Amint azt az elmúlt évek tanulmányai kimutatták, a genetikai tényezők, különösen az interleukin 28B gén polimorfizmusai különös hatással vannak a kezelés eredményére, illetve fertőzés esetén az öngyógyítás lehetőségére.
Az interleukin 28B a lambda interferonok vagy a 3-as típusú interferonok képviselője, amelyek erős antivirális hatással rendelkeznek, és elnyomják a hepatitis C vírus replikációját.. Az interleukin 28B gén polimorfizmusait vizsgálták stabil virológiai válaszreakcióval. Egyes genotípusokban 2-szer gyakrabban érhető el stabil virológiai válasz A hepatitis C fertőzésben a főszerep két egynukleotid szubsztitúció:
Citozin helyettesítése timinnel (C> T), amelyet rs12979860-nak jelöltek az US National Center for Biotechnological Information (NCBI) dbSNP adatbázisában.
Guanin helyettesítése timinnel (T> G), rs8099917
Az ezeken a lókuszokon található nukleotidoktól függően azonosították a C (citozin), T (timin), G (guanin) allélokat és a megfelelő genotípusokat: az rs12979860 allél esetében - CC, CT, TT, valamint TT, TG, GG az rs8099917 allélek esetében, hogy az interleukin 28B genotípusa független és legmegbízhatóbb tényező, amely befolyásolja a PVT-re (antivirális terápia) adott korai és stabil virológiai válasz gyakoriságát az egyéb prognózisi tényezők mellett.. Ebben az esetben az rs12979860 polimorfizmusok felelősek a válasz, rs8099917 apolimorfizmusok szorosan összefüggenek az AVT-re adott válasz hiányával.Ez alapján a következő algoritmus javasolt.kezelésre felkészítő vizsgálatok.
A páciens genotípusának IL28B-vel történő meghatározása megváltoztathatja a kezelési döntés meghozatalának algoritmusát az időtartam megváltoztatásával, mint a PEG IFN / RIB terápia szokásos kúrája, valamint a CHC hármas terápia időtartama. A terápia optimalizálása lehetővé teszi számos további probléma elkerülését olyan betegek kezelésében, akiknél a terápia felírásakor nagy valószínűséggel pozitív választ kapnak (a további mellékhatások és a hármas terápia többletköltségei, proteázgátlók - telaprevir és boceprevir - bevonásával)
A páciens genotípusának IL28B-vel történő meghatározása megváltoztathatja a kezelési döntés meghozatalának algoritmusát az időtartam megváltoztatásával, mint a PEG IFN / RIB terápia szokásos kúrája, valamint a CHC hármas terápia időtartama. A terápia optimalizálásával számos további probléma elkerülhető azon betegek kezelésében, akiknél a terápia felírásakor nagy valószínűséggel pozitív választ kapnak (elkerülje a további mellékhatásokat és a hármas terápia többletköltségeit, proteázgátlók - telaprevir és boceprevir - bevonásával)
21 FBSI "Szövetségi Tudományos Központ az Orvosi Megelőző Technológiák A Közegészségügyi Kockázatkezeléshez A Rospotrebnadzor"
2 Állami Költségvetési Szakmai Felsőoktatási Intézmény „Permi Állami Orvostudományi Akadémia névadó ac. E.A. Wagner "Oroszország Egészségügyi Minisztériuma
3 GUZ "Regional Clinical Infectious Diseases Hospital"
A tanulmány célja. A citolízis, kolesztázis, fibrózis, májregeneráció és az interleukin 28B (IL28B) gén polimorfizmusának laboratóriumi markerei kapcsolatának vizsgálata az rs12979860 régióban krónikus hepatitis C-ben (CHC) szenvedő betegeknél. Anyag és módszerek. 100 CHC-s beteget és 90 egészséges donort vizsgáltak meg. A vérszérumban a májfunkciós teszteket, a hialuronsav, az alfa-fetoprotein koncentrációját enzim immunoassay-vel, a vírusterhelés mértékét és az IL28B gén (rs12979860) polimorfizmusát polimeráz láncreakcióval értékelték. Eredmények. CHC-ban szenvedő betegeknél citolízis, kolesztázis szindrómákat tártak fel, és a hialuronsav és az alfa-fetoprotein medián koncentrációja több mint kétszerese volt ezen indikátorok szintjének a kontrollcsoportban (p = 0,004 és p = 0,0001). Általánosságban elmondható, hogy nem volt statisztikailag szignifikáns különbség az IL28B (rs12979860) genotípusainak és alléljainak gyakoriságában az egészséges egyének és a CHC-s betegek csoportjai között. Mindazonáltal a hepatitisben szenvedő betegek 71,4%-ánál a CT és a TT genotípusok kedvezőtlen kombinációja volt, és ennek megfelelően fennállt az antivirális terápiára adott negatív válasz kialakulásának potenciális kockázata, amelynek maximális megnyilvánulása TT homozigótákban volt. A korrelációs elemzés során az IL-28B gén minor T allélja szignifikáns kapcsolatot mutatott az alanin (r = 0,25, p = 0,02) és aszparaginsav (r = 0,22, p = 0,019) transzaminázokkal, valamint a direkt bilirubinnal (r = 0, 25, p = 0,02), hialuronsav (r = 0,17, p = 0,03), alfa-fetoprotein (r = 0,25, p = 0,02), vírusterhelés (r = 0, 25, p = 0,021). Következtetés. Az IL-28B gén polimorfizmusa a CHC-ben szenvedő betegek májkárosodásának súlyosságával függ össze.
krónikus hepatitis C
interleukin 28B gén polimorfizmusa
citolízis szindróma
kolesztázis
hialuronsav
alfa-fetoprotein
1. Abdurakhmanov D.T. A krónikus hepatitis C kezelésének perspektívái // Klinikai hepatológia. - 2010. - 3. szám - P. 3–9.
2. Simankova T.V., Garmash I.V., Arisheva O.S., Manukhina N.V. Az IL-28B gén polimorfizmusa a krónikus hepatitis C vírusellenes terápiájára adott válasz előrejelzőjeként // Klin. pharmacol. ter. - 2012. - 21. szám (1). - S. 17–22.
3. Shchekotova A.P. Az endothel diszfunkció és a májfibrózis markereinek kapcsolata a vírusterheléssel krónikus vírusos hepatitis C-ben // A tudomány és az oktatás modern problémái (elektronikus folyóirat). 2012. No. 1. URL: www.science-education.ru/101-5458.
4. Agúndez J. A., García-Martin E., Maestro M. L., Cuenca F., Martínez C. és társai. Az IL28B génpolimorfizmus kapcsolata biokémiai és szövettani jellemzőkkel a hepatitis C vírus által kiváltott májbetegségben. http://www.plosone.org/article/info:doi/10.1371/journal.pone.0037998.
5. Eurich D., Boas-Knoop S., Bahra M., Neuhaus R., Somasundaram R., Neuhaus P., Neumann U., Seehofer D. Az IL28B polimorfizmus szerepe a hepatitis C vírus által kiváltott hepatocelluláris karcinóma kialakulásában , graft fibrózis és transzplantáció utáni vírusellenes terápia. Transzplantáció / 2012. március 27., 93 (6): 644-9.
6. Ge D., Fellay J., Thompson A. Az IL28B genetikai variációja előrejelzi a hepatitis C kezelés által kiváltott vírus clearance-ét // Természet. 2009. évf. 461. pp. 399-401.
7. McCarthy J., Li J., Thompson A. Replikált kapcsolat egy IL28B génváltozat és a pegilált interferonra és ribavirinre adott tartós válasz között // Gastroenterology. 2010. évf. 138. 2307-2314.
8. Moliner L., Pontisso P., De Salvo G. L. et al. A szérum és a máj HCV RNS szintje krónikus hepatitis C-ben szenvedő betegeknél: összefüggés a klinikai és szövettani jellemzőkkel // Gut. 1998. évf. 42. pp. 856-860.
9. Perz J., Armstrong G., Farrington L. A hepatitis B vírus és hepatitis C vírus fertőzések hozzájárulása a cirrhosishoz és az elsődleges májrákhoz világszerte // J. Hepatol. 2006. évf. 45 (4). pp. 529-538.
10. Stattermayer A. F., Stauber R., Hofer H., Rutter K. et al. Az IL28B genotípus hatása a korábban nem kezelt krónikus hepatitis C-ben szenvedő betegek korai és tartós virológiai válaszaira // Klinikai gasztroenterológia és hepatológia. 2011. T. 4. No. 3. http://health.elsevier.ru / Journals.
11. Thomas D.L., Thio C.L., Martin M.P. Az IL28B genetikai variációja és a hepatitis C vírus spontán kiürülése // Természet. 2009. évf. 461 (7265). pp. 798-801.
A vírusos hepatitis C az egyik társadalmilag jelentős betegség, és a krónikus májbetegségek egyik fő oka. A WHO becslései szerint a világon 170 millió ember, vagyis a lakosság 3%-a fertőzött hepatitis C vírussal (HCV). Jelenleg a krónikus hepatitis C (CHC) vírusellenes terápiájának "arany standardja" a pegilált interferon ribavirinnel kombinálva. A kombinált vírusellenes terápia a krónikus hepatitis C-ben szenvedő betegek 50-60%-ánál, ezen belül a HCV 1-es genotípusú betegek 40-50%-ánál és 70-80%-ánál a 2-es és 3-as genotípusú betegek átlagosan tartós virológiai választ ad. A kezelés egyéni megközelítése, időben a nemkívánatos események megelőzése és korrekciója növeli a kezelés hatékonyságát, de az esetek közel 40%-ában a vírusellenes terápia hatástalan. Megjelent egy genetikai marker, amivel részben megjósolható az eredmény: az interleukin 28B (IL28B) gén polimorfizmusa bizonyos mértékig meghatározza a páciens immunrendszerének érzékenységét az interferonos stimulációra.
2009-ben D. Ge et al. egyetlen nukleotid szubsztitúciót talált a 19. kromoszómán lévő IL28B-ben, amelyet a lokalizációt figyelembe véve rs12979860-nak neveztek. Az ezen a lókuszon található nitrogénbázistól függően 2 allélt izoláltunk: rs12979860 C (citozin) és rs12979860 T (timin). Az allélok kombinációja alapján az IL28B gén polimorfizmusának 3 genotípusos variánsa lehetséges: CC, CT és TT. A populációban előforduló gyakoriságtól függően az rs12979860 С allél fő, azaz. gyakoribb, és az rs12979860 T allél kisebb. Bebizonyosodott, hogy az antivirális terápiára adott pozitív válasz gyakorisága magasabb az rs12979860 CC genotípusú betegeknél (70,5%), és alacsonyabb az rs12979860 CT és TT genotípusú betegeknél (32,0%, illetve 23,3%). A T allél hordozása, amely növeli az antivirális terápia negatív válaszának valószínűségét, fontosabb, mint a C allél „védő hatása”, ennek ellenére a CC genotípus hozzájárul a vírus eliminációjához. Az IL28B gén polimorfizmusának meghatározása lehetővé tette egy stabil virológiai válasz elérésének valószínűségét 65%-os szenzitivitással és 78%-os specificitással ennek a génnek az rs12979860 markerére.
Ennek a markernek a genetikai polimorfizmusának meghatározása a legnagyobb jelentőséggel bír az 1-es genotípusú HCV-ben szenvedő betegeknél, tekintettel a standard vírusellenes terápia alacsonyabb válaszarányára. Néhány tanulmány nem talált egyértelmű kapcsolatot az IL28B polimorfizmus és a tartós virológiai válasz aránya között ezeknél a betegeknél. Az IL28B genotípus meghatározása nagy jelentőséggel bír az antivirális terápiára adott lehetséges válasz értékelésében és azon betegek kiválasztásában, akiknél rövidebb kezelési ciklus lehetséges. Általánosságban elmondható, hogy az IL28B polimorfizmus az egyik olyan tényező, amely lehetővé teszi a krónikus hepatitis C kezelésének egyénre szabását. Az irodalomban bizonyíték van arra, hogy az IL28B gén polimorfizmusa összefügg a HCV által kiváltott hepatocelluláris karcinóma kialakulásával. Érdekesnek tűnik tehát ennek a génnek a polimorfizmusa és a májkárosodás súlyossága közötti kapcsolat vizsgálata, különösen károsodott májfunkciós tesztekkel, fibrózis és májregeneráció laboratóriumi vizsgálataival, amelyek segítenek tisztázni az IL28B polimorfizmus szerepét a májkárosodásban. a CHC patogenezise és progressziója.
A vizsgálat célja a citolízis, a kolesztázis, a hialuronsav (HA), az alfa-fetoprotein (AFP), a vírusterhelés (VL) szint és az IL28B genetikai polimorfizmus laboratóriumi markerei kapcsolatának vizsgálata volt az rs12979860 régióban CHC-s betegekben. .
Anyagok és kutatási módszerek
100 reaktivációs fázisban lévő CHC-s beteget vizsgáltunk meg, akik a Permi Regionális Fertőző Kórházban kerültek kórházba a kombinált vírusellenes terápia megkezdése céljából. A betegek átlagéletkora 38,3 ± 10,4 év volt, ebből 48 férfi és 52 nő volt. A diagnózis etiológiai igazolását a betegek vérében lévő HCV RNS kvalitatív és kvantitatív meghatározásával végeztük polimeráz láncreakció (PCR), valamint HCV szerológiai markerek alkalmazásával. A HCV genotípusa szerint a CHC-ben szenvedő betegeket a következőképpen osztották fel: az 1-es genotípust a betegek 56%-ában, a 2-es és 3-as genotípust 44%-ban mutatták ki. Az azonos nemű kontrollcsoportba 90 gyakorlatilag egészséges (donor) egyén tartozott, akiknek átlagos életkora 36,3 ± 7,9 év volt, májbetegség nélkül.
A vérszérum biokémiai paramétereit "Architect-4000" (USA) automata analizátorral határoztuk meg. A májfibrózis közvetlen markere, a HA szintjét a vérszérumban a BCM Diagnostics kit segítségével, enzimhez kötött immunszorbens vizsgálattal, Stat-Fax analizátoron (USA) határozták meg 76 betegen. Az AFP koncentrációját a vérszérumban immunokemilumineszcencia analízis módszerével vizsgáltuk AFP kit (Siemens) segítségével az Immulite-1000 analizátoron (Németország) 44 betegen. A kontrollcsoportban a HA és az AFP koncentrációját 20 látszólag egészséges egyénben vizsgálták.
Az IL28B gén rs12979860 markere polimorf variánsainak azonosítására allélspecifikus PCR-t alkalmaztunk a termékek valós idejű kimutatásával. A primerek és szondák tervezését a CJSC "Syntol" (Moszkva) alkalmazottai végezték. A termikus ciklust a "CFX-96" Bio-Rad Laboratories, Inc. detektorerősítőn végezték. (USA). E gén genotípusának meghatározásához DNS-t izoláltak az előzőleg EDTA-val stabilizált teljes vénás vérből minden CHC-s betegnél és 90 egészséges donornál.
Az eredmények statisztikai feldolgozása a Statistica 7.0 szoftver (StatSoft) segítségével történt. Az eredmények eloszlását a Kolmogorov ‒ Smirnov kritérium alapján ellenőriztük. A kapott mennyiségi jellemzők leírására az adatokat medián (Me) és 25 és 75 százalékos, minimum (min) és maximum (max) formájában mutattuk be. Mivel a HA és az AFP indexek eloszlása eltért a normálistól, a független csoportok közötti különbségek szignifikanciájának felmérésére a nem paraméteres Mann-Whitney tesztet alkalmaztuk. A genotípusok és a gének alléljainak arányának leírására a Hardy-Weinberg egyensúlyt alkalmaztuk. A vizsgált csoportok egyensúlyi (stabil) állapotban voltak a vizsgált gén genotípus-gyakoriságait tekintve (p> 0,05). A két populáció közötti különbségeket az esélyhányados (OR) segítségével számítottuk ki eset-kontroll megközelítéssel a különböző öröklődési modellekhez: additív, általános, multiplikatív, domináns és recesszív, és szignifikánsnak tekintették p-nél.< 0,05. Количественная оценка линейной связи между двумя независимыми величинами определялась с использованием коэффициента ранговой корреляции по Спирмену (r). Значимость взаимосвязей и различия между выборками считались достоверными при значении для р < 0,05.
Kutatási eredmények és tárgyalásuk
Figyelembe véve a CHC-ben szenvedő betegek vérének biokémiai paramétereit, citolízis szindrómát tártak fel, amelyet az alanin (ALT) és az aszparaginsav-transzaminázok (AST) aktivitásának növekedése jellemez a vérszérumban, mesenchymalis-gyulladásos szindróma ( a timol teszt emelkedése) és a kolesztázis szindróma (az alkalikus foszfatáz, a direkt bilirubin aktivitásának növekedése).
A CHC-s betegek csoportjában megnövekedett HA-tartalom volt megfigyelhető, ami a fibrózis aktiválódását tükrözi a krónikus májgyulladás hátterében, miközben a HA medián koncentrációja a vérben kétszerese volt a májban mért szintnek. kontrollcsoport (p = 0,01) (1. táblázat). Az AFP mint a hepatocita regeneráció markere koncentrációja a CHC-s betegekben szintén szignifikánsan magasabb volt, mint a kontrollcsoportban.
A CHC-ben szenvedő betegek virémiája nagy eltéréseket mutatott a VL-indexekben. A VL-szint a betegek 70%-ában volt magas - 2∙ 106 kópia/ml felett, az esetek 30%-ában alacsony - 2∙ 106 kópia/ml alatt. Ugyanakkor a minimális virémia 0,022 ∙ 106 volt, a maximális - 8800 ∙ 106 példány / ml. A virémia variabilitása a CHC reaktivációja során vizsgált csoportban összhangban van az irodalmi adatokkal.
Asztal 1
Hialuronsav és alfa-fetoprotein CHC-s betegeknél és a kontrollcsoportban
Jegyzet. p - a mutató különbségeinek szignifikanciáját a vizsgált csoportokban a Mann-Whitney teszt segítségével számítottuk ki.
Jelen tanulmányban az IL-28B gén (rs12979860) egyetlen nukleotid szubsztitúcióját (SNP) elemeztük 190 emberben (90 krónikus májbetegségben nem szenvedő donor és 100 CHC-s beteg).
A C (CC) allél homozigótáinak prevalenciája az egészséges és a CHC-s betegek csoportjában nem különbözött szignifikánsan (χ2 = 0,61; p = 0,44), és 42%, illetve 36% volt (ábra). A patológiás TT homozigóták incidenciája az egészséges és a CHC-s betegek csoportjában 6, illetve 8% volt (χ2 = 0,35; p = 0,55). Mindkét csoportban az ST heterozigóták voltak túlsúlyban (χ2 = 0,79; p = 0,67). A vizsgált marker allélgyakoriságainak arányát a vizsgált csoportokban sem jellemezték eltéréssel. A patológiás minor allél T előfordulása a CHC-csoportban 36%, a kontrollcsoportban - 32% (χ2 = 0,64; p = 0,42). Az IL-28B (rs12979860) genotípusainak és alléljainak előfordulására vonatkozó eredmények mind egészséges egyénekben, mind a CHC csoportban a Perm Terület lakosságában gyakorlatilag nem térnek el más szerzők adataitól. Különösen Oroszországban a protektív C allél előfordulása a lakosság körében 61-64%, a mi vizsgálatainkban - 64% a CHC-ben szenvedő betegeknél és 61% a kontrollcsoportban. Így a vizsgálat során nem volt statisztikailag szignifikáns különbség az IL-28B marker (rs12979860) genotípusainak és alléljainak gyakoriságában az egészséges egyének és a CHC-s csoportok között. A CHC betegek csoportjában a T kockázati allél gyakorisága 0,359 volt, ami nem tért el szignifikánsan az egészséges emberek 0,319-es gyakoriságától. 56 HCV-1 fertőzött beteg közül 40-nél mutatkozott kedvezőtlen rs12979860 CT és TT genotípus kombinációja (35, illetve 5), ami szignifikánsan eltért a kontrollcsoporttól (χ2 = 4,55; p = 0,03). Így az instabil virológiai válasz kialakulásának potenciális kockázata az 1-es genotípusú HCV-ben 71,4% volt.
Az IL-28B génpolimorfizmus (rs12979860) genotípusainak és alléleinek prevalenciája CHC-betegekben és a kontrollcsoportban
A korrelációanalízis során az IL-28B gén minor T allélja (rs12979860) szignifikáns kapcsolatot mutatott ki a funkcionális májtesztekkel: ALT, AST, teljes és direkt bilirubin, ami a génpolimorfizmus és a májkárosodás súlyossága közötti összefüggést jelzi. Ezek az adatok azt is jelzik, hogy a citolízis és a cholestasis súlyossága kedvezőtlenül befolyásolja az antivirális terápia prognózisát (2. táblázat). A kapott eredmények megegyeznek Agundez J.A. vizsgálatának adataival. et al. (2009), akik feltárták a génpolimorfizmus kapcsolatát az ALT-vel, gamma-glutamil-transzpeptidázzal, AST / ALT aránnyal.
2. táblázat
Az IL-28B gén minor T alléljának (rs12979860) kapcsolata májfunkciós tesztekkel, hialuronsavval és alfa-fetoproteinnel a CHC-ban
Megjegyzések: r - indikátorok összekapcsolása; p a korreláció jelentősége.
A T és HA allél közötti pozitív szignifikáns korreláció azt jelzi, hogy a vizsgált gén a májfibrózis progressziójának tényezőjeként értékelhető. Az AFP-vel való összefüggés a génpolimorfizmus és a kifejezettebb májkárosodás és a hepatocarcinoma kockázata közötti összefüggésre is utal. Eurich D. et al. (2012) feltárta az IL-28B és az AFP közötti összefüggést a CHC-vel összefüggő hepatocarcinomában, valamint a fibrózis előrehaladásával HCV-fertőzött betegeknél májtranszplantáció után. A T-allél és a VL-szint közötti kapcsolat a hepatociták súlyosabb károsodására utalhat CHC-s betegekben, ami összhangban van a GC és a virémia mértéke közötti összefüggéssel. Általánosságban elmondható, hogy a T gén minor alléljának feltárt kapcsolatai a tesztelt tesztekkel azt a tényt jelzik, hogy az IL-28B genetikai polimorfizmusa közvetett módon megvalósulhat számos, a CHC patogenezisében szerepet játszó és az antivirális szerek hatékonyságát befolyásoló paraméteren keresztül. terápia. Ezek a tényezők közé tartozik a citolízis és a kolesztázis szindrómák jelenléte, a májfibrózis súlyossága, a hepatocita regeneráció aktiválása és a VL szint.
Így az IL-28B gén polimorfizmusa (rs12979860) összefüggésbe hozható a CHC-ben szenvedő betegek májkárosodásának súlyosságával, amelyet figyelembe kell venni annak érdekében, hogy a kezelés e tényezők kedvezőtlen kombinációjával történő optimalizálása mellett döntsünk, különösen a betegek esetében. a kiskorú T fuvarozásával.
1. A reaktivációs fázisban lévő CHC-s betegeknél a GK és az AFP növekedését mutatták ki, ami a máj fibrózisának aktiválódását és regenerációját jelzi.
2. A vizsgálat során nem találtunk statisztikailag szignifikáns különbséget az IL-28B gén (rs12979860) genotípusainak és alléljainak előfordulási gyakoriságában a vírus különböző genotípusú egészséges egyének és CHC-betegek csoportjai között.
3. A HCV-1-vel fertőzött betegek 71,4%-ánál az rs12979860 CT és TT genotípusok kedvezőtlen kombinációja mutatkozott, és ennek megfelelően fennállt az antivirális terápiára adott negatív válasz kialakulásának potenciális kockázata, amelynek maximális megnyilvánulása TT homozigótákban volt.
4. CHC-ben szenvedő betegekben az IL-28B gén minor T alléljának (rs12979860) összefüggését mutatták ki a citolízis és cholestasis szindrómák súlyosságával, a fibrózis és májregeneráció markereivel, valamint a virémia mértékével.
5. Az 1-es genotípusú HCV CHC-ben szenvedő betegeknél az antivirális terápia prognózisának meghatározásához és a kezelés optimalizálásának kérdésének megoldásához a tényezők kombinációját kell értékelni: a citolízis és a cholestasis súlyosságát, a HA koncentrációját, az AFP-t és a kezdeti a virémia szintje, különösen az IL-28B gén minor T allélját hordozó betegeknél...
Ellenőrzők:
Ustinova O.Yu., az orvostudományok doktora, professzor, orvosi munkáért felelős igazgatóhelyettes, Orvosi és Megelőző Technológiák Szövetségi Tudományos Központja a közegészségügyi kockázatok kezelésére, Perm;
Gein S.V., MD, DSc, vezető kutató, Mikroorganizmusok Fejlődésének Biokémiai Laboratóriuma, Mikroorganizmusok Ökológiai és Genetikai Intézete, Orosz Tudományos Akadémia Uráli Kirendeltsége, Perm.
A mű 2013. december 16-án érkezett be.
Bibliográfiai hivatkozás
Bulatova I.A., Krivcov A.V., Shchekotova A.P., Larionova G.G., Shchekotov V.V. A MÁJSÉRÜLÉS SÚLYOSSÁGÁNAK KAPCSOLATA AZ INTERLEUKIN 28B GÉN POLIMORFIZMÁVAL KRÓNIKUS HEPATITISZ C-S BETEGEKBEN // Fundamental Research. - 2013. - 12-2. sz. - S. 186-190;URL: http://fundamental-research.ru/ru/article/view?id=33301 (hozzáférés dátuma: 2020.02.01.). Felhívjuk figyelmüket a Természettudományi Akadémia által kiadott folyóiratokra
Meghatározás módja Szekvencia-specifikus primer módszer, PCR.
Tanulmányi anyag Teljes vér (EDTA-val)
Házi látogatás lehetséges
A HEPATITIS C egy fertőző betegség, amely krónikusan fertőzött betegeknél a májcirrhosis és a hepatocelluláris karcinóma kialakulásának kockázatával jár. A hepatitis C vírusnak (HCV) több genotípusa van, ezek közül hazánkban az 1-es genotípusú hepatitis C vírus a leggyakoribb.
A krónikus hepatitis C modern antivirális terápiája pegilált interferon (interferon hozzáadott polietilénglikol molekulával és elnyújtott hatással) és ribavirin (PEG-IFN / RBV, PEG IFN / RIB) kombinációja, és lehetővé teszi a siker elérését (tartós virológiai válasz). a betegek 40-60%-ában.
Nyilvánvaló, hogy a kezelés sikerét befolyásoló tényezők, köztük a genetikai tényezők azonosítása nagy jelentőséggel bír, mind annak az orvosnak, akinek objektív kritériumokra van szüksége a kezelés hatékonyságának előrejelzéséhez, mind annak a betegnek, aki a standard terápia megkezdése előtt tájékozódjon a sikerének valószínűségéről.és az alkalmazott vírusellenes szerek mellékhatásairól.
Az egyes citokinek funkcióihoz kapcsolódó genetikai változatok befolyásolják az adott fertőzésre adott immunválasz egyéni jellemzőit. Az IL28B egy interferon-λ-3, és egy II. osztályú citokinreceptor ligandum. Ezek a ligandumok elindítják a JAK / STAT jelátviteli kaszkádot, aktiválva a 2', 5'-oligoadenilát szintetáz szintézisét, amely aktiválja az endonukleázt. Az endonukleáz viszont részt vesz a vírusfehérjék szintézisét blokkoló protein-kináz enzim képződését stimuláló folyamatokban.
Kimutatták, hogy az IL28B génhez kapcsolódó polimorfizmusok összefüggenek a spontán HCV elimináció és az antivirális terápiára adott válasz valószínűségével. A fő szerepet két szubsztitúció játssza: a citozin timin helyettesítése (C> T) az rs12979860 egynukleotidos polimorfizmusban és a timin helyettesítése guaninnal (T> G) az rs8099917 egynukleotidos polimorfizmusban.
Az rs12979860 egynukleotidos polimorfizmus esetében a C/C genotípus kétszer nagyobb valószínűséggel jár pozitív válaszreakcióval interferonnal és ribavirinnel, míg az ebben a helyzetben lévő T/C és T/T genotípusok kisebb valószínűséggel kezelésre adott válasz. A CC genotípus túlnyomórészt olyan embereknél fordul elő, akiknél a fertőzés spontán megszűnt. A C / C allélok hordozóinak immunrendszere jobban képes önmagában legyőzni a vírust. Érdekes módon a C / C genotípus esetén a vírusterhelés (a vírus mennyisége a vérben) a kezelés előtt magasabb, mint a T / T allélok hordozóiban.
Az rs8099917 egynukleotid polimorfizmus szerint a T / T genotípus a fertőzés spontán megszűnésével jár, függetlenül a kezeléstől, míg az ebben a helyzetben lévő G / T és G / G genotípusok kisebb valószínűséggel járnak együtt a kezelésre és a kezelésre. tartós virológiai válasz. Az rs8099917-ben található G allél kockázati allél, és a pegilált interferon- és ribavirin-terápiára adott alacsony válaszaránnyal jár.
A genetikai polimorfizmus szerepének vizsgálata az emberi genom ezen régióiban azt mutatta, hogy az IL28B polimorfizmus pozitív prediktív értéke magasabb, mint a terápia sikerének előrejelzésére használt egyéb alapvető jellemzők (testtömegindex, életkor, fibrózis stádium és vírusfertőzés). Betöltés). Különböző klinikai profilú (a májfibrózis stádiuma 0-4, a virémia kezdeti szintje alacsony és magas) krónikus hepatitisben szenvedő betegek nagy populációján végzett vizsgálatok során azonban kimutatták, hogy a beteg genotípusának prediktív értéke a Az IL28-ra a stabil virológiai válasz elérése érdekében a klinikai jellemzőktől függően jelentősen módosítható, és az rs12979860 C / C genotípusú betegeknél 74,4%-ról 37,3%-ra csökkenthető. Ezért a genetikai markereket az adott beteg egyéb alapvető jellemzőivel kombinálva kell figyelembe venni. Kimutatták, hogy az IL28B polimorfizmus akkor a legjelentősebb, ha 1 HCV altípussal fertőződik.
A páciens IL28B genotípusának meghatározása segít a krónikus hepatitis C PEG IFN/RIB-vel végzett standard terápia alkalmazásáról szóló döntés meghozatalában, és szükség esetén a terápia egyéni optimalizálása a telaprevir és a boceprevir proteázgátlók bevonásával.
Irodalom
1. Belgyógyászat Tinsley R. Harrison szerint. Gyakorlat 2005.3388 p.2. Ghary M.G. et al. A hepatitis C diagnózisa, kezelése és kezelése: frissítés. Amerikai Májbetegségek Tanulmányozó Szövetsége. Hepatológia. 2009, ápr. 49 (4): 1335-1374
3. Thomas D.L. et al. Az IL28 B genetikai variációja és a hepatitis C vírus spontán kiürülése. Természet. 2009. évf. 461., 7265. sz., 798-801.
4. Thompson A.J. et al. Az interleukin-28 B polimorfizmus javítja a vírus kinetikáját, és az 1-es genotípusú hepatitis C vírus tartós virológiai válaszának kezelés előtti legerősebb előrejelzője. Gasztroenterológia. 2010, júl. 139 (1): 120-129
5. A reagens gyártójának anyagai.
Interleukin-28B (genotipizálás) (HCV-kezelés prognózisa)
Elemzés leírása:
Interleukin-28B (genotipizálás) - teszt az interleukin 28B funkcióihoz kapcsolódó genetikai polimorfizmusok meghatározására PCR-rel (polimeráz láncreakció).
A páciens genotípusának IL28B-vel történő meghatározása megváltoztathatja a kezelésre vonatkozó döntés meghozatalának algoritmusát azáltal, hogy megváltoztatja mind a PEG IFN/RIB terápia szokásos időtartama, mind a CHC hármas terápia időtartama. A terápia optimalizálása lehetővé teszi számos további probléma elkerülését olyan betegek kezelésében, akiknél a terápia felírásakor nagy a valószínűsége a pozitív válaszadásnak (a további mellékhatások és a proteázgátlók - telaprevir és boceprevir - hármas terápia többletköltségének elkerülése).
Javallatok
- Vírusos hepatitis C.
- A vírusos hepatitis C kezelésének prognózisa.
- Elégtelen immunológiai válasz az előírt kezelésre.
Kutatási anyag: egész vér.
Felkészülés a kutatásra: a vérvétel szigorúan éhgyomorra történik (legalább 8 órával az utolsó étkezés után).
Az eredmény értelmezése:
|
Polimorfizmus: |
A polimorfizmus lehetséges megnyilvánulásai |
|
|
Interleukin-28B (RS8099917) |
GG genotípust fedeztek fel |
Gyenge válasz az interferon- és ribavirin-terápiára |
|
TG genotípus kimutatható |
Csökkent válasz az interferon- és ribavirin-terápiára |
|
|
TT genotípust fedeztek fel |
Esetleg a fertőzés spontán megszűnése |
|
|
Interleukin-28B (RS12979860) |
CC genotípus kimutatott |
1. A fertőzés esetleges spontán megszűnése 2. A CHC-s betegek körülbelül 80%-a reagál a kezelésre 3. Jellemző a magas vírusterhelés |
|
CT genotípus kimutatható |
A CHC-ben szenvedő betegek 20-40%-a reagál a kezelésre |
|
|
TT genotípust fedeztek fel |
A CHC-ben szenvedő betegek 20-25%-a reagál a kezelésre |
KÓD: 721
Kémcső színe: F
Költség: 770
Felhívjuk figyelmét, hogy az oldalon feltüntetett árak kis mértékben eltérhetnek a hivatalos árlistától.
Vlagyivosztoknak és Artemnek most lehetősége van otthoni vizsgálatok elvégzésére (vérvétel).
+ A kutatás feltételei
- Biokémiai, hematológiai, általános klinikai vizsgálatok, koagulológiai vizsgálatok, immunkémiai - 1 munkanap**
- ELISA diagnosztika, PCR kenetek - 2 munkanap**
- PCR vér, allergia diagnosztika - akár 3 munkanap**
- Áramlási citometria - akár 2 munkanap**
- Immunológiai vizsgálatok - akár 5 munkanap**
- Bakteriológiai kutatás - akár 7 munkanap**
- A biológiai kapcsolat genetikai diagnózisa akár 21 munkanap**
- Molekuláris genetikai vérvizsgálatok következtetés nélkül - akár 5 munkanap**
- Molekuláris genetikai vérvizsgálatok azzal a következtetéssel, akár 21 munkanap**
- Erősen specifikus immunológiai vizsgálatok - az immunológiai vizsgálatokhoz szükséges vérvétel minden nap és csak külön kémcsőben történik. A vizsgálatok hetente egyszer, keddenként zajlanak, az eredményt szerdától, 13:00 után adják ki. .
- Genetikai diagnosztika - a tanulmányok teljes listája árakkal együtt letölthető a weboldalról, A vizsgálatokat az INTO-Steel LLC harmadik fél genetikai laboratóriumában végzik.
* * A kutatás feltételeit az anyag laboratóriumi beérkezésének pillanatától számítják, ide nem értve az anyaggyűjtés napját. Más egészségügyi intézményből történő kiszállításkor a szállítási idő miatt megnövekedhet a szállítási idő.
+ Magyarázatok, a kémcső színének megjelölése szerint- K - kémcső piros kupakkal, szérum beszerzésére;
- F - lila kupakkal ellátott kémcső, plazma beszerzése és teljes vér vizsgálata;
- H - egy kémcső fekete kupakkal, az ESR szintjének tanulmányozása;
- G - sárga kupakkal ellátott kémcső, vizeletminták tanulmányozására;
- C - egy kémcső szürke kupakkal, a glükóz szintjének meghatározására;
- H - kémcső zöld kupakkal, elektrolitok és immunológiai vizsgálatokhoz;
- D - kék kupakkal ellátott kémcső, véralvadási vizsgálatokhoz;
- B - Tartály bioanyag számára (steril);
- M - kenet (előkészítés) különböző helyszínű dián;
- SL - kémcső nyálat gyűjteni;
- TRS - szállítás folyékony közeg;
- T / G - steril tampon szonda kémcsőben (géllel);
- P - film enterobiasis miatti kaparék levételére.
| PRIMORSKY KRAI | ||
| Vlagyivosztok |
Vízszintes fülekLeírás Mára világosan bebizonyosodott, hogy az egyén 19. kromoszómáján (19q13) lokalizált citokin gének (IL28A, IL28B és IL29) klaszterében bekövetkezett változások a fő tényező, amely meghatározza a szervezet vírusellenes védekezésének jellemzőit. A legnagyobb jelentőségű az interleukin 28B génnel (IL28B) szomszédos régió polimorfizmusa. Kimutatták, hogy az IL28B polimorfizmusok meghatározzák mind a HCV spontán eliminációjának valószínűségét, mind az interferon- és ribavirin-terápiára adott választ.
Az IL28B gén rs8099917 és rs12979860 lókuszában lévő egynukleotidos polimorfizmusok (SNP-k) összefüggésbe hozhatók a spontán gyógyulás sebességével akut hepatitis C esetén, és a tartós válasz elérésének valószínűségével a krónikus hepatitis C interferonkészítményekkel történő kezelésében. A kedvező genotípus a CC (a CT-vel és TT-vel szemben) az rs12979860 lókusznál és a TT (a TG-vel és GG-vel szemben) az rs8099917 lókusznál. JavallatokAz előjegyzés indikációi:
 Betöltés ... | |
