टैनिन (टैनिन) पौधे उच्च आणविक भार फेनोलिक यौगिक होते हैं जो प्रोटीन को अवक्षेपित करने और एक कसैले स्वाद के लिए सक्षम होते हैं।
शब्द "टैनिन" ऐतिहासिक रूप से विकसित हुआ है, इन यौगिकों की जानवरों की कच्ची खाल को टिकाऊ चमड़े में बदलने की क्षमता के लिए धन्यवाद, नमी और सूक्ष्मजीवों के लिए प्रतिरोधी। इस शब्द का उपयोग करने के लिए आधिकारिक तौर पर 1796 में सेगुइन द्वारा सुझाए गए कुछ पौधों के अर्क में कमाना प्रक्रिया को पूरा करने में सक्षम पदार्थों को नामित करने के लिए सुझाव दिया गया था।
टैनिंग कोलेजन अणुओं के साथ टैनाइड्स की एक जटिल रासायनिक बातचीत है - संयोजी ऊतक का मुख्य प्रोटीन। टैनिंग गुणों में बहु-नाभिकीय फिनोल होते हैं जिनमें अणु में एक से अधिक हाइड्रॉक्सिल होते हैं। एक प्रोटीन अणु पर टैनाइड की एक सपाट व्यवस्था के साथ, उनके बीच स्थिर हाइड्रोजन बांड उत्पन्न होते हैं:
प्रोटीन अणु टुकड़ा टैनाइड अणु टुकड़ा
प्रोटीन के साथ टैनाइड की बातचीत की ताकत हाइड्रोजन बांड की संख्या पर निर्भर करती है और पॉलीफेनोलिक यौगिक अणु के आकार से सीमित होती है। टैनिन का आणविक भार 20,000 तक हो सकता है। वहीं, टैनाइड्स में प्रति 100 आणविक भार इकाइयों में 1-2 फेनोलिक हाइड्रोक्सी समूह होते हैं। इसलिए, गठित हाइड्रोजन बांडों की संख्या असंख्य है और कमाना प्रक्रिया अपरिवर्तनीय है। बाहरी वातावरण के लिए उन्मुख हाइड्रोफोबिक रेडिकल, त्वचा को नमी और सूक्ष्मजीवों के लिए दुर्गम बनाते हैं।
सभी टैनिन सही टैनिंग करने में सक्षम नहीं होते हैं। 1,000 या अधिक के आणविक भार वाले यौगिकों को इस संपत्ति से अलग किया जाता है। 1000 से कम द्रव्यमान वाले पॉलीफेनोलिक यौगिक चमड़े को कम करने में सक्षम नहीं होते हैं और इनका केवल एक कसैला प्रभाव होता है।
उद्योग में टैनिन का व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है। यह कहने के लिए पर्याप्त है कि टैनिन का विश्व उत्पादन प्रति वर्ष 1,500,000 टन से अधिक है, और प्लांट टैनाइड्स का हिस्सा कुल का 50-60% तक है।
पौधों की दुनिया में वितरण और पौधों में टैनिन की भूमिका। टैनिन व्यापक रूप से कवर और जिम्नोस्पर्म, शैवाल, कवक, लाइकेन, लिम्फोइड्स और फ़र्न के प्रतिनिधियों में पाए जाते हैं। वे कई उच्च पौधों, विशेष रूप से द्विबीजपत्री में पाए जाते हैं। उनकी सबसे बड़ी संख्या फैबेसी, मायर्टेसी, रोसैसी, एनाकार्डियासी, फागेसी, पॉलीगोनेसी परिवारों के कई प्रतिनिधियों में पाई गई थी।
पौधे में टैनिन कोशिका रिक्तिका में स्थित होते हैं और कोशिका की उम्र बढ़ने के दौरान कोशिका की दीवारों पर अधिशोषित हो जाते हैं। वे भूमिगत अंगों, छाल में बड़ी मात्रा में जमा होते हैं, लेकिन पत्तियों और फलों में हो सकते हैं।
टैनिन पौधों में मुख्य रूप से सुरक्षात्मक कार्य करते हैं। ऊतकों को यांत्रिक क्षति के साथ, सतह परतों में उनके ऑक्सीडेटिव संघनन के साथ, टैनिन का एक तीव्र गठन शुरू होता है, जिससे पौधे को और नुकसान और रोगजनकों के नकारात्मक प्रभाव से बचाया जाता है। फेनोलिक हाइड्रॉक्सिल की बड़ी मात्रा के कारण, टैनिन ने बैक्टीरियोस्टेटिक और कवकनाशी गुणों का उच्चारण किया है, जिससे पौधों के जीवों को विभिन्न बीमारियों से बचाया जा सकता है।
टैनिन का वर्गीकरण। 1894 में जी। प्रॉक्टर ने टैनिन के पायरोलिसिस के अंतिम उत्पादों का अध्ययन करते हुए, यौगिकों के 2 समूहों की खोज की - पाइरोगैलिक (पाइरोगॉलोल बनता है) और पाइरोकेटेकोल (अपघटन के दौरान पाइरोकेटेकोल बनता है):
के. फ्रायडेनबर्ग ने 1933 में जी. प्रॉक्टर के वर्गीकरण को स्पष्ट किया। उन्होंने, प्रॉक्टर की तरह, टैनिन को उनके क्षय के अंतिम उत्पादों द्वारा वर्गीकृत किया, लेकिन पायरोलिसिस स्थितियों के तहत नहीं, बल्कि एसिड हाइड्रोलिसिस के तहत। हाइड्रोलिसिस की क्षमता के आधार पर, के। फ्रायडेनबर्ग ने टैनिन के दो समूहों को अलग करने का प्रस्ताव दिया: हाइड्रोलाइजेबल और संघनित।वर्तमान में, के। फ्रायडेनबर्ग का वर्गीकरण अधिक बार उपयोग किया जाता है।
समूह के लिए हाइड्रोलाइजेबल टैनिनयौगिकों का निर्माण एस्टर के प्रकार के अनुसार किया जाता है और एसिड हाइड्रोलिसिस के दौरान उनके घटक घटकों में विघटित हो जाते हैं। केंद्रीय लिंक सबसे अधिक बार ग्लूकोज होता है, कम अक्सर अन्य शर्करा या एलिसाइक्लिक यौगिक (उदाहरण के लिए, क्विनिक एसिड)। केंद्रीय अवशेषों के अल्कोहल हाइड्रॉक्सिल को गैलिक एसिड के साथ एक ईथर बंधन से जोड़ा जा सकता है, इस प्रकार एक समूह बनता है गैलोटैनिन्स, या एलाजिक एसिड, एक समूह बनाते हैं एलागिटैनिन्स.
गैलोटैनिन्स- गैलिक एसिड के एस्टर, अक्सर हाइड्रोलाइज़ेबल टैनिन के समूह में पाए जाते हैं। मोनो-, डी-, ट्राई-, टेट्रा-, पेंटा- और पॉलीहेलॉयल ईथर हैं। मोनोगैलॉयल ईथर का प्रतिनिधि बी-डी-ग्लूकोगैलिन है:
पॉलीहालॉयल ईथर का एक उदाहरण चीनी टैनिन है, जिसकी संरचना पहली बार 1963 में हावर्स द्वारा स्थापित की गई थी:
एलागिटैनिन्सचीनी और एलाजिक एसिड या उसके डेरिवेटिव के एस्टर हैं। एलाजिक एसिड गैलिक एसिड के दो अणुओं के हेक्साऑक्सीडिफेनिक एसिड के ऑक्सीकरण से बनता है, जो तुरंत लैक्टोन - एलाजिक एसिड बनाता है:
पिछले मामले की तरह, ग्लूकोज अक्सर एलागिटैनिन का चीनी घटक होता है।
गैर-शर्करा गैलिक एसिड एस्टरगैलिक एसिड के एस्टर और एक गैर-शर्करा घटक जैसे कि क्विनिक एसिड, हाइड्रॉक्सीसेनामिक एसिड, आदि हैं। पदार्थों के इस समूह का एक उदाहरण 3,4,5-ट्राइहेलोइलक्विनिक एसिड है।
संघनित टैनिनहाइड्रोलाइज़ेबल से भिन्न होता है कि एसिड हाइड्रोलिसिस के दौरान वे अपने घटक घटकों में नहीं टूटते हैं, लेकिन इसके विपरीत, खनिज एसिड की कार्रवाई के तहत, घने लाल-भूरे रंग के पोलीमराइज़ेशन उत्पाद - फ़्लोबैफेन्स - बनते हैं।
संघनित टैनिन मुख्य रूप से कैटेचिन और ल्यूकोसायनिडिन द्वारा बनते हैं, और, बहुत कम सामान्यतः, फ्लेवोनोइड के अन्य कम रूप। संघनित टैनिन "ग्लाइकोसाइड्स" समूह से संबंधित नहीं हैं: संघनित टैनिन में कोई चीनी घटक नहीं होता है।
संघनित टैनिन का निर्माण दो तरह से हो सकता है। के। फ्रायडेनबर्ग (XX सदी के 30 के दशक) ने स्थापित किया कि संघनित टैनिन का निर्माण वायुमंडलीय ऑक्सीजन, गर्मी और एक अम्लीय वातावरण के संपर्क के परिणामस्वरूप कैटेचिन या ल्यूकोसायनिडिन (या उनके क्रॉस-संघनन) के ऑटोकॉन्डेंसेशन की एक गैर-एंजाइमी प्रक्रिया है। . ऑटोकॉन्डेंसेशन के साथ कैटेचिन के पाइरन रिंग का टूटना होता है और एक अणु का C-2 कार्बन परमाणु दूसरे अणु के C-6 या C-8 कार्बन परमाणु के साथ कार्बन-कार्बन बॉन्ड से जुड़ा होता है। इस मामले में, एक पर्याप्त लंबी श्रृंखला बन सकती है:
एक अन्य वैज्ञानिक, डी. हाटुई के अनुसार, संघनित टैनिन "सिर से पूंछ" (रिंग ए से रिंग बी) या "टेल टू टेल" (रिंग बी से रिंग बी) के अणुओं के एंजाइमेटिक ऑक्सीडेटिव संघनन के परिणामस्वरूप बन सकते हैं। प्रकार:
संघनित टैनिन वाले पौधों में उनके अग्रदूत होने चाहिए - मुक्त कैटेचिन या ल्यूकोसायनिडिन। कैटेचिन और ल्यूकोसायनिडिन के मिश्रित संघनित बहुलक आम हैं।
एक नियम के रूप में, पौधों में संघनित और हाइड्रोलाइजेबल दोनों समूहों के टैनिन एक साथ मौजूद होते हैं।
टैनिन के भौतिक रासायनिक गुण. टैनिन एक उच्च आणविक भार द्वारा प्रतिष्ठित हैं - 20,000 तक। प्राकृतिक टैनिन, कुछ अपवादों के साथ, अब तक केवल एक अनाकार अवस्था में ही जाने जाते हैं। इसका कारण यह है कि ये पदार्थ ऐसे यौगिकों के मिश्रण होते हैं जो रासायनिक संरचना में समान होते हैं, लेकिन आणविक भार में भिन्न होते हैं।
टैनिन पीले या भूरे रंग के यौगिक होते हैं जो पानी में कोलाइडल घोल बनाते हैं। इथेनॉल, एसीटोन, ब्यूटेनॉल में घुलनशील और स्पष्ट हाइड्रोफोबिसिटी के साथ सॉल्वैंट्स में अघुलनशील - क्लोरोफॉर्म, बेंजीन, आदि।
गैलोटैनिन ठंडे पानी में खराब घुलनशील होते हैं और गर्म पानी में अपेक्षाकृत अच्छी तरह से घुलनशील होते हैं।
टैनिन में ऑप्टिकल गतिविधि होती है और हवा में आसानी से ऑक्सीकृत हो जाती है।
फेनोलिक हाइड्रॉक्सिल की उपस्थिति के कारण, वे भारी धातु के लवण के साथ अवक्षेपित होते हैं और Fe +3 के साथ रंगीन यौगिक बनाते हैं।
पौधों की सामग्री से टैनिन का अलगाव। चूंकि टैनिन विभिन्न पॉलीफेनोल्स का मिश्रण हैं, इसलिए उनका अलगाव और विश्लेषण एक निश्चित कठिनाई प्रस्तुत करता है।
अक्सर, कुल टैनिन प्राप्त करने के लिए, कच्चे माल को गर्म पानी से निकाला जाता है (टैनिन ठंडे पानी में खराब घुलनशील होते हैं) और लिपोफिलिक पदार्थों को हटाने के लिए ठंडा अर्क एक कार्बनिक विलायक (क्लोरोफॉर्म, बेंजीन, आदि) के साथ इलाज किया जाता है। फिर टैनिन को भारी धातुओं के लवणों के साथ अवक्षेपित किया जाता है, इसके बाद सल्फ्यूरिक एसिड या सल्फाइड के साथ परिसर का विनाश होता है।
रासायनिक संरचना में समान टैनिन का एक अंश प्राप्त करने के लिए, आप डायथाइल ईथर, मिथाइल या एथिल अल्कोहल के साथ कच्चे माल के निष्कर्षण का उपयोग कर सकते हैं, जिसमें स्पष्ट हाइड्रोफोबिसिटी वाले सॉल्वैंट्स का उपयोग करके लिपोफिलिक घटकों को प्रारंभिक रूप से हटा दिया जाता है - पेट्रोलियम ईथर, बेंजीन, क्लोरोफॉर्म।
सीसा लवण के साथ जलीय या जलीय-मादक समाधानों से वर्षा द्वारा टैनिन के कुछ घटकों का अलगाव व्यापक है। परिणामी अवक्षेप को फिर तनु सल्फ्यूरिक अम्ल से उपचारित किया जाता है।
टैनिन के व्यक्तिगत घटकों को अलग करते समय, क्रोमैटोग्राफिक विधियों का उपयोग किया जाता है: सेलूलोज़, पॉलियामाइड पर सोखना क्रोमैटोग्राफी; विभिन्न कटियन एक्सचेंजर्स पर आयन एक्सचेंज; सिलिका जेल पर वितरण; आणविक चलनी पर जेल निस्पंदन।
टैनिन के व्यक्तिगत घटकों की पहचान वर्णक्रमीय विश्लेषण, गुणात्मक प्रतिक्रियाओं और दरार उत्पादों के अध्ययन का उपयोग करके कागज पर या सॉर्बेंट की एक पतली परत में क्रोमैटोग्राफी का उपयोग करके की जाती है।
टैनिन का गुणात्मक विश्लेषण. टैनिन के लिए गुणात्मक प्रतिक्रियाओं को दो समूहों में विभाजित किया जा सकता है: वर्षा प्रतिक्रियाएं और रंग प्रतिक्रियाएं। उच्च-गुणवत्ता वाली प्रतिक्रियाओं को करने के लिए, कच्चे माल को अक्सर गर्म पानी से निकाला जाता है।
वर्षा प्रतिक्रियाएं। 1. जब टैनिन 10% सोडियम क्लोराइड घोल में तैयार 1% जिलेटिन घोल के साथ परस्पर क्रिया करता है, तो एक अवक्षेप बनता है या घोल बादल बन जाता है। जब अतिरिक्त जिलेटिन मिलाया जाता है, तो बादल छा जाते हैं।
2. टैनाइड्स अल्कलॉइड्स (कैफीन, पचिकारपिन) के साथ-साथ कुछ नाइट्रोजनस बेस (यूरोट्रोपिन, नोवोकेन, डिबाज़ोल) के साथ प्रचुर मात्रा में वर्षा देते हैं।
3. लेड एसीटेट के 10% घोल के साथ बातचीत करते समय, हाइड्रोलाइज़ेबल समूह के टैनिन एक फ्लोकुलेंट अवक्षेप बनाते हैं।
4. ब्रोमीन जल के साथ अभिक्रिया में संघनित टैनिन एक प्रवाहकीय अवक्षेप बनाते हैं।
रंगीन प्रतिक्रियाएं।अमोनियम आयरन फिटकरी के घोल के साथ हाइड्रोलाइजेबल समूह के टैनिन काले-नीले रंग के यौगिक बनाते हैं, और संघनित समूह के - काले-हरे रंग के।
यदि पौधे में एक साथ हाइड्रोलाइज़ेबल और संघनित दोनों समूहों के टैनिन होते हैं, तो हाइड्रोलाइज़ेबल टैनाइड्स को पहले लेड एसीटेट के 10% घोल के साथ अवक्षेपित किया जाता है, अवक्षेप को फ़िल्टर किया जाता है, और फिर फ़िल्ट्रेट को अमोनियम आयरन फिटकरी के घोल से प्रतिक्रिया दी जाती है। गहरे हरे रंग का दिखना संघनित समूह पदार्थों की उपस्थिति को इंगित करता है।
टैनिन की मात्रा का ठहराव। इस तथ्य के बावजूद कि टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए लगभग 100 अलग-अलग तरीके हैं, जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों के इस समूह का सटीक मात्रात्मक विश्लेषण मुश्किल है।
टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए व्यापक रूप से इस्तेमाल की जाने वाली विधि में, निम्नलिखित को प्रतिष्ठित किया जा सकता है।
1. ग्रेविमेट्रिक - जिलेटिन, भारी धातु के लवण आदि के साथ टैनिन की मात्रात्मक वर्षा के आधार पर।
2. टिट्रिमेट्रिक - ऑक्सीडेटिव प्रतिक्रियाओं पर आधारित, मुख्य रूप से पोटेशियम परमैंगनेट के साथ।
3. फोटोइलेक्ट्रिक वर्णमिति - आयरन ऑक्साइड लवण, फॉस्फोटुंगस्टिक एसिड, आदि के साथ स्थिर रंगीन प्रतिक्रिया उत्पाद बनाने के लिए टैनिन की क्षमता पर आधारित है।
X और XI संस्करणों के स्टेट फार्माकोपिया ने टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए एक अनुमापांक विधि की सिफारिश की।
विषयसूची
OFS.1.5.3.0008.15 औषधीय पौधों के कच्चे माल और औषधीय हर्बल तैयारियों में टैनिन की सामग्री का निर्धारण
कला के बजाय। जीएफ इलेवन
औषधीय पौधों के कच्चे माल और औषधीय पौधों की तैयारी में टैनिन की सामग्री का निर्धारण अनुमापांक और / या स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विधियों द्वारा किया जाता है। टाइट्रिमेट्रिक विधि टैनिन के संदर्भ में टैनिन की मात्रा निर्धारित करने के लिए है, और स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विधि आपको पाइरोगॉल के संदर्भ में टैनिन की मात्रा निर्धारित करने की अनुमति देती है।
विधि 1. टैनिन के संदर्भ में टैनिन की मात्रा का निर्धारण
कुचल औषधीय पौधे सामग्री या औषधीय हर्बल तैयारी के लगभग 2 ग्राम (सटीक रूप से तौला), 3 मिमी के छेद के साथ एक छलनी के माध्यम से झारना, 500 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक शंक्वाकार फ्लास्क में रखा जाता है, उबलते हुए 250 मिलीलीटर पानी डाला जाता है और एक बंद सर्पिल के साथ एक इलेक्ट्रिक स्टोव पर भाटा के तहत 30 मिनट के लिए आवधिक सरगर्मी के साथ उबला हुआ। परिणामी अर्क को कमरे के तापमान पर ठंडा किया जाता है और रूई के माध्यम से 250 मिलीलीटर की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में फ़िल्टर किया जाता है ताकि कच्चे माल / तैयारी के कण फ्लास्क में न मिलें, घोल की मात्रा को पानी के साथ निशान पर लाएं। और मिलाएं। प्राप्त जलीय अर्क के 25.0 मिलीलीटर को एक शंक्वाकार फ्लास्क में 1000 मिलीलीटर, 500 मिलीलीटर पानी की क्षमता के साथ रखा जाता है, 25 मिलीलीटर इंडिगोसल्फोनिक एसिड समाधान जोड़ा जाता है और 0.02 एम के समाधान के साथ पोटेशियम परमैंगनेट के लगातार सरगर्मी के साथ सुनहरा पीला होने तक शीर्षक दिया जाता है। रंगना।
समानांतर में, एक नियंत्रण प्रयोग किया जाता है: 525 मिलीलीटर पानी, 25 मिलीलीटर इंडिगोसल्फोनिक एसिड समाधान 1000 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक शंक्वाकार फ्लास्क में रखा जाता है और 0.02 एम के समाधान के साथ पोटेशियम परमैंगनेट के लगातार सरगर्मी के साथ सुनहरा पीला होने तक शीर्षक दिया जाता है। रंगना।
पोटेशियम परमैंगनेट समाधान का 1 मिलीलीटर 0.02 एम टैनिन के संदर्भ में 0.004157 ग्राम टैनिन से मेल खाता है।
(वी – वी 1 ) 0.004157 250 100 100
एक्स = ————————————————— ,
ए· 25 · (100 - वू)
वी- जलीय निष्कर्षण के अनुमापन के लिए खपत पोटेशियम परमैंगनेट समाधान 0.02 एम की मात्रा, एमएल;
वी 1 - नियंत्रण प्रयोग में अनुमापन के लिए खपत पोटेशियम परमैंगनेट समाधान 0.02 एम की मात्रा, एमएल;
0.004157 - पोटेशियम परमैंगनेट समाधान 0.02 एम (टैनिन के संदर्भ में), जी के 1 मिलीलीटर के अनुरूप टैनिन की मात्रा;
ए- कच्चे माल या हर्बल औषधीय उत्पाद का वजन, जी;
वू- औषधीय पौधों या हर्बल औषधीय उत्पादों की नमी,%;
250 - पानी निकालने की कुल मात्रा, मिली;
25 - अनुमापन के लिए लिए गए पानी के अर्क की मात्रा, मिली।
ध्यान दें।इंडिगोसल्फोनिक एसिड समाधान की तैयारी।इंडिगो कारमाइन का 1 ग्राम केंद्रित सल्फ्यूरिक एसिड के 25 मिलीलीटर में भंग कर दिया जाता है, फिर एक अतिरिक्त 25 मिलीलीटर केंद्रित सल्फ्यूरिक एसिड जोड़ा जाता है और पानी से 1000 मिलीलीटर तक पतला होता है, ध्यान से परिणामस्वरूप समाधान को पानी में डालने की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में 1000 मिलीलीटर, हलचल।
विधि 2. टैनिन की मात्रा का निर्धारणपाइरोगॉलोल के संदर्भ में
कुचल औषधीय पौधे सामग्री या हर्बल औषधीय उत्पाद के लगभग 0.5 - 1.0 ग्राम (सटीक वजन या अन्यथा निर्दिष्ट फार्माकोपियल मोनोग्राफ या नियामक दस्तावेज), 0.18 मिमी छेद के साथ एक चलनी के माध्यम से निकाला जाता है, 250 मिलीलीटर की क्षमता वाले शंक्वाकार फ्लास्क में रखा जाता है 30 मिनट के लिए पानी के स्नान में 150 मिली पानी और भाटा डालें। फ्लास्क में परिणामी जलीय अर्क को कमरे के तापमान पर ठंडा किया जाता है, रूई के माध्यम से 250 मिलीलीटर की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में फ़िल्टर किया जाता है ताकि कच्चे माल के कण फ्लास्क में न मिलें, घोल की मात्रा को लाया जाता है पानी के साथ निशान और हलचल। परिणामी घोल को पेपर फिल्टर के माध्यम से लगभग 125 मिमी के व्यास के साथ फ़िल्टर किया जाता है, छानने के पहले 50 मिलीलीटर को हटा दिया जाता है।
निर्धारण एक अंधेरी जगह में किया जाता है।
टैनिन की मात्रा का निर्धारण... 5.0 मिली निस्यंद को 25 मिली के वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है, घोल की मात्रा को पानी के साथ निशान पर लाया जाता है और मिलाया जाता है। 25 मिली वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में परिणामी घोल के 2.0 मिली रखें, 1 मिली फॉस्फोरोमोलिब्डेनम-टंगस्टन अभिकर्मक, 10 मिली पानी डालें और 10.6% घोल (टेस्ट सॉल्यूशन) के साथ सोडियम कार्बोनेट के साथ घोल की मात्रा को निशान पर लाएं। . 30 मिनट के बाद, एक संदर्भ समाधान के रूप में पानी का उपयोग करते हुए, 10 मिमी की परत मोटाई के साथ क्युवेट में 760 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमीटर पर परीक्षण समाधान (ए1) के ऑप्टिकल घनत्व को मापें।
टैनिन की मात्रा का निर्धारण जो त्वचा पाउडर द्वारा अवशोषित नहीं होते हैं।छानने के 10.0 मिलीलीटर में 0.1 ग्राम चमड़े का पाउडर मिलाएं, परिणामी मिश्रण को 60 मिनट तक हिलाएं और एक पेपर फिल्टर के माध्यम से छान लें। प्राप्त छानने का 5.0 मिलीलीटर 25 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है, समाधान की मात्रा को पानी के साथ निशान पर लाया जाता है और मिश्रित किया जाता है। 25 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में परिणामी समाधान के 2.0 मिलीलीटर रखें, 1 मिलीलीटर फॉस्फोरोमोलिब्डेनम-टंगस्टन अभिकर्मक, 10 मिलीलीटर पानी जोड़ें, समाधान की मात्रा को 10.6% समाधान के साथ सोडियम कार्बोनेट के साथ निशान तक पतला करें और मिश्रण (परीक्षण समाधान) ) 30 मिनट के बाद, एक संदर्भ समाधान के रूप में पानी का उपयोग करते हुए, 10 मिमी की परत मोटाई के साथ क्युवेट में 760 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर स्पेक्ट्रोफोटोमीटर पर परीक्षण समाधान (ए 2) के ऑप्टिकल घनत्व को मापें।
मानक समाधान का ऑप्टिकल घनत्व समानांतर में मापा जाता है।
पायरोगैलोल सीओ समाधान के 2.0 मिलीलीटर को 25 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है, 1 मिलीलीटर फॉस्फोरोमोलिब्डेनम-टंगस्टन अभिकर्मक, 10 मिलीलीटर पानी जोड़ा जाता है, समाधान की मात्रा को 10.6% समाधान के साथ सोडियम कार्बोनेट के निशान पर लाया जाता है और उभारा जाता है। (मानक समाधान)। 30 मिनट के बाद, एक संदर्भ समाधान के रूप में पानी का उपयोग करते हुए, 10 मिमी की परत मोटाई के साथ क्युवेट में 760 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर एक स्पेक्ट्रोफोटोमीटर पर मानक समाधान (ए 3) के ऑप्टिकल घनत्व को मापें।
ए 1- टैनिन की मात्रा निर्धारित करते समय परीक्षण समाधान का ऑप्टिकल घनत्व;
ए 2 -टैनिन की मात्रा का निर्धारण करते समय परीक्षण समाधान का ऑप्टिकल घनत्व, त्वचा पाउडर द्वारा अधिशोषित नहीं होता है, जिसे पाइरोगॉल के रूप में गणना की जाती है;
ए 3— एक मानक समाधान का ऑप्टिकल घनत्व;
ए- औषधीय पौधे कच्चे माल या हर्बल औषधीय उत्पाद की तौलित मात्रा, जी;
ए 0 - पायरोगैलोल सीआरएम की तौलित मात्रा, जी;
वू- औषधीय पौधों या हर्बल औषधीय उत्पादों की नमी,%।
ध्यान दें. पाइरोगॉल सीओ घोल तैयार करना... पाइरोगॉल सीओ के 0.05 ग्राम (सटीक रूप से तौला) को 100 मिलीलीटर की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है, पानी में घोलकर घोल की मात्रा को पानी के साथ निशान पर लाया जाता है, और मिलाया जाता है। परिणामी घोल के 5.0 मिली को 100 मिली की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है, घोल की मात्रा को पानी के साथ निशान तक लाया जाता है और मिलाया जाता है। समाधान ताजा तैयार किया जाता है।
परिचय
पौधों में, जैविक रूप से सक्रिय पदार्थों (बीएएस) के सबसे आम समूहों में से एक टैनिन (टैनिन) होते हैं, जिनमें औषधीय गतिविधि का एक विस्तृत स्पेक्ट्रम होता है।टैनिन्सएक हेमोस्टैटिक, कसैले, विरोधी भड़काऊ, रोगाणुरोधी प्रभाव है, और उच्च पी-विटामिन गतिविधि, एंटी-स्क्लेरोटिक और एंटीहाइपोक्सिक प्रभाव भी प्रदर्शित करता है। संघनित टैनिन एंटीऑक्सिडेंट होते हैं और एक एंटीट्यूमर प्रभाव होता है। टैनिन्सग्लाइकोसाइड, एल्कलॉइड, भारी धातु के लवण के साथ विषाक्तता के लिए एक मारक के रूप में उपयोग किया जाता है। चिकित्सा में, टैनिन का उपयोग स्टामाटाइटिस, मसूड़े की सूजन, ग्रसनीशोथ, टॉन्सिलिटिस, कोलाइटिस, एंटरोकोलाइटिस, पेचिश जैसे रोगों के उपचार में किया जाता है, इनका उपयोग जलन, गर्भाशय, पेट और रक्तस्रावी रक्तस्राव के लिए भी किया जाता है।.
सामग्री की परिभाषाटैनिन युक्त पौधों की सामग्री की गुणवत्ता स्थापित करने में टैनिन एक महत्वपूर्ण घटक है। टैनिन के निर्धारण के लिए कई तरीके हैं, लेकिन अक्सर टाइट्रिमेट्रिक और स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विधियों का उपयोग किया जाता है।
उद्देश्य- अभिसरण, शुद्धता, रैखिकता के संदर्भ में टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के तरीकों का सत्यापन मूल्यांकन।
सामग्री और अनुसंधान के तरीके
कच्चे माल का उपयोग अनुसंधान की वस्तु के रूप में किया गया था - हवा-शुष्क घास।आम कफ (अल्केमिला वल्गरिस एल.) फैम। रोसैसी (रोसेसी)।
वायु-शुष्क घास में टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के तरीकों के सत्यापन मूल्यांकन के लिएदो विधियों को चुना गया था: परमैंगनेटोमेट्रिक अनुमापन और स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक निर्धारण फोलिन-सियोकाल्टू अभिकर्मक के साथ प्रतिक्रिया के आधार पर। तकनीकों का चुनाव व्यवहार में उनके उपयोग की आवृत्ति से उचित है।
हवा-सूखी घाससाधारण कफमें प्राप्त सितंबर 2015 में आर्कान्जेस्क क्षेत्र के प्रिमोर्स्की जिले में, जो टैनिन (टैनिन) के अनुसंधान और मात्रात्मक निर्धारण के लिए कच्चा माल था।
परमैंगनेटोमेट्रिक निर्धारण की विधि फार्माकोपियल है, जो हैपोटेशियम परमैंगनेट के घोल के साथ टैनिन की ऑक्सीकरण प्रतिक्रिया के आधार पर।लगभग 2 ग्राम (सटीक रूप से तौला गया), कुचल कच्चा माल, 3 मिमी के छेद के आकार के साथ एक छलनी के माध्यम से झारना, 500 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक शंक्वाकार फ्लास्क में रखा गया था, 250 मिलीलीटर पानी को उबालने के लिए गर्म किया गया और भाटा के तहत उबाला गया। एक बंद सर्पिल के साथ एक इलेक्ट्रिक स्टोव 30 मिनट के लिए आवधिक सरगर्मी के साथ। परिणामी अर्क को कमरे के तापमान पर ठंडा किया गया और 250 मिलीलीटर शंक्वाकार फ्लास्क को रूई के माध्यम से फ़िल्टर किया गया ताकि कच्चे माल के कण फ्लास्क में न मिलें। पिपेट 25 मिलीलीटर परिणामी अर्क और स्थानांतरण750 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक अन्य शंक्वाकार फ्लास्क में, 500 मिलीलीटर पानी, 25 मिलीलीटर इंडिगोसल्फोनिक एसिड घोल डालें और पोटेशियम के घोल के साथ लगातार हिलाते हुए टाइट्रेट करें।परमैंगनेट (0.02 mol / l) सुनहरा पीला होने तक।
समानांतर में एक नियंत्रण प्रयोग किया गया था।
पोटेशियम परमैंगनेट समाधान का 1 मिलीलीटर (0.02 mol / l) टैनिन के संदर्भ में 0.004157 ग्राम टैनिन से मेल खाता है।
टैनिन (एक्स) की सामग्री, प्रतिशत के रूप में, पूर्ण शुष्क कच्चे माल के रूप में, सूत्र द्वारा गणना की गई थी (1):
कहाँ (1)
वी निष्कर्षण के अनुमापन के लिए खपत पोटेशियम परमैंगनेट समाधान (0.02 mol / l) की मात्रा है, एमएल;
- नियंत्रण प्रयोग, एमएल में अनुमापन के लिए खपत पोटेशियम परमैंगनेट समाधान (0.02 mol / l) की मात्रा;
0.004157 - पोटेशियम परमैंगनेट समाधान (0.02 मोल / एल) (टैनिन के संदर्भ में), जी के 1 मिलीलीटर के अनुरूप टैनिन की मात्रा;
250 - कुल निष्कर्षण मात्रा, एमएल;
25 - अनुमापन के लिए लिए गए निष्कर्षण की मात्रा, मिली।
एम- कच्चे माल का वजन, जी;
वू- कच्चे माल के सुखाने के दौरान द्रव्यमान में कमी, जी;
स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए, अध्ययन की गई पादप सामग्री का लगभग 1 ग्राम (सटीक तौला), 1 मिमी के छेद के आकार के साथ छलनी से गुजरने वाले एक कण आकार में कुचल दिया गया था, एक पतले खंड के साथ एक शंक्वाकार फ्लास्क में रखा गया था। 50 मिली की क्षमता, 25 मिली एसीटोन-पानी के मिश्रण को 7: 3 (70% एसीटोन घोल) के अनुपात में मिलाया गया। फ्लास्क को बंद कर दिया गया और 60 मिनट के लिए प्रयोगशाला स्टिरर (LAB PU-2, रूस) में रखा गया। परिणामी अर्क को 50 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में फ़िल्टर किया गया था और मात्रा को 70% एसीटोन समाधान (समाधान ए) के साथ निशान पर लाया गया था।
10 मिली की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में 1 मिली घोल ए रखा गया था, फ्लास्क में घोल की मात्रा को शुद्ध पानी (समाधान बी) के साथ निशान तक लाया गया था।
समाधान बी के 0.5 मिलीलीटर को 10 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा गया था, 2 मिलीलीटर शुद्ध पानी, 0.25 मिलीलीटर फोलेन-चॉकलेटू अभिकर्मक, 1.25 मिलीलीटर 20% सोडियम कार्बोनेट समाधान जोड़ा गया था, और समाधान की मात्रा को बनाया गया था पानी के साथ निशान। फ्लास्क को 40 मिनट के लिए प्रकाश से सुरक्षित रखा गया था। समाधान का ऑप्टिकल घनत्व 750 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर निर्धारित किया गया था। निष्कर्षण के अतिरिक्त अभिकर्मकों के मिश्रण को संदर्भ समाधान के रूप में उपयोग किया गया था।
संयंत्र कच्चे माल के अर्क में टैनिन की सामग्री की गणना अंशांकन ग्राफ के मूल्यों से की गई थी, जिसके निर्माण के लिए सीओ टैनिन के एक मानक नमूने के 0.1 मिलीग्राम / एमएल समाधान का उपयोग किया गया था। इस प्रयोजन के लिए, सीओ टैनिन के 0.05 ग्राम (सटीक वजन) को 100 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा गया था, 30 मिलीलीटर पानी में भंग कर दिया गया था, और फ्लास्क में मात्रा को उसी विलायक (समाधान ए) के साथ निशान में समायोजित किया गया था।
परिणामस्वरूप समाधान के 1 मिलीलीटर को 10 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में स्थानांतरित किया गया था। फ्लास्क में घोल का आयतन पानी (समाधान बी) के साथ निशान तक लाया गया।
1 प्रत्येक युक्त समाधान की एक श्रृंखला; 2; 3; 4; 5 माइक्रोग्राम / एमएल सीओ टैनिन समाधान बी के वजन वाले हिस्सों को 10 मिलीलीटर वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखकर तैयार किया गया था, फोलिन - चॉकलेट्यू अभिकर्मक और 20% जलीय सोडियम कार्बोनेट समाधान जोड़ा गया था, और फ्लास्क में समाधान की मात्रा को निशान तक लाया गया था। पानी के साथ।
समाधान मिश्रित थे, फ्लास्क को सील कर दिया गया था और कमरे के तापमान पर रखा गया था, 40 मिनट के लिए प्रकाश से सुरक्षित रखा गया था।
प्राप्त समाधानों का ऑप्टिकल घनत्व संदर्भ समाधान के सापेक्ष 725 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर 1 सेमी की परत मोटाई के साथ क्वार्ट्ज क्यूवेट में स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक रूप से निर्धारित किया गया था।
संदर्भ समाधान सीओ टैनिन (समाधान बी) के अतिरिक्त के बिना अभिकर्मकों का मिश्रण था।
अध्ययनों के परिणामों के आधार पर, टैनिन की सांद्रता पर ऑप्टिकल घनत्व की निर्भरता का एक ग्राफ बनाया गया था (चित्र 1)।
प्राप्त मूल्यों को ध्यान में रखते हुए, टैनिन के योग की गणना सूत्र के अनुसार टैनिन के रूप में की गई थी:
, कहाँ पे
परिणाम
अनुमापन द्वारा टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के परिणाम तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं। एक।
तालिका 1. परमैंगनाटोमेट्री द्वारा टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के परिणाम
| संयंत्र कच्चे माल का नमूना वजन, जी | पोटेशियम परमैंगनेट की मात्रा (0.02 mol / l), पौधे के कच्चे माल से प्राप्त अर्क के अनुमापन के लिए खपत, मिली | टैनिन की मात्रा,% (X .)मैं) | |
|
2,10250 |
15,34892 |
15,72%
|
|
|
2,03255 |
15,21262 |
||
|
2,18345 |
15,84713 |
||
|
2,24350 |
16,24333 |
||
|
2,12465 |
15,85257 |
||
|
2,07055 |
15,80574 |
कच्चे माल में टैनिन की सामग्री का औसत मूल्य 15.7% था। सापेक्ष मानक विचलन (0.024%) के मूल्य की गणना मूल्य, जो 2% से अधिक नहीं है, जो परिणामों के संतोषजनक अभिसरण की विशेषता है।
प्रक्रिया की शुद्धता को निर्धारित करने के लिए अतिरिक्त विधि का उपयोग किया गया था। इस प्रयोजन के लिए, अनुमापन फ्लास्क में 0.05%, 0.1% और 0.15% CO टैनिन का 1 मिली मिलाया गया और प्रत्येक मामले के लिए तीन बार अनुमापन किया गया। अध्ययन के परिणाम तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं। 2.
तालिका 2. टैनिन के परमैंगनेटोमेट्रिक अनुमापन की विधि की शुद्धता का निर्धारण
| अतिरिक्त CO टैनिन की मात्रा, g | कच्चे माल का वजन, जी | परिकलित टैनिन की मात्रा, जी | टैनिन की मात्रा मिली, जी | खुलने की दर,% | मेट्रोलॉजिकल विशेषताएं |
|
0,0005 |
2,2435 |
0,0357 |
0,0353 |
98,87 |
99,91%
|
|
2,1247 |
0,0339 |
0,0340 |
100,29 |
||
|
2,0706 |
0,0330 |
0,0337 |
102,12 |
||
|
0,001 |
2,2435 |
0,0362 |
0,0357 |
98,61 |
|
|
2,1247 |
0,0344 |
0,0340 |
98,84 |
||
|
2,0706 |
0,0335 |
0,0336 |
100,51 |
||
|
0,0015 |
2,2435 |
0,0367 |
0,0366 |
99,73 |
|
|
2,1247 |
0,0349 |
0,0353 |
101,14 |
||
|
2,0706 |
0,0340 |
0,0337 |
99,12 |
प्राप्त परिणामों से संकेत मिलता है कि परिकलित विद्यार्थी का गुणांक तालिका मान से कम है औरइस पद्धति में कोई व्यवस्थित त्रुटि नहीं है, जो हमें यह निष्कर्ष निकालने की अनुमति देती है कि यह सही है।
रैखिकता का अध्ययन करने के लिए, अध्ययन किए गए पौधे सामग्री के वजन वाले हिस्से पर टैनिन की मात्रात्मक सामग्री के पाए गए मूल्यों की निर्भरता निर्धारित की गई थी। इस प्रयोजन के लिए, सामान्य कफ के वायु-शुष्क कच्चे माल के छह भारित भागों में वजन में भिन्नता (तालिका 3) में टैनिन का मात्रात्मक निर्धारण किया गया था।
तालिका 3. परमैंगनेटोमेट्री द्वारा पौधों के कच्चे माल के नमूने के वजन पर टैनिन की मिली सामग्री की निर्भरता
|
|
अनुमापन के लिए प्रयुक्त पोटैशियम परमैंगनेट की मात्रा, मिली |
|
|
2,0706 |
0,3159 |
|
|
3,0013 |
10,8 |
0,4490 |
|
4,0595 |
13,0 |
0,5404 |
|
5,1180 |
15,3 |
0,6360 |
|
6,1385 |
18,2 |
0,7566 |
अध्ययन के दौरान प्राप्त आंकड़ों के आधार पर, अध्ययन किए गए पौधे सामग्री के नमूने के वजन पर टैनिन की एक निश्चित सामग्री की निर्भरता का एक ग्राफ तैयार किया गया था (चित्र 2) और सहसंबंध गुणांक की गणना की गई थी।
चावल। 2. सामान्य कफ के वायु शुष्क कच्चे माल के नमूने के भार पर टैनिन की पाई गई मात्रा की निर्भरता का ग्राफ
परिकलित सहसंबंध गुणांक 0.95 से अधिक नहीं था, जो संकेतित सांद्रता सीमा में विश्लेषण किए गए संयंत्र सामग्री के नमूने के वजन से जांच किए गए पदार्थों की सामग्री को निर्धारित करने के परिणामों की रैखिकता को इंगित करता है।
स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री विधि द्वारा आम कफ जड़ी बूटी के वायु शुष्क कच्चे माल में टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के परिणाम तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं। 4.
तालिका 4. स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के परिणाम
|
नमूना वजन, जी |
समाधान का ऑप्टिकल घनत्व |
टैनिन की मात्रा मिली,% (X .)मैं) |
मेट्रोलॉजिकल विशेषताएं |
|
|
1,02755 |
0,5957 |
7,30920 |
7,87340 |
7,84%
|
|
0,99745 |
0,6130 |
7,52147 |
8,34656 |
|
|
1,0068 |
0,5678 |
6,96687 |
7,65932 |
|
|
0,99580 |
0,5742 |
7,04539 |
7,83120 |
|
|
1,0060 |
0,5750 |
7,05521 |
7,76261 |
|
|
1,00670 |
0,5617 |
6,89202 |
7,57779 |
पौधों की सामग्री में टैनिन की सामग्री का औसत मूल्य 7.8% है, जिसमें सापेक्ष मानक विचलन (0.034%) 2% से अधिक नहीं है, जो परिणामों के संतोषजनक अभिसरण की विशेषता है।
प्रक्रिया की शुद्धता को निर्धारित करने के लिए अतिरिक्त विधि का उपयोग किया गया था। इस प्रयोजन के लिए, प्राथमिक एसीटोन निष्कर्षण के साथ फ्लास्क में 0.05%, 0.1% और 0.15% सीओ समाधान का 1 मिलीलीटर जोड़ा गया था, और फिर प्रत्येक एकाग्रता के लिए टैनिन का मात्रात्मक निर्धारण तीन बार किया गया था। अध्ययन के परिणाम तालिका में प्रस्तुत किए गए हैं। 5.
पेटेंट RU 2439568 के धारक:
आविष्कार फार्माकोलॉजी के क्षेत्र से संबंधित है और इसका उपयोग पौधों की सामग्री में टैनिन को निर्धारित करने के लिए किया जा सकता है। संयंत्र कच्चे माल में टैनिन का निर्धारण करने की विधि में यह तथ्य शामिल है कि उबलते, ठंडा, फ़िल्टर्ड के दौरान पानी के साथ कच्चे माल का एक नमूना निकाला जाता है, एक विभाज्य नमूने का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है और सामग्री की सामग्री सभी टैनिन के योग की गणना एक निश्चित सूत्र के अनुसार की जाती है, फिर छानने का विभाज्य नमूना 1% एसिटिक एसिड में 1% कोलेजन समाधान जोड़ा जाता है, शेक, फिल्टर, 277 एनएम की तरंग दैर्ध्य पर छानने के ऑप्टिकल घनत्व को मापें और गणना करें एक निश्चित सूत्र के अनुसार अवक्षेपित टैनिन की सामग्री। विधि वनस्पति कच्चे माल में टैनिन की सामग्री को निर्धारित करने की सटीकता में सुधार करती है और सब्जी कच्चे माल में चुनिंदा और गैर-अवक्षेपित टैनिन निर्धारित करती है।
आविष्कार रासायनिक-फार्मास्युटिकल उद्योग, फार्माकोग्नॉसी और फार्मास्युटिकल केमिस्ट्री के क्षेत्र से संबंधित है और इसका उपयोग टैनिन युक्त पौधों के कच्चे माल की गुणवत्ता को नियंत्रित करने के लिए किया जा सकता है।
टैनिन (एसजी अब्दुलिना एट अल। औषधीय पौधों के कच्चे माल में टैनिन का कूलोमेट्रिक निर्धारण) के संदर्भ में औषधीय पौधों के कच्चे माल (एचपी) में टैनिन का निर्धारण करने के लिए एक ज्ञात विधि। - पी.13 -15)।
इस पद्धति का नुकसान अतिरिक्त उपकरण (कूलोमीटर), एक विशिष्ट टाइट्रेंट (पोटेशियम हाइपोआयोडाइड) का उपयोग है, जो इसके ऑक्सीकरण गुणों में पोटेशियम परमैंगनेट के करीब है और उच्च और निम्न आणविक भार टैनिन के बीच अंतर करना संभव नहीं बनाता है।
चाय में टैनिन और गैलिक एसिड डेरिवेटिव की सामग्री को कंडक्टोमेट्री द्वारा निर्धारित करने के लिए एक विधि भी ज्ञात है (पेटेंट संख्या 2127878। चाय में टैनिन और कैटेचिन (गैलिक एसिड के संदर्भ में) के अलग-अलग निर्धारण के लिए विधि। एम।: 1999) .
इस पद्धति का नुकसान जहरीले कार्बनिक सॉल्वैंट्स (आइसोब्यूटाइल अल्कोहल) का उपयोग है, साथ ही Fe (III) के साथ एक रंग प्रतिक्रिया का उपयोग है, जिसका उत्पाद एक रंगीन यौगिक है जो समय के साथ रंग में अस्थिर है।
जिंक लवण के साथ टैनिन की वर्षा के बाद टैनिन की पत्तियों में टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए एक विधि भी जानी जाती है और जिंक लवण (GOST 4564-79। स्कम्पिया पत्ती। विनिर्देशों; GOST 4565-79। सुमाच) के साथ जटिलोमेट्रिक विधि द्वारा सुमाच शीट। निर्दिष्टीकरण)।
इस पद्धति का नुकसान विश्लेषण की अवधि और तुल्यता बिंदु निर्धारित करने की कठिनाई है।
गैलिक एसिड के संदर्भ में फोलिन-चॉकलेटू अभिकर्मक के साथ प्रतिक्रिया के बाद स्पेक्ट्रोफोटोमेट्रिक विधि द्वारा टैनिन के मात्रात्मक निर्धारण के लिए एक विधि भी ज्ञात है (जैविक रूप से सक्रिय खाद्य योजकों की गुणवत्ता नियंत्रण और सुरक्षा के तरीकों के लिए दिशानिर्देश। गाइड। पी 4.1. 1672-03। - एम। - 2004 । - पृष्ठ 94-95)।
इस पद्धति का नुकसान कम और उच्च आणविक भार टैनिन के अलग-अलग निर्धारण की असंभवता है।
प्रस्तावित विधि के सबसे करीब यह है कि टैनिन को गैलिक एसिड के संदर्भ में स्पेक्ट्रोफोटोमेट्री द्वारा निर्धारित किया जाता है (जैविक रूप से सक्रिय खाद्य योजकों की गुणवत्ता नियंत्रण विधियों और सुरक्षा के लिए दिशानिर्देश। गाइड। आर 4.1.1672-03। - एम। - 2004 - पी। 120 )
इस पद्धति का नुकसान परीक्षण नमूने का बार-बार कमजोर होना है, जिसके परिणामस्वरूप समाधान में टैनिन की एकाग्रता खराब रूप से निर्धारित होती है। साथ ही, इस पद्धति में, संदर्भ समाधान एक बफर समाधान है, जो विश्लेषण को जटिल बनाता है। इसके अलावा, यह विधि कम आणविक भार और उच्च आणविक भार टैनिन की सामग्री को अलग से निर्धारित करना संभव नहीं बनाती है।
आविष्कार का उद्देश्य टैनिन के निर्धारण की सटीकता और वनस्पति कच्चे माल में अवक्षेपित और गैर-अवक्षेपित टैनिन के अलग-अलग निर्धारण की संभावना में सुधार करना है।
समस्या को इस तथ्य से हल किया जाता है कि उबलते, ठंडा, फ़िल्टर्ड के दौरान पानी के साथ कच्चे माल का एक नमूना निकाला जाता है, एक विभाज्य नमूने का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है, और सभी टैनिन के योग की सामग्री है सूत्र का उपयोग करके गणना की गई
50 - फ्लास्क की मात्रा, मिली,
डब्ल्यू - कच्चे माल की नमी,%,
1% एसिटिक एसिड में 1% कोलेजन समाधान छानने के एक विभाज्य नमूने में जोड़ा जाता है, हिलाया जाता है, फ़िल्टर किया जाता है, छानना का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है और अवक्षेपित टैनिन की सामग्री की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है
डी 1 - समाधान 1 का ऑप्टिकल घनत्व,
डी 2 - समाधान 2 का ऑप्टिकल घनत्व,
एम एनएवी - कच्चे माल के नमूने का वजन, जी,
वी ए एक विभाज्य नमूने की मात्रा है, एमएल,
250 - कुल निष्कर्षण मात्रा, मिली,
50 - फ्लास्क की मात्रा, मिली,
508 - गैलिक एसिड का विशिष्ट अवशोषण सूचकांक (1% गैलिक एसिड समाधान 1 मिलीग्राम / एमएल का ऑप्टिकल घनत्व),
डब्ल्यू - कच्चे माल की नमी,%।
व्यवहार में, विधि निम्नानुसार की जाती है। कुचल कच्चे माल के बारे में 2.0 (सटीक रूप से तौला), 3 मिमी के छेद व्यास के साथ एक छलनी के माध्यम से झारना, 500 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक फ्लास्क में रखा जाता है, उबलते हुए 250 मिलीलीटर पानी डाला जाता है और 30 मिनट के लिए उबाला जाता है। समय-समय पर सरगर्मी के साथ भाटा के तहत। इसे कमरे के तापमान पर ठंडा किया जाता है, 250 मिलीलीटर पानी में लाया जाता है, रूई के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है ताकि कच्चे माल के कण पानी के अर्क में न मिलें। छानना के पहले 50 मिलीलीटर त्यागें।
1-4 मिलीलीटर जलीय अर्क को 50 मिलीलीटर की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है, जिसे पानी के साथ निशान पर लाया जाता है (समाधान 1)। समाधान 1 का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है। पानी का उपयोग तुलना के रूप में किया जाता है।
30 मिलीलीटर जलीय अर्क को 50 मिलीलीटर की क्षमता वाले मापने वाले कंटेनर में रखा जाता है, 2-10 मिलीलीटर वर्षा अभिकर्मक जोड़ा जाता है, 30-60 मिनट के लिए हिलाया जाता है, बसा हुआ, फ़िल्टर किया जाता है। प्राप्त छानने के 1-4 मिलीलीटर को 50 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, पानी के साथ निशान पर लाया जाता है (समाधान 2)। समाधान 2 का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है। पानी का उपयोग तुलना के रूप में किया जाता है।
आविष्कार को निम्नलिखित उदाहरणों द्वारा दर्शाया गया है।
उदाहरण 1. विश्लेषण के लिए लिया गया पौधा कच्चा माल - ओक की छाल।
कुचल कच्चे ओक की छाल के लगभग 2.0 (सटीक रूप से तौला), 3 मिमी के छेद के व्यास के साथ एक छलनी के माध्यम से झारना, 500 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक फ्लास्क में रखा जाता है, उबलते हुए 250 मिलीलीटर पानी डाला जाता है और 30 मिनट के लिए उबाला जाता है। समय-समय पर सरगर्मी के साथ भाटा के तहत। इसे कमरे के तापमान पर ठंडा किया जाता है, 250 मिलीलीटर पानी में लाया जाता है, रूई के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है ताकि कच्चे माल के कण पानी के अर्क में न मिलें। छानना के पहले 50 मिलीलीटर त्यागें।
ओक छाल से 2 मिलीलीटर पानी निकालने को 50 मिलीलीटर की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है, पानी के साथ निशान पर लाया जाता है (समाधान 1)। समाधान 1 का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है। पानी का उपयोग तुलना के रूप में किया जाता है। ओक छाल के लिए डी 1 0.595 है।
30 मिलीलीटर जलीय अर्क को 50 मिलीलीटर की क्षमता वाले मापने वाले कंटेनर में रखा जाता है, 2 मिलीलीटर वर्षा अभिकर्मक जोड़ें, 30 मिनट के लिए हिलाएं, व्यवस्थित करें, फ़िल्टर करें। प्राप्त छानने के 2 मिलीलीटर को 50 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, जिसे पानी के साथ निशान पर लाया जाता है (समाधान 2)। समाधान 2 का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है। पानी का उपयोग तुलना के रूप में किया जाता है। ओक छाल के लिए डी 2 0.276 है।
उदाहरण 2. विश्लेषण के लिए, कुंडल प्रकंदों की पादप सामग्री ली गई।
कुंडल प्रकंद के कुचल कच्चे माल का लगभग 2.0 (सटीक रूप से तौला), 3 मिमी के छेद व्यास के साथ एक छलनी के माध्यम से झारना, 500 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक फ्लास्क में रखा जाता है, 250 मिलीलीटर पानी उबालने के लिए गर्म किया जाता है और डाला जाता है और समय-समय पर सरगर्मी के साथ भाटा के तहत 30 मिनट के लिए उबला हुआ। इसे कमरे के तापमान पर ठंडा किया जाता है, 250 मिलीलीटर पानी में लाया जाता है, रूई के माध्यम से फ़िल्टर किया जाता है ताकि कच्चे माल के कण पानी के अर्क में न मिलें। छानना के पहले 50 मिलीलीटर त्यागें।
कुंडल के प्रकंद से 1 मिली पानी निकालने को 50 मिली की क्षमता वाले वॉल्यूमेट्रिक फ्लास्क में रखा जाता है, जिसे पानी (समाधान 1) के साथ निशान पर लाया जाता है। समाधान 1 का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है। पानी का उपयोग तुलना के रूप में किया जाता है।
जलीय अर्क के 30 मिलीलीटर को 50 मिलीलीटर की क्षमता वाले एक मापने वाले कंटेनर में रखा जाता है, 7 मिलीलीटर वर्षा अभिकर्मक जोड़ा जाता है, 60 मिनट के लिए हिलाया जाता है, बसा हुआ, फ़िल्टर किया जाता है। प्राप्त छानने का 1 मिलीलीटर 50 मिलीलीटर की क्षमता के साथ एक फ्लास्क में स्थानांतरित किया जाता है, पानी के साथ निशान पर लाया जाता है (समाधान 2)। समाधान 2 का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है। पानी का उपयोग तुलना के रूप में किया जाता है।
प्रस्तावित विधि वनस्पति कच्चे माल में टैनिन की सामग्री को निर्धारित करने की सटीकता में सुधार करती है और सब्जी कच्चे माल में चुनिंदा और गैर-अवक्षेपित टैनिन निर्धारित करती है।
गैलिक एसिड के संदर्भ में वनस्पति कच्चे माल में टैनिन का निर्धारण करने की एक विधि, जिसमें यह तथ्य शामिल है कि उबलते, ठंडा, फ़िल्टर्ड के दौरान कच्चे माल का एक नमूना पानी के साथ निकाला जाता है, एक विभाज्य नमूने के ऑप्टिकल घनत्व को तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है 277 एनएम, और सभी टैनिन के योग की सामग्री की गणना सूत्र का उपयोग करके की जाती है: 
जहाँ x a - गैलिक एसिड के संदर्भ में टैनिन के योग की सामग्री,%;
50 - फ्लास्क की मात्रा, मिली;
508 - गैलिक एसिड की विशिष्ट अवशोषण दर (1% गैलिक एसिड समाधान 1 मिलीग्राम / एमएल का ऑप्टिकल घनत्व);
डब्ल्यू - कच्चे माल की नमी,%,
1% एसिटिक एसिड में कोलेजन का 1% घोल छानने के एक विभाज्य नमूने में मिलाया जाता है, हिलाया जाता है, फ़िल्टर किया जाता है, छानना का ऑप्टिकल घनत्व 277 एनएम के तरंग दैर्ध्य पर मापा जाता है, और अवक्षेपित टैनिन की सामग्री का उपयोग करके गणना की जाती है सूत्र: 
जहां X गैलिक एसिड के संदर्भ में अवक्षेपित टैनिन की सामग्री है,%;
डी 1 - समाधान 1 का ऑप्टिकल घनत्व;
डी 2 - समाधान 2 का ऑप्टिकल घनत्व;
एम एनएवी - कच्चे माल के नमूने का वजन, जी;
वी ए विभाज्य नमूने की मात्रा है, एमएल;
250 - कुल निष्कर्षण मात्रा, एमएल;
50 - फ्लास्क की मात्रा, मिली;
508 - गैलिक एसिड की विशिष्ट अवशोषण दर (1% गैलिक एसिड समाधान 1 मिलीग्राम / एमएल का ऑप्टिकल घनत्व);
डब्ल्यू - कच्चे माल की नमी,%।
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