მიკოზების მიკროსკოპული სურათის შესწავლა. მიკოზების დიაგნოსტიკა – კვლევის მეთოდები, კრიტერიუმები. მიკოზების მიკრობიოლოგიური დიაგნოზი

4402 0

სამწუხაროდ, დღესაც შეიძლება ითქვას, რომ სოკოვანი დაავადებების დიაგნოსტიკა ხშირად უდროოა (თმების შეთხელება, აქერცვლა ხშირად შეცდომით „ქერტლში“, „გაშრობად“). ამასთან, დაზიანებებში ხშირად არ ჩნდება სუბიექტური შეგრძნებები (ქავილი, ტკივილი და სხვ.) და პაციენტები, ამ მიზეზით, დიდი ხნის განმავლობაში არ მიმართავენ სპეციალისტს.

ფრჩხილებში ცვლილებები (მახინჯი, მსხვრევადი, გათხელებული) განიხილება, როგორც „ონიქოდისტროფია“ სისხლჩაქცევების, მოყინვის შემდეგ და ა.შ. ამავდროულად (იზოლირებულმა დაზიანებებმაც კი, ფრჩხილების ჩათვლით) შეიძლება გამოიწვიოს ორგანიზმში ალერგიული ცვლილებების წარმოქმნა, რაც იმოქმედებს სისხლის მიმოქცევის და ლიმფური სისტემების სისხლძარღვები და ა.შ. პაციენტები რჩებიან სოკოვანი ინფექციის წყაროდ განუსაზღვრელი ვადით. ზემოაღნიშნულთან დაკავშირებით ყოველთვის აქტუალურია მიკოზების დროული ლაბორატორიული დიაგნოსტიკა და შესაძლო ადრეული მკურნალობა.

სოკოვანი დაავადებების კლინიკური ვარიანტების მრავალფეროვნებამ, რომლებიც ძირითადად გვხვდება ადამიანებში, აგრეთვე სოკოების სხვადასხვა სახეობის (და გვარის) მიკრობიოლოგიის, მორფოსტრუქტურის, იმუნოლოგიური და სხვა პარამეტრების მახასიათებლებმა განაპირობა მიკოზების დიაგნოსტიკის მეთოდების მნიშვნელოვანი რაოდენობა. ; უნდა აღინიშნოს, რომ არსებული მეთოდები მუდმივად იხვეწება და (შედარებით ბოლო დროს) აქვს თავისებური მიკერძოება იმუნოლოგიური და მოლეკულური გენეტიკური ტესტების მიმართ.

მეორე მხრივ, კულტურული კვლევები ჯერ კიდევ „ოქროს სტანდარტებთან ახლოსაა“ და გამოიყენება სხვა კვლევების საეჭვო შედეგების დასადასტურებლად; არსებობს მოსაზრება, რომ კულტურული და მოლეკულური გენეტიკური მეთოდების კომბინაცია მიკოზების დიაგნოსტიკურად "სადავო" ფორმებისთვის (განსაკუთრებით გავრცელებული, ნებისმიერი წარმოშობის იმუნოსუპრესიის ფონზე, შინაგანი ორგანოების დაზიანებით და ა.შ.) ერთ-ერთი ყველაზე საიმედოა. პროცესის მიკოზური ბუნების რეგისტრაციის გზები.

ამასთან, არ უნდა უგულებელვყოთ "ძველი" მეთოდები, კერძოდ ბაქტერიოსკოპია (განსაკუთრებით პირველადი გამოკვლევის დროს), მით უმეტეს, რომ ყოველდღიურ პრაქტიკაში მიკოზის მიკროსკოპული "დამოწმება" ბევრ დერმატოლოგიურ დაწესებულებაში ყველაზე ფართოდ გამოიყენება სხვა ტესტებთან შედარებით.

კანზე (და ზოგჯერ ვისცერული) ალერგიული გამოვლინებების რაოდენობის მნიშვნელოვანი ზრდის გათვალისწინებით - მიკოზის ხანგრძლივი, ქრონიკული, პერიოდულად გამწვავებული მიმდინარეობისას (კანი, ფრჩხილები და ა.შ.) მიზანშეწონილია ჩატარდეს ალერგოლოგიური. ტესტები სხეულის სენსიბილიზაციის ხარისხის დასადგენად, მათ შორის კომბინირებული სოკოვან-ბაქტერიული ინფექცია; ამ ფაქტმა შეიძლება გავლენა მოახდინოს კონკრეტული პაციენტის მკურნალობის სპეციფიკაზე - მაგალითად, განსაზღვროს ანტიმიკოტიკების და მადესენსიბილიზაციის საშუალებების რაციონალური დანიშნულება და ა.შ.

ტრადიციულად, სოკოვანი დაავადების სავარაუდო დიაგნოზი კეთდება კლინიკური გამოვლინებების საფუძველზე და დასტურდება ლაბორატორიული ტესტებით.

წიგნის ამ ნაწილში ჩვენ მოკლედ გთავაზობთ მიკოზების აღრიცხვის ძირითად მეთოდებს (მიუხედავად მათი მდებარეობისა), „კვლევის ტიპისა და მიღებული მასალის“ გათვალისწინებით. უნდა აღინიშნოს, რომ მიკოზების კლინიკური გამოვლინებების პოლიმორფიზმი (მათ შორის, ალერგიული კომპონენტის მქონე) განაპირობებს შესასწავლი პათოლოგიური მასალის მრავალფეროვნებას. ამავდროულად, სოკოს ელემენტების ძიების წარმატება დამოკიდებულია მის სწორ შერჩევაზე.

ამრიგად, ერითემატოსკვატური, ხშირად ფიგურული გამონაყარის პერიფერიული ზონა უფრო მდიდარია მიცელიუმით, სოკოს სპორებით; დაზიანების თმიან უბნებზე იღებენ დახვეულ, მოთეთრო, გათეთრებულ, მოღრუბლულ თმას ან მის ფრაგმენტებს - "ნაკბენები" (მიზანშეწონილია თმის შეგროვების კონტროლი Wood's ნათურის გამოყენებით). გარკვეული უნარ-ჩვევებია საჭირო მასალის შეგროვებისთვის (ნემსის გამოყენებით) ე.წ. "შავი წერტილები" - მუქი რქოვანი კონუსები ფოლიკულების პირებთან.

ყოველდღიურ პრაქტიკაში კანის ფიფქებს ჩვეულებრივ იკვლევენ (აგროვებენ გაფხეკით, ნაცხის საშუალებით, წებოვანი ლენტის გამოყენებით), გაუფერულებული ფრჩხილების გახეხვა, სუბუნგალური ჰიპერკერატოზის არე, ასევე ლორწოვანი გარსის გამონადენი. ჩვენების მიხედვით, გამოკვლეულია ნახველი, სარეცხი სითხე და შარდი (პაციენტებში არაკათეტერიზებული ბუშტით); შარდსაწვეთებიდან და საწოლებიდან შარდის შეგროვება შეუძლებელია.

დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა აქვს ასევე სისხლს (კულტურული გამოკვლევისთვის, აგრეთვე ELISA, PCR), ცერებროსპინალურ სითხეს და სხეულის სხვა სითხეებს (პლევრალური, სახსარშიდა, ინტრაპერიტონეალური - მათ შორის ასპირაციის ან დრენაჟით შეგროვებული); ზოგიერთ შემთხვევაში (ადგილობრივი დიაგნოზიდან გამომდინარე) მნიშვნელოვანია ნაღველი, განავალი, კანქვეშა აბსცესების წერტილები და გამონადენი ფისტულებიდან (განსაკუთრებით ღრმა მიკოზებით). მარტივი დიაგნოსტიკური ტესტებიც კი მოითხოვს რიგი პირობების მკაცრ დაცვას.

სოკოვანი დაავადებების დიაგნოსტიკისთვის ამჟამად გამოიყენება შემდეგი მეთოდები:

- მიკროსკოპია; საფუძვლად უდევს გამოკვლევის მასალაში პათოგენის გამოვლენას, მ.შ. ადამიანის ქსოვილებში;
- კულტურული გამოკვლევა, რომელსაც მოჰყვება სოკოვანი კულტურის მიკროსკოპული გამოკვლევა;
- ჰისტოლოგიური გამოკვლევა (ღრმა მიკოზებისთვის);
- იმუნური და მოლეკულური მეთოდები.

მიკროსკოპული დიაგნოსტიკა

მიკროსკოპული დიაგნოსტიკა შესაძლებელი გახდა სპეციალური ოპტიკური, მოგვიანებით კი ელექტრონული მიკროსკოპული ტექნოლოგიის გამოჩენით, რამაც შესაძლებელი გახადა სოკოების ულტრასტრუქტურის დეტალური შესწავლა. ამ შემთხვევაში, სოკოვანი ელემენტების აღმოჩენას აქვს დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა - თხელი განშტოებული ძაფები, რომლებიც ქმნიან მიცელიუმს (მიცელიუმს), მომრგვალებულ სხეულებს (სპორები; ისინი სოკოების რეპროდუქციული „ორგანია“).

მიკროსკოპული დიაგნოსტიკა გულისხმობს შეუღებავი (მშობლიური) და შეღებილი პრეპარატების შესწავლას. ეს მეთოდი, როგორც აღინიშნა, ყველაზე გავრცელებულია დერმატოლოგიურ პრაქტიკაში შედარებითი სიმარტივისა და დაბალი ღირებულების გამო, მაგრამ, მეორე მხრივ, საკმარისად მგრძნობიარე არ არის და ზოგიერთ შემთხვევაში მოითხოვს განმეორებით ტესტებს და სხვა მეთოდებით დადასტურებას.

ამრიგად, შეუღებავი პრეპარატების გამოკვლევისას, სოკოვანი ელემენტების გარდა, შესაძლებელია ეპითელური უჯრედების, სისხლის უჯრედების და სხვადასხვა დამაბინძურებლების აღმოჩენა გარე გარემოდან, რაც ართულებს მიკოზის გამომწვევი აგენტის პოვნას და საჭიროებს მასალის დამატებით „მომზადებას“. - ე. წ. მისი „განმანათლებლობა“ (მაცერაცია), კონცენტრაცია, განზავება და ა.შ.

მიუხედავად ამისა, ადგილობრივი პრეპარატების პირდაპირი მიკროსკოპია შესაძლებელს ხდის მიკოზის სწრაფად დიაგნოსტირებას და განსაზღვრას, თუ რომელ მკვებავ გარემოზე (საჭიროების შემთხვევაში) უნდა მოხდეს მასალის ინოკულაცია; არსებობს მოსაზრება, რომ დადებითი შედეგი შეიძლება დარჩეს მიკოზის ერთადერთი ლაბორატორიული დადასტურება უარყოფითი პასუხით. კულტურაში (A.Yu. Sergeev, Yu.V.Sergeev, 2003).

წამლების „გასუფთავების“ სხვადასხვა ვარიანტს შორის ყველაზე გავრცელებულია KOH ან NaOH-ის დამატება ტესტის მასალაში (უფრო ხშირად გამოიყენება სოკოების აღმოსაჩენად კანის ქერცლებში, თმაში, აგრეთვე ღრმა მიკოზების პათოგენების რიგ ნახველში და ნახველში. ბიოფსიის ნიმუშები).

დაქუცმაცებული და მინის სლაიდზე მოთავსებისთვის გამოიყენება კაუსტიკური სოდას (ან კალიუმის) 10-20%-იანი ხსნარი - 1-3 წვეთი, 10-20 წუთის განმავლობაში; პრეპარატი მსუბუქად დაწნეხება საფარის შუშით, უფრო სწრაფი მაცერაციისთვის, მას ცეცხლზე აცხელებენ ორთქლის გაჩენამდე. დათვალიერება ხორციელდება ჯერ დაბალი გადიდების, შემდეგ მაღალი გადიდების ქვეშ (მშრალი სისტემა).

სათანადოდ მომზადებული პრეპარატი, რომელიც არ ექვემდებარება მკაცრ მექანიკურ, თერმულ და ქიმიურ ზემოქმედებას, წარმოადგენს ერთგვაროვანი მასის სურათს, რომელიც შედგება ეპითელური უჯრედებისგან, სოკოვანი ელემენტების უჯრედული დაშლის პროდუქტებისგან - მიცელიუმის ძაფებისგან და სპორებისაგან.

შეცვლილ თმას დებენ შუშის სლაიდზე 10-30% ტუტეზე და ამუშავებენ ერთნაირად, ოღონდ უფრო ხანგრძლივად - 20 წუთიდან 3-4 საათამდე, თუ პიგმენტის შემცველობა უხვადაა, რეკომენდებულია ჯერ გაუფერულება. თმა 5%-იანი წყალბადის ზეჟანგით. ისინი მნიშვნელობას ანიჭებენ სოკოვანი ელემენტების გამოვლენას, ასევე მათ მდებარეობას თმასთან მიმართებაში.

პათოლოგიურად შეცვლილი ფრჩხილებიდან მასალის მომზადება (სასურველია დაზიანებების სიღრმიდან გამოფხეკით მიღებული წვრილი ფხვნილი) ანალოგიურად, მაგრამ 30%-იანი კაუსტიკური სოდის გამოყენებით, ცეცხლზე მსუბუქ ორთქლებზე სავალდებულო ფრთხილად გაცხელება და ზემოქმედება. დაახლოებით 1 საათი (ზოგჯერ რამდენიმე საათამდე). ტუტეებით დამუშავებული პრეპარატები არ უნდა ინახებოდეს 1,5-2 საათზე მეტ ხანს მათი „გაფუჭების“ გამო (რეაგენტის კრისტალიზაცია, დიაგნოსტიკური სანდოობის დაქვეითება განისაზღვრება მიკროსკოპული სურათით).

KOH ან NaOH-ის ნაცვლად შეგიძლიათ გამოიყენოთ: ა) KOH-ის ნარევის ხსნარი 15% DMSO-ით; ბ) ფენოლის (2 წილი) ნარევი ქლორაჰიდრატთან (2 წილი) და რძემჟავას (1 წილი); გ) კალკოფლორ თეთრი, რომელსაც აქვს მიდრეკილება ჰიგინისა და ცელულოზის მიმართ; კვლევისთვის საჭიროა ფლუორესცენტური მიკროსკოპი (დაფიქსირდა ლურჯი ან მწვანე ბზინვარება, რაც დამოკიდებულია გამოყენებული ფილტრზე). ცერებროსპინალური სითხის გამოკვლევისას (თუ ეჭვმიტანილია კრიპტოკოკოზი), ხშირად იყენებდნენ მელნის შეღებვას.

Kulaga V.V., Romanenko I.M., Afonin S.L., Kulaga S.M.

მიკოზების ლაბორატორიული დიაგნოსტიკა

მასალის აღება სოკოზე ლაბორატორიული გამოკვლევისთვის.

1.OST 42-21-2-854: ბრძანება No222/80 2000 წლის 27 ივნისს.
2. აღჭურვილობა: პინცეტი, შუშის სლაიდები, მაკრატელი, ვოლკმანის კოვზი.
4.ჩვენებები: სოკოვანი დაავადებები.
5. გართულებები: არანაირი.

სამკურნალო ოთახის მომზადება:

გადაწყვეტილებების შეცვლა.

მომზადება:
-1% ქლორამინის ხსნარი ნაწიბურებისთვის
-3% ქლორამინის ხსნარი - სახვევისა და პინცეტის დეზინფექციისთვის
- სარეცხი ხსნარი (156 მლ წყალბადის ზეჟანგი + 5 გ სარეცხი ფხვნილი + 839 მლ გამოხდილი წყალი) - პინცეტის დასამუშავებლად
- 6% წყალბადის ზეჟანგის ხსნარი - ხელთათმანების სამკურნალოდ.

მანიპულაციის შესრულების ალგორითმი.

თქვენ უნდა აიღოთ პინცეტი, შუშის სლაიდი, ვოლკმანის კოვზი და მაკრატელი;
- მოიწვიე პაციენტი გასახდელში;
- პაციენტი ზის სკამზე ან დივანზე;
- მ/წმ დგას.

ტექნიკა:

აიღეთ კანის ფანტელები და თმა დაზიანებიდან პინცეტით;
- მიღებული მასალა მოათავსეთ შუშის სლაიდზე და დააფარეთ სხვა შუშის სლაიდზე.
- დაიბანეთ ხელები საპნით;
- წაიღეთ მიღებული მასალა ლაბორატორიაში.

მასალის კოლექცია

ფრჩხილების აღება გამოკვლევისთვის.

აიღეთ მაკრატელი და შუშის სლაიდები;
- გამოიყენეთ მაკრატელი ფრჩხილის თავისუფალი კიდიდან ნაჭრის მოსაჭრელად;
- გადააფარეთ აღებულ მასალას სხვა შუშის სლაიდით;

მაკრატელი და პინცეტი დაასველეთ 3%-იან ფორმალდეჰიდის ხსნარში.





დაზარალებული ფრჩხილებიდან მასალის სწორი შეგროვება წარმატებული მიკრობიოლოგიური კვლევის გასაღებია. მასალის აღებისას ისინი ყოველთვის არ იჭერენ ფრჩხილის უბნებს სიცოცხლისუნარიან სოკოებს. ბუნებრივია, არამყარი სოკო კულტურაში არ გაიზრდება და მათი სახეობების დადგენა შეუძლებელია.

ფრჩხილის ფართობი, რომელიც უნდა იქნას აღებული, განისაზღვრება ონიქომიკოზის ფორმით.

ასე რომ, ონიქომიკოზის ზედაპირული ფორმით, ნაკაწრები უნდა გაკეთდეს ფრჩხილის ფირფიტის ზედაპირიდან.

ყველაზე გავრცელებული დისტალური კანქვეშა ფორმით, ყველაზე სიცოცხლისუნარიანი სოკოები განლაგებულია ფრჩხილის ფირფიტის ქვეშ. შესამოწმებლად გაგზავნილი მასალა უნდა მოიცავდეს არა მხოლოდ ფრჩხილის ფირფიტის კალმებს, არამედ ფრჩხილის ფსკერიდან, ფირფიტის ქვეშიდან.

გარდა ამისა, უცვლელი ფრჩხილის ადგილები ასევე უნდა დაიჭიროს, რადგან ყველაზე აქტიური სოკოები განლაგებულია მათსა და ფრჩხილის დაზარალებულ უბნებს შორის საზღვარზე.

პროქსიმალური კანქვეშა ფორმის დროს ძნელია მასალის აღება. ასეთ შემთხვევებში, ზოგჯერ, განსაკუთრებით თუ აპირებენ ჰისტოლოგიური გამოკვლევის ჩატარებას ან დიფერენციალურ დიაგნოზს, კეთდება ფრჩხილის ბიოფსია და ზოგჯერ გამოიყენება ბურღი.

პარონიქიისთვის ნაკაწრები კეთდება პროქსიმალური ქედიდან და ქვემოდან.

ყველა შემთხვევაში, ბაქტერიული დაბინძურების თავიდან ასაცილებლად, ნიმუშის აღებამდე ლურსმანი უნდა დამუშავდეს ეთილის სპირტით.

მიკროსკოპული გამოკვლევა

სოკოების პათოლოგიური მასალის მიკროსკოპული გამოკვლევა ტარდება ბუნებრივ და შეღებილ პრეპარატებში.

უფერული პრეპარატების მოსამზადებლად მიღებულ მასალას სკალპელის ან გამჭრიახი ნემსის გამოყენებით აწებებენ და ათავსებენ შუშის სლაიდს შუაში. სოკოს ელემენტების უფრო მკაფიოდ იდენტიფიცირებისთვის ხდება მასალის გარკვევა (მაცერაცია). ამ მიზნით ისინი მიმართავენ სხვადასხვა ნივთიერებების, ყველაზე ხშირად კაუსტიკური ტუტეს (KOH, NaOH) დახმარებას, რომელიც ხსნის ეპიდერმისის ქერცლებს, ლორწოს, ჩირქს, ანათებს თმის პიგმენტს და ამით სოკოს გამოკვლევისთვის ხელმისაწვდომს ხდის.

წაისვით 20-30% KOH (NaOH) ხსნარის 1-3 წვეთი რბილ კანზე ან ფრჩხილის ფანტელებზე, რომლებიც მოთავსებულია შუშის სლაიდში. ტუტეს წვეთებში შესწავლილი მასალა საგულდაგულოდ თბება ალკოჰოლური ნათურის ცეცხლზე, სანამ ტუტე კრისტალების დელიკატური თეთრი რგოლი არ გამოჩნდება წვეთის პერიფერიაზე. არ გაცხელოთ ადუღებამდე. გაცხელების შემდეგ წვეთი იფარება საფარი შუშით, თავიდან აიცილებს ჰაერის ბუშტების შემოსვლას.

R.A. Arabian და G. I. Gorshkova (1995) გვირჩევენ კანის ქერცლებისა და თმის პრეპარატების დატოვება გაწმენდილი და დაფარული შუშით 5-10 წუთის განმავლობაში, ხოლო ფრჩხილის ფირფიტების პრეპარატები მიკროსკოპამდე 30-40 წუთით ადრე.

პრეპარატების კლირენსი შეიძლება განხორციელდეს გაცხელების გარეშე, ამისათვის მათ ტოვებენ 20%-იან KOH ხსნარში 30-60 წუთის განმავლობაში ან გამოიყენება პათოლოგიური მასალის გასუფთავების სხვა მეთოდები: ქლორალაქტოფენოლი ამანის მიხედვით; ლაქტოფენოლი; ხსნარი, რომელიც შეიცავს 15% დიმეთილ სულფოქსიდს და KOH წყალში. კარგი შედეგი მიიღწევა ფრჩხილის ფირფიტების გაწმენდის შემდეგ, რომელიც მოთავსებულია KOH 5%-იან ხსნარში 24 საათის განმავლობაში, ამ შემთხვევაში გათბობა არ არის საჭირო.

მიკროსკოპული გამოკვლევა ტარდება ჩვეულებრივ ლაბორატორიულ მიკროსკოპზე ჩაძირვის გარეშე.

მიკროსკოპის კონდენსატორი უნდა დაიწიოს და დიაფრაგმა შევიწროვდეს. თავდაპირველად, პრეპარატი მინაზე გვხვდება დაბალი გადიდებით (40x), შემდგომი კვლევა ტარდება უფრო მაღალი გადიდებით (100x);

პრეპარატი დეტალურად არის შესწავლილი 400x გადიდებით. ანალიზის სანდოობის გასაზრდელად და ცრუ-დადებითი შედეგების თავიდან ასაცილებლად საჭიროა რამდენიმე წამლის შესწავლა.

სოკოების მიკროსკოპული დიაგნოსტიკის შეცდომები შეიძლება მოხდეს როგორც წამლის მომზადების დეფექტების, ასევე ლაბორატორიის ასისტენტის არასაკმარისი გამოცდილების გამო.

წარმოების დეფექტები ძირითადად დაკავშირებულია:
პრეპარატის გადახურებით, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს ტუტე კრისტალების დაკარგვა, თმის განადგურება და პათოლოგიურ მასალაში წვრილმარცვლოვანი დაშლის გამოჩენა.

წაგრძელებული, გლუვი ტუტე კრისტალების ხაზოვანი განლაგება ძალიან მოგვაგონებს სეპტატის მიცელიუმის ძაფებს, თუნდაც სუფთა მინაზე პათოლოგიური მასალის გარეშე.

დიფერენციალური დიაგნოსტიკური მახასიათებლებია კრისტალების განსაკუთრებული ერთგვაროვნება, მათი შუშის გამჭვირვალობა, მრავალმხრივი კიდეები და ერთ ელემენტსა და მეორეს შორის განუყოფელი კავშირის არარსებობა. საეჭვო შემთხვევებში რეკომენდებულია პრეპარატში ოდნავ გახურებული გამოხდილი წყლის წვეთების დამატება, რომელიც სწრაფად ხსნის ტუტე კრისტალებს.

შემდეგი შეიძლება შეცდომით იყოს სოკოს ელემენტები:


- ცხიმის წვეთები,
- ჰაერის ბუშტები,
- ბამბის ტანსაცმლის ძაფები
- და ეგრეთ წოდებული "მოზაიკის სოკო".

კანის ლიპიდები, ცხიმოვანი უჯრედების დაშლა და კერატოჰიალინის მარცვლები, განსაკუთრებით ჩვეულებრივი ფორმის მქონე, შეიძლება წააგავდეს ცალკეულ სოკოს სპორებს. მაგრამ ფორმების მრავალფეროვნება და, რაც მთავარია, ზომები, წარმონაქმნების შიდა სტრუქტურის ნაკლებობა (ვაკუოლები, ჭურვები) საუბრობს ამ ელემენტების სოკოვან ბუნებაზე. ლიპიდები ასევე შეიძლება მოხვდეს პრეპარატში არასაკმარისად გაწმენდილი დაზიანებისგან პათოლოგიური მასალის მიღებისას.

ჰაერის ბუშტები შეიძლება წააგავდეს საფუარის მსგავსი უჯრედების სპორებს, მაგრამ ამ უკანასკნელისგან განსხვავებით, ისინი გარშემორტყმულია მკვრივი მუქი გარსით და ჰაერის ყველაზე პატარა ბუშტებიც კი ყოველთვის უფრო დიდია ვიდრე სოკოების უჯრედები.

ძაფები წინდების, ტანსაცმლის ქსოვილიდან და ა.შ. ჩვეულებრივ დევს პათოლოგიური მასალისგან განცალკევებით, ისინი ყოველთვის უფრო დიდია ვიდრე ჰიფები, უფრო უხეში და არა განსხვავებულები.

„მოზაიკის სოკო“ არის არტეფაქტი, რომელიც ჩნდება კრისტალიზაციის პროცესში (შესაძლოა ქოლესტერინის დაშლის გამო). მას აქვს ბადის ან მარყუჟის გარეგნობა, რომელთა კონტურები შეესაბამება რქოვანი ქერცლების საზღვრებს; მიცელიუმის ძაფებისგან განსხვავებით, ის არასოდეს კვეთს ეპიდერმული უჯრედების კედლებს.

ზოგიერთ ლაბორატორიაში მიკროსკოპული გამოკვლევისთვის პრეპარატები იწმინდება 15-30% KOH ხსნარით, რომელსაც ემატება პარკერის კომერციული მუქი ლურჯი მელანის 5-10% (Parker's Superchrome Blue-Black Ink).

ამ შეღებვით, ჰიფები და სპორები ლურჯი ფერისაა.

მიკროსკოპით ვლინდება ძაფისებრი სოკოვანი ჰიფები ან დაწყებული უჯრედები (სურ. 1).

ამრიგად, მიკროსკოპია დასკვნას იძლევა მხოლოდ ინფექციის სოკოვანი ხასიათის შესახებ, მაგრამ არა სოკოს ტიპზე, რომელიც იწვევს მას.

რა თქმა უნდა, მიკროსკოპული გამოკვლევის ეფექტურობა დამოკიდებულია ლაბორატორიის თანამშრომლის კვალიფიკაციაზე.

ბრინჯი. 1. T. rubrum-ით დაზარალებული ფრჩხილების ნაკაწრების მიკროსკოპია. ჩანს სოკოვანი ჰიფები.



კულტურული კვლევა

მასალა ინოკულირებულია სტანდარტულ Sabouraud-ზე, ხშირად დამატებული ანტიბიოტიკებით. დერმატოფიტური ინფექციების დიაგნოსტიკისას, ჩვეულებრივ, საბუროს საშუალებებში ციკლოჰექსიმიდის დამატებაა, რომელიც თრგუნავს ჰაერიდან გამომავალი დამაბინძურებლების სოკოების ზრდას. ხელმისაწვდომია მზა კომერციული მედია დამატებული ანტიბიოტიკებით და ციკლოჰექსიმიდით. უნდა გვახსოვდეს, რომ ბევრი არადერმატოფიტური ობის და კანდიდას ზოგიერთი სახეობა არ იზრდება ციკლოჰექსიმიდთან ერთად, ამიტომ რეკომენდირებულია Sabouraud-ის გარემოზე ციკლოჰექსიმიდით და მის გარეშე გარემოზე ინოკულაცია. სახეობების იდენტიფიკაცია, როგორც წესი, ხორციელდება მოყვანილი კულტურის მიკროსკოპული გამოკვლევით ან სუბკულტურით სელექციურ გარემოზე (ნახ. 2-15).

ბრინჯი. 2. დაზიანებული ფრჩხილებიდან იზოლირებული T. rubrum სოკოს კულტურა. მიღებულია Sabouraud საშუალო (მარცხნივ) და სიმინდის აგარი (მარჯვნივ).

ბრინჯი. 3. სოკოს კულტურა T. mentagrophytes var. interdigitale იზოლირებულია დაზარალებული ფრჩხილებისგან. მიღებულია Sabouraud-ზე.

ბრინჯი. 4. სოკო Candida albicans-ის კულტურა. მიღებულია Sabouraud-ზე.

ბრინჯი. 5. დაზიანებული ფრჩხილებიდან იზოლირებული სოკო Torulopsis glabrata-ს კულტურა. მიღებულია Sabouraud-ზე.

ბრინჯი. 6. სოკო Ulocladium sp., იზოლირებული დაზიანებული ფრჩხილებიდან.

ბრინჯი. 7. დაზიანებული ფრჩხილებიდან იზოლირებული Acremonium sp.-ის მიკრომორფოლოგია.

ბრინჯი. 8. დაზიანებული ფრჩხილებიდან იზოლირებული Fusarium sp.-ის მიკრომორფოლოგია.

ბრინჯი. 9. დაზიანებული ფრჩხილებიდან გამოყოფილი Scopulariopsis sp.-ის მიკრომორფოლოგია.

ბრინჯი. 10. დაზიანებული ფრჩხილებიდან იზოლირებული Candida albicans-ის მიკრომორფოლოგია.

ბრინჯი. 11. დაზიანებული ფრჩხილებიდან იზოლირებული Altemaria sp.-ის მიკრომორფოლოგია.

ბრინჯი. 12. დაზიანებული ფრჩხილებიდან იზოლირებული Aspergillus sp.-ის მიკრომორფოლოგია.

ბრინჯი. 13. დაზიანებული ფრჩხილებიდან იზოლირებული Ulocladium sp-ის მიკრომორფოლოგია.

ბრინჯი. 14. დაზიანებული ფრჩხილებიდან გამოყოფილი Chaetomium sp.-ის მიკრომორფოლოგია.

სურ. 15. დერმატოფიტების იდენტიფიკაციის კვების ნაერთების პანელი (მარცხნივ - T rubrum კულტურა, მარჯვნივ - T mentagrophytes var. mterdigitale).

მარცხნიდან მარჯვნივ: საბუროს საშუალო, ბაქსტერის საშუალო, კრისტენსენის საშუალო, სიმინდის აგარი

უნდა აღინიშნოს, რომ ზოგიერთი ობის, მათ შორის დერმატოფიტების ჩათვლით, იზრდება ნელა კულტურაში, 2-3 კვირის განმავლობაში.

მასალის შეგროვების ყველა წესის დაცვითაც კი, ლაბორატორიის კარგი აღჭურვილობით და მაღალკვალიფიციური პერსონალით, კულტურული კვლევის დადებითი შედეგების რაოდენობა ძალიან მცირეა.

უცხოური ლიტერატურის მიხედვით, პოზიტიური კვლევების პროცენტული მაჩვენებელი 50-ს არ აღემატება.
დადებითი შედეგების პროცენტი საუკეთესო შიდა ლაბორატორიებში ძლივს აღწევს 30-ს.

ამრიგად, ონიქომიკოზის ყოველი 3 შემთხვევიდან 2-ში მისი ეტიოლოგია ვერ დგინდება.

ლუმინესცენციის შესწავლა

1925 წელს მარგარეტმა და დევეზმა აღმოაჩინეს, რომ გარკვეული დერმატოფიტებით ინფიცირებული თმა აძლევდა დამახასიათებელ ბზინვარებას ულტრაიისფერი სხივებით, რომელიც გადიოდა Deveze-ს ფილტრში. Wuda მინა შედგება ბარიუმის სულფატისგან, შეიცავს დაახლოებით 9% ნიკელის ოქსიდს; ის გადასცემს სხივებს 365 ნმ სიგრძით. ულტრაიისფერი სხივების წყაროდ შეიძლება გამოყენებულ იქნას სხვადასხვა მოწყობილობები. ბზინვარების ბუნება ზუსტად დადგენილი არ არის. თმა აგრძელებს ბზინვარებას სოკოს სიკვდილის შემდეგ და მას შემდეგ, რაც ცდილობთ ფლუორესცენტური მასალის ამოღებას ცხელი წყლით ან ცივი ნატრიუმის ბრომიდის ხსნარით. სიკაშკაშის ინტენსივობა და ბუნება დამოკიდებულია ხსნარის pH-ზე. ითვლება, რომ ფლუორესცენტური ნივთიერება ჩნდება სოკოსა და მზარდი თმის ურთიერთქმედების დროს.

ხის ფილტრით გავლილი ულტრაიისფერი სხივების სიკაშკაშე დამახასიათებელია მხოლოდ თმისთვის, რომელიც დაავადებულია Microsporum გვარის სოკოებით (M. canis, M. audouinii, M. ferrugineum, M. distortium, ზოგჯერ M. gypseum და M. nanum), ასევე. როგორც Trichophyton schonleinii. მიკროსპორუმებით ინფიცირებული თმა, განსაკუთრებით M. canis და M. audouinii, აძლევს ყველაზე ნათელ ბზინვარებას; T. schonleinii-ით დაზიანებულ თმას აქვს მომწვანო ფლუორესცენცია.

ბზინვარება შეინიშნება მხოლოდ სოკოთი მთლიანად დაზიანებულ თმაზე. ის შეიძლება არ იყოს ახალ დაზიანებებში. ამ შემთხვევაში თმის ეპილაცია უნდა მოხდეს მარგინალური, ყველაზე აქტიური ზონიდან და ბზინვარება შეიძლება გამოვლინდეს თმის ფესვის ნაწილში.

ლუმინესცენტური მეთოდის გამოყენება შესაძლებელია როგორც ცალკეულ პაციენტებში, ასევე ეპიდემიოლოგიურ კერებში მკურნალობის ეფექტურობის დიაგნოსტიკისა და მონიტორინგისთვის. კომპაქტური მობილური დანადგარები მოსახერხებელია სკოლებში, საბავშვო ბაღებში და ა.შ. საკონტაქტო ადამიანების შესამოწმებლად.

ლუმინესცენტური გამოკვლევა უნდა ჩატარდეს ჩაბნელებულ ოთახში, დაზიანებები ჯერ უნდა გაიწმინდოს ქერქისგან, მალამოს ნარჩენებისგან და ა.შ. ლუმინესცენტური მეთოდის გამოყენება შესაძლებელია პიტირიაზის ვერსიკოლორის დიაგნოსტიკისთვის, განსაკუთრებით მაშინ, როდესაც დაზიანებები ლოკალიზებულია სკალპზე. ამ დაავადების დაზიანებებს აქვს მოწითალო-მოყვითალო ან ყავისფერი ბზინვარება. თუმცა, ეს ბზინვარება არ არის მკაცრად სპეციფიკური, რადგან ის შეიძლება შეინიშნოს სკალპზე ქერტლის არსებობისას და ჯანმრთელ ადამიანებშიც კი თმის ფოლიკულების პირის ღრუს მიდამოში სახეზე და ზედა ტანზე. ლუმინესცენტური მეთოდით გამოვლენილი დაზარალებული თმა უნდა გაიაროს მიკროსკოპული გამოკვლევა.

იმუნოლოგიური და ბიოლოგიური კვლევა

იმუნოლოგიური კვლევის მეთოდები გამოიყენება ორგანიზმში კონკრეტული ცვლილებების დასადგენად და სოკოვანი დაავადებების სეროლოგიური დიაგნოსტიკისთვის. შრატის ნიმუშებში სპეციფიური ანტისხეულების გამოსავლენად ტარდება შემდეგი სეროლოგიური რეაქციები: აგლუტინაცია, ნალექი, კომპლემენტის ფიქსაცია, იმუნოფლუორესცენცია შესაბამისი ანტიგენებით.

პაციენტის სხეულის ალერგიული მდგომარეობა გამოვლინდება ალერგიული კანის ტესტების გამოყენებით. ალერგენებს სვამენ კანზე პირკეტის მიხედვით ან მორეოს მიხედვით კანში შეზელვით, მანტუს მიხედვით ინტრადერმალურად ან კანში ინექციით. ამ ტესტების დახმარებით გამოვლინდება როგორც დაუყოვნებელი, ასევე დაგვიანებული ტიპის ალერგიული რეაქციები, რაც შესაძლებელს ხდის შეფასდეს ჰუმორული და ფიჭური იმუნიტეტის მდგომარეობა.

ლიმფოციტების სპეციფიკური სენსიბილიზაციის იდენტიფიცირებისთვის გამოიყენება ბაზოფილების დეგრანულაციის რეაქციები, აგლომერაცია და ალტერაცია, ბლასტური ტრანსფორმაციის ტესტი, მაკროფაგების მიგრაციის ჩახშობა და ა.შ.

სეროლოგიური და ალერგიული რეაქციების შედეგების შედარება გამოდის სასარგებლო როგორც დიაგნოსტიკისთვის, ასევე მიკოზის მიმდინარეობის პროგნოზისთვის.

ბიოლოგიური მეთოდი. გამოიყენება ღრმა და განსაკუთრებით საშიში მიკოზების ლაბორატორიული დიაგნოსტიკისთვის. იგი ეფუძნება ცხოველთა დაინფიცირებას პაციენტის პათოლოგიური მასალით ან შესწავლილი სოკოს კულტურით. ტარდება სპეციალურ ლაბორატორიებში.

ჰისტოლოგიური კვლევა

დერმატოფიტებით გამოწვეული კანის მიკოზების ჰისტოლოგია

დაზიანებებში პათომორფოლოგიური ცვლილებები გამოწვეულია სოკოების შეყვანა ეპიდერმისის, თმისა და ფრჩხილების რქოვან შრეში და კანის ანთებითი რეაქციით, რომელიც შეიძლება იყოს მწვავე, ქვემწვავე ან ქრონიკული. დიაგნოზი დადგენილად შეიძლება ჩაითვალოს მხოლოდ იმ შემთხვევაში, თუ სოკოვანი ელემენტები აღმოჩენილია ჰისტოლოგიურ პრეპარატებში. ამისათვის გამოიყენება სხვადასხვა ჰისტოლოგიური ლაქები, ყველაზე ინფორმატიული არის პერიოდული მჟავა რეაქცია (PAS), რომელიც საშუალებას იძლევა იდენტიფიცირდეს დერმატოფიტების უმეტესობის უჯრედის კედლის ცელულოზასა და ქიტინში არსებული პოლისაქარიდები (Shifu stain და მისი ცვლილებები). თქვენ ასევე შეგიძლიათ გამოიყენოთ სულფატური რეაქციები და ჰისტოლოგიური მონაკვეთების ვერცხლით გაჟღენთვა [Khmelnitsky O.K., 1973; Lewer W. F. და Schaumburg-Lewerl., 1983].

სოკოები ეპიდერმისის რქოვანა შრეში, სპეციალური ლაქების გამოყენების შემთხვევაშიც კი, მცირე რაოდენობით ვლინდება მიცელიუმის ძაფებისა და სპორების სახით. იშვიათ შემთხვევებში, როდესაც დაზიანებებში ბევრი სოკოა, ისინი შეიძლება გამოვლინდეს ჰემოტოქსილინ-ეოზინით შეღებილ მონაკვეთებში, რქოვან შრეში დელიკატური ბაზოფილური სტრუქტურების სახით.

ეპიდერმისის ანთებითი ცვლილებები შეიძლება განსხვავდებოდეს: წვეტიანი უჯრედების მცირე შიდა და უჯრედგარე შეშუპებიდან მძიმე სპონგიოზამდე. სპონგიოზი ჩვეულებრივ ვითარდება ფეხისა და ხელების მიკოზების დისჰიდროზული ვარიანტებით; კლინიკურად ამ შემთხვევებში აღინიშნება ვეზიკულები. ეს რეაქცია ჩვეულებრივ გამოწვეულია T. mentagrophytes var. interdigitale. ზოგჯერ გამოხატული ჰიპერკერატოზი აღინიშნება ეპიდერმისში, რაც ყველაზე ხშირად აღინიშნება T. rubrum-ით გამოწვეული მიკოზით.

დერმის ჰისტოლოგიური ცვლილებები არასპეციფიკურია და შეესაბამება მწვავე, ქვემწვავე და ქრონიკულ ანთებას.

გლუვი კანის მიკოზის დროს, რომელიც გამოწვეულია T. rubrum-ით, სოკოები ზოგჯერ ვლინდება თმებში და თმის ფოლიკულებში. ფოლიკულების ირგვლივ ვითარდება ანთებითი რეაქცია, რომელიც დერმისში მოხვედრილი სოკოების გამო შეიძლება გრანულომატოზური ხასიათის გახდეს. ამ შემთხვევებში ინფილტრატის ცენტრალური ნაწილი შეიძლება დაექვემდებაროს სუპურაციას და ნეკროზს, ხოლო პერიფერიული ნაწილი შეიძლება შედგებოდეს ლიმფოციტების, ჰისტოციტების, ეპითელიოიდური და მრავალბირთვიანი გიგანტური უჯრედებისგან, რომელთა შიგნით ზოგჯერ გვხვდება სოკოს სპორები. სპორების ზომა აქ დიამეტრში 6 მიკრონს აღწევს, თმაში ისინი ჩვეულებრივ არ აღემატება 2 მიკრონს.

სკალპის მიკოზების ინფილტრაციულ-ჩირქოვან ფორმაში და წვერის და ულვაშის ზრდის მიდამოში სოკოვანი ელემენტები გვხვდება თმის ფოლიკულში, თმის შიგნით და მის გარშემო. თმაში ისინი აღმოჩენილია ზონის ზემოთ, სადაც იწყება კერატინიზაცია (დაახლოებით 30 მიკრონის დონეზე). დერმისში აღინიშნება სხვადასხვა ინტენსივობის ანთებითი რეაქცია, ყველაზე გამოხატული კერიონ ცელსიით. მწვავე ჩირქოვანი რეაქციის შემთხვევაში ინფილტრატში აღინიშნება ნეიტროფილური ლეიკოციტების დიდი რაოდენობა, სოკოვანი ელემენტები ამ შემთხვევაში შესაძლოა მთლიანად გაქრეს. პროცესის ქრონიკული მიმდინარეობისას ინფილტრატმა შეიძლება შეიძინოს გრანულომატოზური ხასიათი და მასში ჩნდება მრავალბირთვიანი გიგანტური უჯრედები. დიაგნოზის დასადასტურებლად ინფილტრატში სოკოების არარსებობის შემთხვევაში შეიძლება გამოყენებულ იქნას იმუნოფლუორესცენტული შეღებვის მეთოდები. ამ მიზნებისათვის გამოიყენება ფლუორესცეინის ეტიკეტირებული ანტიშრატი T. mentagrophytes-ის მიმართ, რაც შესაძლებელს ხდის სოკოს ანტიგენების აღმოჩენას თმაში და პერიფოლიკულურ ინფილტრატში.

კანის ინფილტრაციულ-ჩირქოვანი რეაქციის წარმოქმნა სკალპის მიკოზის დროს (kerion Celsii) და წვერისა და ულვაშის ზრდის არეში სოკოებით გამოწვეული M. canis, T. tonsurans და T. verrucosum არის იმუნოლოგიური რეაქციის გამოვლინება. . ამას მოწმობს:

1. დაზიანებების სპონტანურად გაქრობის ტენდენცია.

2. T. verrucosum (faviforme) და T.tonsurans-ით გამოწვეული მიკოზის დროს კანის მხრივ ძალიან გამოხატული ანთებითი რეაქციით სოკოვანი ელემენტების არარსებობა.

3. მუდმივი დადებითი რეაქცია ტრიქოფიტინის ინტრადერმული შეყვანის საპასუხოდ მიკოზის ინფილტრაციულ-ჩირქოვან ფორმებში, რომლებიც გამოწვეულია ზოოფილური ტრიქოფიტინებით (მაგალითად, T. tonsurans) და უარყოფითი რეაქცია ზედაპირულ მიკოზებში, რომლებიც გამოწვეულია იგივე T. tonsurans-ით.

ფავუსით, დიდი რაოდენობით მიცელიუმის ძაფები და სოკოს ცალკეული სპორები გვხვდება ეპიდერმისის რქოვან შრეში. სკუტულა წარმოდგენილია ექსუდატით, ეპიდერმისის პარაკერატოზული უჯრედებით, ანთებითი ინფილტრატის უჯრედებით, აგრეთვე მიცელიუმის ძაფებითა და სოკოს სპორებით, რომლებიც ძირითადად განლაგებულია სკუტულის პერიფერიულ ზონაში. დაავადების აქტიურ სტადიაზე გამოხატული ანთებითი ინფილტრატი, რომელიც შეიცავს მრავალბირთვიან გიგანტურ და პლაზმურ უჯრედებს, აღინიშნება დეგენერაციული თმის ფოლიკულების ირგვლივ დერმისში. ძველ დაზიანებებში თმა და ცხიმოვანი ჯირკვლები არ არის და ფიბროზის ნიშნებია.

საფუარის მსგავსი სოკოებით გამოწვეული კანისა და ლორწოვანი გარსების მიკოზების ჰისტოლოგია

კანისა და ლორწოვანი გარსების კანდიდოზის დროს კანდიდას გვარის სოკოები გვხვდება ეპიდერმისის რქოვანა შრეში ან ლორწოვანი გარსის ეპითელიუმის ზედაპირულ ფენებში. სოკოვანი ელემენტები, როგორც წესი, მცირე რაოდენობითაა და კარგად არის შეღებილი PAS რეაქციით ან გრამური შეღებვით; წარმოდგენილია სეპტატის განშტოებული მიცელიუმის ძაფების სახით, 2-4 მკმ დიამეტრით, ან ოვალური სპორები, 3-5 მკმ დიამეტრით. სოკოს მიცელიური ფორმის გამოვლენას აქვს დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა.

კანისა და ლორწოვანი გარსების ქრონიკული გრანულომატოზური კანდიდოზის ჰისტოლოგიური გამოკვლევისას სოკოს ელემენტები ასევე უპირატესად გვხვდება ეპიდერმისის რქოვან შრეში ან ლორწოვანი გარსის ეპითელიუმის ზედა ნაწილებში, მაგრამ ზოგჯერ ზურგის ფენაში, შიგნით. თმა და დერმისში. ასევე აღინიშნება მძიმე ჰიპერკერატოზი და პაპილომატოზი; დერმისში არის სქელი ანთებითი ინფილტრატი, რომელიც შედგება ლიმფოიდური უჯრედებისგან, ნეიტროფილებისგან, პლაზმური უჯრედებისგან და მრავალბირთვიანი გიგანტური უჯრედებისგან. ინფილტრატი შეიძლება გავრცელდეს კანქვეშა ცხიმოვან ქსოვილში.

Pityriasis versicolor-ით, სოკოვანი ელემენტების დიდი რაოდენობა გვხვდება ეპიდერმისის რქოვან ფენაში დელიკატური ბაზოფილური სტრუქტურების სახით, რომლებიც აშკარად ჩანს ჰემოტოქსილინ-ეოზინით პრეპარატების შეღებვის დროსაც კი. სოკო წარმოდგენილია როგორც ძაფებით, ასევე სპორებით.

Pityriasis versicolor-ის ფოლიკულური ფორმის დროს ხდება რქოვანი მასების და ანთებითი ინფილტრატი უჯრედების დაგროვება თმის ფოლიკულების გაფართოებულ ღიობებში. ასევე აღინიშნება ანთებითი ინფილტრატი ფოლიკულების ირგვლივ. PAS რეაქციით, სფერული ან ოვალური სოკოს სპორები, 2-4 მკმ დიამეტრის, გვხვდება თმის ფოლიკულების პირის ღრუში, ზოგჯერ კი პერიფოლიკულურ ინფილტრატში. მიცელიუმი არასოდეს არის გამოვლენილი.

პიტირიაზის ვერსიკოლორის მქონე პაციენტებში კანის პიგმენტაციის დარღვევა გამოწვეულია სოკო Pityrosporum-ის უნარით, გამოიმუშავოს ნივთიერება, რომელიც აფერხებს ეპიდერმისში პიგმენტების წარმოქმნის პროცესს. ჰიპოპიგმენტური უბნებიდან კანის ბიოფსიების ელექტრონულმა მიკროსკოპულმა გამოკვლევამ აჩვენა, რომ მელანოციტებში წარმოიქმნება ძალიან მცირე მელანოსომა, რომლებსაც არ შეუძლიათ შეაღწიონ კერატინოციტებში. კანის ჰიპერპიგმენტურ ადგილებში, პირიქით, მელანოსომები დიდია და შეიცავს დიდი რაოდენობით მელანინს.

სოკოვანი დაავადებების დიაგნოსტიკის საფუძველია კანისა და ფრჩხილების დაზიანებული უბნებიდან მომზადებული პრეპარატების მიკროსკოპული გამოკვლევა. თუმცა, მიკროსკოპული სურათი სხვადასხვა ტიპის მიკოზებისთვის მსგავსია: კანის ქერცლებში და ფრჩხილებში ჩანს სოკოს სპორები და განშტოებული სეპტატური მიცელიუმი 4-7 მკმ დიამეტრით. ამიტომ, სოკოს გვარი და ტიპი უმეტეს შემთხვევაში არ შეიძლება განისაზღვროს მიკროსკოპული სურათით კანის მასშტაბით ან ფრჩხილიდან გამოფხეკით. პათოგენის იდენტიფიცირებისთვის, კულტურები ტარდება მკვებავ გარემოზე, ყველაზე ხშირად საბუროს გარემოზე.

Ათლეტის ფეხი.ზიანდება კანის რქოვანა შრე, ყველაზე ხშირად ტერფები და ქვედა კიდურების ფრჩხილები. თმა არასოდეს ზიანდება. ფრჩხილებზე ჩნდება ყვითელი ლაქები ან ზოლები, შემდეგ ვითარდება ჰიპერკერატოზი (ფრჩხილების გასქელება), მათი დეფორმაცია და განადგურება. ფეხების კანზე ჩნდება ძირებისა და ციფრთაშორის ნაკეცების ლამელარული პილინგი და სიწითლე. ზოგჯერ ჩნდება ბუშტები, საფენის გამონაყარი და ბზარები. დაავადებას თან ახლავს ქავილი, წვა და ტკივილი.

ნაკაწრების, ქერცლების და ბუშტუკების გადასაფარებლების მიკროსკოპული გამოკვლევით ვლინდება მიცელიუმის ძაფები 3-5 მმ დიამეტრით, ზოგიერთი ძაფი იშლება მრგვალ და მართკუთხა სპორებად.

ტრიქოფიტოზი.ეს არის კანისა და მისი დანამატების სოკოვანი დაავადება თმაზე ზემოქმედების განსაკუთრებული ტენდენციით [ლათ. ტრიქოსითმა + ფიტონისოკო]. სკალპზე ჩნდება მრავალი დაზიანებები, რომელთა დიამეტრი დაახლოებით 1,5 სმ. მათზე კანი შეშუპებულია, ჰიპერემიული და დაფარულია ქერცლებით. დაზიანებებში თმა იშლება კანის ზედაპირიდან 2-3 მმ სიმაღლეზე, აქედან მომდინარეობს სახელწოდება "რინგჭია".

მიკროსკოპული გამოკვლევა ავლენს ტრიქოფიტონის სოკოს დამახასიათებელ თვისებას - მათი სპორების ჯაჭვებში განლაგებას. სოკოს თვისებებიდან გამომდინარე, ისინი განასხვავებენ:

ენდოტრიქსი (ზედაპირული ტრიქოფიტოზის გამომწვევი აგენტი). სოკოები იზრდება თმის შიგნით, მკვეთრად ცვლის მის სტრუქტურას. მთელი თმა ივსება (ჩაყრილი) ჯაჭვების პარალელური რიგებით, რომლებიც შედგება დიდი მრგვალი ან კვადრატული სპორებისაგან;

Ectothrix (ღრმა ტრიქოფიტოზის გამომწვევი აგენტი), რომელშიც თმა მოცულია პატარა ან დიდი სპორების გარსში, რომელიც მდებარეობს ღერძის გასწვრივ ჯაჭვებში.

ფავუსი არის სკაბი.ზიანდება თმა და კანი და ნაკლებად ხშირად ფრჩხილები. თმა ხდება თხელი, მოსაწყენი, „ფხვნილი“, როგორც ძველი პარიკები, მაგრამ არ იშლება. კანის დაზიანებებს ახასიათებს მოყვითალო-ნაცრისფერი ქერქების (სკუტების) გამოჩენა, აწეული, თეფშის მსგავსი კიდეებით.

მიკროსკოპული გამოკვლევა ავლენს ჰაერის ბუშტებს დაზიანებულ თმაში.

მიკროსპორია.დაზიანებულია კანი და თმა. დაზიანებულ ადგილებში თმა იშლება კანის ზედაპირიდან 6-8 მმ დონეზე. დარჩენილი ღეროების გარშემო მოთეთრო გარსები ჩანს.



დაზიანებული თმის მიკროსკოპული გამოკვლევა ავლენს სპორებს, რომლებიც მდებარეობს თმის ირგვლივ და შიგნით მოზაიკის სახით (შემთხვევით). ისინი ძალიან მცირეა (1-3 მმ), აქედან გამომდინარეობს დაავადების სახელი. თმის დამახასიათებელი მანათობელი ბზინვარება ხელს უწყობს მიკროსპორიის დიაგნოსტირებას.

მიკროსკოპული გამოკვლევით ვლინდება მრგვალი ყვავილოვანი უჯრედები, ხშირად ყურძნის მტევნის სახით.

ღრმა (MOLD) მიკოზები.უფრო ხშირად ისინი გვხვდება, როგორც პროფესიული დაავადებები ანტიბიოტიკების წარმოების ქარხნებში, სოფლის მეურნეობის მუშაკებს შორის, რომლებიც კონტაქტში არიან დაბინძურებულ მარცვლეულთან, თივასთან, კომპოსტთან და ა.შ. პენიცილიუმის (ფუნჯის სოკო) გამომწვევს აქვს უხეში, განიერი, სეპტატიანი მიცელიუმი, რომელიც მთავრდება ფუნჯით. მუკოროზის გამომწვევს აქვს ფართო არასეპტატური მიცელიუმი, რომელიც მთავრდება სპორების ტომრით. ასპერგილოზის გამომწვევი აგენტი (გაჟონვის ობის) ხშირად გვხვდება დაბნელებულ ხილსა და პურზე. მას აქვს უხეში სეპტატური მიცელიუმი, რომელიც მთავრდება გაფართოებით, საიდანაც ვრცელდება სპორებიანი ძაფები, რაც მოგვაგონებს წყლის ნაკადულებს მორწყვის ჭურჭელს.

აქტინომიკოზი.გამოწვეულია სხვადასხვა სახის გასხივოსნებული სოკოთი. ახასიათებს მკვრივი ინფილტრატების წარმოქმნა კანზე, ლორწოვან გარსებსა და შინაგან ორგანოებზე, მიდრეკილება ჩირქისკენ და ფისტულების გაჩენისკენ. თვალისთვის, ფისტულის გამონადენში ჩანს პატარა ყვითელი მარცვლები დამახასიათებელი გასხივოსნებული კიდით - აქტინომიცეტი დრუზენი. მიკროსკოპისთვის მზადდება ფისტულის გამონადენი და ნახველი.

დაბალი გადიდებისას გასხივოსნებული სოკოს დრუზენი ჰგავს მოყვითალო მომრგვალებულ წარმონაქმნებს ღია ამორფული შუა და მუქი ფერის კიდეებზე. მაღალი გადიდებისას დრუზენის ცენტრში ჩანს მიცელიუმის ძაფები, პერიფერიის გასწვრივ კი კოლბის ფორმის შეშუპებები. გრამით შეღებვისას, მიცელიუმის ძაფები არის G+, ხოლო კონუსები არის G-.

ინვაზიური მიკოზების ზუსტი დიაგნოზიარ არის ადვილი. ეს აიხსნება არა მხოლოდ სოკოების კულტურის მოპოვების სირთულეებით, არამედ კვლევის შედეგების ინტერპრეტაციითაც, რადგან სოკოებს, როგორც საფუარს, ისე ძაფისებრს, შეუძლიათ ლორწოვანი გარსების კოლონიზაცია და შესწავლილი ნიმუშების დაბინძურება. ამასთან დაკავშირებით, ინვაზიური მიკოზების დიაგნოზი ეფუძნება ინტეგრირებულ მიდგომას, რომელიც მოიცავს არა მხოლოდ მიკოლოგიური (კულტურული) და სეროლოგიური (სოკოვანი ანტიგენის განსაზღვრა) კვლევების შედეგებს, არამედ სოკოვანი ინფექციის კლინიკურ სიმპტომებს, დამხმარე კვლევის მეთოდებს. კომპიუტერული ან მაგნიტურ-რეზონანსული ტომოგრაფია, ულტრაბგერა).

ევროპულ-ამერიკული თანამშრომლობის ჯგუფი ინვაზიური მიკოზების შესასწავლადიმუნოდეფიციტის მქონე პაციენტებში შემუშავებულია ინვაზიური მიკოზის დიაგნოსტიკის კრიტერიუმები. ისინი წარმოდგენილი იყო 2001 წელს ანტიმიკრობული საშუალებებისა და ქიმიოთერაპიის საერთაშორისო კონფერენციაზე (ICAAC, ჩიკაგო), ხოლო 2002 წელს ბეჭდვით. დადგენილია დადასტურებული, სავარაუდო და შესაძლო ინვაზიური მიკოზის კრიტერიუმები, რომლებიც რეკომენდებულია კლინიკურ და ეპიდემიოლოგიურ კვლევებში გამოსაყენებლად.

დადასტურებული ინვაზიური მიკოზი გამოწვეული ძაფისებრი სოკოებითსოკოვანი მიცელიუმის გამოვლენა ბიოფსიებში ან ასპირატებში ჰისტოლოგიური ან ციტოლოგიური გამოკვლევის დროს ან კულტურის იზოლირებისას ნორმალურად სტერილური დაზიანებისას ასეპტიურ პირობებში მიღებული ნიმუშებიდან, რომელიც, კლინიკური და რენტგენოლოგიური კვლევების შედეგების მიხედვით, დაკავშირებულია ინფექციასთან, შარდისა და ლორწოვანი გარსების კვლევების გამონაკლისი.

დადასტურებული ინვაზიური მიკოზი გამოწვეული საფუარის სოკოებით: საფუარის უჯრედების გამოვლენა (კანდიდის გვარის სოკოებს შეუძლიათ შექმნან ფსევდომიცელიუმი ან ნამდვილი მიცელიუმი) ბიოფსიებში ან ასპირატებში, გარდა ლორწოვანი გარსების ნიმუშებისა, ან კულტურების იზოლაცია ასეპტიურ პირობებში მიღებული ნიმუშებიდან ნორმალურად სტერილური დაზიანებისგან, რომელიც შესაბამისად ინფექციასთან დაკავშირებული კლინიკური და რენტგენოლოგიური გამოკვლევის შედეგებს, გარდა შარდისა, სინუსებისა და ლორწოვანი გარსების ნიმუშების ან მიკროსკოპით და სპეციფიკური შეღებვით (ინდოეთის მელნის წვეთში, მუციკარმინის ლაქაში) საფუარის უჯრედების ან Cryptococcus spp-ის დადებითი ანტიგენი. ცერებროსპინალურ სითხეში.

ძაფისებრი სოკოებით გამოწვეული ფუნგემია: სოკოების სისხლის კულტურის იზოლაცია, გარდა Aspergillus spp. და Penicillium spp., მათ შორის Penicillium marneffei, იზოლირებულ პათოგენთან თავსებადი ინფექციური პროცესის კლინიკურ სიმპტომებთან ერთად.

საფუარის სოკოებით გამოწვეული ფუნგემია: კანდიდას ან სხვა საფუარის სოკოების სისხლის კულტურის იზოლაცია ამ პათოგენთან დაკავშირებული ინფექციის კლინიკური ნიშნების მქონე პაციენტებისგან.

ინვაზიური მიკოზების დიაგნოსტიკური კვლევების კომპლექსი

ბიომასალა შესასწავლად ჩვენებები, გამოყენებული მედია, მნიშვნელობა
სისხლი ჩვენებები:
მუდმივი ცხელება (4-5 დღე ან მეტი) ფართო სპექტრის ანტიბიოტიკებით თერაპიის დროს;
ციებ-ცხელების მეორე „ტალღა“ ანტიბიოტიკოთერაპიის დროს
სისხლის შეგროვება ვენიდან ფლაკონებში აერობული ბაქტერიებისთვის*
ან სოკოებისთვის შერჩეულ გარემოში, განმეორებით (2-3-ჯერ დღეში 1 საათის ინტერვალით)

დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა: საფუარის სოკოების იზოლაცია, ფრთხილად ინტერპრეტაცია ძაფისებრი სოკოების იზოლირებისას, გარდა Fusarium spp.

ვენური კათეტერი ჩვენებები:
საფუარის სოკოების გამოყოფა სისხლიდან
ცენტრალური ან პერიფერიული ვენური კათეტერი ამოღებულია სისხლიდან საფუარის იზოლაციის ყველა შემთხვევაში
მიკოლოგიური კვლევისთვის გამოიყენება კათეტერის ასეპტიკურად ამოღებული დისტალური მონაკვეთი 5-6 სმ სიგრძის, კვლევა ტარდება ნახევრად რაოდენობრივად (მაკის მეთოდი) ან რაოდენობრივი მეთოდით Sabouraud-ის გარემოზე.

დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა:
საფუარის სოკოების იზოლაცია ნახევრად რაოდენობრივ კვლევაში 15 CFU ან მეტი, რაოდენობრივ კვლევაში - 103 CFU/ml ან მეტი კათეტერთან ასოცირებული ინფექციის ან კათეტერული ინფექციის დიაგნოზის დასადასტურებლად

ზედა სასუნთქი გზების გამონადენი, ნახველი, გამორეცხვა ტრაქეიდან, ბრონქებიდან, ბრონქოალვეოლური ამორეცხვის სითხე ჩვენებები:
ძაფისებრი სოკოებით ან Cryptococcus neoformans-ით გამოწვეული მიკოზების ეჭვი;
გახანგრძლივებული ცხელება ფართო სპექტრის ანტიბიოტიკოთერაპიისა და ნეიტროპენიის დროს
ნიმუშების მიკროსკოპია კალკოფლორის თეთრით (მიცელიუმის ან ფსევდომიცელიუმის გამოვლენა);
საბუროს მედიუმზე თესვა;
ასპერგილუსის ანტიგენის განსაზღვრა ბრონქოალვეოლარული ამორეცხვის სითხეში ინვაზიური ასპერგილოზის დამახასიათებელი დაზიანებების არსებობისას ფილტვებში

დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა: ძაფისებრი სოკოების ან Cryptococcus neoformans იზოლაცია

ცერებროსპინალური სითხე ჩვენებები:
მენინგიტის სიმპტომები;
თავის ტვინში დაზიანებების გამოვლენა კომპიუტერული ტომოგრაფიის ან მაგნიტურ-რეზონანსული ტომოგრაფიის გამოყენებით;
"ტვინის" სიმპტომები ცხელებისა და ნეიტროპენიის გამო
მიკროსკოპია კალკოფლორის თეთრით, მელნის წვეთში; Aspergillus, Cryptococcus ანტიგენის განსაზღვრა;
თესვა საბუროს ოთხშაბათს

დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა:
სოკოების გამოვლენა, როგორც საფუარის, ისე ძაფისებრი; დადებითი ანტიგენი

ბიოფსიები, ასპირატები, პერიტონეალური სითხე, პლევრის სითხე ჩვენებები:
ინვაზიური მიკოზის კლინიკური და/ან რენტგენოლოგიური ნიშნები;
ცხელება ფართო სპექტრის ანტიბიოტიკებით თერაპიის დროს.
მიკროსკოპია კალკოფლორის თეთრით, კულტურა Sabouraud-ის გარემოზე

დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა:
სოკოების გამოვლენა, როგორც საფუარის, ასევე ძაფისებრი

* სისხლიდან სოკოს გამოყოფის სიხშირე იდენტური იყო, როდესაც პირველადი სისხლი შეიყვანეს ორივე ფლაკონში ბაქტერიული კულტურის საშუალებით და შერჩევითი სოკოვანი გარემოთი. კვლევა ჩატარდა VASTES 9240 ბაქტერიოლოგიური ანალიზატორის გამოყენებით.

შესაძლო ინვაზიური მიკოზიდიაგნოზირებულია შემდეგი კრიტერიუმების კომბინაციის საფუძველზე:
მიკრობიოლოგიური კრიტერიუმების კატეგორიიდან ერთი ნიშანი;
ერთი ნიშანი "მნიშვნელოვანი" კატეგორიიდან ან ორი ინფექციური პროცესის "ნაკლებად მნიშვნელოვანი" კლინიკური სიმპტომების ჯგუფიდან.

შესაძლო ინვაზიური მიკოზიდიაგნოზირებულია შემდეგი კრიტერიუმების კომბინაციის საფუძველზე:
ინვაზიური მიკოზის განვითარების გამომწვევი მინიმუმ ერთი რისკის ფაქტორის არსებობა;
ერთი ნიშანი მიკრობიოლოგიური კრიტერიუმების კატეგორიიდან ან ერთი ნიშანი ინფექციური პროცესის „მნიშვნელოვანი“ (ორი „ნაკლებად მნიშვნელოვანი“) კლინიკური სიმპტომების კატეგორიიდან.

კონცეფცია " შესაძლო ინვაზიური მიკოზი» არ არის რეკომენდებული მისი გამოყენება სოკოს საწინააღმდეგო პრეპარატების ეფექტურობის შესწავლის კლინიკურ კვლევებში. თქვენ შეგიძლიათ გამოიყენოთ ეს ტერმინი ემპირიული სოკოს საწინააღმდეგო თერაპიის, ეპიდემიოლოგიური კვლევებისა და ფარმაკოეკონომიკის შესწავლისას.

ზე მიკოლოგიური კვლევასტერილური ასპირატები ან ბიოფსიები ითვალისწინებენ არა მხოლოდ სოკოვანი კულტურების იზოლაციას, არამედ მიკროსკოპით მიცელიუმის ან ფსევდომიცელიუმის აღმოჩენას. ჰისტოლოგიურ პრეპარატებში ასპერგილუსის დიფერენცირება ძნელია Fusarium spp., Sceclosporium apiospermum და ზოგიერთი სხვა ძაფისებრი სოკოსგან. დიფერენციალური დიაგნოზისთვის უნდა ჩატარდეს იმუნოჰისტოქიმიური კვლევა ასპერგილუსის ანტისხეულებით.

საფუარის სოკოების იზოლაციასისხლიდან სულ მცირე ერთ კვლევაში მიეკუთვნება "დადასტურებული" ინვაზიური მიკოზის კატეგორიას და წარმოადგენს აბსოლუტურ მითითებას ნეიტროპენიის მქონე პაციენტებში სისტემური ანტიმიკოტიკების დანიშვნისათვის. სისხლიდან საფუარის სოკოების გამოვლენის სიხშირე დაბალია, გავრცელებული კანდიდოზის დროსაც კი არის 35-50%.
ახორციელებს განმეორებითი სისხლის კულტურებიზრდის პოზიტიური შედეგების მიღების ალბათობას.

სხვა ინტერპრეტაციაშედეგები სისხლში ძაფისებრი სოკოების აღმოჩენის შემთხვევაში. Fusarium spp-სთვის დამახასიათებელია ძაფისებრი სოკოების იზოლაციის მაღალი სიხშირე. და შეადგენს 40-60%-ს. ასპერგილუსი გამოვლენილია უკიდურესად იშვიათად, უმეტეს შემთხვევაში იგი განიხილება როგორც დაბინძურება, გარდა Aspergillus terreus.

შერჩევა Aspergillus terreusჰემობლასტოზის მქონე პაციენტების სისხლიდან შეიძლება მიუთითებდეს ჭეშმარიტ ასპერგილემიაზე და ინფექციის კლინიკური სიმპტომების არსებობისას ეს არის ანტიმიკოტიკების დანიშვნის საფუძველი.

ინვაზიური მიკოზის კრიტერიუმები

ინდექსი კრიტერიუმები
ინვაზიური მიკოზის (მაკროორგანიზმის) წარმოქმნის გამომწვევი ფაქტორები ნეიტროპენია (< 0,5*109/л в течение 10 дней)
მუდმივი ცხელება 96 საათზე მეტი ხნის განმავლობაში ფართო სპექტრის ანტიბიოტიკოთერაპიის დროს
სხეულის ტემპერატურა 38 °C-ზე ზემოთ ან 36 °C-ზე ქვემოთ და რომელიმე შემდეგი მიდრეკილი ნიშანი: გახანგრძლივებული ნეიტროპენია (10 დღეზე მეტი) წინა 60 დღის განმავლობაში, ინტენსიური იმუნოსუპრესიული თერაპია ბოლო 30 დღის განმავლობაში, დადასტურებული ან სავარაუდო ინვაზიური მიკოზი წინა პერიოდის ნეიტროპენია ან შიდსი
GVHD-ის სიმპტომების არსებობა, ძირითადად მძიმე მიმდინარეობის შემთხვევები (II ხარისხი) ან ქრონიკული დაავადების ვრცელი კურსი
გლუკოკორტიკოიდების ხანგრძლივი (3 კვირაზე მეტი) გამოყენება ბოლო 60 დღის განმავლობაში
მიკრობიოლოგიური ნიშნები ძაფისებრი სოკოების (მათ შორის Aspergillus spp., Fusaruim spp., Sceclosporium spp. და zygomycetes) და Cryptococcus neqformans გამოყოფა ნახველის ან ბრონქოალვეოლური ამორეცხვის სითხიდან
კულტურული ან ციტოლოგიური გამოკვლევის დადებითი შედეგები (პირდაპირი მიკროსკოპია) პარანასალური სინუსების ასპირატების ძაფისებრი სოკოების გამოსავლენად.
ძაფისებრი სოკოების ან Cryptococcus neoformans-ის გამოვლენა ციტოლოგიით/პირდაპირი მიკროსკოპით ნახველის ან ბრონქოალვეოლარული ამორეცხვის სითხიდან
დადებითი ასპერგილუსის ანტიგენი ბრონქოალვეოლური ამორეცხვის სითხეში, ცერებროსპინალურ სითხეში და სისხლის ნიმუშებში (მინიმუმ ორი)
დადებითი კრიპტოკოკური ანტიგენი სისხლის ნიმუშებში
სოკოვანი ელემენტების გამოვლენა ციტოლოგიური გამოკვლევით ან პირდაპირი მიკროსკოპით ნორმალურად სტერილური სითხეების ნიმუშებში (მაგალითად, Cryptococcus spp. ცერებროსპინალურ სითხეში)
კვლევების ორი დადებითი შედეგი შარდში საფუარის კულტურების გამოვლენის შესახებ საშარდე კათეტერის არარსებობისას
კანდიდას კრისტალები შარდში შარდის კათეტერის გარეშე
Candida spp-ის იზოლაცია. სისხლის კულტურებიდან
კლინიკური ნიშნები
ქვედა სასუნთქი გზები

უნდა იყოს დაკავშირებული ლოკუსთან, საიდანაც ხდება ნიმუშების აღება მიკრობიოლოგიური კვლევისთვის
ფილტვის ახალი ინფილტრატების რომელიმე შემდეგი ტიპი CT-ს მიხედვით: ჰალო ნიშანი, ნახევარმთვარის ნიშანი, ღრუ კონსოლიდაციის უბნებით*
ქვედა სასუნთქი გზების ინფექციის სიმპტომები (ხველა, გულმკერდის ტკივილი, ჰემოპტიზი, ქოშინი), პლევრის ხახუნის რუბლსი, ნებისმიერი ახალი ინფილტრატი, რომელიც არ შედის მაღალი მნიშვნელობის ნიშნებში; პლევრალური გამონაჟონი
ზედა სასუნთქი გზები
მაღალი მნიშვნელობის ნიშნები
ნაკლები მნიშვნელობის ნიშნები

ინვაზიური ინფექციის რენტგენოლოგიური ნიშნები ცხვირის სინუსებში (კედლის ეროზია ან ინფექციის გავრცელება მიმდებარე სტრუქტურებში, ქალას ძვლების ფართო განადგურება)
ცხვირის გამონადენი, ცხვირის შეშუპება, ცხვირის წყლული, ეპისტაქსია, პერიორბიტალური შეშუპება, ტკივილი ზედა ყბის არეში, შავი ნეკროზული წყლული ან მძიმე სასის პერფორაცია
ცენტრალური ნერვული სისტემა
მაღალი მნიშვნელობის ნიშნები
ნაკლები მნიშვნელობის ნიშნები

ცენტრალური ნერვული სისტემის საეჭვო ინფექციის რენტგენოლოგიური ნიშნები (მასტოიდიტი ან სხვა პარამენინგეალური ფოკუსი, ექსტრადურული ემპიემა, მრავლობითი დაზიანება თავის ტვინის ან ზურგის ტვინში)
ფოკალური ნევროლოგიური სიმპტომები და ნიშნები, მათ შორის კეროვანი კრუნჩხვები, ჰემიპარეზი; ცნობიერების დარღვევა, მენინგეალური სიმპტომები, ცერებროსპინალური სითხის ბიოქიმიური შემადგენლობისა და მისი უჯრედული შემადგენლობის დარღვევა (სხვა პათოგენების არარსებობის შემთხვევაში, კულტურისა და მიკროსკოპის მიხედვით, სიმსივნური უჯრედების არარსებობის შემთხვევაში)
*მიკროორგანიზმებით გამოწვეული ინფექციის არარსებობის შემთხვევაში, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს მსგავსი რადიოლოგიური სურათი, მათ შორის ღრუს წარმოქმნა (Mycobacterium spp., Legionella spp., Nocardia spp.).

ზე გამოვლენა სისხლშიან საფუარის სოკოების სხვა სტერილური ბიოსუბსტრატები, აუცილებელია სახეობების იდენტიფიკაცია და სოკოს საწინააღმდეგო პრეპარატების მიმართ მგრძნობელობის დადგენა; ძაფისებრი (ობის) სოკოების იზოლირებისას მხოლოდ სახეობის იდენტიფიკაცია, მგრძნობელობა არ არის განსაზღვრული.

კლინიკურში პრაქტიკაძაფისებრი სოკოების მგრძნობელობა არ არის შესწავლილი ანტიმიკოტიკების მიმართ ასეთი სოკოების მგრძნობელობის განსაზღვრის არასრულყოფილი სტანდარტების გამო. უფრო მეტიც, მხოლოდ ერთმა კვლევამ აჩვენა კორელაცია Aspergillus spp-ის მგრძნობელობას შორის. და ჰემატოლოგიური ავთვისებიანი სიმსივნეების მქონე პაციენტებში ინვაზიური ასპერგილოზის მკურნალობის შედეგები. არც ერთმა შემდგომმა კვლევამ არ აღმოაჩინა მსგავსი შედეგები.

ბოლო დროს დაიწყო ცალკეული ცნობები A. fumigatus სოკოების შეძენილი რეზისტენტობის ფორმირების შესახებ იტრაკონაზოლისა და ვორიკონაზოლის მიმართ.

სოკოების იდენტიფიკაცია სახეობების მიხედვითგანსაკუთრებით სტერილური ლოკებიდან მიღებული, აუცილებელია პირველ რიგში ანტიმიკოტიკის არჩევისთვის და ადეკვატური ანტიფუნგალური თერაპიის ჩასატარებლად. ამრიგად, Candida krusei მდგრადია ფლუკონაზოლის მიმართ და ნაკლებად მგრძნობიარეა, ვიდრე სხვა საფუარის სახეობები ამფოტერიცინი B-ს მიმართ; Aspergillus terreus, Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii), Trichosporon beigelii, Scopulariopsis spp. რეზისტენტული ამფოტერიცინ B-ს მიმართ; მუკორალები მდგრადია იტრაკონაზოლის მიმართ, ვორიკონაზოლი, Candida glabrata ავლენს დოზადამოკიდებულ მგრძნობელობას ფლუკონაზოლის მიმართ, ხოლო ამ ტიპის სოკოების იზოლირებისას, თუნდაც მგრძნობიარე შტამების მიმართ, ფლუკონაზოლის დოზა უნდა გაიზარდოს (მოზრდილებში ინიშნება 800 მგ ნაცვლად 400 მგ); Candida lusitaniae მდგრადია ამფოტერიცინ B-ს მიმართ.

სოკოების იდენტიფიკაცია სახეობების მიხედვითასევე მნიშვნელოვანია საავადმყოფოში ეპიდემიოლოგიური ანალიზის ჩასატარებლად - ინფექციის გავრცელების გამომწვევი აგენტების და, თუ შესაძლებელია, ინფექციის წყაროს იდენტიფიცირება. აღწერილია ისეთი იშვიათი სოკოებით გამოწვეული ინფექციის აფეთქებები, როგორიცაა C. lusitaniae, C. krusei, C. lipolytica.

დაფუძნებული სოკოს სახეობების იდენტიფიკაციაშეიძლება ვივარაუდოთ ლორწოვანი გარსების ინვაზიური მიკოზი ან სოკოვანი კოლონიზაცია. მაგალითად, Aspergillus niger მნიშვნელოვნად ნაკლებად სავარაუდოა, ვიდრე Aspergillus fumigatus გამოიწვიოს ინვაზიური ასპერგილოზი მწვავე ლეიკემიის მქონე პაციენტებში. Aspergillus niger-ის გამოყოფა ბრონქოალვეოლური ამორეცხვის სითხიდან ყველაზე ხშირად განიხილება, როგორც სასუნთქი გზების კოლონიზაცია, ხოლო ნახველისგან, როგორც ჰაერის დაბინძურება და საჭიროებს დამატებით კვლევას ინვაზიური ასპერგილოზის დიაგნოზის დასადასტურებლად.

დაფუძნებული ძაფისებრი სოკოების სეკრეციანახველის, ბრონქოალვეოლარული სითხისა და პარანასალური სინუსების ასპირაციისგან შეიძლება მხოლოდ ვივარაუდოთ ინვაზიური მიკოზი, მისი „დადასტურებული“ კატეგორიაში ჩართვის გარეშე. თუმცა, ნახველში ასპერგილუსის გამოვლენა, განსაკუთრებით Aspergillus fumigatus ან Aspergillus flavus, ნეიტროპენიულ პაციენტებში, რომლებიც იღებენ ალოგენურ ძვლის ტვინს, ყოველთვის უნდა იყოს გათვალისწინებული. ამისათვის საჭიროა განმეორებითი მიკოლოგიური გამოკვლევა და ფილტვების კომპიუტერული ტომოგრაფია. ამრიგად, ნეიტროპენიით, ინვაზიური ასპერგილოზის გამოვლენის ალბათობა Aspergillus spp-ის დადებითი კულტურის შემთხვევაში. ნახველში არის 80%.

შერჩევა Cryptococcus neoformansიმუნოდეფიციტის მქონე პაციენტებში სასუნთქი გზებიდან (გამორეცხვა, ამორეცხვა) დიაგნოსტიკურად მნიშვნელოვანია. თუ იმუნოკომპრომეტირებული პაციენტების საფუარის სოკოების იდენტიფიცირება სასუნთქი გზებიდან (ტრაქეალური, ბრონქული ამორეცხვა, ბრონქოალვეოლარული ამორეცხვა) არ არის საჭირო კვლევა, მაშინ აუცილებელია ამ ნიმუშებიდან Cryptococcus neoformans-ის იდენტიფიცირების სკრინინგი.

კანდიდოზის გამოვლენა შარდშინეიტროპენიის და ცხელების მქონე პაციენტებში ეს ჩვეულებრივ განიხილება გავრცელებული კანდიდოზის ინფექციის გამოვლინებად.

Დროულად დიაგნოსტიკაინვაზიური წარმატებით იყენებს კომერციულ ტესტს Aspergillus spp-ის სპეციფიკური ანტიგენის ცირკულაციის გამოსავლენად. გალაქტომანი (სოკოების უჯრედის კედლის წყალში ხსნადი პოლისაქარიდის კომპონენტი).

გალაქტომანიშეიძლება განისაზღვროს ორი მეთოდით: ლატექსის აგლუტინაციის მეთოდით (Pastorex Aspergillus, BioRAD) და ფერმენტული იმუნოანალიზის მეთოდით (Platelia Aspergillus, BioRAD).

უპირატესობა ფერმენტული იმუნოანალიზის მეთოდიარის უფრო დაბალი მგრძნობელობის ზღვარი სისხლში გალაქტომანის დონის დასადგენად - 1 ნგ/მლ ან ნაკლები, ხოლო ლატექსის აგლუტინაციის გამოყენებით - 15 ნგ/მლ. დიაგნოსტიკური მნიშვნელობა აქვს სისხლში გალაქტომანის განსაზღვრას (მინიმუმ 2 ნიმუში), ცერებროსპინალურ სითხესა და ბრონქოალვეოლურ ამორეცხვას. ფერმენტული იმუნოანალიზის მეთოდის მგრძნობელობა არის დაახლოებით 90%, სპეციფიკა 90-99%, ალოგენური ძვლის ტვინის მიმღებებში ეს მაჩვენებლები უფრო დაბალია და ტოლია შესაბამისად 60-70% და 80-90% პროფილაქტიკური გამო. სოკოს საწინააღმდეგო პრეპარატების გამოყენება (ანტიმიკოტიკები ამცირებენ გალაქტომანის ზღვრულ დონეს).

შემთხვევათა 40%-ში გამოვლენა გალაქტომანისისხლში უსწრებს ფილტვების კომპიუტერული გამოკვლევით განსაზღვრულ ინვაზიური ასპერგილოზის გამოვლინებებს და 70%-ში უსწრებს ინფექციის კლინიკურ სიმპტომებს.

ანტიგენის გამოვლენის ტესტის დიაგნოსტიკური ღირებულება ასპერგილუსიარის შემთხვევა, თუ კვლევა განმეორებით ჩატარდება. სისხლში ასპერგილუსის ანტიგენის განსაზღვრა უნდა ჩატარდეს ცხელების დროს ნეიტროპენიის მქონე პაციენტებში კვირაში 2-ჯერ ფართო სპექტრის ანტიბიოტიკებით მკურნალობისას; პნევმონიისთვის, რომელიც ვითარდება ან გრძელდება ანტიბაქტერიული თერაპიის დროს; როდესაც დაზიანებები აღმოჩენილია ფილტვის ქსოვილში (კომპიუტერული ტომოგრაფია).

დღემდე მიკოზების ეტიოლოგიურ ლაბორატორიულ დიაგნოზში მთავარია კლასიკური მეთოდები, მათ შორის მასალის მიკროსკოპია, პათოგენის სუფთა კულტურის იზოლაცია, რასაც მოჰყვება მისი იდენტიფიკაცია. დამხმარე მნიშვნელობა აქვს იმუნოლოგიურ დიაგნოსტიკურ მეთოდებს. ისინი გამოიყენება ყველაზე მნიშვნელოვანი პათოგენების იდენტიფიცირებისთვის: პათოგენური დიმორფული სოკოები, ასევე კრიპტოკოკოზის, კანდიდოზისა და ასპერგილოზის პათოგენები. გენის ჩვენების მეთოდებს (პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია) ასევე აქვთ შეზღუდული გამოყენება მათი სპეციფიკის ნაკლებობის გამო, მაგრამ ძირითადად გამოიყენება ღრმა და ოპორტუნისტული მიკოზების დიაგნოსტიკაში.

მიკოზების ლაბორატორიული დიაგნოსტიკის კვლევის მასალა, დაავადების ფორმის მიხედვით, შეიძლება იყოს: კანი და მისი დანამატები (თმა, ფრჩხილები), ჭრილობებიდან და ფისტულებიდან გამონადენი, ნახველი, სისხლი, ცერებროსპინალური სითხე და შარდი, ქსოვილის ბიოფსია. პათოლოგიური მასალის აღების სისწორე დიდწილად განაპირობებს შემდგომი ლაბორატორიული კვლევის ეფექტურობას. კანის დაზიანებებისთვის, მასალა ყველაზე ხშირად გროვდება გახეხვით ან წებოვანი ლენტის გამოყენებით (ძირითადად ზედაპირული ფორმებისთვის) დამუშავებამდე ახალი, მაგრამ სრულად განვითარებული დაზიანებებიდან პერიფერიის გასწვრივ, სადაც მდებარეობს ყველაზე სიცოცხლისუნარიანი პათოგენები.

დერმატოფიტური სოკოების იდენტიფიცირებისას თმა უკიდურესად ინფორმატიული მასალაა, რადგან თმის დაზიანების ბუნება შესაძლებელს ხდის პათოგენის იდენტიფიცირებას. ზოგიერთ შემთხვევაში, ვუდის ნათურის გამოყენება ხელს უწყობს დაზიანების დადგენას. დაზიანებულ თმას თავის ქერცლებთან ერთად ეპილაციური პინცეტით აშორებენ. ქრონიკული შავი ლაქების ტრიქოფიტოზის დროს თმას აშორებენ კანიდან გამჭრიახი ნემსით.

ფრჩხილები შეირჩევა ყველა ფენის გასწვრივ, ჭრის მკვეთრი სკალპელით ან მაკრატლით. უფრო ეფექტურია სტომატოლოგიური ბურღის გამოყენებით შერჩევა. კანდიდოზური დაზიანებების დროს მასალის შეგროვება ხდება ფრჩხილის ნაკეციდან გახეხვით. შერჩეული მასალა მიწოდებულია ლაბორატორიაში მუქი ქაღალდის პარკებში, რათა თავიდან იქნას აცილებული გამოშრობა და უცხო მიკროფლორით დაბინძურება. ჩირქის შემცველი მასალა მიეწოდება სტერილურ ლუქებში ან პეტრის ჭურჭელში. ნახველი გროვდება სტერილურ კონტეინერში. ნახველის გამოკვლევა უნდა ჩატარდეს შეგროვებიდან არაუგვიანეს 2 საათისა. თუ კვლევის პერიოდი გახანგრძლივდა, ნიმუშები უნდა ინახებოდეს მაცივარში + 4 °C ტემპერატურაზე, წინააღმდეგ შემთხვევაში შეიძლება მოხდეს დიაგნოსტიკური შეცდომები საფუარის უჯრედების ფსევდომიცელიური ფორმების გამოჩენის გამო.

სისხლი და ცერებროსპინალური სითხე გროვდება ასეპსისის წესების დაცვით. სისხლის დამუშავება ტარდება Sabouraud-ის თხევად გარემოში. სისხლის ნიმუშების დაბინძურების გამორიცხვის მიზნით, ისინი მეორდება. ცერებროსპინალური სითხე ცენტრიფუგირებულია და ნალექი გამოიყენება მიკროსკოპისა და კულტურისთვის.

შარდი გროვდება დილით სტერილურ ჭურჭელში და აუცილებელია თავიდან იქნას აცილებული მასალის დაბინძურება პერინეალური კანის მიკროფლორით. შარდის კულტურა ტარდება რაოდენობრივი კულტურის მეთოდებით.

მიკოზების დიაგნოსტირებისას გამოიყენება პრეპარატები როგორც ბუნებრივი მასალისგან, ასევე ფერადიდან. შეუღებავი პრეპარატების შესწავლისას მკვრივი მასალა წინასწარ იწმინდება (მაცერაცია) 10-30% KOH ხსნარით (შეიძლება გამოვიყენოთ დიმეთილ სულფოქსიდის ხსნარები), შემდეგ კი მიკროსკოპია „დაქუცმაცებული წვეთი“ მეთოდით. კონტრასტის დასამატებლად პრეპარატები შეღებილია მეთილენის ლურჯის წყალხსნარით.

ფიქსირებული ნაცხის შეღებვა ხდება სხვადასხვა მეთოდით: გრამის შეღებვა, მეთილენის ლურჯი შეღებვა, რომანოვსკი-გიემზას შეღებვა. ეს უკანასკნელი მეთოდი საშუალებას გაძლევთ ნახოთ პატარა საფუარის უჯრედები და ფაგოციტოზის ეტაპები. კრიპტოკოკებისთვის გამოიყენება მელნის შეღებვა და საუთგეიტის მუციკარმინის შეღებვა. მელანინის შემცველი სოკო (მუქი ფერის), მაგ. კლადოფიალოფორა ბანდანა, შეღებილი მასა-ფონტანას მიხედვით (მელანინის შეღებვა, რომელიც უჯრედის კედლის ნაწილია). ფლუორესცენტური შრატები გამოიყენება ღრმა მიკოზების პათოგენების, დერმატოფიტოზის პათოგენების, გვარის სოკოების დიაგნოსტიკაში. კანდიდა.

პათოგენის სუფთა კულტურის გამოყოფა შესაძლებელს ხდის სოკოს ზოგადი და სახეობრივი კუთვნილების დადგენა, მისი თვისებებისა და ანტიმიკრობული პრეპარატების მიმართ მგრძნობელობის შესწავლა. სოკოების იზოლირებისთვის და იდენტიფიცირებისთვის გამოიყენება მყარი და თხევადი საბუროს მკვებავი საშუალებები და ვორტი აგარი. ეს გარემო უზრუნველყოფს ყველაზე პათოგენური და ოპორტუნისტული სოკოების ზრდას. გარდა ამისა, Sabouraud-ის გარემო (სურ. 8.2) ასტიმულირებს სოკოებში პიგმენტის წარმოქმნის პროცესებს, რაც მნიშვნელოვანია იდენტიფიკაციისთვის.

დამაბინძურებელი ბაქტერიების ზრდის ჩასახშობად მედიას ემატება ანტიბიოტიკები: ქლორამფენიკოლი, სტრეპტომიცინი, პენიცილინი, ტეტრაციკლინი. სწრაფი პათოგენური სოკოების იზოლირებისთვის გამოიყენება სისხლით და ტვინის გულის ექსტრაქტით გამდიდრებული საშუალებები. სოკოების გაშენებისა და იდენტიფიკაციისთვის გამოიყენება სპეციალური საშუალებები: ცაპეკის გარემო - კონიდიების წარმოქმნისთვის ობის სოკოების იდენტიფიცირებისას, კარტოფილის (კარტოფილ-სტაფილო) აგარი, ბრინჯის აგარი - ზრდის ტიპების იდენტიფიცირებისთვის და ქლამიდოსპორების მისაღებად გვარის სოკოების იდენტიფიცირებისას. კანდიდა, სტაფილოს (ბოსტნეულის) აგარი - სოკოვანი კულტურის ტიპიური კოლონიების მისაღებად ტრიქოფიტონ შონლეინი,კაშკინის საშუალო - პიგმენტის წარმომქმნელი სოკოების იზოლირებისთვის. დიფერენციალური დიაგნოსტიკური გარემო ასევე გამოიყენება, მაგალითად, C-ის იდენტიფიცირებისთვის. ალბიკანსი -ქრომოგენული მედია ან მედია, რომელიც საშუალებას გაძლევთ განსაზღვროთ სოკოს ფოსფოლიპაზის აქტივობა.

სოკოს ინკუბაციური დრო რამდენიმე დღიდან 1 თვემდე ან მეტია. თუ პათოგენურ დიმორფულ სოკოზე ეჭვობენ, კულტივაცია ტარდება 8 კვირის განმავლობაში უარყოფითი პასუხის გასაცემად.

ინოკულაციები ტარდება საცდელ მილებში, ბოთლებში და პეტრის ჭურჭელში ჩასხმულ მედიაზე. დერმატოფიტური სოკოების მასალის ინოკულაცია ერთდროულად ტარდება რამდენიმე საცდელ მილში საშუალო საშუალებით. მასალები, რომლებიც ეჭვმიტანილია ობის სოკოების (ნახველის) შემცველობაში ინოკულირებულია 3 წერტილში და ინკუბირებულია 28 და 37 °C ტემპერატურაზე. მასალის შეგროვებისას დაბინძურების არარსებობის საკითხის გადასაჭრელად, ტარდება საკონტროლო ჰაერის კულტურები, რათა დადგინდეს ობის სოკოების შემცველობა ლაბორატორიულ შენობებში და პალატებში, სადაც პაციენტები იმყოფებიან.

სოკოს მიკოლოგიურ ლაბორატორიაში გაშენებისას დაცულია ბაქტერიოლოგიური ლაბორატორიების მსგავსი უსაფრთხოების ზომები. ალერგენობის თავიდან აცილების მიზნით, პერსონალი მუშაობს ობის სოკოებთან და მიკოტოქსინებთან ერთად ყუთში მოთავსებულ ოთახებში გაზის ბაფთით ან მაგიდის ყუთებში გამონაბოლქვი ქუდით. პათოგენურობის II ჯგუფს (პათოგენური დიმორფული სოკოები) მიკუთვნებულ კულტურებთან მუშაობა შესაძლებელია მხოლოდ სპეციალიზებულ ლაბორატორიებში.

სოკოს სახეობების იდენტიფიკაცია ხორციელდება კულტურული, მორფოლოგიური და სხვა მახასიათებლების კომპლექსის საფუძველზე. პირველი მოიცავს კოლონიის მორფოლოგიას, მის ფერს და ზომას სპეციალურ მედიაზე გაშენებისას, კიდისა და ცენტრის სტრუქტურას, ზედაპირის ბუნებას, რეპროდუქციული ორგანოების არსებობას და ბუნებას, მეორე - მიკროსკოპული მახასიათებლები. მიცელიუმის სტრუქტურა, რეპროდუქციული ორგანოების აგებულება, ფორმა და ზომა - კონიდიოფორები, კონიდიები, ქლამიდოსპორები, ართროსპორები და სხვ.

სოკოები ქმნიან სხვადასხვა ტიპის კოლონიებს მყარ საკვებ გარემოზე. გ.ვენტერის ინსტიტუტის (აშშ) მეცნიერებმა, სოკოების მიერ პიგმენტური ნივთიერებების გარემოში გამოყოფის უნარის გათვალისწინებით, შექმნეს "ნაძვის ხე" მკვებავ გარემოში (ნახ. 8.3).

ბრინჯი. 8.3. სოკოსგან დამზადებული "ნაძვის ხე" (ზედა: Talaromyces stipitatus; ხე Aspergillus nidulans;დეკორაციები: პენიცილიუმ მარნეფეი; stump: ასპერგილუს ტერეუსი)

საფუარის (საფუარის მსგავსი სოკოების) იდენტიფიკაციისას დიდი მნიშვნელობა აქვს კულტურების დუღილისა და ასიმილაციის უნარებს. ამჟამად, კომერციული ტესტის სისტემები გამოიყენება ჩვეულებრივ სოკოების იდენტიფიცირებისთვის - ადამიანებისა და ცხოველების დაავადებების პათოგენები: BBL Mycotube, API 20C bio Merieux და ა.შ.

Ჩატვირთვა...Ჩატვირთვა...