4402 0
За жал, дури и сега може да се каже дека дијагнозата на габични заболувања често е ненавремена (истенчување на зоните на косата, пилинг честопати се мешаат со "првут", "сувост"). Во исто време, субјективните сензации (чешање, болка, итн.) Честопати не се појавуваат кај лезиите, а пациентите, поради тоа, не одат долго време кај специјалист.
Промените во ноктите (грди, распаднати, разредени) се сметаат за „ониходистрофија“ по повреда, смрзнатини итн. Во исто време (дури и изолирани лезии, вклучувајќи ги и ноктите) може да доведат до формирање на алергиско преструктуирање на телото, да влијаат на крвта и лимфни садови, итн Пациентите со ова неограничено долго остануваат извор на ширење на габична инфекција. Во врска со претходното, навремената лабораториска дијагностика на микозите, како и можниот ран третман, се секогаш релевантни.
Разновидноста на клинички варијанти на габични заболувања, претежно пронајдени кај луѓето, како и карактеристиките на микробиологијата, морфоструктурата, имунолошките и другите параметри од различни видови (и родови) на габи доведоа до присуство на значителен број методи за дијагностицирање микози; Треба да се напомене дека достапните методи постојано се подобруваат и (релативно неодамна) имаат необична пристрасност кон имунолошките и молекуларните генетски тестови.
Од друга страна, културните студии с still уште се „во категоријата стандарди блиски до златото“ и се користат за потврдување на сомнителните резултати од други студии; Постои мислење дека комбинацијата на културни и молекуларни генетски методи за дијагностички „сомнителни“ форми на микози (особено дисеминирани, во позадина на имуносупресија на која било генеза, со оштетување на внатрешните органи, итн.) Е еден од најсигурните начини да се регистрира микотичната природа на процесот.
Сепак, не треба да се занемарат „старите“ техники, особено бактериоскопијата (особено при првичниот преглед), особено затоа што во секојдневната практика најшироко се користи микроскопска „верификација“ на микоза во многу дерматолошки институции во споредба со другите тестови.
Земајќи го предвид значителното зголемување на бројот на алергиски манифестации на кожата (а понекогаш и висцерални) - со продолжен, хроничен, периодично влошувачки тек на микоза (кожа, нокти, итн.), Препорачливо е да се спроведат алерголошки тестови за да се идентификуваат степенот на сензибилизација на телото, вклучувајќи комбинирана габична и бактериска инфекција; овој факт може да влијае на специфичноста на третманот кај одреден пациент - на пример, да го одреди рационалното назначување на антимикотици и средства за десензибилизација, итн.
Традиционално, претпоставената дијагноза на габична болест се поставува врз основа на клиничките манифестации и се потврдува со лабораториски тестови.
Во овој дел од книгата, накратко ги прикажуваме основните методи за регистрирање на микози (без оглед на нивната локација), земајќи го предвид „видот на истражувањето и земениот материјал“. Треба да се напомене дека полиморфизмот на клиничките манифестации на микози (вклучително и оние со алергиска компонента) ја одредува разновидноста на патолошкиот материјал што треба да се изучува. Во овој случај, успехот на потрагата по елементи на габата зависи од правилното земање.
Значи, периферната зона на еритемато-сквамозни, често кадрави осипи е побогата со мицелиум, габични спори; на влакнестите области на лезијата, извиткана, белузлава, обезцветена, досадна коса или нивни фрагменти - се зема „коноп“ (препорачливо е да се контролира внесот на коса со помош на Вуд светилка). Одредени вештини се потребни со земање мостри од материјал (со помош на игла) од т.н. "Црни точки" - темни роговидни конуси на устите на фоликулите.
Во секојдневната практика, обично се испитуваат скалите на кожата (собрани со стружење, размачкување, со помош на леплива лента), стружење на променетите нокти, подрачје на субунгвална хиперкератоза, како и испуштање на мукозните мембрани. Според индикациите, се испитуваат спутум, течност за перење, урина (кај пациенти со некатетеризиран мочен меур); урина од кеси за урина, садовите за кревети не можат да се земат за испитување.
Крвта, исто така, има дијагностичка вредност (за културни истражувања, како и ELISA, PCR), цереброспинална течност и други биофлуиди на телото (плеврален, интраартикуларен, интраперитонеален - вклучувајќи ги и оние собрани со аспирација или дренажа); во некои случаи (во зависност од локалната дијагноза), важни се жолчката, изметот, пунктациите на поткожните апсцеси, испуштање на фистула (особено со длабоки микози). Дури и едноставните дијагностички тестови бараат строго почитување на голем број услови.
Во моментов се користат методи за дијагностицирање на габични заболувања:
- микроскопија; врз основа на откривање на патогенот во материјалот за испитување, вкл. во човечки ткива;
- културно истражување проследено со микроскопско испитување на културата на габата;
- хистолошки преглед (г. со длабоки микози);
- имунолошки и молекуларни методи.
Микроскопска дијагностика
Микроскопска дијагностика - стана можна од периодот на појава на специјална оптичка, а подоцна и електронско -микроскопска технологија, што овозможи детално да се проучува ултраструктурата на габите. Во исто време, откривањето на габични елементи - тенки разгранети нишки што формираат мицелиум (мицелиум), заоблени тела (спори; се репродуктивен "орган" на габите) е од дијагностичка вредност.Микроскопската дијагностика вклучува проучување на неизвалкани (мајчин) и обоени препарати. Овој метод, како што е наведено, е најраспространет во дерматолошката пракса поради неговата компаративна едноставност и ниска цена, но, од друга страна, не е доволно чувствителен, бара повторени анализи во некои случаи, потврда со други методи.
Значи, при проучување на неизвалкани препарати, покрај габични елементи, може да се најдат епителни клетки, крвни клетки, разни загадувачи од надворешната средина, што го отежнува пронаоѓањето на предизвикувачкиот агенс на микоза, бара дополнителна "подготовка" на материјалот - т.н. Неговото „просветлување“ (мацерација), концентрација, разредување итн.
Како и да е, директната микроскопија на мајчините препарати ви овозможува брзо да ја дијагностицирате микозата, да одредите на кој хранлив медиум (доколку е потребно) материјалот треба да се инокулира, постои мислење дека неговиот позитивен резултат може да остане единствената лабораториска потврда за микоза со негативен одговор во култура (А.Ј. Сергеев, Ју.В. Сергеев, 2003).
Меѓу различните опции за „просветлување“ на лекови, најчеста е додавањето на KOH или NaOH во материјалот за тестирање (почесто се користи за откривање габи во скали на кожа, коса, како и голем број предизвикувачки агенси на длабоки микози во спутум, биопсија).
За мацерација на смачкана и ставена на стаклен слајд, се изведува 10-20% раствор на натриум хидроксид (или калиум)-1-3 капки, за 10-20 минути; препаратот е лесно притиснат со покривно стакло, за побрза мацерација - се загрева на пламен додека не се појават испарувања. Гледањето се изведува прво при ниско зголемување, потоа под големо зголемување (сув систем).
Правилно подготвениот препарат, не подложен на груби механички, термички и хемиски влијанија, претставува слика на хомогена маса која се состои од епителни клетки, производи од клеточно распаѓање на габични елементи - филаменти и спори на мицелиум.
Променетата коса се става на стаклен лизгач со 10-30% алкалии и се третира на ист начин, но подолго време-од 20 минути до 3-4 часа.Со изобилство на содржина на пигмент, се препорачува однапред да се избели косата со 5% раствор на водород пероксид. Тие придаваат значење на откривање на елементите на габата, како и нивната локација во однос на косата.
Подготовката на материјал од патолошки изменети шајки (по можност ситна пудра добиена со стружење од длабочината на фокусот) се изведува на ист начин, но со употреба на 30% каустична сода, задолжително внимателно загревање на пламен до светлосни пареи и изложеност за околу 1 час (понекогаш и до неколку часа). Препаратите третирани со алкали не треба да се чуваат повеќе од 1,5-2 часа поради нивното "влошување" (кристализација на реагенсот, намалување на дијагностичката сигурност утврдена со микроскопската слика).
Наместо КОХ или НООХ, можете да користите: а) раствор од мешавина на КОХ со 15% ДМСО; б) мешавина од фенол (2 дела) со хлорален хидрат (2 дела) и млечна киселина (1 дел); в) калцифлуорозна бела, која има афинитет кон хиги и целулоза; за истражување, потребен е флуоресцентен микроскоп (се забележува сино или зелено сјај, во зависност од користениот филтер). Во студијата за цереброспинална течност (со сомневање за криптококоза), често се користеше боење со мастило.
Кулага В.В., Романенко И.М., Афонин С.Л., Кулага С.М.
ЛАБОРАТОРИСКА ДИЈАГНОСТИКА НА МИКОЗА
Земање материјал за лабораториско истражување за габа.
1.OST 42-21-2-854: налог бр. 222/80 од 06/27/00
2. Опрема: пинцети, слајдови за микроскоп, ножици, народна лажица.
4. Индикации: габични заболувања.
5. Компликации: бр.
Подготовка на просторија за лекување:
Промена на решенија.
Подгответе:
-1% раствор на хлорамин за партали
-3% раствор на хлорамин - за дезинфекција на преврски и пинцети
- раствор за перење (156 мл. водород пероксид + 5 гр. прашок за детергент + 839 мл. дестилирана вода) - за обработка на пинцети
- 6% раствор на водород пероксид - за третман на ракавици.
Алгоритам за изведување манипулација.
Треба да земете пинцета, стаклен слајд, лажица Фолкман, ножици;
- покани го пациентот во соблекувалната;
- пациентот седи на стол или кауч;
- m / s стои.
Техника на извршување:
Земете скали на кожа и коса од лезијата со пинцета;
- ставете го земениот материјал на стаклен слајд и покријте го со друг стаклен слајд.
- измијте ги рацете со сапун и вода;
- испратениот материјал во лабораторија.
КОЛЕКЦИЈА НА МАТЕРИЈАЛ
Земете ножици и стаклени лизгалки;
- исечете парче од слободниот раб на ноктот со ножици;
- покријте го земениот материјал со друг стаклен слајд;
Потопете ги ножиците и пинцетите во 3% раствор на формалин.
Правилното собирање материјал од погодените нокти е клучот за успешна микробиолошка студија. Кога собираат материјал, тие не ги зафаќаат секогаш областите на ноктот што содржат одржливи габи. Секако, неживоживите печурки во културата нема да растат и нивниот вид не може да се воспостави.
Областа на ноктот што треба да се земе е одредена од формата на онихомикоза.
Значи, со површна форма на онихомикоза, треба да се направат стружење од површината на ноктевата плоча.
Во најчестата дистална субунгвална форма, најизводливите габи се наоѓаат под ноктевата плоча. Материјалот што се испраќа за истражување треба да вклучува не само отсекување на ноктевата плоча, туку и стружење од подлогата за нокти, од под чинијата.
Покрај тоа, областите на непроменетиот шајка треба да бидат фатени, бидејќи најактивните габи се наоѓаат на границата помеѓу нив и погодените области на ноктот.
Во проксималната субунгвална форма, тешко е да се собере материјал. Во овие случаи, понекогаш, особено ако треба да спроведат хистолошки преглед или диференцијална дијагноза, земаат биопсија на ноктот и повремено користат вежба.
Со паронихија, стружењето се прави од проксималниот ролери и од под него.
Во сите случаи, за да се избегне бактериска контаминација, ноктот треба да се третира со етил алкохол пред да се земе примерокот.
МИКРОСКОПСКА СТУДИЈА
Микроскопско испитување на патолошки материјал за габи се изведува во природни и обоени препарати.
За подготовка на необоени препарати, добиениот материјал се дроби со скалпел или игла за сечење и се става во средината на слајд. За појасна идентификација на елементите на габата, материјалот е просветлен (мацериран). За таа цел, тие прибегнуваат кон помош на разни супстанции, најчесто каустични алкали (KOH, NaOH), кои раствораат епидермални скали, слуз, гној, го разјаснуваат пигментот на косата и со тоа ги ставаат печурките достапни за истражување.
На омекнатите скали на кожата или шајката, кои се ставаат во средината на слајдот, нанесете 1-3 капки од 20-30% раствор на КОХ (NaOH). Материјалот за испитување во капки од алкалии внимателно се загрева над пламенот на алкохолната ламба додека не се појави деликатна бела рамка од алкални кристали долж периферијата на капката. Не загревајте до вриење. По загревањето, капката е покриена со покривно стакло, избегнувајќи навлегување на воздушни меури.
РА Арабијски и ГИ Горшкова (1995) препорачуваат да ги оставите скалите на кожата и препаратите за коса покриени со стакло за покривање 5 - 10 минути, а плочките за нокти - 30-40 минути пред микроскопија.
Просветлувањето на препаратите може да се изврши без греење, за ова тие се оставаат во 20% раствор на КОХ 30 - 60 минути или се користат други методи за просветлување на патолошкиот материјал: хлоралактофенол според Аман; лактофенол; раствор кој содржи 15% диметил сулфоксид и КОХ во вода. Добри резултати се добиваат по просветлување на ноктевите плочи, сместени во 5% раствор на КОХ 24 часа, во овој случај не е потребно греење.
Микроскопско испитување се изведува на конвенционален лабораториски микроскоп без потопување.
Кондензаторот на микроскопот мора да се спушти, дијафрагмата се стеснува. На почетокот, лекот се наоѓа на стакло со мало зголемување (40x), последователната студија се изведува при поголемо зголемување (100x);
препаратот е детално проучен со зголемување од 400x. Неопходно е да се испитаат неколку лекови со цел да се зголеми веродостојноста на тестот и да се избегнат лажно позитивни резултати.
Грешки во микроскопската дијагноза на габите може да се појават како поради дефекти во подготовката на лекот, така и поради недостаток на искуство на лабораторискиот асистент.
Производните дефекти се првенствено поврзани со:
со прегревање на лекот, што може да доведе до губење на алкални кристали, уништување на косата и појава на ситнозрнето распаѓање во патолошкиот материјал.
Линеарниот распоред на издолжени, дури и алкални кристали многу наликува на филаментите на септички мицелиум дури и на чисто стакло без патолошки материјал.
Диференцијални дијагностички карактеристики се исклучителната униформност на кристалите, нивната стаклена транспарентност, разновидноста на рабовите и отсуството на нераскинлива врска помеѓу еден елемент и друг. Во сомнителни случаи, се препорачува да се додадат капки малку загреана дестилирана вода во препаратот, кои брзо ги раствораат алкалните кристали.
Следното може да се погреши за елементите на печурката:
- капки маснотии,
- воздушни меури,
- памучни навои на облека
- и таканаречената „мозаична габа“.
Липидите на кожата, масното разградување на клетките и зрната кератохиалин, особено оние со правилна форма, може да личат на индивидуални спори на габата. Но, разновидноста на облиците и, што е најважно, големини, отсуството на внатрешна структура на формации (вакуоли, школки) зборува против габичната природа на овие елементи. Липидите, исто така, можат да навлезат во лекот кога земаат патолошки материјал од недоволно прочистена лезија.
Меурчиња од воздух може да личат на спори на клетки слични на квасец, но за разлика од вторите, тие се опкружени со густа темна мембрана, па дури и најмалите воздушни меури се секогаш поголеми од клетките на габата.
Теми од ткаенина од чорапи, облека, итн. Обично лежат одделно од патолошкиот материјал, тие се секогаш поголеми од хифи, груби и не септички.
"Мозаична габа" е артефакт што се јавува за време на кристализација (веројатно поради распаѓање на холестеролот). Има форма на мрежа или јамки, чии контури одговараат на границите на роговидни скали, за разлика од филаментите на мицелиумот, никогаш не ги преминува wallsидовите на клетките на епидермисот.
Во некои лаборатории, се разјаснуваат препаратите за микроскопско испитување со 15 - 30% раствор на КОХ, на кој се додаваат 5 - 10% од комерцијалното темно сино мастило на Паркер (Суперхромно сино -црно мастило на Паркер).
Со оваа боја, хифите и спорите стануваат сини.
Микроскопија открива филаментозни габични хифи или младиот и надежен клетки (сл. 1).
Така, микроскопијата дава заклучок само за габичната природа на инфекцијата, но не и за видот на предизвикувачот на габата.
Се разбира, ефективноста на микроскопското испитување зависи од квалификациите на вработениот во лабораторијата.
Ориз. 1. Микроскопија на стружење од нокти погодени од Т. rubrum. Хифите на габата се видливи.
КУЛТУРНО ИСТРАУВАЕ
Материјалот е инокулиран на стандарден медиум Сабура, често со антибиотици. Во дијагнозата на инфекции со дерматофити, вообичаено е да се додаде циклохексимид во средството на Сабурау, што го инхибира растот на загадувачките габи што доаѓаат од воздухот. Постојат комерцијални медиуми надвор од полицата со адитиви за антибиотици и циклохексимид. Треба да се запомни дека многу не-дерматофитни мувли и некои видови Кандида не растат на медиум со циклохексимид, затоа се препорачува да се инокулира на медиум Сабуро со циклохексимид и на медиум без него. Идентификацијата на видовите обично се изведува со микроскопско испитување на одгледуваната култура или со повторно сеење на селективни медиуми (слика 2-15).
Ориз. 2. Култура на T. rubrum габа изолирана од погодените нокти. Добиено на медиумот на Сабурау (лево) и пченкарен агар (десно).
Ориз. 3. Култура на габата T. mentagrophytes var. interdigitale изолирани од погодените нокти. Добиено на околината на Сабуро.
Ориз. 4. Култура на габата Candida albicans. Добиено на околината на Сабуро.
Ориз. 5. Култура на габата Torulopsis glabrata изолирана од погодените нокти. Добиено на околината на Сабуро.
Ориз. 6. Култура на габата Ulocladium sp., Изолирана од погодените нокти.
Ориз. 7. Микроморфологија на Acremonium sp Изолирана од погодените нокти.
Ориз. 8. Микроморфологија на Fusarium sp Изолирана од погодените нокти.
Ориз. 9. Микроморфологија на Scopulariopsis sp Изолирана од зафатени нокти.
Ориз. 10. Микроморфологија на Candida albicans изолирана од погодените нокти.
Ориз. 11. Микроморфологија на Altemaria sp Изолирана од погодените нокти.
Ориз. 12. Микроморфологија на Aspergillus sp Изолирани од погодените нокти.
Ориз. 13. Микроморфологија на Ulocladium sp изолирана од погодените нокти.
Ориз. 14. Микроморфологија на Chaetomium sp Изолирана од зафатени нокти.
Слика 15. Панел со хранливи материи хранат за идентификација на дерматофити (лево - култура T rubrum, десно - Т mentagrophytes var. Mterdigitale).
Од лево кон десно: медиум на Сабура, медиум на Бакстер, медиум на Кристенсен, пченкарен агар
Треба да се напомене дека некои габи од мувла, вклучително и дерматофити, растат бавно во културата, за 2-3 недели.
Дури и ако се почитуваат сите правила за собирање материјал, со добра лабораториска опрема и високи квалификации на неговиот персонал, бројот на позитивни резултати од културното истражување е многу мал.
Според странската литература, процентот на позитивни студии не надминува 50.
Процентот на позитивни резултати во најдобрите домашни лаборатории едвај достигнува 30.
Така, во 2 од секои 3 случаи на онихомикоза, неговата етиологија не може да се утврди.
ЛУМИНЕСЦЕНТНО ИСТРАУВАЕ
Во 1925 година, Маргарет и Девез откриле дека влакната погодени од одредени дерматофити даваат карактеристичен сјај кога се изложени на ултравиолетови зраци поминати низ филтерот Бида. Стаклото Бида се состои од бариум сулфат, содржи околу 9% никел оксид; пренесува зраци со должина од 365 nm. Различни уреди може да се користат како извор на ултравиолетови зраци. Природата на сјајот не е точно утврдена. Косата продолжува да свети и по смртта на габата и по обидите да се извлече флуоресцентниот материјал со топла вода или ладен раствор на натриум бромид. Интензитетот и природата на сјајот зависат од pH вредноста на растворот. Се верува дека флуоресцентната супстанција се појавува во процесот на интеракција помеѓу габата и растечката коса.
Сјајот на ултравиолетовите зраци, поминат низ Вуд филтерот, е типичен само за коса погодена од габи од родот Microsporum (M. canis, M. audouinii, M. ferrugineum, M. distortium, повремено M. gypseum и M. nanum), како и Trichophyton schonleinii ... Косата погодена од микроспоруми, особено M. canis и M. audouinii, даваат најсветлиот сјај; влакната погодени од T. schonleinii имаат досадна зеленикава флуоресценција.
Сјајот е забележан само кај коса целосно погодена од габата. Можеби не е во свежи лезии. Во овие случаи, косата треба да се епилира од најактивната зона на рабовите, а сјајот може да се најде во коренскиот дел на косата.
Луминисцентниот метод може да се користи и за дијагностика и за следење на ефикасноста на третманот кај индивидуални пациенти и кај епидемиолошки фокуси. Компактните мобилни единици се погодни за испитување контакт луѓе во училиштата, градинките итн.
Луминисцентниот преглед мора да се изврши во затемнета просторија, лезиите мора претходно да се исчистат од кора, остатоци од маст, итн. Луминисцентниот метод може да се користи за дијагностицирање на лишаи на питиријаза, особено кога лезиите се локализирани на скалпот. Лезиите кај оваа болест имаат црвеникаво-жолта или кафеава сјај. Овој сјај, сепак, не е строго специфичен, бидејќи може да се забележи во присуство на првут на скалпот, па дури и кај здрави луѓе во пределот на устите на фоликулите на косата на лицето и горниот дел од телото. Погодените влакна идентификувани со помош на луминисцентниот метод мора да бидат подложени на микроскопско испитување.
ИМУНОЛОШКИ И БИОЛОШКИ ИСТРАУВАА
Имунолошките методи на истражување се користат за идентификување на специфично преструктуирање на телото и серолошка дијагноза на габични заболувања. За да се откријат специфични антитела во серумот на примерокот, се спроведуваат следните серолошки реакции: аглутинација, таложење, врзување на комплементот, имунофлуоресценција со соодветните антигени.
Алергиска состојба на телото на пациентот се открива со употреба на алергиски тестови на кожата. Алергените се нанесуваат на исцрпена кожа според Пирке или со триење во кожата според Моро, интрадермално според Манту, а исто така и со инјекција во кожата. Со помош на овие тестови, се откриваат алергиски реакции и од непосреден и одложен тип, што овозможува да се процени состојбата на хуморалниот и клеточниот имунитет.
За откривање на специфична сензибилизација на лимфоцитите, се користат базофилни дегранулации, реакции на агломерација и измена, тест за трансформација на експлозија, инхибиција на миграција на макрофаги, итн.
Споредбата на резултатите од серолошките и алергиските реакции е корисна и за дијагноза и за прогноза на текот на микозите.
Биолошки метод. Се користи за лабораториска дијагностика на длабоки и особено опасни микози. Врз основа на инфекција на животни со патолошки материјал од пациент или култура на проучена габа. Се изведува во специјални лаборатории.
ХИСТОЛОШКО ИСПИТУВАЕ
Хистологија на микози на кожата предизвикана од дерматофити
Патоморфолошките промени во лезиите се предизвикани од воведување на габи во рожестиот слој на епидермисот, косата и ноктите и воспалителниот одговор на кожата, кој може да биде акутен, субакутен или хроничен. Дијагнозата може да се смета за утврдена само доколку гастроинтестиналните елементи се најдат во хистолошките препарати. За ова, се користат разни хистолошки дамки, најинформативна е периодичната киселинска реакција (ПАС), што овозможува да се идентификуваат полисахаридите присутни во целулозата и хитинот на клеточниот wallид на повеќето дерматофити (дамка Шифу и нејзините модификации). Можете исто така да ја користите реакцијата на сулфација и импрегнација на хистолошки делови со сребро [Хмелницки ОК, 1973; Луер В. Ф. и Шаумбург-Леверл., 1983].
Габите во рожестиот слој на епидермисот, дури и кога користите специјални дамки, се откриваат во мали количини во форма на филаменти и спори на мицелиум. Во ретки случаи, кога има многу габи во лезиите, тие може да се најдат во делови обоени со хемотоксилин-еозин, во форма на деликатни базофилни структури во рожестиот слој.
Воспалителните промени во епидермисот можат да бидат различни: од помал интра- и екстрацелуларен едем на шилести клетки до тешка спонгиоза. Спонгиозата обично се развива со дисхидротични варијанти на микози на стапалата и рацете, клинички во овие случаи, се забележуваат меурчиња. Оваа реакција обично е предизвикана од T. mentagrophytes var. интердигитален. Понекогаш во епидермисот има изразена хиперкератоза, која најчесто се забележува кај микозата предизвикана од Т. rubrum.
Хистолошките промени во дермисот се неспецифични и одговараат на акутно, субакутно и хронично воспаление.
Во микоза на мазна кожа предизвикана од Т. rubrum, габи понекогаш се наоѓаат во велус коса и фоликули на коса. Околу фоликулите се развива воспалителна реакција, која, поради влегувањето на габите во дермисот, може да добие грануломатозен карактер. Централниот дел на инфилтратот во овие случаи може да подлежи на супурација и некроза, а периферниот дел се состои од лимфоцити, хистоцити, епителиоидни и мултинуклеарни гигантски клетки, во кои понекогаш се наоѓаат габични спори. Големините на спорите тука достигнуваат 6 микрони во дијаметар, во косата обично не надминуваат 2 микрони.
Со инфилтративно-гнојна форма на микози на скалпот и зона на раст на брада и мустаќи, габични елементи се наоѓаат во фоликулот на косата, внатре и околу косата. Во косата, тие се одредуваат веднаш над зоната на почетокот на кератинизацијата (приближно на ниво од 30 микрони). Во дермисот, се забележува воспалителна реакција со различен интензитет, најизразена со керион Целси. Во случај на акутна гнојна реакција, во составот на инфилтратот се забележуваат голем број неутрофилни леукоцити, елементите на габите во овој случај можат целосно да исчезнат. Во хроничниот тек на процесот, инфилтратот може да добие грануломатозен карактер, во него се појавуваат мултинуклеарни џиновски клетки. За да се потврди дијагнозата во отсуство на габи во инфилтратот, може да се користат методи на имунофлуоресцентно боење. За овие цели, се користи антисерум означен со флуоресцин на T. mentagrophytes, што овозможува да се детектираат габични антигени во косата и во перифоликуларниот инфилтрат.
Формирањето на инфилтративно-гнојна реакција на кожата при микоза на скалпот (керион Целси) и зона на раст на брада и мустаќи предизвикани од габите M. canis, T. tonsurans и T. verrucosum е манифестација на имунолошки реакција. Ова е потврдено со:
1. Тенденцијата на лезиите кон спонтано разрешување.
2. Отсуство на габични елементи со многу изразена воспалителна реакција од страна на кожата со микоза предизвикана од T. verrucosum (faviforme) и T. tonsurans.
3. Постојана позитивна реакција како одговор на интрадермалната администрација на трихофитин во инфилтративно -гнојни форми на микоза предизвикана од зоофилни трихофитини (на пример, Т. тонсуранс), и негативна - кај површни микози предизвикани од истите Т. тонусарани.
Со фавус во рожестиот слој на епидермисот, се наоѓаат голем број филаменти од мицелиум и единечни спори на габата. Скутулата е претставена со ексудат, паракератотични клетки на епидермисот, клетки на воспалителниот инфилтрат, како и филаменти од мицелиум и габични спори, кои се наоѓаат главно во периферната зона на скутулата. Во активната фаза на болеста, изразен воспалителен инфилтрат кој содржи мултинуклеарни гигантски и плазма клетки е забележан во дермисот околу дегенеративните фоликули на косата. Во старите лезии, косата и лојните жлезди се отсутни, постојат феномени на фиброза.
Хистологија на микози на кожата и мукозните мембрани предизвикани од габи слични на квасец
Со кандидијаза на кожата и мукозните мембрани, габите од родот Кандида се наоѓаат во рожестиот слој на епидермисот или во површинските слоеви на епителот на мукозната мембрана. Елементите на габата обично се малку, тие се добро обоени со ПАС-реакција или Грам; претставени во форма на преградни разгранети мицелиумски филаменти, со дијаметар од 2-4 микрони, или јајцевидни спори, со дијаметар од 3-5 микрони. Откривањето на мицелијалната форма на габата е од дијагностичка вредност.
Во хистолошка студија за хронична грануломатозна кандидијаза на кожата и мукозните мембрани, габични елементи се исто така претежно пронајдени во рожестиот слој на епидермисот или во најгорните делови на епителот на мукозната мембрана, но понекогаш и во боцкавиот слој, внатре во коса и во дермисот. Исто така, постои изразена хиперкератоза и папиломатоза; во дермисот - густ воспалителен инфилтрат кој се состои од лимфоидни клетки, неутрофили, плазма и мултинуклеарни гигантски клетки. Инфилтратот може да се прошири во поткожното масно ткиво.
Со pityriasis versicolor, голем број габични елементи се наоѓаат во рожестиот слој на епидермисот во форма на деликатни базофилни структури, кои се јасно видливи дури и кога препаратите се обоени со хемотоксилин-еозин. Печурките се претставени и со филаменти и со спори.
Со фоликуларна форма на питиријаза лишаи, постои акумулација на роговидни маси и клетки на воспалителен инфилтрат во проширените усти на фоликулите на косата. Исто така, се забележува воспалителна инфилтрација околу фоликулите. Во реакцијата на ПАС, сферични или овални спори на габата, со дијаметар од 2-4 микрони, се наоѓаат во внатрешноста на устата на фоликулите на косата, а понекогаш и во перифоликуларниот инфилтрат. Мицелиумот никогаш не е откриен.
Оштетената пигментација на кожата кај пациенти со питиријаза версиколор се должи на способноста на габата Питироспорум да произведе супстанција што го инхибира процесот на пигментација во епидермисот. Електронско микроскопско испитување на биопсии на кожа од хипопигментирани области покажа дека во меланоцитите се формираат многу мали меланозоми, кои не се способни да навлезат во кератиноцити. Од друга страна, во хиперпигментирани области на кожата, меланозомите се големи и содржат голема количина меланин.
Основата за дијагноза на габични заболувања е микроскопско испитување на препаратите подготвени од погодените области на кожата и ноктите. Сепак, микроскопската слика кај различни видови микози е слична: во скалите и ноктите на кожата, видливи се спори на габи и разгранет септат мицелиум со дијаметар од 4-7 микрони. Затоа, родот и видот на габата во повеќето случаи не можат да се одредат со микроскопска слика во скалите на кожата или во стружењето од ноктот. За да се идентификува патогенот, инокулациите се вршат на хранливи материи, најчесто на медиумот на Сабура.
Епидермофитоза.Стратум рожницата на кожата, најчесто стапалата и ноктите на долните екстремитети се засегнати. Косата никогаш не е засегната. На ноктите се појавуваат жолти дамки или ленти, потоа се развива хиперкератоза (задебелување на ноктите), нивна деформација и уништување. Ламеларен пилинг на стапалата и интердигитални набори, се појавува црвенило на кожата на нозете. Понекогаш се формираат меурчиња, осип на пелена, пукнатини. Болеста е придружена со чешање, горење, болка.
Микроскопско испитување на стружење, лушпи, капачиња на мочниот меур открива ниско-септички нишки на мицелиум со дијаметар од 3-5 мм, некои од филаментите се распаѓаат во тркалезни и правоаголни спори.
Трихофитоза.Тоа е габична болест на кожата и нејзините додатоци со посебна тенденција да влијаат на косата [лат. трихоскоса + фитонгаба]. На скалпот се појавуваат бројни лезии со дијаметар од околу 1,5 см. Кожата на нив е едематозна, хиперемична, покриена со лушпи. Косата во лезиите се распаѓа на ниво од 2-3мм над површината на кожата, па оттука и името "рингворм".
Микроскопскиот преглед открива карактеристична карактеристика на габите Трихофитон - распоредот на нивните спори во синџири. Во зависност од својствата на печурките, постојат:
Ендотрикс (предизвикувачки агенс на површна трихофитоза). Печурките растат во внатрешноста на косата, драматично менувајќи ја нејзината структура. Целата коса е исполнета (полнета) со паралелни редови синџири, кои се состојат од големи заоблени или квадратни спори;
Ектотрикс (предизвикувачки агенс на длабока трихофитоза), во која косата е обвиткана во обвивка од мали или големи спори распоредени долж оската во синџири.
Фавус е краста.Косата и кожата се засегнати, поретко ноктите. Косата станува тенка, досадна, „прашкаста“, како старите перики, но не се откинува. Лезиите на кожата се карактеризираат со појава на жолто-сиви кори (изгореници) со подигнати рабови, како оние на чинии.
Микроскопскиот преглед открива воздушни меури во погодената коса.
Микроспорија.Кожата и косата се засегнати. Во лезиите, косата се распаѓа на ниво од 6-8 мм над површината на кожата. Белузлави обвивки се видливи околу преостанатите трупци.
Микроскопското испитување на погодената коса открива спори кои се распоредени околу и внатре во косата во мозаична шема (по случаен избор). Тие се многу мали (1-3мм), па оттука и името на болеста. Карактеристичниот флуоресцентен сјај на косата помага да се дијагностицира микроспорија.
Микроскопскиот преглед открива заоблени млади клетки, често во форма на грозје.
Длабоки (мувла) микози.Тие се почести како професионални заболувања во фабриките за антибиотици, кај земјоделските работници во контакт со мувлосано жито, сено, компост, итн. Предизвикувачкиот агенс на пеницилиоза (четка габа) има груб, широк, септички мицелиум завршувајќи со четка. Предизвикувачкиот агенс на мукороза има широк несептички мицелиум завршувајќи во вреќа спори. Предизвикувачкиот агенс на аспергилоза (леукемија мувла) често се наоѓа на мувлосани плодови и леб. Има груб преграден мицелиум, завршувајќи со експанзија, од која конците со спори личат на наводнувачка кутија со потоци на вода.
Актиномикоза.Предизвикани од различни видови зрачна габа. Се карактеризира со формирање на густи инфилтрати на кожата, мукозните мембрани и во внатрешните органи, склони кон супурација и појава на фистули. На окото при испуштање на фистула, видливи се мали жолти зрна со карактеристичен зрачен раб - актиномицет друсен. Подготовките за микроскопија се подготвуваат од испуштање на фистули и спутум.
При ниско зголемување, дробите на сјајната габа имаат појава на жолтеникави формации со тркалезна форма со светло аморфна средина и потемна боја на рабовите. При големо зголемување, филаментите на мицелиум се одредуваат во центарот на друсен, и отоци во форма на колба долж периферијата. При боење според Грам, филаментите на мицелиумот се G +, а конусите се G-.
Прецизна дијагноза на инвазивни микозине е лесно. Ова се објаснува не само со тешкотиите во добивање култура на габи, туку и во толкувањето на резултатите од истражувањето, бидејќи габите, и квасецот и мицелиумот, можат да колонизираат мукозни мембрани и да ги контаминираат примероците што се испитуваат. Во овој поглед, дијагнозата на инвазивни микози се базира на интегриран пристап, вклучувајќи ги не само резултатите од миколошките (културни) и серолошките студии (одредување на габичен антиген), туку и клинички симптоми на габична инфекција, податоци од помошни истражувачки методи ( компјутерска или магнетна резонанца, ултразвук).
Европско-американска кооперативна група за проучување на инвазивни микозикај пациенти со ослабен имунитет, развиени се критериуми за дијагноза на инвазивни микози. Тие беа претставени во 2001 година на Меѓународната конференција за антимикробни лекови и хемотерапија (ICAAC, Чикаго), а во 2002 година во печатена форма. Утврдени се критериумите за докажана, веројатна и можна инвазивна микоза, кои се препорачуваат за употреба во клинички и епидемиолошки студии.
Докажана инвазивна микоза поради филаментозни габи: откривање габичен мицелиум во биопсии или аспирира за време на хистолошко или цитолошко испитување или изолација на култура од примероци добиени под асептични услови од стерилен фокус, што, според резултатите од клиничките и радиолошките студии, е поврзано со инфекција, со исклучок на студии на урина и мукозна мембрана.
Докажана инвазивна микоза поради квасец: откривање на клетки од квасец (габи од родот Кандида може да формираат псевдомицелиум или вистински мицелиум) во биопсии или аспирати, со исклучок на примероци од мукозни мембрани, или изолација на култура од примероци добиени под асептични услови од нормално стерилен фокус, што, според резултатите од клиничките и радиолошките студии поврзани со инфекција, со исклучок на примероци од урина, синус и мукозна мембрана, или откривање со микроскопија и специфично боење (во капка мастило, боење со мукикармин) клетки од квасец или позитивен антиген Cryptococcus spp На во цереброспиналната течност.
Фунгамија поради филаментозни габи: изолација на крвни култури на габи, освен Aspergillus spp. и Penicillium spp., вклучувајќи Penicillium marneffei, во комбинација со клинички симптоми на инфективен процес во согласност со изолираниот патоген.
Фунгамија поради габи од квасец: Изолација на крвни култури на Кандида или други квасец кај пациенти со клинички знаци на инфекција поврзани со овој патоген.
Комплекс на дијагностички студии за инвазивни микози
| Истражен биоматеријал | Индикација, користени медиуми, вредност |
| Крв |
Индикации:
перзистентна треска (4-5 дена или повеќе) за време на терапија со антибиотици со широк спектар; втор "бран" на треска за време на антибиотска терапија Собирање крв од вена во вијали за аеробни бактерии * или во селективен медиум за печурки, повторено (2-3 пати во текот на денот со интервал од 1 час) Дијагностичка важност: изолација на квасец, внимателно толкување при изолирање на филаментозни габи, со исклучок на Fusarium spp. |
| Венски катетер |
Индикации:
изолација на квасец од крвта Централниот или периферниот венски катетер се отстранува во сите случаи на секреција на квасец од крвта За миколошко испитување, се користи асептички отстранет дистален сегмент од катетерот долг 5-6 см. Студијата се изведува полу-квантитативно (метод Маки) или квантитативен метод на медиум на Сабурау Дијагностичка важност:
|
| Испуштање на горниот респираторен тракт, спутум, перење од душникот, бронхии, течност за бронхоалвеоларна лаважа |
Индикации:
сомневање за микози предизвикани од филаментозни габи или Cryptococcus neoformans; продолжена треска за време на терапија со антибиотици со широк спектар и неутропенија Микроскопија на примероци со бел калцифлуор (откривање на мицелиум или псевдомицелиум); сеење во среда на Сабуро; определување на антиген Аспергилус во течност за бронхоалвеоларна лаважа во присуство на фокуси во белите дробови карактеристични за инвазивна аспергилоза Дијагностичка важност: Изолација на филаментозни габи или Cryptococcus neoformans |
| Цереброспинална течност |
Индикации:
симптоми на менингитис; откривање на фокус (фокуси) во мозокот со компјутерска или магнетна резонанца; "Церебрални" симптоми поврзани со треска и неутропенија Микроскопија со бел калцифлуор, во капка мастило; одредување на антигенот на Аспергилус, Криптококус; сеење среда Сабуро Дијагностичка важност:
|
| Биопсии, аспирации, перитонеална течност, плеврална течност |
Индикации:
клинички и / или радиолошки знаци на инвазивна микоза; треска за време на терапија со антибиотици со широк спектар. Микроскопија со бел калцифлуор, позлата на средство Сабура Дијагностичка важност:
|
Веројатна инвазивна микозадијагностицирани со комбинација на следниве критериуми:
една особина од категоријата микробиолошки критериуми;
еден знак од категоријата „значајни“ или два од групата „помалку значајни“ клинички симптоми на инфективниот процес.
Можна инвазивна микозадијагностициран врз основа на комбинација од следниве критериуми:
присуство на барем еден фактор на ризик што го поттикнува развојот на инвазивна микоза;
еден знак од категоријата микробиолошки критериуми или еден знак од категоријата „значајни“ (два од групата „помалку значајни“) клинички симптоми на инфективниот процес.
Концепт " можна инвазивна микоза»Не се препорачува за употреба во клинички испитувања кои ја испитуваат ефективноста на антифунгалните лекови. Овој термин можете да го користите во анализа на емпириска антифунгална терапија, епидемиолошки студии и проучување на фармакоекономијата.
Кај миколошки истражувањаСтерилните аспирати или биопсии ја земаат предвид не само изолацијата на габичната култура, туку и откривањето на мицелиум или псевдомицелиум со микроскопија. Во хистолошките препарати, Aspergillus е тешко да се разликува од Fusarium spp., Sceclosporium apiospermum и некои други филаментозни габи. За диференцијална дијагноза, треба да се спроведе имунохистохемиска студија со антитела кон Аспергилус.
Изолација на габи од квасецод крв барем во една студија припаѓа на категоријата "докажана" инвазивна микоза и е апсолутна индикација за назначување системски антимикотици кај пациенти со неутропенија. Фреквенцијата на откривање габи од квасец од крвта е мала, дури и со дисеминирана кандидијаза, тоа е 35-50%.
Спроведување повторени крвни културија зголемува веројатноста за добивање позитивни резултати.
Друго толкувањерезултати во случај на откривање на филаментозни габи во крвта. Високата фреквенција на изолација на филаментозни габи е карактеристична за Fusarium spp. и изнесува 40-60%. Аспергилус ретко се наоѓа и се смета за контаминација во повеќето случаи, со исклучок на Аспергилус тереус.
Истакнување Aspergillus terreusод крвта на пациенти со хемобластоза може да укаже на вистински аспергилом, и во присуство на клинички симптоми на инфекција, тоа е основа за назначување антимикотици.
Критериуми за инвазивна микоза
| Индекс | Критериуми |
| Фактори кои предизвикуваат појава на инвазивна микоза (макроорганизам) | Неутропенија (< 0,5*109/л в течение 10 дней)
Постојана треска повеќе од 96 часа со антибиотска терапија со широк спектар Температура на телото над 38 ° C или под 36 ° C и било кој од следните предиспонирачки знаци: продолжена неутропенија (повеќе од 10 дена) во претходните 60 дена, интензивна имуносупресивна терапија во последните 30 дена, докажана или веројатна инвазивна микоза во претходните период неутропенија или СИДА Симптоми на GVHD, особено тешки случаи (II степен) или екстензивна хронична болест Долготрајна (повеќе од 3 недели) употреба на глукокортикоиди во последните 60 дена |
| Микробиолошки знаци | Изолација на култура на филаментозни габи (вклучувајќи Aspergillus spp., Fusaruim spp., Sceclosporium spp. И зигомицети) и Cryptococcus neqformans од спутум или бронхоалвеоларна течност за лаважа Позитивни резултати од култура или цитолошки преглед (директна микроскопија) за откривање на филаментозни габи од аспирати на параназалните синуси Откривање на филаментозни габи или Cryptococcus neoformans со цитологија / директна микроскопија од спутум или течност за бронхоалвеоларна лаважа Аспергилус антиген позитивен во течност за бронхоалвеоларна лаважа, цереброспинална течност и примероци од крв (најмалку два) Позитивен антиген на криптокок во примероци од крв Откривање со цитолошко испитување или директна микроскопија на габични елементи во нормално стерилни примероци од течност (на пример, Cryptococcus spp. Во цереброспинална течност) Два позитивни резултати од студии за откривање на култура на габични габи во урината во отсуство на уринарен катетер Кандида кристали во урината во отсуство на уринарен катетер Изолација на Candida spp. од крвни култури |
|
Клинички знаци
Долниот респираторен тракт |
Мора да биде поврзан со локусот од кој се земаат примероци за микробиолошко испитување Било кој од следниве типови на нови белодробни инфилтрати на КТ: симптом на ореол, симптом на полумесечина, празнина со области на консолидација * Симптоми на инфекција на долниот респираторен тракт (кашлица, болка во градите, хемоптиза, диспнеа), шум на плеврално триење, секој нов инфилтрат што не е вклучен во знаците на висока тежина; плеврален излив |
| Горниот респираторен тракт Знаци од големо значење Знаци од помала важност |
Радиолошки знаци на инвазивна синусна инфекција (ерозија на wallид или ширење на инфекција во соседните структури, екстензивно уништување на коските на черепот) Течење на носот, назална конгестија, улцерација на носната слузница, епистакса, периорбитален едем, болка во горната вилица, црна некротична улцерација или перфорација на тврдото непце |
| централен нервен систем Знаци од големо значење Знаци од помала важност |
Знаци на Х-зраци за сомневање за инфекција на ЦНС (мастоидитис или друг параменегеален фокус, екстрадурален емпием, повеќекратни лезии во мозокот или 'рбетниот мозок) Фокусни невролошки симптоми и знаци, вклучувајќи фокални напади, хемипареза; нарушувања на свеста, менингеални симптоми, прекршувања на биохемискиот состав на цереброспиналната течност и неговиот клеточен состав (во отсуство на други патогени, според културата и микроскопија, во отсуство на туморски клетки) |
Кај откривање во крвтаили други стерилни биосупстрати на габи од квасец, императив е да се идентификуваат видовите и да се утврди чувствителноста на антифунгални лекови, при изолирање на филаментозни (мувла) габи - само идентификација на видовите, чувствителноста не е одредена.
Во клинички вежбањечувствителноста на филаментозните габи не се испитува поради несовршени стандарди за одредување на чувствителноста на таквите габи на антимикотици. Покрај тоа, само една студија покажа корелација помеѓу чувствителноста на Aspergillus spp. и резултатите од третманот на инвазивна аспергилоза кај пациенти со хемобластоза. Ниту една од студиите што се спроведени оттогаш не добила слични резултати.
Неодамна, почнаа да се појавуваат изолирани извештаи за формирање стекната отпорност на габите А. fumigatus на итраконазол, вориконазол.
Идентификација на габи на видови, особено оние добиени од стерилни локуси, е неопходна, пред с, за избор на антимикотик и за соодветна антифунгална терапија. Така, Candida krusei се отпорни на флуконазол и помалку чувствителни од другите видови квасец на амфотерицин Б; Aspergillus terreus, Scedosporium apiospermum (Pseudallescheria boydii), Trichosporon beigelii, Scopulariopsis spp. отпорен на амфотерицин Б; Мукоралите се отпорни на итраконазол, вориконазол, Кандида глабрата покажува дозно-зависна чувствителност на флуконазол, и при изолација на овој тип габи, дури и чувствителни соеви, дозата на флуконазол треба да се зголеми (возрасните се препишуваат 800 мг наместо 400 мг); Candida lusitaniae се отпорни на амфотерицин Б.
Идентификација на габи на видовиИсто така е важно за спроведување на епидемиолошка анализа во болница - одредување на предизвикувачките агенси на појава на инфекција и, ако е можно, извор на инфекција. Опишани се појава на инфекција предизвикана од такви ретки габи како C. lusitaniae, C. krusei, C. lipolytica.
Врз основа идентификација на видови на габиможе да се претпостави инвазивна микоза или габична колонизација на мукозните мембрани. На пример, Aspergillus niger е значително помала веројатност од Aspergillus fumigatus да предизвика инвазивна аспергилоза кај пациенти со акутна леукемија. Изолацијата на Aspergillus niger од течност за бронхоалвеоларна лаважа најчесто се смета за колонизација на респираторниот тракт, а од спутум - како контаминација од воздух и бара дополнителни истражувања за да се потврди дијагнозата на инвазивна аспергилоза.
Врз основа екскреција на филаментозни габиод спутум, бронхоалвеоларна течност, аспират на параназалните синуси, може да се претпостави само инвазивна микоза, не вклучувајќи ја во категоријата „докажано“. Сепак, секогаш треба да се земе предвид откривањето на Аспергилус во спутум, особено Аспергилус фумигатус или Аспергилус флавус, кај неутропени пациенти, приматели на алогена коскена срцевина. Ова бара повторено миколошко испитување и компјутерска томографија на белите дробови. Значи, со неутропенија, веројатноста за откривање на инвазивна аспергилоза во случај на позитивна култура на Aspergillus spp. во спутум е 80%.
Истакнување Криптокок неоформенскај пациенти со ослабен имунитет од респираторниот тракт (перење, перење) е дијагностички значаен. Ако идентификацијата на габи од квасец од течности добиени од респираторниот тракт (лаважа од душникот, бронхиите, бронхоалвеоларна лаважа) на имунокомпромитирани пациенти не е задолжителна, тогаш е неопходен скрининг за откривање на Cryptococcus neoformans од овие примероци.
Откривање на кандида во уринатакај пациенти со неутропенија и треска, обично се смета за манифестација на дисеминирана кандидијална инфекција.
Навремено дијагностикаинвазивно успешно користеше комерцијален тест за откривање на циркулацијата на специфичниот антиген на габите Aspergillus spp. галактомана (полисахарид растворлив во вода компонента на габичниот клеточен wallид).
Галактоманможе да се одреди со два методи: методот на латекс аглутинација (Pastorex Aspergillus, BioRAD) и имуносорбентна анализа поврзана со ензими (Platelia Aspergillus, BioRAD).
Предноста ензимски имуноанализае долниот праг на чувствителност за одредување на нивото на галактоман во крвта - 1 ng / ml или помалку, и со помош на латекс аглутинација - 15 ng / ml. Дефиницијата за галактоманција во крвта (во најмалку 2 примероци), цереброспинална течност, бронхоалвеоларна лаважа е од дијагностичка вредност. Чувствителноста на имуносорбентната анализа поврзана со ензими е околу 90%, специфичноста е 90-99%; кај алогените приматели на коскената срцевина, овие индикатори се пониски и еднакви на 60-70%и 80-90%, соодветно, поради профилактичка употреба на антифунгални лекови (антимикотиците го намалуваат прагот на галактоман).
Во 40% од случаите, откривање галактомансијаво крвта, тоа е пред манифестациите на инвазивна аспергилоза, утврдени со компјутерска студија на белите дробови, а во 70% е пред клиничките симптоми на инфекција.
Дијагностичка вредност на тестот за откривање антиген Аспергилусима во случај студијата да се спроведува постојано. Определување на антигенот Аспергилус во крвта треба да се спроведе во случај на треска за време на третманот со антибиотици со широк спектар кај пациенти со неутропенија 2 пати неделно; со пневмонија што се јавува или перзистира во позадина на антибиотска терапија; кога се наоѓаат фокуси во ткивото на белите дробови (компјутерска томографија).
Главните методи во етиолошката лабораториска дијагноза на микози до денес продолжуваат да бидат класични методи, вклучувајќи микроскопија на материјалот, изолација на чиста култура на патогенот со последователна идентификација. Имунолошките дијагностички методи се од второстепено значење. Тие се користат за идентификување на најзначајните патогени: патогени диморфни габи, како и предизвикувачки агенси на криптококоза, кандидијаза и аспергилоза. Методите за индикација на гени (верижна реакција полимераза), исто така, имаат ограничена примена поради нивната недостаток на специфичност, но главно се користат во дијагнозата на длабоки и опортунистички микози.
Материјал за истражување во лабораториска дијагноза на микози, во зависност од формата на болеста, може да бидат: кожата и нејзините додатоци (коса, нокти), испуштање рани и фистули, спутум, крв, цереброспинална течност и урина, биопсии на ткива. Точноста на земање патолошки материјал во голема мера е одредена од ефективноста на понатамошните лабораториски истражувања. Во случај на лезии на кожата, материјалот се избира најчесто со стружење или користење на леплива лента (главно за површни форми) пред третманот од свежи, но целосно развиени фокуси долж периферијата, каде што се наоѓаат најизводливите патогени.
При откривање на дерматофитни габи, косата е исклучително информативен материјал, бидејќи природата на лезијата на косата овозможува да се идентификува патогенот. Во некои случаи, употребата на светилка Вуд помага да се одреди фокусот на лезијата. Зафатената коса, заедно со вагата, се отстранува со пинцета за епилација. Во хронична трихофитоза со црна точка, косата се отстранува од кожата со игла за сечење.
Ноктите се земаат по сите слоеви, сечење со остар скалпел или ножици. Земањето примероци со стоматолошка вежба е поефикасно. Во случај на лезии на кандидијаза, материјалот се избира со стружење од ролерот за нокти. Избраниот материјал се доставува до лабораторијата во темни хартиени кеси за да се избегне сушење и контаминација со надворешна микрофлора. Материјалот што содржи гној се испорачува во стерилни бактериски отпечатоци или садови од Петри. Спутумот се собира во стерилен сад. Испитувањето на спутумот треба да се изврши не подоцна од 2 часа по собирањето. Кога периодот на студирање е продолжен, примероците треба да се чуваат во фрижидер на + 4 ° С, инаку може да се појават дијагностички грешки поврзани со појава на псевдомецелијални форми на клетки од квасец.
Крвта и цереброспиналната течност се собираат асептично. Сеење крв се изведува во течен медиум Сабура. За да се исклучи контаминација на примероци од крв, тие се преиспитуваат. Цереброспиналната течност се центрифугира, а талогот се користи за микроскопија и инокулација.
Урината се собира наутро во стерилен сад, додека е неопходно да се избегне контаминација на материјалот од микрофлората на кожата на перинеумот. Уринокултурата се изведува со употреба на квантитативни методи на култура.
Во дијагнозата на микози, препаратите се користат и од мајчин материјал и обоени. При испитување на неизвалканите препарати, густиот материјал е прелиминарно расчистен (мацериран) со 10-30% раствор на КОХ (може да се користат раствори на диметил сулфоксид), а потоа се микроскопираат со методот „смачкана капка“. За да се додаде контраст, препаратите се обоени со воден раствор на метиленско сино.
Боење на фиксни брисеви се изведува на различни начини: според Грам, метиленско сино, според Романовски - Гимеса. Последниот метод ви овозможува да видите мали клетки од квасец и фази на фагоцитоза. За криптококи, користете дамка со мастило, дамка од мукакармин Саутгејт. Печурки што содржат меланин (темна боја), на пример Кладофиалофора бандана, обоено со Маса - Фонтана (боја на меланин, кој е дел од клеточниот ид). Флуоресцентни серуми се користат во дијагноза на патогени на длабоки микози, патогени на дерматофитоза, габи од родот Кандида.
Изолацијата на чистата култура на патогенот овозможува да се воспостави генеричка и видна припадност на габата, да се проучат неговите својства и чувствителност на антимикробни лекови. За изолација и идентификација на габи, се користат густи и течни култури на Сабура, кантарион. Овие средини обезбедуваат раст на повеќето патогени и опортунистички габи. Покрај тоа, средината Сабура (слика 8.2) ги стимулира процесите на формирање пигмент кај габите, што е важно за идентификација.
За да се потисне растот на заразни бактерии, антибиотиците се додаваат во медиумите: хлорамфеникол, стрептомицин, пеницилин, тетрациклин. За изолација на каприциозни патогени габи, се користат медиуми збогатени со крв и екстракт од церебрално срце. Специјални медиуми се користат за одгледување и идентификација на габи: медиум на Чапек - за формирање конидии при идентификување на мувли, агар од компир (компир -морков), агар од ориз - за идентификување на видовите на раст и добивање кламидоспори при идентификување на габи од родот Кандида, морков (зеленчук) агар - за добивање типични колонии од габична култура Трихофитон шонлеини,Медиумот на Кашкин - за изолација на габи кои формираат пигмент. Исто така, се користат диференцијални дијагностички средини, на пример, за да се идентификува Ц. албиканс -хромогени медиуми или медиуми кои ви овозможуваат да ја одредите активноста на фосфолипазата на габата.
Времето на инкубација на печурки се движи од неколку дена до 1 месец или повеќе. Ако постои сомневање за патогени диморфни габи, култивацијата се изведува 8 недели за да се даде негативен одговор.
Инокулациите се вршат на медиум истурен во епрувети, вијали и садови од Петри. Инокулацијата на материјалот на габите од дерматофит се изведува истовремено на неколку цевки со медиумот. Материјалите за кои постои сомневање дека имаат мувла (спутум) се инокулираат на 3 точки и се инкубираат на 28 и 37 ° С. За да се реши прашањето за отсуство на контаминација при земање мостри од материјал, се вршат контролни култури на воздух за содржината на мувлите во лабораториските простории и одделенија каде што се наоѓаат пациентите.
Кога се одгледуваат габи во миколошка лабораторија, се почитуваат безбедносни мерки, слични на оние во бактериолошките лаборатории. Со цел да се избегне алергизација, персоналот врши работа со калапи и микотоксини во простории со кутии во газа завои или во кутии за маса со качулка. Работата со култури кои припаѓаат на II група на патогеност (патогени диморфни габи) е можна само во специјализирани лаборатории.
Идентификувањето на габичните видови се врши врз основа на комплекс од културни, морфолошки и други карактеристики. Првите вклучуваат морфологија на колонијата, нејзината боја и големина кога се одгледуваат на специјални медиуми, структурата на работ и центарот, природата на површината, присуството и природата на репродуктивните органи, втората - карактеристиките на микроскопските структурата на мицелиумот, структурата, обликот и големината на репродуктивните органи - конидиофори, конидии, кламидоспори, артроспори, итн.
Габите формираат разни видови колонии на цврсти хранливи материи. Научниците од институтот Г. Вентер (САД), земајќи ја предвид способноста на габите да испуштаат пигментни супстанции во медиумот, создадоа „новогодишна елка“ во хранливиот медиум (слика 8.3).
Ориз. 8.3. „Елка“ од печурки (горе: Talaromyces stipitatus; дрво Aspergillus nidulans;украси: Penicillium marneffei;трупец: Aspergillus terreus)
Ензимските и асимилативните способности на културите се од големо значење во идентификацијата на квасецот (габички слични на квасец). Во моментов, комерцијалните системи за тестирање се користат за идентификување на вообичаени габи - предизвикувачки агенси на болести кај луѓето и животните: BBL Mycotube, API 20C bio Merieux, итн.
Се вчитува ...