Kegiatan enzim mikrosomal hepatosit menghalang. Enzim hati. Peningkatan aktiviti dadah

Apabila diedarkan di dalam badan, sebilangan LB dapat dikekalkan sebahagiannya dan terkumpul di pelbagai tisu. Ini terutama disebabkan oleh pengikatan ubat yang boleh dibalikkan kepada protein, fosfolipid dan nukleoprotein sel. Proses ini dipanggil escrow. Kepekatan bahan di tempat pemendapannya (di depot) boleh sangat tinggi. Dari depot, bahan tersebut secara beransur-ansur dilepaskan ke dalam darah dan diedarkan ke organ dan tisu lain, termasuk sampai ke lokasi tindakannya. Banyak LP mengikat protein plasma darah. Sebatian berasid yang lemah (ubat anti-radang bukan steroid, sulfonamida) mengikat terutamanya pada albumin (pecahan protein plasma terbesar), dan asas lemah - kepada glikoprotein asid -1 dan beberapa protein plasma darah yang lain. Ubat yang berkaitan dengan protein tidak menunjukkan aktiviti farmakologi. Tetapi kerana pengikatan ini dapat diterbalikkan, sebahagian zat selalu dilepaskan dari kompleks dengan protein (ini berlaku apabila kepekatan zat bebas dalam plasma darah menurun) dan mempunyai kesan farmakologi. Biotransformasi (metabolisme)- perubahan struktur kimia bahan perubatan dan sifat fizikokimia mereka di bawah tindakan enzim badan. Fokus utama proses ini adalah penukaran bahan lipofilik, yang mudah diserap dalam tubulus ginjal, menjadi sebatian polar hidrofilik, yang dikeluarkan dengan cepat oleh buah pinggang (tidak diserap semula dalam tubulus ginjal). Dalam proses biotransformasi, sebagai peraturan, terdapat penurunan aktivitas (toksisitas) bahan awal.

Biotransformasi ubat lipofilik terutamanya berlaku di bawah pengaruh enzim hati yang dilokalisasi dalam membran retikulum endoplasma hepatosit. Enzim-enzim ini disebut mikrosom kerana mereka dikaitkan dengan serpihan subselular kecil retikulum endoplasma halus (mikrosom), yang terbentuk semasa homogenisasi tisu hati atau tisu organ lain dan dapat diasingkan dengan sentrifugasi (diendapkan dalam apa yang disebut "mikrosomal" pecahan).

Dalam plasma darah, serta di hati, usus, paru-paru, kulit, selaput lendir dan tisu lain, terdapat enzim bukan mikrosom yang dilokalisasi dalam sitosol atau mitokondria. Enzim ini dapat mengambil bahagian dalam metabolisme zat hidrofilik.

Terdapat dua jenis metabolisme ubat utama:

tindak balas bukan sintetik (transformasi metabolik);

· Reaksi sintetik (konjugasi).

Bahan ubat boleh mengalami biotransformasi metabolik (dalam kes ini, bahan yang disebut metabolit terbentuk), atau konjugasi (konjugat terbentuk). Tetapi kebanyakan LB pertama kali dimetabolisme dengan penyertaan reaksi bukan sintetik dengan pembentukan metabolit reaktif, yang kemudiannya menjadi reaksi konjugasi. transformasi metabolik merangkumi tindak balas berikut: pengoksidaan, pengurangan, hidrolisis. Banyak sebatian lipofilik mengalami pengoksidaan di hati di bawah pengaruh sistem mikrosom enzim yang dikenali sebagai oksidase fungsi campuran, atau monooksigenase. Komponen utama sistem ini adalah sitokrom P-450 reduktase dan sitokrom P-450, sebuah hemoprotein yang mengikat molekul ubat dan oksigen di pusat aktifnya. Reaksi ini berlaku dengan penyertaan NADPH. Akibatnya, satu atom oksigen melekat pada substrat (ubat) dengan pembentukan kumpulan hidroksil (tindak balas hidroksilasi). Pemulihan bahan ubat boleh berlaku dengan penyertaan enzim mikrosomal (kloramfenikol) dan bukan mikrosom (klorida hidrat, naloxone). Hidrolisis bahan ubat dilakukan terutamanya oleh enzim bukan mikrosom (esterase, amidases, phosphatases) dalam plasma darah dan tisu. Dalam kes ini, kerana penambahan air, terdapat pecahan ikatan eter, amida dan fosfat dalam molekul bahan ubat. Ester menjalani hidrolisis - asetilkolin, suxamethonium (dihidrolisiskan dengan penyertaan kolinesterase), amida (procainamide), asid asetilsalisilat. Metabolit yang terbentuk akibat tindak balas bukan sintetik mungkin dalam beberapa kes mempunyai aktiviti yang lebih tinggi daripada sebatian induk. Contoh peningkatan aktiviti ubat semasa metabolisme adalah penggunaan prekursor ubat (prodrugs). Prodrug tidak aktif secara farmakologi, tetapi di dalam badan mereka diubah menjadi bahan aktif. Dalam proses tindak balas biosintetik (konjugasi), residu sebatian endogen (asid glukuronik, glutathione, glisin, sulfat, dll.) Atau kumpulan kimia yang sangat polar (asetil, kumpulan metil) ditambahkan ke pengelompokan fungsional molekul ubat atau metabolitnya . Reaksi ini diteruskan dengan penyertaan enzim (terutama transferase) hati, serta enzim tisu lain (paru-paru, ginjal). Enzim dilokalisasikan dalam mikrosom atau dalam pecahan sitosolik. Di bawah pengaruh ubat-ubatan tertentu (phenobarbital, rifampicin, carbamazepine, griseofulvin), induksi (peningkatan kadar sintesis) enzim hati mikrosomal dapat berlaku. Akibatnya, dengan pemberian ubat-ubatan lain secara serentak (misalnya, glukokortikoid, kontraseptif oral) dengan pemicu enzim mikrosom, kadar metabolisme yang terakhir meningkat dan kesannya menurun. Dalam beberapa kes, kadar metabolisme inducer itu sendiri dapat meningkat, akibatnya kesan farmakologinya (karbamazepine) berkurang.

Jalan keluar ubat, kepentingannya untuk farmakoterapeutik dan kesan sampingan ubat. Pelepasan ubat oleh kelenjar air liur ke rongga mulut.

Interaksi yang mengurangkan kepekatan bahan ubat termasuk:

Penurunan penyerapan pada saluran gastrousus.

Induksi enzim hati.

Pengurangan pengambilan sel.

I. Penurunan penyerapan pada saluran gastrousus.

II. Induksi enzim hati.

Sekiranya jalan utama penghapusan ubat adalah metabolisme, maka percepatan metabolisme menyebabkan penurunan konsentrasi ubat di organ sasaran. Sebilangan besar ubat dimetabolisme di hati, organ dengan jisim sel yang besar, aliran darah tinggi dan kandungan enzim. Reaksi pertama dalam metabolisme banyak ubat dikatalisis oleh enzim mikrosom hati yang berkaitan dengan sitokrom P450 dan terkandung dalam retikulum endoplasma. Enzim ini mengoksidakan molekul ubat melalui pelbagai mekanisme - hidroksilasi cincin aromatik, N-demetilasi, O-demetilasi, dan sulfooksidasi. Molekul produk tindak balas ini biasanya lebih polar daripada molekul pendahulunya, dan oleh itu lebih mudah dikeluarkan oleh buah pinggang.

Ekspresi beberapa isoenzim sitokrom P450 diatur, dan kandungannya di hati dapat meningkat di bawah pengaruh ubat-ubatan tertentu.

Bahan khas yang mendorong induksi enzim mikrosom hati adalah phenobarbital. Barbiturat lain melakukan perkara yang sama. Kesan induktif phenobarbital sudah nyata pada dos 60 mg / hari.

Induksi enzim hati mikrosomal juga disebabkan oleh rifampicin, carbamazepine, phenytoin, glutethimide; ia diperhatikan pada perokok, apabila terdedah kepada racun serangga yang mengandung klorin seperti DDT dan penggunaan alkohol secara berterusan.

Phenobarbital, rifampicin dan pemicu enzim hati mikrosomal yang lain menyebabkan penurunan kepekatan serum banyak ubat, termasuk warfarin, quinidine, mexiletine, verapamil, ketoconazole, itraconazole, cyclosporine, dexamethasone, methylprednisolone, prednisolone, steroid dan metirapone. Interaksi ini sangat penting klinikal. Oleh itu, jika pesakit dengan latar belakang antikoagulan tidak langsung mencapai tahap pembekuan darah yang tepat, tetapi pada masa yang sama dia mengambil beberapa pengaruh enzim mikrosom hati, maka jika yang terakhir dibatalkan (misalnya, semasa pembuangan), kepekatan serum antikoagulan akan meningkat. Akibatnya, pendarahan mungkin berlaku.

Terdapat perbezaan individu yang ketara dalam indibilitas enzim dalam metabolisme ubat. Pada sesetengah pesakit, fenobarbital meningkatkan metabolisme ini secara mendadak, sementara yang lain hampir tidak berpengaruh.

Phenobarbital tidak hanya mendorong induksi beberapa isoenzim sitokrom P450, tetapi juga meningkatkan aliran darah hepatik, merangsang rembesan hempedu dan pengangkutan anion organik dalam hepatosit.

Beberapa bahan perubatan juga dapat meningkatkan konjugasi bahan lain dengan bilirubin.

III. Pengurangan pengambilan sel.

Derivatif guanidine yang digunakan untuk rawatan hipertensi arteri (guanethidine dan guanadrel) dipindahkan ke neuron adrenergik kerana pengangkutan aktif biogenik amina. Peranan fisiologi pengangkutan ini adalah pengambilan semula mediator adrenergik, tetapi dengan pertolongannya banyak sebatian yang serupa secara struktural, termasuk turunan guanidin, juga dapat dibawa melawan kecerunan kepekatan.

Biotransformasi (metabolisme) adalah perubahan struktur kimia bahan perubatan dan sifat fizikokimia mereka di bawah tindakan enzim badan. Fokus utama proses ini adalah transformasi bahan lipofilik, yang mudah diserap dalam tubulus ginjal, menjadi sebatian polar hidrofilik, yang cepat dikeluarkan oleh buah pinggang (tidak diserap semula dalam tubulus ginjal). Dalam proses biotransformasi, sebagai peraturan, terdapat penurunan aktivitas (toksisitas) bahan awal.
Biotransformasi ubat lipofilik terutamanya berlaku di bawah pengaruh enzim hati yang dilokalisasi dalam membran retikulum endoplasma hepatosit. Enzim ini dipanggil mikrosom kerana
mereka ternyata dikaitkan dengan serpihan subselular kecil retikulum endoplasma halus (mikrosom), yang terbentuk semasa homogenisasi tisu hati atau tisu organ lain dan dapat diasingkan dengan sentrifugasi (disimpan dalam pecahan yang disebut "mikrosom" ).
Dalam plasma darah, serta di hati, usus, paru-paru, kulit, selaput lendir dan tisu lain, terdapat enzim bukan mikrosom yang dilokalisasi dalam sitosol atau mitokondria. Enzim ini dapat mengambil bahagian dalam metabolisme zat hidrofilik.
Terdapat dua jenis metabolisme utama bahan ubat (peringkat):
tindak balas bukan sintetik (transformasi metabolik);
tindak balas sintetik (konjugasi).

biotransformasi (reaksi metabolik fasa 1), berlaku di bawah tindakan enzim - pengoksidaan, pengurangan, hidrolisis.

konjugasi (reaksi metabolik fasa 2), di mana sisa molekul lain (glukuronik, asid sulfurik, radikal alkil) ditambahkan ke molekul bahan, dengan pembentukan kompleks tidak aktif yang mudah dikeluarkan dari badan dengan air kencing atau tinja.

Di bawah pengaruh ubat-ubatan tertentu (phenobarbital, rifampicin, carbamazepine, griseofulvin), induksi (peningkatan kadar sintesis) enzim hati mikrosomal dapat berlaku. Akibatnya, dengan pemberian ubat-ubatan lain secara serentak (misalnya, glukokortikoid, kontraseptif oral) dengan pemicu enzim mikrosom, kadar metabolisme yang terakhir meningkat dan kesannya menurun. Dalam beberapa kes, kadar metabolisme inducer itu sendiri dapat meningkat, akibatnya kesan farmakologinya (karbamazepine) berkurang.
Sebilangan ubat (cimetidine, chloramphenicol, ketoconazole, ethanol) mengurangkan aktiviti (perencat) metabolisme enzim. Sebagai contoh, cimetidine adalah penghambat pengoksidaan mikrosom dan, dengan melambatkan metabolisme warfarin, dapat meningkatkan kesan antikoagulannya dan memprovokasi pendarahan. Bahan terkenal (furanocoumarins) yang terkandung dalam jus limau gedang, yang menghalang metabolisme ubat-ubatan seperti siklosporin, midazolam, alprazolam dan, oleh itu, meningkatkan kesannya. Dengan penggunaan bahan ubat secara serentak dengan pemicu atau penghambat metabolisme, perlu menyesuaikan dos bahan-bahan yang ditetapkan.

12. Cara pengeluaran ubat dari badan, makna, konsep kuota penghapusan, separuh hayat (T 1/2) dan jumlah pelepasan plasma. Ketergantungan tindakan bahan ubat pada laluan perkumuhan, contohnya.

Perkumuhan bahan ubat yang tidak berubah atau metabolitnya dilakukan oleh semua organ perkumuhan (buah pinggang, usus, paru-paru, susu ibu, air liur, kelenjar peluh, dll.).

Organ utama untuk membuang ubat dari badan adalah buah pinggang. Ekskresi ubat oleh buah pinggang berlaku dengan penapisan dan menggunakan pengangkutan aktif atau pasif. Bahan larut lipoid mudah disaring di glomeruli, tetapi di dalam tubul ia diserap secara pasif lagi. Dadah yang kurang larut dalam lipoid diekskresikan lebih cepat dalam air kencing, kerana kurang diserap dalam tubulus ginjal. Reaksi asid dalam air kencing mendorong penghapusan sebatian alkali dan menyukarkan pembuangan asid. Oleh itu, untuk mabuk dengan ubat-ubatan berasid (misalnya, barbiturat), natrium bikarbonat atau sebatian alkali lain digunakan, dan untuk keracunan dengan alkaloid alkali, amonium klorida digunakan. Juga memungkinkan untuk mempercepat penghapusan ubat-ubatan dari tubuh dengan menetapkan ubat diuretik yang kuat, misalnya, diuretik osmotik atau furosemida, dengan latar belakang pengenalan sejumlah besar cecair ke dalam tubuh (diuresis paksa). Perkumuhan basa dan asid dari badan berlaku oleh pengangkutan aktif. Proses ini berlaku dengan perbelanjaan tenaga dan dengan bantuan sistem pembawa enzim tertentu. Dengan mewujudkan persaingan untuk pembawa dengan bahan apa pun, adalah mungkin untuk melambatkan perkumuhan ubat (misalnya, etamida dan penisilin dirembeskan menggunakan sistem enzim yang sama, oleh itu etamid melambatkan perkumuhan penisilin).

Dadah yang kurang diserap dari saluran pencernaan diekskresikan oleh usus dan digunakan untuk gastritis, enteritis dan kolitis (misalnya, astringen, beberapa antibiotik yang digunakan untuk jangkitan usus). Selain itu, ubat-ubatan dan metabolitnya dari sel-sel hati memasuki hempedu dan memasuki usus dengannya, dari mana ia diserap semula, dihantar ke hati, dan kemudian dengan hempedu ke dalam usus (peredaran usus-hepatik), atau dikeluarkan dari badan dengan najis. Rembesan langsung sejumlah ubat dan metabolitnya oleh dinding usus tidak dikecualikan.

Bahan dan gas yang mudah menguap (eter, nitro oksida, kapur barus, dll) diekskresikan melalui paru-paru. Untuk mempercepat pembebasan mereka, perlu meningkatkan jumlah pengudaraan paru.

Banyak ubat yang dapat dikeluarkan dalam susu, terutama basa lemah dan bukan elektrolit, yang harus dipertimbangkan ketika merawat ibu yang menyusu.

Sebilangan bahan perubatan sebahagiannya diekskresikan oleh kelenjar mukosa mulut, memberikan kesan tempatan (misalnya, menjengkelkan) pada laluan perkumuhan. Jadi, logam berat (merkuri, plumbum, besi, bismut), yang dilepaskan oleh kelenjar air liur, menyebabkan kerengsaan pada mukosa mulut, stomatitis dan gingivitis berlaku. Di samping itu, mereka menyebabkan munculnya sempadan gelap di sepanjang pinggiran gingiva, terutama di kawasan gigi karious, yang disebabkan oleh interaksi logam berat dengan hidrogen sulfida dalam rongga mulut dan pembentukan sulfida yang hampir tidak larut. "Sempadan" ini adalah tanda diagnostik keracunan logam berat kronik.

Dengan penggunaan jangka panjang diphenin dan sodium valproate (anticonvulsants), kerengsaan mukosa gingiva boleh menyebabkan gingivitis hipertrofik ("diphenin gingivitis"). Tahap penghapusan sebarang ubat dinilai menggunakan dua ujian utama:

pertama, masa di mana separuh daripada dos ubat kemoterapi yang diberikan dihapuskan ditentukan, iaitu, separuh hayat yang terakhir dijumpai (T 1/2);
kedua, peratusan bahagian dos tunggal ubat yang dihilangkan pada siang hari (pekali, atau kuota, penghapusan) dikira.

Kedua-dua kriteria untuk penghapusan ubat-ubatan tidak stabil, kerana bergantung pada satu set syarat. Di antara yang terakhir, peranan penting diberikan kepada sifat ubat itu sendiri dan keadaan badan. Mereka bergantung pada kadar metabolisme ubat dalam tisu dan cairan tubuh, intensitas perkumuhannya, keadaan fungsi hati dan ginjal, cara pemberian ubat kemoterapi, tempoh dan keadaan penyimpanan, lipoid kelarutan, struktur kimia, dll.
Penghapusan ubat-ubatan yang larut dalam lemak dan ionisasi yang berkaitan dengan protein dilakukan dengan lebih perlahan "daripada penyediaan larut dalam air, terionisasi, tidak berkaitan dengan protein. Dengan pengenalan dos ubat yang tinggi, penghapusannya diperpanjang, yang disebabkan oleh intensifikasi semua proses yang terlibat dalam pengangkutan, pengedaran, metabolisme dan pembebasan ubat kemoterapi.
Penghapusan kebanyakan ubat pada kanak-kanak jauh lebih rendah daripada pada orang dewasa. Ia terutamanya melambatkan bayi pramatang pada bulan-bulan pertama kehidupan. Enzimopati kongenital dan diperoleh (kekurangan glukosa-6-fosfat dehidrogenase, N-asetiltransferase, dan lain-lain), penyakit hati dan ginjal, yang berlaku dengan kekurangan fungsinya, memperpanjang penghapusan secara tajam.
Faktor lain juga mempengaruhi kadar penghapusan: jantina pesakit, suhu badan, bioritma fisiologi, anak tidur di tempat tidur, dan lain-lain. Data mengenai jangka hayat ubat membolehkan doktor menetapkan dos tunggal dan harian ubat tertentu, kekerapan pemberiannya.

sumber

Enzim (enzim) adalah protein khusus yang terlibat dalam tindak balas biokimia, dapat mempercepat atau memperlambat perjalanannya. Hati menghasilkan sebilangan besar sebatian tersebut kerana peranannya yang penting dalam metabolisme lemak, protein dan karbohidrat. Aktiviti mereka ditentukan oleh hasil ujian darah biokimia. Kajian sedemikian penting untuk menilai keadaan hati dan untuk diagnosis banyak penyakit.

Enzim hati adalah sekumpulan protein aktif secara biologi yang dapat dihasilkan secara eksklusif oleh sel-sel organ ini. Mereka boleh dijumpai pada membran dalam atau luar, sel dalam, atau dalam darah. Bergantung pada peranan enzim, ia dibahagikan kepada beberapa kategori:

hidrolase - mempercepat pemecahan sebatian kompleks menjadi molekul;
synthetases - mengambil bahagian dalam tindak balas sintesis sebatian biologi kompleks dari bahan mudah;
transferase - terlibat dalam pengangkutan molekul merentasi membran;
oxidoreductases - adalah keadaan utama untuk tindak balas redoks normal pada tahap sel;
isomerase - diperlukan untuk proses mengubah konfigurasi molekul sederhana;
lyases - membentuk ikatan kimia tambahan antara molekul.

Penyetempatan enzim hati bergantung pada fungsinya dalam proses metabolisme sel. Jadi, mitokondria terlibat dalam pertukaran tenaga, retikulum endoplasma berbutir mensintesis protein, yang halus - lemak dan karbohidrat, protein-hidrolase ada di lisosom. Semua enzim yang dihasilkan oleh hati dapat dijumpai di dalam darah.

Bergantung pada fungsi apa yang dilakukan oleh enzim dan di mana ia berada di dalam badan, ia dibahagikan kepada 3 kumpulan besar:

sekretori - setelah rembesan oleh sel hati, mereka memasuki aliran darah dan berada di sini dalam kepekatan maksimum (faktor pembekuan darah, kolinesterase);
penunjuk - biasanya terkandung di dalam sel dan dilepaskan ke dalam darah hanya apabila ia rosak, oleh itu ia dapat berfungsi sebagai petunjuk tahap kerosakan hati sekiranya penyakitnya (ALT, AST dan lain-lain);
perkumuhan - diekskresikan dari hati dengan hempedu, dan peningkatan tahap mereka dalam darah menunjukkan pelanggaran proses ini.

Setiap enzim penting untuk mendiagnosis keadaan hati. Kegiatan mereka ditentukan sekiranya disyaki adanya patologi hati utama dan untuk menilai tahap kerosakan pada tisu hati. Untuk mendapatkan gambaran yang lebih lengkap, perlu juga untuk mendiagnosis enzim pencernaan, enzim saluran gastrointestinal, pankreas dan saluran empedu.

Biokimia darah adalah tahap penting dalam diagnosis penyakit hati. Semua proses patologi dalam organ ini boleh berlaku dengan fenomena kolestasis atau sitolisis. Proses pertama adalah pelanggaran aliran keluar hempedu, yang dirembeskan oleh hepatosit. Sekiranya terdapat gangguan lain, pemusnahan unsur sel yang sihat berlaku dengan pembebasan kandungannya ke dalam darah. Dengan adanya dan kuantiti enzim hati dalam darah, adalah mungkin untuk menentukan tahap penyakit dan sifat perubahan patologi pada organ saluran hepatobiliari.

Sindrom kolestasis (kesukaran dalam rembesan hempedu) menyertai penyakit hati yang meradang, gangguan rembesan hempedu dan patologi saluran empedu. Fenomena ini menyebabkan perubahan berikut dalam analisis biokimia:

enzim perkumuhan meningkat;
komponen empedu juga meningkat, termasuk bilirubin, asid hempedu, kolesterol dan fosfolipid.

Aliran keluar hempedu dapat terganggu oleh tekanan mekanikal pada saluran empedu (tisu yang meradang, neoplasma, batu), penyempitan lumennya dan fenomena lain. Kompleks perubahan ciri parameter darah menjadi asas untuk kajian yang lebih terperinci mengenai keadaan saluran empedu dan saluran empedu.

Sitolisis (pemusnahan hepatosit) boleh berlaku dengan hepatitis berjangkit dan tidak berjangkit atau dengan keracunan. Dalam kes ini, kandungan sel dilepaskan, dan enzim penunjuk muncul di dalam darah. Ini termasuk ALT (alanine aminotransferase), AST (aspartate aminotransferase), LDH (lactate dehydrogenase), dan aldolase. Semakin tinggi indikator sebatian ini dalam darah, semakin besar tahap kerosakan pada parenkim organ.

Fosfatase alkali, yang terdapat dalam darah, mungkin bukan sahaja berasal dari hepatik. Sebilangan kecil enzim ini dihasilkan oleh sumsum tulang. Seseorang boleh bercakap mengenai penyakit hati jika terdapat peningkatan serentak dalam tahap alkali fosfatase dan gamma-GGT. Selain itu, peningkatan indeks bilirubin dapat dikesan, yang menunjukkan patologi pundi hempedu.

GGT biasanya meningkat dengan alkali fosfatase. Petunjuk ini menunjukkan perkembangan kolestasis dan kemungkinan penyakit pada sistem empedu. Sekiranya enzim ini meningkat secara terpisah, terdapat risiko kerosakan kecil pada tisu hati pada tahap awal alkoholisme atau keracunan lain. Dengan patologi yang lebih serius, terdapat peningkatan enzim hati secara serentak.

ALT (alanine aminotransferase) adalah enzim yang paling spesifik di hati. Ia terdapat di sitoplasma dan organ lain (buah pinggang, jantung), tetapi di dalam parenkim hepatik ia terdapat dalam kepekatan yang paling besar. Peningkatan darahnya dapat menunjukkan pelbagai penyakit:

hepatitis, mabuk dengan kerosakan hati, sirosis;
infarksi miokardium;
penyakit kronik sistem kardiovaskular, yang ditunjukkan oleh nekrosis kawasan tisu berfungsi;
kecederaan otot, kecederaan atau lebam;
pankreatitis teruk - keradangan pankreas.

Dicadangkan ubat yang meningkatkan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia. Ia boleh digunakan dalam rawatan dan pencegahan pelbagai keracunan dengan zat, biotransformasi yang bergantung pada aktiviti enzim sistem pengoksidaan. Ximedon (N-α-hidroksietil) -4,6-dimetil-1,2-dihydro-2-oxopyrimidine), yang sebelumnya dikenali sebagai ubat dengan spektrum tindakan biologi yang luas dan ketoksikan rendah, telah dicadangkan sebagai agen tersebut. Xymedon meningkatkan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia, dan kesan mendorongnya setanding dengan phenobarbital. 2 tab.

Penemuan ini berkaitan dengan perubatan, khususnya ubat yang meningkatkan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia, dan dapat digunakan dalam rawatan dan pencegahan pelbagai penyakit dan keracunan dengan zat, biotransformasi yang bergantung pada aktiviti enzim pengoksidaan sistem.

Seperti yang anda ketahui, kadar penyingkiran dari badan bahan perubatan yang menjalani biotransformasi bergantung pada aktiviti sistem enzim yang bertanggungjawab untuk metabolisme jenis ini. Salah satu sistem enzim utama yang dilokalisasikan di hati adalah sistem oksidase mikrosom. Antipirin sering digunakan sebagai persediaan ujian untuk menentukan kadar pengoksidaan.

Pada masa ini, sebilangan besar induktor proses pengoksidaan diketahui [Khalilov E.M. Konsep moden mengenai metabolisme ubat dalam badan, Kursus pendek dalam farmakologi molekul, ed. Sergeeva P.V., Institut Perubatan Moscow. N.I Pirogova, Moscow, 1975, 340 p .; Bolshev VN, Induktor dan penghambat enzim metabolisme ubat, Farmakologi dan toksikologi, 1980, No. 3], meningkatkan aktiviti biotransformasi ubat dengan mendorong sintesis oksidase mikrosom.

Antaranya adalah bahan yang meningkatkan aktiviti biotransformasi ubat dengan mendorong sintesis oksidase mikrosomal:

a) kumpulan fenobarbital, rifampisin, diphenhydramine, diazepam, diphenin, nitrogliserin (autoinducer);

b) hidrokarbon poliklik (karsinogenik);

c) hormon steroid;

dan bahan yang mengurangkan aktiviti biotransformasi ubat dalam retikulum endoplasma hati:

a) perencat monoamine oksidase;

b) etazol, kobalt klorida, penyekat histamin H2, kloramfenikol, penyekat β, eritromisin, amidaron, lidokain.

Telah diketahui bahawa induktor yang digunakan (misalnya, phenobarbital) boleh memberi kesan negatif pada tubuh manusia, menyebabkan rasa mengantuk, ketagihan, dll. [Mashkovsky M.D. Ubat-ubatan. T.2. - M .: Novaya Volna, 2000. - 648 s]

Objektif penemuan yang dituntut adalah ubat baru untuk meningkatkan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia, memperluas senjata ubat-ubatan pemacu yang diketahui.

Hasil teknikalnya adalah meningkatkan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia semasa mengambil ubat xymedon.

Ximedon ialah N- (α-hydroxyethyl) -4,6-dimethyl-1,2-dihydro-2-oxopyrimidine dari formula:

dan merupakan salah satu analog bukan glikosida nukleosida pyrimidine yang paling mudah. Ubat ini mempunyai spektrum tindakan biologi yang luas, ketoksikan xymedon sangat rendah LD 50 - dari 6500 hingga 20,000 mg / kg untuk pelbagai haiwan dengan cara pentadbiran yang berbeza [Izmailov S.G. dan lain-lain.Ximedon dalam amalan klinikal. Nizhniy Novgorod: Rumah penerbitan NGMA 2001]. Dengan perintah Kementerian Kesihatan No. 287 dari 12/07/93, xymedon diluluskan untuk digunakan dalam perubatan dan termasuk dalam daftar ubat-ubatan.

Hasil teknikal penyelesaian yang dicadangkan dicapai dengan menggunakan ubat xymedon dalam dos harian 1.5 gram untuk kursus 7 hari untuk mendorong proses pengoksidaan, yang menjadikannya menjanjikan sebagai ubat yang mampu meningkatkan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia. Tidak ada kesan sampingan semasa menggunakan xymedon.

Kadar pengoksidaan dinilai dengan kaedah yang dikembangkan sebelumnya oleh penulis - menggunakan ujian antipirin yang diubah, di mana kepekatan antipirin dalam air liur ditentukan. Uji oksidasi ubat - antipirin - diresepkan kepada pesakit sekali lisan pada dos 0,6 g [Evgeniev MI, Garmonov S.Yu., Shitova NS, Pogoreltsev V.I. Analisis biofarmaseutikal aktiviti enzimatik sistem metabolik badan // Buletin Universiti Teknologi Negeri Kazan. - 2004. - No. 1-2. - S. 74-81; Garmonov S.Yu., Kiseleva T.A., Salikhov I.G., Evgeniev M.I., Shitova N.S., Polekhina V.I., Pogoreltsev V.I. Penilaian fenotip asetilasi dan pengoksidaan pada pesakit diabetes jenis 2 // jurnal perubatan Nizhny Novgorod. - 2005. - No. 3. - H.29-35.]

Induksi oksidase mikrosom hati manusia oleh xymedon dinyatakan sebagai peratusan relatif terhadap jumlah kumulatif antipirin yang dikeluarkan dengan air liur dalam masa 12 jam selepas pemberian ubat ujian sebelum dan sesudah pengambilan xymedon induksi dalam dos harian 1.5 g selama 7 hari.

Kajian dilakukan dalam sekumpulan 8 sukarelawan yang sihat.

Kaedah untuk menentukan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia.

Antipyrine diberikan kepada sukarelawan sekali lisan pada dos 0.6 g pada waktu pagi ketika perut kosong. Air liur dikumpulkan setiap 3 jam dalam 12 jam selepas mengambil ubat ujian. Dalam sampel air liur setiap jam, kandungan antipirin ditentukan dengan kaedah spektrofotometri. Berdasarkan data yang diperoleh, lengkung kinetik diplotkan, jumlah kumulatif antipirin yang dikeluarkan dengan air liur dalam 12 jam dihitung, jumlah antipirin yang terkandung dalam air liur ditentukan oleh grafik penentukuran.

Xymedon diambil dalam dos harian 1.5 g (3 kali sehari, masing-masing 0,5 g) selama 7 hari sebelum menentukan semula jumlah antipirin dalam air liur. Selepas 7 hari, jumlah antipirin yang dikeluarkan ditentukan lagi dengan kaedah yang dinyatakan di atas (ujian antipirin).

Dengan jumlah 1 - jumlah kumulatif antipirin (μg) yang dikeluarkan dengan air liur dalam masa 12 jam sebelum mengambil inducer;

Dengan jumlah 2 - jumlah kumulatif antipirin (μg) yang dikeluarkan dengan air liur dalam masa 12 jam selepas mengambil inducer.

Operasi kaedah digambarkan oleh contoh-contoh khusus berikut.

Pesakit Kayumov adalah sukarelawan yang sihat.

Antipirin diberikan secara oral sekali kepada pesakit dengan dosis 0,6 g. Air liur dikumpulkan setiap tiga jam selama 12 jam setelah mengambil ubat ujian. Untuk memendapkan zarah pepejal, air liur disentrifugasi selama 10 minit. Dalam tabung uji tambahkan 2 ml supernatan, 2 ml air suling, 2 ml reagen zink, 2 ml kalium hidroksida 0,75 N (setitik). Goncangkan penyelesaian selama 30 saat. Seterusnya, sentrifugasi dilakukan selama 15 minit. 3 ml supernatan murni setiap sampel dipindahkan ke dalam tiub dan dimasukkan ke dalam termostat selama 5 minit pada suhu 25 ° C. Kemudian, tanpa mengeluarkan sampel dari termostat, tambahkan 0.05 ml asid sulfurik 4 n dan 0.1 ml larutan natrium nitrit 0.2%. Pengeraman berterusan selama 20 minit. Seterusnya, ketumpatan optik diukur pada spektrofotometer pada panjang gelombang 350 nm. Jumlah antipirin yang dikeluarkan ditentukan oleh graf penentukuran. Penyelesaian rujukan adalah penyelesaian yang disediakan dengan air liur yang diambil dari pesakit sebelum mengambil ubat ujian, sesuai dengan sampel yang dijelaskan di atas.

Keesokan harinya, pesakit diresepkan xymedon pada dos 0,5 g 3 kali sehari. Kursus ini adalah 7 hari. Setelah 7 hari, penentuan jumlah antipirin yang ditarik balik dilakukan lagi seperti yang dijelaskan di atas.

Pengiraan aruhan (%) dibuat mengikut formula 1:

Dengan jumlah 1 - jumlah kumulatif antipirin (mcg) yang dikeluarkan dengan air liur dalam masa 12 jam sebelum mengambil xymedon;

Dengan jumlah 2 - jumlah kumulatif antipirin (μg) yang dikeluarkan dengan air liur dalam masa 12 jam selepas mengambil xymedon.

Hasilnya ditunjukkan dalam Jadual 1.

Penentuan aktiviti oksidase mikrosom hati pesakit 2-8 dilakukan secara serupa dengan contoh 1. Hasilnya ditunjukkan dalam jadual 1.

Pesakit Ibragimov adalah sukarelawan yang sihat.

Pesakit Smerdov adalah sukarelawan yang sihat.

Pesakit Motygullin adalah sukarelawan yang sihat.

Pesakit Yarullin adalah sukarelawan yang sihat.

Pesakit Yakovlev adalah sukarelawan yang sihat

Pesakit Sultanbekov adalah sukarelawan yang sihat.

Pesakit Kalaybashev adalah sukarelawan yang sihat.

Untuk membandingkan peningkatan aktiviti enzim oksidatif semasa mengambil xymedon, kesan pengoksidaan fenobarbital yang diketahui terhadap farmakokinetik antipirin diuji. Phenobarbital diberikan secara lisan pada dos 0,03 g 3 kali sehari selama tiga hari, yang sesuai dengan dos farmakologi standard yang digunakan dalam perubatan untuk kesan antispasmodik dan penenang [Mashkovsky M.D. Ubat-ubatan. T.2. - M .: Novaya Volna, 2000. - 648 p.]. Induksi fenobarbital ditentukan oleh nisbah jumlah kumulatif antipirin yang terkandung dalam air liur sebelum dan sesudah mengambil fenobarbital dalam dos harian 0,09 g. Kajian dilakukan dalam sekumpulan 5 sukarelawan yang sihat (Zakirova, Valitova, Shitova, Ermolaeva, Galiutdinov - contoh 9-13). Pengiraan aruhan (%) dibuat mengikut formula 1:

Dengan jumlah 1 - jumlah kumulatif antipirin (μg) yang dikeluarkan dengan air liur dalam masa 12 jam sebelum mengambil fenobarbital;

Dengan jumlah 2 - jumlah kumulatif antipirin (μg) yang dikeluarkan dengan air liur dalam masa 12 jam selepas mengambil fenobarbital.

Hasilnya ditunjukkan dalam Jadual 2.

Pesakit Zakirov adalah sukarelawan yang sihat.

Contoh 10.

Pesakit Valitov adalah sukarelawan yang sihat.

Contoh 11.

Pesakit Shitov adalah sukarelawan yang sihat.

Contoh 12.

Pesakit Ermolaev adalah sukarelawan yang sihat.

Contoh 13.

Pesakit Galiutdinov adalah sukarelawan yang sihat.

Hasil yang diperoleh menunjukkan bahawa penggunaan xymedon memungkinkan untuk meningkatkan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia, dan kesan mendorong yang disebabkan oleh xymedon setanding dengan penggunaan phenobarbital.

Penggunaan xymedon sebagai pemicu oksidase mikrosom hati berkesan dalam pencegahan dan rawatan keracunan akut dan kronik dengan ubat-ubatan, biotransformasi yang bergantung pada aktiviti enzim sistem pengoksidaan.

Peraturan aktiviti enzim oksidatif menggunakan induktor xymedon adalah selamat dari sudut pandang overdosis induker itu sendiri kerana ketoksikannya yang rendah.

Jadual 1
Induksi oksidase mikrosom hati manusia oleh xymedon
Contoh No.	Contoh No.	A (ketumpatan optik)		Dengan jumlah 1 (jumlah kumulatif jumlah antipirin yang dikeluarkan), μg	A (ketumpatan optik)	Amount (jumlah antipirin yang dikeluarkan), μg	Dengan jumlah 2 (jumlah kumulatif jumlah antipirin yang dikeluarkan), μg	Aruhan,%
1	1	0,185	9,893	29,678	0,100	5,347	16,842	43,25
	2	0,190	10,160		0,060	3,208
	3	0,120	6,417		0,105	5,614
	4	0,060	3,208		0,050	2,673
2	1	0,015	0,802	7,486	0,040	2,139	6,401	14,49
	2	0,045	2,406		0,060	3,208
	3	0,040	2,139		0,010	0,534
	4	0,040	2,139		0,010	0,534
3	1	0,140	7,486	21,121	0,035	1,871	9,356	55,70
	2	0,070	3,743		0,075	4,010
	3	0,105	5,614		0,025	1,336
	4	0,080	4,278		0,040	2,139
4	1	0,250	13,360	35,273	0,145	7,754	31,817	9,79
	2	0,210	11,220		0,130	6,951
	3	0,130	6,950		0,160	8,556
	4	0,070	3,743		0,160	8,556
5	1	0,025	1,336	12,565	0,030	1,604	8,554	68,07
	2	0,100	5,347		0,035	1,871
	3	0,080	4,278		0,075	4,010
	4	0,030	1,604		0,020	1,069
6	1	0,075	4,010	12,298	0,040	2,139	4,544	63,05
	2	0,12	6,417		0,010	0,534
	3	0,020	1,069		0,030	1,604
	4	0,015	0,802		0,005	0,267
7	1	0,080	4,278	15,240	0,060	3,208	10,158	33,19
	2	0,120	6,417		0,025	1,336
	3	0,040	2,139		0,060	3,208
	4	0,045	2,406		0,045	2,406
8	1	0,045	2,406	11,495	0,015	0,802	2,405	79,07
	2	0,045	2,406		0,02	1,069
	3	0,100	5,347		0,005	0,267
	4	0,025	1,336		0,005	0,267

jadual 2 Induksi oksidase mikrosom hati manusia oleh fenobarbital
Contohnya	Dengan jumlah 1 (jumlah kumulatif antipirin yang dikeluarkan sebelum mengambil inducer), μg	Dengan jumlah 2 (jumlah kumulatif antipirin yang dikeluarkan setelah mengambil inducer), μg	Aruhan,%
9	13,635	3,474	74,52
10	10,159	7,217	28,95
11	13,635	4,544	66,67
12	17,646	7,217	59,10
13	20,854	13,635	34,62

TUNTUTAN

Penggunaan xymedon untuk meningkatkan aktiviti oksidase mikrosom hati manusia.

Apa ini?

hidrolase - mempercepat pemecahan sebatian kompleks menjadi molekul;
synthetases - mengambil bahagian dalam tindak balas sintesis sebatian biologi kompleks dari bahan mudah;
transferase - terlibat dalam pengangkutan molekul merentasi membran;
oxidoreductases - adalah keadaan utama untuk tindak balas redoks normal pada tahap sel;
isomerase - diperlukan untuk proses mengubah konfigurasi molekul sederhana;
lyases - membentuk ikatan kimia tambahan antara molekul.

PENTING! Aktiviti enzim juga dipengaruhi oleh kehadiran sebatian lain (faktor bersama). Ini termasuk protein, vitamin dan bahan seperti vitamin.

Kumpulan enzim hati

Bergantung pada fungsi apa yang dilakukan oleh enzim dan di mana ia berada di dalam badan, ia dibahagikan kepada 3 kumpulan besar:

sekretori - setelah rembesan oleh sel hati, mereka memasuki aliran darah dan berada di sini dalam kepekatan maksimum (faktor pembekuan darah, kolinesterase);
penunjuk - biasanya terkandung di dalam sel dan dilepaskan ke dalam darah hanya apabila ia rosak, oleh itu ia dapat berfungsi sebagai petunjuk tahap kerosakan hati sekiranya penyakitnya (ALT, AST dan lain-lain);
perkumuhan - diekskresikan dari hati dengan hempedu, dan peningkatan tahap mereka dalam darah menunjukkan pelanggaran proses ini.

Untuk menentukan enzim hati, darah vena diperlukan, dikumpulkan pada waktu pagi dengan perut kosong.

Enzim yang ditentukan untuk diagnosis penyakit hati

Petunjuk kolestasis

enzim perkumuhan meningkat;
komponen empedu juga meningkat, termasuk bilirubin, asid hempedu, kolesterol dan fosfolipid.

Petunjuk sitolisis

Penentuan fosfatase alkali

Transpeptidase gamma glutamil dalam darah

Diagnosis akhir hanya dapat dibuat berdasarkan pemeriksaan komprehensif, yang meliputi ultrasound

Transaminase hati (ALT, AST)

hepatitis, mabuk dengan kerosakan hati, sirosis;
infarksi miokardium;
penyakit kronik sistem kardiovaskular, yang ditunjukkan oleh nekrosis kawasan tisu berfungsi;
kecederaan otot, kecederaan atau lebam;
pankreatitis teruk - keradangan pankreas.

AST (aspartate dehydrogenase) dijumpai bukan sahaja di hati. Ia juga boleh dijumpai di mitokondria jantung, ginjal, dan otot rangka. Peningkatan enzim ini dalam darah menunjukkan pemusnahan unsur sel dan perkembangan salah satu patologi:

infark miokard (salah satu penyebab yang paling biasa);
penyakit hati dalam bentuk akut atau kronik;
kegagalan jantung;
trauma, keradangan pankreas.

PENTING! Dalam kajian darah dan penentuan transferase, nisbah antara mereka (pekali Ritis) penting. Sekiranya AST / ALS melebihi 2, kita boleh bercakap mengenai patologi serius dengan pemusnahan parenkim hati yang meluas.

Dehidrogenase laktat

LDH tergolong dalam enzim sitolitik. Ia tidak spesifik, iaitu, ia tidak hanya terdapat di hati. Walau bagaimanapun, definisinya penting dalam diagnosis sindrom icterik. Pada pesakit dengan penyakit Gilbert (gangguan genetik yang disertai dengan pelanggaran pengikatan bilirubin), ia berada dalam kisaran normal. Pada jenis penyakit kuning lain, kepekatannya meningkat.

Bagaimana aktiviti bahan ditentukan?

Ujian darah biokimia untuk enzim hati adalah salah satu langkah diagnostik utama. Ini memerlukan darah vena dikumpulkan semasa perut kosong pada waktu pagi. Pada siang hari sebelum kajian, perlu mengecualikan semua faktor yang dapat mempengaruhi fungsi hati, termasuk pengambilan minuman beralkohol, makanan berlemak dan pedas. Satu set enzim standard ditentukan dalam darah:

ALT, AST;
jumlah bilirubin dan pecahannya (bebas dan terikat).

Beberapa kumpulan ubat juga boleh mempengaruhi aktiviti enzim hati. Mereka juga boleh berubah secara normal semasa kehamilan. Sebelum melakukan analisis, perlu diberitahu kepada doktor mengenai pengambilan ubat-ubatan dan sejarah penyakit kronik mana-mana organ.

Piawaian untuk pesakit yang berumur berbeza

Untuk rawatan penyakit hati, diagnosis lengkap mesti dilakukan, yang merangkumi, antara lain, ujian darah biokimia. Aktiviti enzim dikaji secara gabungan, kerana petunjuk yang berbeza dapat menunjukkan gangguan yang berbeza. Jadual menunjukkan nilai normal dan turun naiknya.

Sebatian	Petunjuk norma
Jumlah protein	65-85 g / l
Kolesterol	3.5-5.5 mmol / l
Jumlah bilirubin	8.5-20.5 μmol / L
Bilirubin langsung	2.2-5.1 μmol / l
Bilirubin tidak langsung	Tidak melebihi 17.1 μmol / l
ALT	Untuk lelaki - tidak lebih daripada 45 unit / l; Untuk wanita - tidak lebih daripada 34 unit / l
AST	Untuk lelaki - tidak lebih daripada 37 unit / l; Untuk wanita - tidak lebih daripada 30 unit / l
Pekali ritis	0,9-1,7
Fosfatase alkali	Tidak melebihi 260 unit / l
GGT	Untuk lelaki - dari 10 hingga 70 unit / l; Untuk wanita - dari 6 hingga 42 unit / l

Enzim ALS adalah diagnostik paling penting untuk disyaki hepatitis, degenerasi lemak, atau sirosis hati. Nilainya biasanya berubah dari masa ke masa. Sebatian ini diukur dalam unit per liter. Petunjuk normal pada usia yang berbeza adalah:

pada bayi baru lahir - sehingga 49;
pada kanak-kanak di bawah 6 bulan - 56 atau lebih;
sehingga setahun - tidak lebih daripada 54;
dari 1 hingga 3 tahun - sehingga 33;
dari 3 hingga 6 tahun - 29;
pada kanak-kanak dan remaja yang lebih tua - sehingga 39.

Ubat berkumpul di parenkim hati dan boleh menyebabkan peningkatan aktiviti enzimnya

PENTING! Ujian darah biokimia adalah penting, tetapi bukan satu-satunya kajian yang menentukan keadaan hati. Juga, pemeriksaan ultrasound dan tambahan dilakukan mengikut keperluan.

Ciri-ciri definisi semasa kehamilan

Dalam kehamilan yang normal, hampir semua petunjuk enzim berada dalam had normal. Pada peringkat kemudian, sedikit peningkatan tahap fosfatase alkali dalam darah adalah mungkin - fenomena tersebut dikaitkan dengan pembentukan sebatian ini oleh plasenta. Enzim hati yang meningkat dapat diperhatikan dengan gestosis (toksikosis) atau menunjukkan peningkatan penyakit kronik.

Perubahan aktiviti enzim pada sirosis

Sirosis adalah keadaan yang paling berbahaya di mana parenchyma hati yang sihat digantikan oleh parut dari tisu penghubung. Patologi ini tidak dirawat, kerana pemulihan organ hanya mungkin disebabkan oleh hepatosit normal. Dalam darah, terdapat peningkatan semua enzim spesifik dan bukan spesifik, peningkatan kepekatan bilirubin terikat dan tidak terikat. Tahap protein, sebaliknya, menurun.

Kumpulan khas - enzim mikrosom

Enzim hati mikrosom adalah kumpulan protein khas yang dihasilkan oleh retikulum endoplasma. Mereka mengambil bahagian dalam reaksi meneutralkan xenobiotik (bahan yang asing bagi tubuh dan boleh menyebabkan gejala mabuk). Proses-proses ini berlaku dalam dua peringkat. Sebagai hasil daripada yang pertama, xenobiotik larut dalam air (dengan berat molekul rendah) dikeluarkan dalam air kencing. Bahan tidak larut mengalami serangkaian transformasi kimia dengan penyertaan enzim hati mikrosomal, dan kemudian dihilangkan dalam hempedu ke dalam usus kecil.

Unsur utama yang dihasilkan oleh retikulum endoplasma sel hati adalah sitokrom P450. Untuk rawatan beberapa penyakit, ubat penghambat atau pemicu enzim mikrosomal digunakan. Mereka mempengaruhi aktiviti protein ini:

perencat - mempercepat tindakan enzim, kerana bahan aktif ubat cepat dikeluarkan dari badan (rifampicin, carbamazepine);
pemacu - mengurangkan aktiviti enzim (fluconazole, eritromisin dan lain-lain).

PENTING! Proses induksi atau penghambatan enzim mikrosomal dipertimbangkan ketika memilih rejimen rawatan untuk sebarang penyakit. Pemberian ubat secara serentak dari kedua-dua kumpulan ini adalah kontraindikasi.

Enzim hati adalah petunjuk diagnostik penting untuk mengesan penyakit hati. Walau bagaimanapun, untuk kajian komprehensif, perlu dilakukan analisis tambahan, termasuk ultrasound. Diagnosis akhir dibuat berdasarkan analisis klinikal dan biokimia darah, air kencing dan tinja, ultrasound organ perut, jika perlu - sinar-X, CT, MRI atau data lain.