Kuzaa

Thamani ya lishe

Uwazi

Isotonicity

Jedwali 7. Uzazi wa bakteria kwenye vyombo vya habari vya virutubisho.

Jedwali 7.1. Uainishaji wa vyombo vya habari vya lishe.

Jedwali 7.2. Kanuni za kutenga utamaduni wa seli safi.

Jedwali 7.2.1. Hatua za kutenga utamaduni wa seli safi.

Jedwali 7.3. Utambulisho wa bakteria.

Ni mchakato gani hauhusiani na fiziolojia ya bakteria?

Uzazi

Ni vitu gani vinavyounda 40-80% ya molekuli kavu ya seli ya bakteria?

Wanga

Asidi za nyuklia

Ni madarasa gani ya enzymes yanayotengenezwa na microorganisms?

Oxyreductases

Madarasa yote

Uhamisho

Enzymes ambao ukolezi wake katika seli huongezeka kwa kasi kwa kukabiliana na kuonekana kwa substrate ya inducer katika mazingira?

Iducible

Kikatiba

Mkandamizaji

Mchanganyiko wa Multienzyme

Enzyme ya pathogenicity iliyotolewa na Staphylococcus aureus?

Neuraminidase

Hyaluronidase

Lecithinase

Fibrinolysin

Je, vimeng'enya vya proteolytic vina kazi?

Kuvunjika kwa protini

Kuvunjika kwa mafuta

Kuvunjika kwa wanga

Uundaji wa alkali

Fermentation ya enterobacteria?

Asidi ya Lactic

Asidi ya fomu

Asidi ya Propionic

Asidi ya Butyric

Ni misombo gani ya madini hutumika kuunganisha tRNA kwa ribosomu?

Uoksidishaji wa kibaolojia ni ...?

1. Uzazi

2. Kifo cha seli

Ni vitu gani vyenyewe huunganisha vijenzi vyote vilivyo na kaboni vya seli kutoka kwa CO 2.

Prototrofi

Heterotrophs

Nyaraka otomatiki

Saprophytes

Vyombo vya lishe vinatofautiana:

Kwa utunzi

Kwa uthabiti

Kwa makusudi

Kwa yote hapo juu

Awamu ya uzazi, ambayo ina sifa ya usawa kati ya idadi ya seli zilizokufa, zilizoundwa hivi karibuni na zilizolala?

2. Awamu mbaya ya kuongeza kasi

   Awamu ya stationary

Muda wa kizazi unategemea?

Umri

Idadi ya watu

Yote ya hapo juu

Ili kuanzisha utambulisho wa spishi za bakteria, muundo wao wa antijeni mara nyingi husomwa, ambayo ni, kitambulisho kinafanywa, ni yupi?

Kibiolojia

Mofolojia

Kiserolojia

Biokemikali

Mbinu ya Drigalski ya kupanda mbegu kwenye uso inarejelewa kama...?

Kanuni za mitambo za kutengwa kwa utamaduni safi

Kanuni za kibaolojia za kutenganisha utamaduni safi

Bibliografia

1. Borisov L. B. Microbiology ya matibabu, virology, immunology: kitabu cha maandishi kwa asali. vyuo vikuu - M.: Shirika la Taarifa za Matibabu LLC, 2005.

2. Pozdeev O.K. Microbiology ya matibabu: kitabu cha maandishi kwa asali. vyuo vikuu – M.: GEOTAR-MED, 2005.

3. Korotyaev A.I., Babichev S.A. Mikrobiolojia ya matibabu, immunology na virology / kitabu cha kiada kwa wataalamu wa matibabu. vyuo vikuu - St. Petersburg: SpetsLit, 2000.

4. Vorobyov A. A., Bykov A. S., Pashkov E. P., Rybakova A. M. Microbiology: kitabu cha maandishi. - M.: Dawa, 2003.

5. Microbiolojia ya matibabu, virology na immunology: kitabu cha maandishi / ed. V. V. Zvereva, M. N. Boychenko. – M.: GEOTar-Media, 2014.

6. Mwongozo wa mafunzo ya vitendo katika microbiology ya matibabu, virology na immunology / ed. V.V. Tetsa. - M.: Dawa, 2002.

Utangulizi 6

Muundo wa bakteria kutoka kwa mtazamo wa fiziolojia yao. 7

Kimetaboliki 14

Lishe (usafirishaji wa virutubisho) 25

Kupumua 31

Uzazi 34

Jumuiya za vijidudu 37

MATUMIZI 49

Marejeleo 105

Muundo wa antijeni wa microorganisms ni tofauti sana. Microorganisms imegawanywa katika jumla, au kikundi, na maalum, au ya kawaida, antijeni.

Antijeni za kikundi ni za kawaida kwa aina mbili au zaidi za vijidudu vya jenasi moja, na wakati mwingine ni mali ya genera tofauti. Kwa hivyo, aina fulani za jenasi ya Salmonella zina antijeni za kawaida za kikundi; vimelea vya homa ya matumbo vina antijeni za kundi la kawaida na vimelea vya paratyphoid A na paratyphoid B (0-1.12).

Antijeni mahususi zipo tu katika aina fulani ya vijidudu, au hata katika aina fulani tu (lahaja) au aina ndogo ndani ya spishi. Ufafanuzi antijeni maalum inakuwezesha kutofautisha microbes ndani ya jenasi, aina, aina ndogo na hata aina (subtype). Kwa hivyo, ndani ya jenasi Salmonella, zaidi ya aina 2000 za Salmonella zinatofautishwa na mchanganyiko wa antijeni, na katika jamii ndogo ya Shigella Flexner kuna serotypes 5 (serovarians).

Kulingana na ujanibishaji wa antijeni katika seli ya vijidudu, tofauti hufanywa kati ya antijeni za somatic zinazohusiana na mwili wa seli ya vijidudu, antijeni za capsular - antijeni za uso au bahasha, na antijeni za bendera ziko kwenye flagella.

Somatic, O-antijeni(kutoka kwa Ujerumani ohne Hauch - bila kupumua), inayohusishwa na mwili wa kiini cha microbial. Katika bakteria ya gramu-hasi, O-antijeni ni tata tata ya asili ya lipidopolysaccharide-protini. Ni sumu kali na ni endotoxin kwa bakteria hawa. Katika mawakala wa causative ya maambukizi ya coccal, vibrios ya kipindupindu, mawakala wa causative ya brucellosis, kifua kikuu na baadhi ya anaerobes, antijeni za polysaccharide zimetengwa kutoka kwa mwili wa seli za microbial, ambazo huamua aina maalum ya bakteria. Kama antijeni, zinaweza kufanya kazi kwa fomu safi na pamoja na lipids.

Flagellates, H-antijeni(kutoka Ujerumani Hauch - pumzi), ni protini katika asili na hupatikana katika flagella ya microbes motile. Antijeni za bendera huharibiwa haraka na joto na phenoli. Wao huhifadhiwa vizuri mbele ya formaldehyde. Mali hii hutumiwa katika uzalishaji wa cums za uchunguzi zilizouawa kwa mmenyuko wa agglutination, wakati ni muhimu kuhifadhi flagella.

Capsular, K - antijeni, - ziko juu ya uso wa seli ya microbial na pia huitwa juu juu, au bahasha. Wamesomwa kwa undani zaidi katika vijidudu vya familia ya matumbo, ambayo Vi-, M-, B-, L- na A-antijeni zinajulikana. Kati ya hizi, antijeni ya Vi ni muhimu. Iligunduliwa kwa mara ya kwanza katika aina kali za bakteria ya typhoid na iliitwa antijeni ya virulence. Wakati mtu anachanjwa na tata ya O- na Vi-antigens, kiwango cha juu cha ulinzi dhidi ya homa ya typhoid huzingatiwa. Antijeni ya Vi inaharibiwa ifikapo 60°C na haina sumu kidogo kuliko antijeni ya O. Pia hupatikana katika vijidudu vingine vya utumbo, kama vile E. koli.

Kinga(kutoka Kilatini protectio - patronage, ulinzi), au kinga, antijeni huundwa na vijidudu vya anthrax katika mwili wa wanyama na hupatikana katika exudates mbalimbali wakati wa ugonjwa wa anthrax. Antijeni ya kinga ni sehemu ya exotoxin iliyofichwa na microbe ya anthrax na ina uwezo wa kushawishi maendeleo ya kinga. Kwa kukabiliana na kuanzishwa kwa antijeni hii, antibodies ya kurekebisha-kusaidia huundwa. Antijeni ya kinga inaweza kupatikana kwa kukuza microbe ya kimeta kwenye njia changamano ya synthetic. Chanjo ya kemikali yenye ufanisi mkubwa dhidi ya kimeta ilitayarishwa kutoka kwa antijeni ya kinga. Antijeni za kinga pia zimepatikana katika vimelea vinavyosababisha tauni, brucellosis, tularemia, na kikohozi cha mvua.

Antijeni kamili kusababisha usanisi wa antibodies katika mwili au uhamasishaji wa lymphocytes na kuguswa nao wote katika vivo na katika vitro. Antijeni zilizojaa kamili zina sifa ya utaalam madhubuti, i.e. husababisha mwili kutoa antibodies maalum ambayo huguswa tu na antijeni fulani. Antijeni hizi ni pamoja na protini za asili ya wanyama, mimea na bakteria.

Antijeni zenye kasoro (haptens) kuwakilisha wanga tata, lipids na vitu vingine ambavyo haviwezi kusababisha malezi ya antibodies, lakini huingia kwenye mmenyuko maalum pamoja nao. Haptens hupata mali ya antijeni zilizojaa kamili tu ikiwa zinaletwa ndani ya mwili pamoja na protini.

Wawakilishi wa kawaida wa haptens ni lipids, polysaccharides, asidi nucleic, pamoja na vitu rahisi: rangi, amini, iodini, bromini, nk.

Chanjo kama njia ya kuzuia magonjwa ya kuambukiza. Historia ya maendeleo ya chanjo. Chanjo. Mahitaji ya chanjo. Mambo yanayoamua uwezekano wa kuunda chanjo.

Chanjo ni maandalizi ya kibiolojia ambayo yanazuia maendeleo ya magonjwa ya kuambukiza na maonyesho mengine ya immunopathology. Kanuni ya kutumia chanjo ni kuunda kinga na, kwa sababu hiyo, upinzani dhidi ya maendeleo ya ugonjwa huo. Chanjo inarejelea hatua zinazolenga kuwachanja watu kwa njia bandia kwa kuanzisha chanjo ili kuongeza upinzani dhidi ya ugonjwa huo. Lengo la chanjo ni kuunda kumbukumbu ya kinga dhidi ya pathojeni maalum.

Kuna chanjo ya passiv na hai. Kuanzishwa kwa immunoglobulins zilizopatikana kutoka kwa viumbe vingine ni chanjo ya passiv. Inatumika katika matibabu na matibabu kwa madhumuni ya kuzuia. Utawala wa chanjo ni chanjo hai. Tofauti kuu kati ya chanjo hai na ya passiv ni malezi ya kumbukumbu ya kinga.

Kumbukumbu ya kinga ya mwili hutoa kasi na zaidi kuondolewa kwa ufanisi mawakala wa kigeni wakati wao kuonekana tena katika viumbe. Msingi wa kumbukumbu ya immunological ni seli za kumbukumbu za T- na B.

Chanjo ya kwanza ilipata jina lake kutoka kwa neno chanjo(cowpox) - ugonjwa wa virusi kubwa ng'ombe. Daktari Mwingereza Edward Jenner alitumia kwanza chanjo ya ndui kwa mvulana James Phipps, iliyopatikana kutoka kwa malengelenge kwenye mkono wa mgonjwa wa ndui, mnamo 1796. Karibu miaka 100 tu baadaye (1876-1881) Louis Pasteur alitengeneza. kanuni kuu chanjo - matumizi ya maandalizi dhaifu ya microorganisms kuunda kinga dhidi ya matatizo mabaya.

Baadhi ya chanjo za kuishi ziliundwa na wanasayansi wa Soviet, kwa mfano, P. F. Zdrodovsky aliunda chanjo dhidi ya typhus mwaka wa 1957-59. Chanjo ya mafua iliundwa na kikundi cha wanasayansi: A. A. Smorodintsev, V. D. Solovyov, V. M. Zhdanov mwaka wa 1960. P. A. Vershilova iliyoundwa mnamo 1947-51 chanjo hai ugonjwa wa brucellosis.

Chanjo lazima ikidhi mahitaji yafuatayo:

● kuamilisha seli zinazohusika katika usindikaji na uwasilishaji wa antijeni;
● vyenye epitopu za T- na T-seli ambazo hutoa majibu ya seli na humoral;
● rahisi kuchakata kwa uwasilishaji bora unaofuata wa antijeni za utangamano;
● kushawishi uundaji wa seli T za athari, seli zinazozalisha kingamwili na seli za kumbukumbu zinazolingana;
● kuzuia maendeleo ya ugonjwa kwa muda mrefu;
● usiwe na madhara, yaani, usisababishe ugonjwa mbaya au madhara.

Ufanisi wa chanjo ni kweli asilimia ya watu waliochanjwa ambao waliitikia chanjo kwa kuunda kinga maalum. Kwa hivyo, ikiwa ufanisi wa chanjo fulani ni 95%, hii inamaanisha kuwa kati ya watu 100 waliochanjwa, 95 wanalindwa kwa uhakika, na 5 bado wako katika hatari ya ugonjwa. Ufanisi wa chanjo imedhamiriwa na vikundi vitatu vya mambo. Mambo ambayo hutegemea maandalizi ya chanjo: mali ya chanjo yenyewe, ambayo huamua immunogenicity yake (kuishi, inactivated, corpuscular, subunit, kiasi cha immunogen na adjuvants, nk); ubora wa bidhaa ya chanjo, yaani, immunogenicity haipotei kutokana na kumalizika kwa muda wa chanjo au kutokana na ukweli kwamba ilihifadhiwa au kusafirishwa vibaya. Mambo yanayomtegemea mtu anayepewa chanjo: sababu za kijeni zinazoamua uwezekano wa kimsingi (au kutowezekana) wa kuendeleza kinga maalum; umri, kwa sababu majibu ya kinga yanajulikana kwa karibu zaidi na kiwango cha ukomavu wa mfumo wa kinga; hali ya afya "kwa ujumla" (ukuaji, maendeleo na uharibifu, lishe, magonjwa ya papo hapo au ya muda mrefu, nk); hali ya nyuma ya mfumo wa kinga - kimsingi uwepo wa immunodeficiencies kuzaliwa au alipewa.

Shirika la Shirikisho la Elimu

Taasisi ya Teknolojia ya Biysk (tawi)

taasisi ya elimu ya serikali

katika kozi za "General Biology and Microbiology", "Microbiology" kwa wanafunzi wa taaluma 240901 "Bioteknolojia",
260204 "Teknolojia ya uzalishaji wa chachu na utengenezaji wa divai"
aina zote za elimu

UDC 579.118:579.22

Kamenskaya, vijidudu: mapendekezo ya mbinu ya kazi ya maabara katika kozi "Biolojia ya Jumla"
na Microbiology", "Microbiology" kwa wanafunzi wa utaalam 240901 "Bioteknolojia", 260204 "Teknolojia ya uzalishaji wa Fermentation na winemaking" ya aina zote za elimu / ,
.

Alt. jimbo teknolojia. Chuo Kikuu, BTI. - Biysk:

Nyumba ya uchapishaji Alt. jimbo teknolojia. Chuo Kikuu, 2007. - 36 p.

Miongozo hii inajadili dhana za msingi, sheria na kanuni za uainishaji na utambuzi wa microorganisms. Kazi ya maabara inawasilishwa ili kujifunza mali mbalimbali za bakteria muhimu kuelezea matatizo ya bakteria na kutambua kwa kiwango cha jenasi.

Imekaguliwa na kuidhinishwa

kwenye kikao cha idara

"Bioteknolojia".

Itifaki namba 88 ya 01/01/2001

Mkaguzi:

Daktari wa Sayansi ya Biolojia, Profesa, BPSU jina lake baada ya.

© BTI AltSTU, 2007

DHANA 1 ZA MSINGI NA SHERIA ZA MAJINA

MICROORGANISMS

Aina elfu kadhaa za vijidudu zimeelezewa, lakini inaaminika kuwa hii inawakilisha chini ya 1 % kutoka kwa zile ambazo zipo kweli. Utafiti wa utofauti wa microorganisms ni somo la taxonomy. Kazi yake kuu ni kuunda mfumo wa asili, kutafakari mahusiano ya phylogenetic ya microorganisms. Hadi hivi karibuni, taxonomy ya microorganisms ilikuwa msingi hasa juu ya sifa za phenotypic: morphological, physiological, biochemical, nk, kwa hiyo mifumo ya uainishaji iliyopo kwa kiasi kikubwa ni ya bandia. Walakini, hufanya iwe rahisi kutambua aina mpya za vijidudu.

Taksonomia inajumuisha sehemu kama vile uainishaji, muundo wa majina Na Edeni tification . Uainishaji huamua mpangilio ambao watu walio na kiwango fulani cha homogeneity huwekwa katika vikundi fulani (kodi). Nomenclature ni seti ya sheria za kumtaja taxa. Utambulisho inamaanisha kuamua ikiwa kiumbe kinachochunguzwa ni cha ushuru fulani.

Neno "taxonomia" mara nyingi hutumiwa kama kisawe cha utaratibu, lakini wakati mwingine inaeleweka kama sehemu ya utaratibu, pamoja na nadharia ya uainishaji, uchunguzi wa mfumo wa kategoria za taxonomic, mipaka na utii wa taxa. Jamii kuu ya taxonomic katika biolojia, kama ilivyo kwa wengine sayansi ya kibiolojia, ni mtazamo- seti ya watu wanaojulikana kwa idadi ya sifa za kawaida za kimofolojia, kisaikolojia, biokemikali na molekuli.

Neno "shida" linamaanisha utamaduni safi wa microorganism iliyotengwa na makazi maalum (maji, udongo, mwili wa wanyama, nk). Aina tofauti za aina moja ya microorganisms zinaweza kutofautiana katika sifa fulani, kwa mfano, unyeti kwa antibiotics, uwezo wa kuunganisha bidhaa fulani za kimetaboliki, nk, lakini tofauti hizi ni chini ya aina maalum. Dhana ya "shida" katika microbiology na genetics ni tofauti: katika microbiolojia dhana hii ni pana. Aina za microorganisms zimeunganishwa katika makundi ya taxonomic ya utaratibu wa juu: genera, familia, maagizo, madarasa, mgawanyiko, falme. Makundi haya yanaitwa lazima. Pia kuna kategoria za hiari: jamii ndogo, ndogo, jamii ndogo, kabila, kabila ndogo, jamii ndogo, spishi ndogo. Walakini, katika taksonomia, kategoria za hiari hutumiwa mara chache sana.

Nomenclature ya microorganisms ni chini ya sheria za kimataifa. Kwa hivyo, kuna Kanuni ya Kimataifa ya Nomenclature ya Bakteria. Kwa uyoga wa chachu, mwongozo kuu ni "Chachu. Utafiti wa Kijamii", kwa fangasi wenye filamentous na mwani - Kanuni ya Kimataifa ya Nomenclature ya Botanical.

Ili kutaja vitu katika biolojia, kama katika zoolojia na botania, hutumia binary au binomial (kutoka Lat. bis- mara mbili) mfumo wa nomenclature, kulingana na ambayo kila aina ina jina linalojumuisha maneno mawili ya Kilatini. Neno la kwanza linamaanisha jenasi, na la pili linafafanua aina maalum ya jenasi hii na inaitwa epithet maalum. Jina la kawaida huandikwa kila mara kwa herufi kubwa, na jina maalum – na herufi ndogo hata kama epithet maalum imetolewa kwa heshima ya mwanasayansi, kwa mfano Clostridia pasteuriani. Katika maandishi, haswa na michoro ya Kilatini, misemo yote imeainishwa. Wakati wa kutaja jina la microorganism mara kwa mara, jina la generic linaweza kufupishwa kwa barua moja au zaidi ya awali, k.m. NA.pasteuriani. Ikiwa maandishi yana majina ya vijidudu viwili vinavyoanza na herufi moja (kwa mfano, Clostridia pasteuriani Na Citrobacter freundii), basi vifupisho lazima viwe tofauti (S. pasteuriani Na Ct. freundii). Ikiwa microorganism inatambuliwa tu kwa jenasi, neno sp limeandikwa badala ya epithet maalum. (aina- aina), kwa mfano Pseudomonas sp. Katika kesi hii, wakati jina la microorganism linatajwa tena katika maandishi, jina la generic linapaswa kuandikwa kwa ukamilifu.

Ili kutaja spishi ndogo, tumia kifungu kinachojumuisha jina la jenasi, pamoja na epithets maalum na ndogo. Ili kutofautisha kati ya epithets hizi, mchanganyiko wa barua umeandikwa kati yao, ambayo ni neno fupi la spishi ndogo - "subsp." au (chini ya kawaida) "ss." Kwa mfano, Lactobacillus delbrueckii subsp. bulgaricus.

Kwa kila aina, onyesha pia muhtasari wa jina la mkusanyiko wa tamaduni za microorganism ambayo huhifadhiwa, na nambari ambayo imeorodheshwa hapo. Kwa mfano, Clostridia butyricum ATCC 19398 ina maana kwamba matatizo hayo yanashikiliwa katika Mkusanyiko wa Utamaduni wa Aina ya Marekani (ATCC) chini ya nambari 19398. Orodha ya makusanyo maarufu duniani ya vijidudu imetolewa katika Mwongozo wa Bergeys wa Utaratibu wa Bakteriolojia, 1984-1989), katika katalogi za tamaduni za viumbe vidogo. na machapisho mengine ya kumbukumbu.

Maelezo ya aina yoyote mpya ya microorganism inategemea aina ya kawaida, ambayo huhifadhiwa katika moja ya makusanyo ya microorganisms na kulingana na jumla ya mali zake. aina hii

sifa katika makala asili au ufafanuzi. Aina ya aina ni aina ya nomenclatural ya spishi kwa sababu jina la spishi limepewa. Iwapo aina zozote za awali zilizojumuishwa katika spishi zile zile zitapatikana baadaye kuwa zinastahili kuteuliwa kama spishi maalum, zinapaswa kupewa majina mapya, jina la spishi za zamani likibaki kwa aina na aina zinazohusiana. Katika kesi hii, idadi ya shida iliyopewa jina inabaki sawa. Matatizo halisi ni yale yanayolingana kabisa na mali zao.

Kwa jenasi, aina ya nomenclatural ni spishi maalum iliyoteuliwa ambayo ina seti ya wahusika ambao ni tabia zaidi ya wawakilishi wa taxon fulani. Kwa mfano, kwa aina Bacillus aina ya aina ni KATIKA.subtilis.

Baadhi ya miongozo na catalogs zinaonyesha majina ya zamani ya microorganisms zilizoitwa jina, pamoja na majina ya waandishi ambao kwanza walitenga microorganism hii, na mwaka wa kuchapishwa ambapo kiumbe hiki kilielezwa kwanza. Kwa mfano, moja ya aina ya chachu imeonyeshwa kwenye orodha ya Mkusanyiko wa Viumbe vyote vya Kirusi (VKM) kama Candida magnolia(Lodder et Kreger van Rij, 1952) Meyer et Yarrow 1978, BKM Y-1685. Hii ina maana kwamba ilielezewa kwa mara ya kwanza na Lodder na Kreger van Rij katika chapisho mnamo 1952, wakati ambapo spishi hiyo ilipewa jina. Torulopsis magnolia. Mwaka 1978 Torulopsis magnolia lilibadilishwa jina na watafiti kama vile Meyer na Yarrow kuwa Candida magnolia na kwa sasa imehifadhiwa katika VKM chini ya nambari ya VKM Y-1685. Herufi Y mbele ya nambari ya shida inamaanisha "Chachu".

Mbali na dhana ya "mchujo," maneno "lahaja," "aina," na "fomu" hutumiwa katika biolojia. Kawaida hutumiwa kuteua aina za vijidudu ambazo hutofautiana katika sifa fulani kutoka kwa aina ya aina. Mkazo unaotofautiana na ule wa kawaida katika sifa za kimofolojia huitwa morphovar(morphotype), sifa za kisaikolojia na biokemia - biovar(biotype, aina ya kisaikolojia), kulingana na uwezo wa kuunganisha misombo fulani ya kemikali - hemovar(chemoform, chemotype), hali ya kilimo - kilimo, kwa aina ya majibu kwa kuanzishwa kwa bacteriophage - phagovar(phagotype, lysotype), sifa za antijeni - serovar(serotype)
Nakadhalika.

Katika kazi juu ya genetics ya microorganisms neno hutumiwa mara nyingi "clone", ambapo tunamaanisha idadi ya seli zinazohusiana na urithi zilizopatikana bila kujamiiana kutoka kwa seli ya mzazi mmoja. Katika biolojia ya molekuli, clone inarejelea nyingi

nakala za mlolongo wa DNA zinazofanana zilizopatikana kwa kuziingiza kwenye vekta za cloning (kwa mfano, plasmids). Neno "zilizobadilishwa vinasaba" au aina za "recombinant" hurejelea aina ya vijidudu vilivyopatikana kwa sababu ya hila za uhandisi wa kijeni. Mara nyingi aina mpya za microorganisms hupatikana kwa kutumia mutagens.

Kila aina mpya ya vijidudu vilivyotengwa na vyanzo vya asili au vilivyotengenezwa na mwanadamu lazima iwe na sifa ili kupata seti kamili ya data juu ya mali ya vijidudu.
katika utamaduni safi. Data hizi zinaweza kutumika, kwa mfano, kukusanya pasipoti ya matatizo ya thamani ya viwanda, pamoja na utambulisho wao.

Kusudi la kitambulisho - weka msimamo wa taxonomic wa aina iliyosomwa kulingana na ulinganisho wa mali yake na spishi zilizosomwa na kukubalika (zilizosajiliwa rasmi). Kwa hivyo, matokeo ya kitambulisho kawaida ni kitambulisho cha vijidudu vilivyo chini ya uchunguzi na spishi au kazi fulani.
kwa jenasi fulani. Ikiwa aina iliyosomwa au kikundi cha aina hutofautiana katika mali zao kutoka kwa wawakilishi wa taxa inayojulikana, basi wanaweza kugawanywa katika taxon mpya. Kwa kufanya hivyo, maelezo ya taxon mpya hutolewa, ikiwa ni pamoja na, kwa mfano, katika kesi ya bakteria, zifuatazo: orodha ya matatizo yaliyojumuishwa katika taxon; sifa za kila aina; orodha ya mali zinazochukuliwa kuwa muhimu
katika taxon; orodha ya mali zinazostahiki ushuru kwa uwakilishi katika ushuru wa juu wa karibu; tembeza sifa za uchunguzi, kutofautisha ushuru uliopendekezwa na ushuru unaohusiana kwa karibu; maelezo tofauti ya aina ya kawaida (aina); picha ya microorganism.

Ili ushuru mpya uliopendekezwa kukubalika rasmi, maelezo yake lazima yachapishwe kulingana na sheria fulani. Kwa mfano, uchapishaji halali au ulioidhinishwa wa taxon ya bakteria unahitaji uchapishaji wa makala inayoielezea katika Jarida la Kimataifa la Systematic and Evolutionary Microbiology (IJSEM). Ikiwa uchapishaji utaonekana katika jarida lingine la kisayansi linaloheshimika (uchapishaji unaofaa), basi uchapishaji upya wa makala kutoka jarida hilo hutumwa kwa IJSEM. Tangu 1980, IJSEM imechapisha mara kwa mara kinachojulikana orodha ya majina ya kisheria ya bakteria. Wanaorodhesha majina yote ya bakteria ambayo yamechapishwa katika IJSEM (chapisho halisi au lililoidhinishwa) au iliyochapishwa hapo awali kwa njia yoyote.

majarida mengine mashuhuri. Mara baada ya jina la bakteria kujumuishwa katika orodha ya IJSEM ya majina yaliyoidhinishwa, jina hilo linachukuliwa kuwa halali, bila kujali kama limechapishwa hapo awali katika IJSEM au jarida lingine. Tarehe ya kuchapishwa kwa jina la ushuru fulani katika IJSEM au katika orodha ya majina yaliyohalalishwa ya IJSEM ni kipaumbele cha ushuru.

Utamaduni wa aina ya aina ya aina mpya ya microorganism huhamishiwa kwa kuhifadhi kwenye moja ya makusanyo ya microorganisms ya umuhimu wa dunia. Ikiwa aina ya aina imepotea, inaweza kubadilishwa na kinachojulikana kinachojulikana kama neotype. Katika kesi hiyo, ni lazima kuthibitishwa kuwa mali ya shida mpya inafanana vizuri na maelezo ya moja iliyopotea. Ili kuonyesha kuwa ushuru unapendekezwa kwa mara ya kwanza, kifupi "fam." huongezwa baada ya jina la familia mpya. nov.”, jenasi mpya – “gen. nov.", na aina mpya - "sp. nov." Kwa mfano,
mnamo 2000, pamoja na waandishi-wenza, familia mpya ya bakteria ilipendekezwa - Oscillochloridaceae, familia. nov. Msemo "spishi insertac sedis" inamaanisha kuwa tunazungumza juu ya spishi ambayo kwa muda mfupi haina hadhi dhahiri ya ujasusi, kwani haijulikani wazi ni ushuru gani wa hali ya juu - jenasi au familia - spishi zilizopewa zinapaswa kuwekwa kwa sababu ya ukosefu wa data ya majaribio muhimu kwa hili
data.

2 MAELEZO NA KITAMBULISHO

MICROORGANISMS

Kama ilivyoelezwa tayari, kanuni za uainishaji na kitambulisho cha vikundi tofauti vya prokariyoti na microorganisms za yukariyoti zina tofauti kubwa. Utambulisho wa uyoga kwa madarasa, maagizo
na familia kulingana na sifa za tabia muundo na njia za malezi, kwanza kabisa, ya miundo ya uzazi. Kwa kuongezea, sifa za uboreshaji wa ngono, muundo na kiwango cha ukuaji wa mycelium (ya asili, iliyokuzwa vizuri, septate au nonseptate), kitamaduni (koloni) na ishara za kisaikolojia. Utofautishaji wa genera ndani ya familia na utambuzi wa spishi hufanywa kwa kutumia herufi za kimofolojia zilizopatikana
kutumia hadubini ya elektroni, pamoja na sifa za kisaikolojia na kitamaduni. Hakuna kibainishi kimoja cha kutambua uyoga wote, kwa hivyo kwanza darasa au mpangilio wa uyoga unaotambuliwa hubainishwa na kisha kibainishi kinachofaa cha darasa hili au agizo hutumiwa.

Utambulisho wa fungi ya chachu, ambayo ni kati ya vitu vinavyotumiwa sana vya tafiti mbalimbali za microbiological, inategemea kitamaduni (macromorphological), sifa za cytological, kisaikolojia na biochemical, sifa za mzunguko wa maisha na mchakato wa ngono; ishara maalum inayohusiana na ikolojia, na inafanywa kwa kutumia viashiria maalum vya chachu.

Taksonomia ya aina za microscopic za mwani inategemea muundo wa seli zao na muundo wa rangi. Uamuzi wa nafasi ya utaratibu wa protozoa unafanywa kwa kutumia vipengele vya kimofolojia na mizunguko ya maisha. Kwa hivyo, utambuzi wa yukariyoti unategemea sana sifa za mizunguko yao ya morphology na maendeleo.

Utambulisho wa prokariyoti, ambazo kimofolojia ni tofauti kidogo kuliko yukariyoti, unategemea matumizi ya anuwai ya phenotypic na, mara nyingi, herufi za genotypic. Kwa kiasi kikubwa, kuliko utambuzi wa eukaryotes, inategemea sifa za kazi, kwani bakteria nyingi zinaweza kutambuliwa si kwa kuonekana kwao, lakini tu kwa kujua ni taratibu gani wanazoweza kufanya.

Wakati wa kuelezea na kutambua bakteria, mali zao za kitamaduni, mofolojia, shirika la seli, sifa za kisaikolojia na biochemical, muundo wa kemikali seli, yaliyomo

guanini na cytosine (GC) katika DNA, mfuatano wa nyukleotidi katika jeni inayosimba usanisi wa 16S rRNA na sifa nyingine za pheno- na genotypic. Katika kesi hii, sheria zifuatazo lazima zizingatiwe: fanya kazi na tamaduni safi, tumia njia za kawaida za utafiti, na pia tumia seli ambazo ziko katika hali hai ya kisaikolojia kwa chanjo.

2.1 Sifa za kitamaduni

Utamaduni, au macromorphological, mali ni pamoja na sifa ukuaji wa vijidudu kwenye vyombo vya habari vya virutubishi vilivyo na kioevu.

2.1.1 Ukuaji kwenye media dhabiti

Juu ya uso wa vyombo vya habari vyenye virutubisho, kulingana na mbegu, microorganisms zinaweza kukua kwa namna ya koloni, streak au lawn inayoendelea. Ukoloni inayoitwa nguzo ya pekee ya seli za aina moja, zinazokua mara nyingi kutoka kwa seli moja. Kulingana na mahali ambapo seli zilitengenezwa (kwenye uso wa kati ya virutubishi mnene, katika unene wake au chini ya chombo), zinajulikana. ya juu juu, ya kina Na chini makoloni.

Elimu juunal Makoloni ni kipengele muhimu zaidi cha ukuaji wa microorganisms nyingi kwenye substrate mnene. Makoloni kama haya ni tofauti sana. Wakati wa kuwaelezea, zingatia ishara zifuatazo:

wasifu- gorofa, convex, crater-umbo, koni-umbo, nk (Mchoro 1);

fomu- pande zote, amoeboid, isiyo ya kawaida, rhizoid, nk (Mchoro 2);

ukubwa (kipenyo)- kipimo katika milimita; ikiwa ukubwa wa koloni hauzidi 1 mm, basi huitwa dotted;

uso- laini, mbaya, iliyokunjwa, iliyokunjwa, iliyokunjamana, yenye miduara iliyokolea au iliyopigwa kwa radially;

kuangaza Na uwazi koloni ni shiny, matte, mwanga mdogo, unga, uwazi;

rangi- zisizo na rangi (koloni nyeupe chafu zimeainishwa kama zisizo na rangi) au za rangi - nyeupe, njano, dhahabu, machungwa.
vaya, lilac, nyekundu, nyeusi, nk; hasa kumbuka mgao katika

substrate ya rangi; wakati wa kuelezea makoloni ya actinomycetes, rangi ya mycelium ya anga na substrate imebainishwa, pamoja na kutolewa kwa rangi ndani ya kati;

makali- laini, wavy, jagged, pindo, nk (Mchoro 3);

muundo- homogeneous, faini- au coarse-grained, mkondo, nk (Mchoro 4); makali na muundo wa koloni imedhamiriwa kwa kutumia kioo cha kukuza au kwa ukuzaji wa chini wa darubini. Kwa kufanya hivyo, sahani ya Petri imewekwa kwenye hatua ya microscope na kifuniko chini;

uthabiti kuamua kwa kugusa uso wa koloni na kitanzi. Koloni inaweza kuondolewa kwa urahisi kutoka kwa agar, kuwa mnene, laini au kukua ndani ya agar, mucous (vijiti kwa kitanzi), viscous, kuonekana kama filamu (kuondolewa kabisa), kuwa tete (huvunja kwa urahisi wakati unaguswa na kitanzi) .

1 - curved; 2 - umbo la crater; 3 - uvimbe;

4 - kukua ndani ya substrate; 5 - gorofa; 6 - convex;

7 - umbo la matone ya machozi; 8 - umbo la koni

Kielelezo 1 - wasifu wa koloni

makoloni ya kina, kinyume chake, wao ni monotonous kabisa. Mara nyingi huonekana kama lenti zilizobandika zaidi au chini,
katika makadirio wana sura ya ovals na ncha zilizoelekezwa. Pekee
katika bakteria chache, makoloni ya kina yanafanana na tufts ya pamba ya pamba
yenye vijiti vya kuota ndani ya virutubishi. Uundaji wa makoloni ya kina mara nyingi hufuatana na kupasuka kwa kati mnene ikiwa microorganisms hutoa dioksidi kaboni au gesi nyingine.

Makoloni ya chini ya microorganisms mbalimbali kawaida huchukua fomu ya filamu nyembamba za uwazi zinazoenea chini.

Ukubwa na vipengele vingine vingi vya koloni vinaweza kubadilika na umri na hutegemea muundo wa mazingira. Kwa hiyo, wakati wa kuwaelezea, onyesha umri wa utamaduni, muundo wa kati na joto la kilimo.

1 - pande zote; 2 - pande zote na makali ya scalloped; 3 - pande zote na roll karibu na makali; 4, 5 - rhizoid; 6 - na makali ya rhizoid; 7 - amoeboid;
8 - kama thread; 9 - iliyokunjwa; 10 - sio sahihi;

11 - umakini; 12 - tata

Kielelezo 2 - sura ya koloni

/ - Nyororo; 2 - wavy; 3 - meno; 4 - blade; 5 - sio sahihi; 6 - ciliated; 7 - filamentous; 8 - mbaya; 9 - matawi

Kielelezo 3 - makali ya koloni

1 - homogeneous; 2 - iliyotiwa laini; 3 - nafaka-coarse;

4 - mtiririko; 5 - nyuzinyuzi

Kielelezo 4 - Muundo wa koloni

Wakati wa kuelezea ukuaji wa microorganisms kwa kiharusi kumbuka sifa zifuatazo: chache, wastani au nyingi, zinazoendelea
na ukingo laini au wavy, umbo wazi, unaofanana na minyororo ya makoloni yaliyotengwa, kuenea, pinnate, mti-kama, au rhizoid (Mchoro 5). Tabia ya mali ya macho ya plaque, rangi yake, uso na msimamo.

Ili kuashiria makoloni na ukuaji wa streak, microorganisms nyingi mara nyingi hupandwa kwenye agar ya peptone ya nyama. Gelatin ya nyama-peptoni pia hutumiwa. Ili kuona bora makoloni ya kina, vyombo vya habari vyenye agar au gelatin vinapendekezwa kufafanuliwa.

1 - imara na makali laini; 2 - imara na makali ya wavy; 3 - inayoonekana wazi; 4 - kuenea; 5 - manyoya; 6 - rhizoid

Kielelezo 5 - Ukuaji wa bakteria kwenye mstari

2.1.2. Ukuaji wa media ya kioevu

Ukuaji wa microorganisms katika vyombo vya habari vya virutubisho vya kioevu ni sare zaidi na unaambatana na uchafu wa kati, uundaji wa filamu au sediment. Tabia ya ukuaji wa microorganisms katika kati ya kioevu, ni alibainisha kiwango cha tope(dhaifu, wastani au nguvu); vipengele vya filamu(nyembamba, mnene au huru, laini au iliyokunjwa),
na mashapo yanapotokea, huonyeshwa kama ni machache au mengi, mnene, yamelegea, membamba au yamelegea.

Mara nyingi ukuaji wa microorganisms unaambatana na kuonekana kwa harufu, rangi ya mazingira, na kutolewa kwa gesi. Mwisho huo hugunduliwa na malezi ya povu, Bubbles, na pia kwa msaada wa "kuelea" - zilizopo ndogo zilizofungwa mwisho mmoja. Kuelea huwekwa
ndani ya bomba la majaribio na mwisho uliofungwa kabla ya kunyoosha kati na hakikisha kuwa imejaa kabisa ya kati. Ikiwa gesi inatolewa, hujilimbikiza katika kuelea kwa namna ya Bubble.

Ili kuelezea muundo wa ukuaji wa microorganisms katika vyombo vya habari vya kioevu, hupandwa kwenye mchuzi wa peptoni ya nyama (MPB) au kwa njia nyingine ambayo inahakikisha ukuaji mzuri.

2.2 Sifa za kimofolojia

Sifa za kimofolojia na mpangilio wa seli za bakteria ni pamoja na sifa kama vile umbo na ukubwa wa seli, motility yao, uwepo wa flagella na aina ya flagellation, na uwezo wa kuunda spores. Utambuzi katika seli unaweza pia kuwa muhimu.
mifumo ya utando wa tabia (klorosomes, carboxysomes, phycobilisomes, vacuoles ya gesi, nk) asili katika makundi binafsi ya bakteria.
rium, pamoja na inclusions (miili ya parasporal, granules za volutin,
poly-β-hydroxybutyrate, polysaccharides, nk). Madoa ya gramu ya seli ni ya umuhimu wa msingi kwa jamii ya bakteria.
na muundo wa kuta zao za seli.

2.3 Sifa za kisaikolojia na za kibayolojia

Utafiti wa mali ya kisaikolojia na biochemical ni pamoja na, kwanza kabisa, kuanzisha njia ya lishe ya bakteria iliyochunguzwa (picha/chemo-, auto/heterotrophy) na aina ya kimetaboliki ya nishati (uwezo wa kuchacha, kupumua kwa aerobic au anaerobic au photosynthesis) . Ni muhimu kuamua sifa kama vile uwiano wa bakteria kwa oksijeni ya molekuli, joto, pH ya mazingira, chumvi, mwanga na mambo mengine ya mazingira. KATIKA kundi hili ishara

Pia inajumuisha orodha ya substrates zinazotumika kama vyanzo vya kaboni, nitrojeni na sulfuri, hitaji la vitamini na mambo mengine ya ukuaji, uundaji wa bidhaa za kimetaboliki, na uwepo wa vimeng'enya fulani. Kwa hili, vipimo maalum hutumiwa.

Vipimo vingi vinavyotumiwa kugundua ishara hizi (wakati mwingine huitwa vipimo vya kawaida) ni muhimu kwa uchunguzi na hutumiwa sana katika biolojia ya matibabu. Uzalishaji wao unahitaji uwekezaji mkubwa wa muda, idadi kubwa ya vyombo vya habari changamano na vitendanishi, kufuata masharti ya kawaida, na utekelezaji makini. Ili kuharakisha na kuwezesha mchakato wa kutambua baadhi ya microorganisms ambazo ni muhimu sana kwa matibabu, mifumo mbalimbali ya mtihani imetengenezwa, kwa mfano, Oxi/Ferm Tube, Mycotube na Enterotube II mifumo kutoka Hoffmann-La Roche (Uswisi), nk. Kwa hivyo, mfumo wa Enterotube II, iliyoundwa kwa ajili ya utambuzi wa enterobacteria, ni chumba cha plastiki kilicho na seli 12 zilizo na vyombo vya habari vya uchunguzi wa rangi. Uingizaji wa vyombo vya habari vyote unafanywa na harakati za kutafsiri-mzunguko kupitia chumba cha sindano na nyenzo za mbegu. Incubation hufanyika kwa masaa 24 kwa joto la 37 ºС. Matokeo chanya au hasi ya mtihani huhukumiwa na mabadiliko ya rangi ya kati, kupasuka kwa agar (mtihani wa malezi ya gesi) au baada ya kuanzishwa kwa reagents maalum (mtihani wa malezi ya indole, majibu ya Voges-Proskauer). Kila tabia imeteuliwa na nambari maalum, kwa hivyo data iliyopatikana inaweza kuingizwa kwenye kompyuta na programu inayofaa na kupokea jibu juu ya msimamo wa ushuru wa shida iliyo chini ya utafiti.

Kuamua utungaji wa seli za bakteria pia ni muhimu kwa utaratibu wao (chemosystematics). Njia za kemotaxonomic zinaweza kuwa muhimu, hasa, kwa makundi hayo ya bakteria ambayo morphological na sifa za kisaikolojia hutofautiana sana na hazitoshi kutekeleza utambulisho wao wa kuridhisha. Muundo wa kuta za seli prokaryotes tofauti inajumuisha madarasa kadhaa ya heteropolymers ya kipekee: murein (au pseudomurein), lipopolysaccharides, mycolic na asidi teichoic. Muundo wa ukuta wa seli pia huamua mali ya serological ya bakteria. Hii ni msingi wa njia za immunochemical kwa utambuzi wao.

Muundo wa lipid na asidi ya mafuta ya seli za bakteria wakati mwingine pia hutumiwa kama alama ya kemotaxonomic. Utafiti wa kina wa asidi ya mafuta uliwezekana na maendeleo ya uchambuzi wa chromatographic ya gesi. Tofauti katika utungaji wa lipid hutumiwa kutambua bakteria kwenye jenasi na hata kiwango cha aina. Njia hii, hata hivyo, ina vikwazo fulani, kwani maudhui ya asidi ya mafuta ya seli yanaweza kutegemea hali ya utamaduni na umri wa utamaduni.

Taksonomia ya baadhi ya bakteria huzingatia muundo wa kwinoni
na flygbolag nyingine za elektroni, pamoja na rangi.

Taarifa muhimu kuhusu uhusiano wa kuheshimiana wa bakteria inaweza kupatikana kwa kusoma protini za seli - bidhaa za tafsiri ya jeni. Kulingana na utafiti wa membrane, ribosomal, jumla ya protini za seli, pamoja na enzymes ya mtu binafsi, mwelekeo mpya uliundwa - taxonomy ya protini. Mtazamo wa protini za ribosomal ni miongoni mwa zilizo imara zaidi na hutumiwa kutambua bakteria katika kiwango cha familia au utaratibu. Mwonekano wa protini za utando unaweza kuonyesha jenasi, spishi, na hata tofauti za ndani. Hata hivyo, sifa misombo ya kemikali seli haziwezi kutumika kutambua bakteria kwa kutengwa na data nyingine inayoelezea phenotype, kwa kuwa hakuna kigezo cha kutathmini umuhimu wa vipengele vya phenotypic.

Wakati mwingine njia hutumiwa kutambua bakteria au vijidudu vingine, kama vile chachu. taksonomia ya nambari (au Adansonian).. Inategemea mawazo ya mtaalam wa mimea wa Kifaransa M. Adanson, ambaye alipendekeza kwamba sifa mbalimbali za phenotypic ambazo zinaweza kuzingatiwa zinapaswa kuchukuliwa kuwa sawa, ambayo inafanya uwezekano wa kuhesabu umbali wa taxonomic kati ya viumbe kwa namna ya uwiano wa viumbe. idadi ya sifa chanya kwa jumla ya idadi ya wale waliosoma. Kufanana kati ya viumbe viwili vilivyo chini ya uchunguzi imedhamiriwa na kutathmini kwa kiasi kikubwa idadi kubwa iwezekanavyo (kawaida angalau mia moja) ya sifa za phenotypic, ambazo huchaguliwa ili chaguo zao ziwe mbadala na zinaweza kuonyeshwa kwa ishara za "minus" na "plus". Kiwango cha kufanana huwekwa kulingana na idadi ya vipengele vinavyolingana na huonyeshwa kama mgawo wa mawasiliano S:

Wapi a + d- jumla ya sifa ambazo aina A na B zinalingana;

A- aina zote mbili zilizo na sifa nzuri;

d- zote mbili na hasi;

b- jumla ya sifa ambazo aina A ni chanya, aina B ni hasi;

Na- jumla ya sifa ambazo aina A ni hasi na aina B ni chanya.

Thamani ya mgawo wa mawasiliano inaweza kutofautiana kutoka 0 hadi 1. Mgawo wa 1 unamaanisha utambulisho kamili, 0 inamaanisha kutofautiana kabisa. Tathmini ya mchanganyiko wa sifa hufanywa kwa kutumia kompyuta. Matokeo yaliyopatikana yanawasilishwa kwa namna ya matrix ya kufanana na / au kwa namna ya dendrogram. Taksonomia ya nambari inaweza kutumika wakati wa kutathmini ufanano kati ya taxa ya vijiumbe vya kiwango cha chini pekee (jenasi, spishi). Hairuhusu mtu kuteka hitimisho moja kwa moja kuhusu uhusiano wa maumbile ya microorganisms, lakini kwa kiasi fulani huonyesha mali zao za phylogenetic. Kwa hivyo, imeanzishwa kuwa sifa za phenotypic za bakteria ambazo zinaweza kujifunza kwa sasa zinaonyesha kutoka 5 hadi 20% ya mali ya genotype yao.

2.4 Utafiti wa genotype

Utafiti wa genotype ya microorganisms uliwezekana kutokana na maendeleo ya mafanikio ya biolojia ya molekuli na kusababisha kuibuka kwa genosystematics. Utafiti wa genotype kulingana na uchambuzi wa asidi ya nucleic, kimsingi, hufanya iwezekanavyo kujenga kwa muda mfumo wa asili (phylogenetic) wa microorganisms. Uhusiano wa phylogenetic wa bakteria hupimwa uamuzi wa maudhui ya molar guanini na cytosine (GC) katika DNA, njia za DNA–DNA na DNA–mseto wa rRNA kwa kutumia vichunguzi vya DNA, na pia kusoma mlolongo wa nyukleotidi katika 5.S, J6 SNa
23 S rRNA.

2.4.1 Uamuzi wa maudhui ya molar ya GC

Uamuzi wa maudhui ya molar ya GC kutoka jumla ya nambari Misingi ya DNA katika prokariyoti, kama ilivyoonyeshwa tayari, ni kati ya 25 hadi 75%. Kila aina ya bakteria ina DNA yenye maudhui ya wastani ya GC. Walakini, kwa kuwa kanuni za urithi zimeharibika, na usimbaji wa kijeni hautegemei tu juu ya yaliyomo kwenye besi za nyukleotidi katika vitengo vya kuweka alama (triplets), lakini pia juu ya msimamo wa jamaa, yaliyomo wastani wa GC katika DNA ya spishi mbili za bakteria zinaweza. kuambatana na genotypic yao muhimu

mgawanyiko. Ikiwa viumbe viwili vinafanana sana katika utungaji wa nucleotide, basi hii inaweza kuwa ushahidi wa uhusiano wao wa mageuzi tu ikiwa wana idadi kubwa ya sifa za kawaida za phenotypic au kufanana kwa maumbile kuthibitishwa na njia nyingine. Wakati huo huo, tofauti (zaidi ya 10 ... 15%) katika utungaji wa nucleotide ya DNA ya aina mbili za bakteria yenye mali ya kawaida ya phenotypic inaonyesha kwamba wao ni, angalau, kwa aina tofauti.

2.4.2 Mbinu ya DNA –Mchanganyiko wa DNA

Njia hii ni muhimu zaidi kwa kutathmini uhusiano wa kijeni wa bakteria. Wakati majaribio yanafanywa kwa uangalifu, habari muhimu inaweza kupatikana kuhusu kiwango cha homolojia yao ya maumbile. Ndani ya spishi moja ya bakteria, kiwango cha homolojia ya maumbile ya aina hufikia kutoka 70 hadi 100%. Walakini, ikiwa, kama matokeo ya utofauti wa mageuzi, mfuatano wa msingi wa nyukleotidi wa jenomu za bakteria mbili hutofautiana kwa kiwango kikubwa, basi uunganisho maalum wa DNA-DNA unakuwa dhaifu sana hivi kwamba hauwezi kupimwa. Katika kesi hii, mseto wa DNA-rRNA hufanya iwezekane kuongeza kwa kiasi kikubwa anuwai ya viumbe ambavyo kiwango cha homolojia ya kijeni kinaweza kuamuliwa kwa sababu ya ukweli kwamba katika sehemu ndogo ya genome ya bakteria ya usimbaji wa ribosomal RNA, mlolongo wa msingi wa asili. imehifadhiwa kikamilifu zaidi kuliko katika sehemu nyingine za kromosomu. Kwa sababu hiyo, mseto wa DNA–rRNA mara nyingi hufichua homolojia ya juu kiasi ya jenomu za bakteria ambapo muunganisho wa DNA-DNA hauonyeshi homolojia inayoonekana.

2.4.3 Mbinu ya uchunguzi wa DNA (uchunguzi wa jeni).

Mbinu ya uchunguzi wa DNA ni tofauti ya mbinu ya mseto ya molekuli ya DNA-DNA. Katika kesi hii, mmenyuko wa mseto haufanyiki kati ya maandalizi mawili ya jumla ya DNA, lakini kati ya kipande cha mlolongo wa nyukleotidi ya DNA (probe), pamoja na jeni (alama ya maumbile) inayohusika na kazi maalum (kwa mfano, upinzani dhidi ya dawa fulani. ), na DNA bakteria zinazochunguzwa. Njia ya kawaida ya kuunda uchunguzi wa jeni ni kutenga vipande maalum kwa upangaji wa molekuli. Ili kufanya hivyo, kwanza unda benki ya jeni ya bakteria iliyochunguzwa kwa kugawanya DNA yake na endonucleases.

kizuizi, na kisha chagua clone inayotaka kutoka kwa jumla ya vipande vya DNA na electrophoresis, ikifuatiwa na kuangalia mali ya maumbile ya vipande hivi kwa mabadiliko. Kisha, kipande cha DNA kilichochaguliwa kinaunganishwa kwenye plasmid inayofaa (vekta),
na plasmid hii iliyojumuishwa huletwa ndani ya aina ya bakteria inayofaa kwa kazi (kwa mfano, Escherichia coli). DNA ya Plasmidi imetengwa kutoka kwa biomasi ya bakteria inayobeba uchunguzi wa DNA na kuwekewa lebo, kwa mfano, na lebo ya radioisotopu. Kisha uchunguzi wa DNA ni mseto
na DNA ya bakteria. Maeneo ya mseto yanayotokana yanaonyeshwa na autoradiography. Kulingana na mzunguko wa jamaa wa mseto wa alama ya kijeni na kromosomu ya bakteria fulani, wao hufanya
hitimisho kuhusu uhusiano wa kijenetiki wa bakteria hizi na matatizo chini ya utafiti.

2.4.4 Mbinu ya uchanganuzi wa mfuatano wa nyukleotidi

katika RNA ya ribosomal

Ili kutambua bakteria na kuunda mfumo wa phylogenetic kwa uainishaji wao, njia iliyoenea zaidi na muhimu ni uchambuzi wa mlolongo wa nucleotide katika RNA ya ribosomal. Molekuli za 5S, 16S na 23S rRNA zina maeneo yenye kiwango cha juu zaidi cha uthabiti wa kijeni. Wanaaminika kuwa nje ya utaratibu wa utekelezaji uteuzi wa asili na hubadilika kama matokeo ya mabadiliko ya moja kwa moja yanayotokea kwa kasi isiyobadilika. Mkusanyiko wa mabadiliko hutegemea wakati tu, kwa hivyo habari juu ya mlolongo wa nyukleotidi ya molekuli hizi inachukuliwa kuwa lengo kuu la kuamua uhusiano wa phylojenetiki wa viumbe katika kiwango kutoka kwa jamii ndogo hadi ufalme. Katika kesi ya uchambuzi
5S rRNA kawaida huamua mlolongo kamili wa nyukleotidi, ambayo katika molekuli hii katika prokariyoti ni nyukleotidi 120. Wakati wa kusoma 16S na 23S rRNA, iliyo na nucleotides 1500 na 2500, kwa mtiririko huo, oligonucleotides zilizopatikana kutoka kwa molekuli hizi mara nyingi huchambuliwa kwa kutumia endonucleases maalum ya kizuizi. Utafiti ulioenea zaidi ni utafiti wa mlolongo wa nyukleotidi katika 16S rRNA. Utafiti wa muundo wa 16S rRNA wa wawakilishi wa microorganisms mbalimbali ulisababisha kutambua kundi la archaea kati ya prokaryotes. Thamani za mgawo zinazofanana SAB, kutenganisha I6S rRNA ya bakteria na archaea iko ndani ya 0.1, wakati thamani SAB, sawa na 1.0 inalingana na homolojia kamili ya mfuatano wa nyukleotidi, na 0.02 kwa kiwango cha bahati mbaya.

Kwa kuongezeka, dendrograms zinapendekezwa kwa ajili ya utambuzi wa bakteria, kuonyesha uhusiano kati ya genera ya bakteria, aina au matatizo kulingana na utafiti wa mlolongo wa nyukleotidi (au oligonucleotides) katika rRNA, pamoja na DNA-DNA.
na mseto wa DNA-rRNA. Hata hivyo, utambuzi wa bakteria kabla ya kuzaliwa kwa kuzingatia tu mbinu za maumbile bila kujifunza kwanza sifa zao za phenotypic mara nyingi haiwezekani kabisa. Kwa hiyo, mbinu bora zaidi ya kufanya kazi kwenye taxonomy ya bakteria inachukuliwa kuwa utafiti wa mali zote za genotypic na phenotypic. Katika kesi ya kutofautiana kati ya data ya phylogenetic na phenotypic, kipaumbele kinatolewa kwa muda kwa mwisho.

Changamoto mahususi ni utambuzi wa wale bakteria na archaea, hasa aina za baharini, ambazo haziwezi kukua kwenye vyombo vya habari vya maabara vinavyojulikana na ambazo tamaduni safi hazingeweza kupatikana. Hadi hivi majuzi, shida hii ilionekana kuwa haiwezi kutatuliwa. Walakini, karibu miaka 15 iliyopita, njia zilitengenezwa ambazo zilifanya iwezekane kutoa, kuiga, mlolongo
na kulinganisha RNA za ribosomal moja kwa moja kutoka kwa mazingira. Hii ilifanya iwezekanavyo kuhesabu kwa usahihi na kutambua microorganisms wanaoishi biotope iliyotolewa bila kuwatenganisha katika utamaduni safi. Kwa hivyo microorganism iliyotambuliwa ambayo "haiwezekani" katika maabara inaweza hata kuelezewa, lakini kwa kuongeza neno "candidatus" (mgombea). Neno "candidatus" litaambatana na spishi mpya hadi wanasayansi wapate masharti ya kukuza kiumbe hiki kwenye maabara na kupata utamaduni wake safi, ambao utaruhusu mali zake zote kusomwa na kuchapishwa kama halali.

Utambuzi wa bakteria kwa kawaida hufanywa kwa kutumia Mwongozo wa Bergey wa Bakteriolojia Ainisho Toleo la kwanza la mwongozo huu lilichapishwa mwaka wa 1923 chini ya uongozi wa mwanabakteria maarufu wa Marekani D. H. Bergey (1860–1937).Tangu wakati huo, umechapishwa tena mara kwa mara. kwa ushiriki wa wanabiolojia mashuhuri duniani.Katika toleo la hivi punde, la tisa, bakteria wote wamegawanywa katika vikundi 35 kulingana na sifa za phenotypic zinazotambulika kwa urahisi.Sifa hizi zimeainishwa
katika majina ya kikundi. Nafasi ya taxonomic ya bakteria ndani ya vikundi imedhamiriwa kwa kutumia meza na funguo zilizokusanywa kwa msingi wa idadi ndogo ya herufi za phenotypic. Jedwali za kutofautisha za kutofautisha aina za bakteria wa jenasi fulani, kwa mfano jenasi Bacillus, hazijatolewa, na msomaji anarejelewa kwenye Mwongozo wa Burgee wa Taxonomy of Bacteria.

Mwongozo wa juzuu nne wa Bergey wa Bakteriolojia ya Utaratibu, 1984–1989 una zaidi. habari kamili kuhusu nafasi ya taxonomic ya bakteria. Kwa kila kikundi cha bakteria, maelezo ya genera iliyojumuishwa ndani yake hutolewa.
na spishi, ikijumuisha zile ambazo hazieleweki katika hali ya taksonomia. Mbali na maelezo ya kina ya phenotypic, ikiwa ni pamoja na morphology, shirika na kemikali ya seli, mali ya antijeni, aina ya makoloni, vipengele vya mzunguko wa maisha na ikolojia, sifa za genera pia hutoa habari juu ya maudhui ya GC katika DNA, matokeo ya mseto wa DNA-DNA na DNA-rRNA. Funguo na meza hukuruhusu kutambua bakteria sio tu kwa jenasi, bali pia kwa spishi.

Hivi sasa, toleo la pili la Kitabu cha Mwongozo wa Bakteriolojia ya Mfumo wa Bergcy chenye juzuu nne kimechapishwa.Juzuu la kwanza lilichapishwa mwaka wa 2002. Zaidi ya hayo, kuna idadi ya makala na vitabu vinavyotoa funguo halisi za utambuzi. vikundi tofauti bakteria, kwa mfano, bacilli, pseudomonads, actinomycetes, enterobacteria.

Hivi sasa, data nyingi mpya zimekusanywa, ikiwa ni pamoja na zile zilizopatikana kutokana na uchanganuzi wa mfuatano wa nyukleotidi wa RNA ya ribosomal, kuhusu spishi za bakteria zilizosomwa hapo awali na zilizotengwa hivi karibuni. Kulingana na habari hii, muundo wa spishi za vikundi fulani vya bakteria, kwa mfano jenasi Bacillus, itarekebishwa: aina fulani zitabaki ndani ya jenasi Bacillus, na zingine zitaunda genera mpya au zitagawiwa kwa aina nyingine, tayari zilizopo za bakteria. Inapaswa pia kuzingatiwa kuwa kuelezea aina mpya za bakteria, kama sheria, sifa zaidi zinasomwa kuliko zinahitajika kwa kitambulisho chao, kwani funguo na meza hazijumuishi sifa zote za bakteria zilizotambuliwa, lakini ni zile tu ambazo hutofautiana. aina tofauti (Jedwali 1).

Jedwali 1 - Kiwango cha chini cha orodha ya data inayohitajika

maelezo ya aina mpya za bakteria (kulingana na H. Truper, K. Schleifer, 1992)

Muendelezo wa Jedwali 1

3 KAZI YA MAABARA “KITAMBULISHO
MICROORGANISMS"

Lengo la kazi: familiarization na kanuni za msingi za kutambua microorganisms. Wakati wa kazi ya maabara, kila mwanafunzi anasoma sifa za bakteria zinazohitajika kuelezea aina ya bakteria na kuitambua kwa kiwango cha jenasi.

Kazi

1. Kuamua usafi wa bakteria iliyotambuliwa na kujifunza morpholojia ya seli zake.

2. Eleza sifa za kitamaduni.

3. Jifunze mali ya cytological ya bakteria iliyotambuliwa.

4. Jifunze sifa za kisaikolojia na biokemikali za bakteria zinazotambulika.

5. Kuamua unyeti wa bakteria kwa antibiotics.

6. Jaza jedwali na ufupishe.

3.1 Uamuzi wa usafi wa bakteria iliyotambuliwa

na kusoma mofolojia ya seli zake

Ili kutekeleza kazi ya kutambua vijidudu, kila mwanafunzi hupokea tamaduni moja ya bakteria (kwenye chombo cha agar kilichowekwa kwenye bomba la majaribio), ambayo inajaribiwa kwa usafi. Hii imefanywa kwa njia kadhaa: kuibua, kwa kupanda kwenye vyombo vya habari vya virutubisho na microscopy.

Mchoro wa ukuaji Bakteria inayotokana hutazamwa na mchirizi kwenye uso wa katikati ya agar iliyopigwa. Ikiwa ukuaji kando ya mstari haufanani, basi mazao yanachafuliwa. Kisha tamaduni hiyo inachunguzwa kwenye bomba la majaribio kwenye sehemu ya kati (peptone agar ya nyama) kwa matumizi
katika kazi zaidi, na pia kuchuja juu ya uso wa kati imara katika sahani ya Petri kwa kutumia njia ya uchovu kuangalia kwa usafi (kwa usawa wa makoloni mzima). Mirija ya majaribio na vyombo vilivyochanjwa huwekwa kwenye thermostat kwa joto la 30 ºС kwa muda wa siku 2 hadi 3. Salio la tamaduni ya awali ya bakteria kwenye bomba la majaribio hutumiwa kuangalia usafi kwa kutumia hadubini (kulingana na homogeneity ya kimofolojia ya idadi ya watu), na pia kusoma sura, msimamo wa jamaa, uhamaji wa seli na saizi zao. Utamaduni huo unafanywa kwa darubini kwa kutumia maandalizi ya "matone yaliyovunjika" na maandalizi ya seli zilizowekwa, zilizo na fuchsin. Matokeo yameingizwa kwenye jedwali lililokusanywa kwa namna ya Jedwali 2.

meza 2 – Tabia za bakteria zilizotambuliwa

3.2 Sifa za kitamaduni

Katika somo linalofuata, sahani ya Petri iliyopandwa na kusimamishwa kwa bakteria inayotambulika inachunguzwa. Kigezo cha usafi wa utamaduni ni usawa wa makoloni yaliyokua. Eleza mali ya kitamaduni ya makoloni ya bakteria kwa mujibu wa sehemu
chakavu 2.1 na matokeo yameingizwa kwenye jedwali 2.

3.3 Utafiti wa mali ya cytological ya bakteria zilizotambuliwa

3.3.1 Uwepo wa endospores

Idadi ndogo ya seli kutoka kwa kati imara huwekwa kwenye kitanzi kwenye slide ya kioo katika tone la maji ya bomba na smear hufanywa. Smear ni kavu katika hewa, fasta katika moto burner na ufumbuzi 5% ya asidi chromic hutumiwa kwa hilo. Baada ya 5 ... dakika 10 huosha na maji. Maandalizi yamefunikwa na kipande cha karatasi ya chujio na karatasi hutiwa maji kwa ukarimu na fuchsin ya carbolic ya Ziehl. Joto maandalizi juu ya moto hadi mvuke itaonekana (sio kwa kuchemsha), kisha uichukue kando na uongeze sehemu mpya ya rangi. Utaratibu huu unafanywa kwa dakika 7. Ni muhimu kwamba rangi hupuka, lakini karatasi haina kavu. Baada ya baridi, huondolewa, maandalizi yanaoshwa na maji na kufutwa kabisa na karatasi ya chujio.

Ikiwa shughuli zote zinafanywa kwa usahihi, kuchorea kunageuka kuwa tofauti, na spores nyekundu nyekundu huonekana wazi dhidi ya historia ya bluu ya cytoplasm.

3.3.2 Madoa ya gramu

3.3.2.1 Fanya kupaka nyembamba kwenye slaidi ya glasi iliyochafuliwa kwenye tone la maji ili seli zisambazwe sawasawa juu ya uso wa glasi na zisifanye mafungu.

3.3.2.2 Maandalizi yamekaushwa kwenye hewa, yamewekwa juu ya moto wa burner na kubadilika kwa 1...dakika 2 na gentian carbolic au crystal violet.

3.3.2.3 Kisha rangi hutolewa na smears hutendewa kwa dakika 1 ... 2 na ufumbuzi wa Lugol mpaka wawe nyeusi.

3.3.2.4 Futa suluhisho la Lugol, ondoa rangi ya maandalizi kwa dakika 0.5...1.0 na 96% pombe ya ethyl na suuza haraka na maji.

3.3.2.5 Zaidi ya hayo kubadilika kwa dakika 1…2 na fuchsin ya maji.

3.3.2.6 Rangi hutolewa, maandalizi huoshawa na maji na kukaushwa.

3.3.2.7 Hadubini yenye mfumo wa kuzamisha.

Wakati kuharibiwa kwa usahihi, bakteria ya gramu-chanya ni bluu-violet, gramu-hasi – rangi nyekundu-nyekundu.

Ili kupata matokeo ya kuaminika, inahitajika kuandaa smears kwa uwekaji wa Gram kutoka kwa tamaduni za vijana, zinazokua kikamilifu (kawaida ya siku moja), kwani seli kutoka kwa tamaduni za zamani wakati mwingine hutoa athari ya Gram isiyo na msimamo. Bakteria ya gramu-hasi inaweza kuonekana kama bakteria ya gramu ikiwa filamu ya bakteria (smear) ni nene sana na upaukaji wa pombe haujakamilika kabisa. Bakteria chanya wanaweza kuonekana kama bakteria ya gramu-hasi ikiwa smear itapaushwa na pombe.

3.3.3 Uchoraji kwa upinzani wa asidi

Smear ya bakteria inayochunguzwa huandaliwa kwenye slaidi ya kioo isiyo na mafuta katika tone la maji. Maandalizi yamekaushwa kwenye hewa na yamewekwa juu ya moto wa burner. Karatasi ya chujio imewekwa kwenye smear, maandalizi yanajazwa na fuchsin ya carbol ya Ziehl na moto mara 2-3 hadi mvuke uonekane, ukishikilia slaidi na vidole juu juu ya moto wa burner. Kuonekana kwa mvuke huzingatiwa kwa kuangalia smear kutoka upande, na wakati wanapoonekana, mara moja huwekwa kando.
dawa kwa upande. Ruhusu maandalizi ya baridi, ondoa karatasi ya chujio, ukimbie rangi na safisha smear na maji. Kisha
seli hubadilishwa rangi kwa mmumunyo wa 5% wa asidi Hhttps://pandia.ru/text/79/131/images/image009_42.gif" width="11" height="23 src=">. Ili kufanya hivyo, slaidi ya glasi imejaa mara 2-3 kwenye glasi ya asidi ya sulfuri,

bila kumuweka ndani. Maandalizi yanaosha tena vizuri na maji na kubadilika kwa dakika 3 hadi 5 na bluu ya methylene (kulingana na Leffler). Rangi hutolewa, maandalizi huoshawa na maji, kavu na kuchunguzwa na mfumo wa kuzamishwa. Inapotiwa doa kwa usahihi, seli za bakteria zenye kasi ya asidi huonekana nyekundu, wakati seli za bakteria zisizo na asidi. – bluu.

3.3.4 Uamuzi wa uhamaji

Utamaduni unaochunguzwa huingizwa kwenye safu ya 0.2...0.5% ya nusu-kioevu agar kwa kutumia njia ya kuchomwa. Ili sifa za ukuaji zionekane wazi zaidi, kuchomwa hufanywa kwa karibu na ukuta wa bomba la mtihani. Kupanda huwekwa kwenye thermostat kwa masaa 24. Kupanda kwa njia hii hufanya iwezekanavyo kutambua na kutenganisha microorganisms za simu kutoka kwa immobile.

Aina zisizo za kawaida za bakteria hukua kando ya mstari wa kuchomwa, na kutengeneza matawi madogo ya silinda au conical. Mazingira yanabaki kuwa wazi kabisa. Vijidudu vya rununu wakati wa chanjo kama hiyo husababisha tope iliyotamkwa, ikienea zaidi au chini sawasawa katika unene wote wa kati.

3.4 Utafiti wa mali ya kisaikolojia na biochemical

bakteria zinazotambulika

3.4.1 Uhusiano na oksijeni ya molekuli

Kuhusiana na oksijeni ya Masi, vijidudu vimegawanywa katika vikundi vinne: obligate aerobes, microaerophiles, aerobes facultative (anaerobes) na anaerobes obligate. Kuhukumu
ili kubaini kama vijidudu ni vya kundi moja au jingine, kusimamishwa kwa vijiumbe hutiwa ndani ya mirija ya majaribio kwa kutumia kirutubisho cha agar kilichoyeyushwa kilichopozwa hadi joto la 45 ºC. Kupanda pia kunaweza kufanywa kwa sindano. Aerobes kali kukua juu ya uso wa kati na katika safu ya juu; microaerophiles- kwa umbali fulani kutoka kwa uso. Anaerobes ya kitivo kawaida hukua katika unene mzima wa kati. Anaerobes kali kukua tu katika kina cha kati, chini kabisa ya bomba la mtihani (Mchoro 6).

1 - aerobes; 2 - microaerophiles; 3 - anaerobes ya facultative;

4 - anaerobes

Mchoro 6 - Ukuaji wa vijidudu wakati wa kupanda kwa sindano ( A) na wakati wa kupanda kwenye udongo mnene ulioyeyushwa ( b)

3.4.2 Ukuaji wa glukosi na vyombo vya habari vya peptoni

Utamaduni huletwa kwa kitanzi tasa kwenye chombo cha kioevu kilicho na: 5.0 g/l peptoni, 1.0 g/l K2HP04, 10.0 g/l glucose, 2 ml bromothymol bluu (suluhisho la pombe 1.6%), maji yaliyochujwa hutiwa kwenye mirija ya majaribio ( 8...10 ml kila mmoja) na kuelea. Muda wa kulima ni siku 7 kwenye thermostat kwa joto la 30 ° C. Ukuaji wa microorganisms au kutokuwepo kwake imedhamiriwa na uchafu wa kati, uundaji wa filamu au sediment. Mabadiliko katika rangi ya kiashiria (bromothymol bluu) inaonyesha kuundwa kwa tindikali (rangi ya njano ya kati) au alkali (rangi ya bluu ya kati) bidhaa za kimetaboliki. Uundaji wa gesi unaonyeshwa na mkusanyiko wake katika kuelea. Matokeo ya uchunguzi yanalinganishwa na mazingira tasa.

3.4.3 Ukuaji kwenye gelatin kati

Shughuli ya enzymes ya ziada ya seli ya proteolytic katika vijidudu imedhamiriwa kwa kutumia gelatin, casein au protini zingine kama substrate. Ya kati na gelatin inajumuisha mchuzi wa nyama-peptoni (MPB) na 10 ... 15% gelatin (MPB). Kupanda hufanywa kwa sindano.

Kwa kutumia sindano ya bakteria, seli za microbial huchaguliwa bila kuzaa kutoka kwenye shoal na sindano inaingizwa ndani ya unene wa safu ya MPZ hadi chini ya bomba.

Muda wa kilimo ni kutoka siku 7 hadi 10 kwa joto la kawaida. Liquefaction ya gelatin ni alibainisha kuibua. Ikiwa gelatin inayeyusha, onyesha ukubwa na aina ya liquefaction - safu-kwa-safu, umbo la funnel, umbo la mfuko, umbo la crater, umbo la turnip, umbo la Bubble.

3.4.4 Ukuaji wa wastani na maziwa

Kupanda kwenye "agar ya maziwa" kwenye vyombo vya Petri hufanywa ili kuamua uwezo wa bakteria kuoza kasini ya maziwa. Ya kati ina sehemu sawa za maziwa ya skim tasa na tasa 3% ya agar agar yenye maji. Bakteria huingizwa na kitanzi, kuchora kiharusi kando ya kipenyo cha kikombe au kando ya katikati ya sekta ambayo kikombe kinagawanywa. Muda wa kuoteshwa kwa bakteria kwenye thermostat ifikapo 30 °C ni siku 7. Casein hidrolisisi hugunduliwa na ukanda wa kusafisha kati karibu na makoloni au utamaduni wa microorganisms mzima kando ya mstari. Eneo hilo linaonekana wazi baada ya kutibu kati na bakteria zilizopandwa na suluhisho la asidi ya trichloroacetic 5%. Eneo la hidrolisisi ya kasini hupimwa kwa milimita kutoka kwenye ukingo wa mstari au koloni hadi mpaka wa eneo la mwanga. Ukubwa wa kipenyo cha eneo la mwanga, juu ya shughuli ya caseinolytic ya bakteria.

3.4.5 Ukuaji kwenye wanga

Kupanda kwenye kati ya agar na wanga (katika sahani za Petri) zenye (g/l): peptoni – 10.0; KN2R04 – 5.0; wanga mumunyifu – 2.0; agar – 15.0; pH 6.8 – 7.0, huzalishwa ili kuamua malezi ya amylase na microorganisms. Bakteria huingizwa na kitanzi, kuchora kiharusi kando ya kipenyo cha kikombe au kando ya katikati ya sekta ambayo kikombe kinagawanywa. Muda wa ukuaji wa bakteria ni siku 7 kwenye thermostat kwa joto la 30 ° C. Hidrolisisi ya wanga hugunduliwa baada ya kutibu kati na bakteria zilizokua na suluhisho la Lugol. Ili kufanya hivyo, mimina 3 hadi 5 ml ya suluhisho la Lugol kwenye uso wa kati. Wanga wenye wanga hubadilika kuwa bluu, na eneo la hidrolisisi hubaki bila rangi au hupata rangi nyekundu-kahawia ikiwa wanga imetolewa kwa hidrolisisi hadi dextrins. Eneo la hidrolisisi ya wanga hupimwa kutoka kwa makali ya mstari (koloni) hadi mpaka wa eneo la mwanga (mm). Ukubwa wa kipenyo cha eneo la mwanga, juu ya shughuli za amylase.

3.4.6 Mtihani wa Kikatalani

Sehemu ya utamaduni mzima imesimamishwa kwa kutumia kitanzi cha bakteria katika tone la peroxide ya hidrojeni 3% kwenye slide ya kioo. Uwepo wa katalati unaonyeshwa kwa kuundwa kwa Bubbles za gesi, aliona 1 ... dakika 5 baada ya kuanzishwa kwa bakteria kwa jicho la uchi au chini ya darubini kwa ukuzaji wa chini. Unaweza kutumia matone machache ya peroxide ya hidrojeni moja kwa moja kwenye koloni au utamaduni uliopandwa kwenye slant ya agar na kuchunguza kutolewa kwa oksijeni ya molekuli.

3.4.7 Uamuzi wa unyeti wa bakteria
kwa antibiotics

Unyeti wa vijidudu kwa viuavijasumu unaweza kuamuliwa kwa urahisi kwa kutumia diski za karatasi zilizotengenezwa tayari zilizowekwa na viuavijasumu fulani. Viumbe vidogo vinavyochunguzwa vinakuzwa kwenye kiungo sahihi cha virutubisho. Kusimamishwa nene kwa microorganism inayochunguzwa huandaliwa katika maji ya bomba yenye kuzaa kwa kuosha seli na maji kutoka kwenye uso wa kati ya virutubisho imara. Kufanya kazi karibu na moto wa burner, ongeza 1 ml ya kusimamishwa kusababisha
ndani ya bomba la majaribio na 20 ml ya kuyeyuka na kupozwa kwa joto la 50 ºC agar kati, kwa mfano, nyama peptone agar (MPA). Ikiwa microorganisms zilipandwa katika kati ya virutubishi vya kioevu, basi kiasi kinachofaa cha utamaduni huongezwa kwa agar. Yaliyomo kwenye bomba huchanganywa haraka na kwa uangalifu na kumwaga kwenye sahani ya Petri isiyo na kuzaa.

Wakati kati ina ngumu, karatasi huwekwa juu ya uso wake.
ny disks kwa umbali sawa kutoka kwa kila mmoja na kwa mbali

1.5...2.0 cm kutoka makali ya kikombe. Sahani za Petri huwekwa kwa saa 2 kwa joto la kawaida kwa uenezaji bora wa antibiotics kwenye unene wa kati ya agar, na kisha, bila kugeuza, huwekwa kwenye thermostat kwa saa 24 kwa joto la 30 ºC. Siku moja baadaye, uundaji wa kanda za ukandamizaji wa ukuaji wa microorganisms zilizojifunza karibu na diski zinajulikana. Ikiwa bakteria iliyo chini ya utafiti ni nyeti kwa antibiotics fulani, basi kanda zisizo na ukuaji wa utamaduni zinapatikana karibu na diski. Kipenyo cha eneo la kuzuia ukuaji hupimwa na mtawala wa milimita na matokeo yameandikwa katika Jedwali 3. Eneo la zaidi ya 30 mm linaonyesha.
inaonyesha unyeti mkubwa wa microorganisms kwa antibiotic, na chini ya 12 mm inaonyesha unyeti dhaifu.

Wakati mjaribu ana masuluhisho yake
viua vijasumu au viowevu vya kitamaduni vyenye

antibiotic, tumia njia ya kutumia visima katika unene wa agar.
Katika kesi hiyo, katika agar iliyohifadhiwa iliyohifadhiwa na microorganism ya mtihani, mashimo yanafanywa na drill ya kuziba ya kuzaa (kipenyo kutoka 6 hadi 8 mm) kwa umbali wa 1.5 ... 2.0 cm kutoka kwenye makali ya sahani.
Ufumbuzi wa antibiotic au kioevu cha utamaduni huongezwa kwenye visima. Njia hii pia inafanya uwezekano wa kutambua uwezo wa microorganisms mzima katika kati ya kioevu kuunda vitu vya antibiotic.

Jedwali 3 – Athari za antibiotics kwenye ukuaji wa bakteria

MASWALI 4 YA MTIHANI

1. Bainisha masharti yafuatayo:

- shida; mkazo wa kweli; aina ya shida;

- koloni;

- sifa za kitamaduni;

- Jamii;

- uainishaji;

- muundo wa majina;

- plasmid;

- kuandika fagio.

2. Je, ni sehemu gani ya taxonomy ya microorganisms inajumuisha? Wape sifa zao.

3. Kwa nini mifumo iliyopo ya uainishaji wa microorganisms ni bandia?

5. Ni sifa gani zinazofautisha aina tofauti za aina moja ya microorganism?

6. Ni kategoria zipi za taksonomia za vijidudu ambazo zimeainishwa kuwa za lazima na ambazo zimeainishwa kuwa za hiari?

7. Orodhesha sheria za msingi za nomenclature ya microorganisms.

8. Kusudi kuu la kutambua microorganisms ni nini?

9. Je, kanuni za uainishaji na utambulisho wa vikundi tofauti vya prokariyoti na yukariyoti hutofautianaje?

10. Ni mali gani zinazochunguzwa wakati wa kuelezea na kutambua bakteria?

11. Ni ishara gani zinazozingatiwa wakati wa kuelezea makoloni ya uso, ya kina na ya chini ya microorganisms?

12. Ni vipengele gani vinavyojulikana wakati wa kuelezea ukuaji wa microorganisms kwa kiharusi?

13. Ni nini kinachojulikana wakati wa sifa ya ukuaji wa microorganisms katika kati ya virutubisho kioevu?

14. Je, sifa za kimofolojia na shirika la seli za bakteria zinajumuisha vipengele gani?

15. Je, ni mali gani ya kisaikolojia na ya biochemical ambayo hujifunza wakati wa kutambua bakteria?

16. Katika hali gani ni muhimu kutumia njia za kemotaxonomic?

17. Toa mifano ya vitu vinavyotumika kama viashirio vya kemo-taxonomic?

18. Ni sifa gani za taksonomia ya protini?

19. Eleza njia ya taksonomia ya nambari, ina mapungufu gani?

20. Ni njia gani zinazotumiwa kutathmini uhusiano wa phylogenetic wa bakteria?

21. Nini kiini cha njia ya uchunguzi wa DNA na tofauti yake kutoka kwa njia
Mseto wa DNA-DNA?

22. Je, ni vipengele vipi vya njia ya kuchambua mlolongo wa nyukleotidi katika RNA ya ribosomal?

23. Ni ishara gani ambazo ni msingi wa uainishaji wa bakteria katika "Mwongozo wa Burgee kwa Bakteria"?

24. Ni mali na sifa gani zinazosomwa wakati wa kuelezea aina mpya za bakteria?

25. Ni njia gani za kuamua usafi wa bakteria iliyotambuliwa?

26. Je, ni kanuni gani za msingi za kufanya mbinu ya kuchafua Gram?

27. Ni makundi gani ambayo microorganisms imegawanywa katika kuhusiana na oksijeni ya molekuli?

28. Ni nini kinachotumiwa kama substrate wakati wa kuamua shughuli za enzymes za protolytic za ziada katika microorganisms?

29. Je! Unajua njia gani za kuamua unyeti wa microorganisms kwa antibiotics?Toa sifa zao.

30. Ni njia gani inayotumiwa kuamua uzalishaji wa amylase na microorganisms?

31. Jinsi gani mbegu hufanya iwezekane kutambua na kutenganisha vijidudu vya mwendo kutoka kwa zisizohamishika?

MAPISHI 5 YA DAMU NA VIRUTUBISHO

5.1 Fuksini ya msingi ya kaboliki (Tsilya fuchsin)

Suluhisho la 5% la maji ya phenol mpya iliyosafishwa - 100 ml;

Suluhisho la pombe la msingi la fuchsin - 10 ml;

Mchanganyiko ulioandaliwa huchujwa baada ya masaa 48.

5.2 Methylene bluu (Leffler)

suluhisho la pombe iliyojaa ya bluu ya methylene - 30 ml;

maji - 100 ml;

- 1% ya suluhisho la maji la KOH - 1 ml.

5.3 Mchuzi wa peptoni ya nyama (MPB)

500 g nyama ya kusaga bila mafuta na tendons kumwaga ndani ya lita 1 maji ya bomba na kutolewa kwa joto la kawaida kwa masaa 12 au kwenye thermostat kwa joto la 37 ºС kwa saa 2, na kwa joto la 50 ºС kwa saa moja. Kisha nyama hutiwa kupitia cheesecloth, na infusion inayosababishwa huchemshwa kwa dakika 30. Katika kesi hii, protini huganda. Masi kilichopozwa huchujwa kupitia chujio cha pamba na kuongezwa kwa maji kwa kiasi cha awali. Ifuatayo, ongeza 5 hadi 10 g ya peptoni na 5 g ya chumvi ya meza kwa lita 1 ya mchuzi wa nyama. Ya kati ni moto hadi peptoni itapasuka, na kuchochea daima. MPB inafanywa sterilized kwa shinikizo la 2 atm kwa dakika 20.

5.4 Peptone agar ya nyama (MPA)

Ongeza 20 g ya agar kwa lita 1 ya MPB. Ya kati ni joto mpaka agar itapasuka, basi kati ni alkali kidogo.

Suluhisho la 20% la NaCO64" height="52" bgcolor="white" style="vertical-align:top;background: white">