Taninurile (taninurile) sunt compuși fenolici vegetali cu greutate moleculară mare, capabili să precipite proteinele și având un gust astringent.

Termenul de „taninuri” s-a dezvoltat istoric, datorită capacității acestor compuși de a transforma pieile brute ale animalelor în piele durabilă, rezistentă la umiditate și microorganisme. A folosi acest termen sugerat oficial în 1796 de Seguin pentru a desemna în extractele anumitor plante substanțe capabile să efectueze procesul de tăbăcire.

Bronzarea este o interacțiune chimică complexă a tanidelor cu moleculele de colagen - principala proteină a țesutului conjunctiv. Proprietățile de bronzare sunt posedate de fenolii multinucleari care conțin mai mult de un hidroxil în moleculă. Cu un aranjament plat de tanidă pe o moleculă de proteină, între ele apar legături stabile de hidrogen:

Fragment de moleculă de proteină Fragment de moleculă de tanidă

Puterea interacțiunii tannidei cu proteina depinde de numărul de legături de hidrogen și este limitată de dimensiunea moleculei compusului polifenolic. Greutatea moleculară a taninurilor poate fi de până la 20 000. În același timp, există 1-2 grupări hidroxi fenolice la 100 de unități de greutate moleculară în tanide. Prin urmare, numărul legăturilor de hidrogen formate este numeroase, iar procesul de bronzare este ireversibil. Radicalii hidrofobi, orientați spre mediul extern, fac pielea inaccesibilă umezelii și microorganismelor.

Nu toți taninurile sunt capabile de bronzare adevărată. Compușii cu o greutate moleculară de 1.000 sau mai mult se disting prin această proprietate. Compușii polifenolici cu o masă mai mică de 1000 nu sunt capabili să tăbăcească pielea și au doar un efect astringent.

Taninurile sunt utilizate pe scară largă în industrie. Este suficient să spunem că producția mondială de taninuri depășește 1.500.000 de tone pe an, iar ponderea taninurilor vegetale este de până la 50-60% din total.

Distribuția în lumea plantelor și rolul taninurilor în plante. Taninurile se găsesc pe scară largă în reprezentanții acoperite și gimnosperme, alge, ciuperci, licheni, în limfoizi și ferigi. Se găsesc în multe plante superioare, în special în dicotiledonate. Cel mai mare număr a fost găsit la un număr de reprezentanți ai familiilor Fabaceae, Myrtaceae, Rosaceae, Anacardiaceae, Fagaceae, Polygonaceae.

Taninurile din plantă sunt localizate în vacuolele celulare și în timpul îmbătrânirii celulare sunt adsorbite pe pereții celulari. Se acumulează în cantități mari în organele subterane, scoarță, dar pot fi în frunze și fructe.

Taninurile îndeplinesc în principal funcții de protecție în plante. Odată cu deteriorarea mecanică a țesuturilor, începe o formare intensă a taninurilor, însoțită de condensarea lor oxidativă în straturile de suprafață, protejând astfel planta de deteriorarea ulterioară și de influența negativă a agenților patogeni. Datorită cantității mari de hidroxili fenolici, taninurile au proprietăți bacteriostatice și fungicide pronunțate, protejând astfel organismele vegetale de diferite boli.

Clasificarea taninurilor. În 1894, G. Prokter, studiind produsele finale ale pirolizei taninurilor, a descoperit 2 grupe de compuși - pirogalici (se formează pirogallol) și pirocatecol (pirocatecolul se formează în timpul descompunerii):

K. Freudenberg în 1933 a clarificat clasificarea lui G. Procter. El, ca și Procter, a clasificat taninurile după produsele finale ale degradarii lor, dar nu în condiții de piroliză, ci sub hidroliză acidă. În funcție de capacitatea de hidroliză, K. Freudenberg a propus să distingă două grupe de taninuri: hidrolizabil și condensat.În prezent, clasificarea lui K. Freudenberg este folosită mai des.

Pentru grup taninuri hidrolizabile Compușii sunt construiți în funcție de tipul de esteri și se descompun în timpul hidrolizei acide în componentele lor constitutive. Veriga centrală este cel mai adesea glucoza, mai rar alte zaharuri sau compuși aliciclici (de exemplu, acid chinic). Hidroxilii alcoolici ai reziduului central pot fi legați cu o legătură eterică cu acidul galic, formând astfel o grupare galotanini, sau acid elagic, formând un grup elagitanine.

Galotanini- esterii acidului galic, cel mai adesea întâlniți în grupa taninurilor hidrolizabile. Există mono-, di-, tri-, tetra-, penta- și polihaloil eteri. Reprezentantul monogaloil eterului este b-D-glucogalina:

Un exemplu de eteri polihaloilici este taninul chinezesc, a cărui structură a fost stabilită pentru prima dată în 1963 de către Hawors:

Ellagitannins sunt esteri ai zahărului și acidului elagic sau derivați ai acestora. Acidul elagic se formează prin oxidarea a două molecule de acid galic la acid hexaoxidifenic, care formează imediat lactona - acid elagic:

Ca și în cazul precedent, glucoza este cel mai adesea componenta zahărului elagitaninelor.

Esteri ai acidului galic fără zahăr sunt esteri ai acidului galic și o componentă non-zahar, cum ar fi acidul chinic, hidroxicinamic, etc. Un exemplu de acest grup de substanțe este acidul 3,4,5-trihaloilchinic.

Taninuri condensate Ele diferă de cele hidrolizabile prin faptul că în timpul hidrolizei acide nu se descompun în componentele lor constitutive, ci, dimpotrivă, sub acțiunea acizilor minerali, se formează produse de polimerizare dense roșu-brun - flobafeni.

Taninurile condensate sunt formate în principal din catechine și leucocianidine și, mult mai rar, din alte forme reduse de flavonoide. Taninurile condensate nu aparțin grupului „Glicozide”: nu există o componentă de zahăr în taninurile condensate.

Formarea taninurilor condensate poate avea loc în două moduri. K. Freudenberg (anii 30 ai secolului XX) a stabilit că formarea taninurilor condensate este un proces neenzimatic de autocondensare a catechinelor sau leucocianidinelor (sau a condensării lor încrucișate) ca urmare a expunerii la oxigenul atmosferic, căldură și un mediu acid. . Autocondensarea este însoțită de ruperea inelului piran al catechinelor, iar atomul de carbon C-2 al unei molecule este legat printr-o legătură carbon-carbon cu atomul de carbon C-6 sau C-8 al altei molecule. În acest caz, se poate forma un lanț suficient de lung:

Potrivit unui alt om de știință, D. Hatuei, taninurile condensate se pot forma ca urmare a condensării oxidative enzimatice a moleculelor „cap la coadă” (inel A la inel B) sau „coadă la coadă” (inel B la inel B) tipuri:

Plantele care conțin taninuri condensate trebuie să aibă precursorii lor - catechine libere sau leucocianidine. Polimerii condensați amestecați de catechine și leucocianidine sunt obișnuiți.

De regulă, taninurile din ambele grupări condensate și hidrolizabile sunt prezente simultan în plante.

Proprietățile fizico-chimice ale taninurilor. Taninurile se disting printr-o greutate moleculară mare – până la 20 000. Taninurile naturale, cu câteva excepții, sunt cunoscute până acum doar în stare amorfă. Motivul pentru aceasta este că aceste substanțe sunt amestecuri de compuși care sunt similare ca structură chimică, dar diferă ca greutate moleculară.

Taninurile sunt compuși galbeni sau maro care formează soluții coloidale în apă. Solubil în etanol, acetonă, butanol și insolubil în solvenți cu hidrofobicitate pronunțată - cloroform, benzen etc.

Galotaninii sunt slab solubili în apă rece și relativ bine solubili în apă fierbinte.

Taninurile au activitate optică și se oxidează ușor în aer.

Datorită prezenței hidroxililor fenolici, aceștia precipită cu săruri de metale grele și formează compuși colorați cu Fe +3.

Izolarea taninurilor din materialele vegetale. Deoarece taninurile sunt un amestec de diferiți polifenoli, izolarea și analiza lor prezintă o anumită dificultate.

Adesea, pentru a obține totalul taninurilor, materia primă este extrasă cu apă fierbinte (taninurile sunt slab solubile în apă rece) iar extractul răcit este tratat cu un solvent organic (cloroform, benzen etc.) pentru îndepărtarea substanțelor lipofile. Apoi taninurile sunt precipitate cu săruri ale metalelor grele, urmate de distrugerea complexului cu acid sulfuric sau sulfuri.

Pentru a obține o fracție de taninuri similare ca structură chimică, puteți utiliza extracția materiilor prime cu dietil eter, alcool metilic sau etilic cu îndepărtarea prealabilă a componentelor lipofile folosind solvenți cu hidrofobicitate pronunțată - eter de petrol, benzen, cloroform.

Izolarea unor componente ale taninurilor prin precipitare din soluţii apoase sau apo-alcoolice cu săruri de plumb este larg răspândită. Precipitatele rezultate sunt apoi tratate cu acid sulfuric diluat.

La izolarea componentelor individuale ale taninurilor se folosesc metode cromatografice: cromatografia de adsorbție pe celuloză, poliamidă; schimb ionic pe diferite schimbătoare de cationi; distribuție pe silicagel; filtrare pe gel pe site moleculare.

Identificarea componentelor individuale ale taninurilor se realizează prin cromatografie pe hârtie sau într-un strat subțire de sorbent, folosind analize spectrale, reacții calitative și studiul produselor de scindare.

Analiza calitativă a taninurilor. Reacțiile calitative la taninuri pot fi împărțite în două grupe: reacții de precipitare și reacții de culoare. Pentru a efectua reacții de înaltă calitate, materiile prime sunt extrase cel mai adesea cu apă fierbinte.

Reacții de precipitare. 1. Când taninurile interacționează cu o soluție de gelatină 1% preparată într-o soluție de clorură de sodiu 10%, se formează un precipitat sau soluția devine tulbure. Când se adaugă un exces de gelatină, tulbureala dispare.

2. Tanidele dau precipitatii abundente cu alcaloizi (cofeina, pachicarpin), precum si unele baze azotate (urotropina, novocaina, dibazol).

3. Atunci când interacționează cu o soluție 10% de acetat de plumb, taninurile grupei hidrolizabile formează un precipitat floculent.

4. Taninurile condensate formează un precipitat floculant în reacția cu apa de brom.

Reacții colorate. Taninurile grupului hidrolizabil cu o soluție de alaun de amoniu și fier formează compuși colorați negru-albastru, iar din grupa condensată - negru-verde.

Dacă planta conține simultan taninuri din grupele hidrolizabile și condensate, atunci tanidele hidrolizabile sunt mai întâi precipitate cu o soluție 10% de acetat de plumb, precipitatul este filtrat și apoi filtratul este reacționat cu o soluție de alaun de fier amoniu. Apariția unei culori verde închis indică prezența substanțelor de grup condensat.

Cuantificarea taninurilor. În ciuda faptului că există aproximativ 100 de metode diferite pentru determinarea cantitativă a taninurilor, o analiză cantitativă precisă a acestui grup de substanțe biologic active este dificilă.

Dintre metoda utilizată pe scară largă pentru determinarea cantitativă a taninurilor se pot distinge următoarele.

1. Gravimetric - bazat pe precipitarea cantitativă a taninurilor cu gelatină, săruri de metale grele etc.

2. Titrimetric - bazat pe reactii oxidative, in primul rand cu permanganat de potasiu.

3. Colorimetric fotoelectric - bazat pe capacitatea taninurilor de a forma produse de reacție colorate stabile cu săruri de oxid de fier, acid fosfotungstic etc.

Farmacopeea de Stat a edițiilor X și XI a recomandat o metodă titrimetrică pentru determinarea cantitativă a taninurilor.

Cuprins

OFS.1.5.3.0008.15 Determinarea conținutului de taninuri din materiile prime din plante medicinale și din preparatele din plante medicinale

În loc de art. GF XI

Determinarea conținutului de taninuri din materiile prime din plante medicinale și din preparatele din plante medicinale se realizează prin metode titrimetrice și/sau spectrofotometrice. Metoda titrimetrică este de a determina cantitatea de taninuri în termeni de tanin, iar metoda spectrofotometrică vă permite să determinați cantitatea de taninuri în termeni de pirogalol.

Metoda 1. Determinarea cantității de taninuri din punct de vedere al taninului

Aproximativ 2 g (cântărit cu precizie) de material vegetal medicinal zdrobit sau preparat din plante medicinale, cernute printr-o sită cu orificii de 3 mm, se pun într-un balon conic cu o capacitate de 500 ml, se toarnă 250 ml apă încălzită până la fierbere și se fierbe sub reflux pe o sobă electrică cu spirală închisă timp de 30 de minute cu agitare periodică. Extractul rezultat este răcit la temperatura camerei și filtrat prin vată într-un balon cotat cu o capacitate de 250 ml, astfel încât particulele de materie primă/preparat să nu ajungă în balon, aduceți volumul soluției la semn cu apă. și amestecați. 25,0 ml din extractul apos obţinut se pun într-un balon conic cu o capacitate de 1000 ml, se adaugă 500 ml apă, 25 ml soluţie de acid indigosulfonic şi se titrează cu agitare constantă de permanganat de potasiu cu o soluţie de 0,02 M până la culoarea galben-aurie. colorare.

În paralel, se efectuează un experiment de control: 525 ml apă, 25 ml soluție de acid indigosulfonic se pun într-un balon conic cu o capacitate de 1000 ml și se titrează cu agitare constantă de permanganat de potasiu cu o soluție de 0,02 M până la culoarea galben-aurie. colorare.

1 ml soluție de permanganat de potasiu 0,02 M corespunde la 0,004157 g de tanin din punct de vedere al taninului.

(V – V 1 ) 0,004157 250 100 100

X = ————————————————— ,

A· 25 · (100 - W)

V- volumul de soluție de permanganat de potasiu 0,02 M, consumat pentru titrarea extracției apoase, ml;

V 1 - volumul de soluție de permanganat de potasiu 0,02 M, consumat pentru titrare în experimentul martor, ml;

0,004157 - cantitatea de taninuri corespunzătoare la 1 ml soluție de permanganat de potasiu 0,02 M (din tanin), g;

A- greutatea materiilor prime sau a medicamentului din plante, g;

W- umiditatea plantelor medicinale sau a produselor medicinale din plante,%;

250 - volumul total de extracție a apei, ml;

25 - volum de extract de apă luat pentru titrare, ml.

Notă.Prepararea soluției de acid indigosulfonic. 1 g indigo carmin se dizolvă în 25 ml acid sulfuric concentrat, apoi se adaugă încă 25 ml acid sulfuric concentrat și se diluează cu apă la 1000 ml, turnând cu grijă soluția rezultată în apă, într-un balon cotat cu o capacitate de 1000 ml, se amestecă.

Metoda 2. Determinarea cantității de taninuriîn termeni de pirogalol

Aproximativ 0,5 - 1,0 g (cântărit exact sau altfel specificat în monografia farmacopeei sau în documentația de reglementare) de material vegetal medicinal zdrobit sau de produs medicinal pe bază de plante, cernut printr-o sită cu orificii de 0,18 mm, se pun într-un balon conic cu o capacitate de 250 ml. , se adaugă 150 ml apă și se refluxează într-o baie de apă timp de 30 min. Extractul apos rezultat în balon este răcit la temperatura camerei, filtrat prin vată într-un balon cotat cu o capacitate de 250 ml, astfel încât particulele de materie primă să nu intre în balon, volumul soluției este adus la semnul cu apă și amestecat. Soluția rezultată este filtrată printr-un filtru de hârtie cu un diametru de aproximativ 125 mm, aruncând primii 50 ml de filtrat.

Determinarea se efectuează într-un loc întunecat.

Determinarea cantității de taninuri... 5,0 ml de filtrat se pun într-un balon cotat de 25 ml, volumul soluției se aduce la semn cu apă și se amestecă. Puneți 2,0 ml din soluția rezultată într-un balon cotat de 25 ml, adăugați 1 ml de reactiv fosforomolibden-tungsten, 10 ml apă și aduceți volumul soluției la semn cu carbonat de sodiu cu o soluție 10,6% (soluție de testare) . După 30 de minute, se măsoară densitatea optică a soluției de testat (A1) pe un spectrofotometru la o lungime de undă de 760 nm într-o cuvă cu o grosime a stratului de 10 mm, folosind apă ca soluție de referință.

Determinarea cantității de taninuri care nu sunt adsorbite de pudra de piele. La 10,0 ml de filtrat se adaugă 0,1 g de pulbere de piele, se agită amestecul rezultat timp de 60 de minute și se filtrează printr-un filtru de hârtie. 5,0 ml din filtratul obţinut se pun într-un balon cotat de 25 ml, volumul soluţiei se aduce la semn cu apă şi se amestecă. Se pun 2,0 ml din soluția rezultată într-un balon cotat de 25 ml, se adaugă 1 ml reactiv fosforomolibden-tungsten, 10 ml apă, se diluează volumul soluției până la semn cu carbonat de sodiu cu o soluție 10,6% și se amestecă (soluția de testare). ). După 30 de minute, se măsoară densitatea optică a soluției de testat (A2) pe un spectrofotometru la o lungime de undă de 760 nm într-o cuvă cu o grosime a stratului de 10 mm, folosind apă ca soluție de referință.

Se măsoară în paralel densitatea optică a soluției standard.

Se pun 2,0 ml soluție de pirogalol CO într-un balon cotat de 25 ml, se adaugă 1 ml reactiv fosforomolibden-tungsten, se adaugă 10 ml apă, volumul soluției se aduce la semnul de carbonat de sodiu cu o soluție 10,6% și se agită. (soluție standard). După 30 de minute, se măsoară densitatea optică a soluției standard (A 3) pe un spectrofotometru la o lungime de undă de 760 nm într-o cuvă cu o grosime a stratului de 10 mm, folosind apă ca soluție de referință.

A 1- densitatea optică a soluției de testat la determinarea cantității de taninuri;

A 2 - densitatea optică a soluției de testat la determinarea cantității de taninuri neadsorbite de pulberea de piele, calculată ca pirogalol;

A 3— densitatea optică a unei soluții standard;

A- cantitatea cântărită de materii prime din plante medicinale sau produs medicinal din plante, g;

A 0 - greutatea pirogalolului CRM, g;

W- umiditatea plantelor medicinale sau a produselor medicinale din plante, %.

Notă. Prepararea soluției de pirogalol CO... 0,05 g (cântărit cu precizie) de pirogalol CO se pun într-un balon cotat cu o capacitate de 100 ml, se dizolvă în apă, se aduce volumul soluției la semn cu apă și se amestecă. 5,0 ml din soluția rezultată se pun într-un balon cotat cu o capacitate de 100 ml, volumul soluției se aduce la semn cu apă și se amestecă. Soluția se folosește proaspăt preparată.

Introducere
La plante, una dintre cele mai comune grupe de substanțe biologic active (BAS) sunt taninurile (taninurile), care au un spectru larg de activitate farmacologică.Taninuriau un efect hemostatic, astringent, antiinflamator, antimicrobian și prezintă, de asemenea, activitate ridicată a vitaminei P, efecte anti-sclerotice și antihipoxice. Taninurile condensate sunt antioxidanti si au efect antitumoral. Taninurifolosit ca antidot pentru otrăvirea cu glicozide, alcaloizi, săruri de metale grele. În medicină, taninurile sunt folosite în tratamentul bolilor precum stomatita, gingivita, faringita, amigdalita, colita, enterocolita, dizenteria, se folosesc și pentru arsuri, sângerări uterine, stomacale și hemoroidale..
Definiția conținutuluitaninurile reprezintă o componentă importantă în stabilirea calității materialelor vegetale care conțin taninuri. Există diverse metode de determinare a taninurilor, dar cel mai adesea se folosesc metode titrimetrice și spectrofotometrice.
Obiectiv- evaluarea validarii metodelor de determinare cantitativa a taninurilor din punct de vedere al convergentei, corectitudinii, liniaritatii.
Materiale și metode de cercetare
Ca obiect de cercetare a fost folosită materia primă – iarba uscată la aer.manșetă comună (Alchemilla vulgaris L.) fam. Rosaceae (Rosaceae).
Pentru evaluarea de validare a metodelor de determinare cantitativă a taninurilor din iarba uscată la aers-au ales două metode: titrare permanganatometrică și determinare spectrofotometrică pe baza reacției cu reactivul Folin-Ciocalteu. Alegerea tehnicilor este justificată de frecvența utilizării lor în practică.
Iarbă uscată la aermanșetă obișnuită procurat în Septembrie 2015 în districtul Primorsky din regiunea Arhangelsk, care a fost materia primă pentru cercetare și determinarea cantitativă a taninurilor (taninurilor).
Metoda de determinare permanganatometrică este farmacopeică, adicăbazată pe reacția de oxidare a taninurilor cu o soluție de permanganat de potasiu.Aproximativ 2 g (cântărit cu precizie), materie primă zdrobită, cernută printr-o sită cu dimensiunea orificiului de 3 mm, a fost introdusă într-un balon conic cu o capacitate de 500 ml, s-au adăugat 250 ml apă încălzită la fierbere și s-a fiert la reflux pe o sobă electrică cu spirală închisă timp de 30 de minute cu agitare periodică. Extractul rezultat a fost răcit la temperatura camerei și un balon conic de 250 ml a fost filtrat prin vată, astfel încât particulele de materie primă să nu ajungă în balon. Se pipetează 25 ml din extractul rezultat și se transferăîntr-un alt balon conic cu o capacitate de 750 ml, se adaugă 500 ml apă, 25 ml soluție de acid indigosulfonic și se titrează cu agitare constantă cu o soluție de potasiupermanganat (0,02 mol/l) până la colorarea galben-aurie.
În paralel a fost efectuat un experiment de control.
1 ml de soluție de permanganat de potasiu (0,02 mol/l) corespunde la 0,004157 g de taninuri din punct de vedere al taninului.
Conținutul de taninuri (X), ca procent, în materie de materie primă uscată absolută, a fost calculat prin formula (1):

Unde (1)

V este volumul de soluție de permanganat de potasiu (0,02 mol/l) consumat pentru titrarea extracției, ml;
- volumul de soluție de permanganat de potasiu (0,02 mol/l) consumat pentru titrare în experimentul martor, ml;
0,004157 - cantitatea de taninuri corespunzătoare la 1 ml soluție de permanganat de potasiu (0,02 mol/l) (în termeni de tanin), g;
250 - volum total de extracție, ml;
25 - volumul de extracție luat pentru titrare, ml.
m- greutatea materiilor prime, g;
W- pierderea de masă în timpul uscării materiilor prime, g;
Pentru determinarea cantitativă a taninurilor prin spectrofotometrie, cca 1 g (cântărit exact) din materialul vegetal studiat, zdrobit până la dimensiunea particulelor trecând prin site cu dimensiunea orificiului de 1 mm, a fost introdus într-un balon conic cu o secțiune subțire cu un capacitate de 50 ml, s-au adăugat 25 ml dintr-un amestec de acetonă-apă într-un raport de 7:3 (soluţie de acetonă 70%). Balonul a fost închis și plasat într-un agitator de laborator (LAB PU-2, Rusia) timp de 60 de minute. Extractul rezultat a fost filtrat într-un balon cotat de 50 ml și volumul a fost adus la semn cu soluție de acetonă 70% (soluția A).
Într-un balon cotat cu o capacitate de 10 ml s-a introdus 1 ml soluție A, volumul soluției din balon s-a adus la semn cu apă purificată (soluția B).
Într-un balon cotat de 10 ml s-au introdus 0,5 ml soluție B, s-au adăugat 2 ml apă purificată, 0,25 ml reactiv Folen-Chocalteu, 1,25 ml soluție de carbonat de sodiu 20%, iar volumul soluției s-a adus la marcați cu apă. Balonul a fost lăsat 40 de minute ferit de lumină. Densitatea optică a soluției a fost determinată la o lungime de undă de 750 nm. Un amestec de reactivi fără adaos de extracție a fost utilizat ca soluție de referință.
Conținutul de tanin din extractele din materii prime vegetale a fost calculat din valorile graficului de calibrare pentru construcția căruia s-a folosit o soluție de 0,1 mg/ml dintr-o probă standard de tanin de CO. În acest scop, 0,05 g (greutate exactă) de tanin de CO au fost introduse într-un balon cotat de 100 ml, dizolvate în 30 ml apă, iar volumul din balon a fost ajustat la semn cu același solvent (soluția A).
1 ml din soluția rezultată a fost transferat într-un balon cotat de 10 ml. Volumul soluției din balon a fost adus la semn cu apă (soluția B).
O serie de soluții care conțin câte 1; 2; 3; 4; S-a preparat 5 μg/ml tanin de CO prin introducerea porțiunilor cântărite de soluție B în baloane cotate de 10 ml, s-au adăugat reactivul Folin – Chocalteu și soluție apoasă de carbonat de sodiu 20%, iar volumul de soluții din balon a fost adus la semn. cu apă.
Soluțiile au fost amestecate, baloanele au fost sigilate și ținute la temperatura camerei, ferite de lumină timp de 40 min.
Densitatea optică a soluțiilor obținute a fost determinată spectrofotometric în cuve de cuarț cu grosimea stratului de 1 cm la o lungime de undă de 725 nm față de soluția de referință.
Soluția de referință a fost un amestec de reactivi fără adaos de tanin de CO (soluția B).
Pe baza rezultatelor studiilor, a fost construit un grafic al dependenței densității optice de concentrația de tanin (Fig. 1).

Ținând cont de valorile obținute, suma taninurilor a fost calculată în termeni de tanin după formula:

, Unde

rezultate
Rezultatele determinării cantitative a taninurilor prin titrare sunt prezentate în tabel. 1.

Tabelul 1. Rezultatele determinării cantitative a taninurilor prin permanganatometrie

Greutatea eșantionului de materii prime vegetale, g	Volumul de permanganat de potasiu (0,02 mol/l), consumat pentru titrarea extractului obținut din materii prime vegetale, ml	Cantitatea de taninuri,% (X i)
2,10250		15,34892	15,72% 0,154 Δ = 0,395 ε = 2,52% Sr = 0,024
2,03255		15,21262
2,18345		15,84713
2,24350		16,24333
2,12465		15,85257
2,07055		15,80574

Valoarea medie a conținutului de taninuri din materia primă a fost de 15,7%. Valoarea calculată a valorii abaterii standard relative (0,024%), care nu depășește 2%, care caracterizează convergența satisfăcătoare a rezultatelor.
Metoda de adăugare a fost utilizată pentru a determina corectitudinea procedurii. În acest scop, s-a adăugat în balonul de titrare 1 ml de tanin CO 0,05%, 0,1% și 0,15% și s-a titrat de trei ori pentru fiecare caz. Rezultatele studiilor sunt prezentate în tabel. 2.

Tabelul 2. Determinarea corectitudinii metodei de titrare permanganatometrică a taninurilor

Cantitatea de tanin de CO adăugată, g	Greutatea materiei prime, g	Calculat cantitatea de taninuri, g	Cantitatea găsită de taninuri, g	Rata de deschidere,%	Caracteristici metrologice
0,0005	2,2435	0,0357	0,0353	98,87	99,91% 1,198 0,399 t calc. = 0,23 fila t. = 2,31
	2,1247	0,0339	0,0340	100,29
	2,0706	0,0330	0,0337	102,12
0,001	2,2435	0,0362	0,0357	98,61
	2,1247	0,0344	0,0340	98,84
	2,0706	0,0335	0,0336	100,51
0,0015	2,2435	0,0367	0,0366	99,73
	2,1247	0,0349	0,0353	101,14
	2,0706	0,0340	0,0337	99,12

Rezultatele obţinute indică faptul că coeficientul Student calculat este mai mic decât valoarea tabelului şimetoda nu conține o eroare sistematică, ceea ce ne permite să concluzionam că este corectă.
Pentru studiul liniarității, s-a determinat dependența valorilor găsite ale conținutului cantitativ de taninuri de porțiunea cântărită din materialul vegetal studiat. În acest scop, s-a efectuat o determinare cantitativă a taninurilor în șase porții cântărite de materie primă uscată la aer ale manșetei comune, diferite ca greutate (Tabelul 3).

Tabel 3. Dependența conținutului găsit de taninuri de greutatea probei de materii prime vegetale prin permanganatometrie

Greutatea materiei prime, g	Volumul de permanganat de potasiu utilizat pentru titrare, ml
2,0706		0,3159
3,0013	10,8	0,4490
4,0595	13,0	0,5404
5,1180	15,3	0,6360
6,1385	18,2	0,7566

Pe baza datelor obținute în cursul studiilor s-a trasat un grafic al dependenței unui anumit conținut de taninuri de greutatea probei de material vegetal studiat (Fig. 2) și s-a calculat coeficientul de corelație.

Orez. 2. Graficul dependenței cantității de tanin găsite de greutatea probei de materie primă uscată la aer a manșetei obișnuite

Coeficientul de corelație calculat nu a depășit 0,95, ceea ce indică liniaritatea rezultatelor determinării conținutului de substanțe investigate din greutatea probei de material vegetal analizat în intervalul de concentrație indicat.
Rezultatele determinării cantitative a taninurilor în materia primă uscată la aer a plantei comune de manșetă prin metoda spectrofotometriei sunt prezentate în tabel. 4.

Tabelul 4. Rezultatele determinării cantitative a taninurilor prin spectrofotometrie

Greutatea probei, g	Densitatea optică a soluției		Cantitatea găsită de taninuri, % (X i)	Caracteristici metrologice
1,02755	0,5957	7,30920	7,87340	7,84% 0,11 Δ = 0,28 ε = 3,61% S r = 0,034%
0,99745	0,6130	7,52147	8,34656
1,0068	0,5678	6,96687	7,65932
0,99580	0,5742	7,04539	7,83120
1,0060	0,5750	7,05521	7,76261
1,00670	0,5617	6,89202	7,57779

Valoarea medie a conținutului de taninuri din materialele vegetale este de 7,8% cu o abatere standard relativă (0,034%) care nu depășește 2%, ceea ce caracterizează convergența satisfăcătoare a rezultatelor.
Metoda de adăugare a fost utilizată pentru a determina corectitudinea procedurii. În acest scop, s-a adăugat în balonul cu extracție primară cu acetonă 1 ml de soluție de tanin 0,05%, 0,1% și 0,15% CO, iar apoi s-a efectuat determinarea cantitativă a taninurilor de trei ori pentru fiecare concentrație. Rezultatele studiilor sunt prezentate în tabel. 5.

Deținătorii brevetului RU 2439568:

Invenţia se referă la domeniul farmacologiei şi poate fi utilizată pentru determinarea taninurilor din materiale vegetale. Metoda de determinare a taninurilor din materiile prime vegetale constă în faptul că o probă de materii prime este extrasă cu apă în timpul fierberii, răcită, filtrată, se măsoară densitatea optică a unei probe alicote la o lungime de undă de 277 nm și conținutul de suma tuturor taninurilor se calculează conform unei anumite formule, apoi se adaugă proba alicotă a filtratului 1% soluție de colagen în acid acetic 1%, se agită, se filtrează, se măsoară densitatea optică a filtratului la o lungime de undă de 277 nm și se calculează conţinutul de taninuri precipitate după o anumită formulă. Metoda îmbunătățește acuratețea determinării conținutului de taninuri din materiile prime vegetale și determină selectiv taninurile precipitate și neprecipitate din materiile prime vegetale.

Invenția se referă la industria chimico-farmaceutică, domeniul farmacognoziei și chimiei farmaceutice și poate fi utilizată pentru controlul calității materiilor prime vegetale care conțin taninuri.

O metodă cunoscută de determinare a taninurilor din materiile prime din plante medicinale (HP) prin metoda coulometriei din punct de vedere al taninului (SG Abdullina et al. Determinarea coulometrică a taninurilor din materiile prime din plante medicinale. // Farmacie. Nr. 4. - 2010. - P.13 -15).

Dezavantajul acestei metode este utilizarea unui echipament suplimentar (coulometru), un titrant specific (hipoiodură de potasiu), care este aproape de permanganatul de potasiu în proprietățile sale de oxidare și nu face posibilă diferențierea dintre taninurile cu greutate moleculară mare și mică.

De asemenea, este cunoscută o metodă de determinare a conținutului de tanin și derivați ai acidului galic în ceai prin conductometrie (brevet nr. 2127878. Metodă pentru determinarea separată a taninului și catechinelor (în termeni de acid galic) în ceai. M.: 1999) .

Dezavantajul acestei metode este utilizarea solvenților organici toxici (alcool izobutilic), precum și utilizarea unei reacții de culoare cu Fe (III), al cărei produs este un compus colorat care este instabil la culoare în timp.

De asemenea, este cunoscută o metodă de determinare cantitativă a taninurilor din punct de vedere al taninului din frunzele de scumpia și sumach prin metoda complexometrică după precipitarea taninurilor cu săruri de zinc (GOST 4564-79. Frunza de scumpia. Specificații; GOST 4565-79. Sumach. fișă.Specificații).

Dezavantajul acestei metode este durata analizei și dificultatea determinării punctului de echivalență.

De asemenea, este cunoscută o metodă de determinare cantitativă a taninurilor prin metoda spectrofotometrică după reacția cu reactivul Folin-Chocalteu în ceea ce privește acidul galic (Orientări pentru metodele de control al calității și siguranța aditivilor alimentari biologic activi. Ghid. P 4.1. 1672-03.- M.- 2004.- p.94-95).

Dezavantajul acestei metode este imposibilitatea determinării separate a taninurilor cu greutate moleculară mică și mare.

Cea mai apropiată de metoda propusă este că taninurile sunt determinate prin spectrofotometrie în ceea ce privește acidul galic (Linii directoare pentru metodele de control al calității și siguranța aditivilor alimentari biologic activi. Ghid. R 4.1.1672-03. - M. - 2004 - p. 120).

Dezavantajul acestei metode este diluarea repetată a probei de testat, ca urmare a căreia concentrația de taninuri din soluție este slab determinată. De asemenea, în această metodă, soluția de referință este o soluție tampon, ceea ce complică analiza. În plus, această metodă nu face posibilă determinarea separată a conținutului de taninuri cu greutate moleculară mică și cu greutate moleculară mare.

Obiectivul invenţiei este de a îmbunătăţi acurateţea determinării taninurilor şi posibilitatea determinării separate a taninurilor precipitate şi neprecipitate din materiile prime vegetale.

Problema este rezolvată prin faptul că o probă de materii prime este extrasă cu apă în timpul fierberii, răcită, filtrată, densitatea optică a unei probe alicote este măsurată la o lungime de undă de 277 nm, iar conținutul sumei tuturor taninurilor este calculat folosind formula

50 - volumul balonului, ml,

W - conținutul de umiditate al materiilor prime,%,

La o probă alicotă de filtrat se adaugă soluție de colagen 1% în acid acetic 1%, se agită, se filtrează, se măsoară densitatea optică a filtratului la o lungime de undă de 277 nm și se calculează conținutul de taninuri precipitate folosind formula

D 1 - densitatea optică a soluției 1,

D 2 - densitatea optică a soluției 2,

m nav - greutatea probei de materie primă, g,

V a este volumul unei probe alicote, ml,

250 - volum total de extracție, ml,

50 - volumul balonului, ml,

508 - indicele de absorbție specific al acidului galic (densitatea optică a soluției de acid galic 1% 1 mg/ml),

W - conținutul de umiditate al materiilor prime,%.

În practică, metoda se realizează după cum urmează. Aproximativ 2,0 (cântărit cu precizie) din materia primă zdrobită, cernută printr-o sită cu diametrul găurii de 3 mm, se pune într-un balon cu o capacitate de 500 ml, se toarnă 250 ml apă încălzită până la fierbere și se fierbe timp de 30 de minute. sub reflux cu agitare periodică. Se răcește la temperatura camerei, se aduce la 250 ml cu apă, se filtrează prin vată pentru ca particulele de materie primă să nu intre în extractul de apă. Aruncați primii 50 ml de filtrat.

1-4 ml de extract apos se pun intr-un balon cotat cu o capacitate de 50 ml, adus la semn cu apa (solutia 1). Densitatea optică a soluției 1 este măsurată la o lungime de undă de 277 nm. Apa este folosită drept comparație.

Se pun 30 ml de extract apos într-un recipient de măsurare cu o capacitate de 50 ml, se adaugă 2-10 ml reactiv de precipitare, se agită 30-60 minute, se depune, se filtrează. 1-4 ml din filtratul obţinut se transferă într-un balon cu o capacitate de 50 ml, adus la semn cu apă (soluţia 2). Densitatea optică a soluției 2 este măsurată la o lungime de undă de 277 nm. Apa este folosită drept comparație.

Invenţia este ilustrată prin următoarele exemple.

Exemplul 1. Pentru analiza luată materie primă vegetală - scoarță de stejar.

Aproximativ 2,0 (cântărit cu precizie) de scoarță crudă de stejar zdrobită, cernută printr-o sită cu diametrul găurii de 3 mm, se pun într-un balon cu o capacitate de 500 ml, se toarnă 250 ml apă încălzită până la fierbere și se fierb timp de 30 de minute. sub reflux cu agitare periodică. Se răcește la temperatura camerei, se aduce la 250 ml cu apă, se filtrează prin vată pentru ca particulele de materie primă să nu intre în extractul de apă. Aruncați primii 50 ml de filtrat.

2 ml de extract apos din scoarta de stejar se pun intr-un balon cotat cu o capacitate de 50 ml, adus la semn cu apa (solutia 1). Densitatea optică a soluției 1 este măsurată la o lungime de undă de 277 nm. Apa este folosită drept comparație. D 1 pentru scoarța de stejar este 0,595.

30 ml de extract apos se pun într-un recipient de măsurare cu o capacitate de 50 ml, se adaugă 2 ml de reactiv de precipitare, se agită timp de 30 de minute, se depune, se filtrează. 2 ml din filtratul obţinut se transferă într-un balon cu o capacitate de 50 ml, adus la semn cu apă (soluţia 2). Densitatea optică a soluției 2 este măsurată la o lungime de undă de 277 nm. Apa este folosită drept comparație. D 2 pentru scoarța de stejar este 0,276.

Exemplul 2. Pentru analiză, s-a luat materialul vegetal al rizomilor în spirală.

Aproximativ 2,0 (cântărit cu precizie) din materia primă zdrobită a rizomului spiralat, cernută printr-o sită cu diametrul găurii de 3 mm, se pune într-un balon cu o capacitate de 500 ml, se toarnă 250 ml apă încălzită până la fierbere și se fierbe 30 de minute la reflux cu agitare periodică. Se răcește la temperatura camerei, se aduce la 250 ml cu apă, se filtrează prin vată pentru ca particulele de materie primă să nu intre în extractul de apă. Aruncați primii 50 ml de filtrat.

1 ml de extract de apă din rizomul colacului se pune într-un balon cotat cu o capacitate de 50 ml, adus la semn cu apă (soluția 1). Densitatea optică a soluției 1 este măsurată la o lungime de undă de 277 nm. Apa este folosită drept comparație.

30 ml de extract apos se pun într-un recipient de măsurare cu o capacitate de 50 ml, se adaugă 7 ml de reactiv de precipitare, se agită timp de 60 de minute, se depune, se filtrează. 1 ml din filtratul obţinut se transferă într-un balon cu o capacitate de 50 ml, adus la semn cu apă (soluţia 2). Densitatea optică a soluției 2 este măsurată la o lungime de undă de 277 nm. Apa este folosită drept comparație.

Metoda propusă îmbunătățește acuratețea determinării conținutului de tanin din materiile prime vegetale și determină selectiv taninurile precipitate și neprecipitate din materiile prime vegetale.

O metodă de determinare a taninurilor din materiile prime vegetale în termeni de acid galic, care constă în faptul că o probă de materii prime este extrasă cu apă în timpul fierberii, răcită, filtrată, se măsoară densitatea optică a unei probe alicote la o lungime de undă de 277 nm, iar conținutul sumei tuturor taninurilor este calculat folosind formula:

unde x a - conținutul sumei taninurilor în termeni de acid galic,%;




50 - volumul balonului, ml;
508 - viteza de absorbție specifică a acidului galic (densitatea optică a soluției de acid galic 1% 1 mg/ml);
W - conținutul de umiditate al materiilor prime,%,
la o probă alicotă de filtrat se adaugă o soluție de colagen 1% în acid acetic 1%, se agită, se filtrează, se măsoară densitatea optică a filtratului la o lungime de undă de 277 nm și se calculează conținutul de taninuri precipitate folosind formulă:

unde X este conținutul de taninuri precipitate în termeni de acid galic, %;
D 1 - densitatea optică a soluției 1;
D 2 - densitatea optică a soluției 2;
m nav - greutatea unei probe de materii prime, g;
V a este volumul probei alicote, ml;
250 - volum total de extracție, ml;
50 - volumul balonului, ml;
508 - viteza de absorbție specifică a acidului galic (densitatea optică a soluției de acid galic 1% 1 mg/ml);
W - conținutul de umiditate al materiilor prime,%.

Brevete similare:

Invenția se referă la medicină, și anume la psihoneurologie, și descrie o metodă de predicție a recuperării funcțiilor neurologice la pacienții aflați în perioada acută de accident vascular cerebral ischemic prin efectuarea de studii clinice și biochimice ale concentrației totale de albumină (OCA) în ser în g/ l, în cazul în care, în plus, până la 5-7 ziua bolii, se determină concentrația efectivă de albumină (ECA), se calculează rezerva de legare a albuminei (PCA), iar dacă acest indicator este mai mic de unu, un rezultat negativ al restaurării. a funcţiilor neurologice la pacienţii în perioada acută de AVC ischemic este prezisă.

Invenția se referă la medicină, la cercetarea biologică în oncologie și poate fi utilizată pentru a determina dezvoltarea unui proces malign în tumorile cerebrale după tratamentul chirurgical.

Invenția se referă la medicină, în special la oncologie, și descrie o metodă de evaluare a eficacității chimioterapiei neoadjuvante pentru cancerul vezicii urinare prin examinarea unui pacient, în care intensitatea maximă a autofluorescenței țesuturilor tumorale din regiunea verde a spectrului este înregistrată la nivelul stadiul diagnosticului primar și la 1 lună după chimioterapia preoperatorie și cu o creștere a valorilor pacientului a intensității maxime de autofluorescență a țesutului tumoral cu 15% din inițial și mai mult, eficacitatea tratamentului este evaluată ca o regresie parțială a tumorii. proces, în absența modificărilor intensității autofluorescenței țesutului tumoral față de original, se determină stabilizarea procesului, cu o scădere a intensității autofluorescenței țesutului tumoral cu 15% și mai mult de la marca inițială, progresia procesului tumoral.