1. Поняття про імунний статус
2.
3.
4. Методи оцінки імунного статусу
1. Стан функціональної активності імунної системилюдини в ціломумає життєво важливе значення для організму та позначається поняттям "імунний статус".
Імунний статусце кількісна та якісна характеристика стану функціональної активності органів імунної системи та деяких неспецифічних механізмівпротимікробного захисту.
Порушення імунного статусу та здатності до нормальної імунної відповіді на різні антигени називають імунодефіцитними станами (імунодефіцитами), які діляться.
на первинні (вроджені, спадкові);
Вторинні (придбані).
2. Первинний імунодефіцитлюдини- генетично обумовлена нездатність організму реалізувати ту чи іншу ланку імунітету.Виявляються незабаром після народження, успадковуються, як правило, за рецесивним типом.
Первинні імунодефіцитні станиможуть виражатися у поразках В- і Т-системи імунітету та допоміжних клітин (антитілоутворення та клітинні форми) імунної відповіді, а можуть бути і комбінованими, але всі вони називаються специфічними,на відміну від спадково обумовлених дефектів неспецифічних факторівзахисту – фагоцитозу, системи комплементу та ін.
Найбільш характерним клінічним проявомпервинних імунодефіцитних станів є рецидивні інфекціїверхніх дихальних шляхівта травного тракту, піодермії, артрити, остеомієліти.
При недостатності гуморального імунітетупереважають бактеріальні інфекції;при недостатності клітинного - вірусні та грибкові.
3. Вторинні імунодефіцитні стани виникають як наслідок порушень імунорегуляції та інших патологічних процесів,супроводжуються лімфопенієюі гіпогамаглобулінемією.
Вторинні імунодефіцити пов'язані з такими обставинами:
Перенесеними інфекційними захворюваннями (кір, грип, проказа, кандидоз);
Соматичними (з нефротичним синдромом);
Онкологічними (пухлини лімфоретикулярної природи) захворюваннями;
опіками;
Важкими травмами;
Величезними хірургічними втручаннями;
Деякими лікувальними впливами(рентгенівське опромінення, променева терапіяпухлин, терапія кортикостероїдами, цитостатиками та імунодепресантами при трансплантації тканин та органів, тимектомія, спленектомія та ін.).
При хронічному лімфолейкозі, мієломі, макроглобуліні-мії та захворюваннях, що супроводжуються втратою білка,переважно страждає В-система імунітету.
При лімфогранулематозі, хворобі Ходжкіна, проказі, вірусних інфекціях. Т-система.
Старість є вираженим Т-імунодефіцит.
4. Для виявлення імунодефіцитних станів виникає необхідність оцінки показників функціональної активності імунної системи,тобто. імунного статусу Оцінка імунного статусу складається з кількох етапів:
клініко-лабораторного,який включає в себе:
Збір та оцінку імунологічного анамнезу (частота інфекційних захворювань, характер їх перебігу, вираженість температурної реакції, наявність вогнищ хронічної інфекції, реакції на вакцинацію або введення лікарських засобів);
Оцінку результатів загального клінічного аналізу крові (зміст гранулоцитів, моноцитів, лімфоцитів);
Виявлення за допомогою бактеріологічних, вірусологічних та/або серологічних дослідженьбактеріоносійства та вірусоносійства;
лабораторно-імунологічного.На цьому етапі в імунологічній лабораторії проводяться дослідження, метою яких, власне, і є якісна та кількісна оцінкафункціональної активності імунної системи (імунокомпетентних клітин) Для цього розроблено ряд (набір) тестів, які поділяють на тести 1-го (орієнтовного) та 2-го (аналітичного) рівнів.
Тести 1-го рівняє орієнтовними та дозволяють виявити грубі порушеннядіяльності імунної системи
Вони включають визначення:
Загального та відносного числа лімфоцитів;
Основних субпопуляцій (Т- та В-клітини);
Фагоцитарна активність лейкоцитів;
Концентрації імуноглобулінів різних класіву сироватці крові.
Загальне (абсолютне) та відносне число лімфоцитів визначають за даними клінічний аналіз крові.Зміст Т-і В-лімфоцитів підраховують реакції імунофлюорес-ценції,використовуючи мічені моноклональні флюоресцентні сироватки до специфічним поверхневим антигенним маркерам, символами CD, що позначаються (claster differentiation).Таких антигенних маркерів відомо кілька десятків, але окремі з них характерні для того чи іншого типу клітин:
Рецептор CD3 – всіх Т-лімфоцитів;
Рецептори CD19, 20, 21, 72 - В-лімфоцитів;
Рецептори CD4 – Т-хелпери;
Рецептори CD8 – Т-супресори;
Рецептори CD16 – NK-клітини (натуральні кілери).
Більш доступним і простим, але менш точним та застарілим є метод розеткоутворення.Він заснований на тому, що В-лімфоцити можуть адсорбувати на поверхні еритроцити мишей, а Т-лімфоцити - еритроцити барана (їх також можуть утворювати NK-клітини). Лімфоцит з прилиплими до нього еритроцитами – це і є розетка, їх підраховують у пофарбованих по Романівському-Гімзімазках із суміші лімфоцитів та відповідних еритроцитів.
Для оцінки фагоцитарної активності нейтрофілів крові визначають відсоток фагоцитуючих клітині фагоцитарний показник(Середня кількість мікробних клітин, поглинених одним лейкоцитом).
Концентрацію (рівень) імуноглобулінів різних класів G, М, А та Е у сироватці крові визначають у реакції преципітації в гелі (радіальна імунодифузія по Манчіні)з антиглобуліновими сироватками до IgG, IgM, IgA, IgE, але цей метод дає досить велику помилку при визначенні: ±15%.
Тести 2-го рівнядозволяють провести більше глибокий аналізстану імунної системи та уточнити характер дефектів, виявлених за допомогою тестів 1-го рівня. До них відносяться, наприклад, визначення окремих субкласів імуноглобулінів (особливо IgG, секреторного IgA) та В-лімфоцитів, регуляторних та ефекторних клітин.
Крім того, за допомогою імуноферментних та радіоімуннихметодів можна визначити концентрації окремих цитокі-нов - основних регуляторних молекул, визначальних тип імунної відповіді.
Наприклад, інтерлейкін-2 є обов'язковим компонентом імун- Iної відповіді на будь-які антигени, у тому числі мікробні, оскільки забезпечує проліферацію та диференціювання Т-лімфоцитів.
Призначення дослідження імунологічного статусу проводиться за будь-якої підозри на неадекватну імунну систему: за наявності хронічних або інфекційних захворювань, що часто проявляються, при тяжкому перебігуінфекцій, наявності вогнищ хронічних запалень, захворювань сполучної тканини, аутоімунних процесів та ін. У цих випадках необхідно звернутися до імунолога. Лікар призначить імунітет. За результатами дослідження складається, розшифровку якої лікує лікар.
Оцінка імунного статусу провадиться за допомогою скринінгових тестів. Стандартний тест включає підрахунок абсолютної кількості нейтрофілів, лейкоцитів, тромбоцитів і лімфоцитів, концентрації сироваткових імуноглобулінів (IgG, IgA та IgM), проведення шкірних тестівна гіперчутливість уповільненого типу. Відхилення показників можуть бути нормальною реакцією організму на дію патологічних або фізіологічних факторівтакож вони відображають виснаження імунної системи або надмірну активацію.
При більш детальному вивченні імунного статусу проводиться визначення функціональної активності та кількості гуморальної та клітинної ланок імунної системи.
Що показує імунний статус
Цей вид дослідження дозволяє дізнатися інформацію про стан ланок імунітету. Він використовується в діагностиці первинних та вторинних імунодефіцитів, лімфопроліферативних, аутоімунних, гематологічних, інфекційних захворювань При дослідженні можуть бути виявлені такі порушення функції імунної системи: її недостатність чи імунодефіцит, гіперреактивність, аутоімунні реакції.
Знижена активність розвивається внаслідок зниження кількості складових імунної системи або їхньої недостатньої активності. Гіперактивність імунної системи може призвести до тяжкого перебігу захворювання, що її спричинило. При аутоімунних реакціях імунітет атакує власні тканини. Такий процес спостерігається внаслідок зриву толерантності до антигенів тканин організму.
Відхилення від норми в імунограмі характеризують набутий чи вроджений дефект окремих ланок імунної системи.
Імунологічний статус дозволяє уточнити діагноз, визначити необхідну лікувальну тактику. При виявлених відхиленнях у роботі імунітету пацієнту призначаються спеціальні препарати (імуностимулятори, імуносупресори, імуномодулятори). замісна терапія(Введення сироваток, лейкоцитарної маси, імуноглобулінів, інтерферонів).
Імунний статус людини - це всебічні характеристики стану імунної системи (ІВ), точніше кажучи це кількісні та якісні показники активності всіх органів ІВ та деяких інших механізмів захисту організму (противірусної та протимікробної).
Коли ІВ дає збій, то відразу виникає необхідність дослідження імунного статусу людини щоб визначити всі ланки, які дають збій і виробити план її корекції. Важливість цього кроку настільки висока, що можна говорити про спасіння людського життя.
Для того, щоб визначити імунний статус людини необхідно провести імунограму. І треба також зазначити, що імунний статус дитини чи дорослого залежить від клітинного і гуморального імунітетів, саме їхній стан відображає і стан імунного статусу людини.
Для нашого організму різні ланки ІС однаково важливі і лише їхні спільні зусилля можуть забезпечити повний захист від вторгнення. сторонніх тіліз назовні.
Гуморальна ланка імунного статусу людини бореться зі збудником вірусних і бактеріальних інфекційвідразу ж після їхнього проникнення в організм. Всі реакції даного виду імунітету забезпечуються В-лімфоцитами та проходять у сироватці крові. І цей механізм настільки простий і ефективний: коли В-лімфоцити ідентифікують "чужого", то тут же синтезуються в плазматичні клітини, які виробляють антитіла - імуноглобуліни. Далі ці імуноглобуліни блокують активність "чужих" (антигенів) та видаляють їх з організму.
Крім усього іншого імуноглобуліни виступають як каталізатор для інших реакцій імунологічного штибу і цим теж підтримують імунний статус людини на належному рівні.
Іноді діагностуючи імунний статус людини роблять біопсію вилочкової залози, кісткового мозку, лімфатичних вузлів. Це робиться визначення структури лімфоїдних фолікулів при підозрі на злоякісні новоутворення.
Найважливішим фактором, який визначає імунний статус дитини, є спадковість. У нас є і так звані "шкідливі" гени, які провокують розвиток різних онкологічних захворювань. Так ось, визначаючи імунний статус дитини необхідно це враховувати, саме тому, беручися за лікування дітей, необхідно знати і стан ІС їхніх батьків, чим вони хворіли, які у них хронічні захворювання і струм далі. Також необхідно знати, що імунний статус дитини багато в чому залежить від віку, адже дитина росте і формується в статевому відношенні до 16-17 років і все це не може не позначитися на його імунному статусі. До речі, про періоди формування ІС у дітей ви можете прочитати більш докладно на інших сторінках нашого сайту. Просто важливо знати, що імунний статус дитини багато в чому залежить від здоров'я її батьків (і це повинні знати молоді мами та тата беручи на себе відповідальність народження дітей) а також від періоду зростання та формування його організму.
Сьогодні з'явився дивовижний препарат – Трансфер фактор, який просто не має собі аналогів у світі. Це універсальний імунокоректор, який абсолютно не має побічних ефектіві який рекомендований для застосування людям абсолютно різного віку і станів: і дітям дитячого віку, і глибоким старим, і матерям, що годують, і вагітним. Якщо у вас вже є цей препарат, то за імунний статус дитини своєї можете бути спокійні. Порівнюючи безліч імуномодулятрів та імуностимуляторів між собою беззастережно ми можемо порадити тільки трансфер фактор.
Імунний статус людини, методи оцінкиОсновні питання
1.Імунний статус та його порушення.
2.Імунопатологічні синдроми.
3.Імунологічні тести 1 та 2 рівнів.
4. Правила оцінки імунограм.
5.Методи оцінки лімфоцитів.
1
Імунний статус
Імунний статус - це кількісна таякісна характеристика стану
функціональної активності органів
імунної системи та деяких
неспецифічних механізмів
протимікробного захисту.
2Імунний статус визначається ефективністю
та узгодженістю роботи всіх систем та
ланок імунітету - макрофагів,
комплементу, цитокінів, Т-і В-лімфоцитів,
головної системи гістосумісності.
Розділ медицини, що вивчає патологію
людини в аспекті порушень функцій
імунної системи, називається клінічною
імунологією.
3
Дослідження імунного статусу включає:
1) визначення групи крові та резус-фактора;2) загальний аналізкрові з розгорнутою лейкограмою або
формулою;
3) визначення кількості імуноглобулінів;
4) дослідження лімфоцитів;
5) дослідження фагоцитарної активності нейтрофілів.
Для встановлення діагнозу імунопатологічного
стану проводять: збирання імунологічного анамнезу,
постановку клініко-лабораторних, інструментальних та
імунологічних тестів
4Збір анамнезу
При опитуванні визначають імовірний
імунопатологічний синдром, основними
є:
- інфекційний синдром;
- алергічний та аутоімунний синдроми;
- первинний імунодефіцит;
- вторинний імунодефіцит;
- імунопроліферативний синдром.
5- облік можливих індивідуальних
особливостей (вік, супутні
захворювання) та коливань показників
(фізіологічних та патологічних-прийом
їжі, фізичні навантаження, час доби,
дія стресорів тощо);
- Облік регіональних норм;
6Загальні правила щодо оцінки імунограм:
- комплексний аналіз, а не оцінка одного
показника;
- аналіз у комплексі з клінічними та
анамнестичними даними;
- оцінка різких зрушень показників (не
менше 20% від норми);
- аналіз у динаміці;
- аналіз не лише (і не стільки)
абсолютних даних, а співвідношень
показників (особливо індекс Th/Ts);
7Петров Р.В. із співавт. створили двоетапний підхід до
оцінки імунного статусу, відповідно до якого
імунологічні тести поділені на тести
першого та другого рівня.
На першому етапі за допомогою простих методів
виявляють "грубі" дефекти фагоцитозу, клітинного
та гуморального імунітету.
До тестів першого рівня відносять:
- визначення кількості лімфоцитів у крові (абс., отн.);
- Визначення кількості Т-і В-лімфоцитів;
- Визначення рівня Ig класів IgG, IgM, IgA;
- Визначення фагоцитарної активності лейкоцитів;
- Визначення титру комплементу.
З урахуванням аналізу результатів визначають
подальшу тактику дослідження.
8
Лейкоцити
Норма - 3,5-8,8 4109/л. Підвищення числа лейкоцитів –це лейкоцитоз, зниження – лейкопенія. Лейкоцитоз
ділиться на фізіологічний та патологічний.
фізіологічного лейкоцитозу можуть бути прийом їжі,
фізична робота, прийом гарячих та холодних ванн,
вагітність, пологи, передменструальний період
Патологічний лейкоцитоз буває при інфекційних
захворюваннях (пневмонії, менінгіті, загальному сепсисі та
ін), інфекційних захворюваннях з ураженням клітин
імунної системи Але є й винятки. Наприклад,
деякі інфекційні захворюванняпротікають з
лейкопенією ( черевний тиф, бруцельоз, малярія,
краснуха, кір, грип, вірусний гепатит у гострій фазі).
9
Лімфоцити
Норма: абсолютний зміст- 1,2-3,0 109/л, але частішев клінічному аналізікрові вказується процентне
вміст лімфоцитів.
Цей показник становить 19-37%.
Лімфоцитоз виявляється при хронічному
лімфолейкозі, хронічної променевої хвороби,
бронхіальній астмі, тиреотоксикозі, деяких
інфекційних захворюваннях (коклюші, туберкульозі),
при видаленні селезінки.
До лімфопенії призводять аномалії розвитку
лімфоїдної системи, вірусні інфекції,
іонізуюче випромінювання, аутоімунні захворювання
(системний червоний вовчак), ендокринні захворювання
(хвороба Кушинга, прийом гормональних препаратів),
СНІД.
10
Т-лімфоцити
Норма: відносний зміст 50-90%, абсолютне - 0,8-2,5 109/л.
Кількість Т-лімфоцитів підвищується при
алергічних захворюваннях, у період
одужання, при туберкульозі. Зниження
вміст Т-лімфоцитів відбувається при
хронічні інфекції, імунодефіцитах,
пухлинах, стресах, травмах, опіках,
деяких формах алергії, інфаркті.
11
Т-хелпери
Норма: відносний зміст – 30–50%, абсолютне - 0,6-1,6 109/л.
Зміст Т-хелперів підвищується при
інфекції, алергічні захворювання,
аутоімунних захворюваннях
(ревматоїдному артриті та ін.). Зниження
вміст Т-хелперів відбувається при
імунодефіцитних станах, СНІД,
цито-мегаловірусної інфекції.
12
В-лімфоцити
Норма: відносний зміст – 10–30%, абсолютне - 0,1-0,9 в 109/л.
Підвищений зміст буває при
інфекціях, аутоімунних захворюваннях,
алергіях, лімфолейкозах.
Зниження кількості В-лімфоцитів
виявляється при імунодефіцитах,
пухлини.
13
Фагоцити (нейтрофіли)
Їхню активність оцінюють за допомогою методів, яківизначають частину клітин, здатних формувати в собі
фагосом.
Для оцінки травної здатності нейтрофілів
використовують НСТ-тест (НСТ – це барвник нітросин
тетразолій).
Норма тест-НСТ – 10–30 %. Фагоцитарна активність
лейкоцитів підвищується при гострих бактеріальних інфекціях,
знижується при вроджених імунодефіцитах, хронічних
інфекціях, аутоімунних захворюваннях, алергіях, вірусних
інфекції, СНІД.
Активність роботи фагоцитів оцінюється так званим
фагоцитарним числом (у нормі клітина поглинає 5-10
мікробних частинок), кількістю активних фагоцитів, індексом
завершеності фагоцитозу (має бути більше 1,0).
14
Методи дослідження лімфоцитів
Вивчення поверхневих антигенів CDґрунтується на:
методи розеткоутворення;
метод проточної цитометрії;
методи імунофлюоресценції;
імуноферментний аналіз.
До функціональних тестів відносять методи оцінки
проліферативної активності лімфоцитів на Т- та
В-мітогени (РБТЛ-реакція бластної
трансформації лімфоцитів), синтезу
мононуклеарами цитокінів.
15Для визначення кількості Т-клітин використовують
метод розеткоутворення з еритроцитами
барана.
Метод заснований на спорідненості рецептора CD2 з
білками мембрани еритроцитів барана. При
змішуванні лімфоцитів з еритроцитами барана
утворюються фігури як розеток.
Кількість розеткоутворюючих клітин (Е-РОК)
відповідає кількості Т-лімфоцитів (CD2+
клітин).
Для визначення кількості В-клітин використовують
EAC-розетки. Лімфоцити змішують з
еритроцитами бика, обробленими
комплементом та антитілами до еритроцитів.
Сучасний метод – проточна цитометрія.
16Найважливіше значення має
обчислення імунорегуляторного
індексу CD4/CD8 (хелперносупресорного відношення)
CD8+ несуть Т-супресори та Ткілери, частина NK-клітин.
CD4+ несуть Т-хелпери та Тіндуктори, моноцити, Т-клітини ГЗТ.
1718
Основний принцип імуноцитометрії:
Мічена флюоресцентними МКАдосліджувана клітина проходить з
потоком рідини капіляром.
Потік перетинається променем лазера.
Прилад фіксує відбитий від
поверхні клітини сигнал по
принципом «так/ні».
За зміною лазерної, що проходить
хвилі визначаються параметри та
розміри клітини (пряме та бічне
світлорозсіювання).
Лазерний промінь індукує
флюоресценцію МКА на поверхні
клітин, що дає інформацію про
наявності певних рецепторних
структур.
В результаті підсумовування
інформації по всій популяції
клітин прилад видає точний
кількісний та якісний
аналіз стану клітинних
популяцій.
19Стандартна панель МКА дозволяє визначати
наступні СД-маркери: СД3 (Т-клітини), СД4 (Тхелпери), СД8 (Т-цитотоксичні), СД20 (В-клітини),
СД16 (NK-клітини), СД14 (моноцити/макрофаги), СД25
(Рецептор ІЛ-2).
20Методи дослідження основних
компонентів імунної системи прийнято
ділити також на скринінгові та
розгорнуті.
При оцінці В-системи імунітету до
скринінговим тестам відносять визначення
кіл-ва CD19+ і CD20+ клітин, IgG, IgM та IgA,
до розгорнутих – бласттрансформацію
(РБТЛ) на мітоген лаконоса та S.aureus,
поверхневих маркерів В-лімфоцитів.
21
Імуноглобуліни Jg
Імуноглобулін А. Норма: 0,6-4,5 г/л.JgА підвищується при гострих інфекціях, аутоімунних
захворюваннях (частіше у легенях чи кишечнику), нефропатіях.
Зниження JgА буває при хронічні захворювання(особливо
дихальної системи та шлунково-кишковий тракт), гнійних
процесах, туберкульозі, пухлинах, імунодефіцитах.
Імуноглобулін Е. Норма: 0-0,38 мг/л. Підвищується кількість
JgЕ при спадково обумовлених алергічних реакціях,
алергічних ураженнях органів дихання грибком
Аспергіллусом, глистної інвазії
Зниження JgЕ відбувається при хронічних інфекціях, прийомі
ліків, які пригнічують поділ клітин, уроджених
імунодефіцитні захворювання.
22Імуноглобулін М. Норма: 0,6-3,4 г/л.
Зміст JgМ підвищується при
бронхіальній астмі, інфекціях (гострих та
хронічних), при загостреннях, аутоімунних
захворюваннях (особливо при ревматоїдному
артриті). Знижується JgМ при первинних та
вторинних імунодефіцитах.
Імуноглобулін G. Норма: 6,0-17,6 г/л.
Кількість JgG підвищується в крові при
алергіях, аутоімунних захворюваннях,
перенесених у минулому інфекціях.
Зниження вмісту JgG відбувається за
первинних та вторинних імунодефіцитах.
23Тести другого рівня – глибший аналіз стану імунної системи
проводять за допомогою аналітичних методів: методи оцінки
функціональної активності Т-і В-лімфоцитів, фагоцитів,
допоміжних клітин, природних кілерів, компонентів системи
комплементу та ін.
тести імунофенотипування для визначення відносного та
абсолютної кількості популяцій та субпопуляцій Т-, В-, NK-лімфоцитів;
активаційні маркери лімфоцитів;
оцінка різних етапів фагоцитозу та рецепторного апарату
фагоцитарних клітин;
визначення основних класів та підкласів імуноглобулінів;
циркулюючі імунні комплекси;
визначення концентрації компонентів комплементу у сироватці крові
(С3, С4, С5, С1-інгібітор);
функціональна активність різних субпопуляцій лімфоцитів;
оцінка проліферативної активності Т-і В-лімфоцитів;
дослідження інтерферонового статусу;
шкірні проби і т.д.
24Усі перелічені вище норми
показників імунного статусу можуть
дещо відрізнятись у різних
імунологічні лабораторії. Це
залежить від методики діагностики та
використовуваних реактивів. Але імунна
система, як і будь-яка інша система
організму, може мати розлади в
будь-яких ланках. Так виникають
імунодефіцити.
25Слід особливо наголосити, що повноцінний аналіз
імунограми можливий тільки в комплексі з клінічним
станом та анамнезом пацієнта.
Відсутність характерних зрушень в імунограмі при
виражених клінічних симптомівслід рахувати
атиповою реакцією імунної системи, що є
обтяжливою ознакою захворювання.
Отримані дані пацієнта порівнюються із середніми
значеннями для даного аналіту, отриманими в регіоні
проживання пацієнта. Середньостатистичні показники
різняться залежно від регіону та підпорядковуються
кліматогеографічним умовам, екологічній обстановці,
умов життя.
Необхідно також враховувати вік пацієнта та циркадні.
ритми.
12.3. Імунний статус та його оцінка
Імунний статус - це структурний та функціональний стан імунної системи індивідуума, що визначається комплексом клінічних та лабораторних імунологічних показників.
Таким чином, імунний статус (син. імунний профіль, імунореактивність) характеризує анатомо-функціональний стан імунної системи, тобто її здатність до імунної відповіді на певний антиген Наразічасу.
Наявність у людини імунної системи автоматично має на увазі його здатність до імунної відповіді, але сила і форма імунної відповіді на той самий антиген у різних людей можуть варіювати в широких межах. Надходження антигену в організм в однієї людини викликає переважно антитілоутворення, в іншого - розвиток гіперчутливості, у третього - в основному формування імунологічної толерантності, і т. д. Імунна відповідь на той самий антиген у різних осіб може варіювати не тільки за формою, але і за силою, тобто за ступенем вираженості, наприклад, за рівнем антитіл, стійкістю до інфекції та ін.
По імунореактивності розрізняються не тільки окремі індивідууми, але в однієї і тієї ж людини імунореактивність може коливатися в різні періодийого життя. Так, імунний статус дорослої дитини, особливо новонародженого чи першого року життя, коли імунна система ще функціонально незріла, істотно відрізняється. У дітей легше індукувати імунологічну толерантність, у них нижче за титри сироваткових антитіл при імунізації. Імунний статус молодої та літньої людини також різний. Це частково пов'язано зі станом тимусу, який розглядається як « біологічний годинникімунної системи. Вікова інволюція тимусу веде до повільного згасання Т-клітинних реакцій у міру старіння, зниження здатності до розпізнавання «свого» та «чужого», тому в старості, зокрема, вища частота злоякісних новоутворень. З воз-
ростом наростає також частота виявлення аутоантитіл, у зв'язку з чим старіння іноді розглядається як хронічно поточна аутоагресія.
Імунний статус схильний не тільки до вікових, а й добових коливань залежно від біоритму. Ці коливання обумовлені змінами гормонального фонута іншими причинами. Таким чином, в оцінці імунного статусу слід враховувати значну індивідуальну варіабельність імунологічних показників навіть у нормі.
Імунна система філогенетично належить до молодих (поряд з нервовою та ендокринною) і дуже лабільних до різних зовнішніх впливів. Практично будь-який, навіть незначний, зовнішній вплив на організм людини веде до зміни стану його імунної системи. На імунний статус впливають такі фактори:
клімато-географічні;
соціальні;
екологічні (фізичні, хімічні та біологічні);
«медичні» (вплив лікарських речовин, оперативні втручання, стрес і т. д.).
Серед клімато-географічних факторів на імунний статус впливають температура, вологість, сонячна радіація, довжина світлового дня та ін. Наприклад, фагоцитарна реакція та шкірні алергічні проби менш виражені у жителів північних регіонів, ніж у жителів півдня. Вірус Епштейна-Барру людей білої раси викликає інфекційне захворювання – мононуклеоз, у осіб негроїдної раси – онкопатологію (лімфома Беркітта), а у осіб жовтої раси – зовсім іншу онкопатологію (назофарингеальна карцинома), причому лише у чоловіків. Жителі Африки менш схильні до захворювання на дифтерію, ніж європейське населення.
До соціальних факторів, що впливають на імунний статус, відносяться харчування, житлово-побутові умови, професійні шкідливості тощо.
імуноглобулінів, для побудови імунокомпетентних клітин та їх функціонування. Особливо важливо, щоб у раціоні були присутні незамінні амінокислоти та вітаміни, особливо А та С.
Значний вплив на імунний статус організму надають житлово-побутові умови. Проживання в поганих житлових умовах веде до зниження загальної фізіологічної реактивності, відповідно іммунореактивності, що нерідко супроводжується підвищенням рівня інфекційної захворюваності.
Великий вплив на імунний статус мають професійні шкідливості, оскільки людина проводить на роботі значну частину свого життя. До виробничих факторів, які можуть надавати несприятливий вплив на організм і знижувати імунореактивність, відносять іонізуючу радіацію, хімічні речовини, мікроби і продукти їхньої життєдіяльності, температуру, шум, вібрацію тощо. буд.
Несприятливий вплив на імунний статус мають солі важких металів, ароматичні, алкілуючі сполуки та інші хімічні речовини, у тому числі миючі засоби, дезінфектанти, пестициди, отрутохімікати, які широко застосовуються в практиці. Таким професійним шкідливістю схильні працівники хімічних, нафтохімічних, металургійних виробництв та інших.
Несприятливий впливом геть імунний статус організму надають мікроби і продукти їх життєдіяльності (найчастіше білки та його комплекси) у працівників біотехнологічних виробництв, що з виробництвом антибіотиків, вакцин, ферментів, гормонів, кормового білка та інших.
Такі фактори, як низька або висока температура, шум, вібрація, недостатня освітленість, можуть знижувати імунореактивність, опосередковано впливаючи на імунну систему через нервову та ендокринну системи, які перебувають у тісному взаємозв'язку з імунною системою.
Глобальна дія на імунний статус людини надають екологічні фактори, насамперед, забруднення довкіллярадіоактивними речовинами (відпрацьованим паливом з ядерних реакторів, виток радіонуклідів з реакторів при аваріях), широке застосування пестицидів у сільському господарстві, викидами хімічних підприємств та автотранспорту, біотехнологічних виробництв.
На імунний статус впливають різні діагностичні та лікувальні медичні маніпуляції, лікарська терапія, стрес. Необґрунтоване та часте застосування рентгенографії, радіоізотопного сканування може впливати на імунну систему. Імунореактивність змінюється після травм та хірургічних операцій. Багато лікарських препаратів, у тому числі антибіотики, здатні надавати побічну імунодепресивну дію, особливо при тривалому прийомі. Стрес призводить до порушень у роботі Т-системи імунітету, діючи насамперед через ЦНС.
Незважаючи на варіабельність імунологічних показників у нормі, імунний статус можна визначити шляхом постановки комплексу лабораторних тестів, що включають оцінку стану факторів неспецифічної резистентності, гуморального (В-система) та клітинного (Т-система) імунітету.
Оцінка імунного статусу проводиться у клініці при трансплантації органів та тканин, аутоімунних захворюваннях, алергіях, для виявлення імунологічної недостатності при різних інфекційних та соматичних захворюваннях, для контролю ефективності лікування хвороб, пов'язаних з порушеннями імунної системи. Залежно від можливостей лабораторії оцінка імунного статусу найчастіше базується на визначенні комплексу наступних показників:
загального клінічного обстеження;
стан факторів природної резистентності;
гуморального імунітету;
клітинного імунітету;
додаткові тести.
При загальному клінічному обстеженнівраховують скарги пацієнта, анамнез, кліні-
ні симптоми, результати загального аналізу крові (включаючи абсолютну кількість лімфоцитів), дані біохімічного дослідження.
Знайомство лікаря з пацієнтом починається, як правило, з ознайомлення з його паспортними даними (вік) і скаргами, що пред'являються. Вже на цьому етапі лікар може дізнатися про професію та стаж роботи пацієнта (наявність професійних шкідливостей). З скарг, що висловлюються, слід звернути увагу на рецидивну опортуністичну інфекцію, алергію.
При огляді хворого звертають увагу на чистоту шкірних покривів та слизових оболонок, на яких можна виявити прояви опортуністичних інфекцій, алергії.
При пальпації та перкусії приділяють увагу стану центральних (тимус) та периферичних (лімфатичні вузли, селезінка) органів імунної системи, їх розмірам, спаяності з навколишніми тканинами, хворобливості при пальпації.
У процесі перкусії та аускультації фіксують симптоми, характерні для опортуністичних інфекцій при ураженні внутрішніх органів.
Закінчується клінічний розділ обстеження загальним аналізом крові, що дає уявлення про стан імунокомпетентних клітин (абсолютна кількість лімфоцитів, фагоцитів).
При оцінці стану факторів природної резистентностівизначають фагоцитоз, комплемент, інтерфероновий статус, колонізаційну резистентність. Функціональну активність фагоцитів визначають за їх рухливістю, адгезією, поглинанням, дегрануляцією клітин, внутрішньоклітинним кілінгом і розщепленням захоплених частинок, утворенням активних форм кисню. З цією метою використовують такі тести, як визначення фагоцитарного індексу, НСТ-тест (нітросиній тетразолій), хемілюмінісценцію та ін. Стан системи комплементу визначають реакції гемолізу (результат враховують по 50%-му гемолізу). Інтерфероновий статус виявляють шляхом титрування на культурі клітин рівня інтер-
ферону у сироватці крові. Колонізаційну резистентність визначають за ступенем дисбіозу різних біотопів організму (найчастіше товстої кишки).
Гуморальний імунітетвизначають за рівнем імуноглобулінів класів G, M, A, D, Е в сироватці крові, кількості специфічних антитіл, катаболізму імуноглобулінів, гіперчутливості негайного типу, показнику В-лімфоцитів в периферичної крові, бластгрансформації В-лімфоцитів під дією В-клітинних мітогенів та інших тестів
Для визначення концентрації імуноглобулінів різних класів у сироватці крові зазвичай використовують радіальну імунодифузію по Манчіні. Титр специфічних антитіл (ізогемаглютиніни груп крові, антитіла, що утворюються після вакцинації, природні антитіла) у сироватці визначають у різних імунологічних реакціях (аглютинація, РПГА, ІФА та інші тести). Для визначення катаболізму імуноглобулінів використовують радіоізотопні мітки. Число В-лімфоцитів у периферичній крові встановлюють шляхом визначення специфічних рецепторів на клітинах за допомогою моноклональних антитіл (кластерний аналіз) або реакції розеткоутворення (ЕАС-РОК еритроцити в присутності антитіл і комплементу утворюють розетки з В-лімфоцитами). Функціональний стан В-лімфоцитів визначають реакції бластгрансформації шляхом стимуляції клітин мітогенами, такими як туберкулін, лаконас та ін. При оптимальних умовах культивування В-лімфоцитів з мітогенами показник трансформації в бласти може досягати 80%. Підрахунок бластів проводять під мікроскопом, з використанням спеціальних гістохімічних методів забарвлення або за допомогою радіоактивної мітки - за включенням в ДНК клітини тимідину, міченого тритієм.
Стан клітинного імунітетуоцінюють за кількістю Т-лімфоцитів, а також субпопуляцій Т-лімфоцитів у периферичній крові, бласттрансформації Т-лімфоцитів під дією Т-клітинних мітогенів, визначенням гормонів тимусу, рівнем секретованих цитокінів, а також постановкою шкірних проб з алергенами. Для постановки шкірних алергічних пробвикористовуються антигени, до яких у нормі має бути сенсибілізація, наприклад проба Манту з туберкуліном. Здатність орга-
нізму до індукції первинної імунної відповіді може дати контактна сенсибілізація динітрохлорбензолом.
Для визначення числа Т-лімфоцитів у периферичній крові використовують реакцію розеткоутворення Е-РОК, оскільки еритроцити барана утворюють з Т-лімфоцитами спонтанні розетки, а для визначення числа субпопуляцій Т-лімфоцитів – реакцію розеткоутворення ЕА-РОК. Реакції розеткоутворення використовують у зв'язку з тим, що на мембрані Т-хелпера є рецептор до Fc-фрагменту імуноглобуліну М, а на мембрані Т-супресора - рецептор до Fc-фрагменту імуноглобуліну G, тому Т-хел-пери утворюють розетки з еритроцитами, пов'язаними з антиеритроцитарними антитілами класу IgM, супресори утворюють розетки з еритроцитами, пов'язаними з антиеритроцитарними антитілами класу IgG. Однак реакції розеткоутворення для диференціації Т-лімфоцитів поступилися місцем більш точному та сучасному методу визначення популяцій та субпопуляцій Т-лімфоцитів – кластерному аналізу, заснованому на використанні моноклональних антитіл до рецепторів лімфоцитів. Після визначення числа субпопуляцій Т-лімфоцитів розраховують співвідношення хелперів та супресорів, тобто Т4/Т8 лімфоцитів, яке в нормі становить приблизно 2.
Бласттрансформацію Т-лімфоцитів, тобто їх функціональну активність, визначають шляхом стимуляції Т-клітинними мітогенами, такими як кон-канавалін А або фітогемагглютінін. Під впливом мітогенів зрілі лімфоцити трансформуються у лімфобласти, які можна підрахувати під мікроскопом або виявити за радіоактивною міткою.
Для оцінки стану функції тимусу найчастіше застосовують визначення рівнів al1-тимозину і тимуліну, що є відображенням функції епітеліальних клітин строми тимусу.
Для визначення рівня секретованих імуноцитокінів (інтерлейкіни, мієлопептиди та ін.) використовують імуноферментні методи, засновані на застосуванні моноклональних антитіл до двох різних епітопів цитокіну. З цією метою можна застосовувати реакцію гальмування міграції лейкоцитів.
В якості додаткових тестівдля оцінки імунного статусу можна використовувати такі тести, як визначення бактерицидності сироватки крові, титрування С3-, С4-компонентів комплементу, визначення вмісту С-реактивного білка в сироватці крові, визначення ревматоїдних факторів та інших аутоантитіл.
Таблиця 12.1. Тести для оцінки імунного статусу
|
Тести 1-го рівня |
Тести 2-го рівня |
|
1. Визначення кількості, морфології Т-і В-лімфоцитів у периферичній крові (абс. та %) |
1. Гістохімічний аналіз лімфоїдних органів |
|
2. Кластерний аналіз або ЕАС-розеткоутворення |
2. Аналіз поверхневих маркерів мононуклеарних клітин з використанням моноклональних антитіл |
|
3. Визначення сироваткових імуноглобулінів класів М. (J, A, D, Е |
3. Бластгрансформація В і Т-лімфопітів |
|
4. Визначення фагоцитарної активності лейкоцитів |
4. Визначення цитотоксичності |
|
5. Шкірні алергічні гести |
5. Визначення активності ферментів, асоційованих з імунною недостатністю |
|
6. Рентгенографія та рентгеноскопія лімфоїдних органів, а також інших внутрішніх органів (насамперед легень) залежно від клінічних показань |
6. Визначення синтезу та секреції цитокінів |
|
7. Визначення гормонів тимусу |
|
|
8. Аналіз респіраторного вибуху фагоцитів |
|
|
9. Визначення компонентів комплементу |
|
|
10. Аналіз змішаних клітинних культур |
Таким чином, оцінка імунного статусу проводиться на підставі постановки великої кількості лабораторних тестів, що дозволяють оцінити стан як гуморальної та клітинної ланок імунної системи, так і факторів неспецифічної резистентності. Очевидно, що деякі з тестів складні у виконанні, вимагають дорогих імунохімічних реагентів, сучасного лабораторного обладнання, а також високої кваліфікації персоналу, у зв'язку з чим вони здійснені обмеженою кількістю лабораторій. Тому за рекомендацією Р. В. Петрова всі тести поділені на дві групи: тести 1-го та 2-го рівня. Тести 1-го рівня можуть бути виконані у будь-якій клінічній імунологічній лабораторії первинної ланки охорони здоров'я, вони використовуються для первинного виявлення осіб з явно вираженою імунопатологією. Для більш точної діагностикивикористовуються тести 2-го рівня. Перелік тестів 1-го та 2-го рівня представлений у табл. 12.1.
| " |
Loading...