Reagentų rinkinys „Maistingoji terpė gonokokams izoliuoti, sausa“ (GNK agaras) skirtas mikrobiologiniams tikslams. Jis naudojamas gonokokų išskyrimui tiriant užkrėstą medžiagą, taip pat kaip terpė gonokokams auginti ir laikyti tiriamajame darbe.
Reagentų rinkinį galima įsigyti kaip dviejų liofilizuotų komponentų rinkinį:

• maistinės terpės pagrindai - liofilizatas iš 100 ml tūrio butelyje - 1 vnt.;
• priedas prie maistinės terpės pagrindo - liofilizatas nuo 24 ml tūrio butelyje - 1 vnt.

Junginys: maistinės terpės pagrindas - triušienos ekstraktas, sausas fermentinis peptonas bakteriologiniams tikslams, natrio chloridas, kepinių mielių autolizatas, oroto rūgštis, mikrobiologinis agaras. Priedas prie maistinės terpės pagrindo - normalios skystos arklių išrūgos bakteriologinėms maistinėms terpėms, kepinių mielių autolizatas, aminopeptidas mikrobiologinėms maistinėms terpėms.

Paruošimas:Į butelį su maistinės terpės pagrindu įpilama 100 ml sterilaus išgryninto vandens ir palaikoma (30±5) minutes, po to dedama į verdančio vandens vonią, kol agaras visiškai ištirps, išsilydęs agaras laikomas vandens vonioje ne ilgiau kaip 5 minutes. Į buteliuką įpilkite 24 ml sterilaus išgryninto vandens, pridedant maistinės terpės ir palikite (20±2) minutes, kol visiškai ištirps 20-25°C temperatūroje. Ištirpęs priedas supilamas į ištirpintą bazę, atšaldytą iki (50±2)°C temperatūros, terpė maišoma, 3 ml supilama į sterilius mėgintuvėlius ir pjaunama 0,5 ml sterilaus 0,9 % natrio chlorido tirpalo. įpilama į kiekvieną mėgintuvėlį, kad terpė sudrėkintų. Terpės taip pat galima supilti 10-15 ml į sterilias Petri lėkšteles. Mėgintuvėliai arba lėkštelės su maistine terpe dedami (24±1) valandoms į termostatą (37±1)°C temperatūroje, kad būtų kontroliuojamas sterilumas. Paruošta maistinė terpė laikoma (6±2)°C temperatūroje iki 7 dienų.

Veikimo principas: reagentų rinkinys turėtų užtikrinti kiekvienos bandomosios Neisseria gonorrhoeae "Loshakov" ir Neisseria gonorrhoeae "Denisov" padermės augimą sėjant 0,5 ml mikrobų suspensijos, praskiedimo 10"5 po 24 - 48 valandų inkubavimo temperatūroje ( 37 ± 1) °C permatomų arba permatomų bespalvių kolonijų, kurių dydis svyruoja nuo 0,5 iki 2 mm su lygiais kraštais, pavidalu.

Analizės atlikimas: Inokuliacijos rezultatai registruojami po 24, 48 ir 72 valandų inkubacijos (37±1)°C temperatūroje Sėjant gonorėja sergančių pacientų urogenitalinių organų sekretą, gonokokų augimas ant maistinės terpės turi būti pastebėta po 24-72 val. Jei gonokokas neauga, pasėlius laikykite termostate iki 7 dienų.

Pakuotė: 0,25 kg polietileno stiklainiai, skirti 3,6 litro terpės paruošimui.

Tinkamumo laikas - 1 metai.

Kaina nurodyta su PVM už 1 kg.

Gonokokai yra pupelės formos, išsidėstę diplokokų pavidalu, apsupti mikrokapsulės, neturi žvynelių, nesudaro sporų, panašių į meningokus. Ląstelės sienelė turi išorinę membraną, kurios baltymai pagal funkcinę reikšmę skirstomi į tris grupes. Gonokokams būdingas pilių buvimas, kurie skiriasi vienas nuo kito savo antigeninėmis savybėmis (16 antigeninių variantų). Gonokokai auginami maistinėse terpėse, kuriose yra natūralių baltymų (kraujo serumo, ascito skysčio). Jie geriau auga esant 3-5% CO2. Ant ascitagarų susidaro skaidrios kolonijos lygiais kraštais. Iš angliavandenių fermentuojama tik gliukozė, susidaro katalazė ir citochromo oksidazė – Neisseriai būdingi fermentai.

Antigenai

Gonokokų antigeninė struktūra yra įvairi. Taip yra dėl daugybės antigeninių pilių variantų, kurie susidaro infekcijos vystymosi metu.

Patogeniškumas ir patogenezė

Gonokokai prisitvirtina prie cilindrinio šlaplės epitelio, gimdos kaklelio makšties dalies, tiesiosios žarnos, akies junginės, taip pat spermatozoidų ir pirmuonių (Trichomonas, ameba). Adhezija atsiranda dėl išorinės ląstelės sienelės membranos pilių ir baltymų. Būdingas gonokokų bruožas yra jų gebėjimas prasiskverbti į leukocitus ir juose daugintis. Lipooligosacharidinė ląstelės sienelės dalis turi toksinį poveikį. Kapsuliniai polisacharidai slopina fagocitozę. Prisijungdami prie šlaplės gleivinės cilindrinio epitelio gaurelių, o moterims - endocervikaliniu kanalu, gonokokai prasiskverbia į ląsteles, dalyvaujant ląstelės sienelės išorinės membranos baltymams. Dėl to išsivysto ūminis uretritas, cervicitas ir pažeidžiamas gimdos kaklelis, priedai (vamzdeliai, kiaušidės) moterims, sėklinės pūslelės ir prostatos liaukos vyrams. Esant ekstragenitalinei lokalizacijai, gonokokai gali pažeisti tiesiąją žarną ir tonziles, taip pat naujagimiams sukelti blenorėją (konjunktyvitą). Infekcija įvyksta gonorėja sergančios motinos praeinant per gimdymo kanalą.

Imunitetas

Sergant gonorėja, atsiranda humoralinis imuninis atsakas. Tačiau susidarę antibakteriniai antikūnai neturi apsauginių savybių. Ligos eigoje susidaro IgA, kuris slopina patogeno pilių prisitvirtinimą prie šlaplės gleivinės ląstelių. Tačiau jie nesugeba apsaugoti gleivinės nuo vėlesnės kitų kartų gonokokų infekcijos, kuri yra susijusi su jų antigeninės struktūros pasikeitimu. Tai veda prie pakartotinių infekcijų ir atkryčių, taip pat liga tampa lėtine.

Gonokokinės infekcijos

Gonorėjos ir blenorėjos sukėlėjas N.gonorrhoeae (preliminariai priskiriamas gonokokams) priklauso Neisseriaceae šeimai, Neisseria genčiai. Pacientų išskyrų tepinėliuose gonokokai turi kavos pupelių formą, yra gramneigiami ir išsidėstę poromis tiek leukocitų viduje (nepilna fagocitozė), tiek ląstelių išorėje. Pagal savo morfologines savybes jie labai panašūs į meningokokus. Gonokokams būdingas polimorfizmas - yra mažų ir didelių ląstelių, retai lazdelės formos.Labai išrankūs maistinėms terpėms. Jie geriau auga terpėje, kurioje yra kraujo, serumo ir ascito skysčio. Gonokokuose yra baltymų ir polisacharidų antigenų, pagal kuriuos jie skirstomi į 16 serovarų, tačiau įprastinėse bakteriologinėse laboratorijose jie dar nenustatyti.Gonokokų infekcijų mikrobiologinei diagnostikai naudojami bakterioskopiniai, bakteriologiniai, serologiniai ir alerginiai metodai.

Medžiagos paėmimas tyrimams

Norint oriai ir kokybiškai atlikti bakteriologinę ir bakterioskopinę diagnostiką, svarbu teisingai paimti klinikinę medžiagą. Paprastai tai turi atlikti gydytojas.Vyrams tiriamos šlaplės, parauretrinių latakų, tiesiosios žarnos išskyros ir, jei reikia, medžiaga iš burnos ir ryklės, taip pat prostatos liaukos sekrecija po jos. masažas. Taip pat galite ištirti nuosėdas ir šlapimo „siūlus“, tačiau juose gonokokai aptinkami daug rečiau. Prieš imdamas medžiagą iš šlaplės, pacientas neturėtų šlapintis 4-5 valandas, nevartoti antimikrobinių vaistų ir dezinfekuojamųjų tirpalų. Išorinė šlaplės anga pirmiausia nušluostoma steriliu vatos tamponu, suvilgytu 0,85 % natrio chlorido tirpalu, paskui sausu tamponu. Tepinėliai daromi ne iš mėšlo, kuris laisvai teka, o iš medžiagos, paimtos iškrapštant nuo šlaplės gleivinės bakteriologine kilpa arba specialiu Volkmanno šaukštu. Dėl nedidelių išskyrų būtina atlikti preliminarų šlaplės masažą. Moterims medžiaga imama iš šlaplės, parauretrinių kanalų, gimdos kaklelio, tiesiosios žarnos ir, jei nurodyta, iš burnos ir ryklės. Pirmiausia išvaloma makštis nuo sekreto, masažuojama šlaplė, medžiaga pašalinama gramdant bakteriologine kilpa arba Volkmanno šaukštu. Gimdos kaklelis pirmiausia nuvalomas steriliu vatos tamponu, kad pašalintų gleivių kamštį. Išskyros iš gimdos kaklelio kanalo paimamos bakteriologine kilpa arba pincetu. Medžiaga iš distalinės tiesiosios žarnos paimama Volkmanno šaukštu aklai, t.y. be jokio paciento paruošimo, arba naudojant reoskopą ar tiesiosios žarnos spenelį.Šiuo atveju tiriama medžiaga paimama tiesiai iš matomos pažeidimo vietos. .Sergant burnos ir ryklės gonorėja, gleivėmis Jie paimami iš burnos ryklės steriliais vatos tamponais ant specialių laikiklių iš plieninės vielos.Lenorėjai diagnozuoti junginės sekretas pašalinamas bakteriologine kilpa. Retai gonorėja komplikuojasi gonosepsiu, endokarditu ar artritu. Tada juslidzhenya medžiaga yra kraujas arba sinovinis skystis. Atsižvelgiant į didelį gonokokų jautrumą temperatūros svyravimams, tiriamos medžiagos į laboratoriją pristatomos specialiuose termosuose arba maišeliuose su kaitinimo padėklu.

Bakterioskopinis tyrimas

Bakterioskopinis tyrimas yra labiausiai paplitęs, nors ir mažiau jautrus gonorėjos ir blenorėjos laboratorinės diagnostikos metodas, palyginti su faktinių pasėlių išskyrimu. Tai ypač pasakytina apie lėtinę ligos eigą, kai tiriamojoje medžiagoje yra nedidelis gonokokų kiekis. Tačiau teisingai surinkus medžiagą, pakartotinai tiriant ligonius, taikant provokacinius metodus, kvalifikuotai įvertinus tepinėlius, bakterioskopinis tyrimas gana dažnai leidžia greitai ir teisingai diagnozuoti ligą.Iš gaminami du ploni, vienodi tepinėlio preparatai. tiriama medžiaga. Vienas dažomas metileno mėlynu, antrasis dažomas Gramo metodu. Jei metileno mėlynojo nėra, vieną tepinėlį galima nudažyti 1 % vandeniniu krištolo violetinės spalvos tirpalu arba 0,5 % briliantinės žalios spalvos tirpalu 1 minutę. Išvada apie gonokokų buvimą daroma pagal jų savybes: gramneigiamą spalvą, diplokokų struktūrą, kavos pupelių formą, išsidėstymą leukocitų viduje Veikiant antibiotikams ir kitiems chemoterapiniams vaistams, taip pat sergant lėtine gonorėja, morfologija. ir gonokokų spalva gali pasikeisti. Atskiros ląstelės įgauna skirtingas formas ir dydžius (vadinamosios Asch formos). Be to, tiriamojoje medžiagoje gali būti gramneigiamų kokų, panašių į Veillonella genties gonokokus. Tai tam tikru mastu apriboja pirminio mikroskopijos metodo diagnostinę reikšmę.Geriausi ir patikimiausi rezultatai gaunami taikant imunofluorescencinį metodą. Degiklio liepsnoje fiksuojami ploni paciento išskyrų tepinėliai. Fluoresceino izotiocianatu pažymėtas antigonokokinis serumas 1 valandai tepamas 35 °C temperatūroje drėgnoje kameroje. Po to tepinėliai du kartus nuplaunami buferiniu tirpalu, užtepami gliceroliu buferiniai ir uždengiami dengiamaisiais stikleliais. Kai gonokokai sąveikauja su paženklintais antikūnais, fluorescenciniu mikroskopu aplink bakterijų ląsteles matomas būdingas švytėjimas.

Bakteriologiniai tyrimai

Grynų gonokokų kultūrų išskyrimo indikacijos yra pakartotiniai neigiami bakterioskopijos rezultatai, gonokokams įtartinų, bet morfologiškai nenustatytų mikroorganizmų buvimas, taip pat patikimas ligos išgydymo nustatymas. Labai svarbu pasėlius nedelsiant įdėti į termostatą. Jei neįmanoma atlikti pasėlių medžiagos paėmimo vietoje, galite pakabinti vatos tamponą į mėgintuvėlį su Stewart transportavimo terpe, kuri užtikrina gonokokų gyvybingumo išsaugojimą pristatymo į laboratoriją metu. pagal standartinę schemą vienoje iš specialių maistinių terpių mėgintuvėliuose arba Petri lėkštelėse (CDS, Bailey , kraujo arba serumo agaras, Charkovo įmonės „Biolek“ sausa maistinė terpė bakterijų ir vaistinių preparatų gamybai). Diagnostiniam gonokokų auginimui daugelyje šalių taip pat naudojamas „šokoladinis“ agaras. Geriausios terpės yra triušienos agaro arba šviežių galvijų širdžių pagrindu pagamintos terpės. Į juos pridėjus 20 vnt./ml polimiksino ir 2 μg/ml linkomicino, gonokokų inokuliacijos dažnis žymiai padidėja, nes šie vaistai slopina kitų bakterijų augimą. Prieš sėją visos terpės 15-20 minučių kaitinamos termostate. Indai ir mėgintuvėliai su kultūromis dedami į eksikatorius, kur sukuriama 20 % CO2 atmosfera. Paprastai kolonijos išauga per 18-24 valandas, tačiau galimas ir vėlyvas augimas. Tada pasėliai laikomi termostate (eksikatoriuje!) iki 8 dienų, kasdien tikrinant augimo išvaizdą.Išaugusios gonokokų kolonijos yra apvalios, šiek tiek išgaubtos formos, lygiais kraštais, blizgančiu paviršiumi, gleivėta. nuoseklumas. Jie skaidrūs, tarsi rasos lašeliai, beveik bespalviai, nors gali pasitaikyti ir balkšvų variantų. Susidariusios kolonijos tiriamos makroskopiškai ir mikroskopiškai. Tepinėliuose gonokokai išsidėstę poromis, tetradomis ir sankaupomis. Įprastos kolonijos subkultūrinamos ant serumo agaro, kad būtų išskirta gryna kultūra. Galutinis identifikavimas atliekamas atsižvelgiant į morfologines, kultūrines, fermentines ir antigenines savybes. Biochemiškai gonokokai yra mažai aktyvūs. Išrūgų terpėse, kuriose yra 1,5 % įvairių angliavandenių, jos skaido tik gliukozę, bet ne maltozę ir sacharozę.Išskirtų kultūrų oksidazinis aktyvumas nustatomas kolonijas užtepus 1 % dimetilparafenilendiamino tirpalu (po mikroskopijos). Oksidazei teigiamos kolonijos pirmiausia parausta, o vėliau pajuoduoja.Gonokokų diferencijavimas nuo kitų Neisseria genties rūšių turi ypatingą reikšmę diagnozuojant burnos ir ryklės gonorėją. Kaip žinoma, ant tonzilių, burnos ir nosiaryklės gleivinės visada yra daug gramneigiamų Neisseria - normalios žmogaus mikrofloros atstovų. Patikimi gonokokų nustatymo metodai yra imunofluorescencijos, latekso ir koaguliacijos reakcijos, taip pat fermentinių savybių nustatymas. Būtina atlikti kokybinį mikroorganizmų jautrumo ar atsparumo antibiotikams nustatymą agaro difuzijos metodu naudojant diskelius.Siekiant pirminės mikroskopijos metu dažniau aptikti gonokokus tepinėliuose ir patikimiau išskirti grynąsias kultūras, ypač vangios, lėtinės ligos eigos atvejai, naudojami gonorėjos provokavimo metodai , tai yra dirbtinis patologinio proceso paūmėjimas, dėl kurio išskyrose atsiranda daugiau gonokokų. Pagrindiniai iš šių metodų yra: a) cheminis – 0,5 % sidabro nitrato tirpalo įlašinimas į šlaplę vyrams, gimdos kaklelio kanalo sutepimas 2–5 % sidabro nitrato tirpalu; b) mechaninis – tiesioginio įvedimas. Bougie į šlaplę 10 minučių arba priekinė uretroskopija; c) biologinė – gonovakcinos injekcija į raumenis 500 milijonų mikrobų kūnų arba pirogeninė 200 MTD; d) mityba – sūraus, aštraus maisto vartojimas; e) terminis – šildantis lytiniai organai su induktotermine srove f) fiziologiniai - tepinėlių ėmimas menstruacijų metu Dar geriau derinti kelis provokacijos būdus, pvz., cheminį, maistinį ir biologinį. Pastaruoju metu patikimiau identifikuoti sukėlėją naudojama polimerazės grandininė reakcija gonorėjos. Tai leidžia nustatyti ligos sukėlėją lėtinės gonorėjos atvejais, kai bakterioskopinis ir bakteriologinis tyrimas neduoda teigiamų rezultatų.

Serologinė diagnostika

Serologinė gonorėjos diagnozė atliekama palyginti retai, daugiausia jos lėtinės eigos metu, kai bakterioskopiniai ir bakteriologiniai tyrimai neduoda teigiamų rezultatų. Šiuolaikinėmis sąlygomis atliekamas fermentinis imunologinis tyrimas, RNGA ir Bordet-Gengou reakcijos (BRS). Šių reakcijų antigenai yra: karščiu nužudyta polivalentinė gonokokų vakcina, ultragarsu inaktyvuota vakcina, gonokokų baltymų ir polisacharidų frakcijos, taip pat piridino antigenas. ELISA ir RNGA yra labai specifinės ir patikimos serologinės reakcijos. Palyginti su praeitimi, RSK kiek prarado savo vaidmenį. Jis neturi praktinės vertės diagnozuojant ūminę gonorėją, nes jis gydomas prieš susiformuojant dideliam antikūnų kiekiui. Paprastai jis netinka gydymo patikimumui nustatyti. Bordet-Gengou reakcija svarbi lėtinės gonorėjos, ypač jos komplikuotų formų (gonosepsis, metritas, artritas, prostatitas ir kt.) serodignozėje. Alergijos tyrimų diagnostinę vertę kiek nuvertina tai, kad daugeliui jie teigiami. metų po gonorėjos. Norint juos nustatyti, į odą įšvirkščiama 0,1 ml šviežios gonokokinės vakcinos (100 mln. mikrobų ląstelių 1 ml). Po 24 valandų stebima hiperemija, kartais su patinimu centre.

Gydymas ir profilaktika

Gonorėjos chemoterapijai naudojami antibiotikai: beta laktamai (penicilinai, cefalosporinai) ir kiti antibiotikai. Vakcininė gonorėjos profilaktika nevykdoma, nes nėra veiksmingų vakcinų. Siekiant išvengti blenorėjos, visiems naujagimiams į akies junginę lašinamas vieno iš išvardytų antibiotikų tirpalas.

Neisseria gonorrhoeae priklauso Neisseriaceae šeimai, Neisseria genčiai. Gonokokus Neisseris atrado 1879 m., o visa šeima buvo pavadinta jo vardu.

Morfologija. Gonokokai yra diplokokai, susidedantys iš dviejų pupelių formos kokosų, gulinčių vienas kitam įdubus (primenantys kavos pupeles). Gonokokų dydis yra 1,2-1,3 × 0,7-0,8 mikrono. Jie yra polimorfiniai, kartu su didelėmis yra labai mažų, netaisyklingos formos L formos bakterijų. Gonokokai yra nejudrūs ir nesporuoja. Patologinėje medžiagoje (pūliuose) randama kapsulės formos medžiaga. Gram neigiamas. Veikiant narkotikams ir kitoms medžiagoms jos greitai keičiasi: atsiranda gramteigiamos formos. Patologinėje medžiagoje jie yra tarpląstelėje (leukocituose), bet gali būti ir už ląstelės ribų. Jų galima rasti atskirų kokkų pavidalu (žr. 4 pav.).

Auginimas. Gonokokai yra aerobai. Labai reiklus maistinėms terpėms. Jie auga terpėse, kuriose yra natūralių baltymų (žmogaus) – kraujo, serumo, 37 °C temperatūroje ir 7,2–7,4 pH. Terpė turi būti ką tik paruošta ir drėgna. Sėti reikia iš karto po medžiagos paėmimo. Serumo terpėje gonokokai sudaro mažas 1-2 mm kolonijas, skaidrias, blizgančias lygiais kraštais, primenančias rasos lašelius. Kraujo terpėje hemolizės nėra. Išrūgų sultinyje jie suteikia nedidelį drumstumą ir plėvelę, kuri nusėda ant mėgintuvėlio dugno. Jei po 24 valandų augimas prastas, pasėliai termostate paliekami antrai parai.

Fermentinės savybės. Sacharolitinės savybės yra silpnai išreikštos. Gonokokai skaido tik vieną cukrų – gliukozę, gamindami rūgštį. Jie neturi proteolitinių savybių.

Toksinų susidarymas. Gonokokų ląstelės sienelėje yra toksiškos medžiagos – lipopolisacharido (mažai tyrinėta).

Antigeninė struktūra. Antigeninė struktūra yra nevienalytė ir lengvai kinta veikiant aplinkos veiksniams. Nėra visuotinai priimto gonokokų skirstymo į serovarus ir serotipus.

Atsparumas aplinkos veiksniams. Išorinėje aplinkoje gonokokai nėra labai stabilūs. 56-60° C temperatūroje jie žūva. Esant 40° C temperatūrai, jų gyvybingumas smarkiai sumažėja. Žema temperatūra ir džiūvimas juos greitai sunaikina. Bet jie pūliuoja iki 24 val.. Dezinfekuojantys tirpalai - 1% fenolio tirpalas, gyvsidabrio chloridas 1:1000 gonokokus sunaikina per kelias minutes. Gonokokai ypač jautrūs sidabro druskoms – 1% sidabro nitrato tirpalas juos iš karto žudo. UV spinduliai juos nužudo per kelias minutes.

Gyvūnų jautrumas. Gyvūnai nėra jautrūs gonokokams. Tačiau intraperitoninė gonokokinio toksino injekcija baltosioms pelėms sukelia jų mirtį.

Infekcijos šaltiniai. Asmuo, sergantis gonorėja.

Perdavimo maršrutai. Susisiekite su namų ūkiu (seksualiai), rečiau per užterštus daiktus (rankšluostį, kempines ir kt.).

Žmonių ligos. Gonorėja ir blenorėja.

Patogenezė. Natūralus gonokokų šeimininkas yra sergantis žmogus. Gonokokai prasiskverbia pro šlaplės gleivinę (moterims – šlaplę ir gimdos kaklelį). Gonokokų patogeniškumo veiksnys yra pilių buvimas, kuris, jungdamasis su cilindrinio epitelio mikrovirveliais, palengvina gonokoko prasiskverbimą į epitelio ląstelę, sukeldamas ūmų uždegiminį procesą gleivinėje.

Kliniškai gonorėja pasireiškia skausmu šlapinantis, pūlių išsiskyrimu iš šlaplės ir makšties. Liga yra ūmi, bet kartais tampa lėtinė. Gonokokai gali sukelti gonorėjinį konjunktyvitą – blenorėją (pūlingą akių gleivinės uždegimą naujagimiams). Gonokokai retai prasiskverbia iš šlaplės į kitus organus, tačiau kartais gali sukelti artritą, endokarditą ir kt.

Imunitetas. Natūralaus atsparumo gonokokams nėra. Perduota liga taip pat nesukuria imuniteto. Stebėta fagocitozė yra neišsami.

Prevencija. Sveikatos švietimas. Kultūros ir higienos lygio didinimas. Specifinės prevencijos nėra. Norint išvengti blenorėjos, vaikams iš karto po gimimo į junginės maišelį reikia suleisti 1-2 lašus 30% albucido tirpalo.

Gydymas. Antibiotikai (penicilinas, bicilinas, streptomicinas ir kt.). Taip pat naudojami sulfonamidiniai vaistai. Lėtinės formos atveju naudojama gonokokinė vakcina.

Kontroliniai klausimai

1. Apibūdinkite gonokokų morfologines savybes.

2. Koks yra gonokokų fermentinis aktyvumas ir toksinų gamyba?

3. Koks yra gonokokų atsparumas. Kuriems vaistams gonokokai yra ypač jautrūs?

4. Kokias ligas sukelia gonokokai ir jų patogenezė.

Mikrobiologinis tyrimas

Tyrimo tikslas: gonokokų ir antigonokokinių antikūnų nustatymas.

Medžiaga tyrimams

1. Išskyros iš šlaplės gleivinės vyrams.

2. Moterų išskyros iš šlaplės ir gimdos kaklelio gleivinės.

3. Pūlingos išskyros iš akių.

4. Kraujas serumui.

Pastaba. Bakterioskopiniam ir bakteriologiniam tyrimui medžiaga imama: 1) prieš pradedant gydymą antibiotikais: 2) ne anksčiau kaip po 10 dienų po gydymo antibiotikais pabaigos; 3) ne anksčiau kaip po 2 valandų po paskutinio šlapinimosi; 4) ne anksčiau kaip po 2 valandų po dušo.

Pagrindiniai tyrimo metodai

1. Mikroskopinis (daugiausia naudojamas ūminėms formoms).

2. Mikrobiologiniai.

3. Serologinis.

Tyrimo eiga

Antroji studijų diena

Išimkite pasėlius iš termostato ir apžiūrėkite. Studijuoja kolonijas. Jie daro tepinėlius. Jei yra įtartinų gramneigiamų diplokokų, kolonijos persodinamos į pasvirusią terpę mėgintuvėliuose (terpė turi būti šviežiai paruošta ir joje turi būti pakankamai kondensato) ir tiriama dėl oksidazės. Norėdami tai padaryti, į koloniją pipete užlašinamas lašas 1% dimetilparafenilendiamino tirpalo, kolonijos keičia spalvą nuo tamsiai rudos iki juodos.

Trečia studijų diena

Kultūros išimamos iš termostato, iš pasvirusio agaro padaromi tepinėliai, dažomi Gram ir tiriami mikroskopu. Sėti ant Hiss terpės (laktozės, gliukozės, manitolio ir maltozės). Šiuose angliavandeniuose turėtų būti 30% kraujo serumo. Inokuliuoti mėgintuvėliai dedami į termostatą.

Ketvirtoji tyrimo diena

Nuimkite vamzdelius nuo termostato, jei neauga, palikite juos termostate dar 1-2 dienas. Jei yra augimas, į rezultatus atsižvelgiama (28 lentelė).

Serologinė diagnostika

Trečia ligos savaitė. Lėtinės ligos eigoje ir abejotinais atvejais RSC atliekamas naudojant paciento serumą (žr. 12 skyrių). Užmušta gonokokų kultūra, paruošta pramoninėmis sąlygomis, naudojama kaip antigenas. Galite naudoti netiesioginę hemagliutinacijos reakciją (žr. 12 skyrių).

Kontroliniai klausimai

1. Kokia medžiaga naudojama gonokokams identifikuoti ir kaip ji gaunama?

2. Kiek laiko po šlapinimosi (moterims nusiprausimo) galima paimti medžiagą tyrimams?

3. Kuris tyrimo metodas yra pagrindinis ūminei, o lėtinei gonorėjos formai?

4. Kada ir koks serologinis tyrimas atliekamas įtarus gonorėją?

5. Nuo kokių mikroorganizmų reikia atskirti gonokokus?

Gaukite vaistų iš savo mokytojo. Ištirkite jį ir nubrėžkite gonokokus, esančius leukocitų viduje ir išorėje, naudodami Gramo dėmę.

Kultūros žiniasklaida

Trynio vidutinė. Į 100 ml triušienos MPA įpilkite 15 ml trynio (šviežio vištienos kiaušinio), 6 ml fenolio raudonojo indikatoriaus, 1,5 ml cukraus, ištirpinto 1 ml sterilaus distiliuoto vandens.

Maistinė terpė ascitas-agaras. Į sultinio, paruošto iš triušienos, filtratą, įpilkite 2% agaro, 1% peptono ir 0,5% natrio chlorido. Kaitinkite, kol agaras ištirps, nustatykite pH iki 7,4–7,5 ir šarminkite 20% natrio hidroksidu. Terpė užvirinama, filtruojama, supilama į sterilius buteliukus ir sterilizuojama autoklave 15 minučių 115°C temperatūroje.

Auginimo terpės be ascito receptai (MPA pH 7,4–7,5).

1) mėsos vanduo iš triušienos arba jaučio širdžių - 100 ml

kazeino hidrolizatas - 2 ml

mielių autolizatas - 2 ml

galvijų kraujo serumas - 20 ml

2) mėsos vanduo iš triušienos arba jaučio širdžių - 100 ml

5% hemohidrolizato tirpalas - 2 ml

mielių autolizatas - 2 ml

galvijų serumas - 20 ml

3) mėsos vanduo iš triušienos ar jaučio širdžių - 100 ml

vištienos kiaušinio trynys - 10 ml

galvijų kraujo serumas - 20 ml

Gonokokų augimas šiose terpėse yra gausus. Gonokoko kolonijas galima aptikti naudojant oksidazės testą, kurio metu jos parausta, pajuoduoja.

Gonorėjos sukėlėjas yra Neisseria gonorrhoeae , sukeliantys ūminius ir lėtinius urogenitalinių organų, burnos ir ryklės gleivinės bei akies junginės uždegiminius pažeidimus.

Tyrimo medžiaga – pūlingos išskyros iš urogenitalinių organų, tiesiosios žarnos ar akių junginės (su blenorėja), sąnarinis ir pilvaplėvės eksudatas. Griežtai reglamentuoti gonorėjos laboratorinės diagnostikos metodai yra mikroskopinis ir bakteriologinis (kultūrinis) tyrimas. Gonorėjos mikrobiologinės diagnostikos metodai pateikti 18 schemoje.

18 schema. Gonorėjos mikrobiologinės diagnostikos metodai

Mikroskopinis metodas susideda iš tiriamosios medžiagos tepinėlių, nudažytų Gramu ir metileno mėlynu, tyrimo. Dažant preparatus nuo gonorėjos, taikoma Gramo metodo modifikacija (gencijoninis violetinis dažiklis pakeičiamas krištoliniu violetiniu, o vietoj fuksino naudojama neutrali raudona; preparatas nuplaunamas po kiekvieno dažymo etapo). Ūminės gonorėjos tepinėliuose randama daug polimorfonuklearinių leukocitų, kurių viduje ir išorėje yra pupelės formos gramneigiami diplokokai; lydinčios mikrofloros yra arba minimalios, arba jos visai nėra (25 pav.). Sergant lėtine gonorėja, kai kuriais atvejais tepinėliuose neaptinkamas tipiškas gonokokas arba atrodo netipiškai mažų, panašių į dulkes ar didelių sferinių darinių pavidalu; dažnai 2 gonokokų ląstelės išsidėsčiusios kampu viena prieš kitą, o kartu gausi mikroflora. , randama leukocitų, epitelio ir kitų ląstelių. IFM gali būti naudojamas kaip greitasis diagnostikos metodas.

Ryžiai. 25. Gonorėjos sukėlėjas (Neisseria gonorrhoeae) ūmine gonorėja sergančio paciento šlaplės tepinėliuose. Viduje ir ekstraląstelėje išsidėstę gramatiniai diplokokai, leukocitų gausa.

Bakteriologinis metodas. Gonokokai yra labai jautrūs įvairiems nepalankiems veiksniams, todėl kultūrinius tyrimus būtina atlikti iškart surinkus medžiagą. Sėjama ant specialių maistinių medžiagų. Šių terpių pagrindas yra triušienos MPA, pridėjus mielių autolizato, kazeino hidrolizato arba hemohidrolizato ir galvijų išrūgų. Ascitinis skystis ir kiaušinio trynys šiuo metu nenaudojami kaip gonokokų auginimo terpės priedai. Antrasis auginimo terpės tipas yra selektyvus ir, be minėtų komponentų, apima antibiotikus (polimiksiną, linkomiciną ir ryklės gonorėjos diagnozei – oroto rūgštį). Pasėliai auginami 37 0 C temperatūroje 24-72 valandas atmosferoje su dideliu CO 2 kiekiu. Gonokokų kolonijos yra apvalios, skaidrios, rasos lašų pavidalo. Gonokokams būdingos kolonijos subkultūrinamos į mėgintuvėlius su gonokokų auginimo terpe, kad būtų gautos grynos kultūros, kurios identifikuojamos pagal morfologines ir sacharolitines savybes „margoje“ terpėje (pusiau skystas agaras su išrūgomis ir angliavandeniais) arba naudojant mikrotestų sistemas. Grynų kultūrų tepinėliuose gonokokai yra ne poromis, o atskirai. Biochemiškai gonokokai yra neaktyvūs ir fermentuoja tik gliukozę, susidarant rūgštims ir gamina oksidazę. Oksidazei nustatyti naudojamas testas su 1% vandeniniu dimetilparafenilendiamino arba dietilparafenilendiamino tirpalu, kuris nuspalvina gonokokų kolonijas iš pradžių rožine, paskui raudona, o po kelių minučių – juoda spalva. Taip pat tiriamas gonokokų jautrumas antibiotikams ir jo beta laktamazės aktyvumas.

Serologinis metodas(antikūnų prieš gonokoką nustatymas pacientų kraujyje naudojant RSK ir ELISA) nėra griežtai reglamentuotas, neturi diagnostinės vertės, nėra gydymo efektyvumo stebėjimo metodas ir šiuo metu nenaudojamas realioje praktikoje.

Genų diagnostika. Jis skirtas specifiniams gonokokinės DNR fragmentams aptikti naudojant PGR ir gali būti naudojamas kaip papildomas labai informatyvus gonorėjos diagnozavimo metodas.

Savarankiškas studentų darbas

1. Mikroskopinis metodas- pūlingų išskyrų iš šlaplės tyrimas pacientui, kuriam įtariama gonorėja (parodomoji mikro skaidrė, Gramo dėmė).

2. Bakteriologinis metodas. Kultūros studija . gonorėjos sukėlėjas maistinėje terpėje, skirtoje gonokokams izoliuoti, ant kurių gonokokai sudaro apvalias, skaidrias kolonijas rasos lašų pavidalu. Fermentiškai gonokokas yra neaktyvus ir fermentuoja tik gliukozę, kad susidarytų rūgštis. Atsižvelkite į gonokokų sėjos „margoje“ eilėje rezultatus (demonstracija).

Gonorėjos diagnozė

Neištyręs gonorėjos, joks šiuolaikinis gydytojas nenustatys diagnozės. Nesvarbu, kokius simptomus pacientas turi - gonorėja, kaip ir daugelis kitų infekcijų, pirmiausia nustatoma laboratoriniais metodais. O laiku atliktas tyrimas kartu su kompetentingu metodo, tinkamiausio kiekvienu konkrečiu atveju, parinkimu atlieka lemiamą vaidmenį užkertant kelią rimtoms komplikacijoms.

Laboratorinei gonorėjos diagnostikai naudojami keli metodai:

• tepinėlių mikroskopija dėl Neisser gonokokų (bakterioskopinis metodas);
• bakterinė kultūra nuo gonorėjos (gonokokų);
• serologiniai tyrimai (serodiagnozė);
• fermentinis imunologinis tyrimas (ELISA);
• PGR (polimerazės grandininė reakcija);
• greitieji gonorėjos testai.

Tiksliausi ir labiausiai paplitę iš jų yra bako kultūra ir PGR. Pažvelkime į kiekvieną detaliau, kad suprastume, kodėl.

Kaip atliekamas mikroskopinis gonorėjos tyrimas?

Šlaplės ar makšties (gimdos kaklelio) tepinėlio mikroskopija yra paprasčiausias išankstinės gonorėjos diagnostikos metodas. Tyrimo principas paprastas. Tepinėlis nudažomas ir tiriamas mikroskopu. Tuo pačiu metu atkreipiamas dėmesys į tai, kad yra dvigubų kokosų, turinčių gonokokams būdingą kavos pupelės formos formą.

Esant bet kokiam uždegimui, tepinėlyje yra daug leukocitų - kraujo ląstelių, atsakingų už kūno apsaugą. Sergant gonorėja, jų skaičius taip pat padidėja, tačiau šis faktas negali patvirtinti diagnozės. Baltųjų kraujo kūnelių buvimas tik rodo uždegimą, bet nenurodo, kokia infekcija jį sukėlė.

Leukocitus ir gonokokus sergant gonorėja galima nustatyti atliekant bendrą šlapimo tyrimą (randama nuosėdose).

Metodo pranašumas yra jo paprastumas ir greitis. Ir pagrindinė problema yra mažas tikslumas. Galite atlikti analizę per 10-15 minučių, tačiau tikimybė, kad rezultatas bus teisingas, yra 50%. Panaši išvaizda būdinga beveik visoms Neisseriai, įskaitant ir nepatogeniškas. Todėl mikroskopija naudojama tik atrankai, norint suprasti, ar tepinėlyje nėra nieko pašalinio. Aptikus bakterijų, panašių į gonokokus, atliekami kiti, tikslesni tyrimai: pasėlis, PGR arba kraujo tyrimas naudojant ELISA.

Kaip atliekama gonokokų bakterinė kultūra?

Skirtingai nuo mikroskopinio tepinėlio tyrimo, bako kultūra yra informacinis metodas. Gonokokai auga tik specialiose terpėse, jų kolonijos turi būdingą išvaizdą ir spalvą. Be to, skirtingų tipų bakterijos turi skirtingą gebėjimą apdoroti tam tikras medžiagas (ypač cukrų). Kartu šios savybės padeda nustatyti mikrobo rūšis ir porūšius. Metodo tikslumas yra 90%.

Jei randama gonokokų, tada laboratorijoje tose pačiose kolonijose bus nustatytas jautrumas antibiotikams. Tada gydytojas tiksliai žinos, kuris vaistas kiekvienu konkrečiu atveju yra stipresnis. Todėl prasminga atlikti analizę, net jei kitas metodas aiškiai nustatė infekcijos buvimą.

Metodo trūkumas yra jo trukmė. Laikas, kurio reikia parengti tokią gonorėjos analizę, gali svyruoti nuo kelių dienų iki kelių savaičių.

Kokiais atvejais atliekama gonorėjos serodignozė?

Kovai su liga imuninė sistema gamina antikūnus – specialius apsauginius baltymus. Jie būdingi kiekvienai infekcijai, su kuria turi kovoti. Gydytojai nuėjo iš priešingos pusės – jei yra antikūnų (poveikis), vadinasi, turi būti bakterijos (priežastis). Serologinio metodo principas – stebėti paciento kraujo, kuriame yra antikūnų prieš gonokokus, reakciją su šių antikūnų antigenais, esančiais diagnostikos rinkinyje. Antikūnai ir antigenai traukia vienas kitą kaip magneto poliai ir sulimpa. Dėl šios priežasties tirpale susidaro nuosėdos.

Serologiniai metodai gonorėjai diagnozuoti naudojami retai. Labiausiai domina mokslininkus. Anksčiau jie buvo plačiai naudojami gonorėjai nustatyti, tačiau jų buvo atsisakyta dėl mažo tikslumo ir rezultato priklausomybės nuo subjektyvių veiksnių.

Gonorėjos tyrimo rezultatų laukimo laikas serologiniais metodais yra kelios valandos. Informacijos turinys – nuo ​​60 iki 75%, priklausomai nuo diagnostinio antigenų rinkinio. Serologiniai tyrimai pirmosiomis savaitėmis po užsikrėtimo ligos nenustato – organizmui reikia laiko, kad kraujyje susikauptų antikūnai.

Kaip nustatyti gonorėją naudojant fermentinį imuninį tyrimą

Imunofermentinis tyrimas arba ELISA yra metodas, pakeitęs serologinius diagnostikos metodus. Lygiai taip pat jis leidžia kraujyje nustatyti tam tikras gonorėjos specifinių antikūnų klases, bet tiksliau. Gali diagnozuoti tiek ūminę (praėjus kelioms dienoms po užsikrėtimo), tiek lėtinę gonorėją. Plačiai naudojamas diagnostikai ir patikrai.

Metodo privalumai – pakankamas tikslumas (75-85%), priimtina kaina. Trūkumas: rezultatai gali būti iškraipyti dėl subjektyvių (sugadinti reagentai, žmogiškasis faktorius) ir objektyvių (imunodeficito buvimas, imuninės ligos) priežasčių. Kiek laiko užtrunka atlikti gonorėjos kraujo tyrimą ELISA metodu, priklauso nuo kiekvienos konkrečios laboratorijos ir reagentų (nuo 1 iki 5-6 dienų).

Gonorėjos tyrimas naudojant PGR metodą

Polimerazės grandininės reakcijos metodas yra aukščiausias pasiekimas ligų diagnostikos srityje. Jis labai tikslus ir konkretus. Metodo kūrėjas Kary Mullis 1993 metais gavo Nobelio medicinos premiją. Metodo principas pagrįstas patogeno genetinės medžiagos (neisseria gonorrhoeae DNR) nustatymu tirtuose biologinės medžiagos mėginiuose. Tyrimui atlikti galite naudoti bet kokią biologinę medžiagą – kraują, serumą, išskyras iš lytinių takų, šlaplę, tepinėlius ir įbrėžimus. Medžiaga gali būti užteršta pūliais, eksudatu, šlapimu ir išskyromis, tačiau tai neturi įtakos analizės efektyvumui.

Medžiagoje ieškoma ligos sukėlėjui būdingų genų sekos. Jei randama, tai yra aiškus infekcijos požymis. PGR tyrimas dėl gonorėjos turi didžiausią informacijos turinį ir specifiškumą. Jo tikslumas yra apie 95%. Analizės trukmė yra nuo vienos iki kelių dienų, priklausomai nuo laboratorijos ir reagentų.

Greitieji gonorėjos testai namuose

Populiariausias greitųjų testų gamintojas yra STD Test Express

Greitieji gonorėjos testai buvo sukurti specialiai seksualiai aktyviems žmonėms. Jis pagrįstas principu, panašiu į ELISA (gonokokinio antigeno reakcija su antikūnais iš medžiagos, paimtos iš įtariamo ligos sergančio asmens). Tirti tinka kraujo, išskyrų iš lytinių takų, šlaplės, tiesiosios žarnos mėginiai.

Pagrindinis greitųjų testų privalumas – greitis. Procedūra trunka 10-20 minučių. Metodo trūkumas – dažni klaidingai teigiami ir klaidingai neigiami rezultatai, priklausomybė nuo teisingo testavimo, rezultatų iškraipymas dėl saugojimo taisyklių pažeidimo. Todėl geriau kreiptis į artimiausią laboratoriją.

Apibendrinkime

Daugeliu atvejų gonokokai perduodami kartu su kitomis lytiniu keliu plintančiomis infekcijomis. Jei įtariate ligą, turite išsitirti dėl visų galimų ligų. Todėl optimalu pradėti nuo PGR analizės – ji paruošiama greitai, o iš vieno tepinėlio vienu metu galima ištirti, ar nėra skirtingų bakterijų ir virusų.

Norint patvirtinti diagnozę ir nustatyti jautrumą antibiotikams, būtų prasminga atlikti bako kultūrą, jei gonorėja jau žinoma.

Ar gonorėja gali nepasireikšti atliekant tyrimus? Klaidingai neigiami rezultatai gaunami taikant tiksliausius metodus. Antibiotikai ir kiti vaistai, paciento organizmo ypatumai, lėtinė infekcija ir kiti veiksniai gali pakeisti gonokokų išvaizdą ir formą, paversdami juos vadinamosiomis L formomis. Sunkiais atvejais gydytojas skiria gonorėjos provokaciją – tyčinį imuninės sistemos susilpnėjimą, kad paskatintų infekciją pasireikšti. Naminis provokacijos būdas yra paprastas ir malonus – išgerti alaus ir išsimaudyti karštoje vonioje, rekomenduojamas visiems, kuriems ruošiamasi atlikti kultūrinio tepinėlio testą.

Kultūra gonorėjai gydyti

Gonorėja yra lytiškai plintanti liga, kuri yra viena iš labiausiai paplitusių tarp gyventojų.

Liga pasižymi šlapimo sistemos uždegimu. Dažna infekcijų priežastis yra nevalgius, nenaudojant apsauginių priemonių.

Tiek vyrai, tiek moterys gali užsikrėsti.

Svarbu! Gonorėja, laiku negydant, prisideda prie nevaisingumo vystymosi.

Šiandien mes jums pasakysime, kada ir kaip imti pasėlius nuo gonokokinės infekcijos, ir padėsime suprasti tyrimo rezultatus.

Kultūra gonorėjai gydyti: indikacijos

Nuo užsikrėtimo iki pirmųjų matomų požymių paprastai praeina nuo 3 iki 15 dienų. Gali būti besimptomis.

Būdingi šie simptominiai požymiai:

• Pūlingos išskyros;
• Šlaplės paraudimas ir patinimas;
• Deginimas ir niežėjimas lytinių organų srityje;
• Skausmas apatinėje pilvo dalyje;
• Galimas kūno temperatūros padidėjimas;
• Skausmingas šlapinimasis.

Pastebėjus šiuos simptomus, reikia kuo greičiau kreiptis pagalbos į gydytoją. Tyrimo indikacija yra lytinio partnerio gonokokinė infekcija.

Dėmesio! Ligos perėjimas prie lėtinės gali sukelti daugybę komplikacijų ir nevaisingumą.

Paruošimas: pasėlis nuo gonorėjos

Bakteriologiniams tyrimams gali būti naudojama bet kokia biologinė medžiaga.

Prieš tyrimą paimama tvora:

• Oda;
• Sperma;
• Burnos gleivinė, virškinimo traktas;
• Urogenitalinių takų grandymas.

Bakteriologinį pasėlį skiria urologas arba ginekologas.

Norėdami gauti patikimą rezultatą, turėtumėte žinoti pasiruošimo bakteriologinei inokuliacijai taisykles.

Jei gydytojas paskyrė tepinėlio tyrimą, turite:

• Neturėti lytinių santykių likus dviem dienoms iki tyrimo;
• Negalima nusiprausti;
• Atlikti lytinių organų higieną be intymios higienos priemonių;
• 2-3 valandas prieš paimdami medžiagą, susilaikykite nuo tualeto;
• Likus savaitei iki tyrimo nustokite vartoti vaistus.

Moterims tepinėlis imamas pirmosiomis dienomis pasibaigus mėnesinėms.

Pasėliai dedami į termostatą esant optimalioms drėgmės ir temperatūros sąlygoms. Dėl gonokokų būtina palaikyti 37 laipsnių temperatūrą. Vėliau tiriamos abejotinos kolonijos.

Kolonijų augimo ant agaro rūšys:

• Bespalvis arba su geltonu atspalviu;
• Nedidelis;
• Paviršius yra lygus ir blizgus;
• Šiek tiek išgaubta.

Šis tyrimo metodas yra gana informatyvus. Neigiama yra tai, kad tyrimams atlikti reikia daug laiko. Taikant bakteriologinį tyrimą, galima nustatyti mikroorganizmo jautrumą antibakteriniams vaistams. Tai būtina tolesnio gydymo veiksmingumui.

Gerklės kultūra gonorėjai gydyti

Jei įtariate gonorėjos procesą gerklėje, turėtumėte susisiekti su ENT specialistu arba venerologu. Būtinai reikia paimti tepinėlį iš gerklės, tonzilių ar ryklės.

Tuo pačiu metu paimamas ir urogenitalinių organų tyrimas. Prieš pradedant gydymą, reikia atlikti gonokokinės infekcijos testą. Po gydymo turite atlikti tolesnį tyrimą.

Kultūra gonorėjai iš akies

Pažeistas akies vokas išsipučia ir tampa melsvai raudonas. Esant dideliam pūlių išsiskyrimui, akies vokas gali sulipti.

Atsiranda skausmas, niežėjimas ir deginimas. Analizei paimamos išskyros iš akies. Atliekamas PGR tyrimas ir bakteriologinė kultūra, papildomai tiriant jautrumą antibiotikams.

Prostatos sekrecijos kultūra sergant gonorėja

Naudojant prostatos masažą, surenkamos prostatos išskyros.

Tai skaidrus skystis, kuris pasėjamas ant specialių maistinių medžiagų. Po vienos ar dviejų dienų galima nustatyti mikroorganizmų kolonijas. Siekiant nustatyti veiksmingą vaistą tolesniam gydymui, atliekama antibiograma.

Kultūra gonorėjai iš išangės

Medžiagai rinkti naudojami keli metodai. Pirmuoju atveju medvilninis tamponas perleidžiamas išilgai perianalinių raukšlių. Po to jie dedami į sterilų indą. Antrasis būdas yra įbrėžimas.

Kultūrų paruošimo gonorėjai terminas

Laboratoriniai tyrimai gali užtrukti nuo penkių iki devynių dienų.

Tai priklauso nuo atliktos analizės tipo ir metodikos. Mikroskopinės analizės rezultatą galima gauti maždaug per pusvalandį.

PGR atliekama ne ilgiau kaip per vieną dieną, galima atlikti ir greitąją analizę. PGR paletė leidžia lygiagrečiai tirti, ar nėra gretutinių infekcijų.

Gonorėjos kultūra gydymo veiksmingumui nustatyti

Simptominių gonorėjos požymių nebuvimas ir neigiami laboratoriniai tyrimai yra natūralus gydymo rezultatas. Kontrolė atliekama 10 dieną po antibakterinių vaistų vartojimo nutraukimo.

Tyrimas apima tepinėlio tyrimą tris kartus mikroskopu ir vieną kartą medžiagos inokuliavimą ant maistinės terpės.

Vyrai testą turi atlikti vieną kartą, o moterys – tris kartus. Po dviejų savaičių gydymo nutraukimo, menstruacijų metu ir po jų.

Jei nėra simptomų ir gauti neigiami tyrimai, žmogus yra sveikas. Jei rezultatai teigiami, bet simptomų nepastebėta, tai rodo paslėptą procesą.

Gydymo kursas turi būti kartojamas. Neigiami rezultatai ir uždegimo požymių buvimas rodo, kad organizme yra kito tipo patogeno.

Gonorėjos kultūra: į kurį gydytoją turėčiau kreiptis?

Gonorėjos pasėlius gali skirti atitinkami specialistai – ginekologas, urologas, venerologas.

Tyrimą galima atlikti bet kurioje valstybinėje ar privačioje klinikoje. Jei reikia skubių tyrimų rezultatų, rekomenduojame kreiptis į privačią laboratoriją.

Prisiminti! Jei atsiranda pirmieji simptomai, nedelsdami kreipkitės į specialistą.

Kultūra nuo gonorėjos: kaina

Analizės kaina priklauso nuo medžiagos tyrimo metodo.

Kainos svyruoja nuo 150 iki 2000 rublių. Bakteriologinė sėja kainų politikoje bus maždaug 800-1300 rublių.

Jei Maskvoje reikia atlikti kultūrinį tyrimą dėl gonorėjos, kreipkitės į mūsų kliniką. Mūsų nuosava laboratorija leidžia atlikti tyrimus greitai, efektyviai ir nebrangiai. Kai gausite rezultatus, galite kreiptis į venerologą.

Prevenciniais tikslais reikia naudoti barjerinę kontracepciją. Geriau užkirsti kelią ligos vystymuisi, nei gydyti ją vėliau.

Jei įtariate gonorėją, kreipkitės į kompetentingą venerologą.

Naudojimas: mikrobiologija, gonorėjos diagnostika, maistinė terpė gonokokų išskyrimui ir auginimui. Išradimo esmė: maistinėje terpėje kaip maistinė bazė yra kasos žuvų miltų hidrolizatas ir druskos rūgšties kazeino hidrolizatas, kaip augimo stimuliatorius ir vitaminų šaltinis - kepinių ar alaus mielių autolizatas, hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatorius. Terpės papildomai yra gliukozės, mikrobiologinio agaro, polimiksino-B sulfato, linkomicino hidrochlorido ir distiliuoto vandens. Terpė užtikrina muziejinių padermių gonokokų augimą ir iš gonorėja sergančių pacientų medžiagos, išsaugant tipišką mikroorganizmo morfologiją, o tai prisideda prie plataus jo panaudojimo praktinėje sveikatos priežiūroje diagnozuojant ir gydant lytiškai plintančias ligas. 3 stalai

Išradimas yra susijęs su medicinos mikrobiologijos sritimi ir gali būti naudojamas gonorėjos diagnostikai. Pirmaujančios užsienio įmonės ("Oxoid", "Gibco", "BRL" ir kt.) gamina maistines terpes gonokokams auginti mėsos virškinimo ir fermentolizatų pagrindu, pridedant sterilaus vietinio kraujo. Tarp vietinių preparatų žinomi šie: maistinė terpė "Arginino agaras", diagnostinė, sausa, pagaminta NPO Nutrient Media, Makhachkala, kurią sudaro šie komponentai, g: peptonas 8,0-12,0; argininas 0,07-0,3; cistinas 0,007-0,03; glutamo rūgštis 1,0-1,8; EKD 4,0-7,0; tiamino bromidas 0,002-0,007; geležies nitratas 0,002-0,01; kalio chloridas 0,07-0,2; natrio chloridas 5,0-8,0; amonio chloridas 0,9-2,0; magnio sulfatas 0,4-0,9; gliukozė 4,0-7,0; krakmolas 0,5-2,0; Tris buferis 1,0-2,5; agaras 13-17,0; galvijų serumas 153,0-255,0; polimiksino-M sulfatas 15000-25000 vienetų; linkomicino hidrochloridas 0,001-0,003; distiliuoto vandens iki 1 litro. Šios terpės trūkumas: mažas jautrumas, gonokokų augimo intensyvumo rezultatų nestabilumas. Liofiliniu būdu išdžiovinta terpė gonokokams išskirti (pagaminta VCA tyrimų institute, Sankt Peterburge), susidedanti iš terpės bazės ir priedo tokiu komponentų santykiu, g; parodyta 1 lentelėje. Šios terpės trūkumas: gonokokų augimo intensyvumo ir jautrumo rezultatų nestabilumas. Praktikoje laboratoriškai paruoštos terpės be ascito daugiausia naudojamos iš šviežios triušienos ir šviežių galvijų širdžių ekstraktų, pridedant peptono ir 20 % galvijų kraujo serumo arba sterilaus vietinio kraujo. Praktinės sveikatos tarnybos kritiką kelia tai, kad trūksta gonorėjos diagnostikai reikalingo buitinių maistinių medžiagų kiekio ir jų kokybės. Išradimo tikslas – sukurti sausą maistinę terpę, užtikrinančią stabilius augimo intensyvumo ir padidėjusio jautrumo rezultatus, nenusileidžiančią komercinėms gonokokų diagnostikos terpėms, o jos gamybai naudoti ne maisto produktus. Problema išspręsta subalansuojant terpės, kurioje yra maistingas baltymų pagrindas, kepinių ar alaus mielių autolizatas, agaras, natrio chloridas, pašalinės mikrofloros inhibitoriai linkomicino hidrochloridas ir polimiksino-B sulfatas, komponentų sudėtį, kaip maistinę bazę joje yra kasos hidrolizato. žuvų pašarų miltų ir kazeino druskos rūgšties hidrolizato, be to, jame papildomai yra hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatoriaus (fermentinis juodojo albumino hidrolizatas), gliukozės, siekiant padidinti rezultatų stabilumą tiriant ligonius, sergančius lėtine gonorėja, į terpę įpilkite galvijų kraujo serumo (5-10)%, g/l: žuvų miltų kasos hidrolizatas 22,0-28,0 kazeino rūgštis hidrolizatas 2,8-3,2 kepinių ar alaus mielių autolizatas 0,8-1,2 augimo stimuliatoriaus hemofilinių mikroorganizmų 2,0-10,0 gliukozė 9,0 -11,0 natrio chloridas 2,9-3,1 mikrobiologinis agaras 12,0-15,0 polimiksino-B sulfatas 15000-25000 vnt.
linkomicino hidrochloridas 0,001-0,003
distiliuoto vandens iki 1 l
pH 7,3+0,2
Kiekybinis maistinės terpės komponentų santykis ir jos pH užtikrina didesnį gonokokų augimo intensyvumo lygį ir terpės jautrumą. Maistinė terpė ruošiama taip: pasvertos pagrindinių ingredientų dalys supilamos į kolbą su distiliuotu vandeniu. Terpė kruopščiai sumaišoma ir užkimšus kolbą vatos marlės kamščiu, sterilizuojama (115-119) o C temperatūroje 30 min. po to atšaldomas iki (45-50) o C temperatūros ir sterilus, prieš tai ištirpintas steriliame fiziologiniame tirpale. tirpalo, įpilkite pasvertų polimiksino-B sulfato ir linkomicino hidrochlorido kiekių. Terpė sumaišoma ir supilama į sterilias Petri lėkštes. Biologinei auginimo terpių kontrolei buvo panaudota Neisseria gonorrhoeae muziejaus padermių kultūra ir gonorėja sergančių pacientų medžiaga. Visi pasėliai buvo auginami (37+0,5) o C temperatūroje 10% CO 2 atmosferoje ir didelėje drėgmėje 24-48 valandas: duomenys 1 lentelėje. 1 pavyzdys. Siūloma terpė buvo išbandyta kultivuojant Neisseria gonorrhoeae padermes. ir klinikinėje medžiagoje tokios sudėties maistinėje terpėje, g:
žuvų miltų kasos hidrolizatas 22.0
kepinių mielių autolizatas 0,8
kazeino druskos rūgšties hidrolizatas 2.8
hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatorius 2.0
gliukozė 9,0
natrio chloridas 2.9
mikrobiologinis agaras 12.0
polimiksino-B sulfatas 15000 vnt
linkomicino hidrochloridas 0,001
distiliuoto vandens iki 1 l
pH 7,3+0,2
Rezultatai buvo užfiksuoti po 24-48 valandų auginimo. 2 pavyzdys. Siūloma terpė buvo išbandyta sėjant Neisseria gonorrhoeae štamus ir naudojant klinikinę medžiagą maistinėje terpėje su optimaliu šios sudėties komponentų kiekiu, g:
žuvų miltų kasos hidrolizatas 25,0
kepinių mielių autolizatas 1.0
kazeino druskos rūgšties hidrolizatas 3.0
hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatorius 5.0
gliukozė 10,0
natrio chloridas 3.0
mikrobiologinis agaras 13.0
polimiksino-B sulfatas 20000 vnt
linkomicino hidrochloridas 0,002
distiliuoto vandens iki 1 l
pH 7,3+0,2
Rezultatai buvo užfiksuoti po 24-48 valandų auginimo. 3 pavyzdys. Siūloma terpė buvo išbandyta sėjant Neisseria gonorrhoeae štamus ir naudojant klinikinę medžiagą maistinėje terpėje, kurioje yra didžiausias šios sudėties komponentų kiekis, g:
žuvų miltų kasos hidrolizatas 28.0
kepinių mielių autolizatas 1.2
kazeino druskos rūgšties hidrolizatas 3.2
hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatorius 10.0
gliukozė 11,0
natrio chloridas 3.1
mikrobiologinis agaras 15.0
polimiksino-B sulfatas 25000 vnt
linkomicino hidrochloridas 0,003
distiliuoto vandens iki 1 l
pH 7,3+0,2
Rezultatai buvo užfiksuoti po 24-48 valandų auginimo. 4 pavyzdys. Siūloma terpė buvo išbandyta sėjant Neisseria gonorrhoeae štamus ir naudojant klinikinę medžiagą maistinėje terpėje, pažeidžiant šios kompozicijos komponentų kiekybinį santykį, g:
žuvų miltų kasos hidrolizatas 31.0
kepinių mielių autolizatas 1.4
kazeino druskos rūgšties hidrolizatas 3.4
hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatorius 15.0
gliukozė 13,0
natrio chloridas 3.5
mikrobiologinis agaras 20.0
polimiksino-B sulfatas 30000 vnt
distiliuoto vandens iki 1 l
pH 7,3+0,2
Rezultatai buvo užfiksuoti po 24-48 valandų auginimo. 5 pavyzdys. Siūloma terpė buvo išbandyta sėjant Neisseria gonorrhoeae štamus ir naudojant klinikinę medžiagą maistinėje terpėje, pažeidžiant šios kompozicijos komponentų kiekybinį santykį, g:
žuvų miltų kasos hidrolizatas 18.0
kepinių mielių autolizatas 0,5
kazeino druskos rūgšties hidrolizatas 2.5
hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatorius 0,5
gliukozė 5,0
natrio chloridas 2.5
mikrobiologinis agaras 10.0
polimiksino-B sulfatas 10000 vnt
linkomicino hidrochloridas 0,005
distiliuoto vandens iki 1 l
pH 7,3+0,2
Rezultatai buvo užfiksuoti po 24-48 valandų auginimo. 2 lentelėje pateikiamas lyginamasis gonokokų augimo iš klinikinės medžiagos ir muziejinių padermių aprašymas siūlomoje ir žinomoje terpėje po 24–48 augimo valandų. Kolonijų ir nudažytų tepinėlių morfologija visose tirtose terpėse yra identiška būdingai gonokokams. 2 lentelė rodo, kad siūloma terpė yra pranašesnė už komercinę terpę pagal gonokokų augimo intensyvumą ir jautrumą. Aplinkos komponentų kiekybinio santykio pažeidimas lemia staigų siūlomos aplinkos kokybės mikrobiologinių rodiklių pablogėjimą. Siūloma terpė leidžia išlaikyti Nisseria gonorrhoeae padermių (tiek ką tik išskirtų iš pacientų, tiek muziejinių egzempliorių) gyvybingumą 9 mėnesius. 3 lentelėje pateikti duomenys apie Neisseria gonorrhoeae kultūros gyvybingumą, kai ji auginama ir laikoma kietoje terpėje,
Iš 3 lentelės matyti, kad siūloma mitybinė terpė yra tinkama diagnostikos tikslams identifikuojant pacientus, sergančius ūmine ir lėtine gonorėja, taip pat gauti Neisseria gonorrhoeae biomasę gonovakcinoms kurti. Informacijos šaltiniai
1. Kultūros medijos vadovas (1982)
2. Mikrobiologinių auginimo terpių vadovas (Gibco BRL 1988)
3. Kultūrinės žiniasklaidos, ingredientų ir kitų laboratorinių paslaugų vadovas Oxoid. (Oxoid Limited 1979)
4. BBL produktų ir laboratorinių procedūrų vadovas. 1991. 5. Autorius. Pažyma Nr.1451167, gim. Gadžijeva ir kt. „Maistingoji terpė gonokokams išskirti“. 6. FS 42-146 VS-88 Maistinė terpė gonokokams izoliuoti, sausa.

Reikalauti

1 Maistinė terpė gonokokams išskirti ir auginti, turinti maistinę bazę, kepinių arba alaus mielių autolizatą, mikrobiologinį agarą, natrio chloridą, svetimos mikrofloros inhibitorių ir distiliuotą vandenį, pasižyminti tuo, kad joje yra žuvų kasos hidrolizato. miltai ir kazeino druskos rūgšties hidrolizatas, papildomai yra hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatoriaus, gliukozės ir kaip svetimos mikrofloros inhibitorių polimiksino-B sulfato ir linkomicino hidrochlorido tokiu komponentų santykiu, g/l: 3 Žuvies miltų kasos hidrolizatas7 22 283 Kazeino vandenilio chlorido rūgšties hidrolizatas7 2,8 3,23 Kepyklų autolizatas arba alaus mielės7 0,8 1,23 Hemofilinių mikroorganizmų augimo stimuliatorius7 2 103 Gliukozė7 9 113 Natrio chloridas 3B-bix-5.1-garinatas7 2,8 , 7 vienetas 15000 250003 Linkomicino hidrochloridas7 0,001 0,0033 B Distiliuotas vanduo7 Iki 1 l3 pH7 7,3 + 0,2

Panašūs patentai:

Išradimas yra susijęs su medicinine biotechnologija ir susijęs su meningokokinio adhezino, bakterinės kilmės preparato, naudojamo, pavyzdžiui, nustatyti meningokokų sukibimo laipsniui jų sąveikos su šeimininko ląstelėmis metu, gamyba.