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दुर्भाग्य से, अब भी यह कहा जा सकता है कि फंगल रोगों का निदान अक्सर असामयिक होता है (बाल क्षेत्रों को पतला करना, छीलने को अक्सर "रूसी", "सूखापन" के लिए गलत माना जाता है)। इसी समय, व्यक्तिपरक संवेदनाएं (खुजली, दर्द, आदि) अक्सर घावों में नहीं होती हैं, और रोगी, इस वजह से, लंबे समय तक विशेषज्ञ के पास नहीं जाते हैं।
चोट, शीतदंश, आदि के बाद नाखूनों में परिवर्तन (बदसूरत, ढहते, पतले) को "ओनिकोडिस्ट्रोफी" माना जाता है। साथ ही (नाखूनों सहित अलग-अलग घाव भी) शरीर के एलर्जी पुनर्गठन के गठन का कारण बन सकते हैं, रक्त को प्रभावित कर सकते हैं और लसीका वाहिकाओं, आदि। इसके साथ रोगी अनिश्चित काल तक फंगल संक्रमण के प्रसार का स्रोत बने रहते हैं। पूर्वगामी के संबंध में, मायकोसेस का समय पर प्रयोगशाला निदान, साथ ही साथ संभव प्रारंभिक उपचार, हमेशा प्रासंगिक होते हैं।
मुख्य रूप से मनुष्यों में पाए जाने वाले कवक रोगों के नैदानिक रूपों की विविधता, साथ ही सूक्ष्म जीव विज्ञान, आकृति विज्ञान, प्रतिरक्षाविज्ञानी और कवक के विभिन्न प्रकार (और पीढ़ी) के अन्य मापदंडों की विशेषताओं ने निदान के लिए महत्वपूर्ण संख्या में तरीकों की उपस्थिति का नेतृत्व किया है। मायकोसेस; यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि उपलब्ध विधियों में लगातार सुधार किया जा रहा है और (अपेक्षाकृत हाल ही में) प्रतिरक्षाविज्ञानी और आणविक आनुवंशिक परीक्षणों के प्रति एक अजीब पूर्वाग्रह है।
दूसरी ओर, सांस्कृतिक अध्ययन अभी भी "सोने के करीब मानकों की श्रेणी में" हैं और अन्य अध्ययनों के संदिग्ध परिणामों की पुष्टि के लिए उपयोग किए जाते हैं; एक राय है कि माइकोसिस के नैदानिक रूप से "संदिग्ध" रूपों के लिए सांस्कृतिक और आणविक आनुवंशिक तरीकों का संयोजन (विशेष रूप से प्रसारित, किसी भी उत्पत्ति के इम्युनोसुप्रेशन की पृष्ठभूमि के खिलाफ, आंतरिक अंगों को नुकसान के साथ, आदि) सबसे विश्वसनीय तरीकों में से एक है। प्रक्रिया की मायकोटिक प्रकृति को पंजीकृत करने के लिए।
हालांकि, किसी को "पुरानी" तकनीकों की उपेक्षा नहीं करनी चाहिए, विशेष रूप से बैक्टीरियोस्कोपी (विशेषकर प्रारंभिक परीक्षा में), विशेष रूप से दैनिक अभ्यास में कई त्वचाविज्ञान संस्थानों में माइकोसिस का सूक्ष्म "सत्यापन" अन्य परीक्षणों की तुलना में सबसे व्यापक रूप से उपयोग किया जाता है।
त्वचा (और कभी-कभी आंत) पर एलर्जी की अभिव्यक्तियों की संख्या में उल्लेखनीय वृद्धि को देखते हुए - माइकोसिस (त्वचा, नाखून, आदि) के लंबे, पुराने, समय-समय पर तेज होने वाले पाठ्यक्रम के साथ, डिग्री की पहचान करने के लिए एलर्जी संबंधी परीक्षण करने की सलाह दी जाती है। संयुक्त कवक और जीवाणु संक्रमण सहित शरीर के संवेदीकरण; यह तथ्य किसी विशेष रोगी में उपचार की विशिष्टता को प्रभावित कर सकता है - उदाहरण के लिए, एंटीमाइकोटिक्स और डिसेन्सिटाइजिंग एजेंटों आदि की तर्कसंगत नियुक्ति का निर्धारण करें।
परंपरागत रूप से, एक कवक रोग का एक अनुमानित निदान नैदानिक अभिव्यक्तियों के आधार पर किया जाता है और प्रयोगशाला परीक्षणों द्वारा पुष्टि की जाती है।
पुस्तक के इस खंड में, हम "अनुसंधान के प्रकार और ली गई सामग्री" को ध्यान में रखते हुए, मायकोसेस (उनके स्थान की परवाह किए बिना) को पंजीकृत करने के लिए बुनियादी तरीकों को संक्षेप में प्रस्तुत करते हैं। यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि मायकोसेस (एलर्जी घटक वाले लोगों सहित) के नैदानिक अभिव्यक्तियों का बहुरूपता अध्ययन के लिए रोग संबंधी सामग्री की विविधता को निर्धारित करता है। इस मामले में, कवक के तत्वों की खोज की सफलता इसके सही सेवन पर निर्भर करती है।
तो, एरिथेमेटो-स्क्वैमस का परिधीय क्षेत्र, अक्सर घुंघराले विस्फोट मायसेलियम, फंगल बीजाणुओं में समृद्ध होता है; घाव के बालों वाले क्षेत्रों पर, मुड़, सफेद, फीका पड़ा हुआ, सुस्त बाल या उनके टुकड़े - "भांग" लिए जाते हैं (लकड़ी के दीपक का उपयोग करके बालों के सेवन को नियंत्रित करना उचित है)। तथाकथित से सामग्री (सुई का उपयोग करके) के नमूने के लिए कुछ कौशल की आवश्यकता होती है। "ब्लैक डॉट्स" - रोम के मुंह पर गहरे सींग वाले शंकु।
रोजमर्रा के अभ्यास में, त्वचा के तराजू की आमतौर पर जांच की जाती है (स्क्रैपिंग, स्मीयर, चिपकने वाली टेप का उपयोग करके एकत्र किया जाता है), परिवर्तित नाखूनों को खुरच कर, सबंगुअल हाइपरकेराटोसिस का क्षेत्र, साथ ही श्लेष्म झिल्ली का निर्वहन। संकेतों के अनुसार, थूक, पानी से धोना, मूत्र की जांच की जाती है (बिना पेशाब के मूत्राशय वाले रोगियों में); यूरिन बैग्स, बेड वेसल्स से यूरिन को जांच के लिए नहीं ले जाया जा सकता है।
रक्त नैदानिक महत्व का भी है (संस्कृति अनुसंधान के लिए, साथ ही एलिसा, पीसीआर), मस्तिष्कमेरु द्रव और शरीर के अन्य बायोफ्लुइड्स (फुफ्फुस, इंट्राआर्टिकुलर, इंट्रापेरिटोनियल - आकांक्षा या जल निकासी द्वारा एकत्र किए गए सहित); कुछ मामलों में (सामयिक निदान के आधार पर), पित्त, मल, चमड़े के नीचे के फोड़े के पंचर, फिस्टुला डिस्चार्ज (विशेषकर गहरे मायकोसेस के साथ) महत्वपूर्ण हैं। यहां तक कि साधारण नैदानिक परीक्षणों के लिए कई शर्तों का कड़ाई से पालन करने की आवश्यकता होती है।
वर्तमान में कवक रोगों के निदान के लिए विधियों का उपयोग किया जाता है:
- माइक्रोस्कोपी; परीक्षण सामग्री, सहित में रोगज़नक़ का पता लगाने के आधार पर। मानव ऊतकों में;
- सांस्कृतिक अनुसंधान के बाद कवक की संस्कृति का सूक्ष्म परीक्षण;
- हिस्टोलॉजिकल परीक्षा (गहरे मायकोसेस के साथ जीओ);
- प्रतिरक्षा और आणविक तरीके।
सूक्ष्म निदान
सूक्ष्म निदान - विशेष ऑप्टिकल, और बाद में इलेक्ट्रॉन-सूक्ष्म तकनीक की उपस्थिति की अवधि से संभव हो गया, जिससे कवक के अल्ट्रास्ट्रक्चर का विस्तार से अध्ययन करना संभव हो गया। उसी समय, कवक तत्वों का पता लगाना - पतली शाखाओं वाले तंतु जो एक माइसेलियम (मायसेलियम) बनाते हैं, गोल शरीर (बीजाणु; कवक के प्रजनन "अंग" हैं) नैदानिक मूल्य का है।माइक्रोस्कोपिक डायग्नोस्टिक्स में बिना दाग (देशी) और दाग वाली तैयारियों का अध्ययन शामिल है। यह विधि, जैसा कि उल्लेख किया गया है, इसकी तुलनात्मक सादगी और कम लागत के कारण त्वचाविज्ञान अभ्यास में सबसे व्यापक है, लेकिन दूसरी तरफ, यह पर्याप्त संवेदनशील नहीं है, कुछ मामलों में बार-बार विश्लेषण की आवश्यकता होती है, अन्य तरीकों से पुष्टि की आवश्यकता होती है।
इसलिए, बिना दाग वाली तैयारी का अध्ययन करते समय, फंगल तत्वों के अलावा, कोई उपकला कोशिकाओं, रक्त कोशिकाओं, बाहरी वातावरण से विभिन्न संदूषक पा सकता है, जिससे माइकोसिस के प्रेरक एजेंट को ढूंढना मुश्किल हो जाता है, इसके लिए सामग्री की अतिरिक्त "तैयारी" की आवश्यकता होती है - कहा गया। इसका "ज्ञानोदय" (स्थूलता), एकाग्रता, तनुकरण आदि।
फिर भी, देशी तैयारी की प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी आपको माइकोसिस का शीघ्र निदान करने की अनुमति देती है, यह निर्धारित करती है कि किस पोषक तत्व मीडिया (यदि आवश्यक हो) सामग्री को टीका लगाया जाना चाहिए, एक राय है कि इसका सकारात्मक परिणाम माइकोसिस की एकमात्र प्रयोगशाला पुष्टि में नकारात्मक प्रतिक्रिया के साथ रह सकता है संस्कृति (ए.यू. सर्गेव, यू.वी. सर्गेव, 2003)।
दवाओं के "ज्ञानोदय" के लिए विभिन्न विकल्पों में, सबसे आम परीक्षण सामग्री में KOH या NaOH का जोड़ है (इसका उपयोग अक्सर त्वचा के तराजू, बालों में कवक का पता लगाने के लिए किया जाता है, साथ ही साथ गहरे रंग के कई प्रेरक एजेंट भी होते हैं। थूक, बायोप्सी में मायकोसेस)।
कुचल और कांच की स्लाइड पर रखने के लिए, 10-20% सोडियम हाइड्रॉक्साइड (या पोटेशियम) घोल - 1-3 बूंदें, 10-20 मिनट के लिए; दवा को एक कवर ग्लास के साथ हल्के से दबाया जाता है, तेजी से मैक्रेशन के लिए, इसे एक लौ पर तब तक गर्म किया जाता है जब तक कि वाष्प दिखाई न दे। देखने को पहले कम आवर्धन के तहत किया जाता है, फिर उच्च आवर्धन (शुष्क प्रणाली) के तहत।
एक ठीक से तैयार की गई तैयारी, जो किसी न किसी यांत्रिक, थर्मल और रासायनिक प्रभावों के अधीन नहीं है, एक सजातीय द्रव्यमान की एक तस्वीर प्रस्तुत करती है जिसमें उपकला कोशिकाएं, कवक तत्वों के सेलुलर क्षय के उत्पाद - मायसेलियम फिलामेंट्स और बीजाणु होते हैं।
बदले हुए बालों को कांच की स्लाइड पर 10-30% क्षार के साथ रखा जाता है और उसी तरह से इलाज किया जाता है, लेकिन लंबे समय तक - 20 मिनट से 3-4 घंटे तक। प्रचुर मात्रा में वर्णक सामग्री के साथ, पूर्व-विरंजन की सिफारिश की जाती है 5% हाइड्रोजन पेरोक्साइड समाधान के साथ बाल। वे कवक के तत्वों का पता लगाने के साथ-साथ बालों के संबंध में उनके स्थान को महत्व देते हैं।
पैथोलॉजिकल रूप से परिवर्तित नाखूनों से सामग्री की तैयारी (अधिमानतः फोकस की गहराई से स्क्रैप करके प्राप्त एक अच्छा पाउडर) उसी तरह से किया जाता है, लेकिन 30% कास्टिक सोडा का उपयोग करके, एक लौ पर हल्के वाष्प और जोखिम के लिए अनिवार्य सावधानीपूर्वक हीटिंग लगभग 1 घंटा (कभी-कभी कई घंटों तक)। क्षार-उपचारित तैयारी को उनके "बिगड़ने" (अभिकर्मक का क्रिस्टलीकरण, सूक्ष्म चित्र द्वारा निर्धारित नैदानिक विश्वसनीयता में कमी) के कारण 1.5-2 घंटे से अधिक समय तक संग्रहीत नहीं किया जाना चाहिए।
KOH या NOOH के बजाय, आप उपयोग कर सकते हैं: a) 15% DMSO के साथ KOH के मिश्रण का घोल; बी) क्लोरल हाइड्रेट (2 भाग) और लैक्टिक एसिड (1 भाग) के साथ फिनोल (2 भाग) का मिश्रण; सी) कैल्कोफ्लोरिक सफेद, जिसमें हिगी और सेलूलोज़ के लिए एक समानता है; अनुसंधान के लिए, एक फ्लोरोसेंट माइक्रोस्कोप की आवश्यकता होती है (इस्तेमाल किए गए फिल्टर के आधार पर एक नीली या हरी चमक देखी जाती है)। मस्तिष्कमेरु द्रव (क्रिप्टोकॉकोसिस के संदेह के साथ) के अध्ययन में, स्याही धुंधलापन अक्सर इस्तेमाल किया जाता था।
कुलगा वी.वी., रोमनेंको आई.एम., अफोनिन एस.एल., कुलगा एस.एम.
माइकोसिस का प्रयोगशाला निदान
कवक के लिए प्रयोगशाला अनुसंधान के लिए सामग्री लेना।
1.ओएसटी 42-21-2-854: आदेश संख्या 222/80 दिनांक 27.06.00
2. उपकरण: चिमटी, माइक्रोस्कोप स्लाइड, कैंची, लोककथा चम्मच।
4. संकेत: कवक रोग।
5. जटिलताएं: नहीं।
उपचार कक्ष की तैयारी:
समाधान का परिवर्तन।
तैयार करना:
लत्ता के लिए क्लोरैमाइन का -1% घोल
क्लोरैमाइन का -3% घोल - ड्रेसिंग और चिमटी की कीटाणुशोधन के लिए
- धोने का घोल (156 मिली। हाइड्रोजन पेरोक्साइड + 5 ग्राम। डिटर्जेंट पाउडर + 839 मिली। आसुत जल) - चिमटी के प्रसंस्करण के लिए
- हाइड्रोजन पेरोक्साइड का 6% घोल - दस्ताने के उपचार के लिए।
हेरफेर करने के लिए एल्गोरिदम।
आपको चिमटी, एक कांच की स्लाइड, एक फोकमैन चम्मच, कैंची लेने की आवश्यकता है;
- रोगी को ड्रेसिंग रूम में आमंत्रित करें;
- रोगी एक कुर्सी या सोफे पर बैठता है;
- एम / एस खड़ा है।
निष्पादन तकनीक:
घाव से त्वचा के तराजू और बालों को चिमटी से लें;
- ली गई सामग्री को कांच की स्लाइड पर रखें और दूसरी कांच की स्लाइड से ढक दें।
- अपने हाथ साबुन और पानी से धोएं;
- ली गई सामग्री को प्रयोगशाला में भेजें।
सामग्री का संग्रह
कैंची और कांच की स्लाइड लें;
- कैंची से नाखून के मुक्त किनारे से एक टुकड़ा काट लें;
- ली गई सामग्री को एक और ग्लास स्लाइड से ढक दें;
कैंची और चिमटी को 3% फॉर्मेलिन के घोल में भिगोएँ।
प्रभावित नाखूनों से सामग्री का सही संग्रह एक सफल सूक्ष्मजीवविज्ञानी अध्ययन की कुंजी है। सामग्री उठाते समय, वे हमेशा नाखून के उन क्षेत्रों पर कब्जा नहीं करते हैं जिनमें व्यवहार्य कवक होते हैं। स्वाभाविक रूप से, संस्कृति में गैर-व्यवहार्य मशरूम नहीं उगेंगे, और उनकी प्रजातियों को स्थापित नहीं किया जा सकता है।
लिया जाने वाला नाखून का क्षेत्र ऑनिकोमाइकोसिस के रूप से निर्धारित होता है।
तो, onychomycosis के सतही रूप के साथ, नाखून प्लेट की सतह से स्क्रैपिंग की जानी चाहिए।
सबसे आम डिस्टल सबंगुअल रूप में, सबसे व्यवहार्य कवक नाखून प्लेट के नीचे स्थित होते हैं। शोध के लिए भेजी जाने वाली सामग्री में न केवल नाखून प्लेट की ट्रिमिंग शामिल होनी चाहिए, बल्कि प्लेट के नीचे से नाखून के बिस्तर से स्क्रैपिंग भी शामिल होनी चाहिए।
इसके अलावा, अपरिवर्तित नाखून के क्षेत्रों पर कब्जा कर लिया जाना चाहिए, क्योंकि सबसे सक्रिय कवक उनके और नाखून के प्रभावित क्षेत्रों के बीच की सीमा पर स्थित हैं।
समीपस्थ सबंगुअल रूप में, सामग्री को उठाना मुश्किल है। इन मामलों में, कभी-कभी, विशेष रूप से यदि वे एक हिस्टोलॉजिकल परीक्षा या विभेदक निदान करने जा रहे हैं, तो वे नाखून की बायोप्सी लेते हैं, और कभी-कभी एक ड्रिल का उपयोग करते हैं।
Paronychia के साथ, समीपस्थ रोलर से और उसके नीचे से स्क्रैपिंग बनाई जाती है।
सभी मामलों में, जीवाणु संदूषण से बचने के लिए, नमूना लेने से पहले नाखून को एथिल अल्कोहल से उपचारित किया जाना चाहिए।
सूक्ष्मदर्शी द्वारा परीक्षण
कवक के लिए रोग संबंधी सामग्री की सूक्ष्म जांच देशी और रंगीन तैयारियों में की जाती है।
बिना दाग वाली तैयारी की तैयारी के लिए, परिणामी सामग्री को एक स्केलपेल या विदारक सुई से कुचल दिया जाता है और एक स्लाइड के बीच में रखा जाता है। कवक के तत्वों की स्पष्ट पहचान के लिए, सामग्री प्रबुद्ध (मैक्रेड) है। इस उद्देश्य के लिए, वे विभिन्न पदार्थों की मदद का सहारा लेते हैं, सबसे अधिक बार कास्टिक क्षार (KOH, NaOH), जो एपिडर्मल तराजू, बलगम, मवाद को घोलते हैं, बालों के रंगद्रव्य को स्पष्ट करते हैं और इस तरह मशरूम को शोध के लिए उपलब्ध कराते हैं।
त्वचा या नाखून के नरम तराजू पर, जिन्हें स्लाइड के बीच में रखा जाता है, 20-30% KOH (NaOH) घोल की 1-3 बूंदें डालें। क्षार की बूंदों में परीक्षण सामग्री को अल्कोहल लैंप की लौ पर तब तक सावधानी से गर्म किया जाता है जब तक कि बूंद की परिधि के साथ क्षार क्रिस्टल का एक नाजुक सफेद रिम दिखाई न दे। उबालने के लिए पहले से गरम न करें। गर्म करने के बाद, हवा के बुलबुले के प्रवेश से बचने के लिए ड्रॉप को एक कवर ग्लास से ढक दिया जाता है।
आरए अरेबिस्की और जीआई गोर्शकोवा (1995) माइक्रोस्कोपी से पहले 30 - 40 मिनट के लिए त्वचा के तराजू और बालों की तैयारी को 5 - 10 मिनट और नाखून प्लेटों को कवर ग्लास से ढकने की सलाह देते हैं।
तैयारी का ज्ञान हीटिंग के बिना किया जा सकता है, इसके लिए उन्हें 20% KOH समाधान में 30 - 60 मिनट के लिए छोड़ दिया जाता है या रोग संबंधी सामग्री के ज्ञान के अन्य तरीकों का उपयोग किया जाता है: अमन के अनुसार क्लोरैलैक्टोफेनॉल; लैक्टोफेनॉल; पानी में 15% डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड और KOH युक्त घोल। 24 घंटे के लिए 5% KOH समाधान में रखे नाखून प्लेटों के ज्ञान के बाद अच्छे परिणाम प्राप्त होते हैं, इस मामले में किसी भी हीटिंग की आवश्यकता नहीं होती है।
बिना विसर्जन के एक पारंपरिक प्रयोगशाला माइक्रोस्कोप पर सूक्ष्म परीक्षा की जाती है।
माइक्रोस्कोप के कंडेनसर को नीचे किया जाना चाहिए, डायाफ्राम को संकुचित किया जाना चाहिए। शुरुआत में, दवा कम आवर्धन (40x) पर कांच पर पाई जाती है, बाद का अध्ययन उच्च आवर्धन (100x) पर किया जाता है;
तैयारी का 400x के आवर्धन पर विस्तार से अध्ययन किया जाता है। परीक्षण की विश्वसनीयता बढ़ाने और झूठे सकारात्मक परिणामों से बचने के लिए कई दवाओं की जांच करना आवश्यक है।
कवक के सूक्ष्म निदान में त्रुटियां दवा की तैयारी में दोष और प्रयोगशाला सहायक के अनुभव की कमी दोनों के कारण उत्पन्न हो सकती हैं।
विनिर्माण दोष मुख्य रूप से संबंधित हैं:
दवा की अधिकता के साथ, जिससे क्षार क्रिस्टल का नुकसान हो सकता है, बालों का विनाश हो सकता है और रोग संबंधी सामग्री में महीन दाने वाले विघटन की उपस्थिति हो सकती है।
लम्बी, यहां तक कि क्षार क्रिस्टल की रैखिक व्यवस्था सेप्टिक मायसेलियम के फिलामेंट्स के समान होती है, यहां तक कि रोग संबंधी सामग्री के बिना साफ कांच पर भी।
विभेदक नैदानिक विशेषताएं क्रिस्टल की असाधारण एकरूपता, उनकी कांच की पारदर्शिता, किनारों की बहुमुखी प्रतिभा और एक तत्व और दूसरे के बीच एक अटूट संबंध की अनुपस्थिति हैं। संदिग्ध मामलों में, तैयारी में थोड़ा गर्म आसुत जल की बूंदों को जोड़ने की सिफारिश की जाती है, जो जल्दी से क्षार क्रिस्टल को भंग कर देते हैं।
मशरूम के तत्वों के लिए निम्नलिखित को गलत किया जा सकता है:
- वसा की बूंदें,
- हवा के बुलबुले,
- कपड़ों के सूती धागे
- और तथाकथित "मोज़ेक कवक"।
त्वचा के लिपिड, कोशिकाओं का वसायुक्त क्षय और केराटोहयालिन अनाज, विशेष रूप से सही आकार वाले, कवक के अलग-अलग बीजाणुओं के समान हो सकते हैं। लेकिन आकार की विविधता और, सबसे महत्वपूर्ण बात, आकार, संरचनाओं की आंतरिक संरचना (रिक्तिका, गोले) की अनुपस्थिति इन तत्वों की कवक प्रकृति के खिलाफ बोलती है। अपर्याप्त रूप से शुद्ध किए गए घाव से पैथोलॉजिकल सामग्री लेने पर लिपिड भी दवा में मिल सकते हैं।
हवा के बुलबुले खमीर जैसी कोशिकाओं के बीजाणुओं के समान हो सकते हैं, लेकिन बाद के विपरीत, वे घने अंधेरे झिल्ली से घिरे होते हैं, और यहां तक कि सबसे छोटे हवाई बुलबुले हमेशा कवक की कोशिकाओं से बड़े होते हैं।
मोजे, कपड़े आदि के कपड़े के धागे आमतौर पर रोग संबंधी सामग्री से अलग होते हैं, वे हमेशा हाइपहे, मोटे से बड़े होते हैं और सेप्टेट नहीं होते हैं।
"मोज़ेक फंगस" एक आर्टिफैक्ट है जो क्रिस्टलीकरण के दौरान होता है (संभवतः कोलेस्ट्रॉल के टूटने के कारण)। इसमें एक जाल या लूप का रूप होता है, जिसकी रूपरेखा सींग वाले तराजू की सीमाओं के अनुरूप होती है, मायसेलियम के तंतुओं के विपरीत, यह कभी भी एपिडर्मिस की कोशिकाओं की दीवारों को पार नहीं करती है।
कुछ प्रयोगशालाओं में, सूक्ष्म परीक्षण की तैयारी का स्पष्टीकरण 15-30% KOH समाधान के साथ किया जाता है, जिसमें पार्कर की वाणिज्यिक गहरी नीली स्याही (पार्कर की सुपरक्रोम ब्लू-ब्लैक इंक) का 5-10% जोड़ा जाता है।
इस रंग से हाइप और बीजाणु नीले हो जाते हैं।
माइक्रोस्कोपी से फिलामेंटस फंगल हाइप या नवोदित कोशिकाओं का पता चलता है (चित्र 1)।
इस प्रकार, माइक्रोस्कोपी केवल संक्रमण की कवक प्रकृति के बारे में एक निष्कर्ष देता है, लेकिन कवक-कारक एजेंट के प्रकार के बारे में नहीं।
बेशक, सूक्ष्म परीक्षा की प्रभावशीलता प्रयोगशाला कर्मचारी की योग्यता पर निर्भर करती है।
चावल। 1. टी. रूब्रम से प्रभावित नाखूनों से स्क्रैपिंग की माइक्रोस्कोपी। कवक के हाइप दिखाई दे रहे हैं।
सांस्कृतिक अनुसंधान
सामग्री को एक मानक सबौराड माध्यम पर टीका लगाया जाता है, अक्सर एंटीबायोटिक दवाओं के साथ। डर्माटोफाइट संक्रमण के निदान में, सबौराड के माध्यम में साइक्लोहेमेसाइड जोड़ने की प्रथा है, जो हवा से आने वाले दूषित कवक के विकास को रोकता है। एंटीबायोटिक और साइक्लोहेमेसाइड एडिटिव्स के साथ व्यावसायिक ऑफ-द-शेल्फ मीडिया हैं। यह याद रखना चाहिए कि कई गैर-डर्माटोफाइटिक मोल्ड और कुछ कैंडिडा प्रजातियां साइक्लोहेमेसाइड के साथ माध्यम पर नहीं बढ़ती हैं, इसलिए सबौराउड माध्यम पर साइक्लोहेमेसाइड के साथ और इसके बिना माध्यम पर टीका लगाने की सिफारिश की जाती है। प्रजातियों की पहचान आमतौर पर उगाई गई संस्कृति की सूक्ष्म जांच या चयनात्मक मीडिया (चित्र 2-15) पर शोध करके की जाती है।
चावल। 2. प्रभावित नाखूनों से पृथक टी. रूब्रम कवक का संवर्धन। सबौरौद माध्यम (बाएं) और मकई अगर (दाएं) पर प्राप्त किया।
चावल। 3. कवक की संस्कृति टी. मेंटाग्रोफाइट्स var। इंटरडिजिटल प्रभावित नाखूनों से अलग। सबुरो के पर्यावरण पर प्राप्त किया.
चावल। 4. कवक Candida albicans की संस्कृति। सबुरो के पर्यावरण पर प्राप्त किया.
चावल। 5. कवक टोरुलोप्सिस ग्लाब्रेटा का संवर्धन प्रभावित नाखूनों से अलग किया जाता है। सबुरो के पर्यावरण पर प्राप्त किया.
चावल। 6. कवक की संस्कृति Ulocladium sp., प्रभावित नाखूनों से अलग।
चावल। 7. एक्रेमोनियम एसपी की सूक्ष्म आकृति विज्ञान प्रभावित नाखूनों से पृथक।
चावल। 8. फुसैरियम एसपी की सूक्ष्म आकृति विज्ञान प्रभावित नाखूनों से पृथक।
चावल। 9. Scopulariopsis sp की सूक्ष्म आकृति विज्ञान प्रभावित नाखूनों से पृथक।
चावल। 10. प्रभावित नाखूनों से पृथक कैंडिडा एल्बीकैंस की सूक्ष्म आकृति विज्ञान।
चावल। 11. अल्टेमेरिया एसपी की सूक्ष्म आकृति विज्ञान प्रभावित नाखूनों से पृथक।
चावल। 12. एस्परगिलस एसपी की सूक्ष्म आकृति विज्ञान प्रभावित नाखूनों से पृथक।
चावल। 13. प्रभावित नाखूनों से अलग किए गए उलोक्लेडियम एसपी की सूक्ष्म आकृति विज्ञान।
चावल। 14. चेटोमियम एसपी की सूक्ष्म आकृति विज्ञान प्रभावित नाखूनों से पृथक।
अंजीर 15. डर्माटोफाइट्स की पहचान के लिए पोषक तत्वों का पैनल (बाएं - संस्कृति टी रूब्रम, दाएं - टी मेंटाग्रोफाइट्स var। Mterdigitale)।
बाएं से दाएं: सबौराड का माध्यम, बैक्सटर का माध्यम, क्रिस्टेंसेन का माध्यम, मकई अगर
यह ध्यान दिया जाना चाहिए कि कुछ मोल्ड कवक, डर्माटोफाइट्स सहित, 2-3 सप्ताह में संस्कृति में धीरे-धीरे बढ़ते हैं।
भले ही सामग्री एकत्र करने के सभी नियमों का पालन किया जाता है, अच्छे प्रयोगशाला उपकरण और इसके कर्मियों की उच्च योग्यता के साथ, संस्कृति अनुसंधान के सकारात्मक परिणामों की संख्या बहुत कम है।
विदेशी साहित्य के अनुसार, सकारात्मक अध्ययन का प्रतिशत 50 से अधिक नहीं है।
सर्वोत्तम घरेलू प्रयोगशालाओं में सकारात्मक परिणामों का प्रतिशत मुश्किल से 30 तक पहुंचता है।
इस प्रकार, onychomycosis के हर 3 में से 2 मामलों में, इसके एटियलजि को स्थापित नहीं किया जा सकता है।
ल्यूमिनसेंट अनुसंधान
1925 में, मार्गरेट और डेवेज़ ने पाया कि कुछ डर्माटोफाइट्स से प्रभावित बाल एक बायडा फिल्टर से गुजरने वाली पराबैंगनी किरणों के संपर्क में आने पर एक विशिष्ट चमक देते हैं। बायडा ग्लास में बेरियम सल्फेट होता है, इसमें लगभग 9% निकल ऑक्साइड होता है; यह 365 एनएम की लंबाई के साथ किरणों को प्रसारित करता है। विभिन्न उपकरणों का उपयोग पराबैंगनी किरणों के स्रोत के रूप में किया जा सकता है। चमक की प्रकृति ठीक से स्थापित नहीं की गई है। कवक की मृत्यु के बाद और गर्म पानी या ठंडे सोडियम ब्रोमाइड समाधान के साथ फ्लोरोसेंट सामग्री निकालने के प्रयासों के बाद भी बाल चमकते रहते हैं। चमक की तीव्रता और प्रकृति विलयन के pH पर निर्भर करती है। यह माना जाता है कि फ्लोरोसेंट पदार्थ कवक और बढ़ते बालों के बीच बातचीत की प्रक्रिया में प्रकट होता है।
लकड़ी के फिल्टर के माध्यम से पारित पराबैंगनी किरणों में चमक, केवल जीनस माइक्रोस्पोरम (एम। कैनिस, एम। ऑडॉइनी, एम। फेरुगिनम, एम। डिस्टॉर्टियम, कभी-कभी एम। जिप्सम और एम। नानम) के कवक से प्रभावित बालों के लिए विशिष्ट है। साथ ही ट्राइकोफाइटन शोनेलिनी ... माइक्रोस्पोरम से प्रभावित बाल, विशेष रूप से एम। कैनिस और एम। ऑडॉइनी, सबसे चमकदार चमक देते हैं; टी. शोनेलिनी से प्रभावित बालों में एक नीरस हरा-भरा प्रतिदीप्ति होता है।
फंगस से पूरी तरह प्रभावित बालों में ही चमक दिखाई देती है। यह ताजा घावों में नहीं हो सकता है। इन मामलों में, बालों को सबसे सक्रिय किनारे वाले क्षेत्र से हटा दिया जाना चाहिए, और बालों के मूल भाग में चमक पाई जा सकती है।
ल्यूमिनसेंट विधि का उपयोग निदान और व्यक्तिगत रोगियों में उपचार की प्रभावशीलता की निगरानी और महामारी विज्ञान के क्षेत्र में दोनों के लिए किया जा सकता है। कॉम्पैक्ट मोबाइल इकाइयां स्कूलों, किंडरगार्टन आदि में संपर्क करने वाले लोगों की जांच के लिए सुविधाजनक हैं।
ल्यूमिनसेंट परीक्षा एक अंधेरे कमरे में की जानी चाहिए, घावों को क्रस्ट, मलहम के अवशेषों आदि से पहले से साफ किया जाना चाहिए। ल्यूमिनसेंट विधि का उपयोग पिट्रियासिस लाइकेन के निदान के लिए किया जा सकता है, खासकर जब घावों को खोपड़ी पर स्थानीयकृत किया जाता है। इस रोग के घावों में लाल-पीले या भूरे रंग की चमक होती है। यह चमक, हालांकि, कड़ाई से विशिष्ट नहीं है, क्योंकि यह खोपड़ी पर रूसी की उपस्थिति में और यहां तक कि स्वस्थ लोगों में चेहरे और ऊपरी शरीर पर बालों के रोम के मुंह के क्षेत्र में देखा जा सकता है। ल्यूमिनसेंट विधि से पहचाने गए प्रभावित बालों की सूक्ष्म जांच की जानी चाहिए।
प्रतिरक्षाविज्ञानी और जैविक अनुसंधान
शरीर के विशिष्ट पुनर्गठन और कवक रोगों के सीरोलॉजिकल निदान की पहचान करने के लिए इम्यूनोलॉजिकल अनुसंधान विधियों का उपयोग किया जाता है। नमूने के सीरम में विशिष्ट एंटीबॉडी का पता लगाने के लिए, निम्नलिखित सीरोलॉजिकल प्रतिक्रियाएं की जाती हैं: एग्लूटीनेशन, वर्षा, पूरक बंधन, संबंधित एंटीजन के साथ इम्यूनोफ्लोरेसेंस।
एलर्जी त्वचा परीक्षणों का उपयोग करके रोगी के शरीर की एलर्जी की स्थिति का पता लगाया जाता है। एलर्जी को पीरके के अनुसार या मोरो के अनुसार त्वचा में रगड़कर, मंटौक्स के अनुसार अंतःस्रावी रूप से, और त्वचा में इंजेक्शन द्वारा भी त्वचा पर लगाया जाता है। इन परीक्षणों की मदद से, तत्काल और विलंबित दोनों प्रकार की एलर्जी प्रतिक्रियाओं का पता लगाया जाता है, जिससे हास्य और सेलुलर प्रतिरक्षा की स्थिति का आकलन करना संभव हो जाता है।
लिम्फोसाइटों के विशिष्ट संवेदीकरण की पहचान करने के लिए, बेसोफिल डिग्रेन्यूलेशन, एग्लोमरेशन और परिवर्तन प्रतिक्रियाओं, ब्लास्ट ट्रांसफॉर्मेशन टेस्ट, मैक्रोफेज माइग्रेशन का निषेध आदि का उपयोग किया जाता है।
सीरोलॉजिकल और एलर्जी प्रतिक्रियाओं के परिणामों की तुलना मायकोसेस के निदान और रोग का निदान दोनों के लिए उपयोगी है।
जैविक विधि। इसका उपयोग गहरे और विशेष रूप से खतरनाक मायकोसेस के प्रयोगशाला निदान के लिए किया जाता है। अध्ययन किए गए कवक के रोगी या संस्कृति से रोग संबंधी सामग्री वाले जानवरों के संक्रमण के आधार पर। विशेष प्रयोगशालाओं में किया गया।
हिस्टोलॉजिकल परीक्षा
डर्माटोफाइट्स के कारण त्वचा के मायकोसेस का ऊतक विज्ञान
घावों में पैथोमॉर्फोलॉजिकल परिवर्तन एपिडर्मिस, बालों और नाखूनों के स्ट्रेटम कॉर्नियम में कवक की शुरूआत और त्वचा की एक भड़काऊ प्रतिक्रिया के कारण होते हैं, जो तीव्र, सूक्ष्म या पुरानी हो सकती है। निदान को तभी स्थापित माना जा सकता है जब ऊतकीय तैयारी में कवक तत्व पाए जाते हैं। इसके लिए, विभिन्न हिस्टोलॉजिकल दागों का उपयोग किया जाता है, सबसे अधिक जानकारीपूर्ण आवधिक एसिड प्रतिक्रिया (पीएएस) है, जिससे अधिकांश डर्माटोफाइट्स (शिफू दाग और इसके संशोधनों) की कोशिका भित्ति के सेलूलोज़ और चिटिन में मौजूद पॉलीसेकेराइड की पहचान करना संभव हो जाता है। आप चांदी के साथ सल्फेशन प्रतिक्रियाओं और हिस्टोलॉजिकल वर्गों के संसेचन का भी उपयोग कर सकते हैं [खमेलनित्सकी ओके, 1973; लेवर डब्लू. एफ. और शॉम्बर्ग-लेवर्ल।, 1983]।
एपिडर्मिस के स्ट्रेटम कॉर्नियम में कवक, विशेष दाग का उपयोग करते समय भी, माइसेलियम फिलामेंट्स और बीजाणुओं के रूप में कम मात्रा में पाए जाते हैं। दुर्लभ मामलों में, जब घावों में कई कवक होते हैं, तो वे स्ट्रेटम कॉर्नियम में नाजुक बेसोफिलिक संरचनाओं के रूप में हेमोटॉक्सिलिन-एओसिन से सना हुआ वर्गों में पाए जा सकते हैं।
एपिडर्मिस में भड़काऊ परिवर्तन भिन्न हो सकते हैं: मामूली इंट्रा- और रीढ़ की कोशिकाओं के बाह्य कोशिकीय शोफ से लेकर गंभीर स्पोंजियोसिस तक। स्पोंजियोसिस आमतौर पर पैरों और हाथों के मायकोसेस के डिहाइड्रोटिक वेरिएंट के साथ विकसित होता है, चिकित्सकीय रूप से इन मामलों में, पुटिकाओं का उल्लेख किया जाता है। यह प्रतिक्रिया आमतौर पर टी. मेंटाग्रोफाइट्स वर के कारण होती है। इंटरडिजिटल। कभी-कभी एपिडर्मिस में एक स्पष्ट हाइपरकेराटोसिस होता है, जो अक्सर टी। रूब्रम के कारण होने वाले माइकोसिस में देखा जाता है।
डर्मिस में हिस्टोलॉजिकल परिवर्तन गैर-विशिष्ट हैं और तीव्र, सूक्ष्म और पुरानी सूजन के अनुरूप हैं।
टी. रूब्रम के कारण चिकनी त्वचा के माइकोसिस में, कवक कभी-कभी मखमली बालों और बालों के रोम में पाए जाते हैं। रोम के चारों ओर एक भड़काऊ प्रतिक्रिया विकसित होती है, जो डर्मिस में कवक के प्रवेश के कारण एक दानेदार चरित्र प्राप्त कर सकती है। इन मामलों में घुसपैठ का मध्य भाग दमन और परिगलन से गुजर सकता है, और परिधीय भाग में लिम्फोसाइट्स, हिस्टोसाइट्स, एपिथेलिओइड और बहुराष्ट्रीय विशाल कोशिकाएं होती हैं, जिसके अंदर कभी-कभी कवक बीजाणु पाए जाते हैं। यहां बीजाणु का आकार 6 माइक्रोन व्यास तक पहुंचता है, बालों में वे आमतौर पर 2 माइक्रोन से अधिक नहीं होते हैं।
खोपड़ी के मायकोसेस के घुसपैठ-दबाने वाले रूप और दाढ़ी और मूंछ के विकास क्षेत्र के साथ, बालों के अंदर और आसपास, बालों के रोम में कवक के तत्व पाए जाते हैं। बालों में, वे केराटिनाइजेशन की शुरुआत के क्षेत्र (लगभग 30 माइक्रोन के स्तर पर) के ठीक ऊपर निर्धारित होते हैं। डर्मिस में, अलग-अलग तीव्रता की एक भड़काऊ प्रतिक्रिया नोट की जाती है, जो कि केरियन सेल्सी के साथ सबसे अधिक स्पष्ट होती है। घुसपैठ की संरचना में एक तीव्र प्युलुलेंट प्रतिक्रिया के साथ, बड़ी संख्या में न्यूट्रोफिलिक ल्यूकोसाइट्स नोट किए जाते हैं, इस मामले में कवक के तत्व पूरी तरह से गायब हो सकते हैं। प्रक्रिया के पुराने पाठ्यक्रम में, घुसपैठ एक दानेदार चरित्र प्राप्त कर सकता है, इसमें बहुसंस्कृति वाली विशाल कोशिकाएं दिखाई देती हैं। घुसपैठ में कवक की अनुपस्थिति में निदान की पुष्टि करने के लिए, इम्यूनोफ्लोरेसेंट धुंधला तरीकों का उपयोग किया जा सकता है। इन उद्देश्यों के लिए, फ्लोरेसिन-लेबल वाले एंटीसेरम से टी। मेंटाग्रोफाइट्स का उपयोग किया जाता है, जिससे बालों में और पेरिफोलिक्युलर घुसपैठ में फंगल एंटीजन का पता लगाना संभव हो जाता है।
खोपड़ी के माइकोसिस (केरियन सेल्सी) में एक घुसपैठ-दबाने वाली त्वचा की प्रतिक्रिया का गठन और कवक एम। कैनिस, टी। टॉन्सिल और टी। वर्रुकोसम के कारण दाढ़ी और मूंछों का विकास क्षेत्र एक प्रतिरक्षाविज्ञानी की अभिव्यक्ति है। प्रतिक्रिया। इसका प्रमाण है:
1. सहज समाधान के लिए घावों की प्रवृत्ति।
2. टी. वर्रुकोसम (फेविफोर्मे) और टी. टोंसुरन्स के कारण होने वाले माइकोसिस के साथ त्वचा के हिस्से पर एक बहुत ही स्पष्ट भड़काऊ प्रतिक्रिया के साथ कवक तत्वों की अनुपस्थिति।
3. ज़ोफिलिक ट्राइकोफाइटिन (उदाहरण के लिए, टी। टॉन्सिल) के कारण माइकोसिस के घुसपैठ-दबाने वाले रूपों में ट्राइकोफाइटिन के इंट्राडर्मल प्रशासन के जवाब में एक निरंतर सकारात्मक प्रतिक्रिया, और नकारात्मक - एक ही टी। टॉन्सिल के कारण सतही मायकोसेस में।
एपिडर्मिस के स्ट्रेटम कॉर्नियम में फेवस के साथ, बड़ी संख्या में मायसेलियम फिलामेंट्स और कवक के एकल बीजाणु पाए जाते हैं। स्कूटुला का प्रतिनिधित्व एपिडर्मिस के एक्सयूडेट, पैराकेराटोटिक कोशिकाओं, भड़काऊ घुसपैठ की कोशिकाओं के साथ-साथ मायसेलियम फिलामेंट्स और फंगल बीजाणुओं द्वारा किया जाता है, जो मुख्य रूप से स्कूटुला के परिधीय क्षेत्र में स्थित होते हैं। रोग के सक्रिय चरण में, अपक्षयी बालों के रोम के आसपास के डर्मिस में बहुसंस्कृति वाले विशाल और प्लाज्मा कोशिकाओं से युक्त एक स्पष्ट भड़काऊ घुसपैठ का उल्लेख किया जाता है। पुराने घावों में, बाल और वसामय ग्रंथियां अनुपस्थित होती हैं, फाइब्रोसिस की घटनाएं होती हैं।
खमीर जैसी कवक के कारण त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली के मायकोसेस का ऊतक विज्ञान
त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली के कैंडिडिआसिस के साथ, जीनस कैंडिडा के कवक एपिडर्मिस के स्ट्रेटम कॉर्नियम में या श्लेष्म झिल्ली के उपकला की सतह परतों में पाए जाते हैं। कवक तत्व आमतौर पर कम होते हैं, वे पीएएस-प्रतिक्रिया या ग्राम द्वारा अच्छी तरह से दागदार होते हैं; सेप्टेट ब्रांचिंग मायसेलियम फिलामेंट्स, व्यास में 2-4 माइक्रोन, या अंडाकार बीजाणु, 3-5 माइक्रोन व्यास के रूप में प्रस्तुत किया जाता है। कवक के mycelial रूप का पता लगाना नैदानिक मूल्य का है।
त्वचा और श्लेष्मा झिल्ली के क्रोनिक ग्रैनुलोमेटस कैंडिडिआसिस के एक हिस्टोलॉजिकल अध्ययन में, फंगल तत्व भी मुख्य रूप से एपिडर्मिस के स्ट्रेटम कॉर्नियम में या श्लेष्म झिल्ली के उपकला के ऊपर के हिस्सों में पाए जाते हैं, लेकिन कभी-कभी कांटेदार परत में, अंदर बाल और डर्मिस में। चिह्नित हाइपरकेराटोसिस और पेपिलोमाटोसिस भी है; डर्मिस में - लिम्फोइड कोशिकाओं, न्यूट्रोफिल, प्लाज्मा और बहुराष्ट्रीय विशाल कोशिकाओं से युक्त एक घनी भड़काऊ घुसपैठ। घुसपैठ चमड़े के नीचे के वसायुक्त ऊतक में फैल सकती है।
पिट्रियासिस वर्सिकलर के साथ, नाजुक बेसोफिलिक संरचनाओं के रूप में एपिडर्मिस के स्ट्रेटम कॉर्नियम में बड़ी संख्या में कवक तत्व पाए जाते हैं, जो हेमोटॉक्सिलिन-एओसिन के साथ तैयार होने पर भी स्पष्ट रूप से दिखाई देते हैं। मशरूम को फिलामेंट और बीजाणु दोनों द्वारा दर्शाया जाता है।
पिट्रियासिस लाइकेन के कूपिक रूप के साथ, बालों के रोम के फैले हुए मुंह में सींग वाले द्रव्यमान और एक भड़काऊ घुसपैठ की कोशिकाओं का संचय होता है। रोम के आसपास भड़काऊ घुसपैठ भी नोट की जाती है। पीएएस प्रतिक्रिया में, कवक के गोलाकार या अंडाकार बीजाणु, व्यास में 2-4 माइक्रोन, बालों के रोम के मुंह के अंदर पाए जाते हैं, और कभी-कभी पेरिफोलिक्युलर घुसपैठ में। मायसेलियम का कभी पता नहीं चला।
पिट्रियासिस वर्सिकलर के रोगियों में बिगड़ा हुआ त्वचा रंजकता एपिडर्मिस में रंजकता की प्रक्रिया को बाधित करने वाले पदार्थ का उत्पादन करने के लिए पाइट्रोस्पोरम कवक की क्षमता के कारण होता है। हाइपोपिगमेंटेड क्षेत्रों से त्वचा की बायोप्सी की इलेक्ट्रॉन सूक्ष्म जांच से पता चला है कि मेलानोसाइट्स में बहुत छोटे मेलेनोसोम बनते हैं, जो केराटिनोसाइट्स में प्रवेश करने में सक्षम नहीं होते हैं। दूसरी ओर, त्वचा के हाइपरपिग्मेंटेड क्षेत्रों में, मेलेनोसोम बड़े होते हैं और इनमें बड़ी मात्रा में मेलेनिन होता है।
कवक रोगों के निदान का आधार त्वचा और नाखूनों के प्रभावित क्षेत्रों से तैयार की गई तैयारी की सूक्ष्म जांच है। हालांकि, विभिन्न प्रकार के मायकोसेस में सूक्ष्म चित्र समान है: त्वचा के तराजू और नाखूनों में, कवक के बीजाणु और 4-7 माइक्रोन के व्यास के साथ शाखित सेप्टेट मायसेलियम दिखाई देते हैं। इसलिए, ज्यादातर मामलों में कवक के जीनस और प्रजातियों को त्वचा के तराजू में या नाखून से स्क्रैपिंग में सूक्ष्म चित्र द्वारा निर्धारित नहीं किया जा सकता है। रोगज़नक़ की पहचान करने के लिए, पोषक तत्व मीडिया पर टीकाकरण किया जाता है, सबसे अधिक बार सबौराड के माध्यम पर।
एपिडर्मोफाइटिस।त्वचा के स्ट्रेटम कॉर्नियम, सबसे अधिक बार पैर, और निचले छोरों के नाखून प्रभावित होते हैं। बाल कभी प्रभावित नहीं होते हैं। नाखूनों पर पीले धब्बे या धारियाँ दिखाई देती हैं, फिर हाइपरकेराटोसिस (नाखूनों का मोटा होना) विकसित होता है, उनका विरूपण और विनाश होता है। तलवों और इंटरडिजिटल सिलवटों के लैमेलर छीलने, पैरों की त्वचा पर लालिमा दिखाई देती है। कभी-कभी बुलबुले, डायपर दाने, दरारें बन जाती हैं। रोग के साथ खुजली, जलन, दर्द होता है।
स्क्रैपिंग, स्केल, ब्लैडर कैप की सूक्ष्म जांच से पता चलता है कि माइसेलियम के कम-सेप्टिक फिलामेंट्स 3-5 मिमी के व्यास के साथ, कुछ फिलामेंट्स गोल और आयताकार बीजाणुओं में टूट जाते हैं।
ट्राइकोफाइटोसिस।यह त्वचा और उसके उपांगों का एक कवक रोग है जिसमें बालों को प्रभावित करने की एक विशेष प्रवृत्ति होती है [अव्य। ट्राइकोसबाल + फाइटोनकवक]। खोपड़ी पर लगभग 1.5 सेमी व्यास वाले कई घाव दिखाई देते हैं। उन पर त्वचा edematous, hyperemic, तराजू से ढकी होती है। घावों में बाल त्वचा की सतह से 2-3 मिमी ऊपर के स्तर पर टूट जाते हैं, इसलिए इसका नाम "दाद" है।
सूक्ष्म परीक्षण से ट्राइकोफाइटन कवक की एक विशिष्ट विशेषता का पता चलता है - जंजीरों में उनके बीजाणुओं की व्यवस्था। मशरूम के गुणों के आधार पर, निम्न हैं:
एंडोथ्रिक्स (सतही ट्राइकोफाइटोसिस का प्रेरक एजेंट)। बालों के अंदर मशरूम उगते हैं, नाटकीय रूप से इसकी संरचना बदलते हैं। पूरे बाल जंजीरों की समानांतर पंक्तियों से भरे (भरवां) होते हैं, जिसमें बड़े गोल या चौकोर बीजाणु होते हैं;
एक्टोथ्रिक्स (गहरी ट्राइकोफाइटोसिस का प्रेरक एजेंट), जिसमें बाल जंजीरों में अक्ष के साथ व्यवस्थित छोटे या बड़े बीजाणुओं के एक म्यान में लिपटे होते हैं।
फेवस पपड़ी है।बाल और त्वचा प्रभावित होते हैं, कम अक्सर नाखून। बाल पुराने विग की तरह पतले, सुस्त, "पाउडर" हो जाते हैं, लेकिन टूटते नहीं हैं। त्वचा के घावों को तश्तरी की तरह उभरे हुए किनारों के साथ पीले-ग्रे क्रस्ट (स्क्यूट्स) की उपस्थिति की विशेषता है।
सूक्ष्म जांच से प्रभावित बालों के अंदर हवा के बुलबुले का पता चलता है।
माइक्रोस्पोरिया।त्वचा और बाल प्रभावित होते हैं। घावों में, बाल त्वचा की सतह से ऊपर 6-8 मिमी के स्तर पर टूट जाते हैं। बचे हुए स्टंप के आसपास सफेद रंग के म्यान दिखाई दे रहे हैं।
प्रभावित बालों की सूक्ष्म जांच से पता चलता है कि एक मोज़ेक पैटर्न (यादृच्छिक रूप से) में बालों के चारों ओर और अंदर स्थित बीजाणु होते हैं। वे बहुत छोटे (1-3 मिमी) हैं, इसलिए रोग का नाम। बालों की विशिष्ट फ्लोरोसेंट चमक माइक्रोस्पोरिया का निदान करने में मदद करती है।
सूक्ष्म परीक्षण से गोल नवोदित कोशिकाओं का पता चलता है, अक्सर अंगूर के एक गुच्छा के रूप में।
डीप (मोल्ड) मायकोसेस।वे एंटीबायोटिक कारखानों में व्यावसायिक रोगों के रूप में अधिक आम हैं, कृषि श्रमिकों में फफूंदीदार अनाज, घास, खाद, आदि के संपर्क में हैं। पेनिसिलियोसिस (ब्रश कवक) के प्रेरक एजेंट में ब्रश में समाप्त होने वाला एक मोटा, चौड़ा, सेप्टिक मायसेलियम होता है। म्यूकोरोसिस के प्रेरक एजेंट में एक विस्तृत गैर-सेप्टिक मायसेलियम होता है जो बीजाणुओं के एक बैग में समाप्त होता है। एस्परगिलोसिस (ल्यूकेमिया मोल्ड) का प्रेरक एजेंट अक्सर फफूंदी वाले फलों और ब्रेड पर पाया जाता है। इसमें एक मोटे सेप्टेट मायसेलियम होता है, जो एक विस्तार में समाप्त होता है, जिसमें से बीजाणुओं के साथ धागे, पानी के समान, पानी की धाराओं के साथ फैल सकते हैं।
एक्टिनोमाइकोसिस।विभिन्न प्रकार के रेडिएंट फंगस के कारण। यह त्वचा, श्लेष्मा झिल्ली और आंतरिक अंगों में घने घुसपैठ के गठन की विशेषता है, जो दमन और फिस्टुला की उपस्थिति के लिए प्रवण होता है। फिस्टुला के निर्वहन में आंख पर, एक विशिष्ट उज्ज्वल किनारे वाले छोटे पीले दाने दिखाई देते हैं - एक्टिनोमाइसेट ड्रूसन। फिस्टुलस और थूक के निर्वहन से माइक्रोस्कोपी की तैयारी तैयार की जाती है।
कम आवर्धन पर, दीप्तिमान कवक के ड्रूस में एक हल्के अनाकार मध्य और किनारों पर एक गहरे रंग के साथ एक गोल आकार के पीले रंग की संरचनाएं दिखाई देती हैं। उच्च आवर्धन पर, मायसेलियम फिलामेंट्स ड्रूसन के केंद्र में और परिधि के साथ फ्लास्क के आकार की सूजन निर्धारित की जाती हैं। ग्राम के अनुसार धुंधला होने पर, माइसेलियम के तंतु G + होते हैं, और शंकु G- होते हैं।
आक्रामक मायकोसेस का सटीक निदानआसान नहीं है। यह न केवल कवक की एक संस्कृति प्राप्त करने में कठिनाइयों से समझाया गया है, बल्कि शोध परिणामों की व्याख्या में भी है, क्योंकि कवक, दोनों खमीर और मायसेलियल, श्लेष्म झिल्ली को उपनिवेशित कर सकते हैं और अध्ययन के तहत नमूनों को दूषित कर सकते हैं। इस संबंध में, आक्रामक मायकोसेस का निदान एक एकीकृत दृष्टिकोण पर आधारित है, जिसमें न केवल माइकोलॉजिकल (सांस्कृतिक) और सीरोलॉजिकल (फंगल एंटीजन का निर्धारण) अध्ययनों के परिणाम शामिल हैं, बल्कि फंगल संक्रमण के नैदानिक लक्षण, सहायक अनुसंधान विधियों के डेटा भी शामिल हैं। (गणना या चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग, अल्ट्रासाउंड)।
यूरोपीय-अमेरिकी सहकारी समूह आक्रामक मायकोसेस के अध्ययन के लिएप्रतिरक्षाविहीन रोगियों में, आक्रामक मायकोसेस के निदान के लिए मानदंड विकसित किए गए हैं। उन्हें 2001 में एंटीमाइक्रोबियल और कीमोथेरेपी (ICAAC, शिकागो) पर अंतर्राष्ट्रीय सम्मेलन में और 2002 में प्रिंट में प्रस्तुत किया गया था। सिद्ध, संभावित और संभावित आक्रामक माइकोसिस के मानदंड, जो नैदानिक और महामारी विज्ञान के अध्ययन में उपयोग के लिए अनुशंसित हैं, निर्धारित किए गए हैं।
फिलामेंटस कवक के कारण सिद्ध आक्रामक माइकोसिस: हिस्टोलॉजिकल या साइटोलॉजिकल परीक्षा के दौरान बायोप्सी या एस्पिरेट्स में फंगल मायसेलियम का पता लगाना या एक बाँझ फोकस से सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में प्राप्त नमूनों से संस्कृति का अलगाव, जो कि नैदानिक और रेडियोलॉजिकल अध्ययनों के परिणामों के अनुसार, संक्रमण से जुड़ा है, अपवाद के साथ मूत्र और श्लेष्मा झिल्ली का अध्ययन।
खमीर के कारण सिद्ध आक्रामक माइकोसिस: बायोप्सी या एस्पिरेट्स में खमीर कोशिकाओं का पता लगाना (जीनस कैंडिडा का कवक स्यूडोमाइसीलियम या ट्रू मायसेलियम बना सकता है), श्लेष्मा झिल्ली से नमूनों के अपवाद के साथ, या सामान्य रूप से बाँझ फोकस से सड़न रोकनेवाला परिस्थितियों में प्राप्त नमूनों से संस्कृति का अलगाव, जो, संक्रमण से जुड़े नैदानिक और रेडियोलॉजिकल अध्ययनों के परिणामों के अनुसार, मूत्र, साइनस और श्लेष्म झिल्ली के नमूनों के अपवाद के साथ, या माइक्रोस्कोपी और विशिष्ट धुंधला (स्याही की एक बूंद में, म्यूसीकारमाइन के साथ धुंधला) खमीर कोशिकाओं या एक सकारात्मक एंटीजन क्रिप्टोकोकस द्वारा पता लगाना एसपीपी मस्तिष्कमेरु द्रव में।
फिलामेंटस कवक के कारण कवकनाशी: एस्परगिलस एसपीपी को छोड़कर, कवक के रक्त संस्कृतियों का अलगाव। और पेनिसिलियम एसपीपी।, पेनिसिलियम मार्नेफी सहित, एक संक्रामक प्रक्रिया के नैदानिक लक्षणों के संयोजन में, जो पृथक रोगज़नक़ के अनुरूप है।
खमीर कवक के कारण कवकनाशी: इस रोगज़नक़ से जुड़े संक्रमण के नैदानिक लक्षणों वाले रोगियों में कैंडिडा या अन्य खमीर कवक के रक्त संस्कृतियों का अलगाव।
आक्रामक मायकोसेस के लिए नैदानिक अध्ययन का परिसर
| जांच की गई जैव सामग्री | संकेत, मीडिया का इस्तेमाल, मूल्य |
| खून |
संकेत:
व्यापक स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक दवाओं के साथ उपचार के दौरान लगातार बुखार (4-5 दिन या अधिक); एंटीबायोटिक चिकित्सा के दौरान बुखार की दूसरी "लहर" एरोबिक बैक्टीरिया के लिए एक नस से शीशियों में रक्त संग्रह * या मशरूम के लिए एक चुनिंदा माध्यम में, दोहराया (दिन में 2-3 बार 1 घंटे के अंतराल के साथ) नैदानिक प्रासंगिकता: खमीर का अलगाव, फिलामेंटस कवक को अलग करते समय सावधानीपूर्वक व्याख्या, फुसैरियम एसपीपी को छोड़कर। |
| शिरापरक कैथेटर |
संकेत:
रक्त से खमीर का अलगाव रक्त से खमीर स्राव के सभी मामलों में केंद्रीय या परिधीय शिरापरक कैथेटर हटा दिया जाता है माइकोलॉजिकल परीक्षा के लिए, 5-6 सेमी लंबे कैथेटर के एक असमान रूप से हटाए गए डिस्टल खंड का उपयोग किया जाता है। अध्ययन सबौराड पर एक अर्ध-मात्रात्मक (माकी विधि) या मात्रात्मक विधि द्वारा किया जाता है। नैदानिक प्रासंगिकता:
|
| ऊपरी श्वसन पथ का निर्वहन, थूक, श्वासनली से पानी निकालना, ब्रांकाई, ब्रोन्कोएल्वोलर लैवेज द्रव |
संकेत:
फिलामेंटस कवक या क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स के कारण होने वाले मायकोसेस का संदेह; व्यापक स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक दवाओं और न्यूट्रोपेनिया के साथ चिकित्सा के दौरान लंबे समय तक बुखार; सफेद कैल्कोफ्लोर के साथ नमूनों की माइक्रोस्कोपी (मायसेलियम या स्यूडोमाइसीलियम का पता लगाना); सबुरो के बुधवार को बुवाई; इनवेसिव एस्परगिलोसिस की विशेषता फेफड़ों में फॉसी की उपस्थिति में ब्रोन्कोएलेवोलर लैवेज तरल पदार्थ में एस्परगिलस एंटीजन का निर्धारण नैदानिक प्रासंगिकता: फिलामेंटस कवक या क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स का अलगाव |
| मस्तिष्कमेरु द्रव |
संकेत:
मेनिनजाइटिस के लक्षण; गणना या चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग के साथ मस्तिष्क में एक फोकस (foci) का पता लगाना; बुखार और न्यूट्रोपेनिया से जुड़े "सेरेब्रल" लक्षण स्याही की एक बूंद में सफेद कैल्कोफ्लोर के साथ माइक्रोस्कोपी; एस्परगिलस, क्रिप्टोकोकस के प्रतिजन का निर्धारण; बुवाई बुधवार नैदानिक प्रासंगिकता:
|
| बायोप्सी, एस्पिरेट्स, पेरिटोनियल तरल पदार्थ, फुफ्फुस द्रव |
संकेत:
आक्रामक माइकोसिस के नैदानिक और / या रेडियोलॉजिकल संकेत; व्यापक स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक दवाओं के साथ चिकित्सा के दौरान बुखार। सफेद कैल्कोफ्लोर के साथ माइक्रोस्कोपी, सबौराड माध्यम पर चढ़ाना नैदानिक प्रासंगिकता:
|
संभावित आक्रामक माइकोसिसनिम्नलिखित मानदंडों के संयोजन के साथ निदान किया गया:
सूक्ष्मजीवविज्ञानी मानदंड की श्रेणी से एक विशेषता;
संक्रामक प्रक्रिया के "कम महत्वपूर्ण" नैदानिक लक्षणों के समूह से "महत्वपूर्ण" या दो की श्रेणी से एक संकेत।
संभावित आक्रामक माइकोसिसनिम्नलिखित मानदंडों के संयोजन के आधार पर निदान किया जाता है:
कम से कम एक जोखिम कारक की उपस्थिति जो आक्रामक माइकोसिस के विकास को प्रेरित करती है;
सूक्ष्मजीवविज्ञानी मानदंड की श्रेणी से एक संकेत या "महत्वपूर्ण" की श्रेणी से एक संकेत ("कम महत्वपूर्ण" के समूह से दो) संक्रामक प्रक्रिया के नैदानिक लक्षण।
संकल्पना " संभावित आक्रामक माइकोसिस»ऐंटिफंगल दवाओं की प्रभावशीलता की जांच करने वाले नैदानिक परीक्षणों में उपयोग के लिए अनुशंसित नहीं है। आप इस शब्द का उपयोग अनुभवजन्य एंटिफंगल चिकित्सा, महामारी विज्ञान के अध्ययन, फार्माकोइकोनॉमिक्स के अध्ययन के विश्लेषण में कर सकते हैं।
पर माइकोलॉजिकल रिसर्चस्टेरिल एस्पिरेट्स या बायोप्सी न केवल फंगल कल्चर के अलगाव को ध्यान में रखते हैं, बल्कि माइक्रोस्कोपी द्वारा मायसेलियम या स्यूडोमाइसीलियम का भी पता लगाते हैं। हिस्टोलॉजिकल तैयारियों में, एस्परगिलस को फुसैरियम एसपीपी, सेक्लोस्पोरियम एपिओस्पर्मम और कुछ अन्य फिलामेंटस कवक से अंतर करना मुश्किल है। विभेदक निदान के लिए, एस्परगिलस के एंटीबॉडी के साथ एक इम्यूनोहिस्टोकेमिकल अध्ययन किया जाना चाहिए।
खमीर कवक का अलगावरक्त से कम से कम एक अध्ययन में "सिद्ध" आक्रामक माइकोसिस की श्रेणी से संबंधित है और न्यूट्रोपेनिया के रोगियों में प्रणालीगत एंटीमायोटिक दवाओं की नियुक्ति के लिए एक पूर्ण संकेत है। रक्त से खमीर कवक का पता लगाने की आवृत्ति कम है, यहां तक कि प्रसारित कैंडिडिआसिस के साथ, यह 35-50% है।
बाहर ले जाना बार-बार रक्त संस्कृतियोंसकारात्मक परिणाम मिलने की संभावना बढ़ जाती है।
अन्य व्याख्यारक्त में फिलामेंटस कवक का पता लगाने के मामले में परिणाम। फिलामेंटस कवक के अलगाव की उच्च आवृत्ति फुसैरियम एसपीपी की विशेषता है। और 40-60% है। एस्परगिलस शायद ही कभी पाया जाता है और एस्परगिलस टेरियस के अपवाद के साथ, ज्यादातर मामलों में इसे दूषित माना जाता है।
पर प्रकाश डाला एस्परगिलस टेरियसहेमोब्लास्टोसिस वाले रोगियों के रक्त से सच्चे एस्परगिलोमा का संकेत हो सकता है, और संक्रमण के नैदानिक लक्षणों की उपस्थिति में, यह एंटीमायोटिक दवाओं की नियुक्ति का आधार है।
आक्रामक माइकोसिस के लिए मानदंड
| अनुक्रमणिका | मानदंड |
| आक्रामक माइकोसिस (मैक्रोऑर्गेनिज्म) की शुरुआत को प्रेरित करने वाले कारक | न्यूट्रोपेनिया (< 0,5*109/л в течение 10 дней)
ब्रॉड-स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक थेरेपी के साथ 96 घंटे से अधिक समय तक लगातार बुखार शरीर का तापमान 38 डिग्री सेल्सियस से ऊपर या 36 डिग्री सेल्सियस से नीचे और निम्न में से कोई भी पूर्वसूचक संकेत: पिछले 60 दिनों में लंबे समय तक न्यूट्रोपेनिया (10 दिनों से अधिक), पिछले 30 दिनों के भीतर गहन इम्यूनोसप्रेसिव थेरेपी, पिछले में सिद्ध या संभावित आक्रामक माइकोसिस अवधि न्यूट्रोपेनिया या एड्स जीवीएचडी के लक्षण, मुख्य रूप से गंभीर पाठ्यक्रम (द्वितीय डिग्री) या पुरानी बीमारी के व्यापक पाठ्यक्रम के मामले पिछले 60 दिनों के भीतर ग्लूकोकार्टिकोइड्स का दीर्घकालिक (3 सप्ताह से अधिक) उपयोग |
| सूक्ष्मजीवविज्ञानी संकेत | फिलामेंटस कवक की एक संस्कृति का अलगाव (एस्परगिलस एसपीपी।, फुसारुइम एसपीपी।, सेक्लोस्पोरियम एसपीपी। और जाइगोमाइसेट्स सहित) और क्रिप्टोकोकस नेकफॉर्मन्स थूक या ब्रोन्कोएलेवोलर लैवेज तरल पदार्थ से। परानासल साइनस के एस्पिरेट्स से फिलामेंटस कवक का पता लगाने के लिए संस्कृति या साइटोलॉजिकल परीक्षा (प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी) के सकारात्मक परिणाम थूक या ब्रोन्कोएलेवोलर लैवेज तरल पदार्थ से कोशिका विज्ञान / प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी द्वारा फिलामेंटस कवक या क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स का पता लगाना ब्रोन्कोएलेवोलर लैवेज तरल पदार्थ, मस्तिष्कमेरु द्रव, और रक्त के नमूनों में एस्परगिलस एंटीजन पॉजिटिव (कम से कम दो) रक्त के नमूनों में क्रिप्टोकोकस का सकारात्मक प्रतिजन सामान्य रूप से बाँझ द्रव के नमूनों में कवक तत्वों की साइटोलॉजिकल परीक्षा या प्रत्यक्ष माइक्रोस्कोपी द्वारा पता लगाना (उदाहरण के लिए, क्रिप्टोकोकस एसपीपी। मस्तिष्कमेरु द्रव में) मूत्र कैथेटर की अनुपस्थिति में मूत्र में खमीर कवक की संस्कृति का पता लगाने पर अध्ययन के दो सकारात्मक परिणाम मूत्र कैथेटर की अनुपस्थिति में मूत्र में कैंडिडा क्रिस्टल कैंडिडा एसपीपी का अलगाव। रक्त संस्कृतियों से |
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चिक्तिस्य संकेत
निचला श्वसन पथ |
उस स्थान से जुड़ा होना चाहिए जहां से सूक्ष्मजीवविज्ञानी परीक्षण के लिए नमूने लिए जाते हैं निम्न में से कोई भी प्रकार का नया फेफड़ा सीटी पर घुसपैठ करता है: प्रभामंडल लक्षण, अर्धचंद्राकार लक्षण, समेकन के क्षेत्रों के साथ गुहा * निचले श्वसन पथ के संक्रमण के लक्षण (खांसी, सीने में दर्द, हेमोप्टाइसिस, डिस्पेनिया), फुफ्फुस घर्षण बड़बड़ाहट, कोई भी नई घुसपैठ जो उच्च गंभीरता के संकेतों में शामिल नहीं है; फुफ्फुस बहाव |
| ऊपरी श्वांस नलकी उच्च महत्व के संकेत कम महत्व के संकेत |
आक्रामक साइनस संक्रमण के रेडियोलॉजिकल संकेत (दीवार का क्षरण या आसन्न संरचनाओं में संक्रमण का प्रसार, खोपड़ी की हड्डियों का व्यापक विनाश) बहती नाक, नाक बंद होना, नाक के म्यूकोसा का अल्सरेशन, एपिस्टेक्सिस, पेरिऑर्बिटल एडिमा, ऊपरी जबड़े में दर्द, काला नेक्रोटिक अल्सरेशन, या कठोर तालू का वेध |
| केंद्रीय तंत्रिका तंत्र उच्च महत्व के संकेत कम महत्व के संकेत |
संदिग्ध सीएनएस संक्रमण के एक्स-रे संकेत (मास्टोइडाइटिस या अन्य पैरामेनिंगियल फोकस, एक्स्ट्राड्यूरल एम्पाइमा, मस्तिष्क या रीढ़ की हड्डी में कई घाव) फोकल बरामदगी, हेमिपेरेसिस सहित फोकल न्यूरोलॉजिकल लक्षण और संकेत; चेतना के विकार, मेनिन्जियल लक्षण, मस्तिष्कमेरु द्रव की जैव रासायनिक संरचना का उल्लंघन और इसकी सेलुलर संरचना (अन्य रोगजनकों की अनुपस्थिति में, संस्कृति और माइक्रोस्कोपी के अनुसार, ट्यूमर कोशिकाओं की अनुपस्थिति में) |
पर रक्त में पता लगानाया खमीर कवक के अन्य बाँझ बायोसबस्ट्रेट्स, प्रजातियों की पहचान करना और ऐंटिफंगल दवाओं के प्रति संवेदनशीलता का निर्धारण करना अनिवार्य है, जब फिलामेंटस (मोल्ड) कवक को अलग करते हैं - केवल प्रजातियों की पहचान, संवेदनशीलता निर्धारित नहीं होती है।
नैदानिक में अभ्यासइस तरह के कवक की रोगाणुरोधी दवाओं की संवेदनशीलता को निर्धारित करने के लिए अपूर्ण मानकों के कारण फिलामेंटस कवक की संवेदनशीलता की जांच नहीं की जाती है। इसके अलावा, केवल एक अध्ययन ने एस्परगिलस एसपीपी की संवेदनशीलता के बीच संबंध का प्रदर्शन किया। और हेमोब्लास्टोसिस के रोगियों में आक्रामक एस्परगिलोसिस के उपचार के परिणाम। तब से किए गए किसी भी अध्ययन ने समान परिणाम प्राप्त नहीं किए हैं।
हाल ही में, ए। फ्यूमिगेटस कवक के इट्राकोनाज़ोल, वोरिकोनाज़ोल के अधिग्रहित प्रतिरोध के गठन पर अलग-अलग रिपोर्टें दिखाई देने लगीं।
प्रजातियों के लिए कवक की पहचान, विशेष रूप से बाँझ लोकी से प्राप्त, सबसे पहले, एक रोगाणुरोधी के चयन के लिए और एक पर्याप्त एंटिफंगल चिकित्सा के लिए आवश्यक है। इस प्रकार, कैंडिडा क्रूसी फ्लुकोनाज़ोल के प्रतिरोधी हैं और अन्य खमीर प्रजातियों की तुलना में एम्फोटेरिसिन बी के प्रति कम संवेदनशील हैं; एस्परगिलस टेरियस, स्केडोस्पोरियम एपिओस्पर्मम (स्यूडालेसचेरिया बॉयडी), ट्राइकोस्पोरन बेगेली, स्कोपुलरिओप्सिस एसपीपी। एम्फोटेरिसिन बी के लिए प्रतिरोधी; म्यूकोरेल्स इट्राकोनाज़ोल, वोरिकोनाज़ोल के प्रतिरोधी हैं, कैंडिडा ग्लाब्रेटा फ्लुकोनाज़ोल के लिए खुराक पर निर्भर संवेदनशीलता प्रदर्शित करता है, और इस प्रकार के कवक, यहां तक कि संवेदनशील उपभेदों को अलग करते समय, फ्लुकोनाज़ोल की खुराक बढ़ाई जानी चाहिए (वयस्कों को 400 मिलीग्राम के बजाय 800 मिलीग्राम निर्धारित किया जाता है); कैंडिडा लुसिटानिया एम्फोटेरिसिन बी के प्रतिरोधी हैं।
प्रजातियों के लिए कवक की पहचानयह एक अस्पताल में महामारी विज्ञान विश्लेषण करने के लिए भी महत्वपूर्ण है - प्रकोप के प्रेरक एजेंटों का निर्धारण और यदि संभव हो तो संक्रमण का स्रोत। सी. लुसिटानिया, सी. क्रुसी, सी. लिपोलाइटिका जैसे दुर्लभ कवक के कारण होने वाले संक्रमण के प्रकोप का वर्णन किया गया है।
आधारित कवक की प्रजातियों की पहचानश्लेष्म झिल्ली के आक्रामक माइकोसिस या कवक उपनिवेशण को ग्रहण किया जा सकता है। उदाहरण के लिए, एस्परगिलस नाइजर एस्परगिलस फ्यूमिगेटस की तुलना में तीव्र ल्यूकेमिया वाले रोगियों में आक्रामक एस्परगिलोसिस का कारण बनने की संभावना काफी कम है। ब्रोन्कोएल्वोलर लैवेज तरल पदार्थ से एस्परगिलस नाइजर के अलगाव को अक्सर श्वसन पथ के उपनिवेशण के रूप में माना जाता है, और थूक से - हवा से संदूषण के रूप में और आक्रामक एस्परगिलोसिस के निदान की पुष्टि करने के लिए अतिरिक्त शोध की आवश्यकता होती है।
आधारित फिलामेंटस कवक का उत्सर्जनथूक, ब्रोन्कोएलेवोलर द्रव, परानासल साइनस के महाप्राण से, कोई केवल आक्रामक माइकोसिस मान सकता है, इसे "सिद्ध" की श्रेणी में शामिल नहीं किया जा सकता है। हालांकि, थूक में एस्परगिलस का पता लगाना, विशेष रूप से एस्परगिलस फ्यूमिगेटस या एस्परगिलस फ्लेवस, न्यूट्रोपेनिक रोगियों में, एलोजेनिक अस्थि मज्जा प्राप्त करने वालों पर हमेशा विचार किया जाना चाहिए। इसके लिए बार-बार माइकोलॉजिकल परीक्षा और फेफड़ों की कंप्यूटेड टोमोग्राफी की आवश्यकता होती है। तो, न्यूट्रोपेनिया के साथ, एस्परगिलस एसपीपी की सकारात्मक संस्कृति के मामले में आक्रामक एस्परगिलोसिस का पता लगाने की संभावना। थूक में 80% है।
पर प्रकाश डाला क्रिप्टोकोकस नियोफ़ॉर्मन्सश्वसन पथ (धोने, पानी से धोना) से प्रतिरक्षित रोगियों में नैदानिक रूप से महत्वपूर्ण है। यदि इम्युनोकॉम्प्रोमाइज्ड रोगियों के श्वसन पथ (श्वासनली, ब्रांकाई, ब्रोन्कोएलेवोलर लैवेज से लैवेज) से प्राप्त तरल पदार्थ से खमीर कवक की पहचान अनिवार्य नहीं है, तो इन नमूनों से क्रिप्टोकोकस नियोफॉर्मन्स का पता लगाने के लिए स्क्रीनिंग आवश्यक है।
मूत्र में कैंडिडा का पता लगानान्यूट्रोपेनिया और बुखार के रोगियों में, इसे आमतौर पर प्रसारित कैंडिडल संक्रमण की अभिव्यक्ति माना जाता है।
समय पर निदानइनवेसिव ने कवक एस्परगिलस एसपीपी के विशिष्ट प्रतिजन के संचलन का पता लगाने के लिए एक व्यावसायिक परीक्षण का सफलतापूर्वक उपयोग किया। galactomanna (फंगल कोशिका दीवार का पॉलीसेकेराइड पानी में घुलनशील घटक)।
गैलेक्टोमैनदो विधियों द्वारा निर्धारित किया जा सकता है: लेटेक्स एग्लूटीनेशन विधि (पास्टोरेक्स एस्परगिलस, बायोराड) और एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख (प्लेटेलिया एस्परगिलस, बायोराड)।
लाभ एंजाइम इम्युनोसेरक्त में गैलेक्टोमैन के स्तर को निर्धारित करने के लिए संवेदनशीलता की निचली सीमा है - 1 एनजी / एमएल या उससे कम, और लेटेक्स एग्लूटिनेशन की मदद से - 15 एनजी / एमएल। रक्त में गैलेक्टोमेंसी का निर्धारण (कम से कम 2 नमूनों में), मस्तिष्कमेरु द्रव, ब्रोन्कोएलेवोलर लैवेज नैदानिक मूल्य का है। एंजाइम-लिंक्ड इम्युनोसॉरबेंट परख की संवेदनशीलता लगभग 90% है, विशिष्टता 90-99% है; एलोजेनिक अस्थि मज्जा प्राप्तकर्ताओं में, ये संकेतक कम हैं और क्रमशः 60-70% और 80-90% के बराबर हैं। ऐंटिफंगल दवाओं का रोगनिरोधी उपयोग (एंटीमायोटिक दवाएं गैलेक्टोमैन के दहलीज स्तर को कम करती हैं)।
40% मामलों में, पता लगाना गैलेक्टोमेंसीरक्त में, यह आक्रामक एस्परगिलोसिस की अभिव्यक्तियों से आगे है, जो फेफड़ों के एक कंप्यूटर अध्ययन द्वारा निर्धारित किया जाता है, और 70% में यह संक्रमण के नैदानिक लक्षणों से आगे है।
एंटीजन डिटेक्शन टेस्ट का नैदानिक मूल्य एस्परजिलसइस घटना में है कि अध्ययन बार-बार किया जाता है। सप्ताह में 2 बार न्यूट्रोपेनिया के रोगियों में व्यापक स्पेक्ट्रम एंटीबायोटिक दवाओं के उपचार के दौरान बुखार के मामले में रक्त में एस्परगिलस एंटीजन का निर्धारण किया जाना चाहिए; निमोनिया के साथ जो एंटीबायोटिक चिकित्सा की पृष्ठभूमि के खिलाफ होता है या बना रहता है; जब फेफड़े के ऊतकों (कंप्यूटेड टोमोग्राफी) में फॉसी पाए जाते हैं।
आज तक माइकोसेस के एटियलॉजिकल प्रयोगशाला निदान में मुख्य तरीके शास्त्रीय तरीके हैं, जिसमें सामग्री की माइक्रोस्कोपी, इसके बाद की पहचान के साथ रोगज़नक़ की शुद्ध संस्कृति का अलगाव शामिल है। इम्यूनोलॉजिकल डायग्नोस्टिक तरीके माध्यमिक महत्व के हैं। उनका उपयोग सबसे महत्वपूर्ण रोगजनकों की पहचान करने के लिए किया जाता है: रोगजनक डिमॉर्फिक कवक, साथ ही क्रिप्टोकॉकोसिस, कैंडिडिआसिस और एस्परगिलोसिस के प्रेरक एजेंट। जीन संकेत के तरीके (पोलीमरेज़ चेन रिएक्शन) में भी उनकी विशिष्टता की कमी के कारण सीमित अनुप्रयोग हैं, लेकिन मुख्य रूप से गहरे और अवसरवादी मायकोसेस के निदान में उपयोग किया जाता है।
रोग के रूप के आधार पर माइकोसेस के प्रयोगशाला निदान में अनुसंधान के लिए सामग्री हो सकती है: त्वचा और उसके उपांग (बाल, नाखून), घावों और नालव्रणों का निर्वहन, थूक, रक्त, मस्तिष्कमेरु द्रव और मूत्र, ऊतक बायोप्सी। पैथोलॉजिकल सामग्री लेने की सटीकता काफी हद तक आगे के प्रयोगशाला अनुसंधान की प्रभावशीलता से निर्धारित होती है। त्वचा के घावों के मामले में, सामग्री को अक्सर ताजा से उपचार से पहले चिपकने वाली टेप (मुख्य रूप से सतही रूपों के लिए) को स्क्रैप या उपयोग करके चुना जाता है, लेकिन परिधि के साथ पूरी तरह से विकसित फॉसी, जहां सबसे व्यवहार्य रोगजनक स्थित होते हैं।
डर्माटोफाइट कवक का पता लगाते समय, बाल एक अत्यंत जानकारीपूर्ण सामग्री है, क्योंकि बालों के घाव की प्रकृति रोगज़नक़ की पहचान करना संभव बनाती है। कुछ मामलों में, लकड़ी के दीपक का उपयोग घाव के फोकस को निर्धारित करने में मदद करता है। प्रभावित बाल, तराजू के साथ, एपिलेशन चिमटी के साथ हटा दिए जाते हैं। क्रोनिक ब्लैक-पॉइंट ट्राइकोफाइटोसिस में, त्वचा से बालों को एक विदारक सुई से हटा दिया जाता है।
सभी परतों के साथ नाखूनों को ले जाया जाता है, एक तेज स्केलपेल या कैंची से काट दिया जाता है। दंत ड्रिल का उपयोग करके चयन अधिक कुशल है। कैंडिडिआसिस घावों के मामले में, सामग्री का चयन नाखून रोलर से स्क्रैप करके किया जाता है। बाहरी माइक्रोफ्लोरा के साथ सूखने और संदूषण से बचने के लिए चयनित सामग्री को गहरे रंग के पेपर बैग में प्रयोगशाला में पहुंचाया जाता है। मवाद युक्त सामग्री बाँझ जीवाणु प्रिंट या पेट्री डिश में वितरित की जाती है। थूक एक बाँझ कंटेनर में एकत्र किया जाता है। थूक की जांच संग्रह के 2 घंटे बाद नहीं की जानी चाहिए। जब अध्ययन की अवधि बढ़ा दी जाती है, तो नमूनों को + 4 डिग्री सेल्सियस पर एक रेफ्रिजरेटर में संग्रहित किया जाना चाहिए, अन्यथा खमीर कोशिकाओं के स्यूडोमाइसेलियल रूपों की उपस्थिति से जुड़ी नैदानिक त्रुटियां हो सकती हैं।
रक्त और मस्तिष्कमेरु द्रव को असमान रूप से एकत्र किया जाता है। सबौराड के तरल माध्यम में रक्त की बुवाई की जाती है। रक्त के नमूनों के संदूषण को बाहर करने के लिए, उनकी पुन: जांच की जाती है। मस्तिष्कमेरु द्रव को अपकेंद्रित किया जाता है, और तलछट का उपयोग माइक्रोस्कोपी और टीकाकरण के लिए किया जाता है।
सुबह एक बाँझ कंटेनर में मूत्र एकत्र किया जाता है, जबकि पेरिनेम की त्वचा के माइक्रोफ्लोरा द्वारा सामग्री के संदूषण से बचने के लिए आवश्यक है। मात्रात्मक संस्कृति विधियों का उपयोग करके मूत्र संवर्धन किया जाता है।
मायकोसेस के निदान में, देशी सामग्री और दाग दोनों से तैयारी का उपयोग किया जाता है। बिना दाग वाली तैयारियों की जांच करते समय, सघन सामग्री को 10-30% KOH समाधान (डाइमिथाइल सल्फ़ोक्साइड के घोल का उपयोग किया जा सकता है) के साथ प्रारंभिक रूप से स्पष्ट किया जाता है, और फिर "कुचल ड्रॉप" विधि का उपयोग करके सूक्ष्मदर्शी किया जाता है। इसके विपरीत जोड़ने के लिए, तैयारियों को मेथिलीन ब्लू के जलीय घोल से दाग दिया जाता है।
निश्चित स्मीयरों का धुंधलापन विभिन्न तरीकों से किया जाता है: ग्राम के अनुसार, मेथिलीन नीला, रोमनोवस्की के अनुसार - गिमेसा। बाद की विधि आपको छोटी खमीर कोशिकाओं और फागोसाइटोसिस के चरणों को देखने की अनुमति देती है। क्रिप्टोकोकी के लिए, स्याही के दाग, साउथगेट म्यूसीकारमाइन दाग का उपयोग करें। मेलेनिन युक्त मशरूम (गहरे रंग का), उदाहरण के लिए क्लैडोफिलोफोरा बंडाना, मास द्वारा सना हुआ - फोंटाना (मेलेनिन का रंग, जो कोशिका भित्ति का हिस्सा है)। प्रतिदीप्त सेरा का उपयोग डीप मायकोसेस के रोगजनकों, डर्माटोफाइटिस के रोगजनकों, जीनस के कवक के निदान में किया जाता है। कैंडिडा।
रोगज़नक़ की एक शुद्ध संस्कृति का अलगाव कवक के सामान्य और प्रजातियों की संबद्धता को स्थापित करना, इसके गुणों और रोगाणुरोधी दवाओं के प्रति संवेदनशीलता का अध्ययन करना संभव बनाता है। कवक के अलगाव और पहचान के लिए, सबौराड के घने और तरल संस्कृति मीडिया, वोर्ट-अगार का उपयोग किया जाता है। ये वातावरण अधिकांश रोगजनक और अवसरवादी कवक की वृद्धि प्रदान करते हैं। इसके अलावा, सबौराड पर्यावरण (चित्र। 8.2) कवक में वर्णक गठन की प्रक्रियाओं को उत्तेजित करता है, जो पहचान के लिए महत्वपूर्ण है।
दूषित बैक्टीरिया के विकास को दबाने के लिए, एंटीबायोटिक्स को मीडिया में जोड़ा जाता है: क्लोरैम्फेनिकॉल, स्ट्रेप्टोमाइसिन, पेनिसिलिन, टेट्रासाइक्लिन। सनकी रोगजनक कवक के अलगाव के लिए, रक्त से समृद्ध मीडिया और सेरेब्रल हार्ट एक्सट्रैक्ट का उपयोग किया जाता है। कवक की खेती और पहचान के लिए विशेष मीडिया का उपयोग किया जाता है: Czapek का माध्यम - मोल्ड की पहचान करते समय कोनिडिया के गठन के लिए, आलू (आलू-गाजर) अगर, चावल अगर - विकास के प्रकारों की पहचान करने और क्लैमाइडोस्पोर प्राप्त करने के लिए जीनस के कवक की पहचान करते समय कैंडीडा, गाजर (सब्जी) अगर - विशिष्ट कवक संस्कृति कालोनियों को प्राप्त करने के लिए ट्राइकोफाइटन शोनेलिनी,काश्किन माध्यम - वर्णक बनाने वाले कवक के अलगाव के लिए। डिफरेंशियल डायग्नोस्टिक वातावरण का भी उपयोग किया जाता है, उदाहरण के लिए, सी की पहचान करने के लिए। अल्बिकन्स -क्रोमोजेनिक मीडिया या मीडिया जो आपको कवक की फॉस्फोलिपेज़ गतिविधि को निर्धारित करने की अनुमति देता है।
मशरूम का ऊष्मायन समय कई दिनों से लेकर 1 महीने या उससे अधिक तक होता है। यदि रोगजनक डिमॉर्फिक कवक का संदेह है, तो नकारात्मक प्रतिक्रिया देने के लिए 8 सप्ताह तक खेती की जाती है।
टेस्ट ट्यूब, शीशियों और पेट्री डिश में डाले गए मीडिया पर टीकाकरण किया जाता है। डर्माटोफाइट कवक पर सामग्री का टीकाकरण माध्यम के साथ कई ट्यूबों पर एक साथ किया जाता है। जिन सामग्रियों में फफूंदी (थूक) होने का संदेह होता है, उन्हें 3 बिंदुओं पर टीका लगाया जाता है और 28 और 37 डिग्री सेल्सियस पर इनक्यूबेट किया जाता है। सामग्री के नमूने के दौरान संदूषण की अनुपस्थिति के मुद्दे को हल करने के लिए, प्रयोगशाला परिसर और वार्ड जहां रोगी स्थित हैं, में मोल्ड की सामग्री के लिए नियंत्रण वायु संस्कृतियों को किया जाता है।
माइकोलॉजिकल प्रयोगशाला में कवक की खेती करते समय, बैक्टीरियोलॉजिकल प्रयोगशालाओं के समान सुरक्षा उपायों का पालन किया जाता है। एलर्जी से बचने के लिए, कार्मिक बॉक्सिंग रूम में धुंध पट्टियों में या हुड के साथ टेबल बॉक्स में मोल्ड और मायकोटॉक्सिन के साथ काम करते हैं। रोगजनकता के द्वितीय समूह (रोगजनक डिमॉर्फिक कवक) से संबंधित संस्कृतियों के साथ काम केवल विशेष प्रयोगशालाओं में ही संभव है।
कवक प्रजातियों की पहचान सांस्कृतिक, रूपात्मक और अन्य विशेषताओं के एक परिसर के आधार पर की जाती है। पहले में कॉलोनी की आकृति विज्ञान, उसका रंग और आकार जब विशेष मीडिया पर खेती की जाती है, किनारे और केंद्र की संरचना, सतह की प्रकृति, प्रजनन अंगों की उपस्थिति और प्रकृति, दूसरी - सूक्ष्म की विशेषताएं शामिल हैं मायसेलियम की संरचना, प्रजनन अंगों की संरचना, आकार और आकार - कोनिडियोफोर्स, कोनिडिया, क्लैमाइडोस्पोर, आर्थ्रोस्पोर, आदि।
कवक ठोस पोषक माध्यम पर विभिन्न प्रकार के उपनिवेश बनाते हैं। जी। वेंटर इंस्टीट्यूट (यूएसए) के वैज्ञानिकों ने, वर्णक पदार्थों को माध्यम में छोड़ने की कवक की क्षमता को ध्यान में रखते हुए, पोषक माध्यम में एक "क्रिसमस ट्री" बनाया (चित्र। 8.3)।
चावल। 8.3. मशरूम का "क्रिसमस ट्री" (शीर्ष: टैलारोमाइसेस स्टिपिटेटस; लकड़ी एस्परगिलस निडुलन्स;सजावट: पेनिसिलियम मार्नेफी;स्टंप: एस्परगिलस टेरियस)
खमीर (खमीर जैसी कवक) की पहचान में संस्कृतियों की एंजाइमेटिक और आत्मसात करने की क्षमता का बहुत महत्व है। वर्तमान में, वाणिज्यिक परीक्षण प्रणालियों का उपयोग सामान्य कवक की पहचान करने के लिए किया जाता है - मानव और पशु रोगों के प्रेरक एजेंट: बीबीएल मायकोट्यूब, एपीआई 20 सी बायो मेरियक्स, आदि।
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