PARUOŠIMAI
NAUJOS ELISA BANDYMŲ SISTEMOS ĮVERTINIMAS
"Rotaviruso antigenas-ELISA-GERIAUSIAS"
12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.
1 FGUN SSC VB „Vector“ iš Rospotrebnadzor, Koltsovo gyvenvietė, Novosibirsko sritis;
2 Cheminės biologijos ir fundamentaliosios medicinos institutas, Novosibirskas;
3 Valstybinis medicinos biologinių produktų standartizacijos ir kontrolės institutas, pavadintas V. I. L.A. Tarasevichag Maskva
Pateikti UAB „Vector-Best“ (Novosibirskas) sukurto naujo reagentų rinkinio „Rotavirus-antigen-IFA-BEST“ jautrumo, specifiškumo ir atkuriamumo bandymų rezultatai. Gauti duomenys leidžia prognozuoti rezultatų diagnostinį patikimumą, naudojant šią bandymų sistemą A grupės rotaviruso antigenui aptikti klinikinėje medžiagoje.
Raktažodžiai: ELISA testų sistema, efektyvumas, rotavirusas A
A grupės rotavirusai (Reoviridae šeima, Rotaviruso gentis) yra dažniausia mažų vaikų sunkaus gastroenterito priežastis visame pasaulyje. Suaugusieji, kurių imuninė sistema susilpnėjusi, dažnai suserga. Rotavirusinė infekcija (RVI) yra labai užkrečiama liga, pasireiškianti keliais perdavimo keliais. Infekcijos šaltinis yra asmuo, turintis akivaizdžią ar besimptomę ligos formą, taip pat viruso nešiotojas. Tarp vaikų ir suaugusiųjų RVI gali pasireikšti atsitiktiniais atvejais, vietinėmis grupinėmis ligomis, protrūkiais ir yra plačiai paplitusi. Šios infekcijos perdavimo išmatose ir burnoje mechanizmas realizuojamas per maistą (pieną ir pieno produktus, kūdikių maistą), vandenį ir kontaktinius buitinius kelius.
Rotavirusinio gastroenterito diagnozė pagal klinikinį vaizdą, ypač sergant atsitiktiniu sergamumu, kelia tam tikrų sunkumų, nes šiai infekcijai būdingi simptomai mažai skiriasi nuo kitų įvairių etiologijų ūminių žarnyno infekcijų (AEI) simptomų. Diferencinė diagnozė pacientams, sergantiems rotavirusiniu gastroenteritu, atliekama tiek apsinuodijus maistu, tiek naudojant kitus virusinius AEI (norovirusus, astrovirusus, adenovirusus, koronavirusus, Coxsackie enterovirusus ir ECHO) ir bakterinę (salmoneliozė, dizenterija, choleros mikroorganizmai). Deja, ne visos specializuotos Rusijos Federacijos medicinos įstaigos atlieka rotavirusinės infekcijos diagnostiką.
RVI diagnostikos metodai yra skirti išmatose aptikti ištisus virionus, viruso antigeną ar virusui būdingą RNR. Daug žadantis būdas tiesiogiai aptikti virusus tiek klinikinėje medžiagoje, tiek aplinkos objektuose yra atvirkštinės transkripcijos metodas - polimerazės grandininė reakcija (RT -PCR). Pastaraisiais metais buvo sukurtos bandymų sistemos, pagrįstos šiuolaikiniais mokslo pasiekimais, derinant įvairius rotavirusų aptikimo metodus: daugialypis PGR su hibridizacijos-fluorescenciniu amplifikacijos produktų aptikimu „galutiniame taške“; galutiniu tašku pagrįstas imuninis PGR (IPCR) su realaus laiko aptikimu; kiekybinis RT-PCR su realaus laiko aptikimu. Tyrimų laboratorijos naudoja elektroninę mikroskopiją, kad greitai aptiktų rotavirusus. Tačiau visi aukščiau išvardyti metodai yra gana sunkūs ir reikalauja brangių prietaisų bei aukštos kvalifikacijos personalo. Todėl, atliekant laboratorinę diagnostiką ligoninėse ir ambulatoriškai, pirmenybė teikiama metodams, pagrįstiems viruso antigeno aptikimu išmatose, naudojant su fermentais susietą imunosorbentinį tyrimą (ELISA) su mono- ir polikoniniais antikūnais prieš rotavirusus. Šis metodas yra prieinamas praktinėms laboratorijoms, jį lengva nustatyti ir leidžia greitai gauti rezultatą.
Šio darbo tikslas yra ištirti naujo reagentų rinkinio „Rotavirus-antigen-IFA-BEST“, sukurto UAB „Vector-Best“, Novosibirske, diagnostinį efektyvumą.
^ Rugsėjo-gruodžio mėn
medžiagos ir metodai
Tyrimo medžiaga buvo išmatų mėginiai iš mažų vaikų, kuriems diagnozuota AEI ir be klinikinių žarnyno infekcijos apraiškų, kurie buvo hospitalizuoti Vaikų miesto 3 klinikinės ligoninės, Novosibirsko, žarnyno infekcijų ir kvėpavimo takų infekcijų skyriuose. Išmatų mėginiai buvo surinkti į vienkartines sterilias 2-3 ml tūrio plastikines talpyklas, patekus pacientams į ligoninės skyrių, ir 15 dienų laikomi –20 ° C temperatūroje. Ilgesnis medžiagos laikymas buvo atliktas -70 ° C temperatūroje.
Iš pradžių buvo ištirta 104 išmatų mėginių grupė, ar nėra OCI patogenų. Jų:
30 mėginių, kuriuose ELISA ir RT-PCR buvo aptikti tik A grupės rotavirusai; genotipavimas RT-PGR parodė, kad išmatų mėginiuose buvo PG1 (18 mėginių), PG2 (4 mėginių), PG3 (3 mėginių), PG4 (2 mėginių), PG4 (1 mėginio), PG9 (1 mėginio) genotipo rotavirusų, PG3 (1 mėginys);
14 mėginių, kuriuose RT-PCR buvo aptikti tik antrojo genotipo norovirusai, o tai patvirtino nustatant 5 colių nukleotidų seką-kapsido geno sritį, esančią norovirusų genome 5085-5485 regione. h.;
15 mėginių, kuriuose RT-PCR buvo aptikti tik astrovirusai, o tai patvirtino nustatant 5 colių nukleotidų seką- kapsido geno sritį, esančią ant astrovirusų genomo 4526–4955 n regione; 15 mėginių kuriuose PGR buvo nustatyti tik adenovirusai;
30 išmatų mėginių (kontrolinių) iš vaikų, neturinčių klinikinių žarnyno infekcijos apraiškų, hospitalizuotų ligoninės kvėpavimo skyriuje; išankstinė analizė neatskleidė minėtų virusinių patogenų šiuose mėginiuose.
Mėginiai buvo patikrinti, ar nėra puvimo, noro, astro ir adenovirusų, naudojant RT-PCR, naudojant komercinius rinkinius „AmpliSens No go virus 1, 2 genotipai-306/322“, „AmpliSens Astrovirus -165“, užregistruotus Rusijos Federacija, „AmpliSens Adenovirus - 462“, „AmpliSens Rotavirus - 290“ (pagaminta FGUN centrinio epidemiologijos tyrimų instituto, RF). Mėginiai buvo tiriami pagal atitinkamų reagentų rinkinių naudojimo instrukcijas per galiojimo laiką. Mėginiai, teigiami dėl rotaviruso buvimo, buvo genotipuoti RT-PCR. Rotaviruso antigeno buvimo ar nebuvimo nustatymas taip pat atliktas ELISA, naudojant komercinę bandymų sistemą IDEIA ™ Rotavirus, (DakoCytomation, UK) pagal rinkinio instrukcijas.
Bandant Rota-viruso-antigeno-ELISA-BEST reagento rinkinį, visi minėti mėginiai (104) buvo užšifruoti ir tris kartus išbandyti naudojant bandymų rinkinį. Užbaigus bandymus, mėginiai buvo iššifruoti ir rezultatai išanalizuoti.
Rezultatai ir DISKUSIJA
„Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“ reagento rinkinio jautrumas buvo įvertintas pagal teigiamų bandymų mėginių, naudojamų išbandytą bandymo sistemą ir etaloninius vaistus, sutapimų skaičių (%). Tuo pat metu buvo atskleista, kad naudojant „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“ reagento rinkinį, visi 30 mėginių, kuriuose buvo patvirtintas rotaviruso A buvimas, buvo teigiami (1 lentelė). Vadinasi, bandymo rinkinio jautrumas rotavirusui A nustatyti buvo 100%. Reikėtų pažymėti, kad grupėje buvo mėginiai su septyniais skirtingais rotavirusų genotipais, ir visi jie buvo sėkmingai aptikti naudojant „Rotavirus - antigen - I FAB - EST“ reagento rinkinį.
Bandymų sistemos specifiškumas buvo įvertintas pagal neigiamų rezultatų (%) sutapimų skaičių (procentais), naudojant bandomąją bandymų sistemą su pateiktais preliminariais tyrimais. Siekiant įvertinti specifiškumą, į grupę buvo įtraukta 30 mėginių, kuriuose nebuvo aptikta virusinių patogenų, taip pat 14 mėginių, kuriuose buvo nustatyti tik antrojo genotipo norovirusai, naudojant RT-PCR metodą, 15 mėginių, kuriuose buvo nustatytas RT-PCR metodas. buvo aptikta tik astrovirusų; 15 mėginių, kuriuose PGR buvo aptikti tik adenovirusai. Nustatyta, kad 69 iš 74 neigiamų mėginių optinio tankio vertės nustatant rotaviruso antigeno-ELISA-BEST reagento rinkinį rotavirusui A neviršijo foninių verčių, t. gautas matuojant optinį tankį kontroliniuose neigiamuose mėginiuose. Du mėginiai, kuriuose buvo astrovirusų, vienas mėginys - antrojo genotipo norovirusas, vienas mėginys - adenovirusas, ir du mėginiai, kuriuose nebuvo aptikta nė vieno iš minėtų virusinių patogenų, parodė teigiamus optinio tankio indeksus. Reikėtų pažymėti, kad mėginiuose, kuriuose anksčiau nebuvo aptikta nė vieno virusinio patogeno, teigiami signalai buvo užfiksuoti tik vieno iš pakartotinių tyrimų metu (2 lentelė). Taigi Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST reagento rinkinio specifiškumas buvo 93,2%.
Atliekant bandymus buvo įvertintas rezultatų, gautų naudojant reagentų „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“, ant klinikinės medžiagos atkuriamumas-visi mėginiai buvo tiriami tris kartus skirtingais eksperimentais, siekiant nustatyti rezultatų kitimą. . Beveik visais atvejais buvo gauti panašūs rezultatai: bandymų sistema vienodai aptiko visus neigiamus ir teigiamus mėginius. Išimtis buvo du mėginiai, kuriuose anksčiau nebuvo aptikta nė vieno virusinio patogeno: viename iš abiejų mėginių pakartojimų optinio tankio vertės viršijo ODcrit. Reikėtų pažymėti, kad perteklius buvo nereikšmingas (2 lentelė). Taigi rezultatų atkuriamumas buvo 98,8%.
Bandymų rezultatai parodė, kad reagentų „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“ bandymų rinkinys savo diagnostiniu efektyvumu-specifiškumu, jautrumu ir atkuriamumu-yra panašus į Rusijos Federacijoje prieinamą diagnostiką.
naudojant išbandytą reagentų rinkinį „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“ A grupės rotaviruso antigeno aptikimui klinikinėje medžiagoje.
Literatūra
1. Bogomolovas B.P. // "Infekcinės ligos: skubi diagnostika, gydymas, prevencija". - M., Nauja diamed. - 2007 m.
2. Vasiliev B.Ya., Vasiljeva RI, Lobzin Yu.V. // „Ūminės žarnyno ligos. Rotavirusai ir rotavirusinė infekcija “. - S.-Pb., Lan. - 2000 m.
3. Zhirakovskaya EV, Tikunov A.Yu., Bodnev O.A. ir kt. // „BIOPreparations“. - 2008 - Nr. 2. - p. 15–18.
4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.C. ir kiti. // ZhMEI - 2008 - Nr. 4. - su. 12-16.
5. Ignatyuk TE, Golutvin IA, Nasikan NS ir kt. // "Virologijos klausimai". - 2003. - 48 t. - Nr. 6. - p. 1721 m.
6. Novikova H.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chuprova A.B. // "Virologijos klausimai". - 2007 m.- 52 t. -3 - p. 19-23.
7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A. ir kt. //
"Užkrečiamos ligos". - 2004. - t. 2. - Nr. 4. - p. 85-91.
8. Podkolzin AT, Fenske EB, Abramycheva N.Yu. ir kt. // "Terapinis archyvas". - 2007. - t. 79. - Nr. 11. -l. 10-16.
9. Sergevnin VI, Woldschmidt NB, Sarmometov EV ir kt. // Epidemiologija ir infekcinės ligos. -2004.-№ 6.-p. 17-20.
10. Sergevnin V.I., Woldschmidt N.B., Sarmometov E.V. ir kt. // Higiena ir sanitarija. - 2007. - Nr. 1. - p. 56-58.
11. Arcangeletti MC, De Conto E, Pinardi F. ir kt. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76 straipsnio 3 dalis. - P. 165 -170.
12. Gladstone B. P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., ir al. // Epidemiolis. Užkrėsti. - 2008. V. 136 (3). - P. 399-405.
13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. // J. Virol. Metodai. -2006 m. - V. 137 straipsnio 2 dalis. - P. 280 - 286.
14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C. ir kt. // J. Clin. Mikrobiolis. - 2008. V. 46 (2). - P. 462–469.
15 Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F. ir kt. // Appl. Aplinka. Mikrobiolis. - 2008. - V. 74 (7). - P. 2069 - 2078 m.
16. Stockmanas L. J., Staatas M. A., Holloway M., ir al. // J. Clin. Mikrobiolis. - 2008. - V. 46 (5). - P. 1842 - 1843 m.
„Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“ reagento rinkinio jautrumo ir specifiškumo įvertinimas
1 lentelė
Mėginių skaičius Mėginių skaičius Aptikimo rezultatai naudojant etaloninius vaistus IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Aptikimo rezultatai naudojant „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“ rinkinį
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
„Rotavirus-antigen-ELISA-BEST“ reagento rinkinio specifiškumo įvertinimas-
2 lentelė
PGR „AmpliSens“
rotavirusas rotavirusas rotavirusinis rotavirusas
0,443 1,306 0,676 0,418
Rotaviruso antigenas-IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
Svarų sterlingų
2009 m. Gruodžio mėn
AmpliSens
rotavirusas rotavirusas rotavirusas rotavirusas rotavirusas rotavirusas rotavirusas rotavirusas rotavirusinis rotavirusas
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPKrit = 0.150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
Rotavirusas
OPKrit 0.250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
antigenas-ELISA-GERIAUSIAS „Vektorius geriausias“
OPKrit OPKrit 0.263 0.251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0.150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EecT"
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
2009 m. Gruodžio mėn
PGR „AmpliSens“
adenovirusas adenovirusas adenovirusas adenovirusas neigiamas nereikšmingas nereikšmingas
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPKrit = 0.150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Rotavirusas - antigenas - IFA -BEST CJSC "Vector -Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
Vaikų helmintiazės gydymas yra labai svarbus, nes to pasekmės gali būti fizinių ir psichinių, vidaus organų ir sistemų patologinių procesų vystymosi atsilikimas ir net mirtis. Be to, helmintai yra labai užkrečiami, todėl jie taip lengvai plinta ikimokyklinio ir mokyklinio ugdymo įstaigose. Remiantis tuo, akivaizdu, kaip svarbu laiku gydyti helmintozę vaikams.
Pirmieji helminto požymiai vaikams
Kirminai yra sąlygiškai patogeniniai žmogaus organizmo veiksniai, kirminai, kurių galutinis savininkas yra žmogus. Be to, šiuo klausimu savininko amžius nevaidina jokio vaidmens, įvairių tipų helmintozės gali būti stebimos tiek vaikams, tiek suaugusiems pacientams.
Kodėl helmintozė yra pavojinga vaikui?
Kaip minėta anksčiau, vaikų helmintai gali sukelti rimtų ligų ir patologijų, dėl kurių protinis ir fizinis vystymasis sulėtėja. Galimos kiekvieno tipo helmintozės komplikacijos gali būti visiškai skirtingos, pavyzdžiui:
Todėl vaikų helmintozėms reikia dar daugiau dėmesio, savalaikės medicininės pagalbos, ilgalaikio specialisto stebėjimo ir prevencijos.
Pagrindiniai simptomai vaikams
Vaikų helmintozės simptomai gali skirtis priklausomai nuo kirminų tipo:
1. Apvaliosios kirmėlės iš karto pasireiškia kaip alerginė reakcija, karščiavimas ir pykinimas vaikui. Pirmieji pasirodymai dažniausiai būna ryškūs, tačiau greitai išnyksta. Po to gali būti pastebėti šie simptomai: 
- diegliai ir disbiozė bei naujagimiai;
- kūdikiams iki 1 metų - bambos skausmas, išmatų problemos, alergija ir diatezė;
- vyresni vaikai turi miego problemų, neramų elgesį, košmarus;
- 3-7 metų vaikams būdingas pykinimas, karščiavimas, kosulys ir pilvo skausmas, bėrimas.
2. Enterobiozė, kurios sukėlėjas yra pinworms, pasireiškia kaip ištrintas klinikinis vaizdas. Ir tik po mėnesio galima pastebėti šiuos simptomus:
- naujagimiams - išangės uždegimas, patinimas ir paraudimas, atsisakymas valgyti, naktinis verksmas, apetito stoka;
- vaikams iki vienerių metų būdingi tie patys simptomai, taip pat stiprus išangės niežėjimas naktį (nuo 23.00 iki 1.00), mergaitės kenčia nuo lytinių organų uždegimo;
- vyresniems vaikams - pilvo skausmas prie bambos, miego sutrikimas, niežėjimas sėdmenyse.
3. Toksokarozės simptomus sunku atpažinti, išskyrus žemą kūno temperatūrą ir alergines reakcijas (bėrimą, dilgėlinę, niežėjimą ir patinimą). Po infekcijos gali atsirasti kosulys, kuris dar labiau sukelia pneumoniją ar bronchitą, ypač mažiausiems pacientams. 
Trichineliozė rodo lengvus požymius naujagimiams, kitaip pastebimi šie požymiai:
- karščiavimo būklė;
- veido patinimas;
- raumenų skausmas;
- alerginės reakcijos;
- 5 metų ir vyresniems vaikams gali padidėti tonzilės, blužnis, išbėrimas ir gerklės skausmas.
Sunkiausia diagnozuoti helmintozės simptomus 2 metų ir jaunesniems vaikams, nes vaikas negali paaiškinti savo elgesio ir būklės. Todėl dėl bet kokių netipinių vaiko apraiškų ir elgesio geriau parodyti gydytojui.
Ką pirmiausia reikia padaryti?
Kirminai, kurie buvo rasti vaiko išmatose, yra svarbiausias ligos simptomas, po kurio reikia nedelsiant kreiptis pagalbos į gydytoją. Nė vienas helmintų gydymas negali būti sėkmingas be tinkamai atliktos diagnozės. Tyrimo metodai šiuo atveju turėtų būti sudėtingi, įskaitant šias procedūras: 
- paėmimas iš išangės;
- vaiko išmatų tyrimas;
- kraujo tyrimas;
- raumenų biopsija retais atvejais, įtarus trichineliozę;
- serologinis kraujo tyrimas;
- Rentgenas, ultragarsas, tomografija;
- ELISA, skirta nustatyti antikūnus kraujyje.
Gydymo metodai
Vaikų helmintozės gydymas turėtų būti išsamus, gerai apgalvotas, paskirtas tiksliai nurodant dozes ir vaisto vartojimo dažnumą. Taip yra dėl to, kad vaistai nuo toksinių komponentų naudojami antihelmintiniam poveikiui, o tai reiškia, kad neracionalus vartojimas gali sukelti šalutinį poveikį. Be to, namuose yra tinkamas alternatyvus gydymas vaistiniais augalais.
Liaudies gynimo priemonės
Šiuolaikinis vaikų ligų gydymas liaudies gynimo priemonėmis apima 4 veiksmingus būdus: 
Bet kokį namų gydymo metodą reikia iš anksto aptarti su gydytoju. Reikia prisiminti, kad yra kontraindikacijų vaistažolėms ir liaudies gynimo priemonėms individualios netoleravimo forma.
Gydymas vaistais
- Sergant enterobioze ir askarioze, dažniausiai naudojami tokie vaistai kaip pirantelis ir mebendazolas. Vartoti Pirantel yra tinkama 10 mg medžiagos dozei už kiekvieną kirminų kirmino svorio kilogramą ir 5 mg / kg nuo ascaris. Mebendazolas geriamas du kartus per parą po 50 mg 2–3 metų vaikams tris dienas iš eilės, du kartus po 100 mg tris dienas iš eilės vyresniems nei 3 metų vaikams, po 3 savaičių gydymas kartojamas.
- Esant toksokarozei, Mebendazolas skiriamas kitokia doze - 2 metų ir vyresniems vaikams du kartus per parą po 100 mg 14-10 dienų.
- Trichineliozei gydyti skiriama 5 mg mebendazolo kilogramui svorio, po to dozė padalijama į tris dozes per parą. Gydymo kursas yra 1 savaitė, griežtai prižiūrint gydytojui.
Helmintozės profilaktika
- rankų plovimas iš karto po sąlyčio su gyvūnais, po gatvės ir smėlio duobių, einant į tualetą ir prieš valgant;
- valgyti tik švarų maistą;
- tinkamai atliktas mėsos ir žuvies produktų terminis apdorojimas;
- gerti virintą vandenį;
- asmeninės higienos ir higienos taisyklių laikymasis;
- reguliarus naminių gyvūnėlių kirminų šalinimas;
- atliekant profilaktinį kirminų kirpimą vaikams nuo 2 metų ir vyresniems.
Kraujo tyrimas dėl toksokarų
Žmogaus infekcijos su toksokaroze ypatybės
Infekcijos nešiotojai yra šunys, rečiau katės. Toksokarų kiaušiniai paskirstomi su benamių šunų išmatomis. Patekę ant žemės, vandenyje ar pasilikę ant gyvūno kailio, jie įvairiais būdais įvedami į sveiką kūną.
Reakcija į įsibrovimą
Iš medicininės statistikos žinoma, kad suaugusiesiems yra mažesnė tikimybė užsikrėsti toksokaroze, nebent kyla pavojus jų profesijai. Vaikai daug dažniau užsikrečia infekcija.
Dažniausi toksokarozės simptomai:
- Karščiavimas be jokių ligų.
- Temperatūros padidėjimas.
- Didėjantis ir mažėjantis galvos ar pilvo skausmas.
- Odos bėrimas, kurio negalima pašalinti.
- Veido paburkimas.
- Padidėjęs eozinofilų kiekis kraujyje, kurį atskleidė bendra analizė.
Norint tiksliai diagnozuoti, skiriamas imunologinis toksokarų tyrimas. Baltymų junginių, turinčių helminto (antigenų) genetinę informaciją, buvimas kraujyje išprovokuoja imunitetą igg klasės antikūnų gamybai. Tai yra pirmasis toksokarozės infekcijos požymis.
Preliminari diagnostika
Pradinis paciento istorijos etapas yra kolektyvinis. Prieš siunčiant pacientą atlikti kraujo tyrimo dėl toksokarozės, būtina ištirti ligos istoriją ir atlikti preliminarų tyrimą.
Pirminė diagnozė:
- Sunkinančių aplinkybių, galinčių išprovokuoti infekciją, tyrimas - specifinis darbas su gyvūnais ar augintinio buvimas, kasinėjimas potencialiai pavojingose vietose, vaikai žaidžia tose vietose, kur vaikšto šunys.
- Fizinis paciento tyrimas. Odos tyrimas poodinei invazijai toksokarais, vokais ir akių obuoliais, palpacija.
- Išsamus kraujo tyrimas. Užsikrėtus toksokarioze, būdingas reikšmingas kai kurių rodiklių padidėjimas - eozinofilai (70-80%), limfocitai, ESR. Tuo tarpu hemoglobino lygis smarkiai sumažėja.
- Kepenų mėginių paėmimas. Esant stipriai invazijai, veikia kepenų apkrova, kuri pasireiškia stipriu bilirubino šuoliu.
Naudojant įprastinius tyrimus (kraują, koprogramą, tepinėlį) neįmanoma gauti tiesioginio Toxocar invazijos patvirtinimo. Be to, dvylikapirštės žarnos tyrimas nėra informatyvus, nes lervas sunku migruoti.
Gavęs išankstinio tyrimo rezultatus, nurodydamas galimą infekciją toksokaromis, ir diferencijuodamas tariamą diagnozę nuo ligų, turinčių panašių simptomų, pacientui paskirta ELISA dėl toksokarozės.
Susietas imunosorbentinis tyrimas
Pagrindinis šio tyrimo tikslas - patvirtinti toksokarų buvimą žmogaus organizme. Šių helmintų antikūnai randami kraujo plazmoje, todėl jie imami iš venos.
Toksokarų analizei reikia šiek tiek pasiruošti:
- Dieną prieš procedūrą nevalgykite riebaus ar sunkaus maisto.
- Prieš apsilankydami laboratorijoje, negerkite saldžių gėrimų, gazuotų gėrimų ir alkoholinių gėrimų.
- Imkite mėginius tuščiu skrandžiu.
- Nevartokite vaistų ankstesnę dieną ir tą dieną, kurią planuojamas tyrimas.
Reikėtų pažymėti, kad tam tikrai aplinkybei įtakos gali turėti šis labai informatyvus invazijos aptikimo būdas. Klaidingai teigiamas rezultatas gali atsirasti, jei pacientas turi:
- Onkologinės ligos.
- Plaučių tuberkuliozė.
- Sunkios kepenų patologijos.
- Autoimuninis sindromas.
- Antifosfolipidinis sindromas.
- Nėštumas.
Šiuo atveju nebus įmanoma gauti 100% patvirtinančios analizės, nes išvardytomis aplinkybėmis gynybos sistema taip pat gamina imunoglobulinus (antikūnus). Būtina atlikti papildomą diagnostiką ir atskirti toksokarozę nuo išvardytų veiksnių.
IgG klasės imunoglobulinų (titro) koncentracija pasiekia didžiausią įmanomą vertę po 2-3 mėnesių nuo invazijos pradžios. Kuo sunkesnė infekcija, tuo didesnis šis skaičius.
ELISA rezultatai
Norint nustatyti diagnozę, kruopščiai tiriamas fermentinis imuninis tyrimas, gauti rezultatai lyginami su pamatinėmis vertėmis. Norma yra antikūnų titras 1: 100, kai teigiamumo indeksas yra mažesnis nei 0,9.
Pavadinimų skaitinės vertės
Gauti rezultatai gali būti neigiami, teigiami, silpnai teigiami arba abejotini. AT titrų skaičius priklauso nuo invazijos sunkumo ir jos atsiradimo amžiaus.
Analizės dekodavimas:
- AT titras iki 1: 100 - rezultatas neigiamas. Paciento organizme toksokarų lervų nerasta.
- AT titras iki 1: 400 - rezultatas yra silpnai teigiamas. Pacientas turi silpną invaziją arba išsivysto akių toksokarozės forma. Kai kuriais atvejais indikatorius kalba apie neseniai įvykusią infekciją.
- AT titras iki 1: 600 - rezultatas teigiamas. Asmuo kenčia nuo klinikinės helmintozės formos, jei jis aptinkamas, reikia nedelsiant gydyti.
- AT titras iki 1: 800 - rezultatas teigiamas. Tai kalba apie sunkią progresuojančio pobūdžio invaziją ir didelę tikimybę susirgti vidaus organų patologiniu procesu.
Išskyrus retas išimtis, ELISA tyrimai atskleidžia apleistą invazijos formą su kitos kilmės helmintozių mišiniu. Šiuo atveju bendras antikūnų kiekis gali būti didesnis nei 1: 800.
Teigiamumo koeficientas
Atliekant su fermentais susijusį imunosorbentinį toksokarozės tyrimą, kurio titras yra 1: 400 - 1: 600, siekiant atskirti invaziją nuo šalutinių veiksnių, gauti rodikliai lyginami su pamatine verte. Skirtumas tarp šių skaičių paprastai vadinamas indeksu arba teigiamumo koeficientu.
Paprastai atliekant ELISA, vienas rodiklis stovi priešais kitą. Pirmasis yra norma, antrasis gali reikšti:
- Iki 0,9 - rezultatas neigiamas. Toksokarų lervų nerasta.
- 0,9-1,1 - rezultatas abejotinas. Tokiu atveju paskirta pakartotinė diagnostika.
- 1.1-2.2 - rezultatas silpnai teigiamas. Asmuo yra nešiotojas, turintis silpną invaziją.
- 2.2-4.2 - rezultatas teigiamas. Vidutinė toksokarozė vystosi ilgą laiką.
- Virš 4.4 - rezultatas rodo helminto invazijos piką arba neseniai atsiradusią helmintozę.
KP, kurio rezultatas yra 4,4 ir nustatytas eozinofilijos padidėjimas 10%, gali parodyti, kad išsivysto akių toksokarozės forma ir ar yra antikūnų prieš kryžminę invaziją, iš viso toksokarozę.
Imuninis atsakas ir optinis antikūnų tankis (teigiamumo koeficientas) priklauso nuo infekcijos toksokarais laipsnio ir jų vietos. Mažiausias titras ir CP indikatorius leidžia tik manyti, kad nėra helmintų, bet to tvirtinti negalima.
Pateikta informacija negali būti savidiagnostikos ar savigydos šaltinis. ELISA rezultatai kartu su preliminariu tyrimu gali tik pasakyti specialistui apie problemos buvimą. „Invitro“ laboratorijoje kraujo diagnostika atliekama labai tiksliai, prie analizės rezultato pridedami specialistų komentarai apie teigiamumo koeficientą. Tai labai padeda gydytojui nustatyti tikslesnę diagnozę.
Nustatymų skaičius 96 (48 egzemplioriai)
Veikiantis planšetinio kompiuterio formatas: nuluptas 12x8, sulaužęs 1 skylę.
Jautrumas: 1,5 V / ml.
Matavimo diapazonas: 0-400 V / ml.
Bandinio tūris yra ne didesnis kaip 25 μl.
Sąlygų, skirtų fermentinei reakcijai su chromogenu atlikti termostatinėje purtyklėje 37 ° C temperatūroje, standartizavimas.
Į komplektą įeina:
1. Dryžuota plokštė 12 x 8 šulinėlių, paruošta naudoti - 1 vnt.
2. Paruošti naudoti kalibravimo mėginiai (0–400 V / ml), dažomi skirtingu intensyvumu, priklausomai nuo koncentracijos-6 buteliukai.
3. Kontrolinis mėginys - 1 butelis.
4. Vieno komponento konjugatas, paruoštas naudojimui, praskiesti nereikalingas - 1 butelis.
5. Serumo praskiedimo tirpalas - 1 butelis.
6. Chromogeninis substratas, vieno komponento - tetrametilbezidino plius (TMB +) tirpalas, paruoštas naudojimui, praskiesti nereikia - 1 buteliukas.
7. Buferinis fosfato -fiziologinio tirpalo tirpalas su 2–2 buteliukais.
8. Stop reagentas, paruoštas naudoti - 1 butelis.
9. Plėvelė planšetės sandarinimui - 1 vnt.
10. Trafaretas kalibravimo grafiko sudarymui - 1 vnt.
11. Vonia su reagentu - 2 vnt.
12. Pipetės antgaliai 5-200 µl - 16 vnt.
Tabletės pakuotė - tikčio maišelis su užtrauktuku.
FST-T darbinio tirpalo stabilumas mažiausiai 5 dienas +2 ... 8 ° C temperatūroje.
Laikykite rinkinį +2 ... 8 ° C temperatūroje. Galiojimo laikas - 1 metai nuo pagaminimo datos.
Registruotas „Roszdravnadzor“.
Pirmaujantys Rusijos gamintojai Infekcijų diagnostikai skirtų reagentų rinkinių segmente: - CJSC "Vector -Best", Novosibirskas; - LLC NPO diagnostikos sistemos, N. Novgorodas; - UAB „Ecolab“, Electrogorsk, Maskvos sritis. Neinfekcinių ligų ir fiziologinių sąlygų diagnostikai skirtų reagentų rinkinių srityje:-LLC "Alkor-Bio", Sankt Peterburgas; - UAB „Vector-Best“, Novosibirskas; - UAB „Hema-Medica“, Maskva. Agentų laboratorinės diagnostikos reagentų segmente: - LLC "Alkor -Bio", Sankt Peterburgas; - UAB „Vector-Best“, Novosibirskas; - UAB „NPO Immunotex“, Stavropolis. Laboratorinės įrangos gamyba: - LLC "Pikon, Maskva
Galimo importo pakeitimo laipsnio įvertinimas pagal bandymų nomenklatūrą Analitų nomenklatūra, vienetai Patvirtinta naudoti RF Pagaminta RF Galimo importo pakeitimo laipsnis Infekcinių ligų žymenys% Neinfekcinių ligų žymenys ir fiziologinių būklių rodikliai% Alergijos žymenys% Iš viso:%
Importo pakeitimo laipsnio įvertinimas pagal planšetinių kompiuterių produktų rinkos apimtį ELISA Rinkos segmentai Rinkos apimtis Rusijos Federacijoje, mln. Vietinių gamintojų pardavimo apimtis, mln. Importo pakeitimo dalis Infekcinių ligų žymenys% Neužkrečiamųjų ligų žymenys ir fiziologinių būklių rodikliai% Alergijos žymenys% Įranga 50051% Iš viso:%
Importo pakeitimo laipsnio įvertinimas pagal visos imunocheminių metodų produktų rinkos apimtį Rinkos segmentai Rinkos apimtis Rusijos Federacijoje, mln. Vietinių gamintojų pardavimo apimtis, mln. Importo pakeitimo dalis Infekcinių ligų žymenys% Neužkrečiamųjų ligų žymenys ir fiziologinių būklių rodikliai% Alergijos žymenys% Įranga% Iš viso:%
Vidaus gamintojų problemos pramonėje: ELISA metodas sensta. Buitiniai IF reagentai palaipsniui keičiami importuotais chemiliuminescenciniais; Esama viešųjų pirkimų sistema skatina arba pigiausių prekių pirkimą, arba unikalių savybių importuotus produktus; Viena iš pagrindinių vietinių automatinės įrangos gamintojų neišsivystymo ir importuotų produktų gamybos lokalizacijos priežasčių yra muitinės administracinė kliūtis; Pagrindinė pastarųjų laikų problema yra naujų produktų valstybinės registracijos RZN sistemoje žlugimas. Naujų produktų priėmimas į rinką praktiškai sustojo ir tie užsienio gamintojai, kurie anksčiau užsiregistravo su ilgais sąrašais, ir toliau turi pranašumą prieš vietinius; Pagrindinė technologinio atsilikimo priežastis yra nesugebėjimas įgyti teisės gaminti suderinamus šiuolaikinės įrangos gaminius; Žemas vidaus gamintojų konsolidavimo laipsnis ir nuolatiniai karai tarpusavyje neleidžia kurti pažangių produktų ir vienodomis sąlygomis konkuruoti su pirmaujančiais žaidėjais, įskaitant užsienio rinkas.
Pasiūlymai: Įvesti nekonkurencinę viešųjų medicinos prietaisų pirkimo procedūrą pagal FCC, po to paskelbti poziciją. Finansavimo ribų nustatymas pagal vidutinę rinkos kainą suteiks tam tikrų pranašumų vidaus gamintojams, leis apriboti brangių importuotų reagentų vartojimą ir efektyviau kontroliuoti biudžeto lėšų naudojimą; Skatinti vidaus gamintojų plėtrą ir konsolidavimą, siekiant sutelkti išteklius modernių produktų kūrimui ir patekti į tarptautinę rinką. Nekonkurencinga viešųjų pirkimų procedūra greitai paliks rinkoje tik tikrai konkurencingas įmones; Skirti valstybės lėšas, kad remiantis viešojo ir privataus sektoriaus partnerystės principais būtų sukurta daugybė tyrimų, kurių pakanka, kad būtų užtikrinta šalies biologinė sauga; Muitinės lengvatos turėtų būti skirtos komponentams, o ne gataviems produktams; Suderinti registravimo sistemą su Europos sistema, kai medicinos prietaisai, turintys mažą galimo pavojaus lygį, registruojami remiantis atitikties deklaracija.
Įkeliama ...