Activitatea enzimelor microsomale ale hepatocitelor inhibă. Enzime hepatice. Creșterea activității de droguri

Când sunt distribuite în corp, unele LB pot fi parțial reținute și acumulate în diferite țesuturi. Acest lucru se datorează în principal legării reversibile a medicamentelor de proteine, fosfolipide și nucleoproteine ale celulelor. Acest proces se numește escrow. Concentrația substanței la locul depunerii sale (în depozit) poate fi destul de mare. Din depozit, substanța este eliberată treptat în sânge și distribuită către alte organe și țesuturi, inclusiv ajungând la locul acțiunii sale. Multe LP se leagă de proteinele plasmatice din sânge. Compușii slab acizi (antiinflamatoare nesteroidiene, sulfonamide) se leagă în principal de albumină (cea mai mare fracțiune de proteine plasmatice) și de baze slabe - de glicoproteină α1-acidă și de alte proteine plasmatice din sânge. Medicamentul asociat cu proteinele nu prezintă activitate farmacologică. Dar, deoarece această legare este reversibilă, o parte din substanță este eliberată în mod constant din complex cu proteina (acest lucru se întâmplă atunci când concentrația substanței libere în plasma sanguină scade) și are un efect farmacologic. Biotransformare (metabolism)- modificări ale structurii chimice a substanțelor medicamentoase și a proprietăților fizico-chimice ale acestora sub acțiunea enzimelor organismului. Accentul principal al acestui proces este transformarea substanțelor lipofile, care sunt ușor reabsorbite în tubulii renali, în compuși polari hidrofili, care sunt excretați rapid de rinichi (nu sunt reabsorbiți în tubii renali). În procesul de biotransformare, de regulă, există o scădere a activității (toxicității) substanțelor inițiale.

Biotransformarea medicamentelor lipofile are loc în principal sub influența enzimelor hepatice localizate în membrana reticulului endoplasmatic al hepatocitelor. Aceste enzime sunt numite microsomale deoarece se asociază cu mici fragmente subcelulare ale reticulului endoplasmatic neted (microzomi), care se formează în timpul omogenizării țesutului hepatic sau al țesuturilor altor organe și pot fi izolate prin centrifugare (precipitate în așa-numitul „microsomal” fracțiune).

În plasma sanguină, precum și în ficat, intestine, plămâni, piele, mucoase și alte țesuturi, există enzime non-microsomale localizate în citosol sau mitocondrii. Aceste enzime pot participa la metabolismul substanțelor hidrofile.

Există două tipuri principale de metabolism al medicamentelor:

reacții nesintetice (transformare metabolică);

· Reacții sintetice (conjugare).

Substanțele medicamentoase pot suferi fie biotransformare metabolică (în acest caz, se formează substanțe numite metaboliți), fie conjugare (se formează conjugate). Dar majoritatea LB-urilor sunt metabolizate mai întâi cu participarea unor reacții nesintetice cu formarea de metaboliți reactivi, care apoi intră în reacții de conjugare. transformarea metabolică include următoarele reacții: oxidare, reducere, hidroliză. Mulți compuși lipofili suferă oxidare în ficat sub influența sistemului microsomal al enzimelor cunoscute sub numele de oxidaze cu funcție mixtă sau monooxigenaze. Principalele componente ale acestui sistem sunt citocromul P-450 reductaza și citocromul P-450, o hemoproteină care leagă moleculele medicamentului și oxigenul din centrul său activ. Această reacție are loc cu participarea NADPH. Ca rezultat, un atom de oxigen se atașează la substrat (medicament) cu formarea unei grupări hidroxil (reacție de hidroxilare). Recuperarea substanțelor medicamentoase poate avea loc cu participarea enzimelor microsomale (cloramfenicol) și non-microsomale (hidrat de clor, naloxonă). Hidroliza substanțelor medicamentoase este efectuată în principal de enzime non-microsomale (esteraze, amidaze, fosfataze) în plasma sanguină și țesuturi. În acest caz, datorită adăugării de apă, are loc defalcarea legăturilor eter, amidă și fosfat în moleculele substanțelor medicamentoase. Esterii sunt supuși hidrolizei - acetilcolină, suxametoniu (hidrolizat cu participarea colinesterazelor), amide (procainamidă), acid acetilsalicilic. Metaboliții care se formează ca urmare a reacțiilor nesintetice pot avea, în unele cazuri, o activitate mai mare decât compușii părinți. Un exemplu de creștere a activității medicamentelor în timpul metabolismului este utilizarea precursorilor de medicamente (promedicamente). Promedicamentele sunt inactive farmacologic, dar în organism sunt transformate în substanțe active. În procesul de reacții biosintetice (conjugare), reziduurile compușilor endogeni (acid glucuronic, glutation, glicină, sulfați etc.) sau grupări chimice foarte polare (grupări acetil, metil) sunt adăugate la grupările funcționale ale moleculelor medicamentoase sau ale metaboliților acestora . Aceste reacții au loc cu participarea enzimelor (în principal transferaze) ale ficatului, precum și a enzimelor altor țesuturi (plămâni, rinichi). Enzimele sunt localizate în microsomi sau în fracția citosolică. Sub influența anumitor substanțe medicamentoase (fenobarbital, rifampicină, carbamazepină, griseofulvină), poate apărea inducerea (creșterea ratei de sinteză) a enzimelor hepatice microsomale. Ca urmare, odată cu administrarea simultană a altor medicamente (de exemplu, glucocorticoizi, contraceptive orale) cu inductori ai enzimelor microsomale, rata metabolică a acestora din urmă crește și efectul lor scade. În unele cazuri, rata metabolică a inductorului în sine poate crește, ca urmare a cărei efecte farmacologice (carbamazepină) scad.

Căile de excreție ale medicamentelor, importanța lor pentru efectele farmacoterapeutice și secundare ale medicamentelor. Eliberarea medicamentelor de către glandele salivare în cavitatea bucală.

Interacțiunile care reduc concentrația de substanțe medicamentoase includ:

Scăderea absorbției în tractul gastro-intestinal.

Inducerea enzimelor hepatice.

Scăderea absorbției celulare.

I. Scăderea absorbției în tractul gastro-intestinal.

II.Inducerea enzimelor hepatice.

Dacă principala cale de eliminare a medicamentului este metabolismul, atunci accelerarea metabolismului duce la o scădere a concentrației medicamentului în organele țintă. Majoritatea medicamentelor sunt metabolizate în ficat, un organ cu o masă celulară mare, flux sanguin ridicat și conținut de enzime. Prima reacție în metabolismul multor medicamente este catalizată de enzimele microsomale hepatice asociate cu citocromul P450 și conținute în reticulul endoplasmatic. Aceste enzime oxidează moleculele medicamentului prin diferite mecanisme - hidroxilarea inelului aromatic, N-demetilare, O-demetilare și sulfooxidare. Moleculele produselor acestor reacții sunt de obicei mai polare decât moleculele precursorilor lor și, prin urmare, sunt mai ușor de îndepărtat de rinichi.

Expresia unor izoenzime ale citocromului P450 este reglementată, iar conținutul lor în ficat poate crește sub influența anumitor medicamente.

O substanță tipică care induce inducerea enzimelor microsomale hepatice este fenobarbitalul. Alte barbiturice fac la fel. Efectul inductiv al fenobarbitalului se manifestă deja la o doză de 60 mg / zi.

Inducerea enzimelor hepatice microsomale este cauzată și de rifampicină, carbamazepină, fenitoină, glutetimidă; este observat la fumători, atunci când este expus la insecticide care conțin clor, cum ar fi DDT și la utilizarea constantă a alcoolului.

Fenobarbitalul, rifampicina și alți inductori ai enzimelor hepatice microsomale determină o scădere a concentrației serice a multor medicamente, inclusiv warfarină, chinidină, mexiletină, verapamil, ketoconazol, itraconazol, ciclosporină, dexametazonă, metilprednisolonă, prednisolonă, steroizi activi steroizi) și metirapona. Aceste interacțiuni au o mare importanță clinică. Deci, dacă un pacient pe fondul anticoagulanților indirecți atinge nivelul adecvat de coagulabilitate a sângelui, dar în același timp ia un inductor al enzimelor microsomale hepatice, atunci dacă acesta din urmă este anulat (de exemplu, la externare), concentrația serică a anticoagulantului va crește. Ca urmare, poate să apară sângerări.

Există diferențe individuale semnificative în inducibilitatea enzimelor în metabolismul medicamentelor. La unii pacienți, fenobarbitalul crește brusc acest metabolism, la alții nu are aproape niciun efect.

Fenobarbitalul nu numai că induce inducerea unor izoenzime ale citocromului P450, dar îmbunătățește și fluxul sanguin hepatic, stimulează secreția bilei și transportul anionilor organici în hepatocite.

Unele substanțe medicamentoase pot îmbunătăți și conjugarea altor substanțe cu bilirubina.

III.Diminuarea absorbției celulare.

Derivații de guanidină utilizați pentru tratamentul hipertensiunii arteriale (guanetidină și guanadrel) sunt transferați către neuroni adrenergici datorită transportului activ al aminelor biogene. Rolul fiziologic al acestui transport este recaptarea mediatorilor adrenergici, dar cu ajutorul acestuia, mulți alți compuși similari din punct de vedere structural, inclusiv derivații de guanidină, pot fi transportați și împotriva gradientului de concentrație.

Biotransformarea (metabolismul) este o modificare a structurii chimice a substanțelor medicamentoase și a proprietăților lor fizico-chimice sub acțiunea enzimelor corpului. Accentul principal al acestui proces este transformarea substanțelor lipofile, care sunt ușor reabsorbite în tubulii renali, în compuși polari hidrofili, care sunt excretați rapid de rinichi (nu sunt reabsorbiți în tubii renali). În procesul de biotransformare, de regulă, există o scădere a activității (toxicității) substanțelor inițiale.
Biotransformarea medicamentelor lipofile are loc în principal sub influența enzimelor hepatice localizate în membrana reticulului endoplasmatic al hepatocitelor. Aceste enzime sunt numite microsomale deoarece
se dovedesc a fi asociate cu mici fragmente subcelulare ale reticulului endoplasmatic neted (microzomi), care se formează în timpul omogenizării țesutului hepatic sau al țesuturilor altor organe și pot fi izolate prin centrifugare (depuse în așa-numita fracție „microsomală” ).
În plasma sanguină, precum și în ficat, intestine, plămâni, piele, mucoase și alte țesuturi, există enzime non-microsomale localizate în citosol sau mitocondrii. Aceste enzime pot participa la metabolismul substanțelor hidrofile.
Există două tipuri principale de metabolism al substanțelor medicamentoase (etape):
reacții nesintetice (transformare metabolică);
reacții sintetice (conjugare).

biotransformarea (reacțiile metabolice ale primei faze), are loc sub acțiunea enzimelor - oxidare, reducere, hidroliză.

conjugare (reacții metabolice de fază 2), în care reziduurile altor molecule (glucuronic, acizi sulfurici, radicali alchil) sunt adăugate la molecula substanței, cu formarea unui complex inactiv care este ușor excretat din organism cu urină sau fecale.

Sub influența anumitor medicamente (fenobarbital, rifampicină, carbamazepină, griseofulvină), poate apărea inducerea (creșterea ratei de sinteză) a enzimelor hepatice microsomale. Ca urmare, odată cu administrarea simultană a altor medicamente (de exemplu, glucocorticoizi, contraceptive orale) cu inductori ai enzimelor microsomale, rata metabolică a acestora din urmă crește și efectul lor scade. În unele cazuri, rata metabolică a inductorului în sine poate crește, ca urmare a cărei efecte farmacologice (carbamazepină) scad.
Unele medicamente (cimetidină, cloramfenicol, ketoconazol, etanol) reduc activitatea (inhibitori) a enzimelor metabolizante. De exemplu, cimetidina este un inhibitor al oxidării microsomale și, prin încetinirea metabolismului warfarinei, poate crește efectul său anticoagulant și poate provoca sângerări. Substanțele cunoscute (furanocumarine) conținute în sucul de grapefruit, care inhibă metabolismul medicamentelor precum ciclosporina, midazolamul, alprazolamul și, prin urmare, le sporesc efectul. Odată cu utilizarea simultană a medicamentelor cu inductori sau inhibitori ai metabolismului, este necesară ajustarea dozelor prescrise ale acestor substanțe.

12. Modalități de excreție a medicamentelor din organism, sens, conceptul cotei de eliminare, timpul de înjumătățire (T 1/2) și clearance-ul total al plasmei. Dependența acțiunii substanțelor medicinale de calea excreției, exemple.

Excreția substanței medicamentoase nemodificate sau a metaboliților săi este efectuată de toate organele excretoare (rinichi, intestine, plămâni, mamare, salivare, glande sudoripare etc.).

Principalul organ pentru îndepărtarea medicamentelor din organism este rinichii. Excreția medicamentelor prin rinichi are loc prin filtrare și folosind transportul activ sau pasiv. Substanțele liposolubile sunt ușor filtrate în glomeruli, dar în tubuli sunt absorbite pasiv din nou. Medicamentele slab solubile în lipoizi sunt excretate mai repede în urină, deoarece sunt slab reabsorbite în tubii renali. Reacția acidă a urinei promovează eliminarea compușilor alcalini și îngreunează excreția celor acizi. Prin urmare, pentru intoxicația cu medicamente acide (de exemplu, barbiturice), se utilizează bicarbonat de sodiu sau alți compuși alcalini, iar pentru intoxicația cu alcaloizi alcalini, se utilizează clorură de amoniu. De asemenea, este posibilă accelerarea eliminării medicamentelor din organism prin prescrierea unor diuretice puternice, de exemplu, diuretice osmotice sau furosemid, pe fondul introducerii unei cantități mari de lichid în organism (diureză forțată). Excreția bazelor și acizilor din organism are loc prin transport activ. Acest proces are loc cu cheltuirea energiei și cu ajutorul anumitor sisteme purtătoare de enzime. Prin crearea de concurență pentru purtătorul cu orice substanță, este posibil să se încetinească excreția medicamentului (de exemplu, etamida și penicilina sunt secretate utilizând aceleași sisteme enzimatice, prin urmare etamida încetinește excreția penicilinei).

Medicamentele care sunt slab absorbite din tractul gastrointestinal sunt excretate de intestine și sunt utilizate pentru gastrită, enterită și colită (de exemplu, astringenți, unele antibiotice utilizate pentru infecții intestinale). În plus, medicamentele și metaboliții lor din celulele ficatului pătrund în bilă și intră în intestin cu ea, de unde sunt fie reabsorbite, livrate în ficat, apoi cu bilă în intestin (circulație intestin-hepatică), fie sunt excretate din corpul cu fecale. Secreția directă a unui număr de medicamente și a metaboliților acestora de către peretele intestinal nu este exclusă.

Substanțele și gazele volatile (eter, oxid de azot, camfor etc.) sunt excretate prin plămâni. Pentru a accelera eliberarea lor, este necesar să creșteți volumul de ventilație pulmonară.

Multe medicamente pot fi excretate în lapte, în special bazele slabe și non-electroliții, care ar trebui luate în considerare la tratarea mamelor care alăptează.

Unele substanțe medicamentoase sunt parțial excretate de glandele mucoasei bucale, exercitând un efect local (de exemplu, iritant) asupra căilor de excreție. Deci, metalele grele (mercur, plumb, fier, bismut), eliberate de glandele salivare, provoacă iritarea mucoasei bucale, apar stomatite și gingivite. În plus, acestea provoacă apariția unei margini întunecate de-a lungul marginii gingivale, în special în zona dinților cariosi, care se datorează interacțiunii metalelor grele cu hidrogenul sulfurat în cavitatea bucală și formării de sulfuri practic insolubile. Această „graniță” este un semn de diagnostic al otrăvirii cronice cu metale grele.

Cu utilizarea pe termen lung a difeninei și valproatului de sodiu (anticonvulsivante), iritarea mucoasei gingivale poate provoca gingivită hipertrofică ("difenină gingivită"). Nivelul de eliminare a oricărui medicament este evaluat folosind două teste principale:

în primul rând, se determină timpul în care se elimină jumătate din doza administrată de medicamentul chimioterapic, adică timpul de înjumătățire al acestuia din urmă (T 1/2);
în al doilea rând, se calculează procentul acelei părți dintr-o singură doză de medicament care este eliminată în timpul zilei (coeficient sau cotă, eliminare).

Aceste două criterii pentru eliminarea oricărui medicament nu sunt stabile, deoarece depind de un set de condiții. Dintre acestea din urmă, un rol semnificativ este atribuit proprietăților medicamentului în sine și stării corpului. Acestea depind de rata metabolismului medicamentului în țesuturile și fluidele corpului, intensitatea excreției acestuia, starea funcțională a ficatului și rinichilor, calea de administrare a medicamentului chimioterapic, durata și condițiile de depozitare, lipoidul solubilitate, structură chimică etc.
Eliminarea medicamentelor ionizate solubile în grăsimi asociate cu proteinele se efectuează mai lent „decât preparatele ionizabile solubile în apă, ionizate, care nu sunt asociate cu proteinele. Odată cu introducerea unor doze mari de medicamente, eliminarea lor se prelungește, ceea ce se datorează intensificării tuturor proceselor implicate în transportul, distribuția, metabolismul și eliberarea medicamentelor pentru chimioterapie.
Eliminarea majorității medicamentelor la copii este semnificativ mai mică decât la adulți. Este încetinit în special la copiii prematuri în primele luni de viață. Enzimopatiile congenitale și dobândite (deficit de glucoză-6-fosfat dehidrogenază, N-acetiltransferază etc.), afecțiuni hepatice și renale, care apar cu insuficiența funcțiilor lor, prelungesc brusc eliminarea.
Alți factori afectează, de asemenea, rata eliminării: sexul pacientului, temperatura corpului, bioritmurile fiziologice, șederea copilului în pat etc. Datele privind timpul de înjumătățire al medicamentelor permit medicului să prescrie mai rezonabil o doză unică și zilnică a unui anumit medicament, frecvența administrării acestuia.

o sursă

Enzimele (enzimele) sunt proteine specifice care sunt implicate în reacțiile biochimice, care pot accelera sau încetini cursul lor. Ficatul produce un număr mare de astfel de compuși datorită rolului său important în metabolismul grăsimilor, proteinelor și carbohidraților. Activitatea lor este determinată de rezultatele unui test de sânge biochimic. Astfel de studii sunt importante pentru evaluarea stării ficatului și pentru diagnosticul multor boli.

Enzimele hepatice sunt un grup de proteine biologic active care pot fi produse exclusiv de către celulele acestui organ. Ele pot fi găsite pe membrana interioară sau exterioară, în interiorul celulelor sau în sânge. În funcție de rolul enzimelor, acestea sunt împărțite în mai multe categorii:

hidrolaze - accelerează descompunerea compușilor complecși în molecule;
sintetaze - participă la reacțiile de sinteză a compușilor biologici complecși din substanțe simple;
transferazele - sunt implicate în transportul moleculelor peste membrane;
oxidoreductazele - sunt principala condiție pentru evoluția normală a reacțiilor redox la nivel celular;
izomerasele - necesare proceselor de schimbare a configurației moleculelor simple;
liasele - formează legături chimice suplimentare între molecule.

Localizarea enzimelor hepatice depinde de funcția lor în procesele de metabolism celular. Deci, mitocondriile sunt implicate în schimbul de energie, reticulul endoplasmatic granular sintetizează proteinele, cel neted - grăsimile și carbohidrații, proteinele-hidrolaze sunt pe lizozomi. Toate enzimele pe care le produce ficatul se găsesc în sânge.

În funcție de funcțiile pe care le îndeplinesc enzimele și de locul în care sunt localizate în corp, acestea sunt împărțite în 3 grupuri mari:

secretor - după secreția de către celulele hepatice, acestea intră în sânge și sunt aici în concentrație maximă (factori de coagulare a sângelui, colinesterază);
indicator - sunt în mod normal conținute în interiorul celulelor și sunt eliberate în sânge numai atunci când sunt deteriorate, prin urmare pot servi drept indicatori ai gradului de afectare a ficatului în cazul bolilor sale (ALT, AST și altele);
excretor - excretat din ficat cu bilă, iar creșterea nivelului lor în sânge indică o încălcare a acestor procese.

Fiecare dintre enzime este importantă pentru diagnosticarea stării ficatului. Activitatea lor este determinată în caz de suspiciune de patologii hepatice majore și pentru a evalua gradul de afectare a țesutului hepatic. Pentru a obține o imagine mai completă, poate fi necesară și diagnosticarea enzimelor digestive, a enzimelor tractului gastro-intestinal, a pancreasului și a tractului biliar.

Biochimia sângelui este o etapă importantă în diagnosticul bolilor hepatice. Toate procesele patologice din acest organ pot apărea odată cu fenomenele de colestază sau citoliză. Primul proces este o încălcare a scurgerii de bilă, care este secretată de hepatocite. În cazul altor tulburări, distrugerea elementelor celulare sănătoase are loc odată cu eliberarea conținutului lor în sânge. Prin prezența și cantitatea de enzime hepatice în sânge, este posibil să se determine stadiul bolii și natura modificărilor patologice în organele tractului hepatobiliar.

Sindromul colestazei (dificultate în secreția biliară) însoțește bolile inflamatorii hepatice, secreția biliară afectată și patologia tractului biliar. Aceste fenomene determină următoarele modificări în analiza biochimică:

enzimele excretoare sunt crescute;
componentele biliare sunt, de asemenea, crescute, inclusiv bilirubina, acizii biliari, colesterolul și fosfolipidele.

Ieșirea bilei poate fi perturbată de presiunea mecanică asupra căilor biliare (țesut inflamat, neoplasme, calculi), îngustarea lumenului și a altor fenomene. Complexul modificărilor caracteristice ale parametrilor sanguini devine baza pentru un studiu mai detaliat al stării vezicii biliare și a tractului biliar.

Citoliza (distrugerea hepatocitelor) poate apărea cu hepatită infecțioasă și neinfecțioasă sau cu otrăvire. În acest caz, conținutul celulelor este eliberat și enzimele indicatoare apar în sânge. Acestea includ ALT (alanină aminotransferază), AST (aspartat aminotransferază), LDH (lactat dehidrogenază) și aldolază. Cu cât indicatorii acestor compuși din sânge sunt mai mari, cu atât este mai extins gradul de deteriorare a parenchimului organului.

Fosfataza alcalină, care se găsește în sânge, nu poate fi doar de origine hepatică. O mică cantitate din această enzimă este produsă de măduva osoasă. Putem vorbi de boli hepatice dacă există o creștere simultană a nivelului de fosfatază alcalină și gamma-GGT. În plus, poate fi detectată o creștere a indicilor bilirubinei, ceea ce indică patologii ale vezicii biliare.

GGT crește de obicei cu fosfatază alcalină. Acești indicatori indică dezvoltarea colestazei și a posibilelor boli ale sistemului biliar. Dacă această enzimă este crescută izolat, există riscul de deteriorare minoră a țesutului hepatic în stadiile incipiente ale alcoolismului sau altei otrăviri. Cu patologii mai grave, există o creștere simultană a enzimelor hepatice.

ALT (alanina aminotransferaza) este cea mai specifică enzimă din ficat. Se găsește în citoplasmă și în alte organe (rinichi, inimă), dar în parenchimul hepatic este prezent în cea mai mare concentrație. Creșterea sa în sânge poate indica diverse boli:

hepatită, intoxicație cu leziuni hepatice, ciroză;
infarct miocardic;
boli cronice ale sistemului cardiovascular, care se manifestă prin necroză a zonelor țesutului funcțional;
leziuni musculare, leziuni sau vânătăi;
pancreatită severă - inflamație a pancreasului.

Se propune un medicament care crește activitatea oxidazelor microsomale hepatice umane, care poate fi utilizat în tratamentul și prevenirea diferitelor intoxicații cu substanțe, a căror biotransformare depinde de activitatea enzimelor sistemului de oxidare. Ximedon (N-α-hidroxietil) -4,6-dimetil-1,2-dihidro-2-oxopirimidină), cunoscut anterior ca un medicament cu un spectru larg de acțiune biologică și toxicitate scăzută, a fost propus ca un astfel de medicament. Xymedon crește activitatea oxidazelor microsomale ale ficatului uman, iar efectul său de inducere este comparabil cu cel al fenobarbitalului. 2 filă.

Invenția se referă la medicină, în special la medicamente care măresc activitatea oxidozelor microsomale ale ficatului uman și pot fi utilizate în tratamentul și prevenirea diferitelor boli și intoxicația cu substanțe, a căror biotransformare depinde de activitatea enzimelor de oxidare sistem.

După cum știți, rata de eliminare din organism a substanțelor medicinale supuse biotransformării depinde de activitatea sistemelor enzimatice responsabile de acest tip de metabolism. Unul dintre principalele sisteme enzimatice localizate în ficat este sistemul oxidaselor microsomale. Antipirina este adesea utilizată ca preparat de testare pentru determinarea ratei de oxidare.

În prezent, sunt cunoscuți un număr mare de inductori ai procesului de oxidare [Khalilov E.M. Concepte moderne despre metabolismul medicamentelor în organism, Un curs scurt de farmacologie moleculară, ed. Sergeeva P.V., Institutul Medical din Moscova. N.I. Pirogova, Moscova, 1975, 340 p.; Bolșev VN, Inductori și inhibitori ai enzimelor metabolismului medicamentelor, Farmacologie și toxicologie, 1980, nr. 3], creșterea activității de biotransformare a medicamentelor prin inducerea sintezei oxidazelor microsomale.

Printre acestea se numără substanțe care măresc activitatea de biotransformare a medicamentelor prin inducerea sintezei oxidazelor microsomale:

a) grup fenobarbital, rifampicină, difenhidramină, diazepam, difenină, nitroglicerină (autoinducător);

b) hidrocarburi policiclice (cancerigene);

c) hormoni steroizi;

și substanțe care reduc activitatea de biotransformare a medicamentelor în reticulul endoplasmatic al ficatului:

a) inhibitori ai monoaminooxidazei;

b) etazol, clorură de cobalt, H2 blocante ale histaminei, cloramfenicol, β-blocante, eritromicină, amidaronă, lidocaină.

Se știe că inductorii utilizați (de exemplu, fenobarbitalul) pot avea un efect negativ asupra corpului uman, provocând somnolență, dependență etc. [Mashkovsky M.D. Medicamente. T.2. - M.: Novaya Volna, 2000. - 648 s]

Obiectivul invenției revendicate este un nou medicament pentru creșterea activității oxidazelor microsomale ale ficatului uman, extinzând arsenalul medicamentelor inductoare cunoscute.

Rezultatul tehnic constă în creșterea activității oxidazelor microsomale ale ficatului uman atunci când se ia medicamentul xymedon.

Ximedon este N- (α-hidroxietil) -4,6-dimetil-1,2-dihidro-2-oxopirimidină cu formula:

și este unul dintre cei mai simpli analogi non-glicozidici ai nucleozidelor pirimidinice. Medicamentul are un spectru larg de acțiune biologică, toxicitatea xymedonului este extrem de redusă LD 50 - de la 6500 la 20.000 mg / kg pentru diferite animale cu căi de administrare diferite [Izmailov S.G. și altele.Ximedon în practica clinică. Nizhniy Novgorod: Editura NGMA 2001]. Prin ordinul Ministerului Sănătății nr. 287 din 12/07/93, xymedon este aprobat pentru utilizare în medicină și este inclus în registrul medicamentelor.

Rezultatul tehnic al soluției propuse este obținut prin utilizarea medicamentului xymedon în doză zilnică de 1,5 grame pentru un curs de 7 zile pentru a induce procesele de oxidare, ceea ce îl face promițător ca medicament capabil să crească activitatea oxidozelor microsomale ale ficatului uman. Nu au existat efecte secundare la utilizarea xymedon.

Rata de oxidare a fost evaluată prin metoda dezvoltată anterior de autori - folosind un test antipirină modificat, în timpul căruia s-a determinat concentrația de antipirină în salivă. Medicamentul testat de oxidare - antipirina - a fost prescris pacienților o dată pe cale orală la o doză de 0,6 g [Evgeniev MI, Garmonov S.Yu., Shitova NS, Pogoreltsev V.I. Analiza biofarmaceutică a activității enzimatice a sistemelor metabolice ale corpului // Buletinul Universității Tehnologice de Stat din Kazan. - 2004. - Nr. 1-2. - S. 74-81; Garmonov S.Yu., Kiseleva T.A., Salikhov I.G., Evgeniev M.I., Shitova N.S., Polekhina V.I., Pogoreltsev V.I. Evaluarea fenotipurilor de acetilare și oxidare la pacienții cu diabet de tip 2 // Nizhny Novgorod medical journal. - 2005. - Nr. 3. - P.29-35.]

Inducerea oxidazelor microsomale hepatice umane de către xymedon a fost exprimată ca procent din cantitatea cumulativă de antipirină excretată cu salivă în decurs de 12 ore după administrarea medicamentului test înainte și după un curs de administrare a inductorului xymedon la o doză zilnică de 1,5 g timp de 7 zile.

Studiile au fost realizate într-un grup de 8 voluntari sănătoși.

Metodă pentru determinarea activității oxidazelor microsomale ale ficatului uman.

Antipirina se administrează voluntarului o dată pe cale orală, la o doză de 0,6 g dimineața, pe stomacul gol. Saliva este colectată la fiecare 3 ore în decurs de 12 ore după administrarea medicamentului testat. În probele orare de salivă, conținutul de antipirină este determinat prin metoda spectrofotometrică. Pe baza datelor obținute, sunt reprezentate curbe cinetice, se calculează cantitatea cumulativă de antipirină excretată cu salivă în 12 ore, cantitatea de antipirină conținută în salivă este determinată de graficul de calibrare.

Xymedon se administrează în doză zilnică de 1,5 g (de 3 ori pe zi, câte 0,5 g fiecare) timp de 7 zile înainte de a determina din nou cantitatea de antipirină din salivă. După 7 zile, cantitatea de antipirină îndepărtată este determinată din nou prin metoda descrisă mai sus (testul antipirinei).

Cu total 1 - cantitatea cumulată de antipirină (μg) excretată cu salivă în decurs de 12 ore înainte de a lua inductorul;

Cu total 2 - cantitatea cumulată de antipirină (μg) excretată cu salivă în decurs de 12 ore după administrarea inductorului.

Funcționarea metodei este ilustrată de următoarele exemple specifice.

Pacientul lui Kayumov este un voluntar sănătos.

Antipirina se administrează oral o dată pacientului la o doză de 0,6 g. Saliva este colectată la fiecare trei ore timp de 12 ore după administrarea medicamentului testat. Pentru a precipita particule solide, saliva este centrifugată timp de 10 minute. În eprubete adăugați 2 ml de supernatant, 2 ml de apă distilată, 2 ml de reactiv de zinc, 2 ml de hidroxid de potasiu 0,75 N (în picături). Agitați soluția timp de 30 de secunde. Apoi, centrifugarea se efectuează timp de 15 minute. 3 ml de supernatant pur din fiecare probă sunt transferate în tuburi și plasate într-un termostat timp de 5 minute la o temperatură de 25 ° C. Apoi, fără a scoate probele din termostat, adăugați 0,05 ml de acid sulfuric 4 n și 0,1 ml de soluție de azotit de sodiu 0,2%. Incubația este continuată timp de 20 de minute. Apoi, densitatea optică este măsurată pe un spectrofotometru la o lungime de undă de 350 nm. Cantitatea de antipirină îndepărtată este determinată de graficul de calibrare. Soluția de referință este o soluție preparată cu salivă luată de la pacient înainte de a lua medicamentul de testat, conform probei descrise mai sus.

A doua zi, pacientului i se prescrie xymedon în doză de 0,5 g de 3 ori pe zi. Cursul este de 7 zile. După 7 zile, determinarea cantității retrase de antipirină se efectuează din nou așa cum este descris mai sus.

Calculul inducției (%) se face conform formulei 1:

Cu total 1 - cantitatea cumulată de antipirină (mcg) excretată cu salivă în decurs de 12 ore înainte de a lua xymedon;

Cu total 2 - cantitatea cumulată de antipirină (μg) excretată cu salivă în decurs de 12 ore după administrarea xymedon.

Rezultatele sunt prezentate în Tabelul 1.

Determinarea activității oxidazelor microsomale hepatice la pacienții 2-8 a fost efectuată în mod similar cu exemplul 1. Rezultatele sunt prezentate în tabelul 1.

Pacientul Ibragimov este un voluntar sănătos.

Pacientul lui Smerdov este un voluntar sănătos.

Pacientul lui Motygullin este un voluntar sănătos.

Pacientul lui Yarullin este un voluntar sănătos.

Pacientul lui Yakovlev este un voluntar sănătos

Pacientul Sultanbekov este un voluntar sănătos.

Pacientul lui Kalaybashev este un voluntar sănătos.

Pentru a compara creșterea activității enzimelor oxidative atunci când se ia xymedon, a fost testat efectul cunoscutului inductor al oxidării fenobarbitalului asupra farmacocineticii antipirinei. Fenobarbitalul a fost administrat oral la o doză de 0,03 g de 3 ori pe zi timp de trei zile, ceea ce corespunde dozei farmacologice standard utilizate în medicină pentru efectul antispastic și sedativ [Mashkovsky M.D. Medicamente. T.2. - M.: Novaya Volna, 2000. - 648 p.]. Inducerea fenobarbitalului a fost determinată de raportul dintre cantitatea cumulativă de antipirină conținută în salivă înainte și după administrarea fenobarbitalului în doză zilnică de 0,09 g. Studiile au fost efectuate într-un grup de 5 voluntari sănătoși (Zakirova, Valitova, Shitova, Ermolaeva, Galiutdinov - exemple 9-13). Calculul inducției (%) se face conform formulei 1:

Cu total 1 - cantitatea cumulată de antipirină (μg) excretată cu salivă în decurs de 12 ore înainte de a lua fenobarbital;

Cu total 2 - cantitatea cumulată de antipirină (μg) excretată cu salivă în decurs de 12 ore după administrarea fenobarbitalului.

Rezultatele sunt prezentate în Tabelul 2.

Pacientul lui Zakirov este un voluntar sănătos.

Exemplul 10.

Pacientul lui Valitov este un voluntar sănătos.

Exemplul 11.

Pacientul lui Shitov este un voluntar sănătos.

Exemplul 12.

Pacientul lui Ermolaev este un voluntar sănătos.

Exemplul 13.

Pacientul Galiutdinov este un voluntar sănătos.

Rezultatele obținute arată că utilizarea xymedon face posibilă creșterea activității oxidazelor microsomale ale ficatului uman, iar efectul inductor cauzat de xymedon este comparabil cu cel al fenobarbitalului.

Utilizarea xymedonului ca inductor al oxidazelor microsomale hepatice este eficientă în prevenirea și tratamentul intoxicației acute și cronice cu medicamente, a căror biotransformare depinde de activitatea enzimelor sistemului de oxidare.

Reglarea activității enzimelor oxidative cu ajutorul inductorului xymedon este sigură din punctul de vedere al unei supradoze a inductorului în sine datorită toxicității sale scăzute.

tabelul 1
Inducerea oxidazelor microsomale ale ficatului uman de către xymedon
Exemplul nr.	Eșantionul nr.	A (densitate optică)		Cu total 1 (cantitate cumulată de antipirină totală excretată), μg	A (densitate optică)	С (cantitate de antipirină excretată), μg	Cu total 2 (cantitate cumulată de antipirină totală excretată), μg	Inducţie,%
1	1	0,185	9,893	29,678	0,100	5,347	16,842	43,25
	2	0,190	10,160		0,060	3,208
	3	0,120	6,417		0,105	5,614
	4	0,060	3,208		0,050	2,673
2	1	0,015	0,802	7,486	0,040	2,139	6,401	14,49
	2	0,045	2,406		0,060	3,208
	3	0,040	2,139		0,010	0,534
	4	0,040	2,139		0,010	0,534
3	1	0,140	7,486	21,121	0,035	1,871	9,356	55,70
	2	0,070	3,743		0,075	4,010
	3	0,105	5,614		0,025	1,336
	4	0,080	4,278		0,040	2,139
4	1	0,250	13,360	35,273	0,145	7,754	31,817	9,79
	2	0,210	11,220		0,130	6,951
	3	0,130	6,950		0,160	8,556
	4	0,070	3,743		0,160	8,556
5	1	0,025	1,336	12,565	0,030	1,604	8,554	68,07
	2	0,100	5,347		0,035	1,871
	3	0,080	4,278		0,075	4,010
	4	0,030	1,604		0,020	1,069
6	1	0,075	4,010	12,298	0,040	2,139	4,544	63,05
	2	0,12	6,417		0,010	0,534
	3	0,020	1,069		0,030	1,604
	4	0,015	0,802		0,005	0,267
7	1	0,080	4,278	15,240	0,060	3,208	10,158	33,19
	2	0,120	6,417		0,025	1,336
	3	0,040	2,139		0,060	3,208
	4	0,045	2,406		0,045	2,406
8	1	0,045	2,406	11,495	0,015	0,802	2,405	79,07
	2	0,045	2,406		0,02	1,069
	3	0,100	5,347		0,005	0,267
	4	0,025	1,336		0,005	0,267

masa 2 Inducerea oxidaselor microsomale ale ficatului uman de către fenobarbital
Exemple de	Cu 1 total (cantitate cumulată de antipirină excretată înainte de a lua inductorul), μg	Cu total 2 (cantitate cumulată de antipirină excretată după administrarea inductorului), μg	Inducţie,%
9	13,635	3,474	74,52
10	10,159	7,217	28,95
11	13,635	4,544	66,67
12	17,646	7,217	59,10
13	20,854	13,635	34,62

REVENDICARE

Utilizarea xymedonului pentru a crește activitatea oxidazelor microsomale ale ficatului uman.

Ce este?

hidrolaze - accelerează descompunerea compușilor complecși în molecule;
sintetaze - participă la reacțiile de sinteză a compușilor biologici complecși din substanțe simple;
transferazele - sunt implicate în transportul moleculelor peste membrane;
oxidoreductazele - sunt principala condiție pentru evoluția normală a reacțiilor redox la nivel celular;
izomerasele - necesare proceselor de schimbare a configurației moleculelor simple;
liasele - formează legături chimice suplimentare între molecule.

IMPORTANT! Activitatea enzimelor este influențată și de prezența altor compuși (co-factori). Acestea includ proteine, vitamine și substanțe asemănătoare vitaminelor.

Grupuri de enzime hepatice

În funcție de funcțiile pe care le îndeplinesc enzimele și de locul în care sunt localizate în corp, acestea sunt împărțite în 3 grupuri mari:

secretor - după secreția de către celulele hepatice, acestea intră în sânge și sunt aici în concentrație maximă (factori de coagulare a sângelui, colinesterază);
indicator - sunt în mod normal conținute în interiorul celulelor și sunt eliberate în sânge numai atunci când sunt deteriorate, prin urmare pot servi drept indicatori ai gradului de afectare a ficatului în cazul bolilor sale (ALT, AST și altele);
excretor - excretat din ficat cu bilă, iar creșterea nivelului lor în sânge indică o încălcare a acestor procese.

Pentru a determina enzimele hepatice, este necesar sânge venos, colectat dimineața pe stomacul gol.

Enzime care sunt determinate pentru diagnosticarea bolilor hepatice

Indicatori ai colestazei

enzimele excretoare sunt crescute;
componentele biliare sunt, de asemenea, crescute, inclusiv bilirubina, acizii biliari, colesterolul și fosfolipidele.

Indicatori de citoliză

Determinarea fosfatazei alcaline

Gamma glutamil transpeptidază în sânge

Diagnosticul final se poate face numai pe baza unei examinări cuprinzătoare, care include ultrasunete

Transaminaze hepatice (ALT, AST)

hepatită, intoxicație cu leziuni hepatice, ciroză;
infarct miocardic;
boli cronice ale sistemului cardiovascular, care se manifestă prin necroză a zonelor țesutului funcțional;
leziuni musculare, leziuni sau vânătăi;
pancreatită severă - inflamație a pancreasului.

AST (aspartat dehidrogenază) se găsește nu numai în ficat. Poate fi găsit și în mitocondriile inimii, rinichilor și mușchilor scheletici. O creștere a acestei enzime în sânge indică distrugerea elementelor celulare și dezvoltarea uneia dintre patologii:

infarct miocardic (una dintre cele mai frecvente cauze);
boală hepatică sub formă acută sau cronică;
insuficienta cardiaca;
traume, inflamație a pancreasului.

IMPORTANT! În studiul sângelui și determinarea transferazelor, raportul dintre ele (coeficientul Ritis) contează. Dacă AST / ALS depășește 2, putem vorbi despre patologii grave cu distrugere extinsă a parenchimului hepatic.

Lactat dehidrogenază

LDH aparține enzimelor citolitice. Nu este specific, adică se găsește nu numai în ficat. Cu toate acestea, definirea sa este importantă în diagnosticul sindromului icteric. La pacienții cu boala Gilbert (o tulburare genetică care este însoțită de o încălcare a legării bilirubinei), aceasta se încadrează în intervalul normal. În alte tipuri de icter, concentrația sa crește.

Cum se determină activitatea substanțelor?

Un test biochimic de sânge pentru enzimele hepatice este una dintre principalele măsuri de diagnostic. Acest lucru va necesita sânge venos colectat pe stomacul gol dimineața. În ziua precedentă studiului, este necesar să se excludă toți factorii care pot afecta funcționarea ficatului, inclusiv aportul de băuturi alcoolice, alimente grase și condimentate. Un set standard de enzime este determinat în sânge:

ALT, AST;
bilirubina totală și fracțiunile sale (libere și legate).

Unele grupuri de medicamente pot afecta, de asemenea, activitatea enzimelor hepatice. De asemenea, se pot schimba în mod normal în timpul sarcinii. Înainte de analiză, este necesar să anunțați medicul despre administrarea oricărui medicament și despre istoricul bolilor cronice ale oricărui organ.

Standarde pentru pacienți de diferite vârste

Pentru tratamentul bolilor hepatice, trebuie efectuat un diagnostic complet, care include, printre altele, un test biochimic de sânge. Activitatea enzimatică este studiată în combinație, deoarece diferiți indicatori pot indica tulburări diferite. Tabelul prezintă valorile normale și fluctuațiile acestora.

Compus	Indicatori ai normei
Proteine totale	65-85 g / l
Colesterol	3,5-5,5 mmol / l
Bilirubina totală	8,5-20,5 μmol / L
Bilirubina directă	2,2-5,1 μmol / L
Bilirubină indirectă	Nu mai mult de 17,1 μmol / l
ALT	Pentru bărbați - nu mai mult de 45 de unități / l; Pentru femei - nu mai mult de 34 de unități / l
AST	Pentru bărbați - nu mai mult de 37 de unități / l; Pentru femei - nu mai mult de 30 de unități / l
Coeficientul Ritis	0,9-1,7
Fosfataza alcalină	Nu mai mult de 260 de unități / l
GGT	Pentru bărbați - de la 10 la 70 de unități / l; Pentru femei - de la 6 la 42 de unități / l

Enzima SLA este diagnosticul cel mai important pentru suspiciunea de hepatită, degenerare grasă sau ciroză hepatică. Valorile sale se modifică în mod normal în timp. Acest compus este măsurat în unități pe litru. Indicatorii normali la diferite vârste vor fi:

la nou-născuți - până la 49;
la copii sub 6 luni - 56 sau mai mult;
până la un an - nu mai mult de 54;
de la 1 la 3 ani - până la 33;
de la 3 la 6 ani - 29;
la copii mai mari și adolescenți - până la 39.

Medicamentele se acumulează în parenchimul hepatic și pot determina o creștere a activității enzimelor sale

IMPORTANT! Un test biochimic de sânge este un studiu important, dar nu singurul care determină starea ficatului. De asemenea, cu ultrasunete și examinări suplimentare se efectuează după cum este necesar.

Caracteristicile definiției în timpul sarcinii

În cursul normal al sarcinii, aproape toți indicatorii enzimatici rămân în limite normale. În etapele ulterioare, este posibilă o ușoară creștere a nivelului de fosfatază alcalină din sânge - fenomenul este asociat cu formarea acestui compus de către placentă. Enzimele hepatice crescute pot fi observate cu gestoză (toxicoză) sau indică o exacerbare a bolilor cronice.

Modificări ale activității enzimei în ciroză

Ciroza este cea mai periculoasă afecțiune în care parenchimul hepatic sănătos este înlocuit de cicatrici din țesutul conjunctiv. Această patologie nu este tratată, deoarece restaurarea organului este posibilă numai datorită hepatocitelor normale. În sânge, există o creștere a tuturor enzimelor specifice și nespecifice, o creștere a concentrației de bilirubină legată și nelegată. Pe de altă parte, nivelurile de proteine scad.

Grup special - enzime microsomale

Enzimele hepatice microsomale sunt un grup special de proteine care sunt produse de reticulul endoplasmatic. Participă la reacțiile de neutralizare a xenobioticelor (substanțe străine corpului și care pot provoca simptome de intoxicație). Aceste procese au loc în două etape. Ca rezultat al primului dintre acestea, xenobiotice solubile în apă (cu greutate moleculară mică) sunt excretate în urină. Substanțele insolubile suferă o serie de transformări chimice cu participarea enzimelor hepatice microsomale și apoi sunt eliminate în bilă în intestinul subțire.

Principalul element care este produs de reticulul endoplasmatic al celulelor hepatice este citocromul P450. Pentru tratamentul unor boli, se utilizează medicamente-inhibitori sau inductori ai enzimelor microsomale. Acestea afectează activitatea acestor proteine:

inhibitori - accelerează acțiunea enzimelor, datorită cărora substanțele active ale medicamentelor sunt excretate rapid din organism (rifampicină, carbamazepină);
inductori - reduc activitatea enzimelor (fluconazol, eritromicină și altele).

IMPORTANT! Procesele de inducere sau inhibare a enzimelor microsomale sunt luate în considerare la selectarea unui regim de tratament pentru orice boală. Administrarea simultană a medicamentelor acestor două grupuri este contraindicată.

Enzimele hepatice sunt un indicator diagnostic important pentru detectarea bolilor hepatice. Cu toate acestea, pentru un studiu cuprinzător, este de asemenea necesar să se efectueze analize suplimentare, inclusiv ultrasunete. Diagnosticul final se face pe baza analizelor clinice și biochimice ale sângelui, urinei și fecalelor, ultrasunetelor organelor abdominale, dacă este necesar - raze X, CT, RMN sau alte date.