглы из сустава или околосуставных тканей поддержи­вает отрицательное давление в шприце, количества интерстициальной жидкости в игле обычно достаточно для поляризационной микроскопии и определения кристаллов. Следует просто снять иглу со шприца, наполнить шприц воздухом, снова присоединить иглу и выдавить ее содержимое на предметное стекло. Такой метод особенно эффективен для поиска кристаллов урата натрия при подагре.

Бактериологическое исследование синовиальной жидкости

Моноартрит всегда следует считать инфекционным, пока не доказано обрат­ное. Для диагностики большинства бактериальных инфекций необходимо и достаточно окраски мазка по Граму, бактериологического исследования и опреде­ления чувствительности. Как правило, синовиальную жидкость нужно лишь поместить в стерильную пробирку для бактериологического исследования и отправить в лабораторию для рутинного исследования. К сожалению, возбудители некоторых распространен­ных инфекций с трудом поддаются культивированию, поэтому отрицательный результат бактериологического исследования и окрашивания по Граму не обяза­тельно исключает инфекцию. Например, результаты бактериологического анализа синовиальной жидкости более чем у 20% пациентов с гонококковым артритом отрицательны, даже если в качестве среды для посева применяли шоколадный агар. Кроме того, из синовиальной жидкости трудно культивировать туберкулез, а для культивирования анаэробных или грибковых возбудителей необходимы специальные методы и среды. Иногда микобактериальные и грибковые инфекции выявляют только с помо­щью биопсии синовиальной оболочки. Важно раннее начало антибактериальной терапии, поскольку бактериальные инфекции способны быстро приводить к деструкции сустава. Лечение следует начинать, основываясь на результатах подсчета и анализа лейкоцитов, окрашивания мазка по Граму, и при необходимости корректировать его с учетом результатов бактериологического исследования и определения чувствительности.

Статью подготовил и отредактировал: врач-хирург
3.5 Микроскопическое исследование синовиальной жидкости

3.5.1.Требования к образцу синовиальной жидкости для микроскопического исследования.

Перед проведением микроскопического исследования врач должен иметь информацию о времени получения синовиальной жидкости и результатах оценки физико-химических свойств.

В настоящее время для взятия биологических жидкостей выпускаются вакуумные пробирки, содержащие антикоагулянт (К 2 ЭДТА), который является также консервантом для клеточных элементов и не влияет на их морфологию.

П р и м е ч а н и е 1 ─ Синовиальную жидкость, стабилизированную К 2 ЭДТА нельзя использовать для обнаружения рагоцитов.

Проводится три вида микроскопического исследования:

подсчет клеток в нативной синовиальной жидкости в камере Горяева (цитоз), исследование нативного препарата и окрашенного азур-эозином препарата с подсчетом синовиоцитограммы.

3.5.2 Подсчет количества клеточных элементов в 1 мкл синовиальной жидкости камере Горяева (определение цитоза).

Ход исследования.:

Исследование проводят в нативной или стабилизированной К 2 ЭДТА синовиальной жидкости.

В пробирку налить 0,4 мл изотонического или гипотонического раствора NaCI.

С помощью семплера или микропипетки внести 20 мкл СЖ (разведение 1:20).

Содержимое пробирки аккуратно без пены размешать.

Расчет произвести по формуле: , где

А – количество клеточных элементов в 40 больших квадратах камеры Горяева;

250 - 1/250 – объем одного большого квадрата камеры;

20 - степень разведения СЖ.

Окончательный вариант формулы:

Если при микроскопии нативного препарата СЖ обнаружено, что клетки покрывают все поля зрения или СЖ имеет высокую вязкость, необходимо разведение - 1: 200 (4 мл изотонического или гипотонического раствора NaCI и 20 мкл исследуемой СЖ).

Для разведения СЖ используется изотонический 0,9% (150ммоль/л) раствор NaCI. Если в СЖ необходимо лизировать эритроциты, используется гипотонический 0,3% (50ммоль/л) раствор NaCI.

Изотонический и гипотонический растворы NaCI можно подкрашивать 3% раствором метиленового синего или метилвиолета.

При разведении в 200 раз окончательный расчет проводят по формуле: Х =А 1250

В нормальной СЖ число клеток варьирует и составляет 0.1 – 0.5 х10 9 /л.

П р и м е ч а н и е ─ При суставной патологии цитоз увеличивается, свидетельствуя о нарастании воспалительного процесса. При дегенеративных заболеваниях и посттравматическом артрите цитоз в СЖ составляет 2 - 2,5х10 9 /л. При воспалительных заболеваниях суставов (РА, .РеА, анкилозирующий спондилоартрит, псориатический артрит, подагра, псевдоподагра) цитоз варьирует от 3 до 75х10 9 /л, при септических артритах превышает 80х10 9 /л.

3.5.3 Приготовление нативных и окрашенных препаратов для микроскопического исследования.

В лаборатории должна быть утверждена процедура подготовки синовиальной жидкости и приготовления нативного и окрашенного азур-эозином препаратов для микроскопического исследования и процедура проведения этих микроскопических исследований. Каждый сотрудник должен выполнять все этапы анализа одинаковым способом, оценивать обнаруженные при микроскопии клеточные элементы и кристаллы, используя одни и те же критерии для идентификации.

Препараты для микроскопического исследования (нативные и окрашенные) могут быть приготовлены как непосредственно из СЖ без центрифугирования, так и из осадка, полученного путем центрифугирования образца СЖ (например, для определения кристаллов).

Если СЖ мутная с низкой вязкостью, ее можно сразу наносить на предметное стекло.

Для приготовления нативного препарата капля СЖ наносится на предметное стекло и покрывается покровным.

Мазок для последующей окраски готовится аналогично мазку крови: на край предметного стекла наносят каплю СЖ, шлифованным краем другого стекла (или пластикового шпателя) под углом 45 ◦ выравнивают каплю по стеклу и эатем быстрым движением с небольшим нажимом, чтобы предотвратить разрушение клеток, распределяют по стеклу, не доходя до края стекла на 1 – 1,5 см.

Для получения большей концентрации клеток в микроскопическом препарате можно использовать приготовление мазка на основе толстой капли. На стекло наносится большая (толстая) капля СЖ, которая распределяется по нему шлифованным стеклом медленно и без нажима.

Увеличение концентрации клеток может быть достигнуто также методом центрифугирования СЖ и получения сконцентрированного осадка.

Прозрачную или полупрозрачную СЖ, независимо от величины вязкости, рекомендуют центрифугировать.

В центрифужную пробирку помещают синовиальную жидкость.

Центрифугируют 10 мин при 1000 об/мин. при 5-7 ◦ С. С помощью пастеровской пипетки отсасываются надосадочную синовиальную жидкость (супернатант) и оставляют только осадок. Этой же пипеткой аккуратно без пены перемешивают осадок.

1 каплю осадка (приблизительно 40 мкл) переносят этой же пастеровской пипеткой (с баллончиком и тонко оттянутым концом) на предметное стекло и покрывают покровным (нативный препарат). Покровное стекло должно покрывать каплю осадка полностью без пузырей.

Затем из этого осадка готовится мазок для окраски азур-эозином. Клетки в осадке сконцентрированы, что безусловно облегчает микроскопию и подсчет процентного содержания отдельных клеток. Однако этот способ имеет существенные недостатки: при самых щадящих условиях центрифугирования может страдать структура некоторых синовиальных клеток, а также происходить их разрыв.

При малом объеме синовиальной жидкости, например, жидкость находится только в пункционной игле, содержимое иглы выдувают поршнем шприца на предметное стекло и из этой капли делают мазок или вначале покрывают ее покровным стеклом и предварительно на иммерсии исследуют нативный препарат. Затем снимают покровное стекло, аккуратно распределяют материал по предметному стеклу, высушивают, фиксируют и окрашивают этот препарат азур-эозином.

Если капля СЖ вязкая и густая, разведение делают на этом же предметном стекле,

добавляя к капле СЖ 2-4 капли физиологического раствора, после чего

аккуратно смешивают уголком пластикового шпателя или предметного стекла каплю СЖ с каплями физиологического раствора, наносят на другое предметное стекло каплю разведенной СЖ, распределив ее по ширине шлифованной поверхности шпателя или шлифованного стекла, легким движением сделать мазок, так чтобы он занимал 2/3 предметного стекла.

Независимо от того, готовится ли мазок из цельной СЖ или осадка, мазок должен быть равномерным и заканчиваться щеточкой.

Используются обычные способы фиксации и окраски мазков, аналогичные применяемым в гематологических исследованиях: приготовленные мазки подсушивают на воздухе без подогрева, затем фиксируют по методу Май-Грюнвальда, окрашивают по методу Романовского-Гимзы или модификации этого метода; наиболее чувствительным и специфичным для определения клеточного состава СЖ считается метод Паппенгейма. (см. ГОСТ Р Цитологические исследования пунктата костного мозга).

Стандартизация приготовления препаратов из синовиальной жидкости позволяет получить сравнимые результаты микроскопического исследования в разных лабораториях.

3.5.4 . Микроскопическое исследование нативного препарата синовиальной жидкости.

Изучение препарата начинают с малого увеличения (ок. х 7, 10 или х 20, об. х 10) для общего обзора и более детального изучения препарата на большом увеличении (ок х10 и об.х40. Для достоверного обнаружения рагоцитов в нативном препарате рекомендуется использовать фазово-контрастную микроскопию, или исследовать препарат с иммерсией. Для идентификации кристаллов рекомендуется использовать поляризационный микроскоп.

В нативном препарате при увеличении х70, х100 или х200 можно получить только ориентировочное представление о лейкоцитах, обнаружить эритроциты и тканевые клеточные элементы. При увеличении х400 перечисленные клеточные элементы видны более четко. При микроскопии на этих увеличениях удобно поднять до упора конденсор и максимально закрыть диафрагму. Такой режим работы обеспечивает большую четкость нативных клеточных элементов.

Эритроциты, содержащие гемоглобин, при увеличении х400 по форме похожи на двояко вогнутые линзы желтовато-розоватого цвета. Это неизменные эритроциты они сохраняют форму и гемоглобин благодаря рН синовиальной жидкости, которая колеблется в пределах от 7,0 до 8,5. Эритроциты попадают в синовиальную жидкость при травмах суставов или во время пункции.

Лейкоциты при воспалении суставов представлены в синовиальной жидкости нейтрофилами. Нейтрофилы бесцветные или сероватые, мелкозернистые правильной круглой формы клетки. Иногда (при аллергических состояниях) можно обнаружить в синовиальной жидкости эозинофилы, которые отличаются от нейтрофилов по характерной равномерной, сферической, желтоватого цвета зернистости, но дифференцировать лейкоциты в нативных препаратах не следует.

Рагоциты.

Рагоциты - это макрофаги, содержащие в своей цитоплазме резко преломляющие свет гранулы, размер которых больше, чем размер внутриклеточной зернистости в цитоплазме этих клеток. Эти гранулы могут быть бесцветные, зеленоватые или черные, в зависимости от преломления проходящего через них света. Размер гранул варьирует от 0,20 до 0,33 мкм. За счет этих гранул размер рагоцитов несколько больше нейтрофилов, моноцитов, макрофагов, не содержащих этой зернистости. Эти гранулы содержат иммунные комплексы, в состав которых входит ревматоидный фактор, а также иммуноглобулины и антинуклеолярный фактор.

Обнаружение и подсчет рагоцитов, производятся в нативном препарате с использованием фазово-контрастной микроскопии или иммерсии.

На покровное стекло, которое покрывает нативный препарат, наносят каплю иммерсионного масла и устанавливают иммерсионный объектив, получая увеличение х900 или х1000. Подсчитывают 100 клеточных элементов (лейкоцитов, рагоцитов и тканевых клеток) и отмечают, сколько процентов из них составляют рагоциты

П р и м е ч а н и е 1 ─ При ревматоидном артрите количество рагоцитов может достигать 50% клеточного состава.

Кристаллы

В норме СЖ не содержит кристаллов, они обнаруживаются при различных заболеваниях суставов.

Для идентификации большинства кристаллов в СЖ используют метод поляризоционной микроскопии при увеличении 300 – 500.

Подсчет кристаллов проводят в нативном препарате цельной СЖ.

Кристаллы моноурата натрия (С 5 Н 3 NaN 4 O 3) игловидной или полосковидной формы длиной 2 - 30 мкм, обладают сильным двулучепреломлением, хорошо различимы в нативном препарате и легко отличаются от других кристаллов. В полярзационном микроскопе на черном фоне игольчатые кристаллы хорошо видны как «белые искры».

Эти кристаллы часто обнаруживаются внутриклеточно в нейтрофилах и макрофагах.

П р и м е ч а н и е 2 ─ кристаллы моноурата натрия типичны для подагры.

Пирофосфат кальция

Пирофосфат кальция – кальций пирофосфат дигидрат или дигидропирофосфат кальция (CаPPD) Ca 2 P 2 O 7 2H 2 O. Эти кристаллы имеют форму коротких или длинных полосковидных прямоугольников или ромбов с тупыми концами размером 2 - 10 мкм и обладают слабым двулучепреломлением, растворимы в 10 % растворе ЭДТА.

П р и м е ч а н и е 3 ─ эти кристаллов в синовиальной жидкости обнаруживаются при хондрокальцинозе и пирофосфатной артропатии..

Гидроксиапатит

Гидроксиапатит - Ca 5 (PO 4) 3 OH. - кристаллы очень мелкие, практически не различимы при обычном увеличении ни в световом, ни в поляризационном микроскопах. В поляризационном микроскопе можно обнаружить только друзы этих кристаллов размером 5 – 20 мкм. В фазовоконтрастном микроскопе кристаллы гидроксиапатита обнаруживаются внутри полиморфноядерных лейкоцитов (нейтрофилов) и внеклеточно, как светлые диски диаметром 2-3 мкм.

Эти кристаллы могут быть обнаружены по яркокрасной окраске при применении ализаринового красного.

Метод окраски СЖ ализариновым красным.

Реактивы: 2% водный раствор ализаринового красного с рН 4,2 (рН доводят с помощью гидроокиси аммония).

Суспензию профильтровать и хранить в холодильнике в склянке из темного стекла. Непосредственно перед исследованием необходимое количество краски профильтровать через миллипоровый фильтр.

20 мкл краски смешать с равным объемом СЖ или осадка, полученного после центрифугирования. Приготовить нативный препарат и микроскопировать лучше в поляризационном микроскопе: кристаллы овоидной формы, 2-3 мкм в диаметре, насыщенной красной окраски с розовым ореолом.

П р и м е ч а н и е 4 ─ Эти кристаллы обнаруживаются при гидроксиапатитной артропатии.

В синовиальной жидкости могут быть также обнаружены кристаллы оксалата кальция, холестерина, липидов, Шарко-Лейдена и др.

П р и м е ч а н и е 5 ─ Кристаллы оксалата кальция (С 2 СаО 4  Н 2 О) имеют обычно кубическую форму но могут образовывать бесцветные, блестящие, сильно преломляющие свет кристаллы различной величины в форме октаэдров или прямоугольников, напоминающих почтовые конверты. Иногда встречаются кристаллы оксалата кальция округлой формы и с перехватом, напоминающие песочные часы, гимнастические гири или банты (С 2 СаО 4  2Н 2 О). Эти кристаллы могут фагоцитироваться полиморфоядерными лейкоцитами (нейтрофилами).

П р и м е ч а н и е 6 ─ Жидкие кристаллы липидов представлены на темном поле в виде черных мальтийских крестов, делящих каждую каплю липида на четыре белых блестящих сегмента. Капли нейтрального жира не обладают эффектом двулучевого преломления света.

Кристаллы холестерина, оксалата натрия и жидкие кристаллы липидов не специфичны для какого-либо определенного суставного заболевания и могут встречаться при различных артропатиях, отражая нарушение метаболизма.

П р и м е ч а н и е 7 ─ В СЖ можно обнаружить амилоидные глыбки. Это бесцветные образования округлой формы, слоистого строения, напоминающего спил дерева, с характерным блеском. Идентифицируются в нативных препаратах при увеличении х400, а также с иммерсией при увеличении х1000. Амилоид можно определить в нативной СЖ, окрашенной красным конго. Полученный препарат можно смотреть как в световом, так и в поляризационном микроскопе.

Амилоидные глыбки находят при заболеваниях, слпровождающихся амилоидной артропатией.

Кристаллы гематоидина.

Кристаллы гематоидина образуются при распаде гемоглобина в гематомах без доступа кислорода. Это слегка вытянутые в длину ромбики и/или иглы золотисто-желтого цвета. Кристаллы гематоидина хорошо различимы как в нативном, так и в окрашенном азур-эозином препаратах. Так как обычно в СЖ эти кристаллы достаточно мелкие, нативные препараты рекомендуется микроскопировать на иммерсии. В очаге воспаления эти кристаллы могут быть фагоцитированы макрофагами или располагаться на поверхности клеточных элементов.

П р и м е ч а н и е 8 ─ При травме и внутрисуставном кровотечении в полости сустава создаются условия, при которых могут образовываться кристаллы гематоидина.
Кристаллы Шарко-Лейдена.

Кристаллы Шарко-Лейдена по форме напоминают стрелку компаса или резко вытянутый в длину ромб. Обычно кристаллы Шарко-Лейдена расположены на фоне детрита или в сочетании с большим количеством эозинофилов и образуются при распаде эозинофилов из эозинофильной зернистости, эти кристаллы можно обнаружить в СЖ больных, страдающих аллергическим синовитом.
Кристаллы лекарственных препаратов

Стероиды. Внутрисуставные инъекции стероидных препаратов приводят к их кристаллизации внутри суставов, где могут сохраняться до 10 недель. Обнаружение этих кристаллов при микроскопическом исследовании нативных препаратов и последующая неправильная дифференцировка может привести к ошибочным заключениям.
Неклеточные и некристаллические элементы в СЖ.

В СЖ могут быть обнаружены фрагменты хряща и поврежденных связок. Фрагменты хряща в нативном препарате можно распознать по характерному шелковистому блеску. Обнаруживают также фрагменты хряща, содержащие кластеры хондроцитов и фрагменты мениска, которые представлены волнистыми коллагеновыми волокнами и также хондроцитами; фрагменты связок представлены длинными тонкими фибриллами и параллельно расположенными нитями коллагена

П р и м е ч а н и е 9 ─ Встречаются наиболее часто в СЖ после травмы коленного сустава.

П р и м е ч а н и е 10 ─ Несмотря на высокую чувствительность метода поляризационной микроскопии, при его использовании возможны серьезные ошибки, которые обычно возникают из-за недостаточно высокой разрешающей способности конкретного микроскопа, наличия посторонних кристаллоподобных примесей и повреждений на предметном или покровном стекле. Микроскопист должен учитывать возможность помех и хорошо знать принципы распознавания кристаллов.

3.5.5. Микроскопическое исследование препаратов синовиальной жидкости, окрашенных азур-эозином (с подсчетом синовиоцитограммы).

Приготовление мазков СЖ и методы их окраски (п.5.5.2).

Клеточный состав синовиальной жидкости (синовиоцитограмма).

Определение клеточного состава СЖ – важнейший этап ее исследования, позволяющий уточнить диагноз, определить степень воспалительной активности процесса и прогноз. Определение количественного распределения клеток (синовиоцитограмма) является важнейшим показателем для дифференциальной диагностики болезней суставов. Подсчет процентного соотношения клеток проводят так же, как и подсчет лейкоцитарной формулы крови. (подсчитывают 100 клеток в мазке и рассчитывают процентное содержание каждого вида клеток).

В норме в СЖ преобладают клетки тканевого происхождения (синовиоциты и гистиоциты) – до 65%. Лимфоциты составляют около 30%, а моноциты и нейтрофилы – 1-2%.

Клетки крови в СЖ.

Нейтрофилы (полиморфноядерные лейкоциты).

Нейтрофилы в 1,5-2 раза больше эритроцита, по диаметру (14-16 мкм). Соотношение ядра и цитоплазмы сдвинуто в сторону ядра. Цитоплазма сиреневого цвета, заполнена мелкой, пылевидной зернистостью, имеющей окраску ядра клетки. Ядра состоят из 3-4 сегментов, с четким делением на окси- и базихроматин. При дистрофии количество сегментов в нейтрофилах резко увеличивается до 5-7 (гиперсегментация). При апоптозе в нейтрофиле фрагменты ядра сливаются в одну или две гиперхромные гомогенные, бесструктурные массы правильной круглой формы.

В нормальной СЖ количество нейтрофилов не превышает в формуле 1-2%.

П р и м е ч а н и е 1 ─ При ревматоидном артрите содержание нейтрофилов достигает 90%, а количество лимфоцитов снижается до 10%. Аналогичная картина отмечается при анкилозирующем спондилоартрите. При воспалительных заболеваниях и внутрисуставном кровотечении нейтрофилы составляют в формуле СЖ 60-80%, а при септической артропатии - более 95%.

Лимфоциты.

Это клетки до 12 мкм в диаметре. Соотношение цитоплазмы и ядра сдвинуто в сторону ядра (9: 1). Ядро грубо глыбчатой структуры, базофильная цитоплазма узким ободком окружает ядро, иногда просматривается зона просветления вокруг ядра.

В нормальной СЖ количество лимфоцитов колеблется от 8 до 30%.

П р и м е ч а н и е 2 ─ При воспалительных заболеваниях преобладают нейтрофилы, а при дегенеративных – лимфоциты. При дегенеративных заболеваниях суставов и травматическом артрите в СЖ содержание лимфоцитов достигает 85%. Преобладают лимфоциты в формуле также при токсико-аллергических синовитах и синовиальной форме туберкулеза. При артритах вирусной этиологии, например вызванной вирусом HTLV-1 - появляются атипичные лимфоциты, количество которых достигает 20%.

Моноциты.

П р и м е ч а н и е 3 ─ Моноциты встречаются при различных суставных артропатиях, в том числе при вирусных артритах и при моноцитарных артритах, а также при повреждении имплантационных протезов.

Кроме этих клеток в СЖ (при патологии) могут быть обнаружены в небольшом количестве другие клетки крови: эозинофилы, базофилы, плазматические клетки.

П р и м е ч а н и е 4─ Эозинофилы встречаются в СЖ крайне редко, идентичны эозинофилам периферической крови.

П р и м е ч а н и е 5─ Базофилы встречаются в незначительном количестве при воспалительных артритах, серонегативной артропатии, невоспалительных артропатиях, связанных с травмой.

П р и м е ч а н и е 6 ─ Плазматические клетки встречаются в СЖ при воспалительных артропатиях. Обнаружение плазматических клеток характерно, в частности, для ревматоидного артрита, т.е. для длительного вяло текущего воспалительного процесса.

Тканевые клетки в СЖ.

Синовиоциты.

Эти клетки относятся к однослойному уплощенному эпителию, покрывающему синовиальные оболочки суставов. По своей морфологии они идентичны мезотелиальным клеткам. Синовиациты - эпителиальные клетки диаметром 18-25 мкм, с различным ядерно/цитоплазматическим соотношением. Они содержат центрально или эксцентрично расположенные ядра круглой или овальной формы, мелко-глыбчатой или петлистой структуры, окруженные широким ободком базофильной цитоплазмы, иногда с «оборочкой» по периферии. Цитоплазма в перинуклеарной зоне у некоторых синовиоцитов содержит мелкую зернистость. Синовиоциты отторгаются от поверхности синовиальной оболочки сустава и обнаруживаются в СЖ при артропатиях. Синовиальные клетки могут содержать 2 и более ядер (многоядерные).

Различают три вида синовиоцитов:

тип А – макрофагальные синовиоциты, способные к фагоцитозу;

тип В – синовиальные фибробласты, способные к синтезу и секреции гиалуроновой кислоты;

тип АВ – переходные формы клеток, сочетающие эти оба свойства.

Гистиоциты.

Тканевые макрофаги – клетки размером 18-20-25 мкм с округлым или моноцитоидным компактным ядром, окруженным мелкозернистой или не содержащей зернистости цитоплазмой.

П р и м е ч а н и е 7 ─ Гистиоциты всегда присутствуют в СЖ при воспалительных процессах.

П р и м е ч а н и е 8 ─ В СЖ могут быть обнаружены многоядерные клетки, которые представляют собой синовиоциты или плазматические клетки и имеют такое же значение как и мононуклеарные варианты этих клеток.

П р и м е ч а н и е 9 ─ Обнаружение LЕ –клеток, содержащих в цитоплазме включения гомогенезированного ядерного материала, в СЖ в отличие от периферической крови, не является прямым указанием на СКВ. Однако сочетание LE-клеток с большим количеством лимфоцитов в СЖ позволяет заподозрить наличие у больного СКВ.

П р и м е ч а н и е 10 ─ Клетки в митозе.

Митотические фигуры не имеют диагностического значения. Синовиоциты в состоянии деления подтверждают процесс пролифераии клеток выстилки суставной сумки.
Недифференцируемые клетки.

Недифференцируемые клетки отмечаются практически во всех синовиограммах.

В тонких, хорошо сделанных мазках СЖ, фиксированных фиксаторами или фиксаторами- красителями и докрашенных азур-эозином, все клеточные элементы поддаются дифференцировке. Только в толстых мазках, приготовленных неопытной рукой лаборанта из вязкой, гиперклеточной и предварительно неразведенной СЖ, встречаются клетки, неподдающиеся дифференцированию. Это могут быть любые клеточные элементы - и тканевые, и кровяные. В таких препаратах практически невозможно обнаружить кристаллы и микроорганизмы.