У всіх без винятку випадках утворення та зростання пов'язане з діяльністю гена типу HER2. Саме він відповідає за те, яка кількість білків буде виділена жіночому організмуу розвиток тканин молочної залози. Коли перероджуються перші здорові клітини на злоякісні, до рецепторів гена надходить інформація про те, що потрібно додатковий поділклітинного матеріалу.
Ген запускає програму нарощування додаткових тканин усередині грудей, хоча насправді цей клітинний матеріал буде використаний пухлиною для свого зростання та розвитку. Так, карцинома, по суті, обманює організм, і змушує його живити рак за рахунок своїх ресурсів.
Завдання фіш аналізу при раку молочної залози, якраз і полягає в тому, щоб виявити неправильну роботу гена HER2, і вжити відповідних заходів реагування щодо призначення адекватного медичного лікування.
Якщо своєчасно не провести фіш тест при раку молочної залози, то навіть у разі застосування в процесі лікування тих чи інших препаратів – це може призвести до того, що пухлина й надалі агресивно розвиватиметься, охоплюватиме нові тканини грудей. Це так звані наслідки неправильно призначеної терапії через відсутність об'єктивних даних про функціонування HER2 гена.
У процесі проходження фіш аналізу лікарем вводиться в кров пацієнтки спеціальні речовини, що містять елементи, що забарвлюють, які здатні візуалізувати картину хромосомних порушень. Таким чином, лікар здатний наочно побачити, а надалі вивчити генетичні аномалії у геномі жінки, що призвели до розвитку онкології грудей.
Якщо відхилення у роботі гена HER2 підтверджуються, то призначається відповідне лікування. Якщо ж ні, лікар за допомогою інших аналізів встановлює іншу причину розвитку РМЗ.
Ще одним важливою перевагоюФіш аналізу є те, що вже через пару днів пацієнт отримує комплексний звіт про генетичну схильність до розвитку того чи іншого онкологічного захворювання. За допомогою даного медичного тестування можна одночасно діагностувати патологію не лише молочної залози, а й усіх органів черевної порожнини.
Інформативне відео
Рак молочної залози (РМЗ) - поширений вид онкології і, на жаль, поки що не розроблено жодного способу терапії, що дає повну гарантію лікування. Тому найкращий вихід для хворого - профілактика та своєчасна діагностикаРМЗ. Фіш - аналіз при раку молочної залози - це найбільш сучасний метод дослідження, що дозволяє спрямувати лікування пацієнта найбільш вірним шляхом.
Незважаючи на величезний накопичений досвід у вивченні та лікуванні цього захворювання, медицина досі не в змозі вказати зовнішні фактори, що викликають злоякісну пухлину молочної залози Жоден із відомих канцерогенів не вдається достовірно пов'язати із виникненням цієї хвороби. Сучасні методидіагностики в цілому дають непогані результати та дозволяють з високою точністювизначити наявність чи відсутність захворювання та стадію розвитку. Проте чи всі вони дають вичерпну інформацію, що дозволяє точно призначити лікування.
- Загальний аналіз крові – перевіряється рівень лейкоцитів, швидкість осідання еритроцитів та гемоглобін. Перші два показники при онкології збільшуються, останній, навпаки, знижується. Однак цей аналіз дозволяє судити лише про наявність певних проблем в організмі. Поставити точний діагноз«рак молочні залозиз його допомогою не можна, особливо на ранньому етапі розвитку пухлини.
- Біохімія - визначає рівень ферментів та електролітів, що дозволяє судити про наявність метастазів. Однак ці дані не завжди є об'єктивними. Також це дослідження показує наявність у крові деяких онкомаркерів, які допомагають відстежити наявність ракової пухлинита її дислокацію.
- Спектральний аналіз дозволяє визначити наявність раку з ймовірністю понад 90%, у тому числі і на ранній стадії. Метод заснований на вивченні крові під інфрачервоним випромінюванням, що дозволяє визначити її молекулярний склад.
- Біопсія - проводиться шляхом забору зразка тканини з грудей та подальшого цитологічного аналізу, який визначає наявність ракових клітинта їх кількість, яка залежить від ступеня розвитку захворювання.
- Генетичний аналіз визначає схильність пацієнта до утворення раку грудей. Він проводиться шляхом виявлення у крові певних генів, які відповідають за передачу раку від покоління до покоління.
Однак найновішим і ефективним методомдослідження сьогодні є так званий FISH (фіш) тест. Розшифрування абревіатури у перекладі з англійської звучить як «внутрішньоклітинна флуоресцентна гібридизація».
Метод фіш – тестування є відносно новим – він використовується з 1980 року. Однак незважаючи на складність та високу ціну, він встиг заслужити позитивні відгукияк від лікарів, так і від пацієнтів, які завдяки йому успішно позбулися раку.
За зростання клітин молочної залози в людському організмівідповідає ген за назвою HER2. Назва в перекладі з англійської означає Людський естрогенний Рецептор - 2. У нормі рецептори цього гена виробляють HER2 - білок, який регулює поділ клітин залози. Ракова пухлина (зазвичай це карцинома) при зародженні «обманює» цей ген, змушуючи його нарощувати додаткову тканину, яка використовуватиметься пухлиною для свого розвитку. Ця аномалія проявляється приблизно 30% випадків і характеризується терміном «ампліфікація».
Таким чином, організм хворого сам допомагає розвиватися онкології. Якщо цей процес не зупинити, то навіть найсучасніші та потужні методилікування можуть допомогти пацієнтові.
Дослідження ампліфікації гена HER2 проводиться зазвичай у два етапи:
- IHC (імуногістохімічний тест);
- безпосередньо FISH – аналіз (флуоресцентна гібридизація).
Під місцевим наркозомпацієнту проводять біопсію - забір зразків тканин, які вирушають до спеціалізованої лабораторії.
Спочатку зазвичай проводиться імуногістохімія. мікроскопічний аналіззразка тканини ракової пухлини. Він визначає важливу наявність гена HER2 в пухлинній тканині. Це дослідження значно дешевше, ніж фіш-тест, а також простіше та швидше проводиться. Однак при цьому воно не дає таких точних відомостей. Результат визначається в цифрах від нуля до трьох балів. Якщо результат менше або дорівнює одиниці, то ген HER2 у пухлини відсутня і необхідності подальшого дослідження немає. Від двох до трьох балів - прикордонний стан, понад три - злоякісна освіта перебуває у процесі зростання і необхідно розпочинати другий етап діагностики.
Фіш-дослідження при раку молочної залози проводиться таким чином: у кров вводяться елементи молекул ДНК (дезоксирибонуклеїнової кислоти), позначені спеціальним барвником. Ці маркери вбудовуються в молекули ДНК пацієнта і визначають, чи має місце ампліфікація HER2 і який її рівень. Аналіз проводиться в реальному часі, лікар порівнює швидкість поділу гена в місці передбачуваної пухлини зі швидкістю поділу звичайної ділянки молочної залози.
При раку молочної залози FISH дослідження може дати такі результати:
- реакція позитивна - швидкість розподілу гена HER2 в пухлинної тканини перевищує нормальну вдвічі і вище, у разі необхідна додаткова терапія;
- реакція негативна - HER2 не бере участі в процесі поділу ракових клітин і, якщо пухлина все ж таки є, цей ген не буде каталізувати її розвиток.
Таким чином, аналіз дозволяє визначити неправильну поведінку гена HER2 і скоригувати лікування, застосувавши паралельно терапію, спрямовану на придушення цього гена. В даний час для цього застосовується препарат Герцептін.
Якщо вчасно не провести фіш-тест або не звернути увагу на його результати, лікар не матиме даних про поведінку HER2. У такому разі лікування буде призначено без урахування можливої агресивної діяльності цього гена. Швидше за все результату така терапія не принесе - пухлина й надалі агресивно розвиватиметься.
Крім описаного вище, стеження за поведінкою гена HER2 дає онкологам розуміння ступеня агресивності пухлини та можливість спрогнозувати швидкість її зростання та поширення. Це дуже важливу роль у побудові лікування пацієнта. Визначається, чи є потреба у призначенні тяжкого лікування(наприклад, опромінення чи хімія), чи достатньо буде гормональної терапії, чи має сенс хірургічне втручанняабо воно необов'язкове.
Плюси та мінуси фіш-аналізу
Як і будь-який інший метод діагностики, FISH-дослідження має позитивні та негативні сторони.
Однак, незважаючи на деякий скептицизм, пов'язаний, можливо, з новизною даної методики, вона має незаперечні плюси:- Дослідження проводиться швидко – результат буває готовий вже за кілька днів, тоді як інші способи діагностики займають до кількох тижнів. Цей момент буває дуже важливий у питанні боротьби з онкологією.
- Крім дослідження раку молочної залози, аналіз дозволяє дізнатися про схильність того чи іншого пацієнта до онкології будь-якого органу черевної порожнини. Пацієнту надається докладний звіт, керуючись яким він може надалі проходити обстеження для профілактики можливого розвиткураку.
- В силу специфіки фіш-аналізу, за допомогою його можна виявити незначні генетичні аномалії, які не піддаються діагностиці іншими методами.
- На відміну від інших видів досліджень, фіш-тест безпечний для пацієнта. Крім біопсії, він не вимагає жодних додаткових травмуючих впливів.
Частина онкологів вважають ефективність фіш-тесту спірною. Вони спираються на проведені дослідження, які не виявили суттєвої переваги цього методу перед дешевшим IHC-дослідженням.
Також до мінусів фіш-тесту відносять такі фактори:
- дорожнеча дослідження;
- через те, що маркери, що впроваджуються в ДНК, дещо специфічні, їх не можна застосовувати на деяких ділянках хромосом;
- аналіз виявляє в повному обсязі генетичні ушкодження, що може призвести до діагностичним помилкам.
В цілому незважаючи на критику, фіш-аналіз є найшвидшим і найточнішим з методів діагностики карциноми грудей. Важливо й те, що він дозволяє прогнозувати розвиток деяких інших видів онкології.
Будь-який рак найпростіше піддається лікуванню на ранніх стадіяхрозвитку. На жаль, за іронією долі, більшість із відомих видів злоякісних утвореньдуже важко діагностуються на ранніх стадіях. Крім того, багато застосовуваних методів діагностики займають багато часу і не дають повністю об'єктивної картини. Фіш-аналіз не тільки дає найточнішу картину стану пухлини, але також дозволяє уберегти пацієнта від руйнівних для організму форм лікування (наприклад, хіміотерапії), оскільки визначається ступінь агресивності пухлини і, відповідно, ймовірність виникнення метастазів.
Рак молочної залози не можна недооцінювати. Він може торкнутися всіх - і молодих, і старих, і жінок, і чоловіків. Надзвичайна складність лікування, висока смертність, динаміка захворюваності, що зростає, є причиною підвищеної увагидо цієї проблеми із боку медицини.
На сьогоднішній день немає методу лікування, що на 100% гарантує позитивний результат хвороби. Існуючі методитрудомісткі, дорогі і здатні нанести велику супутню шкоду організму.
Це одне із тих захворювань, про яке можна сказати, що найкраще лікування- Це виключення факторів ризику та своєчасна діагностика.
Схильність до раку молочної залози
Незважаючи на те, що рак вперше був описаний ще у XV столітті до нашої ери і вчені мають велика кількістьінформації, її все одно не вистачає повного описуетіології раку молочної залози.
Не знайдені з достатньою достовірністю фактори зовнішнього середовища, що впливають виникнення або розвиток раку. Окремі дослідження, що вказують на той чи інший канцероген, не отримують повноцінного визнання всієї медичної спільноти. Тим не менш, є деяка залежність між раком грудей та наступними обставинами:
Одним із найважливіших вищеперелічених факторів є фактор віку: з роками ймовірність розвитку раку грудей зростає на порядки. У цілому нині, складність питання етіології РМЗ обумовлена його генної природою. Невідомо, чому раптом відбувається збій і тканина молочної залози починає безконтрольний поділ, торкаючись сусідніх тканин і призводячи до метастазів по всьому організму.
Але вчені сходяться в одному: сучасне життянабагато більше схиляє до ракових захворювань, ніж раніше.
Так, вказується на великі дози електромагнітного випромінювання, погану екологію, знижений вміст кисню в містах, гіподинамію, стрес та ін.
Необхідні аналізи
Можливості позитивного результату раку безпосередньо пов'язані з терміном початку лікування, тому ставлення до діагностики має бути найсерйознішим.
В якості діагностичних методівобов'язкові:
- щомісячна самостійна перевірка (тест пальпацією);
- перевірка у лікаря раз на квартал;
- УЗД кожні півроку;
- МРТ щорічно.
Мамографія ( рентгенологічні дослідження) не рекомендується до 30 років, оскільки в молодому віцідії радіації краще уникати. При підозрах на рак молочної залози необхідно буде пройти такі аналізи:
Метод FISH-дослідження
FISH-дослідження (FISH-аналіз) – це цитогенетичний метод, застосовуваний вивчення мембранного білка HER2 (Human Estrogen Receptor2). При проведенні FISH-дослідження використовують ДНК-зонди, позначені флуоресцентною фарбою. Ці зонди вбудовуються у необхідні ділянки ДНК та здатні кількісно визначити ступінь ампліфікації HER2. Оскільки дослідження проводиться в динаміці, і гени продовжують ділитися, можна оцінити співвідношення числа копій гена HER2 з числом копій ділянки, що нормально ділиться. Якщо воно більше або дорівнює 2, результат вважається HER2-позитивним.
FISH-аналіз відіграє найважливішу роль у прогнозуванні раку та вибору принципу лікування.Так, ампліфікація або підвищена активністьцього білка зустрічається у 30% випадків раку і потребує особливих методів лікування, спрямованих на пригнічення його функції. У нормальному стані HER2 контролює зростання, розподіл та самовідновлення клітин. У разі захворювання на рак цей білок виробляє занадто багато мембранних рецепторів і дає клітинам команду на неконтрольований поділ. Так клітина перетворюється на ракову.
При позитивному результаті тесту FISH призначається лікування, спрямоване на супресію HER2. Основними ліками на сьогоднішній день є Герцептін. Якщо не проводити цей тест або ігнорувати його результати, вибір методу лікування виявиться неправильним, і рак перейде в термінальну стадію. Крім того, такий рак відрізняється агресивнішим розвитком, ніж HER2-негативний.
Разом з FISH-аналізом проводять імунногістохімічний аналіз. Це теж генний метод дослідження білка HER2, але у випадку з імуногістохімічним аналізом виявляється кількість білка HER2 над клітині, а конкретно взятому зразку.
Від фіш-методу він відрізняється вартістю, але це на виході дає менш інформативні результати, які залежать від дослідника, лабораторії та критеріїв, що застосовуються. Кількість білка HER2 визначається за забарвленням досліджуваного зразка і оцінюється за шкалою від нуля до трьох. У сукупності ці два методи є золотим стандартом дослідження HER2-статусу пацієнта.
Таким чином, незважаючи на свій імідж, рак грудей цілком піддається успішному лікуванню. В арсеналі онкологів всі передові досягнення медицини. Всі ці кошти цілком доступні звичайнісінькому громадянину.
Головне в успішному результаті хвороби - своєчасне складання аналізів на рак молочної залози, вибір правильного методу лікування і раніше його початок. Не варто зневірятися за відсутності результатів, адже позитивний емоційний фон теж значно впливає на перебіг захворювання.
Інвазивні методи пренатальної діагностики дозволяють не тільки зазирнути в майбутнє і достовірно передбачити, чи очікують ще ненародженого малюка захворювання, пов'язані з внутрішньоутробними вадами розвитку, а й з'ясувати характер і причини вроджених патологій.
Однак будь-яка інформація має цінність лише тоді, коли є своєчасною. Якщо йдеться про стан розвитку плода, швидкість отримання результатів аналізів набуває життєво важливого значення.
Тому, FISH-метод, що дозволяє оцінити наявність у ембріона найбільш часто зустрічаються аномалій розвитку максимально стислі терміни, дуже затребуваний у генетичній діагностиці
FISH – абревіатура, у розшифровці якої криється суть технології виявлення хромосомних аномалій – fluorescence in situ hybridization – флюоресцентної гібридизації у «домашньому» середовищі.
Цей прийом, запропонований наприкінці 70-х років минулого століття Дж. Голлом та М.-Л. Пардью, заснований на можливості відновлення послідовності розташування фрагментів нуклеїнових кислот(ДНК чи РНК) після їх денатурації.
Автори розробили метод, що дозволяє за допомогою гібридизації in situ штучно створених мічених ДНК-проб (зондів) і цитогенетичного матеріалу, взятого на аналіз, виявити кількісні та якісні відхилення хромосом, що цікавлять.
Наприкінці минулого століття, після успішного застосування для фарбування ДНК-зондів флуоресцентних барвників, FISH-метод отримав свою назву і з того часу інтенсивно вдосконалюється та варіатизується.
Сучасні методики FISH-аналізу прагнуть того, щоб забезпечити можливість отримання максимально повної інформаціїдля аналізу забраного генетичного матеріалу за процедуру гібридизації.
Справа в тому, що одного разу після гібридизації можна оцінити лише обмежену кількість хромосом одного й того ж цитогенетичного матеріалу. Здатність до повторної гібридизації ДНК-ланцюжків знижується від разу до разу.
Тому, на даний момент у генетичній діагностиці найчастіше метод гібридизації in situ застосовується для швидкої відповіді на питання про наявні, найпоширеніші анеуплоїдії по 21, 13, 18 хромосомах, а також по статевих хромосомах X, Y.
Для аналізу FISH-методом підходять будь-які тканинні чи клітинні зразки.
У пренатальній діагностиці це можуть бути зразки крові, еякулята, або .
Швидкість отримання результатів забезпечується тим, що клітини, отримані із забраного на аналіз матеріалу, не потрібно культивувати в поживних середовищахДомагаючись їх поділу до потрібної кількості, як при класичному способі каріотипування.
Відібраний матеріал проходить спеціальну підготовкудля одержання концентрованої чистої клітинної суспензії. Далі проводять процес денатурації ДНК-проби та нативних ДНК досліджуваного зразка до одноланцюгового стану та процес гібридизації, під час якого забарвлені ДНК-зонди інкубуються з ДНК зразка.
Таким чином, візуалізуються шукані (забарвлені) хромосоми у клітині, оцінюється їх кількість, будова генетичних структур тощо. Розглянути ланцюжки ДНК, що світяться, дозволяє окуляр особливого флуоресцентного мікроскопа.
В даний час FISH-метод широко використовується в діагностичних ціляхдля виявлення генетичних захворювань, хромосомних аберацій у репродуктивній медицині, онкології, гематології, у біологічній дозиметрії тощо.
Як застосовують FISH-діагностику плода?
У сфері репродуктивної медицини FISH-метод, як один із прийомів молекулярної цито генетичної діагностикивикористовується на всіх етапах.
- парою.
Для визначення каріотипу майбутніх батьків проводиться один раз, оскільки геном людини незмінний протягом усього життя.
Каріотипування пари перед зачаттям дитини допоможе виявити чи є батьки носіями генетичних патологій, що передаються у спадок, у тому числі прихованих. А також загальний стангеному майбутніх мами та тата, що може вплинути на успішність зачаття малюка та виношування вагітності.
Діагностика FISH-методом в даному випадкунайчастіше виступає як додаткове обстеження до класичного каріотипування, при виявленні хромосомних патологій у досліджуваному матеріалі ( венозної кровібатьків), якщо є підозра на мозаїцизм.
Дообстеження FISH-методом дозволить достовірно підтвердити або спростувати наявність підозрюваної аномалії у клітинах майбутнього батька.
- Дослідження еякуляту.
Показано при труднощах із репродукцією в парі за «чоловічим фактором». Аналіз сперми FISH-методом дозволить оцінити рівень аномальних за хромосомним набором сперматозоїдів, а також визначити, чи є чоловік носієм генетичних захворювань, зчеплених зі статтю.
Якщо пара надалі вдасться до зачаття за допомогою ЕКЗ, FISH-аналіз еякуляту дозволить відібрати найбільш якісні сперматозоїди для запліднення яйцеклітини.
- При ЕКЗ.
Для передімплантаційної генетичної діагностики (ПГД). За результатами досліджень каріотипу батьків визначаються можливі хромосомні, генетичні абберації, які можуть бути передані ембріону.
Завдяки можливостям FISH-діагностики, дослідження генетичного здоров'яембріонів, що утворилися, можна здійснити в лічені години до перенесення в порожнину матки, щоб забезпечити настання вагітності свідомо здоровим плодом.
Крім того, можливості ПГД дозволяють визначити статеву приналежністьембріонів, а отже, «замовити» стать майбутньої дитини, якщо це необхідно.
- У період виношування вагітності.
У пренатальній діагностиці: аналіз плодових клітин, отриманих за допомогою біопсії ворсин хоріону, амніоцентезу або кордоцентезу, методом FISH медичні центризазвичай пропонують на додаток до класичного генетичного дослідження клітин плода (каріотипування).
Цей метод незамінний, коли необхідне швидке отримання відповіді про наявність у плоду найбільш поширених хромосомних вад: трисомії по 21, 18, 13 хромосомах, абберацій у хромосомах X і Y, іноді анеуплоїдій по 14 (або 17), 15, 16 хромосом.
Переваги аналізу FISH-методом
Проведення генетичного аналізу FISH-методом, хоч і залишається на сьогоднішній день допоміжним методом діагностики хромосомних патологій, проте доцільність його проведення зумовлюють незаперечні переваги:
- швидкість отримання результатів, що стосуються хромосом, що тестуються, - протягом декількох годин - не більше 72-х.
Це може бути важливим, якщо від діагнозу генетиків залежить доля вагітності;
- висока чутливість і достовірність методу FISH - успішне проведення аналізу можливе на мізерно малій кількості біоматеріалу - достатньо однієї клітини, похибка результатів при цьому, не більше 0,5%.
Це може бути важливо при обмеженій кількостіклітин у вихідному зразку, наприклад, при поганому їх розподілі.
- можливість проведення діагностики FISH-методом на будь-якому терміні вагітності (з 7-го тижня) та за будь-яким біологічним зразком: фрагменти хоріону, амніотична рідина, плодова кров тощо.
Де можна зробити діагностику FISH-методом
У Москві FISH-метод для пренатальної діагностики хромосомних відхилень плода застосовують у наступних медичних центрах:
Як правило, клініки пропонують послугу FISH-діагностики в рамках повного каріотипування плода шляхом інвазивного втручання додаткову плату. І, як правило, майбутні батьки згодні доплатити, адже завдяки FISH-методу вже через пару діб можна дізнатися про свого малюка найголовніше
Сучасний метод цитогенетичного аналізу, що дозволяє визначати якісні та кількісні зміни хромосом (у тому числі транслокації та мікроделеції) та використовуваний для диференціальної діагностикизлоякісних захворювань крові та солідних пухлин.
Синоніми росіяни
Флуоресцентна гібридизація in situ
FISH-аналіз
Синоніми англійські
Fluorescence in-situ hybridization
Метод дослідження
Флуоресцентна гібридизація in situ.
Який биоматериал можна використовуватиме дослідження?
Зразок тканини, зразок тканини в парафіновий блок.
Як правильно підготуватись до дослідження?
Підготовка не потрібна.
Загальна інформація про дослідження
Флуоресцентна гібридизація in situ (FISH, від англ. fluorescence in- situ hybridization) – це один із самих сучасних методівдіагностики хромосомних аномалій Він ґрунтується на використанні ДНК-проб, мічених флуоресцентною міткою. ДНК-проби є спеціально синтезовані фрагменти ДНК, послідовність яких комплементарна послідовності ДНК досліджуваних аберантних хромосом. Таким чином, ДНК-проби розрізняються за складом: визначення різних хромосомних аномалій використовуються різні, специфічні ДНК-проби. ДНК-проби також різняться за розміром: одні можуть бути спрямовані до цілої хромосоми, інші до конкретного локусу.
В ході процесу гібридизації за наявності в досліджуваному зразку аберантних хромосом відбувається їх зв'язування з ДНК-пробою, яке при дослідженні за допомогою флуоресцентного мікроскопа визначається як флуоресцентний сигнал (позитивний результат тесту FISH). За відсутності аберантних хромосом незв'язані ДНК-проби в ході реакції "відмиваються", що при дослідженні за допомогою флуоресцентного мікроскопа визначається як відсутність флуоресцентного сигналу ( негативний результат FISH-тесту). Метод дозволяє оцінити як наявність флуоресцентного сигналу, а й його інтенсивність і локалізацію. Таким чином, FISH-тест – це не лише якісний, а й кількісний метод.
FISH-тест має низку переваг у порівнянні з іншими методами цитогенетики. В першу чергу дослідження FISH може бути застосоване як до метафазних, так і до інтерфазних ядрів, тобто до клітин, що не діляться. Це основна перевага FISH у порівнянні з класичними способами каріотипування (наприклад, фарбуванням хромосом по Романівському-Гімзі), які застосовуються лише до метафазних ядр. Завдяки цьому дослідження FISH є точнішим методом для визначення хромосомних аномалій у тканинах з низькою проліферативною активністю, у тому числі у солідних пухлинах.
Так як у FISH-тесті використовується стабільна ДНК інтерфазних ядер, для дослідження можуть бути використані різні біоматеріали - аспірати тонкокутної аспіраційної біопсії, мазки, аспірати кісткового мозку, біоптати і, що важливо, збережені фрагменти тканини, наприклад, гістологічні блоки. Так, наприклад, FISH-тест може бути успішно виконаний на повторних препаратах, отриманих з гістологічного блоку біоптату молочної залози при підтвердженні діагнозу "аденокарцинома молочної залози" і необхідності визначення HER2/neu-статусу пухлини. Слід особливо наголосити, що в даний момент дослідження FISH рекомендовано як підтверджує тест при отриманні невизначеного результату імуногістохімічного дослідження пухлини на онкомаркер HER2/neu (ІГХ 2+).
Іншою перевагою FISH є його здатність визначати мікроделеції, які не виявляються за допомогою класичного каріотипування або ПЛР. Це має особливе значення при підозрі на синдром Ді Джорджі та велокардіофаціальний синдром.
FISH-тест широко використовується у диференціальній діагностиці злоякісних захворювань, насамперед у онкогематології. Хромосомні аномалії у поєднанні з клінічною картиноюта даними імуногістохімічного дослідження є основою класифікації, визначення тактики лікування та прогнозу лімфо- та мієлопроліферативних захворювань. Класичними прикладамиє хронічний мієлолейкоз- t (9; 22), гострий промієлоцитарний лейкоз - t (15; 17), хронічний лімфолейкоз - трисомія 12 та інші. Що стосується солідних пухлин, найчастіше FISH-дослідження застосовується при діагностиці раку молочної залози, сечового міхура, товстої кишки, нейробластоми, ретинобластоми та інших.
Дослідження FISH також може бути використане у пренатальній та преімплантаційній діагностиці.
FISH-тест часто проводять у поєднанні з іншими методами молекулярної та цитогенетичної діагностики. Результат цього дослідження оцінюють у комплексі з результатами додаткових лабораторних та інструментальних даних.
Навіщо використовується дослідження?
- Для диференціальної діагностики злоякісних захворювань (крові та солідних органів).
Коли призначається дослідження?
- При підозрі на наявність злоякісного захворюваннякрові або солідних пухлин, тактика лікування та прогноз яких залежить від хромосомного складу пухлинного клону.
Що означає результати?
Позитивний результат:
- Наявність у досліджуваному зразку аберантних хромосом.
Негативний результат:
- Відсутність у досліджуваному зразку аберантних хромосом.
Що може впливати на результат?
- Кількість аберантних хромосом.
- Імуногістохімічне дослідження клінічного матеріалу (з використанням 1 антитіла)
- Імуногістохімічне дослідження клінічного матеріалу (з використанням 4 і більше антитіл)
- Визначення HER2 статусу пухлини методом FISH
- Визначення HER2 статусу пухлини методом СІSH
Хто призначає дослідження?
Онколог, педіатр, акушер-гінеколог, лікар-генетик.
Література
- Wan TS, Ma ES. Молекулярні cytogenetics: an indispensable tool for cancer diagnosis. Anticancer Res. 2005 Jul-Aug; 25 (4): 2979-83.
- Kolialexi A, Tsangaris GT, Kitsiou S, Kanavakis E, Mavrou A. Impact of cytogenetic and molecular cytogenetic studies on hematologic malignancies. Chang Gung Med J. 2012 Mar-Apr;35(2):96-110.
- Mühlmann M. Molecular cytogenetics в metaphase and interphase cells for cancer and genetic research, diagnosis and prognosis. Application in tissue sections and cell suspensions. Genet Mol Res. 2002 р. Jun 30;1(2):117-27.
Loading...