PERSEDIAAN
PENILAIAN SISTEM UJIAN ELISA BARU
"Rotavirus-antigen-ELISA-TERBAIK"
12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.
1 FGUN SSC VB "Vektor" Rospotrebnadzor, penempatan Koltsovo, wilayah Novosibirsk;
2 Institut Biologi Kimia dan Perubatan Asas, Novosibirsk;
3 State Institute for Standardization and Control of Medical Biological Products yang dinamakan L.A. Tarasevichag Moscow
Hasil pengujian kepekaan, kekhususan dan kebolehulangan sekumpulan reagen baru "Rotavirus-antigen-IFA-BEST" yang dikembangkan di CJSC "Vector-Best" (Novosibirsk) disajikan. Data yang diperoleh memungkinkan untuk meramalkan kebolehpercayaan diagnostik hasil ketika menggunakan sistem ujian ini untuk mengesan antigen rotavirus kumpulan A dalam bahan klinikal.
Kata kunci: Sistem ujian ELISA, kecekapan, rotavirus A
Rotavirus Kumpulan A (keluarga Reoviridae, genus Rotavirus) adalah penyebab gastroenteritis teruk pada kanak-kanak kecil di seluruh dunia. Orang dewasa dengan sistem imun yang lemah sering jatuh sakit. Jangkitan rotavirus (RVI) adalah penyakit yang sangat menular dengan pelbagai cara penularan. Punca jangkitan adalah orang yang mempunyai bentuk penyakit yang jelas atau tidak simptomatik, serta pembawa virus. Di kalangan kanak-kanak dan orang dewasa, RVI dapat menampakkan diri dalam bentuk kes sporadis, penyakit kumpulan tempatan, wabak dan berleluasa. Mekanisme penularan fecal-oral jangkitan ini disedari oleh makanan (susu dan produk tenusu, makanan bayi), laluan air dan hubungan rumah tangga.
Diagnosis gastroenteritis rotavirus oleh gambaran klinikal, terutamanya dengan morbiditi sporadis, agak sukar, kerana gejala ciri jangkitan ini sedikit berbeza dengan gejala jangkitan usus akut (AEI) lain dari pelbagai etiologi. Diagnosis pembezaan pada pesakit dengan gastroenteritis rotavirus dilakukan baik dengan jangkitan toksik makanan dan dengan EEI virus lain (norovirus, astrovirus, adenovirus, coronavirus, Coxsackie enterovirus dan ECHO) dan etiologi bakteria (salmonellosis, disentri, mikroorganisma kolera). Malangnya, tidak semua institusi perubatan khas Persekutuan Rusia menjalankan diagnostik jangkitan rotavirus.
Kaedah diagnostik untuk RVI bertujuan untuk mengesan keseluruhan virion, antigen virus atau RNA spesifik virus dalam tinja. Pendekatan yang menjanjikan untuk pengesanan langsung virus baik dalam bahan klinikal dan objek alam sekitar adalah kaedah transkripsi terbalik - reaksi berantai polimerase (RT-PCR). Dalam beberapa tahun kebelakangan ini, sistem ujian telah dibuat berdasarkan perkembangan saintifik moden dengan gabungan pelbagai kaedah untuk mengesan rotavirus: multiplex PCR dengan pengesanan hibridisasi-pendarfluor produk amplifikasi "pada titik akhir"; imuno-PCR berasaskan titik akhir (IPCR) dengan pengesanan masa nyata; kuantitatif RT-PCR dengan pengesanan masa nyata. Makmal penyelidikan menggunakan mikroskop elektron untuk mengesan rotavirus dengan cepat. Walau bagaimanapun, semua kaedah di atas agak sukar dan memerlukan instrumen yang mahal dan kakitangan yang berkelayakan. Oleh itu, semasa menjalankan diagnostik makmal di hospital dan pesakit luar, keutamaan diberikan kepada kaedah berdasarkan pengesanan antigen virus dalam tinja menggunakan ujian imunosorben berkait enzim (ELISA) dengan antibodi mono dan polikonal terhadap rotavirus. Kaedah ini tersedia untuk makmal praktikal, senang disediakan dan membolehkan anda mendapatkan hasil dengan cepat.
Tujuan kerja ini adalah untuk mengkaji kecekapan diagnostik sekumpulan reagen baru "Rotavirus-antigen-IFA-BEST" yang dikembangkan di JSC "Vector-Best", Novosibirsk.
^ September-Disember
Bahan dan kaedah
Bahan kajian ini adalah sampel tinja dari anak kecil dengan diagnosis AEI dan tanpa manifestasi klinikal jangkitan usus, yang dimasukkan ke hospital di jabatan jangkitan usus dan jangkitan pernafasan di Hospital Klinik Kanak-Kanak Bandar No. 3, Novosibirsk. Sampel tinja dikumpulkan dalam bekas plastik steril sekali pakai dalam jumlah 2-3 ml setelah dimasukkan pesakit ke jabatan hospital dan disimpan pada - 20 ° C selama 15 hari. Penyimpanan bahan yang lebih lama dilakukan pada suhu - 70 ° C.
Satu panel 104 sampel feses diuji secara awal untuk mengetahui adanya patogen OCI. Daripada mereka:
30 sampel di mana hanya rotavirus kumpulan A yang dikesan oleh ELISA dan RT-PCR; genotip oleh RT-PCR menunjukkan bahawa sampel tinja mengandungi rotavirus genotip PG1 (18 sampel), PG2 (4 sampel), PG3 (3 sampel), PG4 (2 sampel), PG4 (1 sampel), PG9 (1 sampel), PG3 (1 sampel);
14 sampel di mana hanya norovirus genotip kedua dikesan oleh RT-PCR, yang disahkan oleh penentuan urutan nukleotida 5 "- kawasan gen kapsid yang terletak di genom norovirus di wilayah 5085-5485 jam .;
15 sampel di mana hanya Astrovirus yang dikesan oleh RT-PCR, yang disahkan oleh penentuan urutan nukleotida 5 "- kawasan gen kapsid yang terletak di genom Astrovirus di wilayah 4526 - 4955 n.; 15 sampel di mana hanya adenovirus yang dikesan oleh PCR;
30 sampel tinja (kawalan) dari kanak-kanak tanpa manifestasi klinikal jangkitan usus, dimasukkan ke hospital di bahagian pernafasan hospital; analisis awal tidak mendedahkan patogen virus di atas dalam sampel ini.
Sampel diuji untuk kehadiran atau ketiadaan rot-, noro-, astro- dan adenovirus oleh RT-PCR menggunakan alat komersil "AmpliSens No go virus 1, 2 genotypes - 306/322", "AmpliSens Astrovirus -165" yang terdaftar di Persekutuan Rusia, "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (dihasilkan oleh FGUN Central Research Institute of Epidemiology, RF). Sampel diperiksa sesuai dengan arahan penggunaan kit reagen masing-masing selama jangka hayat. Sampel positif untuk kehadiran rotavirus genotip oleh RT-PCR. Penentuan adanya atau ketiadaan antigen rotavirus juga dilakukan oleh ELISA menggunakan sistem ujian komersial IDEIA ™ Rotavirus, (DakoCytomation, UK) sesuai dengan petunjuk kit.
Semasa menguji kit reagen Rota-virus-antigen-ELISA-BEST, semua sampel di atas (104) dienkripsi dan diuji tiga kali dengan kit ujian. Setelah selesai ujian, sampel-sampelnya disahkod dan hasilnya dianalisis.
Keputusan dan perbincangan
Sensitiviti kit reagen "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" dinilai berdasarkan jumlah kebetulan hasil positif (dalam%) sampel ujian menggunakan sistem ujian yang diuji dan ubat rujukan. Pada saat yang sama, terungkap bahwa ketika menggunakan kit reagen "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST", semua 30 sampel dengan kehadiran rotavirus A yang disahkan positif (Jadual 1). Akibatnya, kepekaan kit ujian untuk mengesan rotavirus A adalah 100%. Harus diingat bahawa panel tersebut menyertakan sampel dengan tujuh genotip rotavirus yang berbeza, dan semuanya berjaya dikesan dengan kit reagen Rotavirus - antigen - I FAB-EST.
Kekhususan sistem ujian dinilai oleh jumlah kebetulan hasil negatif (dalam%) sampel ujian menggunakan sistem ujian yang diuji dengan kajian awal yang diserahkan. Untuk menilai kekhususan, panel yang digunakan termasuk 30 sampel di mana patogen virus tidak dikesan, dan juga 14 sampel di mana hanya norovirus genotip kedua yang dikesan menggunakan kaedah RT-PCR, 15 sampel di mana kaedah RT-PCR dikesan hanya astrovirus; 15 sampel di mana hanya adenovirus yang dikesan oleh PCR. Telah ditentukan bahawa dalam 69 dari 74 sampel negatif, nilai ketumpatan optik semasa pengesanan dengan kit reagen Rotavirus-antigen-ELISA-BEST untuk kehadiran rotavirus A tidak melebihi nilai latar belakang, iaitu nilai Diperoleh sebagai hasil pengukuran ketumpatan optik pada sampel negatif kawalan. Dua sampel yang mengandungi astrovirus, satu sampel - norovirus dari genotip kedua, satu sampel - adenovirus dan dua sampel di mana tidak ada patogen virus di atas yang dikesan, menunjukkan indeks kepadatan optik positif. Harus diingat bahawa dalam sampel di mana tidak ada patogen virus yang terdeteksi sebelumnya, isyarat positif dicatatkan hanya dalam salah satu kajian berulang (Jadual 2). Oleh itu, kekhususan kit reagen Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST adalah 93.2%.
Semasa ujian, kebolehulangan hasil yang diperoleh menggunakan kit ujian reagen "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" pada bahan klinikal dinilai - semua sampel diperiksa tiga kali dalam eksperimen yang berbeza untuk menentukan variasi hasil . Dalam hampir semua kes, hasil serupa diperoleh: sistem ujian mengesan semua sampel negatif dan positif dengan cara yang sama. Pengecualian adalah dua sampel, di mana tidak ada patogen virus yang terdeteksi sebelumnya: dalam salah satu pengulangan untuk kedua-dua sampel, nilai ketumpatan optik melebihi ODcrit. Harus diingat bahawa kelebihan itu tidak signifikan (Jadual 2). Oleh itu, kebolehulangan hasilnya adalah 98.8%.
Hasil ujian menunjukkan bahawa set ujian reagen "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" dalam kecekapan diagnostiknya - kekhususan, kepekaan dan kebolehulangan - sebanding dengan diagnostik yang terdapat di Persekutuan Rusia.
menggunakan kit reagen yang diuji "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" untuk mengesan antigen rotavirus kumpulan A dalam bahan klinikal.
Sastera
1. Bogomolov B.P. // "Penyakit Berjangkit: Diagnostik Kecemasan, Rawatan, Pencegahan". - M., Diamed baru. - 2007.
2. Vasiliev B.Ya., Vasil'eva RI, Lobzin Yu.V. // "Penyakit usus akut. Rotavirus dan Jangkitan Rotavirus ”. - S.-Pb., Lan. - 2000.
3. Zhirakovskaya EV, Tikunov A.Yu., Bodnev O.A., et al. // "BIOPreparations". - 2008 - No. 2. - hlm. 15 - 18.
4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.C. dan lain-lain. // ZhMEI - 2008 - No.4. - dengan. 12 - 16.
5. Ignatyuk TE, Golutvin IA, Nasikan NS, et al. // "Soalan Virologi". - 2003. - ayat 48. - No. 6. - hlm. 1721.
6. Novikova H.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chuprova A.B. // "Soalan Virologi". - 2007 .-- ayat 52. -№ 3 - hlm. 19-23.
7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A., et al. //
"Penyakit berjangkit". - 2004. - ayat 2. - No. 4. - hlm. 85 -91.
8. Podkolzin AT, Fenske EB, Abramycheva N.Yu., et al. // "Arkib terapeutik". - 2007. - ayat 79. - No. 11. -p. 10-16.
9. Sergevnin VI, Woldschmidt NB, Sarmometov EV, et al. // Epidemiologi dan penyakit berjangkit. -2004.-№ 6.-p. 17-20.
10. Sergevnin V.I., Woldschmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // Kebersihan dan kebersihan. - 2007. - No. 1. - hlm. 56 -58.
11. Arcangeletti MC, De Conto E, Pinardi F., di al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76 (3). - Hlm 165 -170.
12. Gladstone B. P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., di al. // Epidemiol. Jangkitan. - 2008. V. 136 (3). - Hlm 399-405.
13. Min B. S., NohY J., Shin J. H., atal. // J. Virol. Kaedah. -2006. - V. 137 (2). - Hlm 280 - 286.
14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., di al. // J. Klinik. Mikrobiol. - 2008. V. 46 (2). - Hlm 462 - 469.
15 Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F., di al. // Aplikasi Persekitaran. Mikrobiol. - 2008. - V. 74 (7). - Hlm 2069 - 2078.
16. Stockman L. J., Staat M. A., Holloway M., di al. // J. Clin. Mikrobiol. - 2008. - V. 46 (5). - Hlm 1842 - 1843.
Penilaian kepekaan dan kekhususan kit reagen "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
Jadual 1
Bilangan sampel Jumlah sampel Hasil pengesanan dengan ubat rujukan IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Hasil pengesanan Adeno-PCR dengan kit "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
Penilaian kekhususan kit reagen "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" -
jadual 2
PCR AmpliSens
rotavirus rotavirus rotavirus
0,443 1,306 0,676 0,418
Rotavirus-antigen-IFA-BEST CJSC "Vektor-Terbaik"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
£ September
Disember 2009
AmpliSens
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPKrit = 0.150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
Rotavirus
OPKrit 0.250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
antigen-ELISA-TERBAIK "Vektor-Terbaik"
OPKrit OPKrit 0.263 0.251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
astrovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0.150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EecT"
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
Disember 2009
PCR AmpliSens
adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus lalai negtig
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPKrit = 0.150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Rotavirus - antigen - IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
Rawatan helminthiasis pada kanak-kanak sangat penting, kerana akibatnya ini boleh menjadi kelewatan dalam perkembangan fizikal dan mental, proses patologi organ dan sistem dalaman, dan bahkan kematian. Di samping itu, serangan helminthik sangat menular, sebab itulah ia mudah merebak di institusi prasekolah dan sekolah. Berdasarkan ini, jelas betapa pentingnya rawatan helminthiasis tepat pada masanya pada kanak-kanak.
Tanda-tanda helminths pertama pada kanak-kanak
Cacing adalah agen oportunis tubuh manusia, cacing yang mana seseorang adalah pemilik terakhir. Di samping itu, dalam hal ini, usia pemilik tidak memainkan peranan, jenis helminthiases yang berlainan dapat diperhatikan pada kanak-kanak dan pesakit dewasa.
Mengapa helminthiasis berbahaya bagi kanak-kanak?
Seperti disebutkan sebelumnya, helminths pada kanak-kanak dapat menyebabkan penyakit dan patologi serius, akibatnya perkembangan mental dan fizikal menjadi perlahan. Kemungkinan komplikasi untuk setiap jenis helminthiasis boleh sama sekali berbeza, contohnya:
Oleh itu, helminthiases kanak-kanak memerlukan lebih banyak perhatian, bantuan perubatan tepat pada masanya, tindak lanjut jangka panjang oleh pakar, dan pencegahan.
Gejala utama pada kanak-kanak
Gejala helminthiasis pada kanak-kanak mungkin berbeza, bergantung pada jenis cacing:
1. Cacing gelang segera menampakkan diri sebagai reaksi alahan, demam dan loya pada anak. Penampilan pertama biasanya cerah, tetapi cepat reda. Selepas itu, gejala berikut dapat diperhatikan: 
- kolik dan dysbiosis dan bayi baru lahir;
- pada bayi di bawah 1 tahun, sakit di pusar, masalah dengan najis, alahan dan diatesis;
- kanak-kanak yang lebih tua mempunyai masalah tidur, tingkah laku gelisah, mimpi buruk;
- kanak-kanak berumur 3-7 tahun dicirikan oleh loya, demam, batuk dan sakit perut, ruam.
2. Enterobiasis, agen penyebabnya adalah cacing kremi, menampakkan dirinya sebagai gambaran klinikal yang terhapus. Dan hanya selepas 1 bulan, gejala berikut dapat diperhatikan:
- pada bayi baru lahir, keradangan, bengkak dan kemerahan dubur, penolakan makan, menangis pada waktu malam, kurang selera makan;
- kanak-kanak di bawah satu tahun dicirikan oleh gejala yang sama, serta gatal-gatal yang teruk pada dubur pada waktu malam (dari jam 23.00 hingga 1.00), kanak-kanak perempuan mengalami keradangan pada alat kelamin;
- pada kanak-kanak yang lebih tua, sakit perut berhampiran pusar, gangguan tidur, gatal di punggung.
3. Gejala Toksokariasis sukar dikenali, kecuali suhu badan yang rendah dan reaksi alergi (ruam, gatal-gatal, gatal-gatal dan bengkak). Selepas jangkitan, batuk mungkin berlaku, yang selanjutnya menyebabkan radang paru-paru atau bronkitis, terutama pada pesakit terkecil. 
Trichinosis menunjukkan tanda-tanda ringan pada bayi baru lahir, jika tidak, tanda-tanda berikut diperhatikan:
- keadaan demam;
- bengkak muka;
- sakit otot;
- reaksi alahan;
- kanak-kanak berumur 5 tahun ke atas mungkin mengalami amandel yang membesar, limpa, ruam, dan sakit tekak.
Paling sukar untuk mendiagnosis gejala helminthiasis pada kanak-kanak berumur 2 tahun dan lebih muda, kerana anak itu tidak dapat menjelaskan tingkah laku dan keadaannya. Oleh itu, untuk sebarang manifestasi dan tingkah laku atipikal kanak-kanak, lebih baik menunjukkan kepada doktor.
Apakah perkara pertama yang perlu dilakukan?
Cacing yang terdapat di dalam tinja kanak-kanak adalah gejala penyakit yang paling penting, selepas itu anda perlu segera mendapatkan bantuan doktor. Tiada rawatan helminth yang berjaya tanpa diagnosis yang dilakukan dengan betul. Kaedah tinjauan dalam kes ini harus rumit, termasuk prosedur berikut: 
- mengambil gesekan dari dubur;
- kajian najis kanak-kanak;
- ujian darah;
- biopsi otot dalam kes yang jarang berlaku dengan disyaki trichinosis;
- ujian darah serologi;
- X-ray, ultrasound, tomografi;
- ELISA untuk mengesan antibodi dalam darah.
Kaedah rawatan
Rawatan helminthiasis pada kanak-kanak harus komprehensif, difikirkan dengan baik, ditetapkan dengan dos yang tepat dan kekerapan pemberian ubat. Ini disebabkan oleh fakta bahawa ubat-ubatan dengan komponen toksik digunakan untuk kesan anthelmintik, yang bermaksud bahawa penggunaan tidak rasional dapat menyebabkan kesan sampingan. Selain itu, di rumah, rawatan rakyat dengan tanaman ubat adalah sesuai.
Ubat-ubatan rakyat
Rawatan moden dengan ubat-ubatan rakyat untuk penyakit seperti ini untuk kanak-kanak melibatkan 4 cara yang berkesan: 
Sebarang kaedah rawatan di rumah harus dibincangkan terlebih dahulu dengan doktor anda. Harus diingat bahawa terdapat kontraindikasi terhadap ramuan dan ubat-ubatan rakyat dalam bentuk intoleransi individu.
Rawatan ubat
- Dengan enterobiasis dan ascariasis, ubat seperti Pirantel dan Mebendazole biasanya digunakan. Mengambil Pirantel sesuai dengan dos 10 mg bahan untuk setiap kilogram berat badan dari cacing kremi, dan 5 mg / kg dari ascaris. Mebendazole diambil dua kali sehari pada kadar 50 mg untuk kanak-kanak berumur 2-3 tahun selama tiga hari berturut-turut, dua kali selama 100 mg selama tiga hari berturut-turut untuk kanak-kanak berusia lebih dari 3 tahun, setelah 3 minggu terapi diulang.
- Dengan toksocariasis, Mebendazole diresepkan dalam dos yang berbeza - untuk kanak-kanak berumur 2 tahun dan lebih tua, dua kali sehari, 100 mg selama 14-10 hari.
- Rawatan trichinosis menerima Mebendazole 5 mg per kilogram berat badan, selepas itu dos dibahagikan kepada tiga dos sehari. Kursus rawatan adalah 1 minggu di bawah pengawasan ketat doktor.
Pencegahan helminthiasis
- membasuh tangan sebaik sahaja bersentuhan dengan haiwan, setelah jalan dan tebing pasir, pergi ke tandas dan sebelum makan;
- makan makanan bersih sahaja;
- rawatan haba daging dan produk ikan dengan betul;
- minum air masak;
- pemeliharaan kebersihan dan kebersihan diri;
- pembersihan haiwan peliharaan secara berkala;
- menjalankan pencegahan penyahcacing pada kanak-kanak berumur 2 tahun ke atas.
Ujian darah untuk toksokar
Ciri jangkitan manusia dengan toksocariasis
Pembawa jangkitan adalah anjing, lebih jarang kucing. Telur toxocara diedarkan bersama najis anjing liar. Sekali di tanah, di air atau berlama-lama di bulu binatang, mereka dimasukkan ke dalam tubuh yang sihat dengan pelbagai cara.
Tindak balas terhadap pencerobohan
Dari statistik perubatan diketahui bahawa orang dewasa cenderung untuk dijangkiti toksocariasis, kecuali pekerjaan mereka berisiko. Kanak-kanak cenderung mendapat jangkitan.
Gejala toksocariasis yang paling biasa:
- Demam tanpa penyakit.
- Kenaikan suhu.
- Meningkatkan dan mengurangkan kesakitan di kepala atau perut.
- Kemunculan ruam kulit yang tidak dapat dihilangkan.
- Muka bengkak.
- Peningkatan tahap eosinofil dalam darah, dinyatakan oleh analisis umum.
Untuk membuat diagnosis yang tepat, ujian imunologi untuk toksokar ditetapkan. Kehadiran sebatian protein dalam darah, membawa maklumat genetik helminth (antigen), memprovokasi kekebalan terhadap pengeluaran antibodi kelas igg. Ini adalah tanda pertama jangkitan toksokariasis.
Diagnostik awal
Tahap awal sejarah pesakit adalah kolektif. Sebelum menghantar pesakit untuk menjalani ujian darah untuk toksokariasis, perlu mengkaji sejarah penyakit dan membuat pemeriksaan awal.
Diagnosis utama:
- Mengkaji keadaan yang memburukkan yang boleh mencetuskan jangkitan - pekerjaan khusus dengan haiwan atau kehadiran haiwan kesayangan, penggalian di kawasan yang berpotensi berbahaya, anak-anak bermain di tempat anjing berjalan.
- Pemeriksaan fizikal pesakit. Pemeriksaan kulit untuk pencerobohan subkutan oleh toksokar, kelopak mata dan bola mata, palpasi.
- Pelantikan ujian darah terperinci. Semasa jangkitan dengan toksocariasis, peningkatan ketara dalam beberapa petunjuk adalah ciri - eosinofil (70-80%), limfosit, ESR. Manakala tahap hemoglobin turun dengan ketara.
- Mengambil sampel hati. Dengan pencerobohan yang teruk, beban pada hati mempengaruhi, yang ditunjukkan oleh lonjakan bilirubin yang kuat.
Mustahil untuk mendapatkan pengesahan langsung pencerobohan Toxocar menggunakan ujian rutin (darah, coprogram, smear). Juga, kajian duodenum tidak berinformasi, kerana larva sukar untuk berhijrah.
Setelah menerima hasil pemeriksaan awal, yang menunjukkan kemungkinan jangkitan dengan toxocaras, dan membezakan diagnosis yang diduga dari penyakit dengan gejala yang serupa, pesakit ditugaskan untuk menjalani ELISA untuk toksocariasis.
Ujian imunosorben berkait
Matlamat utama kajian ini adalah untuk mengesahkan kehadiran toksokar dalam tubuh manusia. Antibodi terhadap helminths ini terdapat dalam plasma darah, jadi diambil dari vena.
Analisis toksokar memerlukan beberapa persiapan:
- Jangan makan makanan berlemak atau berat sehari sebelum prosedur anda.
- Jangan minum minuman bergula, minuman berkarbonat dan minuman beralkohol pada waktu siang sebelum mengunjungi makmal.
- Ambil sampel semasa perut kosong.
- Jangan minum ubat pada hari sebelumnya dan hari di mana ujian dijadualkan.
Harus diingat bahawa cara mengesan pencerobohan ini sangat bermaklumat dapat dipengaruhi oleh beberapa keadaan. Hasil positif palsu mungkin berlaku sekiranya pesakit mempunyai:
- Penyakit onkologi.
- Tuberkulosis paru.
- Patologi hati yang teruk.
- Sindrom autoimun.
- Sindrom antiphospholipid.
- Kehamilan.
Dalam kes ini, tidak mustahil untuk mendapatkan analisis pengesahan 100%, kerana dalam keadaan ini, sistem pertahanan juga menghasilkan imunoglobulin (antibodi). Adalah perlu untuk menjalankan diagnostik tambahan dan membezakan toksocariasis dari faktor yang disenaraikan.
Kepekatan imunoglobulin (titer) kelas IgG mencapai nilai maksimum yang mungkin setelah 2-3 bulan dari awal pencerobohan. Semakin teruk jangkitan, semakin tinggi angka ini.
Keputusan ELISA
Untuk membuat diagnosis, immunoassay enzim dikaji dengan teliti, hasil yang diperoleh dibandingkan dengan nilai rujukan. Norma adalah titer antibodi 1: 100 dengan indeks positif kurang dari 0.9.
Nilai berangka tajuk
Hasil yang diperoleh boleh menjadi negatif, positif, lemah positif, atau dipersoalkan. Jumlah titisan AT bergantung kepada keparahan pencerobohan dan usia kejadiannya.
Penyahkodan analisis:
- Pada titer hingga 1: 100 - hasilnya negatif. Tidak ada larva toxocara di badan pesakit.
- Pada titer hingga 1: 400 - hasilnya positif positif. Pesakit mengalami pencerobohan yang lemah atau bentuk toksokariasis okular berkembang. Dalam beberapa kes, petunjuk menunjukkan jangkitan baru-baru ini.
- Pada titer hingga 1: 600 - hasilnya positif. Seseorang menderita bentuk klinikal helminthiasis, jika dikesan, terapi segera diperlukan.
- Pada titer hingga 1: 800 - hasilnya positif. Ini membicarakan pencerobohan yang teruk yang bersifat progresif dan sebilangan besar kemungkinan perkembangan proses patologi organ-organ dalaman.
Dengan pengecualian yang jarang berlaku, kajian ELISA mendedahkan bentuk pencerobohan yang diabaikan dengan campuran helminthiases yang berlainan. Dalam kes ini, jumlah antibodi boleh lebih tinggi daripada 1: 800.
Pekali positif
Dalam ujian imunosorben berkait enzim untuk toksokariasis dengan titer 1: 400 - 1: 600 untuk membezakan pencerobohan dari faktor sampingan, petunjuk yang diperoleh dibandingkan dengan nilai rujukan. Perbezaan antara nombor ini biasanya disebut indeks atau pekali positif.
Biasanya, dalam bentuk ELISA yang dijalankan, satu penunjuk berdiri bertentangan dengan yang lain. Yang pertama adalah norma, yang kedua bermaksud:
- Hingga 0.9 - hasilnya negatif. Tidak ada larva toxocara yang dijumpai.
- 0.9-1.1 - hasilnya diragukan. Dalam kes ini, diagnostik berulang ditetapkan.
- 1.1-2.2 - hasilnya positif positif. Seseorang adalah pembawa dengan pencerobohan yang lemah.
- 2.2-4.2 - hasilnya positif. Toksokariasis sederhana telah lama berkembang.
- Di atas 4.4 - hasilnya menunjukkan puncak pencerobohan helminthik atau helminthiasis baru-baru ini.
KP dengan hasil 4.4 dan peningkatan eosinofilia yang dikesan sebanyak 10% dapat menunjukkan perkembangan bentuk toksocariasis okular dan adanya antibodi terhadap invasi silang, hingga toksocariasis.
Tindak balas imun dan ketumpatan optik antibodi (pekali positif) bergantung pada tahap jangkitan dengan toksokar dan lokasinya. Titer terkecil dan penunjuk CP hanya membolehkan kita menganggap ketiadaan helminths, tetapi tidak menegaskan ini.
Maklumat yang diberikan tidak dapat menjadi sumber diagnosis diri atau rawatan diri. Hasil ELISA dalam kombinasi dengan pemeriksaan awal hanya dapat memberitahu pakar mengenai kehadiran masalah. Di makmal Invitro, diagnostik darah dilakukan dengan ketepatan yang tinggi, hasil analisis disertakan dengan komen dari pakar mengenai pekali positif. Ini sangat membantu doktor membuat diagnosis yang lebih tepat.
Bilangan penentuan 96 (48 dalam rangkap)
Format tablet berfungsi: dilucutkan 12x8, memecahkan 1 lubang.
Sensitiviti: 1.5 U / ml.
Julat pengukuran: 0-400 U / ml.
Isipadu sampel ujian tidak lebih daripada 25 μl.
Piawaian keadaan untuk melakukan tindak balas enzimatik dengan kromogen dalam pengocok termostat pada suhu 37 ° C.
Set ini merangkumi:
1. Plat bergaris telaga 12 x 8, siap digunakan - 1 pc.
2. Sampel penentukuran yang siap digunakan (0-400 U / ml) berwarna dengan intensiti yang berbeza-beza bergantung pada kepekatan - 6 botol.
3. Sampel kawalan - 1 botol.
4. Konjugat satu komponen, siap digunakan, tidak memerlukan pencairan - 1 botol.
5. Larutan pencairan serum - 1 botol.
6. Substrat kromogenik, satu komponen - tetramethylbezidine plus (TMB +), siap digunakan, tidak memerlukan pencairan - 1 botol.
7. Larutan larutan fosfat-garam dengan tween - 2 botol.
8. Hentikan reagen, siap digunakan - 1 botol.
9. Filem untuk menutup tablet - 1 pc.
10. Stensil untuk membina graf penentukuran - 1 pc.
11. Mandi reagen - 2 pcs.
12. Petua pipet untuk 5-200 µl - 16 pcs.
Pembungkusan tablet - beg jati berkunci zip.
Kestabilan larutan kerja FST-T sekurang-kurangnya 5 hari pada suhu +2 ... 8 ° C.
Simpan kit pada suhu +2 ... 8 ° C. Tarikh luput - 1 tahun dari tarikh pengeluaran.
Berdaftar dengan Roszdravnadzor.
Pengilang Rusia terkemuka Dalam segmen kit reagen untuk diagnostik jangkitan: - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - LLC Sistem Diagnostik NPO, N. Novgorod; - CJSC "Ecolab", Electrogorsk, wilayah Moscow. Dalam bidang kit reagen untuk diagnosis penyakit tidak berjangkit dan keadaan fisiologi: - LLC "Alkor-Bio", St. Petersburg; - CJSC "Vektor-Terbaik", Novosibirsk; - LLC "Hema-Medica", Moscow. Dalam segmen reagen untuk diagnostik makmal alahan: - LLC "Alkor-Bio", St. Petersburg; - CJSC "Vektor-Terbaik", Novosibirsk; - LLC NPO Immunotex, Stavropol. Pengeluaran peralatan makmal: - LLC "Pikon, Moscow
Penilaian tahap kemungkinan penggantian import dengan tatanama ujian Nomenklatur analit, unit Diluluskan untuk digunakan dalam RF Dihasilkan dalam RF Tahap kemungkinan penggantian import Penanda penyakit berjangkit% Penanda penyakit tidak berjangkit dan petunjuk keadaan fisiologi% Penanda alergi% Jumlah:%
Penilaian tahap penggantian import dengan jumlah pasaran produk untuk tablet ELISA segmen Pasaran pasaran di Persekutuan Rusia, jutaan. Jumlah penjualan pengeluar domestik, jumlah yang besar. Bahagian penggantian import Penanda penyakit berjangkit% Penanda penyakit tidak berjangkit dan petunjuk keadaan fisiologi% Penanda alergi% Peralatan 50051% Jumlah:%
Penilaian tahap penggantian import dengan jumlah pasaran produk untuk kaedah imunokimia secara keseluruhan Segmen pasaran Jumlah pasaran di Persekutuan Rusia, juta. Jumlah penjualan pengeluar domestik, jumlah yang besar. Bahagian penggantian import Penanda penyakit berjangkit% Penanda penyakit tidak berjangkit dan petunjuk keadaan fisiologi% Penanda alergi% Peralatan% Jumlah:%
Masalah pengeluar domestik dalam industri: Kaedah ELISA menjadi usang. Terdapat penggantian reagen IF domestik secara beransur-ansur dengan chemiluminescent yang diimport; Sistem perolehan awam yang ada merangsang pembelian barang paling murah, atau produk import dengan ciri unik; Salah satu sebab utama kekurangan peralatan automatik pengeluar domestik dan penyetempatan pengeluaran produk import adalah halangan pentadbiran kastam; Masalah utama sejak kebelakangan ini adalah keruntuhan sistem pendaftaran produk baru negara di RZN. Kemasukan produk baru ke pasaran hampir berhenti dan pengeluar asing yang sebelumnya mendaftar dengan senarai panjang terus mendapat kelebihan berbanding produk domestik; Sebab utama kelewatan teknologi adalah ketidakupayaan untuk mendapatkan hak untuk menghasilkan produk yang sesuai untuk peralatan moden; Tahap penggabungan pengeluar domestik yang rendah dan perang harga yang berterusan antara satu sama lain menjadikannya mustahil untuk mengembangkan produk maju dan bersaing dengan pemain terkemuka pada tahap yang sama, termasuk di pasaran asing.
Cadangan: Memperkenalkan prosedur yang tidak kompetitif untuk pengadaan awam alat perubatan dalam kerangka FCC, diikuti dengan penerbitan posisi. Penentuan had pembiayaan berdasarkan harga pasaran rata-rata akan memberikan kelebihan tertentu kepada pengeluar domestik, akan memungkinkan untuk membatasi penggunaan reagen import mahal dan mengawal penggunaan dana belanjawan dengan lebih cekap; Menggalakkan pembesaran dan penyatuan pengeluar domestik untuk menumpukan sumber daya pada pengembangan produk moden dan memasuki pasaran antarabangsa. Prosedur perolehan awam yang tidak kompetitif dengan cepat akan meninggalkan hanya perusahaan yang benar-benar kompetitif di pasaran; Untuk memperuntukkan dana negara untuk merangsang, berdasarkan prinsip-prinsip perkongsian awam-swasta, pengembangan sejumlah ujian yang cukup untuk memastikan keselamatan biologi negara; Keistimewaan kastam harus untuk komponen, bukan untuk produk jadi; Harmonisasikan sistem pendaftaran dengan sistem Eropah, di mana alat perubatan dengan tahap potensi risiko rendah didaftarkan berdasarkan pernyataan pematuhan.
Memuat ...