ПРЕПАРАТИ
ОЦІНКА НОВОЇ ІФА ТЕСТ-СИСТЕМИ
«Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ»
12Жираковська Є.В.,3Ігнатьєв Г.М., 3Індікова І.М., 12Тікунова Н.В.
1 ФГУН ДНЦ СБ «Вектор» Росспоживнагляду, п. Кольцове, Новосибірська обл.;
2 Інститут хімічної біології та фундаментальної медицини, Новосибірськ;
3 Державний інститутстандартизації та контролю медичних біологічних препаратівім. Л.А. Тарасевичаг Москва
Наводяться результати випробувань чутливості, специфічності та відтворюваності нового набору реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ», розробленого в ЗАТ «Вектор-Бест» (Новосибірськ). Отримані дані дозволяють прогнозувати діагностичну достовірність результатів при використанні даної тест-системи виявлення антигену ротавіруса групи А в клінічному матеріалі.
Ключові слова: ІФА тест-система, ефективність, ротавірус А
Ротавіруси групи А (родина Reoviridae, рід Rotavirus) є найбільш поширеною причиною важкого гастроентериту у дітей молодшого вікув усьому світі. Нерідко хворіють і дорослі з ослабленим імунітетом. Ротавірусна інфекція(РВІ) є висококонтагіозним захворюванням з множинними шляхамипоширення. Джерелом інфекції служить людина з маніфестною або безсимптомною формоюзахворювання, а також вірусоносій. Серед дітей та дорослих РВІ може виявлятися у вигляді спорадичних випадків, локальних групових захворювань, спалахів та має повсюдне поширення. Фекально-оральний механізм передачі цієї інфекції реалізується харчовим (молоко та молочні продукти, дитяче харчування), водним та контактно-побутовим шляхами .
Постановка діагнозу ротавірусного гастроентериту за клінічною картиною, особливо при спорадичній захворюваності, становить певну складність, оскільки характерні для цієї інфекції симптоми мало відрізняються від симптомів інших гострих кишкових інфекцій (ГКІ) різної етіології. Диференційна діагностикау хворих на ротаві-русний гастроентерит проводиться як з харчовими токсикоінфекціями, так і з іншими ОКИ вірусною (норовіруси, астровіруси, аденовіруси, коронаві-руси, ентеровіруси Коксакі та ECHO) та бактеріальною (сальмонельоз, дизентерія, холера, ієрсиніоз, умовно-патогенні мікроорганізми) етіології. На жаль, не у всіх спеціалізованих лікувальних закладахРФ проводять діагностику ротавірусної інфекції.
Діагностичні методипри РВІ спрямовані на виявлення цілісних віріонів, вірусного антигену або вірусоспецифічної РНК у фекаліях. Перспективним підходом до прямого виявлення вірусів як у клінічному матеріалі, так і в об'єктах довкілля, є метод зворотної транскрипції - лімеразною ланцюгової реакції(ВІД-ПЛР) . У Останніми рокамистворюються тест-системи, що базуються на сучасних наукових розробках з комбінуванням різних методівдетекції ротавірусів: мультиплексна ПЛР з гібридизаційно-флуоресцентною детекцією продуктів ампліфікації «по кінцевої точки»; імуно-ПЛР (IPCR) «по кінцевій точці» з детекцією в реальному часі; кількісна ВІД-ПЛР з детекцією в реальному часі. У науково-дослідних лабораторіях для швидкого виявлення ротавірус використовують електронну мікроскопію. Проте всі перераховані вище методи є досить трудомісткими і вимагають наявності дорогих приладів і висококваліфікованого персоналу. Тому під час проведення лабораторної діагностикиу стаціонарах та в амбулаторних умовперевага надається методам, заснованим на виявленні вірусного антигену у фекаліях за допомогою імуноферментного аналізу (ІФА) з моно-і полікпональними антитілами до ротавірусів. Цей метод доступний для практичних лабораторій, простий у постановці та дозволяє досить швидко отримати результат.
Мета справжньої роботи - вивчення діагностичної ефективності нового набору реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ», розробленого в ЗАТ «Вектор-Бест», м. Новосибірськ.
^Вересень-грудень
матеріали та методи
Матеріалом дослідження були зразки фекалій дітей раннього вікуз діагнозом ГКИ та без клінічних проявів кишкової інфекції, що знаходилися на стаціонарне лікуванняу відділеннях кишкових інфекцій та респіраторних інфекційМУЗ «Дитяча міська клінічна лікарня№3» Новосибірська. Зразки фекалій збирали в одноразові стерильні пластикові контейнерив обсязі 2-3 мл при надходженні пацієнтів у відділення стаціонару і зберігали при -20 °С протягом 15 діб. Більше тривале зберіганняматеріалу здійснювалося за - 70 °С.
У роботі було використано попередньо протестовану на наявність збудників ОКІ панель із 104 зразків фекалій. З них:
30 зразків, у яких методами ІФА та ВІД-ПЛР були виявлені лише ротавіруси групи А; гено-типування методом ОТ-ПЛР показало, що фекальні проби містили ротавіруси генотипу PG1 (18 зразків), PG2 (4 зразки), PG3 (3 зразка), PG4 (2 зразка), PG4 (1 зразок), PG9 (1 зразок) , PG3 (1 зразок);
14 зразків, у яких методом ВІД-ПЛР були виявлені тільки норовіруси другого генотипу, що було підтверджено визначенням нуклеотидної послідовності 5" - області гена капсиду, розташованого на геном норовірусів в районі 5085-5485 h.;
15 зразків, у яких методом ОТ-ПЛР були виявлені тільки астровіруси, що було підтверджено визначенням нуклеотидної послідовності 5" - області гена капсиду, розташованого на геномі астровірусів у районі 4526 - 4955 р.; 15 зразків, в яких методом ПЛРбули виявлені лише аденовіруси;
30 зразків фекалій (контроль) від дітей без клінічних проявів кишкової інфекції, госпіталізованих до респіраторного відділення лікарні; попередній аналізне виявив у цих зразках перерахованих вище вірусних патогенів.
Тестування зразків на наявність або відсутність рота-, норо-, астро- та аденовірусів проводили методом ВІД-ПЛР з використанням зареєстрованих в РФ комерційних наборів "АмпліСенс Adenovirus - 462", "АмпліСенс Rotavirus - 290" (виробництва ФГУН ЦНДІ епідеміології, РФ). Дослідження зразків проводили відповідно до інструкцій із застосування відповідних наборів реагентів у період терміну придатності. Позитивні за наявністю ротавіруса зразки були генотиповані методом ОТ-ПЛР. Визначення наявності або відсутності антигену ротавіруса також проводили методом ІФА з використанням комерційної тест-системи IDEIA Rotavirus, (DakoCytomation, Великобританія) відповідно до інструкції до набору.
При проведенні випробувань набору реагентів «Рота-вірус-антиген-ІФА-БЕСТ» усі вищезгадані зразки (104) були зашифровані та триразово протестовані досліджуваним набором. Після завершення випробувань зразки були дешифровані та результати проаналізовані.
Результати та обговорення
Чутливість комплекту реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ» оцінювали за кількістю збігів позитивних результатів (в %) тестування зразків за допомогою тест-системи та препаратів порівняння. При цьому було виявлено, що при використанні комплекту реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ» усі 30 зразків із підтвердженою наявністю ротавіруса А були позитивними (табл. 1). Отже, чутливість досліджуваного комплекту реагентів для виявлення ротавірусів А становила 100 %. Слід зазначити, що до складу панелі увійшли зразки з сімома різними генотипами ротавірусів, і всі вони були успішно виявлені комплектом реагентів "Рота вірус - антиген - І ФА-БЕСТ".
Специфічність тест-системи оцінювали за кількістю збігів негативних результатів(в %) тестування зразків за допомогою випробуваної тест-системи зданими попередніх досліджень. Для оцінки специфічності у панель, що використовується, були включені 30 зразків, в яких вірусні патогени виявлені не були, а також 14 зразків, в яких були виявлені тільки норовіруси другого генотипу за допомогою методу ОТ-ПЛР, 15 зразків, в яких методом ОТ-ПЛР були виявлені лише астровіруси; 15 зразків, у яких методом ПЛР було виявлено лише аденовіруси. Було визначено, що у 69 із 74 негативних зразків значення оптичних щільностей при детекції набором реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ» на присутність ротавіруса А не перевищували фонових, тобто значень, отриманих в результаті вимірювання оптичної щільності в контрольних негативних зразках. Два зразки, що містять астровіруси, один зразок - норовірус другого генотипу, один зразок -аденовірус і два зразки, в яких жоден з перелічених вище вірусних патогенів виявлений не був, продемонстрували позитивні показники оптичної щільності. Слід зазначити, що у зразках, у яких жоден із вірусних патогенів раніше не був виявлений, позитивні сигнали були зареєстровані лише в одному з повторних досліджень (табл. 2). Таким чином, специфічність комплекту реагентів "Ро-тавірус-антиген-ІФА-БЕСТ" склала 93,2%.
У ході проведення випробувань оцінювали відтворюваність результатів, отриманих під час використання випробуваного комплекту реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ» на клінічному матеріалі - всі зразки були досліджені триразово в різних дослідах для визначення варіювання результатів. Майже завжди були отримані подібні результати: тест-система виявляла все негативні і позитивні спроби однаково. Виняток склали дві проби, в яких раніше не було виявлено жодного з вірусних патогенів: в одному з повторів для обох зразків значення оптичної щільності перевищили ОПкрит. Слід зазначити, що перевищення було незначним (табл. 2). Таким чином, відтворюваність результатів становила 98,8%.
Результати проведених випробувань показали, що випробуваний набір реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ» за своєю діагностичною ефективністю -специфічності, чутливості та відтворюваності - порівняємо з наявними в РФ діагности-
ними тест-системами, що дозволяє прогнозувати діагностичну достовірність результатів при використанні дослідженого набору реагентів «Ро-тавірус-антиген-ІФА-БЕСТ» для виявлення антигену ротавіруса групи А в клінічному матеріалі.
Література
1. Богомолов Б.П. // "Інфекційні захворювання: невідкладна діагностика, лікування, профілактика». – М., Нью-діамед. – 2007.
2. Васильєв Б.Я., Васильєва Р.І., Лобзін Ю.В.// «гострі кишкові захворювання. Ротавіруси та ротаві-русна інфекція». – С.-Пб., Лань. – 2000.
3. Жираковська Є.В., Тікунов А.Ю., Боднєв О.А., та ін// «БІОпрепарати». – 2008 – № 2. – с. 15 – 18.
4. Жираковська Є.В., Малєєв В.В., Боднєв A.C. та ін // ЖМЕІ - 2008 - №.4. - с. 12 – 16.
5. Ігнатюк Т.Є., Голутвін І.А., Насікан Н.С., та ін // «Питання вірусології». – 2003. – т. 48. – №6.- с. 1721.
6. Новікова H.A., Федорова О.Ф., Єпіфанова Н.В., Чуп-рова А.Б. // «Питання вірусології». – 2007. – т.52. -№ 3 – с. 19-23.
7. Подколзін А.Т., Мухіна A.A., Шипулін Г.А., та ін//
"Інфекційні захворювання". – 2004. – т. 2. – № 4. – с. 85-91.
8. Подколзін А.Т., Фенське Є.Б., Абрамичева Н.Ю., та ін// «Терапевтичний архів». – 2007. – т. 79. – № 11. –с. 10-16.
9. Сергєвнін В.І., Вольдшмідт Н.Б., Сармометов Є.В., та ін // «Епідеміологія та інфекційні захворювання». -2004. - №6.-с. 17-20.
10.Сергевнін В.І., Вольдшмідт Н.Б., Сармометов Є.В., та ін. // Гігієна та санітарія. – 2007. – № 1. – с. 56 -58.
11. Arcangeletti М.С., De Conto Е, Pinardi F., at al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. – 2005. -V. 76 (3). - P. 165-170.
12.Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., at al. // Epidemiol. Infect. - 2008. V. 136 (3). – P. 399-405.
13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. //J. Virol. Методи. -2006. - V. 137(2). – P. 280 – 286.
14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., at al. //J. Clin. Microbiol. – 2008. V. 46 (2). – P. 462 – 469.
15. Schets F.M., van Wijnen JH, Schijven JF, at al. //Appl. Environ. Microbiol. – 2008. – V. 74 (7). – P. 2069 – 2078.
16. Stockman LJ, Staat M.A., Holloway M., at al. // J. Clin. Microbiol. – 2008. – V. 46 (5). – P. 1842 – 1843.
Оцінка чутливості та специфічності комплекту реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ»
Таблиця 1
№п/п Кількість зразків Результати детекції препаратами порівняння IDEIA Rotavirus Астро-ПЛР Hopo 2-ПЛР Адено-ПЛР Результати детекції набором «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ»
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
Оцінка специфічності комплекту реагентів «Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ>-
Таблиця 2
ПЛР АмпліСенс
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus
0,443 1,306 0,676 0,418
Ротавірус-антиген-ІФА-БЕСТ ЗАТ «Вектор-Бест»
ОПКрит ОПКрит ОПКрит
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
£Вересень
Грудень 2009
АмпліСенс
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation ОПКрит = 0,150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
Ротавірус-
ОПКрит 0,250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
антиген-ІФА-БЕСТ «Вектор-Бест»
ОПКрит ОПКрит 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus norovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO «BeKTop-EecT»
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
Грудень 2009
ПЛР АмпліСенс
adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus заперечень заперечень заперечень заперечень заперечень заперечень... заперечень заперечень заперечень заперечень... заперечень заперечень заперечень заперечень заперечень заперечень заперечень заперечень заперечень заперечень...
IDEIA Rotavirus DakoCytomation ОПКрит = 0,150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Ротавірус - антиген-ІФА-БЕСТ ЗАТ «Вектор-Бест»
ОПКрит О П Кріт ОПКрит
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
Лікування гельмінтозів у дітей вкрай важливо, оскільки наслідками цього можуть бути відставання у розвитку фізичному та розумовому, патологічні процеси внутрішніх органіві систем, навіть летальний кінець. Крім того, гельмінтні інвазії є дуже заразними, тому так легко поширюються в дошкільних та шкільних закладах. Тому зрозуміло, наскільки важливо своєчасне лікуваннягельмінтозу у дітей.
Перші ознаки гельмінтів у дітей
Глисти - це умовно-патогенні агенти людського організму, хробаки, для яких людина є остаточним господарем До того ж у цьому питанні вік господаря не відіграє жодної ролі, різні видигельмінтози можуть спостерігатися як у дітей, так і у дорослих пацієнтів.
Чим небезпечний гельмінтоз для дитини?
Як уже говорилося раніше, гельмінти у дітей можуть викликати серйозні захворюваннята патології, внаслідок чого сповільнюється розумове та фізичний розвиток. Можливі ускладненняу кожного виду гельмінтозу можуть бути зовсім різні, наприклад:
Тому дитячі гельмінтози вимагають ще більшої уваги, своєчасної допомоги лікаря, тривалого спостереження у фахівця, профілактики.
Основні симптоми у дітей
Симптоми гельмінтозу у дитини можуть бути різні, залежно від виду хробаків:
1. Аскариди відразу ж виявляють себе алергічною реакцією, гарячковим станом та нудотою у дитину. Перші появи зазвичай яскраві, але швидко затихають. Після цього можуть спостерігатися такі симптоми: 
- коліки та дисбактеріоз та новонароджених;
- у малюків до 1 року біль у ділянці пупка, проблеми зі стільцем, алергія та діатез;
- у старших діток проблеми зі сном, неспокійна поведінка, кошмари;
- для дітей 3-7 років характерні нудота, гарячковий стан, покашлювання та біль у животі, висип.
2. Ентеробіоз, збудником якого є гострики, виявляє себе стертою клінічною картиною. І лише через 1 місяць можна помітити такі симптоми:
- у новонароджених запалення, набряклість та почервоніння ануса, відмова від їжі, плач ночами, відсутність апетиту;
- дітям до року властиві такі ж симптоми, а також сильний свербіжанусу вночі (з 23.00 до 1.00 год.), дівчатка страждають від запалення статевих органів;
- у старших дітей болі в ділянці живота біля пупка, порушення сну, свербіж в ділянці попи.
3. Симптоми токсокарозу важко розпізнати, крім невеликий температуритіла та алергічних реакцій(висип, кропив'янки, свербіж та набряк). Після зараження може спостерігатися кашель, що надалі викликає пневмонію або бронхіт, особливо у найменших пацієнтів. 
Трихінельоз припускає слабовиражені ознаки у новонароджених дітей, в іншому випадку спостерігаються такі ознаки:
- гарячковий стан;
- набряклість особи;
- м'язові болі;
- алергічні реакції;
- у дітей віком від 5 років і старше можуть спостерігатися збільшені мигдалики, селезінка, висип та біль у горлі.
Найважче діагностувати симптоми гельмінтозу у дітей 2 років і молодше, оскільки дитина не може пояснити свою поведінку та стан. Тому при будь-яких нетипових проявах та поведінці дитини краще показати лікареві.
Що потрібно зробити насамперед?
Глисти, які були виявлені в калових масахдитини - це самий головна ознаказахворювання, після чого потрібно одразу ж звернутися за допомогою до лікаря. Жодне лікування гельмінтів може бути успішним без правильно проведеної діагностики. Методи обстеження в даному випадкуповинні бути комплексними, що включають такі процедури: 
- взяття зіскрібка з анального отвору;
- вивчення калу дитини;
- аналіз крові;
- біопсія м'язів у поодиноких випадках при підозрі на трихінельоз;
- серологічне дослідження крові;
- рентген, УЗД, томографія;
- ІФА для виявлення антитіл у крові.
Методи лікування
Лікування гельмінтозу у дітей має бути комплексним, добре продуманим, розписаним з точними дозуваннями та періодичністю прийому препаратів. Це з тим, що з глистогінного ефекту застосовуються препарати з токсичними складовими, отже, нераціональне застосування може призвести до побічним ефектам. Крім цього в домашніх умовах доречно народне лікуванняцілющими рослинами.
Народні засоби
Сучасне лікування народними засобами таких захворювань для дітей передбачає 4 ефективні способи: 
Будь-який спосіб домашнього лікуванняпотрібно заздалегідь обговорити з лікарем. Потрібно пам'ятати, що до трав і народним засобампередбачені протипоказання як індивідуальної непереносимості.
Медикаментозне лікування
- При ентеробіозі та аскаридозі зазвичай використовують такі препарати, як Пірантел та Мебендазол. Прийом Пірантела доречний у дозі 10 мг речовини на кожний кілограм ваги від гостриків і 5 мг/кг від аскарид. Мебендазол приймають двічі на день по 50 мг діти 2-3 роки три дні поспіль, двічі по 100 мг три дні поспіль дітям старше 3 років, після 3 тижнів терапію повторюють.
- При токсокарозі призначають Мебендазол в іншій дозі - дітям 2 років і старше двічі на добу по 100 мг протягом 14-10 днів.
- Лікування трихінельозом приймає Мебендазол по 5 мг на кожен кілограм ваги, після чого дозу ділять на три прийоми на добу. Курс лікування становить 1 тиждень під суворим наглядом лікаря.
Профілактика гельмінтозів
- миття рук відразу ж після контактів з тваринами, після вулиці та пісочниць, відвідування туалету та перед їжею;
- вживання лише чистих продуктів;
- правильно проведена термічна обробкам'ясних та рибних продуктів;
- пиття кип'яченої води;
- дотримання особистої гігієни та санітарії;
- регулярна дегельмінтизація свійських тварин;
- проведення профілактичної дегельмінтизації у дітей віком від 2 років і старше.
Аналіз крові на токсокари
Особливості зараження людини токсокарозом
Рознощиками інфекції є собаки, рідше за кішку. Поширюються яйця токсокари з фекаліями бродячих собак. Опинившись на землі, у воді або затримуючись на шерсті тварини, вони різними способамизаносяться у здоровий організм.
Реакція на проникнення чужинця
З медичної статистики відомо, що дорослі люди рідше заражаються токсокарозом, якщо їх рід занять не потрапляє до групи ризику. У дітей шансів підхопити інфекцію значно більше.
Найбільш поширені симптоми при токсокарозі:
- Гарячка без ознак будь-якого захворювання.
- Підвищення температури.
- Біль у голові або животі, що наростають і загасають.
- Поява висипу на шкірі, що не піддається усуненню.
- Одутлість обличчя.
- Підвищення рівня еозинофілів у крові, виявлене за загального аналізу.
Щоб поставити точний діагноз, призначається імунологічний аналізна токсокари. Наявність білкових сполук у крові, що несуть у собі генетичну інформаціюгельмінта (антигени), провокує імунітет вироблення антитіл класу igg. Це і є першою ознакою зараження токсокарозом.
Попередня діагностика
Початковий етап анамнезу хворого має збірний характер. Перш ніж відправити пацієнта здавати аналіз крові на токсокароз, необхідно вивчити передісторію хвороби та зробити попереднє обстеження.
Первинна діагностика:
- Вивчення посилювальних обставин, які могли спровокувати зараження специфічна роботаз тваринами чи наявність домашнього вихованця, земляні роботиу потенційно небезпечній місцевості, ігри дітей у місцях вигулу собак.
- Фізикальний огляд хворого. Обстеження шкірних покривівна предмет підшкірної інвазії токсокарами, повік та очних яблукпальпація.
- Призначення розгорнутого аналізу крові. Під час зараження токсокарозом характерним є значне підвищення деяких показників – еозинофілів (70–80%), лімфоцитів, ШОЕ. Тоді як рівень гемоглобіну помітно падає.
- Взяття печінкових проб. При тяжкій інвазії позначається навантаження на печінку, яка проявляється сильним стрибком білірубіну.
Отримати пряме підтвердження інвазії токсокарами за допомогою нормальних аналізів (крові, копрограми, мазка) неможливо. Також неінформативно дуоденальне дослідження, оскільки утруднений мігруючий характер личинок.
Після отримання результатів попереднього обстеження, що вказують на можливе зараженнятоксокарами, та диференціювання передбачуваного діагнозу від захворювань із схожими ознаками, хворому призначається проходження ІФА на токсокароз.
Імуноферментний аналіз
Головною метою цього дослідження є підтвердження присутності токсокарів в організмі людини. Антитіла до цих гельмінтів виявляються у плазмі крові, тому її паркан роблять із вени.
Аналіз на токсокарі вимагає деякої підготовки:
- Не вживайте жирну та важку їжу за день до процедури.
- Не пийте солодкі, газовані та алкогольні напоїпротягом доби до відвідин лабораторії.
- Здавайте проби натще.
- Не вживайте лікарські засобиу попередній день і день, на який призначено аналіз.
Необхідно врахувати, що на цей інформативний спосіб виявлення інвазії можуть вплинути деякі обставини. Хибнопозитивний результатможе виявитися за наявності у пацієнта:
- Онкологічні захворювання.
- Туберкульозу легень.
- Тяжких патологій печінки.
- Аутоімунного синдрому.
- Антифосфоліпідного синдрому.
- Вагітності.
У цьому випадку отримати на 100% підтверджуючий аналіз не вдасться, тому що за перерахованих обставин захисна система також виробляє імуноглобуліни (антитіла). Необхідно провести додаткову діагностикута диференціювати токсокароз від перерахованих факторів.
Концентрація імуноглобулінів (титр) класу IgG досягає максимально можливого значеннячерез 2-3 місяці від початку інвазії. Чим важче інфікування, тим вищий цей показник.
Результати ІФА
Для встановлення діагнозу ретельно вивчається імуноферментний аналіз, отримані результати порівнюються з референсними значеннями. Нормою вважається титр антитіл 1:100 за індексу позитивності менше 0,9.
Чисельні значення титрів
Отримані результати можуть мати характер: негативний, позитивний, слабопозитивний або сумнівний. Кількість титрів АТ залежить від тяжкості інвазії та давності її виникнення.
Розшифровка аналізу:
- Титр АТ до 1:100 результат негативний. В організмі пацієнта личинок токсокар не виявлено.
- Титр АТ до 1:400 – результат слабопозитивний. У хворого спостерігається слабка інвазія або розвивається очна форма токсокарозу. У деяких випадках показник говорить про нещодавно перенесену інфекцію.
- Титр АТ до 1:600 – результат позитивний. Людина страждає клінічною формоюгельмінтозу, при виявленні якого потрібна негайна терапія.
- Титр АТ до 1:800 – результат позитивний. Говорить про важку інвазію прогресуючого характеру і високу частку ймовірності розвитку патологічного процесувнутрішніх органів.
За рідкісними винятками при дослідженні ІФА виявляється запущена формаінвазії з домішкою гельмінтозів іншого походження У цьому випадку сумарні антитіла можуть бути вище 1:800.
Коефіцієнт позитивності
При імуноферментний аналізна токсокароз із титром 1:400 – 1:600 для диференціювання інвазії від побічних факторів, отримані показники порівнюють із референсним значенням. Різницю між цими цифрами прийнято називати індексом чи коефіцієнтом позитивності.
Зазвичай, у бланку проведеного ІФА один показник стоїть навпроти іншого. Перший – це норма, другий може означати:
- До 0,9 результат негативний. Личинок токсокар не виявлено.
- 0,9-1,1 - результат сумнівний. І тут призначається повторна діагностика.
- 1,1-2,2 – результат слабко позитивний. Людина є носієм за слабкої інвазії.
- 2,2-4,2 – результат позитивний. Токсокароз середньої тяжкостірозвивається досить давно.
- Понад 4,4 – результат свідчить про пік глистної інвазіїабо нещодавно перенесений гельмінтоз.
КП при результаті 4,4 та виявленому підвищенні еозинофілії на 10% може говорити про розвиток очної форми токсокарозу та наявність антитіл на перехресні інвазії, сумарних до токсокарозу.
Імунна реакція та оптична щільність антитіл (коефіцієнт позитивності) залежать від ступеня зараженості токсокарами та місця їх локалізації. Найменший показник титр та КП дозволяє лише припустити відсутність гельмінтів, але не стверджувати про це.
Викладена інформація не може бути джерелом для самодіагностики або самолікування. Результати ІФА разом з попереднім обстеженнямможуть розповісти про наявність проблеми лише фахівцю. У лабораторії Інвітро діагностика крові проводиться з високою точністю, Результат аналізу супроводжується коментарями фахівців про коефіцієнт позитивності Це суттєво допомагає лікарю точніше поставити діагноз.
Кількість визначень 96 (48 у дублях)
Формат робочого планшета: стрипований 12х8, що ламається по 1 лунці.
Чутливість: 1,5 Од/мл.
Діапазон вимірів: 0-400 Од/мл.
Обсяг досліджуваного зразка - трохи більше 25 мкл.
Стандартизація умов проведення ферментативної реакції з хромогеном в шейкері, що термостатується, при 37ºС.
Склад набору:
1. Планшет стрипований 12 по 8 лунок, готовий до застосування – 1 шт.
2. Проби калібрувальні готові для використання (0-400 Од/мл) пофарбовані з різним ступенем інтенсивності залежно від концентрації – 6 флаконів.
3. Зразок контрольний – 1 флакон.
4. Кон'югат однокомпонентний, готовий для використання, що не вимагає розведення – 1 флакон.
5. Розчин для розведення сироваток – 1 флакон.
6. Субстрат хромогенний, однокомпонентний – розчин тетраметилбезідину плюс (ТМБ+) готовий для використання, що не вимагає розведення – 1 флакон.
7. Розчин буферний фосфатно-сольовий з твіном – 2 флакони.
8. Стоп-реагент, готовий до використання - 1 флакон.
9. Плівка для заклеювання планшета – 1 шт.
10. Трафарет для побудови калібрувального графіка – 1 шт.
11. Ванночка для реагенту - 2 шт.
12. Наконечники для піпетки на 5-200 мкл – 16 шт.
Упаковка планшета - пакет тика "зіп-лок".
Стабільність робочого розчину ФСТ-Т не менше ніж 5 діб при температурі +2...8°C.
Набір зберігати за температури +2...8°C. Термін придатності – 1 рік з дати виробництва.
Зареєстровано в Росздравнагляд.
Ведучі російські виробникиУ сегменті наборів реагентів для діагностики інфекцій: - ЗАТ "Вектор-Бест", м. Новосибірськ; – ТОВ «НВО Діагностичні системи», м. М.Новгород; - ЗАТ «Еколаб», м. Електрогорськ МО. В області наборів реагентів для діагностики немає інфекційних захворюваньта фізіологічних станів: - ТОВ «Алкор-Біо», м. Санкт-Петербург; - ЗАТ «Вектор-Бест», м. Новосибірськ; - ТОВ "Хема-Медика", м. Москва. У сегменті реагентів для лабораторної діагностики алергій: – ТОВ «Алкор-Біо», м. Санкт-Петербург; - ЗАТ «Вектор-Бест», м. Новосибірськ; - ТОВ «НВО Імунотекс», м. Ставрополь. Виробництво лабораторного обладнання: - ТОВ «Пікон, м.Москва
Оцінка ступеня можливого імпортозаміщення за номенклатурою тестів. Номенклатура аналітів, од. Дозволені до використання в РФСтупінь можливого імпортозаміщення Маркери інфекційних захворювань % Маркери неінфекційних захворювань та показники фізіологічних станів % Маркери алергії % Разом: %
Оцінка ступеня імпортозаміщення за обсягом ринку продукції для планшетного ІФА Сегменти ринку Обсяг ринку в РФ, млн.р. Обсяг продажу вітчизняних виробників, млн.р. Частка імпортозаміщення Маркери інфекційних захворювань % Маркери неінфекційних захворювань та показники фізіологічних станів % Маркери алергії % Обладнання50051% Разом: %
Оцінка ступеня імпортозаміщення за обсягом ринку продукції для імунохімічних методів в цілому Сегменти ринку Обсяг ринку в РФ, млн.р. Обсяг продажу вітчизняних виробників, млн.р. Частка імпортозаміщення Маркери інфекційних захворювань % Маркери неінфекційних захворювань та показники фізіологічних станів % Маркери алергії % Обладнання % Разом: %
Проблеми вітчизняних виробників у галузі: Метод ІФА застаріває. Відбувається поступове заміщення вітчизняних ІФ-реагентів на імпортні хемілюмінесцентні; Існуюча система держзакупівель стимулює або придбання найдешевших товарів, або унікальних за характеристиками імпортних виробів; Одна з основних причин недостатнього розвитку вітчизняних виробників автоматичного обладнання та локалізації виробництва імпортних виробів – митний адміністративний бар'єр; Основна проблема останнього часу – колапс системи державної реєстрації нової продукції РЗН. Допуск нової продукції ринку практично зупинено і закордонні виробники, які раніше зареєстрували довгими списками продовжують мати перевагу над вітчизняними; Основна причина технологічного відставання – неможливість отримати право виробляти сумісну продукцію до сучасного обладнання; Низький ступінь консолідації вітчизняних виробників та постійні цінові війни між собою не дають можливості розробляти передові продукти та конкурувати з провідними гравцями на рівних, у тому числі на зарубіжних ринках.
Пропозиції: У рамках ФКС запровадити безконкурсний порядок державних закупівель медичних виробів із подальшою позиційною публікацією. Визначення лімітів фінансування на основі середньоринкової ціни дасть певні переваги вітчизняним виробникам, дозволить обмежити споживання дорогих імпортних реагентів та контролювати ефективніше освоєння бюджетних коштів; Сприяти укрупненню та консолідації вітчизняних виробників з метою концентрації ресурсів на розробці сучасних продуктів та виходу на міжнародний ринок. Безконкурсний порядок держзакупівель швидко залишить над ринком лише реально конкурентоспроможні підприємства; Виділити гос.средства стимулювання, на принципах приватно-державногопартнерства, розроблення достатньої для забезпечення біологічної безпеки країни номенклатури тестів; Митні пільги мають бути на комплектуючі, а не готові вироби; Гармонізувати систему реєстрації з європейською, де медичні виробиз низьким рівнем потенційного ризикуреєструються виходячи з декларації відповідності.
Loading...