Нормальна мікрофлора організму тварини коротко. Мікрофлора повітря та води. Кількісне та якісне визначення мікрофлори повітря та води. Роль нормальної мікрофлори

У Останнім часомСуттєво зріс інтерес до індигенної (власної) мікрофлори сільськогосподарських та свійських тварин та методів її корекції. Питання про можливість існування тварин і людини у відсутності мікроорганізмів вперше було поставлено Луї Пастером (цитується по 10). Згідно з сучасними уявленнями, в природному середовищі необхідний симбіоз макроорганізму з його мікрофлорою, що заселяє. Безмікробні тварини (і рослини) можуть жити і розвиватися лише в умовах штучної ізоляції (стерильному довкіллі). Нормальна мікрофлора тварини та людини постійно персистує в організмі здорового господаря і взаємодіє з ним за принципом симбіозу. Індигенна флора представлена ​​мікробіоценозами (певними співтовариствами мікроорганізмів), що формуються в природних нішах (біотопах) фізіологічних систем макроорганізму (травний тракт, респіраторний та урогенітальний апарати, шкірний покрив і т.д.) контактують з зовнішнім середовищем. У будь-якому мікробіоценозі розрізняють характерну для даного виду (облігатну, резидентну) випадкову (факультативну, тимчасову, транзиторну) мікрофлору. У кожному з біотопів формуються власні, відмінні від інших, умови для існування та взаємодії мікроорганізмів, що їх населяють. Тому видовий та кількісний склад флори в різних біоценозах мають суттєві відмінності. У зв'язку з цим існують такі поняття, як мікроекологія кишечника, шкірного покриву, геніталій, верхніх дихальних шляхів, порожнини рота і т. д. У живому організмі міститься величезна кількість клітин мікроорганізмів-симбіонтів (досягає 1014). Їх видове розмаїття (понад 400 видів) забезпечують участь нормальної мікрофлори в найрізноманітніших фізіологічних функціях макроорганізму (13, 14). Однією з найважливіших функцій нормальної мікрофлори є забезпеченняколонізаційної резистентності (КР) по відношенню як до сторонніх мікроорганізмів, що проникають в організм господаря, так і обмеження розмноження її окремихпредставників поза місцями властивого їм проживання. При зниженні КР відбувається порушення рівноваги якісного та кількісного складу індигенної флори. За рахунок збільшення зростання окремих популяцій мікроорганізмів відбувається колонізація останніми шкірного та слизових покривів макроорганізму, а також відзначають розширення ареалу поширення представників опортуністичної (умовно-патогенної) мікрофлори, включаючи аероби та анаероби, їх транслокацію у внутрішні органи. Це веде до гнійно-запальних процесів, септицемії. Посилюється передача факторовантибіотикорезистентності та патогенності між угрупованнями бактерій (1, 8, 16). Найбільш складні мікробіоценози ссавців – мікрофлора товстого оздоблення кишечника, рота та носоглотки. Якісний та кількісний склад мікрофлори поверхні шкіри, а також слизових порожнин носа, геніталій і т.д. більш убогий. Тому індигенна мікрофлора кишечника істотно впливає на стан мікробіоценозів інших біотопів живого організму. Склад нормальної флори шлунково-кишковий трактздорового дорослого собаки (табл. 1) стабільний і за відсутності істотних змін за умов годівлі, змісту, стресових ситуацій, і навіть захворювань із застосуванням фармакологічних препаратів коливається незначно. Через високу кислотність мікробіоценоз шлунка досить бідний. Мікроорганізми, здатні зберігати свою життєдіяльність у кислому середовищі та в присутності пепсину (ацидофільна паличка та інші лактобактерії, ентерококи, гриби, бацили, сарцини), локалізуються переважно у пилоричній його частині. Питома кількість мікроорганізмів дванадцятипалої та худої кишок коливається в межах 102-105 бактерій в 1 г їхнього вмісту. Гальмування їх зростання в цій частині тонкого кишківника забезпечується за рахунок більш кислого середовища, яка підтримується за рахунок надходження хімусу (вмісту шлунка), та викиду жовчних кислот. Активна перистальтика, секреторні імуноглобуліни (IgA, IgЕ), та ферменти безпосередньо беруть участь у регуляції чисельності мікроорганізмів. Основні жителі - лактобактерії, ентерококи, ентеробактерії, стептококи, за своїм кількісним представництвом незначно поступаються біфідобактерій, іноді зустрічаються кандиди. Аналогічна ситуація спостерігається і в краніальній частині клубової кишки, тоді як вкаудальний мікробіоценоз значно різноманітніший і часто включає до свого складу види, що переважно мешкають у товстому відділі кишечника (бактероїди, клостридії, еубактерії, фузобактерії та ін.). Питома вміст мікроорганізмів у цьому ділянці може досягати 107 один г вмісту кишечника. Слід сказати, що мікробіозенозиндигенна флора товстого відділу кишечника в порівнянні з тонким значно переважає як в якісному так і кількісному відношенні. Крім згаданих у таблиці 1, тут практично завжди є представники вейолонелл, пептококів, пептострептококів, актиноміцетів, псевдомонасів, алкалігенесів та інших пологів (11). У міру просування до прямої кишки питомий вміст бактерій зростає (1010-1012мікробних клітин на 1г вмісту). Залежно від вологості фекалій відсотковий вміст бактеріальної маси по відношенню до загальної ваги досліджуваного матеріалу коливається в межах 15-30%. У цій статті насамперед пропонуються результати дослідження мікроекології кишечника у собак у віці 2-7 років, де особливу увагу приділяли нормальній мікрофлорі. У найближчих номерах ми плануємо представити матеріали щодо вікової динаміки індигенної флори кишечника, також будуть розглянуті причини розвитку дисбактеріозів (зниження КР) та способи їх корекції. Отримані результати показують, що основу нормальної мікрофлори кишечника усобак, як і в інших тварин, становлять неспоротворні облігатні анаеробні мікроорганізми. Співвідношення представників анаеробно-аеробної флори кишечника в нормі становить приблизно 1000:1 відповідно. Найважливішими представниками резидентної флори шлунково-кишкового тракту є біфідо- та лактобактерії, бактероїди, ентерококи, ешерихії, дріжджоподібні гриби (9). БіфідобактеріїБільшість нормофлори кишечника (від 60 до 90% і більше) у здорових собак, як і в інших моногастричних тварин складають біфідобактерії (рис. 1). У нормі з 1 г вмісту товстого відділу кишечника собак (залежно від віку, типу годування та ін.) їх висівали до 1012. Слід звернути увагу ветеринарних лікарів на те, що мікроскопічне дослідження фекалій при використанні спеціальних методів забарвлення мазків може дати лише орієнтовне уявлення про співвідношення популяцій мікроорганізмів (присутність коків, грампозитивних та грамнегативних бактерій, грибів і т. д.). Наявність чи відсутність біфідофлори цим шляхом встановити не можна, т.к. вона має морфологічні подібності з низкою інших бактерій - облігатних мікроорганізмів кишечника (додаток 1). Визначення кількісного вмісту біфідофлори здійснюють методом посіву послідовних десятикратних розведень досліджуваного матеріалу на елективні (спеціальні) напіврідкі живильні середовища, які розливають високим (не менше двох третин висоти пробірки) стовпчиком і перед посівом регенерують (прогрівають). Піддається бактеріологічному аналізу матеріал вносять акуратно в нижню частину пробірки, вміст якої злегка перемішують, дотримуючись при цьому умов анаеробіозу, і далі інкубують при оптимальній температурі від 1 до 3 днів. Такого роду дослідження вимагає високої кваліфікації та практичних навичок бактеріолога. Враховуючи домінуюче положення біфідофлори в кишечнику здорових особин, а також дані клінічних та мікробіологічних досліджень, багато авторів дійшли висновку про те, що представники роду біфідобактерій - основна таксономічна група мікрофлори шлунково-кишкового тракту, яка є показником здоров'я (4). Дійсно, при зниженні КР біфідофлора першою зникає зі шлунково-кишкового тракту. Переважання даних мікроорганізмів в кишечнику, як правило, перешкоджає розмноженню патогенних і умовно-патогенних бактерій, нормалізуючи мікробіоценоз в цілому. Антагоністична активність біфідобактерій до патогенів, що належать кентеробактеріям (ешерихії, клебсієли, сальмонели, протей, шигели і т.д.), кокам (срепто-, стафілококи), вібріонам, кампілобактеріям, клостридіям та ін. лактату, продукції летких жирних кислот (ЛЖК), лізоцимоподібних та інших речовин, що володіють антибактеріальною активністю, і навіть можливості придушувати токсиноутворення чи руйнувати токсини патогенних бактерій тощо. Особливо слід підкреслити їх участь у симбіозі з макроорганізмом на рівні пристінного травлення, що визначається добре вираженими адгезивними властивостями. Це є одним із головних елементів конкурентоспроможності в освоєнні харчової ніші по відношенню до інших представників індигенної флори та патогенів. Біфідобактерії безпосередньо беруть участь у регуляції імунних функцій макроорганізму. Вони стимулюють проліферацію клітин лімфоїдної тканини, посилюють фагоцитарну активність макрофагів, моноцитів і гранулоцитів, посилюють специфічний гуморальний імунітет, синтез цитокінів (вироблення гамма-інтерферону, JL-6, TNF, ALPHA), а також стимулюють імунні механізми на рівні клітин, включаючи протипухлинний захист. Як і інші представники індигенної флори біфідобактерії здатні викликати декон'югацію жовчних кислот. Вони також беруть активну участь у водно-сольовому, білковому, жировому, нуклеотидному, вітамінному обмінах, підтримці рН та анаеробіозу в кишечнику. Вони синтезують такі амінокислоти, як лізин, аргінін, валін, метіонін, лейцин, тирозин, а також глютамінову кислоту. На долю незамінних амінокислотприпадає близько 40% від загальної їх кількості. Внутрішньоклітинні біфідобактерії акумулюють вітаміни В1, В2, В6, В12, С, нікотинову, фолієву кислоти і біотин, а також продукують в культуральне середовище В6, В12 і фолієву кислоту. При дефіциті представників такого роду знижується синтез ендогенного утворення вітаміну К, що веде до порушення процесів згортання крові. Викладена коротко характеристика біфідобактерій свідчить про те, що вони як один з різновидів нормальної флори макроорганізму домінують не тільки в кількісному, але і в якісному (фізіологічному) відношенні. У проведеній нами видовій ідентифікації біфідобактерій, виділених з фекалійсобак, показано, що переважаючим виявився вид B.adolescentis (41,7% штамів), другим за чисельністю був вид B.globosum (16,7%), третім - B.termophilum (8, 3%). У жодному випадку не вдалося виділити від собак біфідобактерії виду B.bifidum, характерні для кишечника людини і використовувані для виготовлення пробіотичних препаратів в гуманітарній медицині. Другою за чисельністю, а очевидно і за значимістю групою резидентної флори шлунково-кишкового тракту собак є молочнокислі бактерії, представники роду Lactobacterium (додаток 2). За даними наших досліджень, кількість лактобактерій уздорових собак становить 106-109/г вмісту товстого відділу кишечника (рис.1). При зниження КР (дисбактеріозах) лактобактерії висіваються в значно меншій кількості або їх не вдається виявити зовсім (рис. 2). Молочнокислі бактерії як облігатні представники шлунково-кишкового тракту беруть активну участь у процесах, що відбуваються в ньому. Вони ферментують велику кількість вуглеводів і спиртів, окремі представники цього викликають гідролізкрохмалю і синтезують білки. Антагоністична активність молочнокислих бактерій щодо гнильної, патогенної та умовно-патогенної мікрофлори обумовлена ​​їх здатністю синтезувати численні антибіотичні речовини. Деякі з них відносяться до низькомолекулярних білків. Їх класифікували як бактеріоцини, подібні за механізмом своєї дії з антибіотиками, але відрізняються від них малою активністю щодо близьких видів мікроорганізмів (додаток 3). Характеристика фізико-хімічних властивостейбактеріоцини ацидофільнихбактерій дозволили об'єднати їх під терміном «Лактацин В». Крім того, лактобактерії продукують антимікробні речовини, що отримали назву лантабіотиків. Вони менш чутливі до дії амілаз і протеїназ і містять амінокислоти, які зазвичай не присутні в бактеріоцинах. Крім бактеріоцинів і лантабіотиків лактобактерії синтезують неідентифіковані речовини, що мають бактеріоціноподібний ефект. Етинізкомолекулярні органічні сполукинебілкової природи виявляють свою активність у присутності кислоти чи перекису водню. Вони стримують зростання та розвиток псевдоманад, сальмонел, шигел, стрептококів, стафілококів, а також анаеробних бактерій, у тому числі клостридій, біфідобактерій та бактероїдів. Одним з найважливіших продуктів метаболізму молочнокислих бактерій є перекис водню. Здатність до її продукції визначається генетично детермінованим ознакою і не залежить від основного середовища та контакту з киснем. Інгібуючий ефект перекису водню в кишечнику має більш важливе значення для стримування чисельності представників аеробної флори, ніж дія органічних кислот, що продукуються нею. Бактерицидний ефект перекису водню пов'язаний з її сильною окислювальною дією на бактеріальні клітини та руйнуванням основної молекулярної структури клітинних білків. Лактобактерії відіграють важливу роль у становленні імунітету у новонароджених, що мають низьку активність клітинного та гуморального імунітету та низьку фагоцитарну активність мононуклеарних макрофагів. Посилення фагоцитарної активності макрофагів, захоплення та катаболізм ними антигенів спостерігають при пероральному, підшкірному та інтраперитонеальному введенні живих лактобактерій, супернатантів, убитих культур або фрагментів їх стінок. В умовах in vitro та in vivo молочнокислі бактерії стимулюють продукцію інтерферонів та інтерлейкінів (3, 7). Крім перерахованих властивостей, що забезпечують імуностимулюючий і антагоністичний щодо патогенів ефект, лактобактерії властиві й інші найважливіші фізіологічні функції. Вони беруть активну участь у метаболізмі вуглеводів, білків, ліпідів, нуклеїнових кислот. Їм, як і біфідобактеріям, належить важлива роль регуляції водно-сольового обміну, підтримці рН і анаеробіозу в кишечнику, деконьюгації жовчних кислот, синтезі вітамінів, амінів та інших біологічно активних сполук. Більшість вивчених нами штамів лактобактерій, виділених з фекалій собак, було віднесено до виду L.acidophilum (56%), другим за чисельністю був вид L.plantarum (16%), третім - L.helveticum (12%). Ешеріхії Це сапрофіти, які в нормі входять до складу резидентної флори кишечника. Вони розташовуються безладно і рівномірно по всій порожнині кишечника, локалізуються переважно в просвіті і лише частково примикають до епітелію його ворсинок. Так само, як біфідо-і лактобактерії, ешерихії беруть активну участь у ферментативнихпроцесах в кишечнику, утворюючи при цьому органічні кислоти, вітаміни та іншібіологічно активні речовини. У 1905 році H. Conrad встановив, що в результаті життєдіяльності ешерихій у поживному середовищі накопичуються бактерицидні речовини, що перешкоджають зростанню інших бактерій. В даний час відомо, що ешерихії продукують як in vitro, так і in vivo до 24 типів таких речовин, названих коліцинами. Можливо, кишкову флору слід називати не сапрофітною, а умовно-патогенної, Так як у порівнянні з іншими представниками, що відносяться до даної категорії мікроорганізмів, вона є найбільш агресивною: ешерихії в числі перших заселяють організм після народження і їх частіше за інших виявляють у крові тварин при зниженні природного імунітету, наприклад, після опромінення. Так, за даними авторів (2, 5), більш ніж у 50% випадків вони є причиною септицемії у опромінених тварин. Слід пам'ятати, що величезна кількість ешерихій - патогени з постійно вираженою високою вірулентністю (додаток 4). У різних відділах кишечника здорових собак кількість ешерихій коливається в межах від 102 до 109 колонієутворюючих одиниць на 1 г досліджуваного матеріалу. Власні дослідження, проведені на здорових собаках, показують, що кількість ешерихій коливається в межах 106-109 в одному грамі фецесу. Бактероїди До складу нормальної мікрофлори шлунково-кишкового тракту, а також ротової порожнини, верхніх дихальних шляхів, сечостатевих органіввходять бактероїди. Рід Bacteroides включає більше 20 видів, більшість з яких виділяється з організму людини ітварини. В умовах кислого середовища бактероїди виявляють антагоністичну активність по відношенню до сальмонел, ешеріхій, інших мікроорганізмів і, мабуть, відіграють істотну роль у резистентності організму до інфекцій. Однак результати досліджень останніх роківсвідчать про їх участь в етіології багатьох патологічних процесів: ентерити, некротичні гепатити, перитоніти, менінгіти іт. д. Вивчення патогенності представників даного роду на тваринах свідчить про їх синергізм у розвитку інфекційних процесів, який відзначають щодо боррелій, мікоплазм, стрептококів, стафілококів, пастерел, а у людини – холерного вібріона (6). У 1 г вмісту товстого відділу кишечника здорових собак їх кількість коливається в межах 107-1010. Широко поширені в природі фекальні стрептококи або ентерококи. Їх виявляють у кишечнику та фекаліях людини і тварин, а також у грунті та воді. Ентерококи є облігатними представниками нормальної мікрофлори шлунково-кишкового тракту і деякі з них (переважно Ent. faecium) включають до складу пробіотичних препаратів для нормалізації кишкової мікрофлори. Антагоністичні функції цих мікроорганізмів пов'язані, головним чином, з їх кислотоутворюючими властивостями і здатністю продукувати бактеріоцини. У той же час ентерококи - це факультативно-анаеробні умовно-патогенні мікроорганізми, здатні викликати у тварин і людини гастроентерити, пневмонії, мастити, ендокардити, менінгіти, септицемію та інші захворювання. Як і властиво всім умовно-патогенним мікроорганізмам, їх негативний вплив проявляється уособей зі зниженням загальної резистентності. Зміст представників цього роду мікроорганізмів у здорових собак составляет104-108/ р фекалій (власні дослідження). Клостридії В організмі тварин та людини виявляється до 35 видів клостридій. Кількісний показник окремих видів(Cl.clostridiforme, Cl.innocuum, Cl.ramosum) може досягати 108-109/г фекалій (11). За даними власних досліджень, частота виділення клостридій з кишечника собак коливалася в межах 75-100% випадків. Їх питомий вміст у різних відділах становило від 0 до 104 / г досліджуваного матеріалу. Характерною особливістю клостридій є їх здатність до сапрофітного існування в ґрунті та шлунково-кишковому тракті людини та тварин. Роль представників цього роду для макроорганізму (виключаючи патогенні види) вивчена недостатньо. Є дані літератури, що свідчать про синтез клостридії вітамінів: нікотинової, фолієвої, пантотенової кислотта рибофлавіну (12). Тому природно припускати, що клостридії також беруть участь у підтримці кишкового нормобіозу свого господаря. Більше того, деякі автори вважають, що клостридії, особливо тих видів, кількість яких може досягати великих величин, є найбільш давньою регуляторною системою мікроекології людини і тварин, що забезпечує гомеостатичні взаємини між господарем та його мікрофлорою. Гриби роду Candida Дріжджоподібні гриби роду Candida становлять самостійний рід і налічують понад 80 видів. Вони входять до складу нормальної флори, що заселяє слизові оболонки респіраторного апарату та шлунково-кишкового тракту, а також статевих органів та шкіри. З фекалій здорових собак ми висівали їх у кількостях до 103, рідко – 104/г. Гриби роду Candida також відносяться до умовно-патогенних мікроорганізмів, і всі фактори, що знижують загальну або колонізаційну резистентність макроорганізму та пригнічують неспецифічну імунний захист, Створюють умови для активізації їх зростання та розвиткуспецифічного захворювання - кандидамікозу. В експериментах на мавпах і собаках показано, що ці мікроорганізми можуть проникати в організм господаря через слизові оболонки кишечника і надходити в кров. Істотне значення в патогенезі захворювання має ендотоксин, що викликає ураження паренхіматозних органів. Перераховані вище групи мікроорганізмів складають основну частину більш-менш вивченої для шлунково-кишкового тракту тварин резидентної мікрофлори. При цьому слід зазначити той факт, що тільки біфідо-і лактобактерії є мікроорганізмами, участь яких у патологічних процесах(як пряме, так і непряме) на сьогоднішній день не встановлено. Крім резидентної мікрофлори в шлунково-кишковому тракті спорадично зустрічаються інші мікроорганізми, іменовані транзиторними, які найчастіше висіваються при захворюваннях шлунково-кишкового тракту тварин, хоча і серед них зустрічаються сапрофітні види мікробів. Насамперед це клебсієли, псевдомонаси, протей, стафілококи, спірохети, цитробактери, ентеробактери, плісняві гриби та інші. На кількісне розмаїття резидентної мікрофлори собак, на чисельне співвідношення в мікробіоценозі того чи іншого біотопу резидентної та транзиторної мікрофлори основний вплив мають вік, тип годівлі та різні фактори зовнішнього середовища, включаючи застосування лікарських препаратів. Поки в мікробіоценозах переважають представники нормальної мікрофлори, зберігається КР та здоров'я макроорганізму в цілому. Якщо ж зовнішні впливи(хіміотерапевтичні препарати, пестициди та інші отрути, стреси, вірулентні мікроорганізми і т.д.) за своєю інтенсивністю перевищують компенсаторні механізми екологічної системи«макроорганізм - його нормальна мікрофлора», то мікробіоценозах починає переважати транзиторна мікрофлора, що веде до розвитку локальних інфекційних процесів, і навіть генералізованої інфекції та інших ускладнень. Таким чином, очевидно, що тваринний організм і мікрофлора, що його населяє, є взаємозалежними і співіснуючими частинами. єдиної системи. З екологічних позицій взаємодія між макро-і мікроорганізмами є окремим випадком універсально поширеного в живому світі симбіозу з його різними формами(Коменсалізм, мутуалізм, паразитизм, хижацтво тощо). Виходячи з вище сказаного слід, що взаємодія між нормальною мікрофлорою та організмом господаря переважно здійснюється на рівні мутуалізму. Мікроорганізми кишечника, будучи частиною нормофлори, одночасно представляють собою складну саморегулюючу відкриту систему, де їх різні популяції мають різноманітні взаємини як у рівні їх угруповань, і з організмом господаря. Найбільш помітну роль відіграють їх конкурентно-антагоністичні властивості, що в основному і визначає нормальне функціонуванняєдиної екологічної системи: тваринний організм - навколишнє середовище

Надіслати свою гарну роботу до бази знань просто. Використовуйте форму нижче

Студенти, аспіранти, молоді вчені, які використовують базу знань у своєму навчанні та роботі, будуть вам дуже вдячні.

Розміщено на http://www.allbest.ru

МІНІСТЕРСТВО СІЛЬСЬКОГО ГОСПОДАРСТВА РОСІЙСЬКОЇ ФЕДЕРАЦІЇ

ФДБОУ ВПО «УРАЛЬСЬКИЙ ДЕРЖАВНИЙ

АГРАРНИЙ УНІВЕРСИТЕТ"

РЕФЕРАТ

з дисципліни: «Мікробіологія м'яса»

на тему «Мікрофлора тіла тварини»

Єкатеринбург

Зотримання

Вступ

1. Визначення, термінологія

2. Видовий склад та кількісна характеристика мікрофлори найважливіших областей тіла тварини

3. Розподіл мікроорганізмів за відділами шлунково-кишкового тракту

4. Відмінності мікрофлори тіла різних видів тварин

5. Нормальна мікрофлора організму та патогенні мікроорганізми

6. Морфофункціональна роль та метаболічна функція аутомікрофлори організму

Список літератури

Уведення

Мікрофлору організму ссавців, включаючи сільськогосподарських, домашніх тварин та людини, стали вивчати разом з розвитком мікробіології як науки, з появою великих відкриттів Л. Пастера, Р. Коха, І. І. Мечникова, їхніх учнів та співробітників. Так, в 1885 р. Т. Ешеріх виділив з фекалій дітей обов'язкового представника мікрофлори кишечника - кишкову паличку, що зустрічається практично у всіх ссавців, птахів, риб, рептилій, амфібій, комах і т. д. Через 7 років з'явилися перші дані про значення кишкової палички для життєдіяльності, здоров'я макроорганізму С. О. Єнсен (1893) встановив, що різні типиі штами кишкової палички можуть бути як патогенними для тварин (викликають у телят септичне захворювання та діарею), так і непатогенними, тобто абсолютно нешкідливими і навіть корисними мешканцями кишечника тварин та людини. У 1900 р. Г. Тіссьє відкрив у фекаліях новонароджених біфібактерії та обов'язкових представників нормальної кишкової мікрофлори організму у всі періоди його життя. Молочнокислі палички (L. acidophilus) були виділені Моро в 1900 році.

1. Програничні термінологія

Нормальна мікрофлора - це відкритий біоценоз мікроорганізмів, що зустрічаються у здорових людейта тварин (В. Г. Петровська, О. П. Марко, 1976). Цей біоценоз має бути властивий абсолютно здоровому організму; він фізіологічний, тобто сприяє підтримці здорового статусу макроорганізму, правильному відправленню його нормальних фізіологічних функцій. Уся мікрофлора тіла тварини може бути названа ще аутомікрофлорою (відповідно до значення слова «ауто»), тобто мікрофлора будь-якого складу (О. В. Чахава, 1982) даного організму в нормі і при патології.

Нормальну мікрофлору, пов'язану лише зі здоровим статусом організму, ряд авторів поділяє на дві частини:

1. облігатну, постійну частину, що склалася у філогенезі та онтогенезі в процесі еволюції, яку ще називають індигенною (тобто місцевою), аутохтонною (корінною), резидентною тощо;

2. факультативну, чи транзиторну.

До складу аутомікрофлори періодично можуть включатися і патогенні мікроорганізми, що випадково проникають в макроорганізм.

Склад мікрофлори тіла

2. Усклад і кількісна характеристика мікрофлори найважливіших областей тіла тварини

З організмом тварини асоційовані, як правило, десятки та сотні видів різних мікроорганізмів. Вони, як пишуть В. Г. Петровська та О. П. Марко (1976), є облігатними для організму в цілому. Багато видів мікроорганізмів зустрічаються у багатьох областях тіла, змінюючись лише кількісно. Кількісні варіації можливі у тієї ж мікрофлори залежно від виду ссавців. Більшості тварин властиві загальні усереднені показники для низки областей їх тіла. Наприклад, для дистальних, нижніх відділів шлунково-кишкового тракту характерні такі мікробні групи, що виявляються у вмісті кишечнику або фекаліях (табл. 1).

Таблиця 1. Мікрофлора нижніх відділів ШКТ

Кількість мікробів в 1 г матеріалу з кишківника

Біфідобактерії

107 – 109 (до 1010)

Бактероїди

1010 (до 1011)

Пептококи

Пептострептококи

Копрококи

Румінококи

Фузобактерії

Еубактрії

Клостридії

Вайлонели

Анаеробні грамнегативні коки роду Megasphaera

Різні групи спірально-звивистих (вигнутих) бактерій, спірохети

Лактобактерії

Ешеріхії

Ентерококи

Більше транзиторно можуть бути представлені:

Інші представники ентеробактерій (Klebsiella, Proteus, Citrobacter, Enterobacter та ін.)

Псевдомонади

Стафілококи

Інші стрептококи

Дифтероїди

Аеробні бацили

Гриби, актиноміцети

У верхній частині табл. 1. наведено лише облігатно анаеробні мікроорганізми - представники кишкової флори. В даний час встановлено, що на частку строго анаеробних видів в кишечнику припадає 95-99%, а всі аеробні і факультативно анаеробні види складають 1-5%, що залишилися. мікрофлора тіло тварина організм

Незважаючи на те, що в кишечнику мешкають десятки і сотні (до 400) відомих видів мікроорганізмів, там можуть існувати ще й зовсім невідомі мікроорганізми. інтимно пов'язані з поверхнею (глікоколіксом, щітковою облямівкою) епітеліальних клітин слизової оболонки кишечника. Витончений кінець цих довгих, ниткоподібних бактерій поглиблений між мікроворсинками щіткової облямівки епітеліальних клітин і, мабуть, фіксований там так, що вдавлює мембрани клітин. Цих бактерій може бути так багато, що вони, подібно до трави, покривають поверхню слизової оболонки. Це теж суворі анаероби (облігатні представники кишкової мікрофлори гризунів), корисні для організму види, які багато в чому нормалізують функції кишечника. Однак ці бактерії були виявлені лише бактеріоскопічними методами (за допомогою електронної скануючої мікроскопії зрізів кишкової стінки). Нитчасті бактерії не ростуть на відомих нам поживних середовищах, лише можуть переживати на щільних агаризованих середовищах не більше одного тижня) J . P. Koopman et. al., 1984).

3. Ррозподіл мікроорганізмів по відділах шлунково-кишкового тракту

Через високу кислотність шлункового сокуу шлунку міститься невелика кількість мікроорганізмів; в основному це кислотостійка мікрофлора - лактобактерії, стрептококи, дріжджі, сардини і т. д. Кількість мікробів там - 103/г вмісту.

Мікрофлора 12-палої та худої кишок

У кишечнику скрізь є мікроорганізми. Якби їх не було у якомусь відділі, то не виникало б перитоніту мікробної етіології при травмуванні кишечника. Тільки у проксимальних ділянках тонкого кишечника видів мікрофлори менше, ніж у товстому. Це лактобактерії, ентерококи, сардини, гриби, у нижніх відділах наростає кількість біфідобактерій, кишкових паличок. Кількісно ця мікрофлора може відрізнятися у різних особин. Можливий мінімальний ступінь обсіменіння (10 1 - 10 3 /г вмісту), і значний - 10 3 - 10 4 /г Кількість та склад мікрофлори товстого кишечника представлені в табл 1.

Мікрофлора шкіри

Основні представники мікрофлори шкіри - дифтероїш (коринебактерії, пропіонові бактерії), плісняві гриби, дріжджі, спорові аеробні палички (бацили), стафілококи (в першу чергу переважає S. epidermidis, але на здоровій шкірі в невеликій кількості присутній і S. ).

Мікрофлора респіраторного тракту

На слизових оболонках респіраторного тракту найбільше мікроорганізмів в області носоглотки, за гортанню кількість їх значно менша, ще менша у великих бронхах, а в глибині легень здорового організмумікрофлори взагалі нема.

У носових ходах є дифтероїди, насамперед коринебактерії, постійні стафілококи (резидентен S. epi dermidis), нейссерії гемофільні бактерії, стрептококи (альфа-гемолітичні); в носоглотці - коринебактерії, стрептококи (S. mitts, S. salivarius та ін), стафілококи, нейссеої, вайлонели, гемофільні бактерії, більш тран- зторно зустрічаються ентеробактерії, бактероїди, гриби, ентерококі, ентерококи, Ст subtil is та ін.

Мікрофлору глибоколежачих відділів дихальних шляхів вивчали менше (A – Halperin – Scottetal., 1982). Люди це пов'язані з труднощами отримання матеріалу. У тварин матеріал доступніший для дослідження (можна використовувати вбитих тварин). Ми вивчали мікрофлору середніх дихальних шляхів у здорових свиней, включаючи їх мініатюрний (лабораторний) різновид; результати представлені у табл. 2.

Таблиця 2. Мікрофлора слизової оболонки трахеї та великих бронхів здорових свиней

Перших чотирьох представників виявляли постійно (100%), менш резидентно (1/2-1/3 випадків) встановлювали: лактобактерії (102-103), кишкову паличку (102-113), плісняві гриби (10 2-10 4), дріжджі. Інші автори відзначали транзиторне носійство протею, синьогнійної палички, клостридій, представників аеробних бацил. Нами в цьому ж плані одного разу було виявлено Bacteroides melaninoge-nicus.

Мікрофлора родовіх шляхів ссавців

Дослідження останніх років, в основному зарубіжних авторів (Boyd, 1987; А. В. Onderdonketal., 1986; J. M. Milleretal., 1986; A. N. Masfarietal., 1986; H. Knotheua. 1987), мікрофлора, що колонізує (тобто заселяє) слизові оболонки родових шляхів, дуже різноманітна і багата у видовому відношенні. Широко представлені компоненти нормальної мікрофлори, у складі багато суворо анаеробних мікроорганізмів (табл. 3).

Таблиця 3. Мікрофлора пологових шляхів (піхва, шийка матки)

Назва мікробних груп (родів чи видів)

Частота народження, %

Облігатно анаеробні мікроорганізми:

Бактероїди

Біфідобактерії

Пептококи, пептострептококи

Вайлонели

евбактерії

Клостридії

Факультативно анаеробні та аеробні мікроорганізми:

Лактобактерії

Кишкова паличка та ін.

Коринебактерії

Стафілококи

Стрептококи

Якщо порівняти мікробні види родових шляхів з мікрофлорою інших областей тіла, виявляють, що мікрофлора родових шляхів матері за цією ознакою аналогічна основним групам мікробних мешканців тіла. майбутнього молодого організму, тобто облігатних представників своєї нормальної мікрофлори, тварина отримує при проходженні через родові шляхиматері. Подальше заселення тіла молодої тварини походить від цієї розплодки еволюційно обґрунтованої мікрофлори, отриманої від матері. Слід врахувати, що у здорової самки плід у матці стерильний до моменту пологів, що почалися. Однак правильно сформована (відібрана в процесі еволюції) нормальна мікрофлора організму тварини в повному обсязі населяє його тіло не відразу, а за кілька днів, встигаючи розмножитися у певних співвідношеннях. В. Браун наводить наступну послідовність її становлення в перші 3 дні життя новонародженого: бактерії виявляють у перших пробах, взятих з тіла новонародженого відразу після народження. Так, на слизовій оболонці носа спочатку переважаючими виявлялися коагулазонегативні стафілококи (S. epidermidis); на слизовій глотки - ті ж стафілококи та стрептококи, а також невелика кількість ептеробактерій. У прямій кишці в 1-й день вже були виявлені кишкові палички, ентерококи, ті ж стафілококи, а на третій день після народження встановлювався мікробний біоценоз, в основному звичайний для нормальної мікрофлори товстого кишечника (W. Braun, F. Spenckcr u. a.). , 1987).

4. Протлі мікрофлори тіла різних видів тварин

Наведені вище облігатні представники мікрофлори властиві більшості домашніх, сільськогосподарських ссавців тварин і організму людини. Залежно від виду тварини швидше може змінюватися кількість мікробних груп, але не видовий склад. У собак кількість кишкових паличок та лактобактерій у товстому кишечнику така ж, як наведено у табл. 1. Однак біфідобактерії були на порядок нижче (10 8 в 1 г), на порядок вище було стрептококів (S. lactis, S. mitis, ентерококи) та клостридій. У щурів і мишей (лабораторних) настільки ж було збільшено кількість молочнокислих паличок (лактобактерій), більше стрептококів та клостридій. У цих тварин у кишковій мікрофлорі виявилося мало кишкових паличок та було зменшено кількість біфідобактерій. Знижено кількість кишкових паличок і у морських свинок(За даними В. І. Орловського). У фекаліях морських свинок, згідно з нашими дослідженнями, кишкові палички містилися в межах 10 3 --10 4 в 1 г. У кроликів переважали бактероїди (до 10 9 --10 10 в 1 г), було значно зменшено кількість кишкових паличок (часто навіть до 10 2 в 1 г) та лактобактерій.

У здорових свиней (за нашими даними) мікрофлора трахеї та великих бронхів ні кількісно, ​​ні якісно помітно не відрізнялася від усереднених показників і дуже подібна до мікрофлори людини. Їхню кишкову мікрофлору теж характеризувала певна схожість. Для мікрофлори рубця жуйних тварин характерні специфічні особливості. Багато в чому це пов'язують із наявністю бактерій - розщеплювачів клітковини. Однак целюлолітичні бактерії (і взагалі фнбролітичні), характерні для травного тракту жуйних, аж ніяк не є симбіонтами самих цих тварин. Так, у сліпій кишці свиней і багатьох травоїдних тварин важливу роль відіграють такі спільні з жуйними розщеплювачі волокон целюлози та геміцелюлози, як Bacteroides succi-nogenes, Ruminococcus flavefaciens, Bacteroides ruminicola та інші (V. H. 8).

5. Нормальна мікрофлора організму та патогенні мікроорганізми

Облігатні макроорганізми, які наведені вище, це переважно представники пепатогенної мікрофлори. Багато видів, що входять у зазначені групи, є навіть покликаними симбіонтами макроорганізму (лактобактерії, біфлдобактерії), корисні для нього. Певні корисні функції виявлені у багатьох непатогенних видів клостридії, бактероїдів, еубактерній, ентерококів, непатогенних кишкових паличок і т. д. Цих та інших представників мікрофлори тіла називають «нормальною» мікрофлорою. Однак у фізіологічний для макроорганізму мікробіоценоз іноді включаються і менш нешкідливі, умовно-патогенні і вельми патогенні мікроорганізми. Надалі ці патогени можуть:

більш-менш тривало існувати в організмі у складі всього комплексу його аутомікрофлори; у таких випадках формується носійство патогенних мікробів, але кількісно, ​​все ж таки, превалює нормальна мікрофлора;

бути витіснені (швидко або дещо пізніше) з макроорганізму корисними симбіотичними представниками нормальної (аутохтонної) мікрофлори та елімінувати;

розмножитися, так потіснивши нормальну мікрофлору, що при певному ступені колонізації макроорганізму здатні викликати відповідне захворювання.

У кишечнику тварин і людини, наприклад, крім певних видів непатогенних клостридії в невеликій кількості мешкає С. perfringens. У складі всієї мікрофлори здорової тварини кількість С. perfringens не перевищує 10 - 11 5 в 1 р. Однак за наявності деяких умов, пов'язаних, можливо, з порушеннями в нормальній мікрофлорі, патогенний С. perfrtngens розмножується на слизовій оболонці кишечника в величезній кількості(10 7 -10 9 і більше), викликаючи анаеробну інфекцію. У цьому випадку він навіть витісняє нормальну мікрофлору і може бути виявлений у скарифікаті кате слизової оболонки клубової кишки майже в чистій культурі. Подібним чиномвідбувається розвиток кишкової коліінфекції у тонкому кишечнику у молодих тварин, тільки там так само бурхливо розмножуються патогенні типи кишкової палички; при холері поверхня слизової оболонки кишечника колонізує холерний вібріон і т. д.

6. Морфофункціональна роль та метаболічна функція аутомікрофлори організму

Аутомікрофлора впливає на макроорганізм після його народження так, що під її впливом дозрівають і формуються структура та функції низки контактуючих із зовнішнім середовищем органів. Таким шляхом набувають свого морфофункціонального вигляду у дорослої тварини шлунково-кишковий, респіраторний, сечостатевий тракт та інші органи. Нова область біологічних павук - гнотобіологія, що успішно розвивається з часу Л. Пастера, дозволила дуже чітко усвідомити, що багато імунобіологічних особливостей дорослого, нормально розвиненого організму тварини формуються під впливом аутомікрофлори його тіла. Безмікробні тварини (гнотобіоти), отримані кесаревим перетиномі потім які містяться тривалий час у спеціальних стерильних гнотобіблогічних ізоляторах без будь-якого доступу до них будь-якої життєздатної мікрофлори, мають риси ембріонального стану слизових оболонок, сполучених із зовнішнім середовищем органів. Імунобіологічний статус їх також зберігає ембріональні риси. Спостерігають гіпоплазію лімфоїдної тканини насамперед цих органів. У безмікробних тварин менше імунокомпетентних клітинних елементів та імуноглобулінів. Однак характерно, що потенційно організм такої гнотобіотичної тварини залишається здатним до розвитку імунобіологічних можливостей, і лише через відсутність антигенних стимулів, що йдуть у звичайних тварин (починаючи з народження) від аутомікрофлори, він не зазнав природного розвитку, що зачіпає і всю імунну системув цілому, і місцеві лімфоїдні скупчення слизових оболонок таких органів, як кишечник, дихальні шляхи, око, ніс, вухо і т. д. Таким чином, у процесі індивідуального розвиткуорганізму тварини саме від його аутомікрофлори випливають впливи, в т. ч. антигенні стимули, що зумовлюють нормальний імуноморфофункціональний стан звичайної дорослої тварини.

Мікрофлора тіла тварини, зокрема мікрофлора шлунково-кишкового тракту, виконує для організму важливі метаболічні функції: впливає на всмоктування у тонкому кишечнику, ферменти її беруть участь у деградації та обміні жовчних кислот у кишечнику, утворює незвичайні жирні кислоти у травному тракті. Під впливом мікрофлори йде катаболізм деяких травних ферментів макроорганізму у кишечнику; інактивуються, розпадаються ентерокіназа, лужна фосфатаза, в товстому кишечнику йде розпад деяких імуноглобулінів травного тракту, що виконали свою функцію і т.д. Мікрофлора шлунково-кишкового тракту бере участь у синтезі багатьох вітамінів, необхідних макроорганізму. Її представники (наприклад, ряд видів бактероїдів, анаеробні стрептококи та ін.) своїми ферментами здатні розщеплювати клітковину, пектинові речовини, які не засвоюються тваринним організмом самостійно.

Зписок літератури

1. Балтрашевич А. К. та ін. Щільне середовище без крові та її напіврідкий та рідкий варіанти для культивування бактероїдів / Науково-дослідна лабораторія експериментально-біологічних моделей АМН СРСР. М. 1978 7 с.

2. Гончарова Г. І. До методики культивування В. bifidum // Лабораторна справа. 1968. № 2. С. 100-102.

3. І. Н. Блохіна Е, С. Воронін та ін. Методичні рекомендаціїз виділення та ідентифікації умовно-патогенних ентеробактерій і сальмонел при гострих кишкових захворюваннях молодняку ​​сільськогосподарських тварин/М: МВА, 1990. 32 с.

4. Петровська В. Г., Марко О. П. Мікрофлора людини в нормі та патології. М: Медицина, 1976. 221 с.

5. Чахава О. В. та ін. Мікробіологічні та імунологічні основи гнотобіології. М: Медицина, 1982. 159 с.

Розміщено на Allbest.ru

...

Подібні документи

    Характеристика основних показників мікрофлори ґрунту, води, повітря, тіла людини та рослинної сировини. Роль мікроорганізмів у кругообігу речовин у природі. Вплив факторів довкілля на мікроорганізми. Цілі та завдання санітарної мікробіології.

    реферат, доданий 12.06.2011

    Визначення та аналіз основних особливостей та сутності епіфітної мікрофлори – мікроорганізмів, що мешкають на поверхні надземних частин рослин та в зоні їх ризосфери. Ознайомлення з характерними рисами, притаманними представникам епіфітної мікрофлори

    дипломна робота , доданий 01.02.2018

    Склад та напрямки діяльності кафедри мікробіології та імунології. Принципи роботи у мікробіологічній лабораторії. Підготовка посуду та інструментів. Техніка відбору проб, посіву та приготування поживних середовищ. Методи ідентифікації мікроорганізмів.

    звіт з практики, доданий 19.10.2015

    Вплив рухової активності стан організму. Центр тяжкості та розподіл навантаження під час руху. Фізіологічні показники тренованості м'язів Регуляція підтримки пози та руху тварини. Роль мозочка в регуляції положення тіла.

    реферат, доданий 21.12.2013

    Основні властивості молока та причини виникнення патогенної мікрофлори. Сутність біохімічних процесів бродіння та гниття. Фази змін мікрофлори парного молока. Характеристика кисломолочних продуктів, особливості їх використання людиною

    курсова робота , доданий 12.04.2012

    Вивчення основних відділів шлунково-кишкового тракту. Дослідження мікрофлори шлунка та кишечника людини. Характеристика видового складу та середньої концентрації бактерій. Роль ентерококів у забезпеченні колонізаційної резистентності слизової оболонки.

    презентація , доданий 15.03.2017

    контрольна робота , доданий 27.09.2009

    Географічні особливості Арктики. Властивості та умови проживання облігатних психрофілів, вивчення угруповань палеоорганізмів вічної мерзлоти. Чисельність життєздатної мікрофлори у мерзлих породах, її дослідження методом накопичувального культивування.

    реферат, доданий 29.03.2012

    Вивчення поняття фізичної та хімічної теплорегуляції. Ізотермія – сталість температури тіла. Чинники, що впливають на температуру тіла. Причини та ознаки гіпотермії та гіпертермії. Місця вимірювання температури. Види лихоманок. Загартовування організму.

    презентація , доданий 21.10.2013

    Аналітичний огляд даних з видовому розмаїттюпредставників мікросвіту водойми. Умови життя морських мікроорганізмів. Вивчення шляхом мікрокопіювання. Скупчення одноклітинних водоростей. Склад мікрофлори, характерний для прісної водойми.

Інтизаров Михайло Михайлович, академік РАСГН, проф.

ПЕРЕДМОВА

При розгляді способів боротьби з багатьма інфекційними хворобамибактеріальної та вірусної етіологіїчастіше зосереджують основну увагу на патогенних мікроорганізмах - збудниках цих захворювань, рідше звертають увагу і супутню звичайну мікрофлору тіла тварин. Але в ряді випадків саме звичайна мікрофлора набуває великого значення у виникненні чи розвитку хвороби, сприяючи чи перешкоджаючи її прояву. Іноді звичайна мікрофлора стає джерелом тих патогенних або умовнопатогенних інфекційних агентів, які зумовлюють ендогенне інфікування, прояв секундарних інфекцій і т. д. За інших обставин комплекс звичайної мікрофлори тіла тварин блокує шляхи та можливості розвитку інфекційного процесу, що викликається деякими патогенними. Тому знати склад, властивості, кількісні характеристики, біологічну значимість різних групта представників звичайної мікрофлори організму (ссавців, у тому числі домашніх, сільськогосподарських тварин та людини) повинні лікарі, біологи, працівники тваринництва, викладачі вузів та науковці.

Вступ

Мікрофлору організму ссавців, включаючи сільськогосподарських, домашніх тварин та людини, стали вивчати разом з розвитком мікробіології як науки, з появою великих відкриттів Л. Пастера, Р. Коха, І. І. Мечникова, їхніх учнів та співробітників. Так, в 1885 р. Т. Ешеріх виділив з фекалій дітей обов'язкового представника мікрофлори кишечника - кишкову паличку, що зустрічається практично у всіх ссавців, птахів, риб, рептилій, амфібій, комах і т. д. Через 7 років з'явилися перші дані про значення кишкової палички для життєдіяльності, здоров'я макроорганізму С. О. Єнсен (1893) встановив, що різні типи і штами кишкової палички можуть бути як патогенними для тварин (викликають у телят септичне захворювання і діарею), так і непатогенними, тобто абсолютно нешкідливими і навіть корисними мешканцями кишечника тварин та людини. У 1900 р. Г. Тіссьє відкрив у фекаліях новонароджених біфіжбактер «і - відомий: і обов'язкових представників нормальної кишкової мікрофлори організму в усі періоди його життя. Молочнокислі палички (L. acidophilus) були виділені Моро в 1900 році.

Визначення, термінологія

Нормальна мікрофлора - це відкритий біоценоз мікроорганізмів, що зустрічаються у здорових людей та тварин (В. Г. Петровська, О. П. Марко, 1976). Цей біоценоз має бути властивий абсолютно здоровому організму; він фізіологічний, тобто сприяє підтримці здорового статусу макроорганізму, правильному відправленню його нормальних фізіологічних функцій. Уся мікрофлора тіла тварини може бути названа ще аутомікрофлорою (відповідно до значення слова «ауто»), тобто мікрофлора будь-якого складу (О. В. Чахава, 1982) даного організму в нормі і при патології.

Нормальну мікрофлору, пов'язану лише зі здоровим статусом організму, ряд авторів поділяє на дві частини:

1) облігатну, постійну частину, що склалася у філогенезі та онтогенезі впроцесі еволюції, яку ще називають індигенною (тобто місцевою), аутохтонною (корінною), резидентною тощо;

2) факультативну, чи транзиторну.

До складу аутомікрофлори періодично можуть включатися і патогенні мікроорганізми, що випадково проникають в макроорганізм.

Видовий склад та кількісна характеристикамікрофлори найважливіших областей тіла тварини

З організмом тварини асоційовані, як правило, десятки та сотні видів різних мікроорганізмів. Вони , як пишуть В. Г. Петровська та О. П. Марко (1976), є облігатними для організму в цілому. Багато видів мікроорганізмів зустрічаються у багатьох областях тіла, змінюючись лише кількісно. Кількісні варіації можливі у тієї ж мікрофлори залежно від виду ссавців. Більшості тварин властиві загальні усереднені показники для низки областей їх тіла. Наприклад, для дистальних, нижніх відділів шлунково-кишкового тракту характерні такі мікробні групи, що виявляються у вмісті кишечнику або фекаліях (табл. 1).

У верхній частині табл. 1. наведено лише облігатноанаеробні мікроорганізми - представники кишкової флори. В даний час встановлено, що на частку строго анаеробних видів в кишечнику припадає 95-99%, а всеаеробні та факультативно анаеробні види становлять 1-5%, що залишилися.

Незважаючи на те, що в кишечнику мешкають десятки і сотні (до 400) відомих видів мікроорганізмів, там можуть існувати ще й зовсім невідомі мікроорганізми. інтимно пов'язані з поверхнею (глікоколіксом, щітковою облямівкою) епітеліальних клітин слизової оболонки кишечника. Витончений кінець цих довгих, ниткоподібних бактерій поглиблений між мікроворсинками щіткової облямівки епітеліальних клітин і, мабуть, фіксований там так, що вдавлює мембрани клітин. Цих бактерій може бути так багато, що вони, подібно до трави, покривають поверхню слизової оболонки. Це теж суворі анаероби (облігатні представники кишкової мікрофлори гризунів), корисні для організму види, які багато в чому нормалізують функції кишечника. Однак ці бактерії були виявлені лише бактеріоскопічними методами (за допомогою електронної скануючої мікроскопії зрізів кишкової стінки). Нитчасті бактерії не ростуть на відомих нам поживних середовищах, лише можуть переживати на щільних агаризованих середовищах не більше одного тижня) J . P. Koopman et. al., 1984).

Розподіл мікроорганізмів у відділах шлунково-кишкового тракту

Через високу кислотність шлункового соку в шлунку міститься невелика кількість мікроорганізмів; здебільшого це кислотостійка мікрофлора - лактобактерії, стрептококи, дріжджі, сардини і т. д. Кількість мікробів там - 10 3 /г вмісту.

Мікрофлора 12-палої та худої кишок

У кишечнику і їзді є мікроорганізми. Якби їх не було у якомусь відділі, то не виникало б перитоніту мікробної етіології при травмуванні кишечника. Тільки у проксимальних ділянках тонкого кишечника видів мікрофлори менше, ніж у товстому. Це лактобактерії, ентерококи, сардини, гриби, у нижніх відділах наростає кількість біфідобактерій, кишкових паличок. Кількісно ця мікрофлора може відрізнятися у різних особин. Можливий мінімальний ступінь обсіменіння (10 1 - 10 3 /г вмісту), і значний - 10 3 - 10 4 /г Кількість та склад мікрофлори товстого кишечника представлені в табл. 1.

Мікрофлора шкіри

Основні представники мікрофлори шкіри - дифтероїш (коринебактерії, пропіонові бактерії), плісняві гриби, дріжджі, спорові аеробні палички (бацили), стафілококи (в першу чергу переважає S. epidermidis, але на здоровій шкірі з невеликою кількістю присутній і S.). .

Мікрофлора респіраторного тракту

На слизових оболонках респіраторного тракту найбільше мікроорганізмів в області носоглотки, за гортанню кількість їх значно менша, ще менша у великих бронхах, а в глибині легенів здорового організму мікрофлори взагалі немає.

У носових ходах є дифтероїди, насамперед корнебактерії, постійні стафілококи (резидентен S. epi dermidis), нейссерії, гемофільні бактерії, стрептококи (альфа-гемолітичні); в носоглотці - коринебактерії, стрептококи (S. mitts, S. salivarius та ін.), стафілококи, нейссеоії, вайлонели, гемофільні бактерії, більш транзиторно зустрічаються ентеробактерії, бактероїди, гриби, ентерококи, лактоеки, лактое. is та ін.

Мікрофлору глибинних відділів дихальних шляхів вивчали менше (A - Halperin - Scott et al., 1982). Люди це пов'язані з труднощами отримання матеріалу. У тварин матеріал доступніший для дослідження (можна використовувати вбитих тварин). Ми вивчали мікрофлору середніх дихальних шляхів у здорових свиней, включаючи їх мініатюрний (лабораторний) різновид; результати подані в табл. 2.

Перших чотирьох представників виявляли постійно (100%), менш резидентно (1/2-1/3 випадків) встановлювали: лактобактерії (10 2 -10 3), кишкову паличку (10 2 -Ш 3), плісняві гриби (10 2 -10) 4) дріжджі. Інші автори відзначали транзиторне носійство протею, синьогнійної палички, клостридій, представників аеробних бацил. Нами в цьому плані одного разу було виявлено Bacteroides melaninoge — nicus .

Мікрофлора родових шляхів ссавців

Дослідження останніх років, в основному зарубіжних авторів (Boyd, 1987; А. В. Onderdonk et al., 1986; J. M. Miller et al., 1986; A. N. Masfari et al., 1986; H. Knothe u 1987), показали, що мікрофлора, що колонізує (тобто заселяє) слизові оболонки родових шляхів, дуже різноманітна і багата у видовому відношенні. Широко представлені компоненти нормальної мікрофлори, у складі багато суворо анаеробних мікроорганізмів (табл. 3).

Якщо порівняти мікробні види родових шляхів з мікрофлорою інших областей тіла, виявляють, що мікрофлора родових шляхів матері за цією ознакою аналогічна основним групам мікробних мешканців тіла. майбутнього молодого організму, тобто облігатних представників своєї нормальної мікрофлори, тварина отримує при проходженні через родові шляхи матері. Подальше заселення тіла молодої тварини походить від цієї розплодки еволюційно обґрунтованої мікрофлори, отриманої від матері. Слід врахувати, що у здорової самки плід у матці стерильний до моменту пологів, що почалися.

Однак правильно сформована (відібрана в процесі еволюції) нормальна мікрофлора організму тварини в повному обсязі населяє його тіло не відразу, а за кілька днів, встигаючи розмножитися у певних співвідношеннях. В. Браун наводить наступну послідовність її становлення в перші 3 дні життя новонародженого: бактерії виявляють у перших пробах, взятих з тіла новонародженого відразу після народження. Так, на слизовій оболонці носа спочатку переважаючими виявлялися коагулазонегативні стафілококи (S. epidermidis); на слизовій глотки - ті ж стафілококи та стрептококи, а також невелика кількість ептеробактерій. У прямій кишці в 1-й день вже були виявлені кишкові палички, ентерококи, ті ж стафілококи, а на третій день після народження встановлювався мікробний біоценоз, в основному звичайний для нормальної мікрофлори товстого кишечника (W. Braun, F. Spenckcr u. a.). , 1987).

Відмінності мікрофлори тіла різних видів тварин

Наведені вище облігатні представники мікрофлори властиві більшості домашніх, сільськогосподарських ссавців тварин і організму людини. Залежно від виду тварини швидше може змінюватися кількість мікробних груп, але не видовий склад. У собак кількість кишкових паличок та лактобактерій у товстому кишечнику така ж, як наведено у табл. 1. Однак біфідобактерії були на порядок нижче (10 8 в 1 г), на порядок вище було стрептококів (S. lactis, S. mitis, ентерококи) та клостридій. У щурів і мишей (лабораторних) на стільки ж було збільшено кількість молочнокислих паличок (лактобактерій), більше стрептококів та клостридій. У цих тварин у кишковій мікрофлорі виявилося мало кишкових паличок та було зменшено кількість біфідобактерій. Знижено кількість кишкових паличок та у морських свинок (за даними В. І. Орловського). У фекаліях морських свинок, згідно з нашими дослідженнями, кишкові палички містилися в межах 10 3 -10 4 в 1 г. У кроликів переважали бактероїди (до 10 9 -10 10 в 1 г), значно зменшено кількість кишкових паличок (часто навіть до 10 2 в 1 г) та лактобактерій.

У здорових свиней (за нашими даними) мікрофлора трахеї та великих бронхів ні кількісно, ​​ні якісно помітно не відрізнялася від усереднених показників і дуже подібна до мікрофлори людини. Їхню кишкову мікрофлору теж характеризувала певна схожість.

Для мікрофлори рубця жуйних тварин характерні специфічні особливості. Багато в чому це пов'язують із наявністю бактерій – розщеплювачів клітковини. Однак целюлолітичні бактерії (і взагалі фібролітичні), характерні для травного тракту жуйних, аж ніяк не є симбіонтами самих цих тварин. Так, у сліпій кишці свиней і багатьох травоїдних тварин важливу роль відіграють такі спільні з жуйними розщеплювачі волокон целюлози та геміцелюлози, як Bacteroides succi - nogenes, Ruminococcus flavefaciens, Bacteroides ruminicola та інші (V. H. 8).

Нормальна мікрофлора організму та патогенні мікроорганізми

Облігатні макроорганізми, які наведені вище, це переважно представники пепатогенної мікрофлори. Багато видів, що входять у зазначені групи, є навіть покликаними симбіонтами макроорганізму (лактобактерії, біфлдобактерії), корисні для нього. Певні корисні функції виявлені у багатьох непатогенних видів клостридії, бактероїдів, еубактерній, ентерококів, непатогенних кишкових паличок і т. д. Цих та інших представників мікрофлори тіла називають «нормальною» мікрофлорою. Однак у фізіологічний для макроорганізму мікробіоценоз іноді включаються і менш нешкідливі, умовно-патогенні і вельми патогенні мікроорганізми. Надалі ці патогени можуть:

а) більш менш тривало існувати в організмі
у складі всього комплексу його аутомікрофлори; у таких випадках формується носійство патогенних мікробів, але кількісно, ​​все ж таки, превалює нормальна мікрофлора;

б) бути витісненими (швидко або дещо пізніше) з макроорганізму корисними симбіотичними представниками нормальної мікрофлори та елімінувати;

в) розмножитися, так потіснивши нормальну мікрофлору, що за певної міри колонізації макроорганізму здатні викликати відповідне захворювання.

У кишечнику тварин і людини, наприклад, крім певних видів непатогенних клостридії в невеликій кількості мешкає С. perfringens. У складі всієї мікрофлори здорової тварини кількість С. perfringens не перевищує 10-15 млд в 1 р. Однак за наявності деяких умов, пов'язаних, можливо, з порушеннями в нормальній мікрофлорі, патогенний С. perfrtngens розмножується на слизовій оболонці кишечника у величезній кількості (10 7 -109 і більше), викликаючи анаеробну інфекцію. У цьому випадку він навіть витісняє нормальну мікрофлору і може бути виявлений у скарифікаті кате слизової оболонки клубової кишки майже в чистій культурі. Подібним чином відбувається розвиток кишкової коліінфекції у тонкому кишечнику у молодих тварин, тільки там так само бурхливо розмножуються патогенні типи кишкової палички; при холері поверхня слизової оболонки кишечника колонізує холерний вібріон і т. д.

Біологічна роль (функціональне значення) нормальної мікрофлори

Патогенні та умовно-патогенні мікроорганізми протягом життя тварини періодично контактують та проникають у її організм, включаючись до складу загального комплексу мікрофлори. Якщо ці мікроорганізми не можуть відразу викликати захворювання, то співіснують з іншою мікрофлорою тіла якийсь час, але найчастіше бувають транзиторні. Так, для порожнини рота з патогенних і умовно-патогенних факультативнотранзиторних мікроорганізмів можуть бути типові Р, aeruginosa, С. perfringens, С. albicans, представники (родів Esoherichia, Klebsiella, Proteus; для кишечника вони ж і ще більш патогенні ент fragilis, С. tetani, С. sporogenes, Fusobacterium necrophorum, деякі представники роду Campylobacter, кишкові спірохети (в т. ч. і патогенні, умовно-патогенні) та багато інших.Для шкіри і слизових оболонок характерні S. aureus; тракту - він і пневмококи тощо.

Однак роль і значення корисної, симбіотичної нормальної мікрофлори організму в тому, що вона нелегко допускає цих патогенних факультативно-транзиторних мікроорганізмів у своє середовище, у зайняті вже нею просторові екологічні ніші. Наведені вище представники аутохтонної частини нормальної мікрофлори першими, ще при проходженні новонародженого через родові шляхи матері, посіли своє місце на тілі тварини, тобто колонізували його шкіру, шлунково-кишковий і респіраторний тракти, геніталії та інші області тіла.

Механізми, що перешкоджають колонізації (заселенню) патогенною мікрофлорою тіла тварини

Встановлено, що найбільші популяції аутохтонної, облігатної частини нормальної мікрофлори займають у кишечнику характерні місця, свого роду території у мікросередовищі кишечника (D. Savage, 1970). Ми вивчали цю екологічну особливість біфідобактерії, бактероїдів і встановили, що вони розташовуються не рівномірно в хімусі по всій порожнині кишкової трубки, а розстилаються в смугах та шарах слизу (муцинів), що йдуть за всіма вигинами поверхні слизової оболонки тонкого кишечника. Частково вони примикають до поверхні епітеліальних клітин слизової оболонки. Оскільки біфідобактерії, бактероїди та інші колонізують ці субрегіони кишкового мікросередовища першими, то багатьом патогенним мікроорганізмам, що пізніше проникають у кишечник, вони створюють перешкоди для наближення та фіксації (адгезії) на слизовій оболонці. І це один із провідних факторів, оскільки встановлено, що для реалізації своєї патогенності (здатності викликати захворювання) будь-які патогенні мікроорганізми, в т.ч. кишкові інфекції, повинні адгезувати до поверхні епітеліальних клітин кишечника, потім розмножитися на ній, або, проникнувши глибше, колонізувати ці ж близькі субрегіони, в районі яких вже склалися величезні за кількістю популяції, наприклад біфідобактерії. Виходить, що в цьому випадку біфідофлора здорового організму екранує від деяких патогенів слизову оболонку кишечника, лімітуючи доступ їм до поверхні мембранепітеліоцитів і рецепторів на епітеліальних клітинах, на яких патогенним мікробам необхідно зафіксуватися.

Для багатьох представників аутохтонної частини нормальної мікрофлори відомий ще ряд механізмів антагонізму стосовно патогенної та умовно-патогенної мікрофлори:

Продукція летких жирних кислот із коротким ланцюгом вуглецевих атомів (їх утворює суворо анаеробна частина нормальної мікрофлори);

Утворення вільних метаболітів жовчі (лактобактерії, біфідобактерії, бактероїди, ентерококи та багато інших можуть утворювати їх, декон'югуючи солі жовчних кислот);

Продукція лізоциму (притаманна лактобактеріям, біфідобактеріям);

Закислення середовища при продукуванні органічних кислот;

Продукція коліцинів та бактеріоцинів (стрептококами, стафілококами, кишковою паличкою, нейссеріями, пропяоновими бактеріями та ін.);

Синтез різних антибіотикоподібних субстанцій багатьма молочнокислими мікроорганізмами - Streptococcus lactis, L. acidophilus, L. fermentum, L. brevis, L. helveticus, L. pjantarum і т. д.;

Конкурування непатогенних мікроорганізмів, споріднених з патогенними видами, з патогенними видами за одні й ті ж рецептори на клітинах макроорганізму, до яких повинні фіксуватися та їх патогенні родичі;

Поглинання симбіотичними мікробами зі складу нормальної мікрофлори деяких важливих компонентівта елементів живильних ресурсів (наприклад, залізо), необхідних для життєдіяльності патогенних мікробів.

Багато з цих механізмів і факторів, що є у представників мікрофлори тіла тварини, поєднуючись разом і взаємодіючи, створюють своєрідний бар'єрний ефект - перешкоду для розмноження умовно-патогенних та патогенних мікроорганізмів у певних областях тіла тварини. Стійкість макроорганізму до колонізації патогенами, створювана його звичайною мікрофлорою, одержала назву колонізаційної резистентності. Цю резистентність до колонізації патогенною мікрофлорою створює переважно комплекс корисних видівстрого анаеробних мікроорганізмів, що входять до складу нормальної мікрофлори: різні представники пологів - Bifidobacterium, Bacteroides, Eubacterium, Fusobacterium, Clostridium (непатогенні), а також факультативні анаероби, наприклад, рід Lactobacil - lus, непатогенні Е. coli. faecalis, S. faecium та інші. Саме ця частина строго анаеробних представників нормальної мікрофлори організму і домінує за кількістю популяції у всій кишковій мікрофлорі в межах 95-99%. Нормальну мікрофлору організму з цих причин часто розглядають як додатковий фактор неспецифічної резистентності організму здорової тварини та людини.

Дуже важливо створити та дотримуватись умов, за яких прямо чи опосередковано формується заселення новонародженого нормальною мікрофлорою. Ветеринарні фахівці, адміністративно-господарські працівники, тваринники повинні правильно підготувати до пологів матерів, провести пологи, забезпечити молозивне та молочне вигодовування новонароджених. Треба дбайливо ставитись до стану нормальної мікрофлори родових шляхів.

Ветеринарним спеціалістам треба мати на увазі, що нормальна мікрофлора пологових шляхів здорових самок - це та фізіологічно обґрунтована розплодка корисних мікроорганізмів, яка зумовить правильний розвиток усієї мікрофлори тіла майбутньої тварини. Якщо пологи неускладнені, то мікрофлору не слід порушувати невиправданими лікувальними, профілактичними та іншими впливами; не вводити в родові шляхи без достатньо вагомих свідчень антисептичні засоби, обдумано застосовувати антибіотики

Концепціяпродисбактеріозі

Бувають випадки, коли порушується еволюційно склалося співвідношення видів у нормальній мікрофлорі або змінюються кількісні співвідношення між найважливішими групамимікроорганізмів аутомікрофлори організму, або змінюється якість самих мікробних представників. І тут виникає дисбактеріоз. А це відкриває шляхи патогенним і умовно-патогенним представникам аутомікрофлори, які можуть впровадитися або розмножитися в організмі та викликати захворювання, дисфункції тощо. д. аутомікрофлори організму тварини

Морфофункціональна роль та метаболічна функція аутомікрофлори організму

Аутомікрофлора впливає на макроорганізм після його народження так, що під її впливом дозрівають і формуються структура та функції низки контактуючих із зовнішнім середовищем органів. Таким шляхом набувають свого морфофункціонального вигляду у дорослої тварини шлунково-кишковий, респіраторний, сечостатевий тракти та інші органи. Нова область біологічних павук - гнотобіологія, що успішно розвивається з часу Л. Пастера, дозволила дуже чітко усвідомити, що багато імунобіологічних особливостей дорослого, нормально розвиненого організму тварини формуються під впливом аутомікрофлори його тіла. Безмікробні тварини (гнотобіоти), отримані кесаревим перетином і потім які містяться тривалий час у спеціальних стерильних гнотобіблогічних ізоляторах без будь-якого доступу до них будь-якої життєздатної мікрофлори, мають риси ембріонального стану слизових оболонок, сполучених із зовнішньою. Імунобіологічний статус їх також зберігає ембріональні риси. Спостерігають гіпоплазію лімфоїдної тканини насамперед цих органів. У безмікробних тварин менше імунокомпетентних клітинних елементів та імуноглобулінів. Однак характерно, що потенційно організм такої гнотобіотичної тварини залишається здатним до розвитку імунобіологічних можливостей, і лише через відсутність антигенних стимулів, що йдуть у звичайних тварин (починаючи з народження) від аутомікрофлори, він не зазнав природного розвитку, що зачіпає і всю імунну систему загалом, і місцеві лімфоїдні скупчення слизових оболонок таких органів, як кишечник, дихальні шляхи, око, ніс, вухо і т.д. , що зумовлюють нормальний імуноморфофункціональний стан звичайної дорослої тварини.

Мікрофлора тіла тварини, зокрема мікрофлора шлунково-кишкового тракту, виконує для організму важливі метаболічні функції: впливає на всмоктування у тонкому кишечнику, ферменти її беруть участь у деградації та обміні жовчних кислот у кишечнику, утворює незвичайні жирні кислоти у травному тракті. Під впливом мікрофлори йде катаболізм деяких травних ферментів макроорганізму у кишечнику; інактивуються, розпадаються ентерокіназа, лужна фосфатаза, в товстому кишечнику йде розпад деяких імуноглобулінів травного тракту, що виконали свою функцію і т.д. Мікрофлора шлунково-кишкового тракту бере участь у синтезі багатьох вітамінів, необхідних макроорганізму. Її представники (наприклад, ряд видів бактероїдів, анаеробні стрептококи та ін.) своїми ферментами здатні розщеплювати клітковину, пектинові речовини, які не засвоюються тваринним організмом самостійно.

Деякі методи контролю стану мікрофлори тіла тварини

Контроль стану мікрофлори у конкретних тварин або їх груп дозволить своєчасно коригувати небажані зміни важливої ​​аутохтонної частини нормальної мікрофлори, виправити порушення за рахунок штучного введення корисних бактеріальних представників, наприклад біфідобактерій або лактобактерій і т. д., і не допустити розвитку дисбактеріозу в дуже важких формах. Такий контроль здійснимо, якщо у потрібний момент провести мікробіологічні дослідженнявидового складу та кількісних співвідношень, насамперед в аутохтонній строго анаеробній мікрофлорі деяких областей тіла тварини. Для бактеріологічного дослідженняберуть слиз зі слизових оболонок, вміст органів чи навіть саму тканину органу.

Взяття матеріалу. Для дослідження товстого відділу кишечника можуть бути використані фекалії, зібрані спеціально за допомогою стерильних трубок – катетерів – або іншими способами в стерильний посуд. Іноді потрібно брати вміст різних відділівшлунково-кишкового тракту чи інших органів. Це можливо переважно після забою тварин. У такий спосіб можна отримати матеріал з худої, 12-палої кишок, шлунка та ін. Взяття відрізків кишечника разом з їх вмістом дозволяє визначати мікрофлору як порожнини травного каналу, так і стінки кишки шляхом приготування зіскрібків, гомогенатів слизової оболонки або стінки кишки. Взяття матеріалу у тварин після забою також дозволяє більш повно та різнобічно визначати нормальну мікрофлору родових верхніх та середніх дихальних шляхів (трахеї, бронхів тощо).

Кількісне дослідження. Для визначення кількостей різних мікроорганізмів взятий тим чи іншим способом матеріал від тварини використовують для приготування 9-10 десятикратних розведень його (від 10 1 до 10 10) у стерильному фізіологічному розчині або будь-якому (відповідному виду мікроба) стерильному рідкому поживному середовищі. Потім з кожного розведення, починаючи від менш концентрованого, висівають на відповідні живильні середовища.

Так як досліджуваними пробами є біологічні субстрати зі змішаною мікрофлорою, треба так підбирати середовища, щоб кожна задовольняла ростові потреби мікробного роду або виду, що шукали, і одночасно інгібувала зростання іншої супутньої мікрофлори. Тому бажано, щоб середовища були селективними. за біологічної роліі значущості в нормальній мікрофлорі важливіша її аутохтонна строго анаеробна частина. Прийоми її виявлення ґрунтуються на використанні відповідних поживних середовищ та спеціальних методів анаеробного культивування; більшість із перелічених вище строго анаеробних мікроорганізмів можна культивувати на новому, збагаченому та універсальному поживному середовищі № 105 А. К. Балтрашевича з співавт. (1978). Це середовище складного складу і тому може задовольняти ростовим потребам різної мікрофлори. Пропис цього середовища можна знайти у посібнику «Теоретичні та практичні основи гнотобіології» (М.: Колос, 1983). Різні варіантицього середовища (без додавання стерильної крові, з кров'ю, щільна, напіврідка і т. д.) дозволяють вирощувати багато облигатно анаеробні види, в анаеростатах в газовій суміші без кисню і поза анаеростатів, використовуючи напіврідкий варіант середовища № 105 в пробірках.

Біфідобактерії теж виростають на цьому середовищі, якщо до неї додати 1% лактози. Однак через надзвичайно великої кількостіне завжди доступних компонентів та складного складу середовища № 105 можуть виникнути труднощі з її виготовленням. Тому доцільніше скористатися не менш ефективною при роботі з біфідобактеріями, але більш простою і доступною у виготовленні середовищем Блаурокка (Гончарова Г. І., 1968). Її склад та приготування: печінковий відвар – 1000 мл, агар-агар – 0,75 г, пептон – 10 г, лактоза – 10 г, цистин – 0.1 г, сіль кухонна (х/ч) – 5 г. На початку готують печінковий відвар: 500 г свіжої яловичої печінки нарізають дрібними шматочками, заливають 1 л дистильованої води та кип'ятять 1 год; відстоюють і фільтрують через ватно-марлевий фільтр, доливають дистильованою водою до початкового обсягу. У цей відвар додають розплавлений агар-агар, пептон та цистин; встановлюють рН = 8,1-8,2 за допомогою 20% їдкого натру і кип'ятять 15 хв; дають відстоятися 30 хв іфільтрують. Фільтрат доводять дистильованою водою до 1 л і додають до нього лактозу. Потім розливають по пробірках по 10-15 мл і стерилізують текучим паром дробово (Блохіна І. Н., Воронін Е. С. та ін., 1990).

У ці середовища надання їм селективних властивостей необхідно вводити відповідні інгібуючі зростання іншої мікрофлори агенти. Для виявлення бактероїдів – це неоміцин, канаміцин; для спірально вигнутих бактерій (наприклад, кишкових спірохет) – спектиноміцин; для анаеробних коків роду Veillonella – ванкоміцин. Для виділення із змішаних популяцій мікрофлори біфідобактерій та інших грампозитивних анаеробів до середовищ додають азид натрію.

Для визначення у матеріалі кількісного вмісту лактобактерій доцільно використовувати сольовий агар Рогоза. Селективні властивості йому надають додаванням оцтової кислоти, що створює в цьому середовищі рН = 5,4.

Неселективним середовищем для лактобактерій може бути гідролізат молока з крейдою: до літра пастеризованого знежиреного молока (рН -7,4-7,6), що не містить домішок антибіотиків, додають 1 г порошку панкреатину і 5 мл хлороформу; струшують періодично; ставлять на 72 год термостат при 40° С. Потім фільтрують, встановлюють рН = 7,0-7,2 і стерилізують при 1 атм. 10 хв. Отриманий гідролізат розводять водою 1: 2, додають 45 г простерилізованого прогрівання порошку крейди і 1,5-2% агар-агару, нагрівають до розплавлення агару і стерилізують повторно в автоклаві. Перед вживанням середу скошують. За бажанням у середу можна ввести якийсь селекціонуючий агент.

Виявити та визначити рівень стафілококів можна на досить простому поживному середовищі – глюкозному сольовому м'ясопептонному агарі (МПА з 10%). кухонної соліта 1-2% глюкози); ентеробактерій - на середовищі Ендо та інших середовищах, прописи яких можна знайти в будь-яких посібниках з мікробіології; дріжджів і грибів - серед Сабуро. Актиноміцети доцільно виявляти на середовищі СР-1 Красильникова, що складається з 0,5 калію фосфорнокислого двозаміщеного. 0,5 г магнію сірчанокислого, 0,5 г натрію хлористого, 1,0 г калію азотнокислого, 0,01 г заліза сірчанокислого, 2 г вуглекислого кальцію, 20 г крохмалю, 15-20 г агар-агару і до 1 л дистильованої води . Усі інгредієнти розчинити, змішати, нагріти до розплавлення агару, встановити рН = 7, профільтрувати, розлити пробірками, стерилізувати в автоклаві при 0,5 атм. 15 хв перед посівами скошувати.

Для виявлення ентерококів бажана селективна середовище (агар-М) у спрощеному варіанті наступного складу: до 1 л розплавленого стерильного МПА додати 4 г фосфорнокислого двозаміщеного, розчиненого в мінімальній кількості стерильної дистильованої води 400 мг розчиненого аэи; 2 г розчиненої глюкози (або готового стерильного розчину 40% глюкози - 5 мл). Усі переміщати. Після охолодження суміші приблизно До 50° додати до неї розчиненої в стерильній дистильованій воді ТТХ (2,3,5-трифенілтетразолій хлорид) - 100 мг. Перемішати, середу не стерилізувати, відразу розлити в стерильні чашки Петрі або пробірки. Ентеро коки ростуть на цьому середовищі у вигляді невеликих, сіро-білого кольору колоній. Але частіше через домішки ТТХ колонії ейтерокококів, набувають темно-вишневого кольору (вся колонія або, її центр).

Спорові аеробні палички (В. subtilis та ін) легко виявляють після прогрівання досліджуваного матеріалу при 80 ° С протягом 30 хв. Потім висівають прогрітий матеріал ні МПА або 1МПБ і після звичайної інкубації (37° С при доступі кисню) наявність цих бацил встановлюють зростання їх на поверхні середовища у вигляді плівки (на МПБ).

Встановити кількість коринебактерій у матеріалах із різних галузей тіла тварини можна з допомогою середовища Бучина (випускається у готовому вигляді Дагестанським інститутом сухих поживних середовищ). Її можна збагатити до 5% стерильної крові. Нейссерії виявляють на середовищі Бергеа з ристоміцином: до 1 л розплавленого агару Хоттйнгера (менш бажаний МПА) додати 1% мальтози, стерильно розчиненої в дистильованій воді (можна 10 г мальтози розчинити в мінімальній кількості води і прокип'яти 2 мл -ного розчину водногр блакитного (аніліновий блакитний водорозчинний), розчин рйстоміцину; розрахунку 6,25 од. на 1 мл середовища. Змішати, не стерилізувати, розлити в стерильні чашки Петрі або пробірки. Грамнегативні коки роду Neisseria ростуть у вигляді дрібних та середніх колоній блакитного чи синього кольору. Гемофільні бактерії можна виділяти на середовищі, що є шоколадним агаром (з кінської крові) з бацитрацином як селективного агента. .

Методи виявлення умовно-патогенних мікроорганізмів (синьогнійної палички, протею, клебсієл та ін.). Добре відомі чи можна знайти у більшості бактеріологічних посібників.

БІБЛІОГРАФІЧНИЙ СПИСОК

Основний

Балтрашевич А. К. та ін. Щільне середовище без крові та її напіврідкий та рідкий варіанти для культивування бактероїдів / Науково-дослідна лабораторія експериментально-біологічних моделей АМН СРСР. М. 1978 7 с. Бібліогр. 7 назв. Деп. у ВНИИМИ 7.10.78 № Д. 1823.

Гончарова Г. І. До методики культивування В. bifidum // Лабораторна справа. 1968. № 2. З. 100-1 D 2.

Методичні рекомендації щодо виділення та ідентифікації умовно-патогенних ентеробактерій і сальмонел при гострих кишкових захворюваннях молодняку ​​сільськогосподарських тварин / І. Н. Блохіна Е, С. Воронін та ін. ХМ: МВА, 1990. 32 с.

Петровська В. Г., Марко О. П. Мікрофлора людини в нормі та патології. М: Медицина, 1976. 221 с.

Чахава О. В. та ін. Мікробіологічні та імунологічні основи гнотобіології. М: Медицина, 1982. 159 с.

Knothe Н. u. a. Vaginales Keimspektrum//FAC: Fortschr. antimlkrob, u. Antirieoplastischen Chemotherapie. 1987. Bd. 6-2. S. 233-236.

Koopman Y. P. та ін. Яксуспільство з герм-free rats with different rnicrofloras // Zeitschrift fur Versuchstierkunde. 1984. Bd. 26, N 2. S. 49-55.

Varel V. H. Activity of fiber-degrading microorganisms in the pig large intestine//J. Anim. Science. 1987. V. 65, N 2. P. 488-496.

Додатковий

Boyd M. E. Postoperative gynecologic infections//Can. J. Surg. 1987.

V. 30, N 1. P. 7-9.

Masfari A. N., Duerden B, L, Kirighorn G. R. Quantitative studies of vaginal bacteria//Genitourin. Med. 1986. V. 62, N 4. P. 256-263.

Методи для сприятливого і сприятливого випробування похідних мікрофіорів при menstruation / A. B. Onderdonk, G. A. Zamarchi, Y. A. Walsh et al. //Appl. та Environ. Microbiology. 1936. V. 51, N 2. P. 333-339.

Miller J. M., Pastorek J. G. Microbiology of premature rupture membrans//Clin. Obstet. і Gyriecol. 1986. V. 29, N 4. P. 739-757.

менш часто виділяються із здорового організму.

Організм тварини у нормі містить сотні видів мікроорганізмів; у тому числі домінують бактерії. Віруси та найпростіші представлені значно меншою кількістю видів. Провести чітку межу між сапрофітами та патогенними мікробами, що входять до складу нормальної мікрофлори, часто неможливо. Кров та внутрішні органи тварин практично стерильні. Не містять мікробів і деякі порожнини, що стикаються із зовнішнім середовищем - матка, сечовий міхур. Швидко знищуються мікроби у легенях. Але в ротовій порожнині, носі, кишечнику, піхві є постійна нормальна мікрофлора, характерна для кожної області тіла (аутохтонна). Протягом внутрішньоутробного періоду організм розвивається в стерильних умовах порожнини матки, та його первинне обсіменіння відбувається при проходженні через родові шляхи та у першу добу при контакті з навколишнім середовищем. Потім протягом років після народження формується характерний для певних біотопів його організму мікробний «пейзаж». Серед нормальної мікрофлори виділяють резидентну (постійну) облігатну мікрофлору та транзиторну (непостійну) мікрофлору, яка не здатна до тривалого існування в організмі.

Нормальна мікрофлора - це сукупність мікроорганізмів, що зустрічаються у здорових людей та тварин, вона сприяє підтримці фізіологічних функцій та здорового статусу макроорганізму. Нормальну мікрофлору, пов'язану лише зі здоровим статусом організму, поділяють на дві частини: 1) облігатну, постійну частину, що склалася в процесі еволюції та 2) факультативну, або транзиторну.

3)до складу аутомікрофлори періодично можуть включатися і патогенні мікроорганізми, що випадково проникають в макроорганізм.

З організмом тварини асоційовані, як правило, десятки та сотні видів різних мікроорганізмів. Багато видів мікроорганізмів зустрічаються в різних областяхтіла, змінюючись лише кількісно. Більшості організмів властиві загальні усереднені показники для низки областей їх тіла.

Так мікрофлора шкіри представлена ​​коринебактеріями, пропіоновими бактеріями, цвілевими грибами, дріжджами, споровими аеробними паличками, стафілококами з переважанням S. epidermidis і в невеликій кількостіS. aureus (той самий, що постійно виділяють при отитах).

Через високу кислотність у шлунку міститься невелика кількість мікроорганізмів; в основному це кислотостійка мікрофлора - лактобактерії, стрептококи, дріжджі, сардини і т. д. Кількість мікробів там - 10 * 3 / г вмісту. Набагато рясніша, заселений кишечник, в проксимальних ділянках тонкого кишечника видів мікрофлори менше - розщеплення їжі відбувається за рахунок власних ферментів, - у товстому набагато більше. Це лактобактерії, ентерококи, сардини, гриби, у нижніх відділах наростає кількість біфідобактерій, кишкових паличок. У собак кількість біфідобактерії 10 * 8 в 1 г, на порядок вище (табличних даних) стрептококів (S. lactis, S. mitis, ентерококи) та клостридій. Кількісно ця мікрофлора може відрізнятися у різних особин.

У цій таблиці наводиться список основних мікроорганізмів, що населяють шлунково-кишковий тракт.

Мікрофлора, що заселяє слизові оболонки родових шляхів, дуже різноманітна і багата на видове відношення. У відсотковому відношенні вона представлена: Бактероїди – 17%; Біфідобактерії до 80%; пептококи та пептострептококи 20%; Клостридії 1%.

Якщо порівняти мікрофлору родових шляхів із мікрофлорою інших областей тіла, то виявляють, що мікропейзаж матері за цією ознакою аналогічний основним групам мікробних мешканців тіла майбутнього організму. Треба враховувати, що у здорової самки плід стерильний до моменту пологів, що почалися.

Нормальна мікрофлора організму тварини у повному обсязі заселяє його тіло за кілька днів після народження, встигаючи розмножитися у певних співвідношеннях. Так у прямій кишці в 1-й день вже виявляються кишкові палички, ентерококи, стафілококи, а на третій день після народження встановлювався нормальний мікробний біоценоз.

На слизових оболонках респіраторного тракту найбільше мікроорганізмів в області носоглотки, далі по висхідних шляхах їх кількість значно зменшується, в глибині легенів здорового організму мікрофлори взагалі немає.

У носових ходах є дифтероїди, насамперед корнебактерії, постійні стафілококи (резидентен S. epidermidis), нейссерії, гемофільні бактерії, стрептококи (альфа-гемолітичні); в носоглотці - коринебактерії, стрептококи (S. mitts, S. salivarius та ін), стафілококи, нейссерії, вайлонели, гемофільні бактерії, більш транзнторно зустрічаються ентеробактерії, бактероїди, гриби, ентерококи, лактоекі, лактоекі та ін.

таб. з роботи академіка РАСГН, проф. Інтизарова М.М.

Облігатні мікроорганізми – це переважно представники непатогенної мікрофлори. Багато видів, що входять у зазначені групи, є необхідними (лактобактерії, біфідобактерії). Певні корисні функції виявлені у багатьох непатогенних видів клостридії, бактероїдів, еубактерній, ентерококів, непатогенних кишкових паличок тощо. Тому їх називають «нормальною» мікрофлорою. Однак у фізіологічний для макроорганізму мікробіоценоз, іноді включаються і менш нешкідливі, умовно-патогенні та патогенні мікроорганізми. Надалі ці патогенні можуть:

а) більш менш тривало існувати в організмі в таких випадках формується носійство патогенних мікробів, але кількісно, ​​все ж таки, превалює нормальна мікрофлора;

б) бути витісненими з макроорганізму корисними симбіотичними представниками нормальної мікрофлори та елімінувати;

в) розмножитися, потіснивши нормальну мікрофлору, та викликати відповідне захворювання.

Так наприклад, патогенний С. perfrtngens може розмножитися на слизовій оболонці кишечнику в кількості (10 * 7 -10 * 9 і більше), викликаючи анаеробну інфекцію. У цьому випадку він навіть витісняє нормальну мікрофлору і може бути виявлений у скарифікаті слизової оболонки клубової кишки. Подібним чином відбувається розвиток кишкової коліінфекції у тонкому кишечнику у молодих тварин, лише там розмножуються патогенні типи кишкової палички.

Транзиторні мікроорганізми шлунково-кишкового тракту

Назва мікробних груп Кількість мікробів в 1г. матеріалу
Ентеробактерії Klebsiela, Proteus, Enterobacter, Citrobacter 0 – 10*6
Псевдомонади 0 – 10*4
Стафілококи в т.ч. Epidermidis, S.aureus 10*3 – 10*4
Стрептококи До 10*7
Дифтероїди 0 – 10*4
Аеробні бацили subtilis 10*3 – 10*4
Гриби, актиноміцети 10*3

таб. з роботи академіка РАСГН, проф. Інтизарова М.М.

Патогенні та умовно-патогенні мікроорганізми протягом життя тварини періодично контактують та проникають у її організм, включаючись до складу загального комплексу мікрофлори. Так, для порожнини рота з патогенних і умовно-патогенних факультативно-транзиторних мікроорганізмів можуть бути типові Р, aeruginosa, С. perfringens, С. albicans, представники (родів Esoherichia, Klebsiela, Proteus; для кишечника вони ж і ще більш патогенні) також В. fragilis, С. tetani, С. sporogenes, Fusobacterium necrophorum, деякі представники роду Campylobacter, кишкові спірохети.Для шкіри і слизових оболонок характерні S. aureus;для респіраторного тракту - він же і пневмококи і т. д.

Факультативна мікрофлора родових шляхів найчастіше представлена ​​такими різновидами.

таб. з роботи академіка РАСГН, проф. Інтизарова М.М.

Ветеринарним фахівцям і заводчикам треба пам'ятати, що нормальна мікрофлора пологових шляхів здорових самок обумовлює правильний розвиток всієї мікрофлори тіла майбутнього тварини. Тому її не слід порушувати невиправданими лікувальними, профілактичними та іншими впливами; не вводити у пологові шляхи без досить вагомих показань антисептичні засоби.

Ветеринарна клініка "ВетЛіга" здійснює забір матеріалу з подальшою передачею в інфекційну лікарню по буднях, з попереднім записом за тел. 2 300-440

Loading...Loading...