Винахід відноситься до ветеринарної біології та імунології, зокрема до виробництва та застосування біологічних препаратівдля вакцинації тварин. Запропонована вакцина включає протективний антиген вакцинного штаму 55 ВНИИВВиМ у концентрації (17,5 2,5) імунізуючих доз та живі суперечки вакцинного штаму СТІ-1 у концентрації (2,5 0,3)10 7 в 1 мл фізіологічного розчину. Запропонована вакцина нешкідлива, забезпечує створення напруженого антитоксичного та антимікробного імунітету проти сибірки. Винахід може бути використаний для специфічної профілактики сибірки. 6 табл.

Пропонований винахід відноситься до галузі ветеринарної біотехнології та імунології, зокрема виробництва вакцин для специфічної профілактики сибірки тварин. Сибірка - хвороба, що протікає у вигляді шкірної, кишкової та легеневої форми, що зустрічається у вигляді одиничних і групових захворювань. До сибірки сприйнятливі багато видів домашніх і диких тварин. З свійських тварин хворіють великий і дрібний рогата худоба, свині, верблюди, буйволи, вівці, олені, собаки та кішки. Сибірська виразка досі має поширення, завдаючи величезних економічних та соціальних збитків, тому розробка високоефективних вакцин, що забезпечують напружений та тривалий імунітет проти цієї інфекції, є актуальною. В даний час широко відома "Вакцина СТІ жива проти сибірки тварин". Вона може випускатися у двох формах. - Суха вакцина СТИ є висушеною під вакуумом однорідною пористою таблеткою, що складається з живих спор безкапсульної слабовірулентної культури сибіркового штаму СТИ-1 і наповнювача. - Рідка вакцина СТІ являє собою завись живих спір безкапсульної слабовірулентної культури сибіркового штаму СТІ в 30-му нейтральному розчині гліцерину (1). Відома вакцина проти сибірки і емфізематозного карбункула жива асоційована, що включає суспензію спор сибіркового виразного авірулентного вакцинного штаму 55 ВНИИВВиМ у вихідній концентрації (2,0-2,5)10 9 спор в 1 см 1 9 життєздатних клітин штаму емфізематозного карбункула і фізіологічний розчин при наступному співвідношенні компонентів, мас.%: Спори сибіркового штаму 55 ВНИИВВиМ з вихідною концентрацією (2,0-2,5)10 9 спор в 1 см 3 - 1, 1 Суспензія штаму емфізематозного карбункула в концентрації 2,110 9 - 95,0 - 97,0 Фізіологічний розчин - Решту Вакцину вводять підшкірно в ділянці середньої третини шиї великої рогатої худоби у віці від 3 до 6 міс. 1,0-1,1 см 3 (2). Відома комбінована сибірка вакцина для людей, що включає живі спори штаму СТІ-1 і протективний антиген (ПА), отриманий при певних умовкультивування цього вакцинного штаму Термін формування напруженого імунітету у людей проти сибіркової інфекції становить 7-10 діб після одноразової імунізації. Порівняльні випробування даної вакцини на лабораторних та сільськогосподарських тварин показали її суттєві переваги перед використовуваними в даний час у ветеринарній практиці протисибірковими вакцинами на основі окремих штамів 55 ВНДІВВіМ або СТІ. Ступінь продуктивності була невисокою (3). У завдання наших досліджень входило - розробити комбіновану вакцину проти сибірки на основі бінарної комбінації живих спор вакцинного штаму СТІ-1 і протективного антигену, отриманого з мікробної культури вакцинного штаму 55 ВНИИВВиМ, що забезпечує створення в організмі щеплених тварин високим виходом продукування протективного антигену. Запропонована вакцина включає живі спори вакцинного штаму СТІ-1 з концентрацією (2,50,3)10 7 протективний антиген на основі мікробних культур вакцинного штаму 55 ВНІІВВіМ з активністю (17,52,5) імунізуючих доз в 1 мл при наступному співвідношенні протективний антиген вакцинного штаму 55 ВНИИВВиМ у концентрації (17,52,5) імунізуючих доз та живі суперечки вакцинного штаму СТІ-1 у концентрації (2,50,3)10 7 спір в 1 мл фізіологічного розчину. Вакцину готують в такий спосіб. Технологічна схемавиробництва включає наступні основні стадії. - Приготування робочої культури виробничого штаму СТІ-1 звичайним способом за умови утримання в 1 см 3 культурального середовища не менше 2,5 млрд. спор., оптимально (2,50,3)10 7 . - Приготування поживних середовищ та додаткових розчинів. - Вирощування нативної спорової культури. Вирощування проводять у культиваторах. Посівну культуру з однієї ампули перед посівом активують шляхом прогрівання в ультратермостаті. Культивування проводять при безперервному механічному перемішуванні, аерації стерильним повітрям при температурі 32-34 o протягом 36-48 годин, періодично перевіряючи ступінь спороутворення і відсутність сторонньої мікрофлори. Потім при досягненні культури 70-75% припиняють перемішування, подачу повітря. Далі нативну культуру підігрівають до 36-37 o З і витримують при періодичному перемішуванні 3-5 годин, після чого культуру охолоджують до 15-20 o С. Відібрана нативна культура повинна відповідати наступним вимогам: - не містити сторонньої мікрофлори; - містити не менше 90% нормально забарвлених суперечок; - мати загальну концентрацію спор - не менше 1,5 млрд в 1 см 3 культурального середовища; - Мати значення рН середовища 8,2-8,9 од. рН. Одержання спорового концентрату. Отримання спорового концентрату здійснюють звичайним способом, за таких умов:
- не містити сторонньої мікрофлори;
- загальна концентрація спор у суспензії повинна становити не менше 12 млрд. суперечка в 1 см 3;
- містити не менше 90% спор та мати рН 7,0-8,5 од. рН. При необхідності концентрат розводять дист. водою та проводять повторний контроль. Потім окремо виділяють протективний антиген з культурального середовища вакцинного штаму 55 ВНДІВВіМ. Далі проводять змішування компонентів вакцини: суперечки зі штаму СТІ-1 з концентрацією (2,50,3)10 7 спор і протективний антиген зі штаму 55 ВНИИВВиМ із вмістом (17,52,5) імунізуючих доз в 1 мл фізіологічного розчину. Вакцину вводять з профілактичною метоюодноразово для профілактичних щепленьвсіх видів сільськогосподарських тварин. Первинно щеплених тварин (молодняк) імунізують дворазово. Вакцину при підшкірному введенні застосовують у наступних дозах:
- вівцям та козам – в область середньої третини шиї або внутрішньої поверхні стегна в обсязі 0,5 мл розведеної вакцини;
- великої рогатої худоби, оленів та ослам - в область середньої третини шиї обсягом 1,0 мл розведеної вакцини;
- свиням - в ділянку внутрішньої поверхні стегна або за вухом в об'ємі 1,0 мл розведеної вакцини;
- хутровим звірам - в ділянку внутрішньої поверхні стегна або в підхвостове дзеркало в обсязі 1,0 мл розведеної вакцини. Конкретні прикладищодо випробування запропонованої вакцини відображені в таблицях 1-6. Крім того, до заявки додаються ще чотири таблиці 3-6 по порівняльній характеристиціімуногенних властивостей сибірки вакцин на морських свинках, напруженість імунітету у морських свинокпісля імунізації різними сибірковими вакцинами, а також напруженість імунітету за рівнем антитіл у овець і великої рогатої худоби, імунізованих проти сибірки. Запропонована комбінована вакцина проти сибірки тварин за рахунок вмісту в ній вакцинного штаму СТІ-1 забезпечує створення антимікробного імунітету, а наявність протективного антигену, отриманого на основі мікробних культур вакцинного штаму 55 ВНИИВВиМ, забезпечує створення антитоксичного імунітету. Вакцина нешкідлива, не вимагає великих витрат і при одноразовому введенні в організмі тварини забезпечує створення тривалого та напруженого імунітету (антимикробного та антитоксичного) проти сибірки. Запропонована вакцина апробована з позитивним результатом з 1998 по 2001 р. в Азербайджані на 900 тис. головах великої та на 5 млн. голів дрібної рогатої худоби. Крім того, вакцина апробована з 1998 та 2000 р. на 100000 голів великої та 3 млн. голів дрібної рогатої худоби в тваринницьких господарствах Туркменії. Запропонована вакцина знайде застосування в тваринницьких господарствах країни для боротьби з одним із найнебезпечніших захворювань - сибіркою тварин, а також забезпечить епідеміологічний добробут населення. Джерела інформації
1. "Вакцина СТІ жива проти сибірки тварин". ТУ ГОСТ 15991 – 86 Держкомітет зі стандартів, Москва. 2. Патент РФ 2112544, кл. А 61 До 39/116, 1998. 3. Наказ МОЗ РФ 132 від 16.04.92. "Про дозвіл застосування у практиці охорони здоров'я нових медичних імунологічних препаратів", п. 23, с.4 та с.27.

формула винаходу

Комбінована вакцинапроти сибірки тварин на основі живих спор вакцинного штаму СТІ-1, яка відрізняється тим, що вона додатково містить протективний антиген вакцинного штаму 55 ВНИИВВиМ, при цьому компоненти, що входять у вакцину, беруть у наступних співвідношеннях: живі суперечки вакцинного штаму (2,5 0,3)10 7 спор і протективний антиген вакцинного штаму 55 ВНИИВВиМ у концентрації (17,5 2,5)ІД 50 (імунізуючих доз для білих мишей) в 1 мл фізіологічного розчину.

ГОСТ Р 52616-2006 Вакцина проти сибірки тварин зі штаму 55-ВНИИВВиМ жива. Технічні умови

Прийнятий 25 грудня 2006 року
Федеральним агентством з технічного регулювання та метрології

1. ГОСТ Р 52616-2006
2. Група Р31
3. НАЦІОНАЛЬНИЙ СТАНДАРТ РОСІЙСЬКОЇ ФЕДЕРАЦІЇ
4. ВАКЦИНА ПРОТИ СИБІРСЬКОЇ Виразки ТВАРИН
5. З ШТАМА 55-ВНИИВВИМ ЖИВА
6. Технічні умови
7. Live vaccine на anthrax of animals from strain 55-VNIIW & M. Specifications
8. ГКС 11.220
9. ОКП 93 8470
10. Дата введення 2008-01-01
11. Передмова
12. Цілі та принципи стандартизації в Російській Федерації встановлені Федеральним закономвід 27 грудня 2002 р. N 184-ФЗ "Про технічне регулювання", а правила застосування національних стандартів Російської Федерації - ГОСТ Р 1.0-2004 "Стандартизація у Російській Федерації. Основні положення"
13. Відомості про стандарт
14. 1 РОЗРОБЛЕН Федеральним державною установою"Всеросійський державний Центрякості та стандартизації лікарських засобів для тварин та кормів"
15. 2 ВНЕСЕН Технічним комітетом зі стандартизації ТК 454 "Охорона життя, здоров'я тварин та ветеринарно-санітарна безпека продуктів тваринного походження та кормів"
16. 3 ЗАТВЕРДЖЕНИЙ І ВВЕДЕНИЙ У ДІЮ Наказом Федерального агентства з технічного регулювання та метрології від 25 грудня 2006 р. N 329-ст
17. 4 ВВЕДЕНО ВПЕРШЕ
18. Інформація про зміни до цього стандарту публікується в інформаційному покажчику "Національні стандарти", що щорічно видається, а текст змін і поправок - у щомісячно видаваних інформаційних покажчиках "Національні стандарти". У разі перегляду (заміни) або скасування цього стандарту відповідне повідомлення буде опубліковане у щомісячному інформаційному покажчику "Національні стандарти". Відповідна інформація, повідомлення та тексти розміщуються також в інформаційній системі загального користування - на офіційному сайті Федерального агентства з технічного регулювання та метрології в мережі Інтернет
19. Вступ
20. Цей стандарт розроблено відповідно до Федерального закону "Про технічне регулювання" з метою формування нормативної бази для дотримання вимог законопроекту - спеціального технічного регламенту "Про вимоги безпеки лікарських засобів для тварин, процесів їх розробки, випробування, виробництва, виготовлення, зберігання, перевезення, реалізації , застосування та утилізації", встановлення правил та характеристик у сферах виробництва та обігу продукції, забезпечення науково-технічного прогресу та конкурентоспроможності продукції. Розробка стандарту дозволить уніфікувати вимоги до якості вакцини, методів контролю, безпеки, упаковки, маркування, транспортування, зберігання, утилізації.
21. 1 Область застосування
22. Даний стандарт поширюється на вакцину проти сибірки тварин зі штаму 55-ВНИИВВиМ живу (суху і рідку), призначену для профілактичної імунізації сприйнятливих тварин (далі - вакцина).
23. Вакцина являє собою завись живих спор безкапсульної слабовірулентної культури сибіркового штаму 55-ВНИИВВиМ в 30%-ному нейтральному розчині гліцерину або масу спор, ліофілізовану під вакуумом із захисним середовищем.
24. 2 Нормативні посилання
25. У цьому стандарті використано нормативні посилання на такі стандарти:
26. ГОСТ Р 50460-92 Знак відповідності за обов'язкової сертифікації. Форма, розміри та технічні вимоги
27. ГОСТ Р 51232-98 Вода питна. Загальні вимогидо організації та методів контролю якості
28. ГОСТ Р 51314-99 Ковпачки алюмінієві та комбіновані до флаконів та пляшок для лікарських засобів, крові та кровозамінників
29. ГОСТ Р 51652-2000 Спирт етиловий ректифікований із харчової сировини. Технічні умови
30. ГОСТ 8.579-2002 Державна система забезпечення єдності вимірів. Вимоги до кількості фасованих товарів в упаковках будь-якого виду під час їх виробництва, розфасовки, продажу та імпорту
31. ГОСТ 12.0.004-90 Система стандартів безпеки праці. Організація навчання безпеки праці. загальні положення
32. ГОСТ 12.1.005-88 Система стандартів безпеки праці. Загальні санітарно-гігієнічні вимоги до повітря робочої зони
33. ГОСТ 12.1.008-76 Система стандартів безпеки праці. Біологічна безпека. Загальні вимоги
34. ГОСТ 12.2.003-91 Система стандартів безпеки праці. Устаткування виробниче. Загальні вимоги безпеки
35. ГОСТ 12.3.002-75 Система стандартів безпеки праці. Процеси виробничі. Загальні вимоги безпеки
36. ГОСТ 12.4.011-89 Система стандартів безпеки праці. Засоби захисту працюючих. Загальні вимоги та класифікація
37. ГОСТ 17.0.0.01-76 Система стандартів у галузі охорони природи та покращення використання природних ресурсів. Основні положення
38. ДЕРЖСТАНДАРТ 342-77 Натрій дифосфат 10-водний. Технічні умови
39. ГОСТ 1770-74 Посуд мірний лабораторний скляний. Циліндри, мензурки, колби, пробірки. Загальні технічні умови
40. ГОСТ 5959-80 Ящики з листових матеріалів нерозбірні для вантажів масою до 200 кг. Загальні технічні умови
41. ГОСТ 6672-75 Скло покривне для мікропрепаратів. Технічні умови
42. ГОСТ 6709-72 Вода дистильована. Технічні умови
43. ГОСТ 8074-82 Мікроскопи інструментальні. Типи, основні параметри та розміри. Технічні вимоги
44. ГОСТ 9284-75 Скло предметне для мікропрепаратів. Технічні умови
45. ГОСТ 11285-93 Залізи підшлункові великої рогатої худоби та свиней заморожені. Технічні умови
46. ГОСТ 12026-76 Папір фільтрувальний лабораторний. Технічні умови
47. ГОСТ 12301-81 Коробки з картону, паперу та комбінованих матеріалів. Загальні технічні умови
48. ГОСТ 12923-82 Алігнін медичний. Технічні умови
49. ГОСТ 13646-68 Термометри ртутні скляні для точних вимірювань. Технічні умови
50. ГОСТ 14192-96 Маркування вантажів
51. ГОСТ 16280-2002 Агар харчовий. Технічні умови
52. ГОСТ 17206-96 Агар мікробіологічний. Технічні умови
53. ГОСТ 17768-90 Засоби лікарські. Упаковка, маркування, транспортування та зберігання
54. ГОСТ 18481-81 Ареометри та циліндри скляні. Загальні технічні умови
55. ГОСТ 20015-88 Хлороформ. Технічні умови
56. ГОСТ 20729-75 Поживні середовища. М'ясна вода (для ветеринарних цілей). Технічні умови
57. ГОСТ 20730-75 Живильні середовища. Бульйон м'ясо-пептонний (для ветеринарних цілей). Технічні умови
58. ГОСТ 22967-90 Шприци медичні ін'єкційні багаторазового застосування. Загальні технічні вимоги та методи випробувань
59. ГОСТ 24061-89 Препарати біологічні сухі. Метод визначення вологості
60. ГОСТ 24104-2001 Ваги лабораторні. Загальні технічні вимоги
61. ГОСТ 25336-82 Посуд та обладнання лабораторні скляні. Типи, основні параметри та розміри
62. ГОСТ 25377-82 Голки ін'єкційні багаторазового застосування. Технічні умови
63. ГОСТ 27785-88 Препарати біологічні сухі. Метод визначення кисню у флаконах із препаратом
64. ГОСТ 27840-93 Тара для посилок та бандеролей. Загальні технічні умови
65. ГОСТ 28083-89 Препарати біологічні. Метод контролю вакууму в ампулах та флаконах
66. ГОСТ 28085-89 Препарати біологічні. Метод бактеріологічного контролю стерильності
67. ГОСТ 29112-91 Середи живильні щільні (для ветеринарних цілей). Загальні технічні умови
68. ГОСТ 29230-91 (ІСО 835-4-81) Посуд лабораторний скляний. Піпетки градуйовані. Частина 4. Піпетки видувні
69. Примітка - При користуванні цим стандартом доцільно перевірити дію стандартів посилань в інформаційній системі загального користування - на офіційному сайті Федерального агентства з технічного регулювання та метрології в мережі Інтернет або за щорічно видається інформаційному покажчику "Національні стандарти", який опублікований станом на 1 січня , та за відповідними інформаційними покажчиками, що щорічно видаються, опублікованими в поточному році. Якщо стандарт посилається (змінений), то при користуванні цим стандартом слід керуватися заміненим (зміненим) стандартом. Якщо стандарт зв'язку скасовано без заміни, то положення, в якому дано посилання на нього, застосовується в частині, що не зачіпає це посилання.
70. 3 Терміни та визначення
71. У цьому стандарті застосовані такі терміни з відповідними визначеннями:
72. 3.1 жива вакцина: Імунобіологічний препарат, що одержується з живих атенуйованих штамів мікроорганізмів, збудників хвороб тварин та людини.
73. 3.2 вакцинація: Застосування вакцини для запобігання інфекційній хворобі.
74. 3.3 суперечки: Форма існування деяких видів мікроорганізмів у несприятливих умовах зовнішнього середовищаневизначено довгий час.
75. 3.4 капсула: Слизовий шар навколо бактеріальних клітин капсулоутворюючих мікроорганізмів.
76. 3.5 Ліофілізація: Висушування із замороженого стану під вакуумом.
77. 3.6 вірулентність: Ступінь патогенності (хвороботворності) мікроорганізмів.
78. 3.7 штам вакцинний: Генетично однорідна популяція мікроорганізмів із постійними, спадково закріпленими властивостями.
79. 3.8 мікробіологічна чистота: Відсутність у популяції штаму мікроорганізмів інших видів (типів, сероварів).
80. 3.9 дисоціація: Поява у популяції штаму мікроорганізмів змінених клітинних форм.
81. 3.10 Нешкідливість вакцини: Відсутність шкідливих для організму наслідків місцевого та загального характеру після введення вакцини.
82. 3.11 реактогенність: Здатність живих вакцин викликати при введенні незначної реакції місцевого або загального характеру (набряклість, болючість, короткочасне підвищення температури та ін.).
83. 3.12 імуногенність: Здатність вакцини викликати у вакцинованих особин формування стану несприйнятливості проти інфекційної хвороби.
84. 3.13 концентрація водневих іонів(рН): Реакція середовища (кисла, лужна, нейтральна) рН - негативний логарифм концентрації водневих іонів на підставі 10.
85. 3.14 колонія мікроорганізмів: Нащадок однієї мікробної клітини на твердому живильному середовищі.
86. 4 Технічні вимоги
87. 4.1 Вакцина повинна відповідати вимогам цього стандарту та виготовлятися відповідно до технологічного регламенту (інструкції) з виготовлення, затвердженого в установленому порядку.
88. 4.2 Суха вакцина являє собою ліофілізовану із захисним середовищем під вакуумом масу живих спор безкапсульної слабовірулентної культури сибіркового штаму 55-ВНИИВВиМ, з вмістом життєздатних суперечок в межах 0,2-1,2 млрд в одній ампулі (флакон.
89. 4.3 Рідка вакцина являє собою завись живих спір безкапсульної слабовірулентної культури сибіркового штаму 55-ВНИИВВиМ в 30%-ному нейтральному розчині гліцерину з вмістом спор в межах 0,02-1,20 млрд в одній ампулі.
90. 4.4 Вакцина з фізико-хімічних, морфологічних, культуральних, біологічним властивостяммає відповідати вимогам та нормам, зазначеним у таблиці 1.
91. Таблиця 1
92. найменування показника сухої вакцини рідкої вакциниЗовнішній вигляд і колір Однорідна пориста маса білувато-сірого кольору.Наявність сторонньої домішки, плісняви, пластівців, що не розбиваються, тріщин флаконів (ампул) Не допускається в ресуспензованому вигляді Не допускаєтьсяКонцентрація водневих іонів (рН) – 7,0±0,2Наявність вакууму в ампулах Має бути вакуум -Наявність кисню та азоту у флаконах Має бути азот у флаконах за відсутності киснюМасова частка вологи, %, не більше 3,0 -Час ресуспензування, хв, не більше 3,0 -Масова частка гліцерину, % – 30,0±3,0Кількість живих спор, млн/см, для застосування підшкірно 22,0±2,0 22,0±2,0внутрішньошкірно 110,0±10,0 110,0±10,0Масова частка суперечка, % 95,0±5,0 95,0±5,0Мікробіологічна чистота Типовість росту культури штаму 55-ВНІІВВіМ Морфологічні властивості Дисоціація, %, не більше Рухливість Капсулоутворення Нешкідливість Залишкова вірулентність Імуногенність

    Характеристика та норма

    У посівах вакцини на живильних середовищах не повинно бути зростання сторонньої бактеріальної та грибної мікрофлори

    У посівах на живильні середовища має бути типове зростання культури штаму 55-ВНДІВВіМ. На кров'яному агарі через 24 години інкубування ознаки гемолізу повинні бути відсутніми

    У мазках з бульйонних і агарових культур, пофарбованих за Грамом, повинні бути великі (3-10) мкм грампозитивні палички, розташовані поодинці або з'єднані в ланцюжки, а також суперечки, що вільно лежать, що являють собою блискучі овальні, іноді круглі, утворення розміром (1, 2-1,5)х(0,8-1,0) мкм, в окремих випадках суперечки, що знаходяться в центрі вегетативної клітини або поза нею. Інволюційні форми бактерій повинні бути відсутніми

    5,0

    Повинні бути тільки нерухомі палички та ланцюжки

    Повинні бути лише безкапсульні бацили

    Вакцина має бути нешкідливою

    Вакцина має бути слабовірулентною

    Вакцина має бути імуногенною

93. 4.5 Упаковка та маркування
94. 4.5.1 Вакцину розфасовують у стерильні ампули або стерильні флакони. Вакцину, призначену для ліофілізації, розфасовують у ампули по 1,0-2,0 см (10-50 доз), рідку в ампули по 1,0-5,0 см (10-50 доз) та у флакони по 10-50 см (10-50 доз). Похибка розфасовки згідно з ГОСТ Р 8.579.

________________
* На території Російської Федерації діє ГОСТ 8.579-2002. - Примітка виробника бази даних.


95. 4.5.2 Флакони з вакциною закривають стерильними гумовими пробками та обкатують алюмінієвими ковпачками за ГОСТ Р 51314.
96. 4.5.3 На ампули з вакциною наклеюють етикетку або незмивною фарбою (травленням) по склу вказують:
97. скорочене найменування препарату;
98. об'єм препарату, см;
99. номер серії;
100. дату виготовлення (місяць, рік).
101. 4.5.4 На флакони з вакциною наклеюють етикетку, на якій вказують:
102. найменування організації-виробника;
103. логотип організації-виробника (за наявності);
104. назва вакцини;
105. номер серії та номер контролю;
106. об'єм вакцини, см;
107. термін придатності (місяць, рік);
108. дози та спосіб введення;
109. умови зберігання;
110. позначення стандарту;
111. штрих-код (за наявності);
112. кількість розріджувача для підшкірного введення;
113. напис: "Для тварин".
114. 4.5.5 Ампули (флакони) з вакциною у фасуванні до 50 см по 10-20 шт. упаковують у картонні коробки за ГОСТ 12301 з наявністю гнізд чи перегородок, що забезпечують їхню нерухомість. У кожну коробку вкладають інструкцію із застосування.
115. 4.5.6 На коробку наклеюють етикетку, яка повинна містити:
116. найменування організації-виробника;
117. адресу, телефон та логотип (за наявності);
118. найменування біопрепарату;
119. кількість ампул (флаконів) у коробці;
120. кількість доз в ампулі (флакон);
121. кількість розріджувача на одну ампулу (флакон) для внутрішньошкірного та підшкірного застосування;
122. номер серії;
123. номер контролю;
124. дату виготовлення (місяць, рік);
125. термін придатності (місяць, рік);
126. умови зберігання;
127. дози для різних видівта віку тварин;
128. позначення цього стандарту;
129. штрих-код (за його наявності);
130. інформацію про підтвердження відповідності ГОСТ Р 50460;
131. напис: "Для тварин".
132. 4.5.7 Коробки з вакциною, а також флакони в розфасовці по 50 см з рідкою вакциною, упаковують у ящики з листових деревних матеріалів за ГОСТ 5959 або ящики для посилок за ГОСТ 27840 або інші ящики масою брутто не більше 15 кг. Для упаковки флаконів у ящики використовують алігнін за ГОСТ 12923 чи інші теплоізоляційні матеріали. Допускається упаковка вакцини в фасуванні по 10 см безпосередньо в ящики, при цьому кожен ряд перекладають вакцини алігніном.
133. Всередину кожної скриньки вкладають не менше п'яти екземплярів інструкції із застосування вакцини та контрольний лист із зазначенням: найменування організації-виробника; найменування біопрепарату, його кількості в ящику, дати упаковки, номери (прізвища) пакувальника.
134. 4.5.8 На кожне вантажне місце (ящик) наносять транспортне маркування за ГОСТ 14192 із зазначенням маніпуляційних знаків: "Типке. Обережно", "Обмеження температури", та попереджувального напису; "Біопрепарати".
135. 4.5.9 Маркування, яке характеризує упаковану продукцію, повинно містити:
136. найменування організації-виробника;
137. адресу організації-виробника;
138. товарний знак (за його наявності);
139. найменування вакцини;
140. кількість вакцини у ящику;
141. дату виготовлення (місяць, рік);
142. номер серії;
143. термін придатності (місяць, рік);
144. умови зберігання;
145. позначення цього стандарту.
146. 4.5.10 Поєднання транспортного маркування та маркування, що характеризує упаковану продукцію, на одній стороні транспортної тари не допускається.
147. 5 Вимоги безпеки
148. 5.1. З біологічної безпеки вакцина повинна відповідати вимогам ГОСТ 12.1.008.
149. 5.2 Виробниче обладнання, що використовується при виготовленні вакцини, має відповідати вимогам ГОСТ 12.2.003, а виробничі процеси- ГОСТ 12.3.002.
150. 5.3 Повітря робочої зони повинне відповідати вимогам ГОСТ 12.1.005.
151. 5.4 Персонал, зайнятий у виробництві вакцини, має бути забезпечений засобами захисту відповідно до ГОСТ 12.4.011 та пройти навчання безпечним умовам праці відповідно до ГОСТ 12.0.004.
152. 5.5 Утилізацію вакцини, що не пройшла контроль, що залишилася після використання, а також з терміном придатності, що минув, проводять шляхом автоклавування протягом 2 годин при температурі 134 °С і тиском 2 атм. із дотриманням вимог ГОСТ 17.0.0.01.
153. 6 Правила приймання
154. 6.1 Кожна серія вакцини має бути прийнята (перевірена) у Відділі біологічного технічного контролю (ОБТК) організації-виробника.
155. 6.2 Серією слід вважати певну кількість вакцини, виготовленої в одних виробничих умовах за один технологічний цикл з однієї розплодки штаму, змішаної із захисним середовищем в одній ємності, розфасованої в ампули (флакони) однакової місткості і ліофільно висушеної в одному сублімаційному , або об'єднаної в одній ємності з 30%-ним нейтральним розчином гліцерину та розфасованої в один вид флаконів або ампул (для рідкої вакцини), що отримала свій номер, номер контролю та оформлену одним документом про якість (паспорт).
156. 6.3 У документі про якість (паспорт) зазначають:
157. найменування організації-виробника;
158. найменування вакцини;
159. номер серії;
160. номер контролю;
161. дату виготовлення (місяць, рік);
162. обсяг серії;
163. результати випробування за показниками якості;
164. термін придатності (місяць, рік);
165. умови зберігання;
166. номер та дату видачі документа про якість;
167. позначення стандарту;
168. висновок та підпис особи, яка видала документ про якість.
169. 6.4 Для контролю за якістю вакцини від кожної серії відбирають вибірку. З вибірки виділяють середню пробу кількості 20 ампул (флаконів) з вакциною, 10 з яких використовують для випробування за показниками якості, а 10 зберігають в архіві протягом терміну придатності. Кількість відібраних проб має забезпечити проведення аналізів у чотирьох повторностях.
170. 6.5 Архівні зразки маркують написом "Архів", опечатують та постачають документом встановленої форми із зазначенням:
171. найменування вакцини;
172. номери серії;
173. дати виготовлення (місяць, рік);
174. дати відбору проб;
175. обсяг серії;
176. кількості відібраних зразків;
177. посади та підписи особи, яка відібрала проби;
178. терміну придатності (місяць, рік);
179. позначення цього стандарту;
180. термін зберігання проб.
181. 6.6 При отриманні незадовільних результатів випробувань хоча б за одним із показників щодо нього проводять повторні випробування на подвоєній кількості ампул або флаконів, відібраних від тієї ж серії вакцини. Результати повторного випробування розповсюджують на всю серію та вважають остаточними.
182. У разі незадовільних результатів повторної перевірки серію вакцини вважають такою, що не відповідає вимогі цього стандарту, її вибраковують і знищують шляхом автоклавування протягом 2 годин при температурі 134 °С.
183. 6.7 Контроль вакцини, що надходить з рекламацією, проводить організація-виробник у присутності представника ФДМ "Всеросійський державний Центр якості та стандартизації лікарських засобів для тварин та кормів".
184. 7 Методи випробування
185. 7.1 Визначення зовнішнього вигляду, кольору, наявності сторонньої домішки, плісняви, пластівців, що не розбиваються, тріщин ампул (флаконів)
186. 7.1.1 Для визначення зовнішнього вигляду, кольору, наявності сторонньої домішки, плісняви, пластівців, що не розбиваються, тріщин кожен флакон (ампулу) з рідкою вакциною струшують і переглядають у світлі, що проходить, перевертаючи вниз пробкою. Одночасно перевіряють міцність закупорювання та правильність етикетування.
187. 7.1.2 У флаконах і ампулах не повинно бути сторонньої домішки, плісняви, пластівців і тріщин, що не розбиваються.
188. 7.2 Визначення концентрації водневих іонів (рН)
189. 7.2.1 рН у вакцині визначають згідно з . рН має становити 7,0±0,2.
190. 7.3 Визначення наявності вакууму в ампулах із сухою вакциною; кисню та азоту у флаконах
191. 7.3.1 Наявність вакууму в ампулах із сухою вакциною визначають згідно з ГОСТ 28083 за допомогою апарату типу "д"Арсонваль" або "Тесла". У ампулах із сухою вакциною повинен бути вакуум.
192. 7.3.2 Наявність кисню та азоту у флаконах із сухою вакциною визначають за ГОСТ 27785. У флаконах за відсутності кисню має бути азот.
193. 7.4 Визначення масової часткивологи у сухій вакцині
194. 7.4.1 Масову частку вологи у сухій вакцині визначають за ГОСТ 24061. Масова частка вологи має бути не більше 3%.
195. 7.5 Визначення часу ресуспензування сухої вакцини
196. 7.5.1 Для проведення випробувань сухої вакцини використовують три ампули з сухою вакциною, які після їх розтину вносять по 1-2 см фізіологічного розчину. Вміст ампул після струшування повинен ресуспензуватися повністю протягом 3 хв.
197. 7.6 Визначення масової частки гліцерину в рідкій вакцині
198. Масову частку гліцерину визначають у рідкій вакцині з концентрацією спор 22-24 млн/см.
199. 7.6.1 Апаратура, матеріали, реактиви
200. Термостат із температурою нагрівання (22±2) °С.
201. Набір денсиметрів згідно з ГОСТ 18481.
202. Циліндри скляні мірні місткістю 100 см за ГОСТ 1770.
203. Термометри скляні згідно з ГОСТ 13646.
204. 7.6.2 Проведення випробування
205. Для проведення випробування використовують три флакони з вакциною, які попередньо витримують термостаті при температурі (22±2) °С протягом 30 хв. Один флакон з вакциною вилучають із термостата, розкривають і його вміст переливають у скляний циліндр, потім занурюють у нього денсиметр, розрахований на вимірювання густини рідини від 1,0597 до 1,0860 г/см.
206. Циліндр з вакциною та денсиметром поміщають у термостат, де витримують при температурі (22±2) °С протягом 15-20 хв. Аналогічно надходять з другим і третім флаконами з вакциною.
207. 7.6.3 Обробка результатів
208. Масову частку гліцерину у вакцині у відсотках визначають за показанням денсиметра відповідно до таблиці 2.
209. Таблиця 2
210. За остаточний результат приймають середньоарифметичні результати трьох паралельних визначень. Допустима масова частка гліцерину в рідкій вакцині (30,0±3,0)% відповідає щільності 1,0648-1,0806 г/см.
211. 7.7 Визначення кількості живих суперечок
212. 7.7.1 Визначення кількості живих суперечок шляхом посіву вакцини на щільні живильні середовища
213. 7.7.1.1 Апаратура, матеріали та реактиви
214. Автоклав вертикальний чи іншої марки.
215. Термостат із температурою нагрівання (37±1) °С.
216. Флакони скляні місткістю 20 см.
217. Піпетки скляні мірні виконань 1, 2, 3, 4, 5, 6 місткістю 0,1; 1,0; 5,0; 10 см по ГОСТ 29230.
218. Ваги лабораторні середнього класу точності згідно з ГОСТ 24104.
219. Чашки Петрі згідно з ГОСТ 25336.
220. Камера Горяєва.
221. Пробки гумові.
222. Шпателі стерильні.
223. Вода дистильована для ін'єкцій.
224. Розчин фізіологічний з рН (7,0±0,2) .
225. Натрій фосфорнокислий піро згідно з ГОСТ 342.
226. Агар м'ясо-пептонний (МПА) згідно з ГОСТ 29112.
227. Поживний агар сухий "КД".
228. Середовище для культивування сибірки - агар СВК.
229. Твін-80*.

________________
* Фірма "Флюка".


230. 7.7.1.2 Проведення випробування
231. Для випробування використовують такі агарові середовища; м'ясо-пептонний агар (МПА), агар СВК, поживний агар КД, які готують відповідно до чинної рецептури.
232. Розплавлений і охолоджений до температури 45 ° -50 ° С агар розливають по 15-20 см в стерильні чашки Петрі. Для роботи використовують живильне середовище без конденсату, для чого після розливу агару чашки Петрі залишають до моменту застигання агару і потім обережно над полум'ям стерильними тампонами видаляють конденсат, що утворився з кришки чашки. Для проведення випробування беруть по три ампули або по три флакони із сухою вакциною. Вміст кожної ампули (флакона) розводять розріджувачем - 0,01%-ним водним розчином твина-80 або фізіологічним розчином, дистильованою водою з рН (7,0±0,2) до робочого розведення в кількості, позначеній на етикетці коробки з вакциною. Розведені препарати, а також нерозведені вакцини струшують і з кожної ампули (флакону) готують по шість послідовних десятиразових розведень від 10 до 10. Для кожного розведення використовують окрему піпетку. Розведення вакцини витримують при кімнатній температуріпротягом 15-20 хв і після ретельного перемішування двох останніх розведень вакцини (10, 10), починаючи з останнього, стерильною мікропіпеткою роблять висіви в чашки Петрі з агаром. Кожним розведенням вакцини засівають три чашки Петрі з агаром, вносячи в кожну по 0,1 см суспензію.
233. Після рівномірного розподілу стерильним шпателем посівного матеріалу поверхнею агару чашки Петрі переносять у термостат, ставлять вгору дном і витримують при температурі (37±1) °С протягом 18-24 год. При розподілі посівного матеріалу кожного розведення вакцини користуються окремим стерильним шпателем.
234. 7.7.1.3 Обробка результатів
235. Після закінчення зазначеного часу підраховують кількість колоній, що виросли в кожному розведенні вакцини і знаходять середньоарифметичне число колоній. Кількість живих спор в 1 см вакцини, млн, обчислюють за формулою
236. , (1)
237. де - середньоарифметична кількість колоній, що виросли у чашках з розведення 10;
238. - Середньоарифметична кількість колоній, що виросли в чашках з розведення 10;
239. - Постійний коефіцієнт.
240. Результати визначення концентрації спор в 1, 2, 3 флаконах або ампулах підсумовують, ділять на 3 і отримують середньоарифметичне значення, яке приймають за остаточний результат кількості життєздатних спор в 1 см розведеної або нерозведеної вакцини.
241. 7.7.2 Визначення кількості живих суперечок прискореним методом
242. Визначення кількості живих спор в 1 см вакцини проводять у два етапи: спочатку визначають загальну кількість спор в 1 см вакцини, потім - масову частку живих спор у відсотках. Після цього шляхом розрахунку визначають дійсне число живих спор 1 см вакцини.
243. 7.7.2.1 Апаратура, матеріали та реактиви за 7.7.1.1.
244. 7.7.2.2 Для підрахунку загальної кількості спор в 1 см вакцину, підготовлену за 7.7.1.2, розводять у співвідношенні 1:5 фізіологічним розчином. Отриманою суспензією суперечку заповнюють звичайним способом камеру Горяєва. Через 10 хв під мікроскопом (об'єктив 40, окуляр 7 або 10) проводять підрахунок спор у п'яти великих квадратах, розташованих по діагоналі, і знаходять середньоарифметичну кількість спор в одному великому квадраті. Загальна кількістьспір в 1 см вакцини, млн, обчислюють за формулою
245. , (2)
246. де – середньоарифметична кількість спор у великому квадраті;
247. - Постійний коефіцієнт.
248. За остаточний результат приймають середньоарифметичні результати трьох визначень.
249. 7.7.2.3 Визначення масової частки живих суперечок
250. Для цього на предметне скло стерильною пастерівською піпеткою наливають тонкий рівномірний шар розплавленого агару (МПА, СВК, КД). Після його застигання стерильною піпеткою наносять краплю вакцини, підготовленої по 7.7.1.2, і, нахиляючи скло в різні сторони, Поступово розподіляють краплю по поверхні агару. Предметне скло з висіяною вакциною поміщають у чашку Петрі, яку для створення вологості кладуть шматочок вати, змоченою водою, і чашку Петрі ставлять у термостат з температурою (37±1) °С.
251. Після закінчення 2 годину ділянку засіяної поверхні агару (МПА, СВК, КД) переглядають під імерсійною системою мікроскопа з фазовоконтрастним пристроєм (об'єктив 90, окуляр 7 або 10), для чого на нього попередньо поміщають покривне скло. У кожному полі зору окремо підраховують сибіркові палички і не пророслі сибірки. Загальна кількість підрахованих клітин (сибіркових паличок і суперечка) має бути не менше 500.
252. Масову частку живих суперечок у вакцині % обчислюють за формулою
253. , (3)
254. де - число підрахованих сибіркових паличок;
255. - загальна кількість підрахованих клітин (паличок та суперечка);
256. - Постійний коефіцієнт.
257. 7.7.2.4 Після визначення загальної кількості суперечок в 1 см вакцини та частки в ній живих суперечок % проводять обчислення числа живих суперечок в 1 см вакцини, млн, за формулою
258. . (4)
259. 7.8 Визначення масової частки суперечка
260. 7.8.1 Апаратура, матеріали та реактиви
261. Мікроскоп біологічний марки МБІ за ГОСТ 8074 чи будь-якої марки зі збільшенням 400-900.
262. Пристрій для спостереження методом фазового розмаїття КФ4.
263. Скло предметне для мікропрепаратів за ГОСТ 9284.
264. Скло покривне для мікропрепаратів за ГОСТ 6672.
265. 7.8.2 Проведення випробування
266. Для випробування використовують суху або рідку вакцину, підготовлену за 7.7.1.2. З приготовлених вакцин роблять розведення 10 на фізіологічному розчині. З розведення вакцини 10 на предметних скла готують роздавлену або висячу краплю і переглядають її під мікроскопом при кратності збільшення 400-900 у фазовому контрасті. У кожному полі зору окремо підраховують сибірки та палички. Загальна кількість підрахованих клітин (спор та паличок) має бути не менше 200.
267. 7.8.3 Обробка результатів
268. Масову частку спор у вакцині, %, обчислюють за формулою
269. , (5)
270. де - число підрахованих сибіркових спір;
271. - Постійний коефіцієнт;
272. - загальна кількість підрахованих клітин (спор та паличок).
273. Масова частка спор має становити (95,0±5,0)%.
274. 7.9 Визначення мікробіологічної чистоти
275. 7.9.1 Апаратура, матеріали та реактиви
276. Мікроскоп біологічний марки МБІ згідно з ГОСТ 8074.
277. Флакони скляні місткістю 100 см.
278. Затори ватно-марлеві.
279. М'ясо-пептонний бульйон згідно з ГОСТ 20730.
280. М'ясо-пептонний агар за ГОСТ 29112.
281. Середа Сабуро за ГОСТ 28085.
282. Середовище Кітт-Тароцці (МППБ) за ГОСТ 28085.
283. 7.9.2 Проведення випробування
284. 7.9.2.1 Підготовка середовищ – за ГОСТ 28085.
285. 7.9.2.2 Для випробування використовують п'ять ампул або п'ять флаконів із вакциною. Вміст кожної ампули з сухою вакциною розводять в фізіологічному стерильному розчині в обсязі, зазначеному на етикетці коробки з вакциною, використовуючи для кожної ампули окремий флакон. З кожної проби сухої або рідкої вакцини роблять посіви по 0,2-0,3 см у МПБ, МППБ під вазеліновим маслом, на МПА, агар Сабуро у дві пробірки з кожним середовищем і по 0,5-1,0 см у два флакони з МПБ та МППБ під вазеліновим маслом. Через три доби інкубування посівів з флаконів з МППБ під вазеліновим маслом проводять пересівання на аналогічне живильне середовище у флаконах. Посіви інкубують протягом 10 діб, а пересіви 7 діб за температури (37±1) °С, для агару Сабуро - при температурі (22±2) °С.
286. Протягом зазначеного часу посіви щодня переглядають на чистоту зростання сибірки. При утрудненні диференціації сибірки від сторонньої бактеріальної та грибної мікрофлори з мікробних культур готують мазки на знежирених предметних стеклах. Мазки підсушують на повітрі до повного висихання, фіксують над полум'ям пальника і фарбують Грамом. Фарбу змивають дистильованою водою, предметне скло з мазками висушують фільтрувальним папером і переглядають під імерсійною системою мікроскопа.
287. 7.9.3 Обробка результатів
288. У всіх поживних середовищах не повинно бути зростання сторонньої бактеріальної та грибної мікрофлори. У МПБ і МПА має бути типове зростання культури штаму 55-ВНИИВВиМ. У мазках, приготованих з мікробних культур і пофарбованих за Грамом, має бути сибірка культура штаму 55-ВНИИВВиМ.
289. 7.10 Визначення типовості росту культури штаму 55-ВНДІВВіМ
290. 7.10.1 Апаратура, матеріали, реактиви 7.7.1.1. та 7.9.1 та агар кров'яний за нормативним документом.
291. 7.10.2 Проведення випробування
292. Поживні середовища (МПБ та МПА) та випробувану вакцину готують за 7.9.2. Визначення типовості росту проводять шляхом посіву досліджуваної серії вакцини по 0,2-0,3 см у дві пробірки з МПБ, дві пробірки з МПА та по 0,3-1,0 см у два флакони місткістю 50,0 см або 100,0 см з МПБ, а також бактеріологічною петлею штрихами (для отримання окремих колоній) на три чашки Петрі з МПА та три чашки з кров'яним агаром. Через 5 діб інкубування посівів із флаконів з МПБ проводять пересів на аналогічне середовище у флаконах. Посіви витримують протягом 10 діб і щодня переглядають візуально на типовість росту сибірки штаму 55-ВНИИВВиМ, пересіви - 5 діб, а посіви на кров'яний агар і МПА на чашках Петрі - 1 діб при температурі (37±1) °С.
293. 7.10.3 Обробка результатів
294. У посівах вакцини в МПБ має бути характерне зростання сибірки штаму 55-ВНИИВВиМ з утворенням на дні пробірки або флакона пухкого осаду, а на поверхні середовища - пристінкового кільця. Бульйон має бути прозорим або з невеликою опалесценцією. При струшуванні пробірки або флакона з посівами осад розбивається на гомогенну завись. Неприпустиме зростання з утворенням плівки, помутнінням середовища. На поверхні МПА має бути зростання культури штаму 55-ВНИИВВиМ у вигляді сірувато-білуватих, круглих, шорстких, із сріблястим відтінком колоній R-форми, діаметром 3-4 мм.
295. На кров'яному агарі через 24 години інкубування повинні формуватися сірувато-білуваті, круглі та шорсткі колонії діаметром 2-4 мм без ознак гемолізу. У наступні дні можливий гемоліз.
296. 7.11 Визначення морфологічних властивостей штаму 55-ВНДІВВіМ
297. 7.11.1 Апаратура, матеріали та реактиви за 7.7.1.1.
298. 7.11.2 Проведення випробування
299. З 24-46 год мікробних культур, вирощених у МПБ та на МПА по 7.10.2, готують мазки та забарвлюють їх за Грамом, які переглядають під імерсійною системою мікроскопа.
300. 7.11.3 Обробка результатів
301. У мазках, пофарбованих за Грамом, повинна бути типова і чиста культура штаму 55-ВНИИВВиМ у вигляді однорідних струнких паличок і коротких ланцюжків темно-синього (фіолетового) кольору, а суперечки повинні бути овальної форми, блискучі (незабарвлені), що знаходяться в центрі. або поза нею. Інволюційні форми (звивисті, округлі і т.д.) повинні бути відсутніми.
302. 7.12 Визначення однорідності культури штаму 55-ВНДІВВіМ
303. 7.12.1 Апаратура, матеріали та реактиви за 7.7.1.1 та 7.9.1 з наступним доповненням:
304. Серце великої рогатої худоби.
305. Підшлункова залоза великої рогатої худоби згідно з ГОСТ 11285.
306. Хлороформ згідно з ГОСТ 20015.
307. М'ясна вода за ГОСТ 20729.
308. Агар харчовий за ГОСТ 16280 або мікробіологічний агар за ГОСТ 17206.
309. 7.12.2 Проведення випробування
310. При випробуванні використовують 1,3% агару на триптичному переварі серця, для приготування якого беруть 6,6 кг свіжих бичачих сердець, очищених від жиру, ріжуть на шматочки і варять 10-15 хв 10 дм. водопровідної водипри постійному перемішуванні. М'ясо пропускають через м'ясорубку. Відвар охолоджують до температури (50±5) °З додаючи холодну воду до початкового об'єму. Відвар підлужують 20%-ним розчином NaOH до рН 7,8-8,0. Відвар та м'ясний фаршпоміщають у сулію, куди додають 1,32 кг підшлункової залози, 100 см хлороформу і витримують у термостаті при температурі (48±1) °С протягом 7 діб. Перші три доби перемішують кожні 30 хв, періодично перевіряючи, щоб рН становив 7,8-8,0. Потім перемішують один раз на добу і за дві доби до закінчення гідролізу припиняють перемішування. Фільтрують полотняний фільтр, стерилізують при температурі (110±5) °С протягом 30 хв.
311. Для приготування 1,3%-ного агару беруть триптичного перевару серця - 2,4 дм, м'ясної води - 2,4 дм, водопровідної води - 7,2 дм, 0,5%-ного розчину NaCI - 60 см, 20%- ного розчину NaOH - 7,0 см та агару (в % до загального обсягу) - 1,3%.
312. Середовище стерилізують в автоклаві 30 хв за температури (110±5) °С. Вміст амінного азоту в середовищі має становити від 160 до 180 мг/%, рН середовища до стерилізації 7,7-7,8 після стерилізації 7,4-7,6.
313. Для проведення випробування використовують вакцину зі штаму 55-ВНДІВВіМ у розведенні (10) по 7.7.1.2. З отриманого розведення вакцини роблять посіви по (0,10±0,01) см на три чашки Петрі з 1,3% агаром, приготованим на триптичному переварі серця. Посіви інкубують протягом 20-24 годин при температурі (37±1)
314. °З.
315. 7.12.3 Обробка результатів
316. Колонії, що виросли на поверхні 1,3%-ного агару, приготовленого на триптичному переварі серця в чашках Петрі, повинні бути однорідними (круглі, підняті над поверхнею агару, опуклі, шорсткі, жовтувато-білого кольору, діаметром 3-4 мм). Наявність дисоціативних форм колоній, що відрізняються за формою, кольором, консистенцією та розміром, не повинна перевищувати 5%.
317. 7.13 Визначення рухливості культури штаму 55-ВНДІВВіМ
318. 7.13.1 Апаратура, матеріали та реактиви за 7.7.1.1.
319. 7.13.2 Проведення випробування
320. МПБ та випробувану вакцину зі штаму 55-ВНИИВВиМ готують за 7.9.2. З 18-24 год мікробної культури, вирощеної в МПБ, як зазначено в 7.10.2, на предметних скла готують за загальноприйнятими методиками "роздавлену або висячу краплі" і переглядають за допомогою мікроскопа з фазоконтрастним пристроєм при збільшенні 400-600.
321. 7.13.3 Обробка результатів
322. У "роздавленій чи висячій краплях" під мікроскопом повинні бути лише нерухомі палички та ланцюжки, що складаються з паличок.
323. 7.14 Визначення капсулоутворення
324. 7.14.1 Апаратура, матеріали та тварини
325. Холодильник будь-якої марки з температурою (4±2) °С.
326. Термостат температури (37±1) °С.
327. Центрифуга із прискоренням (5-10)х10 об/хв (9,8 м/с).
328. Флакони скляні місткістю від 20 до 100 см.
329. Скляні пробірки за ГОСТ 25336.
330. Піпетки скляні мірні виконань 1, 2, 3, 4, 5, 6 місткістю 1,0, 5,0 та 10,0 см за ГОСТ 29230.
331. Скло предметне для мікропрепаратів за ГОСТ 9284.
332. Пробки гумові.
333. Папір фільтрувальний за ГОСТ 12026.
334. Голки ін'єкційні N 0625 згідно з ГОСТ 25377.
335. Вода дистильована згідно з ГОСТ 6709.
336. Вода водопровідна за ГОСТ Р 51232
337. Розчин фізіологічний з рН (7,0±0,2).
338. Сироватка крові великої рогатої худоби за нормативним документом.
339. Водяна баня.
340. Гідрокарбонатна магнієво-кальцієво-натрієва природна мінеральна водаза нормативним документом.
341. Ефір для наркозу за нормативним документом.
342. Спирт етиловий, ректифікований за ГОСТ Р 51652.
343. Миші білі масою 18-20 г.
344. Синець Леффлера або фарба Романовського-Гімза.
345. 7.14.2 Проведення випробування
346. Для проведення випробувань на капсулоутворення використовують середовище "Казань", що складається з 60%-ної природної мінеральної (гідрокарбонатної магнієво-кальцієво-натрієвої) стерильної води і 40%-ної стерильної неконсервованої сироватки крові великої рогатої худоби, інактивованої5. Приготоване середовище розливають у стерильні пробірки, які закривають стерильними гумовими пробками. При цьому слід звернути увагу на те, щоб рівень середовища був нижчим на 1 см нижнього кільця гумових пробок. У такому вигляді середовище може зберігатись при температурі (4±2) °С тривалий час, не втрачаючи своїх властивостей.
347. Для випробування використовують чотири ампули з сухою або чотири флакони або ампули з рідкою вакциною. Вміст кожної ампули з сухою вакциною розводять стерильним фізіологічним розчином половині обсягу, зазначеного на етикетці коробки з ампулами, використовуючи для кожної ампули окремий флакон. З метою підвищення концентрації рідкої вакцини та зменшення вмісту в ній гліцерину флакони з вакциною відстоюють при температурі (4±2) °С протягом 5-7 діб. Після відстою кожного флакона видаляють три чверті надосадової рідини, а осад розводять у співвідношенні 1:2 стерильним фізіологічним розчином. Замість відстоювання можна використовувати центрифугування при (5-10)10 об/хв протягом 20-30 хв, надосадову рідину видаляють, а осад розводять стерильним фізіологічним розчином до половини первинного об'єму.
348. Після розведення сухої чи концентрованої рідкої вакцини готують дві середні проби. Для цього по 5 см вмісту кожного з двох флаконів переносять у стерильний флакон, ретельно перемішують і закривають флакон гумовою або ватно-марлевою пробкою.
349. Шприци та ін'єкційні голки стерилізують шляхом кип'ятіння в дистильованій воді протягом 50-60 хв. Ватні тампони загортають пергаментний папір, поміщають в бікс і стерилізують в автоклаві при температурі (120±1) °С протягом 1 год.
350. З кожної приготованої проби роблять посіви по 1,0 см у дві пробірки з середовищем "Казань" або заражають п'ять білих мишей, взятих із групи свідомо здорових тварин, внутрішньочеревно в дозі 1 см (40-48 млн. живих спор).
351. Після закінчення 10-18 год інкубації при температурі (37±1) °З мікробних культур, що виросли в середовищі "Казань", готують мазки на знежирених предметних скла. Мазки висушують на повітрі, фіксують у суміші Никифорова (одна частина етанолу та одна частина ефіру) протягом 15 хв, після чого висушують на повітрі і фарбують синькою Леффлера протягом 15-20 хв. Фарбу змивають водопровідною водою, предметне скло з мазками висушують і переглядають під імерсійною системою мікроскопа.
352. Усі або більшість заражених білих мишей повинні загинути протягом п'яти діб. Виживших мишей після зазначеного терміну піддають евтаназії. З черевного ексудату, серця, печінки та селезінки полеглих білих мишей роблять мазки-відбитки на знежирених предметних шибках, фіксують, фарбують, як мазки із середовищем "Казань", і переглядають під імерсійною системою мікроскопа. Як контроль використовують 2-ю вакцину Ценковського.
353. 7.14.3 Обробка результатів
354. У мазках мікробної культури штаму 55-ВНИИВВиМ, що виросла в середовищі "Казань", або в мазках-відбитках з черевного ексудату та органів загиблих мишей повинні бути тільки безкапсульні сибіркові мікроби. У контрольних пробах – капсульні форми мікроба.
355. 7.15 Визначення нешкідливості
356. 7.15.1 Матеріали, реактиви та тварини
357. Скляні пробірки за ГОСТ 25336.
358. Піпетки скляні мірні виконань 1, 2, 3, 4, 5, 6 місткістю від 1,0 до 10,0 см за ГОСТ 29230.
359. Тампони ватяні.
360. Шприци місткістю 5 см за ГОСТ 22967.
361. Вода дистильована за ГОСТ Р 51232.
362. Розчин фізіологічний з рН (7,0±0,2).
363. Спирт етиловий, ректифікований за ГОСТ Р 51652.
364. Кролики вагою 2,5-3,0 кг.
365. 7.15.2 Підготовка до випробування
366. Для проведення випробування використовують суміш рівних обсягів вакцини із трьох ампул або трьох флаконів, яку готують за 7.7.1.2.
367. 7.15.3 Проведення випробування
368. Три клінічно здоровим кроликаммасою 2,5-3,0 кг вакцину вводять підшкірно з розрахунку 200 млн спор в область зовнішньої поверхні стегна в рівних обсягах обидві кінцівки.
369. 7.15.4 Обробка результатів
370. Вакцину вважають нешкідливою, якщо всі кролики протягом 10 діб після її введення залишаються живими. Допускається утворення набряків дома введення вакцини, підвищення температури тіла в окремих тварин.
371. 7.16 Визначення імуногенної активності
372. 7.16.1 Матеріали, реактиви, тварини
373. Флакони скляні місткістю 50 см.
374. Скляні пробірки за ГОСТ 25336.
375. Піпетки скляні мірні виконань 1, 2, 3, 4, 5, 6 місткістю 1,0, 5,0, 10,0 см за ГОСТ 29230.
376. Пробки гумові або ватно-марлеві.
377. Тампони ватяні.
378. Голки ін'єкційні N 0416-0426 згідно з ГОСТ 25377.
379. Вода дистильована згідно з ГОСТ 6709.
380. Розчин фізіологічний з рН (7,0±0,2).
381. Спирт етиловий, ректифікований за ГОСТ Р 51652.
382. Культура сибірка вірулентна для морських свинок - штам 2-ї вакцини Ценковського (М-71 - стандартна заражаюча сибірська культура або 71/12).
383. 7.16.2 Підготовка до випробування
384. Для випробування використовують суміш рівних об'ємів вакцини із трьох ампул або трьох флаконів, приготовлену за 7.7.1.2. Для цього 12 клінічно здорових морських свинок масою 350-400 г імунізують вакциною підшкірно в ділянку живота в дозі по 10,0-12,0 млн спор в обсязі 0,5 см і 10 свинок тієї ж маси залишають для контролю.
385. 7.16.3 Проведення випробування
386. Через 12-14 діб після вакцинації 10 тварин з числа вакцинованих і 10 контрольних (невакцинованих) морських свинок заражають сибірковою стандартною культурою (штам 2-ї вакцини Ценковського М-71 або 71/12) в дозі по (1,0±0, 1) млн життєздатних суперечок. Культуру вводять підшкірно в області живота в об'ємі (0,50±0,05) см кожній тварині.
387. Термін спостереження за тваринами – 10 діб після зараження.
388. 7.16.4 Обробка результатів
389. Не менше восьми з десяти неімунізованих морських свинок мають загинути, а вакциновані - не менше восьми з десяти мають залишитися живими протягом 10 діб після зараження.
390. У разі відмінка великої кількостівакцинованих морських свинок імуногенні властивості вакцини перевіряють, як зазначено в 7.16, на подвоєній кількості тварин.
391. У разі отримання незадовільних результатів у повторній перевірці імуногенні властивості вакцини перевіряють кількісним методом порівняно з референс-препаратом вакцини зі штаму 55-ВНІІВВіМ, як зазначено в 7.16.5.
392. 7.16.5 Визначення імуногенної активності вакцини кількісним методом
393. Метод заснований на визначенні 50% імунізуючої дози () вакцини в порівнянні з референс-препарату вакцини зі штаму 55-ВНИИВВиМ.
394. 7.16.5.1 Підготовка до випробування
395. З сухої або рідкої вакцини, підготовленої по 7.7.1.1 і референс-препарату вакцини з штаму 55-ВНИИВВиМ, роблять розведення на стерильному фізіологічному розчині з вмістом 10 млн, 2 млн, 400 тис. і 80 тис. живих спор. суспензіями спор кожного з двох зазначених препаратів імунізують 30 клінічно здорових морських свинок масою 350-400 г підшкірно в область живота в об'ємі по 0,5 см. останні менші дози - по сім тварин, для того, щоб на час зараження живими залишилося не менше шести морських свинок.
396. 7.16.5.2 Проведення випробування
397. Через 12-14 діб по шість морських свинок, імунізованих вакциною з штаму 7.16. 3.
398. 7.16.5.3 Обробка результатів
399. Усі неімунізовані морські свинки мають загинути протягом 10 діб. Допускається виживання однієї невакцинованої морської свинки.
400. З імунізованих тварин у зазначений термін, залежно від введення доз випробуваної вакцини та референс-препарату вакцини зі штаму 55-ВНІІВВіМ, деяка кількість залишається живою.
401. вакцини зі штаму 55-ВНИИВВиМ та референс-препарату цієї ж вакцини обчислюють за формулою
402. , (6)
403. де – логарифм максимальної імунізуючої дози (5 млн спор);
404. - логарифм кроку розведення препарату, що дорівнює 5;
405. - відношення числа тварин, що вижили, після зараження, до загальному числуморських свинок, яким було введено дози випробуваного препарату;
406. - Індекс, відповідний номеру дози;
407. - сума значень, знайдених всім випробуваних доз;
408. - Постійний коефіцієнт.
409. Залежно від кількості морських свинок, що вижили, можуть бути отримані наступні значення та відповідні їм значення, зазначені в таблиці 3. Значення вакцини зі штаму 55-ВНИИВВиМ не повинно перевищувати значення референс-препарату вакцини зі штаму 55-ВНИИВВиМ.
410. Таблиця 3
411. 7.17 Визначення залишкової вірулентності
412. 7.17.1 Матеріали, реактиви, тварини
413. Шприц місткістю 5 см за ГОСТ 22967.
414. Піпетки мірні за ГОСТ 29230.
415. Скляні пробірки за ГОСТ 25336.
416. Розчин фізіологічний стерильний рН (7,0±0,2) .
417. Морські свинки масою 350-400 р.
418. Білі миші масою 18-20 р.
419. 7.17.2 Підготовка до випробування
420. Для випробування використовують суміш вакцини із трьох ампул або трьох флаконів, приготовлену за 7.7.1.2.
421. 7.17.3 Проведення випробування
422. Дванадцять клінічно здорових морських свинок масою 350-400 г, імунізують вакциною підшкірно в ділянку м'язів живота в дозі 10,0-12,0 спор в об'ємі 0,5 см, одночасно десяти білим мишам масою 18-20 г внутрішньочеревно вводять по 10,0 -12,0 млн спор обсягом 0,5 див.
423. Вакцина зі штаму 55-ВНИИВВиМ у морських свинок викликає у місці ін'єкції утворення набряку і можлива загибель одного-двох тварин протягом 10 діб. У білих мишей вакцина викликає загибель одного-п'яти тварин протягом 1-5 діб.
424. 8 Транспортування та зберігання
425. 8.1 Вакцину транспортують відповідно до ГОСТ 17768.
426. Транспортування вакцини при температурі понад 20 ° С понад п'ять діб не допускається.
427. 8.2 Вакцину зберігають у сухому темному приміщенні при температурі від 2°С до 15°С протягом терміну придатності.
428. 8.3 Термін придатності вакцини – два роки з дати виготовлення. Датою виготовлення сухої вакцини зі штаму 55-ВНИИВВиМ вважають дату закінчення її ліофілізації, а рідкої вакцини - дату з'єднання спорової культури штаму 55-ВНИИВиМ з 30%-ним нейтральним розчином гліцерину.
429. 9 Вказівки щодо застосування
430. 9.1 Вакцину застосовують у ветеринарній практиці для профілактичної імунізації сприйнятливих тварин проти сибірки відповідно до інструкції щодо її застосування, затвердженої в установленому порядку.
431. 9.2 Кількість живих спір у вакцині для підшкірного застосування має бути (22±2) млн/см, для внутрішньошкірного застосування – (110±10) млн/см.
432. 9.3 Вакцина, що зазнала заморожування, для застосування не придатна.
433. Бібліографія

________________
* Текст відповідає оригіналу. Слід читати СанПіН 2.3.2.1078-01. - Примітка виробника бази даних.

ІНСТРУКЦІЯ

щодо застосування вакцини проти сибірки тварин

зі штаму 55-ВНИИВВиМ живої рідкої

(Організація-виробник: ФГУП "Орлівська біофабрика")

I. ЗАГАЛЬНІ ВІДОМОСТІ

1. Міжнародне непатентоване найменування: Вакцина проти сибірки тварин зі штаму 55-ВНИИВВиМ жива рідка.

2. Лікарська форма: рідина. Вакцина виготовлена ​​з спір живої безкапсульної сибірки культури вакцинного штаму 55-ВНИИВВиМ з додаванням в якості стабілізатора (30 3)% гліцерину.

На вигляд вакцина являє собою прозору або злегка опалесцентну рідину з незначним білуватим осадком, що утворюється при зберіганні, легко розбивається в гомогенну суспензію.

Вакцина розфасована по 1,0 см 3 (10 – 50 доз) у скляні запаяні ампули місткістю 3 см 3 або по 50 см 3 (50 доз) у скляні флакони, закупорені гумовими пробками, укріпленими алюмінієвими ковпачками.

3. Ампули з вакциною упаковані в коробки, що забезпечують їх цілісність. У кожну коробку вкладено інструкцію із застосування вакцини та пристосування для розкриття ампул.

Флакони з вакциною упаковані в ящики із гофрованого картону або інших матеріалів, що є транспортною тарою. У кожну скриньку вкладено щонайменше п'ять екземплярів інструкції із застосування вакцини.

Термін придатності вакцини два роки з дати випуску за умови дотримання умов зберігання та транспортування. Після закінчення терміну придатності вакцина до застосування не придатна.

4. Вакцину зберігають і транспортують у сухому темному місці при температурі від 2 °С до 8 °С. Допускається транспортування вакцини при температурі не вище 20 ºС протягом 14 діб.

5. Вакцину слід зберігати у місцях, недоступних для дітей.

6. Вакцину у флаконах (ампулах) без маркування, з порушенням цілісності та/або герметичності закупорювання, зі зміненим зовнішнім виглядом, що зазнала заморожування, з терміном придатності, що минув, невикористану в день розкриття флаконів (ампул), бракують, знезаражують кип'ятінням протягом двох годин і утилізують.

Утилізація знезараженої вакцини не вимагає дотримання спеціальних запобіжних заходів.

^ ІІ. БІОЛОГІЧНІ ВЛАСТИВОСТІ

7. Вакцина забезпечує формування у тварин імунітету до збудника сибірки через 10 діб після одноразового введення тривалістю 12 місяців у дорослих тварин і шість місяців у молодняку.

Кількість живих суперечок безкапсульної сибірки культури вакцинного штаму 55-ВНИИВВиМ у вакцині для підшкірного застосування становить (22,02,0) млн/см 3 , для внутрішньошкірного - (110,010,0) млн/см 3 .

Вакцина нешкідлива, помірковано реактогенна, лікувальних властивостей не має.

^ ІІІ. ПОРЯДОК ЗАСТОСУВАННЯ

8. Вакцина призначена для профілактики сибірки у сільськогосподарських тварин (велика і дрібна рогата худоба, коні, осли, верблюди, олені, свині, хутрові звірі) у всіх категоріях господарств.

Хворих на інфекційні хвороби;

Клінічно хворих;

Ослаблених та виснажених;

В останній місяць вагітності та протягом 7-10 діб після пологів;

Протягом 7-10 діб після хірургічних операцій;

З підвищеною температурою тіла;

У спекотний та холодний час.

На тваринах, які не підлягають імунізації, складають опис із зазначенням причини, через яку вони не були вакциновані, та можливого термінупроведення імунізації.

10. Молодняк всіх видів тварин, крім лошат, вперше вакцинують у тримісячному віці, лошат – дев'ятимісячному, повторно їх вакцинують через шість місяців.

Дорослих тварин ревакцинують щороку одноразово.

У разі захворювання на сибірку вакцинації піддають все поголів'я, що мало прямий або непрямий контакт з хворою твариною, незалежно від пори року і термінів попереднього введення вакцини.

Позапланової одноразової вакцинації піддають всіх тварин, які вперше надійшли в господарство. У загальну череду вакцинованих тварин допускають не раніше, ніж через 14 діб після імунізації.

Вакцину вводять тваринам підшкірно, використовуючи одноразові або звичайні шприци, або внутрішньошкірно за допомогою безигольного ін'єктора в наступних дозах (див. 3):

^ Вид тварин	Місце введення вакцини	Дози, см 3
Підшкірно
Вівці та кози	Область задньої третини шиї або внутрішньої поверхні стегна	0,5
Велика рогата худоба, олені, верблюди, коні, віслюки	Область задньої третини шиї	1,0
Свині	Область внутрішньої поверхні стегна або за вухом	1,0
Пухові звірі	Область внутрішньої поверхні стегна або підхвостове дзеркало	1,0
Внутрішньошкірно
Велика рогата худоба, олені, верблюди	Безшерста ділянка промежини	0,2
Коні та осли	Область задньої третини шиї	0,2
Свині	За вухом	0,2
Вівці та хутрові звірі	Підхвостове дзеркало	0,1

Вакцина у флаконах знаходиться в готовому для застосування вигляді і використовується тільки для підшкірного застосування.

Вакцину в ампулах перед застосуванням розводять кип'яченою водою, стерильним 0,9%-ним розчином натрію хлориду або 30%-ним розчином гліцерину. З цією метою вакцину з ампули за допомогою шприца з голкою переносять у стерильний флакон з відповідним розріджувачем, взятому в об'ємі, необхідному для розведення вакцини для підшкірного або внутрішньошкірного застосування, зазначеному на етикетці коробки. Розведену вакцину використовують для підшкірного або внутрішньошкірного застосування.

^ Забороняється підшкірне застосування вакцини, розведеної внутрішньошкірного застосування.

Для вакцинації використовують шприци, голки, а також безголковий ін'єктор, які перед початком і після закінчення роботи стерилізують кип'ятінням у дистильованій воді протягом двох годин.

^ Забороняється використовувати для стерилізації хімічні дезінфікуючі засоби.

У процесі імунізації флакон із вакциною періодично струшують.

При вакцинації дотримуються правил асептики та антисептики.

Місце введення вакцини дезінфікують 70% розчином етилового спирту.

Протягом 10 діб після вакцинації за тваринами встановлюють спостереження, не допускають перегрівання, переохолодження, утомливих перегонів.

11. Передозування вакцини може викликати у тварин:

підвищення температури тіла;

Освіта вираженого набряку у місці введення вакцини;

збільшення регіонарних лімфатичних вузлів;

Погіршення загального стану аж до смерті.

Тварин із зазначеними ознаками негайно ізолюють і проводять лікування сироваткою протисибіркою або глобуліном протисибірковим та/або антибіотиками (пеніцилін, стрептоміцин, тетрациклін, біоміцин та ін.), а також призначають їм симптоматичні засоби(глюкозу, кофеїн та Камфорна оліячи ін.).

12. Особливостей поствакцинальної реакції при первинному та наступних введеннях вакцини не встановлено.

13. Слід уникати порушень схеми проведення вакцинації, оскільки це може призвести до зниження ефективності імунопрофілактики.

У разі пропуску чергового введення вакцини необхідно провести імунізацію якнайшвидше.

14. Через добу після вакцинації у тварин можливе незначне підвищення температури тіла та формування в місці ін'єкції помірно вираженої припухлості, що зникає через 3 - 5 діб.

15. Забороняється застосування вакцини проти сибірки спільно з іншими живими імунобіологічними препаратами, а також з антибіотиками, антигельмінтиками та інсектоакарицидами протягом 14 діб до і після чергової імунізації.

16. Молоко від вакцинованих тварин використовують без обмежень, за винятком випадків, коли у них проявляються поствакцинальні ускладнення. У такому випадку молоко піддають кип'ятінню і використовують для годування тваринам.

Забій тварин на м'ясо дозволяється не раніше ніж через 10 діб після введення вакцини. При вимушеному забої тварини протягом цього терміну м'ясо направляють на термічну промислову переробку, у разі загибелі тварини труп спалюють.

^ IV. ЗАХОДИ ОСОБИСТОЇ ПРОФІЛАКТИКИ

17. При роботі з вакциною слід дотримуватись загальних правил особистої гігієни та техніки безпеки, передбачених при роботі з лікарськими засобами ветеринарного призначення.

18. Усі особи, які беруть участь у проведенні вакцинації, повинні бути одягнені в спецодяг (гумові чоботи, халат, штани, головний убір, гумові рукавички) та забезпечені окулярами закритого типу. У місцях роботи має бути аптечка долікарської допомоги.

19. При попаданні вакцини на шкіру та/або слизові оболонки їх рекомендується негайно промити великою кількістю водопровідної води і обробити шкіру 70%-ним розчином етилового спирту, а слизові оболонки - розчином тетрацикліну або хлортетрацикліну (100000000 ). За відсутності антибіотиків в очі вводять кілька крапель 1% розчину злодія азотнокислого срібла, в ніс - 1% розчин протарголу.

При випадковому введенні вакцини людині необхідно місце уколу обробити 70%-ним розчином етилового спирту і звернутися до медичного закладу.

У разі розливу вакцини, ділянку підлоги або ґрунту заливають 5%-ним розчином хлораміну або гарячим 10%-ним розчином їдкого натрію.

20. Організація-виробник: ФГУП «Орлівська біофабрика»

Інструкцію розроблено ФГУП «Орлівська біофабрика»

302501, Росія, Орловська обл., Орлівський р-н, сел. Біофабрика

Із твердженням цієї інструкціївтрачає силу «Інструкція з

Застосування вакцини проти сибірки тварин зі штаму 55-ВНИИВВиМ живою (рідкою)», затверджена Россільгоспнаглядом 21 липня 2009 р.

Директор ФГУП "Орлівська біофабрика" В.М. Трифан

I. Загальні відомості

1. Міжнародне непатентоване найменування: Вакцина жива із штаму

55-ВНИИВВиМ проти сібірської виразки тварин суха.

2. Лікарська форма: Ліофілізована маса. Вакцина виготовлена ​​зі спор живої безкапсульної культури атенуйованого вакцинного штаму 55-ВНИИВВиМ Ba сillus anthracis з додаванням сахарозо-желатинового середовища у співвідношенні 1:1.

На вигляд вакцина являє собою суху однорідну пористу масу сірувато-білого кольору.

Вакцина розфасована по 1-5 см 3 (25-100 доз) або 10-20 см 3 (50-250 доз) у скляні флакони, закупорені гумовими пробками, укріпленими алюмінієвими ковпачками; по 1-2 см 3 (25-100 доз) у запаяні ампули.

3. Флакони (ампули) з вакциною упаковані в картонні коробки, що забезпечують їхню цілісність. У кожну коробку вкладено інструкцію із застосування вакцини.

Термін придатності вакцини 24 місяці з дати випуску, за умови дотримання умов зберігання та транспортування.

Вакцина після закінчення терміну придатності та не використана в день розкриття флакона (ампули) до застосування не придатна.

4. Вакцину зберігають і транспортують у темному сухому місці при температурі від 2про З до 8 про С. Допускається транспортування вакцини за температури не вище 20 про С протягом 14 діб.

5. Вакцину слід зберігати у місцях, недоступних для дітей.

6. Вакцину у флаконах (ампулах)без маркування, з порушенням цілісності та/або герметичності закупорювання, зі зміненим зовнішнім виглядом, з терміном придатності, що минув, не використану в день розкриття ампули (флакона), бракують, знезаражують шляхом кип'ятіння протягом двох годин і утилізують.

Утилізація знезараженої вакцини не вимагає дотримання спеціальних запобіжних заходів.

II . ФАРМОКОЛОГІЧНІ (БІОЛОГІЧНІ) ВЛАСТИВОСТІ

7. Біологічний препарат. Вакцина забезпечує формування у тварин імунітету до збудника сибірки через 10 діб після одноразового введення, тривалістю 12 місяців у дорослих тварин і 6 місяців у молодняку.

У вакцині для підшкірного введення міститься 22,0±2,0 млн/см 3 для внутрішньошкірного введення - 110,0±10,0 млн/см 3 живих спір безкапсульної культури атенуйованого вакцинного штаму 55-ВНИИВВиМ.

Вакцина нешкідлива, помірно реактогенна, не має лікувальних властивостей.

III . ПОРЯДОК ЗАСТОСУВАННЯ

8. Вакцина призначена для профілактики сибірки у сільськогосподарських тварин у всіх категоріях господарств.

Хворих на інфекційні захворювання;

Клінічно хворих;

Ослаблених та виснажених;

В останній місяць вагітності та протягом 7 - 10 діб після пологів;

Протягом 7-10 діб після хірургічних операцій;

Підвищена температура тіла;

- у спекотну (при температурі довкілля вище +27 про З) і холодну (при температурі довкілля нижче -5 про З) пору року.

На тварин, що не підлягають імунізації,складають опис із зазначенням причини, через яку вони не були вакциновані та можливого терміну проведення імунізації.

10. Вакцинації підлягають:дорослі тварини (велика і дрібна рогата худоба, коні, віслюки, верблюди, олені, свині, хутрові звірі), а також їх молодняк з 3-х місячного віку, за винятком лошат, яких вакцинують, починаючи з 9 місяців. Дорослих тварин, які раніше не імунізували, вакцинують одноразово, молодняк - дворазово з інтервалом у шість місяців.

Дорослих тварин ревакцинують щороку одноразово.

При встановленні в господарстві випадку захворювання на сибірку вакцинації піддають все поголів'я, що мало прямий або непрямий контакт з хворою твариною, незалежно від пори року і строків попереднього введення вакцини.

Позапланову одноразову вакцинацію піддають всіх тварин, які вперше надійшли в господарство. У загальну череду їх допускають не раніше, ніж через 14 діб після введення вакцини.

Вакцину вводять тваринам підшкірно, використовуючи одноразові або звичайні шприци або внутрішньошкірно за допомогою безигольного ін'єктора в наступних обсягах:

Вид тварин	Місце введення вакцини	Об'єм вакцини, см 3
Підшкірно
Вівці та кози (м'ясних та м'ясошерстих порід)
Кози молочних порід	Область задньої третини шиї або внутрішньої поверхні стегна
Велика рогата худоба, олені, верблюди, коні, віслюки	Область задньої третини шиї
	Область внутрішньої поверхні стегна чи за вухом.
Пухові звірі	Область внутрішньої поверхні стегна або підхвостове дзеркало
Внутрішньошкірно
Велика рогата худоба, олені, верблюди	Безшерста ділянка промежини
Коні та осли	Область задньої третини шиї
Вівці та хутрові звірі	Підхвостове дзеркало

Перед застосуванням вакцину розводять за допомогою шприца з голкою у співвідношенні 1:1 кип'яченою водою або стерильним 0,9% розчином хлориду натрію і переносять у стерильний флакон з відповідним розріджувачем, взятому в обсязі, зазначеному на етикетці коробки з вакциною.

Забороняється підшкірне застосування вакцини, розведеної внутрішньошкірного застосування.

Для вакцинації використовують шприци, голки, а також безголковий ін'єктор, які перед початком та після закінчення роботи стерилізують кип'ятінням у дистильованій воді протягом двох годин.

Розведену вакцину періодично збовтують.

Місце введення вакцини дезінфікують 70%-ним розчином етилового спирту.

Протягом 10 діб після вакцинації за тваринами встановлюють спостереження, не допускається переохолодження, перегрівання, тяжкі перегони.

11. Передозування вакцини може викликати у тварин підвищення температури тіла, утворення вираженого набряку у місці введення вакцини, збільшення регіонарних лімфатичних вузлів та погіршення загального стану.

Тварин із зазначеними ознаками негайно ізолюють і проводять лікування сироваткою протисибіркою або глобуліном протисибірковим та/або антибіотиками.(пеніцилін, стрептоміцин, тетрациклін, біоміцин та ін.), а також призначають їм симптоматичні засоби (глюкозу, кофеїн та камфорне масло або інші).

12. Особливостей поствакцинальної реакції при первинному та наступних введеннях вакцини не встановлено.

13. Слід уникати порушень схеми проведення вакцинації, оскільки це може призвести до зниження ефективності імунопрофілактики сибірки. У разі пропуску чергового введення вакцини необхідно провести імунізацію якнайшвидше.

14. Через добу після вакцинації у тварин можливе незначне короткочасне підвищення температури тіла та формування у місці ін'єкції помірно вираженої припухлості, що зникає через 3-5 діб.

15. Забороняється застосування вакцини проти сибірки спільно з іншими живими імунобіологічними препаратами, а також з антибіотиками, антигельмінтиками та інсектоакарицидами протягом 14 діб до та після її введення.

16. Молоко від вакцинованих тварин використовують без обмежень, за винятком випадків, коли у тварин виявляються поствакцинальні ускладнення. У цьому випадку молоко піддають кип'ятінню і використовують для годування тварин.

Забій тварин на м'ясо дозволяється не раніше ніж через 10 діб після введення вакцини. При вимушеному забої тварини протягом цього терміну м'ясо направляють на термічну промислову переробку, у разі загибелі тварини труп спалюють.

IV . ЗАХОДИ ОСОБИСТОЇ ПРОФІЛАКТИКИ

17. При роботі з вакциною слід дотримуватись правил особистої гігієни та техніки безпеки, передбачених при роботі з лікарськими засобами ветеринарного призначення.

18. Усі особи, які беруть участь у проведенні вакцинації, повинні бути одягнені в спецодяг (гумові чоботи, халат, штани, головний убір, гумові рукавички) та забезпечені окулярами закритого типу. У місцях роботи має бути аптечка долікарської допомоги.

19. При попаданні вакцини на шкіру та/або слизові оболонки їх рекомендується негайно промити великою кількістю водопровідної води та обробити шкіру - 70%-ним розчином етилового спирту, слизові оболонки - розчином тетрацикліну або хлортетрацикліну (100.000000020000000020000000000200000000000000000000000000000000000000000000000000000000000000002) За відсутності антибіотиків в очі ввести кілька крапель 1%-ного розчину азотнокислого срібла, в ніс-1%-ний розчин протарголу.

При випадковому введенні вакцини людині, місце уколу необхідно обробити 70% розчином етилового спирту і звернутися до медичного закладу.

У разі розливу вакцини, ділянку підлоги або ґрунту заливають 5%-ним розчином хлораміну або гарячим 10%-ним розчином їдкого натрію.

20. Організація-виробник: ТОВ «Агровет», 109472, м. Москва, вул. Ташкентська, будинок 34, корп. 5.

456.00 ₽

Розповсюджуємо нормативну документацію з 1999 року. Пробиваємо чеки, сплачуємо податки, приймаємо до оплати всі законні форми платежів без додаткових процентів. Наші клієнти захищені Законом. ТОВ "ЦНТІ Нормоконтроль"

Наші ціни є нижчими, ніж в інших місцях, тому що ми працюємо безпосередньо з постачальниками документів.

способи доставки

• Термінова кур'єрська доставка(1-3 дні)
• Кур'єрська доставка (7 днів)
• Самовивіз із московського офісу
• Пошта РФ

Поширюється на вакцину проти сибірки тварин зі штаму 55-ВНИИВВиМ живу (суху і рідку), призначену для профілактичної імунізації сприйнятливих тварин.

3 Терміни та визначення

4 Технічні вимоги

5 Вимоги безпеки

6 Правила приймання

7 Методи випробування

8 Транспортування та зберігання

9 Вказівки щодо застосування

Бібліографія

Цей ГОСТ знаходиться в:

Організації:

25.12.2006	Затверджено	Федеральне агентство з технічного регулювання та метрології	329-ст
	Виданий	Стандартінформ	2007 р.
	Розроблено	ФГУ Всеросійський державний Центр якості та стандартизації лікарських засобів для тварин та кормів

Live vaccine на anthrax of animals from strain 55-VNIIVV & M. Specifications

• ГОСТ 12.0.004-90Організація навчання безпеки праці. Загальні положення . Замінено на ГОСТ 12.0.004-2015.
• ГОСТ 12.1.005-88Система стандартів безпеки праці.Загальні санітарно-гігієнічні вимоги до повітря робочої зони
• ГОСТ 12.1.008-76Система стандартів безпеки праці.Біологічна безпека. Загальні вимоги
• ГОСТ 12.4.011-89Система стандартів безпеки праці.Засоби захисту працюючих. Загальні вимоги та класифікація
• ГОСТ 17.0.0.01-76Система стандартівв галузі охорони природи та покращення використання природних ресурсів. Основні положення
• ГОСТ Р 50460-92Знак відповідності за обов'язкової сертифікації. Форма, розміри та технічні вимоги
• ГОСТ Р 51232-98Вода питна. Загальні вимоги до організації та методів контролю якості
• ГОСТ 14192-96Маркування вантажів
• ГОСТ 12.2.003-91Система стандартів безпеки праці.Устаткування виробниче. Загальні вимоги безпеки
• ГОСТ 12.3.002-75Система стандартів безпеки праці.Процеси виробничі. Загальні вимоги безпеки. Замінено на ГОСТ 12.3.002-2014.
• ГОСТ 9293-74Азот газоподібний та рідкий. Технічні умови
• ГОСТ 6709-72Вода дистильована. Технічні умови
• ГОСТ 12026-76Папір фільтрувальний лабораторний. Технічні умови
• ГОСТ 12923-82Алігнін медичний. Технічні умови
• ГОСТ 13646-68
• ГОСТ 17206-96Агар мікробіологічний. Технічні умови
• ГОСТ 1770-74Посуд мірний лабораторний скляний. Циліндри, мензурки, колби, пробірки. Загальні технічні умови
• ГОСТ 17768-90Засоби лікарські. Упаковка, маркування, транспортування та зберігання
• ГОСТ 18481-81Ареометри та циліндри скляні. Загальні технічні умови
• ГОСТ 20015-88Хлороформ. Технічні умови
• ГОСТ 20729-75Поживні середовища. М'ясна вода (для ветеринарних цілей). Технічні умови
• ГОСТ 22967-90Шприци медичні ін'єкційні багаторазового застосування. Загальні технічні вимоги та методи випробувань
• ГОСТ 25336-82Посуд та обладнання лабораторні скляні. Типи, основні параметри та розміри
• ГОСТ 25377-82Голки ін'єкційні багаторазового застосування. Технічні умови . Замінений на ГОСТ 25377-2015.
• ГОСТ 27840-93Тара для посилок та бандеролей. Загальні технічні умови
• ГОСТ 29112-91Поживні середовища щільні (для ветеринарних цілей). Загальні технічні умови
• ГОСТ 342-77Реактиви. Натрій дифосфат 10-водний. Технічні умови
• ГОСТ 6672-75Скло покривне для мікропрепаратів. Технічні умови
• ГОСТ 8074-82Мікроскопи інструментальні. Типи, основні параметри та розміри. Технічні вимоги
• ГОСТ 9142-90Ящики із гофрованого картону. Загальні технічні умови. Замінений на ГОСТ 9142-2014.
• ГОСТ 9284-75Скло предметне для мікропрепаратів. Технічні умови
• ГОСТ Р 51314-99Ковпачки алюмінієві та комбіновані для закупорювання лікарських засобів. Загальні технічні умови
• ГОСТ 16280-2002Агар харчовий. Технічні умови
• ГОСТ Р 51652-2000Спирт етиловий ректифікований із харчової сировини. Технічні умови
• ГОСТ 8.579-2002Державна система забезпечення єдності вимірів. Вимоги до кількості фасованих товарів в упаковках будь-якого виду під час їх виробництва, розфасовки, продажу та імпорту
• СанПіН 2.3.2.1078-01Гігієнічні вимоги безпеки та харчової цінності харчових продуктів
• ГОСТ 12301-2006Коробки з картону, паперу та комбінованих матеріалів. Загальні технічні умови. Замінений на ГОСТ 33781-2016.
• ГОСТ Р 53228-2008Терези неавтоматичної дії. Частина 1. Метрологічні та технічні вимоги. Випробування
• ГОСТ 24061-2012масової частки вологи
• ГОСТ 27785-2012Засоби лікарські біологічні ліофілізовані для ветеринарного застосування. Метод визначеннякисню у флаконах
• ГОСТ 28083-2012Засоби лікарські біологічні ліофілізовані для ветеринарного застосування. Методконтролю вакууму в ампулах та флаконах
• ГОСТ 28085-2013Засоби лікарські біологічнідля ветеринарного застосування. Метод бактеріологічного контролю стерильності

стор 1

стор 2

стор 3

стор 4

стор 5

стор 6

стор 7

стор 8

стор 9

стор. 10

стор. 11

стор. 12

стор 13

стор 14

стор. 15

стор. 16

стор. 17

стор 18

стор 19

стор 20

стор 21

стор 22

стор 23

стор 24

стор 25

стор 26

ФЕДЕРАЛЬНЕ АГЕНТСТВО З ТЕХНІЧНОГО РЕГУЛЮВАННЯ ТА МЕТРОЛОГІЇ

НАЦІОНАЛЬНИЙ

СТАНДАРТ

РОСІЙСЬКОЇ

ФЕДЕРАЦІЇ

ВАКЦИНА ПРОТИ СИБІРСЬКОЇ Виразки ТВАРИН із ШТАМА 55-ВНИИВиМ

ЖИВА

Технічні умови

Видання офіційне

Стандартінформ

Передмова

Цілі та принципи стандартизації в Російській Федерації встановлені Федеральним законом від 27 грудня 2002 № 184-ФЗ «Про технічне регулювання», а правила застосування національних стандартів Російської Федерації - ГОСТ Р 1.0-2004 «Стандартизація в Російській Федерації. Основні положення"

Відомості про стандарт

1 РОЗРОБЛЕНО Федеральною державною установою «Всеросійський державний Центр якості та стандартизації лікарських засобів для тварин та кормів»

2 ВНЕСЕН Технічним комітетом зі стандартизації ТК454 «Охорона життя, здоров'я тварин та ветеринарно-санітарна безпека продуктів тваринного походження та кормів»

3 ЗАТВЕРДЖЕНИЙ І ВВЕДЕНИЙ У ДІЮ Наказом Федерального агентства з технічного регулювання та метрології від 25 грудня 2006 р. № 329-ст

4 ВВЕДЕНО ВПЕРШЕ

Інформація про зміни до цього стандарту публікується в інформаційному покажчику «Національні стандарти», що щорічно видається, а текст змін і поправок - у щомісячно видаються інформаційних покажчиках «Національні стандарти». У разі перегляду (заміни) або скасування цього стандарту відповідне повідомлення буде опубліковане у щомісячному інформаційному покажчику «Національні стандарти». Відповідна інформація, повідомлення та тексти розміщуються також в інформаційній системі загального користування - на офіційному сайті Федерального агентства з технічного регулювання та метрології в мережі Інтернет

© Стандартінформ. 2007

Цей стандарт не може бути повністю або частково відтворений, тиражований і поширений як офіційне видання без дозволу Федерального агентства з технічного регулювання та метрології

ГОСТ P 52616-2006

1 Область застосування............................................1

3 Терміни та визначення..........................................2

4 Технічні вимоги..........................................3

5 Вимоги безпеки.........................................5

6 Правила приймання..............................................6

7 Методи випробування.............................................7

8 Транспортування та зберігання..................................................16

9 Вказівки щодо застосування.........................................16

Бібліографія................................................17

Вступ

Цей стандарт розроблений відповідно до Федерального закону «Про технічне регулювання» з метою формування нормативної бази для дотримання вимог законопроекту – спеціального технічного регламенту «Про вимоги безпеки лікарських засобів для тварин, процесів їх розробки, випробування, виробництва, виготовлення, зберігання, перевезення, реалізації . застосування та утилізації», встановлення правил та характеристик у сферах виробництва та обігу продукції, забезпечення науково-технічного прогресу та конкурентоспроможності продукції Розробка стандарту дозволить уніфікувати вимоги до якості вакцини, методів контролю. безпеки, пакування, маркування, транспортування, зберігання, утилізації.

НАЦІОНАЛЬНИЙ СТАНДАРТ РОСІЙСЬКОЇ ФЕДЕРАЦІЇ

ВАКЦИНА ПРОТИ СИБІРСЬКОЇ ВИРАЗКИ ТВАРИН З ШТАМА 55-ВНИИВВИМ ЖИВА

Технічні умови

Live vaccir>e проти anthrax of animals from strain 55-VNIIW & M. Specifications

Дата введення - 2008-01-01

1 Область застосування

Даний стандарт поширюється на вакцину проти сибірки тварин зі штаму 55-ВНИИВВиМ живу (суху і рідку), призначену для профілактичної імунізації сприйнятливих тварин (далі - вакцина).

Вакцина являє собою завись живих спор безкапсульної слабовірулентної культури сибіркового штаму 55-ВНИИВВиМ в 30%-ному нейтральному розчині гліцерину або масу спор, ліо-філізовану під вакуумом із захисним середовищем.

2 Нормативні посилання

У цьому стандарті використано нормативні посилання на такі стандарти:

4.5.2 Флакони з вакциною закривають стерильними гумовими пробками та обкатують алюмінієвими ковпачками за ГОСТ Р 51314 .

4.5.3 На ампули з вакциною наклеюють етикетку або незмивною фарбою (травленням) по склу вказують:

найменування організації-виробника; скорочене найменування препарату: об'єм препарату, см3: номер серії:

дату виготовлення (місяць, рік).

4.5.4 На флакони з вакциною наклеюють етикетку, де вказують: найменування організації-виробника;

логотип організації-виробника (за наявності);

назва вакцини;

номер серії та номер контролю:

обсяг вакцини, см 3;

дату виготовлення (місяць, рік);

термін придатності (місяць, рік):

ГОСТ P 52616-2006

дози та спосіб введення; умови зберігання; позначення стандарту; штрих-код (за наявності);

кількість розріджувача для підшкірного введення; напис; "Для тварин".

4.5.5 Ампули (флакони) з вакциною у фасуванні до 50 см 3 по 10-20 шт. упаковують у картонні коробки за ГОСТ 12301 з наявністю гнізд або перегородок, що забезпечують їх нерухомість У кожну коробку вкладають інструкцію із застосування.

4.5.6 На коробку наклеюють етикетку, яка повинна містити: найменування організації-виробника:

адресу, телефон та логотип (за наявності); найменування біопрепарату; кількість ампул (флаконів) у коробці; кількість доз в ампулі (флаконі):

кількість розріджувача на одну ампулу (флакон) для внутрішньошкірного та підшкірного застосування:

номер серії;

номер контролю;

дату виготовлення (місяць, рік):

термін придатності (місяць, рік):

умови зберігання;

дози для різних видів та віку тварин; позначення цього стандарту; штрих-код (за його наявності);

інформацію про підтвердження відповідності за ГОСТ Р 50460: напис: «Для тварин».

4.5.7 Коробки з вакциною, а також флакони в розфасовці по 50 см 3 з рідкою вакциною упаковують у ящики з листових деревних матеріалів за ГОСТ 5959 або ящики для посилок за ГОСТ 27840 або інші ящики брутто не більше 15 кг. Для упаковки флаконів в ящики використовують алігнін за ГОСТ 12923 або інші теплоізоляційні матеріали Допускається упаковка вакцини в розфасовці по 10 см 3 безпосередньо в ящики, кожен ряд вакцини перекладають алігніном.

Всередину кожної скриньки вкладають не менше п'яти екземплярів інструкції із застосування вакцини та контрольний лист із зазначенням: найменування організації-виробника; найменування біопрепарату. його кількості в ящику, дати упаковки, номери (прізвища) пакувальника

4 .5.8 На кожне вантажне місце (ящик) наносять транспортне маркування за ГОСТ 14192 із зазначенням маніпуляційних знаків: «Тендітне. Обережно». «Обмеження температури» та попереджувального напису: «Біопрепарати».

4.5.9 Маркування, що характеризує упаковану продукцію, повинне містити: найменування організації-виробника;

адресу організації-виробника; товарний знак (за його наявності); найменування вакцини; кількість вакцини у ящику; дату виготовлення (місяць, рік); номер серії;

термін придатності (місяць, рік);

умови зберігання;

позначення цього стандарту.

4.5.10 Поєднання транспортного маркування та маркування, що характеризує упаковану продукцію. з одного боку транспортної тари заборонена.

5 Вимоги безпеки

5.1. З біологічної безпеки вакцина повинна відповідати вимогам ГОСТ 12.1.008.

5.2 Виробниче обладнання, яке використовується при виготовленні вакцини, повинно відповідати вимогам ГОСТ 12.2.003. а виробничі процеси - ГОСТ 12.3.002.

5.3 Повітря робочої зони повинне відповідати вимогам ГОСТ 12.1.005.

5.4 Персонал, зайнятий у виробництві вакцини, має бути забезпечений засобами захисту відповідно до ГОСТ 12.4.011 та пройти навчання безпечним умовам праці відповідно до ГОСТ 12.0.004

5.5 Утилізацію вакцини, що не пройшла контроль, що залишилася після використання, а також з терміном придатності, що минув, проводять шляхом автоклавування протягом 2 годин при температурі 134 °С і тиском 2 атм. з дотриманням вимог ГОСТ 17.0.0.01.

6 Правила приймання

6.1 Кожна серія вакцини має бути прийнята (перевірена) у Відділі біологічного технічного контролю (ОБТК) організації-виробника

6.2 Серією слід вважати певну кількість вакцини, виготовленої в одних виробничих умовах за один технологічний цикл з одного розшарування штаму, змішаної із захисним середовищем в одній ємності, розфасованої в ампули (флакони) однакової місткості і ліофільно висушеної в одному сублімаційному , або об'єднаної в одній ємності з 30% нейтральним розчином гліцерину і розфасованої в один вид флаконів або ампул (для рідкої вакцини), що отримала свій номер, номер контролю та оформленої одним документом про якість (паспортом).

6.3 У документі про якість (паспорт) зазначають: найменування організації-виробника; найменування вакцини;

номер серії; номер контролю; дату виготовлення (місяць, рік): обсяг серії;

результати випробування за показниками якості; термін придатності (місяць, рік); умови зберігання;

номер та дату видачі документа про якість: позначення стандарту;

висновок та підпис особи, яка видала документ про якість.

6.4 Для контролю якості вакцини від кожної серії відбирають вибірку З вибірки виділяють середню пробу у кількості 20 ампул (флаконів) з вакциною. 10 із яких використовують для випробування за показниками якості, а 10 зберігають в архіві протягом терміну придатності. Кількість відібраних проб має забезпечити проведення аналізів у чотирьох повторностях.

6.5 Архівні зразки маркують написом «Архів», опечатують та постачають документом встановленої форми із зазначенням;

найменування вакцини; номери серії:

дати виготовлення (місяць, рік); дати відбору проб: обсяг серії;

кількості відібраних зразків; посади та підписи особи, яка відібрала проби: строку придатності (місяць, рік); позначення цього стандарту; термін зберігання проб.

6.6 При отриманні незадовільних результатів випробувань хоча б одному з показників щодо нього проводять повторні випробування на подвоєній кількості ампул або флаконів, відібраних від тієї ж серії вакцини. Результати повторного випробування розповсюджують на всю серію та вважають остаточними.