Biopsziás anyag immunhisztokémiai vizsgálata. Igh kutatás. Felkészülés a kutatásra

[12-027 ] Klinikai anyag immunhisztokémiai vizsgálata (1 antitest felhasználásával)

3300 RUB

Rendelni

A szöveti sejtek tanulmányozása, amelyet speciális reagensekkel végeznek.

Szinonimák orosz

IHC, immunhisztokémia, immunhisztokémiai elemzés.

angol szinonimák

Immunhisztokémia, IHC, immunhisztokémiai elemzés.

Kutatási módszer

Immunhisztokémiai módszer.

Milyen bioanyag használható kutatáshoz?

Szövetminta / szövetminta paraffin blokkban.

Hogyan kell megfelelően felkészülni a tanulásra?

Nincs szükség speciális képzésre.

Általános információk a tanulmányról

A klinikai anyag immunhisztokémiai vizsgálatát végezzük a benne lévő kívánt anyagok azonosítása érdekében. A kész szövettani preparátumokat speciális reagensekkel dolgozzák fel, amelyek a kimutatandó anyag ellen jelölt specifikus antitesteket tartalmaznak, amelyek ebben a helyzetben antigénként szolgálnak. Ha a kívánt anyag a vizsgált anyagban van, akkor az antitest kötődik annak meghatározott területeihez. Ennek eredményeként komplex képződik közöttük, és a szövet megfestődik.

Ezt a módszert különféle kóros állapotok diagnosztizálására alkalmazzák, szerepe különösen nagy az onkológia területén. Az immunhisztokémiai (IHC) kutatás nemcsak a daganat diagnosztizálásában, annak nozológiai változatának meghatározásában, a primer tumorfókusz azonosításában és a sejtek rákos degenerációjának kimutatásában segít, hanem a betegség lefolyásának és a betegség sikerének előrejelzésében is. kezelés. A prognózist befolyásoló tényezők közé tartoznak az ösztrogén és a progeszteron receptorai, a Ki-67 (a tumoraktivitás markere), a her-2 neu (epidermális növekedési faktor, meghatározza a daganat érzékenységét a trastuzumab / herceptin kemoterápiás gyógyszerre), VEGF (vascularis növekedés). faktor), Bcl-2, p53 stb. Az immunhisztokémiai elemzéssel ellentétben rutin szövettani vizsgálattal nem határozhatók meg.

Ez a módszer a szisztémás kötőszöveti betegségek és vesebetegségek diagnosztizálásában is alkalmazható, lehetővé teszi baktériumok és vírusok kimutatását a vizsgált szövetekben, például Epstein-Barr vírus, papilloma vírus, Helicobacter Pylori krónikus gyomorhurut), mikobaktériumok a tuberkulózis diagnosztikájában stb.

Az IHC elemzése alapján az orvos pozitív és negatív markereket tartalmazó következtetést kap, és ez segít megerősíteni vagy megcáfolni más klinikai és laboratóriumi vizsgálatok hipotézisét.

A méhnyakrák az egyik leggyakoribb rákbetegség a nők körében. Epidemiológiai és laboratóriumi adatok megerősítik a humán papilloma vírus (HPV, HPV) kiváltó ágens szerepét a nyaki nyálkahártya epitheliumának rákmegelőző és rosszindulatú elváltozásainak túlnyomó többségében. Ebben az esetben a HPV DNS az esetek 95-100%-ában kimutatható.

A humán papillomavírus a Papillomaviridae családba tartozó kisméretű, körkörös, kétszálú dezoxiribonukleinsav (DNS) vírus. A HPV-nek több mint 130 típusa ismert. A méhnyakkarcinómával való kapcsolatuk alapján kockázati fokuk szerint osztályozzák őket. A HPV 16 és 18 a leggyakoribb magas kockázatú típusok. A hámsejtekbe jutva a vírus génhibákat okoz bennük, ezáltal hozzájárul a daganat kialakulásához. Az IHG segítségével a HPV által érintett sejtekben könnyen kimutatható a p16 és p18 fehérjék expressziója, pozitivitásuk erősen korrelál a HPV pozitivitásával. Ez segít megkülönböztetni a nem neoplasztikus diszpláziát (gyulladás következtében) és a neoplasztikus (a papillomavírus okozta és rákosodni képes) diszpláziát, valamint lehetővé teszi a közepesen súlyos vagy súlyos diszplázia (CIN II / III) differenciáldiagnózisát. a méhnyakrák korai formái, az invazív karcinóma progressziójára és kialakulására hajlamos elváltozások kimutatása. Közepes-nagy fokú diszpláziákban (a CIN II esetek 80-100%-ában, CIN III szinte minden esetben) és invazív méhnyakrákban a p16 fehérje fokozott expressziója állapítható meg, amely a lézió súlyosságának növekedésével fokozódik.

Azoknál a nőknél, akiknél alacsony súlyosságú laphám intraepiteliális elváltozások vannak, a fokális és diffúz expresszió a betegség progresszióját jelzi. A p16 hiánya vagy fokális expressziója nagyfokú léziókban további jele lehet a kóros folyamat kedvező lefolyásának.

A differenciáldiagnózishoz immunhisztokémiai vizsgálatot is alkalmaznak.

A cöliákia olyan szisztémás betegség, amelyet a glutén vagy a gabonamagvakban található megfelelő prolaminok genetikai intoleranciája okoz. Ezt a patológiát a vékonybél nyálkahártyájának károsodása (atrófiás enteropátia kialakulása), specifikus antitestek megjelenése a vérszérumban és a gluténfüggő klinikai megnyilvánulások széles skálája jellemzi. A betegség kétszer gyakrabban fordul elő nőknél, mint férfiaknál, és először gyermekkorban és felnőttkorban is megjelenhet. A cöliákia kifejezett vagy elmosódott klinikai képpel, valamint gasztroenterológiai tünetek nélkül jelentkezhet. Leggyakrabban a betegség lefolyásának egy törölt változata van, ezért a cöliákia (GE) diagnózisa nehéz.
Az elsődleges laboratóriumi szakaszban szerológiai vizsgálatot végeznek, amely meghatározza a vérben lévő specifikus biomarkereket. A pozitív eredménnyel rendelkező egyéneknél a vékonybél endoszkópiáját biopsziával, majd a vett anyag szövettani és IHC elemzésével együtt mutatják be.

Ismeretes, hogy a cöliákia a vékonybél hámsejtjeiben a limfociták számának növekedésével jár együtt. Ugyanakkor jellegzetessége, hogy az intraepiteliális limfociták (IEL) többsége specifikus T-sejt receptort (CD3 γ és CD3δ-pozitív sejteket) hordoz a felszínén. Minél aktívabb a betegség előrehaladása, annál nagyobb az IEL. Ezt a funkciót immunhisztokémiai vizsgálat során használják a limfociták domináns típusának meghatározására. Ez az elemzés különösen fontos, ha eltérés van a szerológiai adatok és a szövettani értékelés között a standard helyeken.

Mire használják a kutatást?

A daganat típusának és alfajának, rosszindulatúságának mértékének és az onkológiai folyamat prevalenciájának meghatározása;
proliferatív betegségek differenciáldiagnosztikájára;
a sejtekben változásokat okozó etiológiai tényező meghatározása;
a hatékony terápia kiválasztásához;
a tumorsejtek proliferatív aktivitásának felmérésére;
a kezelés hatékonyságának felmérése;
rák (például mellrák, prosztatarák) receptorstátuszának diagnosztizálására;
a daganat elsődleges fókuszának meghatározása;
azonosítani az érintett sejtek rosszindulatú potenciálját;
a betegek elsődleges kiválasztásához rendelői regisztrációhoz és további vizsgálatokhoz;

Mikorra tervezik a vizsgálatot?

A diszplázia (magas és közepes) és a méhnyakrák kezdeti stádiumának differenciáldiagnózisában;
mell-, gyomor-, prosztatarák esetén a különböző típusú terápia iránti érzékenység meghatározása érdekében;
a rosszindulatú daganat mértékének meghatározásában és a betegség prognózisának értékelésében;
a terápia hatékonyságának értékelése során;
amikor metasztázisok forrását keresik;
gasztrointesztinális stromadaganatok (GIST) diagnosztizálásában antitestek kiterjesztett paneljének felhasználásával, beleértve a DOG1-et is;
neuroendokrin daganatok diagnosztizálásában;
a cöliákia differenciáldiagnózisában, tisztázatlan szövettani képpel kísérve;
ha eltérés van a szerológiai vizsgálat és a szövettani vizsgálat eredménye között.

Mit jelentenek az eredmények?

Referencia értékek

Az értékek tartománya minden egyes betegség esetében egyedi, a használt antitestektől függően.

A vizsgálati eredmények dekódolása információkat tartalmaz a kezelőorvos számára, és nem diagnózis.

Elvégzik a gyógyszer morfológiai értékelését (a daganatokat a WHO szerint osztályozzák), leíró választ adnak, jelezve az antitest-expresszió értékelését. Az IHG-t mindig a morfológiai vizsgálat kiegészítéseként kell alkalmazni, és nem szabad elszigetelten értelmezni.

Mi befolyásolhatja az eredményt?

Egyes betegségekben vannak olyan tényezők, amelyek befolyásolhatják az eredményt. Például a cöliákia diagnosztizálása során a gluténmentes diéta felírása a vizsgálat előtt hamis negatív eredményhez vezethet.

Jelenleg számos onkológiai betegség magas színvonalú diagnosztizálása lehetetlen immunhisztokémiai vizsgálat nélkül. Ez egy rendkívül pontos és informatív módszer, amely nemcsak a daganat azonosítását, hanem az optimális kezelési taktika kidolgozását is lehetővé teszi.

Az IHC-t nyirokrendszeri rákos megbetegedések esetén kell felírni, amikor a nyirokcsomók vagy a belső szervek érintettek

IHC kutatás - mi ez?

Az IHC a patológiás anatómiában a rákos és jóindulatú daganatok diagnosztizálására használt technika. Akkor írják elő, ha standard szövettani módszerrel nem lehet pontos diagnózist felállítani, vagy ha molekuláris szinten részletezni kell a daganatok klinikailag jelentős paramétereit.

Nagyon gyakran a szövettan nem elegendő. Ennek oka a legtöbb esetben a kóros formáció rendkívül atipikus felépítése, ami jelentősen megnehezíti a pontos diagnózis felállítását. Különösen limfóma és leukémia esetén az IHC szinte mindig megtörténik.

Meg kell jegyezni, hogy összesen mintegy 70 típusú leukémia és limfóma létezik. Némelyikük igazolása csak több – szövettani, immunhisztokémiai és molekuláris genetikai – vizsgálattal lehetséges.

Egy másik diagnózis - "kis kerek sejtes daganat" - 13 eltérő lefolyású és prognózisú rosszindulatú daganatot jelenthet. Ezenkívül mindegyikük speciális kemoterápia és sugárterápia kidolgozását igényli. Az ilyen daganatok megkülönböztetését az egyetlen módszer - az immunhisztokémia - segíti.

A technika lényege

Bármilyen daganatos folyamat kialakulásával a szervezet számára idegen fehérjék - antigének - képződnek, ezzel szemben az emberi immunrendszer antitesteket - immunglobulinokat - termel. Antigénekhez kötődnek és epitópokhoz – az antigén makromolekulák fő részeihez – kötődnek. Az antitestek két funkciót látnak el egyszerre: kötő és effektor. Egyszerűen fogalmazva, közvetlenül zavarják az antigéneket, hogy károsítsák, és egyidejűleg aktiválják a komplementet, immunválaszt váltva ki.

Az antigének szerepe ebben az esetben az atipikus daganatsejteké. Az immunhisztokémiai vizsgálat elvégzése előtt a biometár részeit specifikus antitestekkel jelölik meg. A további megjelenítés érdekében ezeket az antitesteket enzimekkel festik meg. Ezután nagy pontosságú optika segítségével megfigyeljük a vizsgált cellák viselkedését.

Ha az antitestként megjelölt fehérjevegyületek kötődnek a daganatsejtekhez, akkor a kívánt anyagok jelenlétére utaló fény – fluoreszcencia – látható. Így azonosítják például a hormonreceptorokat és a tumormarkereket. Ha az emlőrák gyanúja merül fel, az ösztrogén és a progeszteron receptorait észlelik.

Ki látható

Az immunhisztokémia kijelölésének fő jelzése a rosszindulatú daganatok. Az onkológiában ezt a módszert használják áttétek és kóros mikroorganizmusok felkutatására, a daganat típusának és helyének meghatározására, valamint a kóros folyamat aktivitásának felmérésére. Az IHC segítségével bőrrák (melanoma), szarkóma, limfogranulomatózis, limfocitás leukémia és leukémia esetén a végső, vagy ritkábban köztes diagnózis felállítható, a folyamat rosszindulatúságának mértéke tipizálható. Ez utóbbi rendkívül fontos a neuroendokrin képződményekben, amelyeket "rejtett gyilkosoknak" is neveznek, mivel nagyon nehéz felismerni őket a korai szakaszban.

Immunhisztokémiát gyakran végeznek a mérgező gyógyszerekkel történő agresszív kezelés elkerülése érdekében

Bizonyos esetekben az immunhisztokémiai elemzés lehetővé teszi a metasztázisok forrásának megállapítását, ha az elsődleges fókusz lokalizációja nem ismert, valamint differenciáldiagnosztikát több különböző eredetű daganat esetében.

Az IHC felírható meddőségre, az endometrium, a méh és a petefészkek krónikus patológiáira, valamint a visszatérő vetélésekre. Akkor is célszerű megtenni, ha több IVF eljárás után sem következik be terhesség.

Az immunhisztokémia segít kimutatni a fogantatást megakadályozó sejtek jelenlétét, és meghatározza a meddőség kezelésének további taktikáját.

Az immunhisztokémiai (IHC) vizsgálat egy módszer a rosszindulatú daganatok specifikus antigén tulajdonságainak azonosítására. Egy adott sejt- vagy szöveti komponens (antigén) lokalizációjának in situ azonosítására szolgál, jelölt antitestekhez kötve, és a modern rákdiagnosztika szerves részét képezik, lehetővé téve a különböző sejtek, hormonok és receptoraik szövetekben történő lokalizációjának kimutatását, enzimek, immunglobulinok, sejtkomponensek stb. egyedi gének.

Az IHC vizsgálat céljai

Az IHC vizsgálatok lehetővé teszik:

1) elvégzi a daganatok hisztogenetikai diagnózisát;

2) meghatározza a neoplazma nozológiai változatát;

3) ismeretlen elsődleges fókuszú elsődleges daganat azonosítása metasztázissal;

4) meghatározza a daganatos betegség prognózisát;

5) meghatározza a sejtek rosszindulatú átalakulását;

6) azonosítani a lehetőségeket;

7) a daganatsejtek kemoterápiás gyógyszerekkel szembeni rezisztenciájának és érzékenységének azonosítása;

8) a daganatsejtek sugárterápiával szembeni érzékenységének meghatározása.

Hogyan zajlik az IHC kutatás?

Az IHC-kutatás az anyaggyűjtéssel kezdődik. Ehhez elvégzik, amelyben a daganatból és a közeli szövetekből szövetoszlopot vesznek, vagy az anyag a műtétből származik. Ezután az anyagot rögzítik. A rögzítés után az anyagot a vezetékekhez küldik, ami lehetővé teszi a munkára való felkészítést (zsírtalanítás és további rögzítés). Passzázs után az összes mintát paraffinba ágyazzuk, így szövettani blokkokat kapunk. A paraffin blokkok örökre eltárolódnak, ezért az IHC-kutatás már korábban elkészített paraffinblokkok jelenlétében is elvégezhető.

Az IHC-vizsgálat következő szakasza a mikrotómia - egy laboráns legfeljebb 1,0 μm vastagságú paraffintömbökből metszeteket készít, és speciális szövettani tárgylemezekre helyezi őket.

Ezután a rutinfestést és az immunhisztokémiai kutatásokat szekvenciálisan végezzük, lehetővé téve az egyes szakaszokban a daganat fenotípusának és nozológiájának egyre jobban megkülönböztetését.

Amint látja, az IHC-vizsgálat összetett többlépcsős folyamat, ezért az IHC-vizsgálathoz a legmodernebb laboratóriumot kell kiválasztani, magasan képzett szakemberekkel és magas fokú automatizálással - így minimalizálja az elszegényedés kockázatát. - minőségi diagnosztika. Ma ilyen laboratórium az UNIM.

Külön meg kell említeni a tanulmány időzítését. Oroszországban átlagosan az IHC-kutatást 10 naptól több hétig terjedő időtartamban végzik. Ha kapcsolatba lép az UNIM-mel, mindössze 3 nap alatt elvégezheti az IHC-vizsgálatot! Ezenkívül az UNIM-ben végzett IHC-kutatás előnye, hogy Oroszország bármely városából származó kutatási anyagokat kínál. Ha szükséges, adja meg a költségeket kutatási kérelem benyújtásával, vagy hívja a forródrótot (Oroszországban ingyenes): 8 800 555 92 67.

Kezdjük azzal, hogy megvizsgáljuk, mi az immunhisztokémiai vizsgálat. A szövetek mikroszkópos vizsgálatát jelenti, amely a kóros anyagok elleni antitestek kimutatásán alapul.

Két kutatási módszer létezik:

közvetlen (az antitestek közvetlen reakciója közvetlenül egy kóros anyagra);
indirekt módszer (a kóros anyagokat másodlagos antitestek segítségével ismerik fel).

Jelölési módok:

Az enzimek fehérjemolekulák, egyben RNS-molekulák is. Például: alkalikus foszfatáz (hidroláz enzim);
fluoreszcens - ugyanaz a fizikai folyamat, például - a fluoreszcein szerves vegyület;
elektronsűrű részecskék, például arany.

Használt:

szekréciós folyamatok tanulmányozása és kutatása, beleértve a szintetikus folyamatokat is;
a hormonreceptorok felismerése;
különböző sejttípusok, -nemzetségek azonosítása tulajdonságaik alapján.

Mire használják az immunhisztokémiát emlőrákban?

Az emlőkutatás területén ezt a vizsgálatot előzetes diagnózisként használják a pontos diagnózis felállítására, beleértve a rosszindulatú daganatokat is. Ez a tanulmány lehetővé teszi a következők meghatározását:

Pontos elváltozás (jó- vagy rosszindulatú) és megfelelő kezelés.
A pontos hely (metasztázisok jelenléte a szervezetben és diszlokációjuk).
A betegség kezdeti fókusza.
A betegség stádiuma (például a rák mértéke).
Sejtburjánzás (a rákos sejtek szaporodási és fejlődési sebességének felismerésére).
A rákos sejtek gyógyszerre adott válasza, érzékenysége nyomon követheti a kemoterápiával, sugárterápiával szembeni érzékenységet is.

A tanulmány képes részletesen tanulmányozni a betegséget, ami lehetővé teszi a betegség teljes diagnosztizálását és a megfelelő kezelés kiválasztását. Ez fontos szerepet játszik a daganatos betegek diagnózisában, kezelésében, várható élettartamában. Azt is mondhatja, hogy ezzel a módszerrel:

Kutatási indikációk

Alapvetően ezt a diagnózist az emberi test bármely szövetének tanulmányozására (kutatására) használják. Ennek a vizsgálatnak az alapja minden olyan daganat, amely rák kialakulására utal. A vizsgálatot az endometrium tanulmányozására is végezzük:

metasztázisokkal;
meddőséggel;
sikertelen IVF-kísérletek után;
a méh különböző betegségeivel;
a kismedencei szervek különböző típusú patológiáival;
állandó vetéléssel;
endometrium betegséggel.

A vizsgálatnak nincs abszolút ellenjavallata. Az IHC akadályozása csak az lehet, hogy bármilyen okból nem lehet kutatási anyagot venni.

Hogyan működik a kutatás

Az ilyen típusú kutatásokat csak speciális laboratóriumokban lehet végezni, miközben az orvosnak speciális képesítéssel és speciális képzésen kell részt vennie.

A mintavétel közvetlenül a bőr érintett területén történik biopsziával. Az anyaggyűjtés az emlőmirigyen végzett műtét során is előfordulhat.

Ezután a kapott anyagot speciálisan feldolgozzák és tartósítják. Ehhez paraffinnal töltik fel. Ebben a formában, paraffinban, az anyag hosszú ideig megfelelően tárolható.

A következő lépés a mikrotómia. Az anyagot speciális berendezéssel vékony rétegekre vágják.

A jövőben a szeletelt rétegeket bizonyos antitestekkel megfestik, és mindezt mikroszkóp alatt vizsgálják. Egyes laboratóriumokban a festett anyagot automata készüléken tanulmányozzák.

IHG Endometrium

Javallatok:

két vagy három sikertelen IVF-eljárás;
nem az első (tartós) korai vetélés;
meddőség.

A vizsgálat során olyan betegségek fordulnak elő, mint:

endometritis,
hiperplázia,
az endometrium nem teljes átalakulása,
a fejlődési fázisok megsértése
és egyéb betegségek.

A gyakorlat azt mutatja, hogy az endometriumhoz kapcsolódó betegségek 73%-ban okozzák a meddőséget.

Felkészülés a kutatásra

Ezt a vizsgálatot a menstruációs ciklus egy bizonyos napján, általában az 5-7. napon végzik, megvizsgálják az endometrium gyulladásos folyamatait, a ciklus 20-24. napján felmérik a váladékot, megnézik a receptor funkció.

ne vegyen be hormonokat egy héttel a vizsgálat előtt;
ne vegyen be hemosztatikus gyógyszereket;
megfelelő intim higiénia.

Milyen az eljárás

Az eljárás nőgyógyászati széken történik. A nőt speciális gyógyszerekkel elaltatják, tükröt helyeznek be. Megtörténik a nemi szervek átszervezése. Egy speciális eszközt vezetnek be - hiszteroszkóp rendszert és kerítést hajtanak végre. Ezután az eszközt eltávolítják, és végrehajtják a szervek átszervezését.

Ezután a nő orvos felügyelete alatt áll a teljes gyógyulásig, körülbelül 1-2 óráig.

Az eredmények elkészítése körülbelül 3-5 napot vesz igénybe. Csak szakember tudja értékelni az eredményeket.

Mell IHG eredmények

Mit határoz meg az elemzés:

HER2neu vagy más szóval az emberi epidermális növekedési faktor receptor. Felelős a fehérjetermelésért. Ha a rákos sejtek károsodnak, a rendellenes növekedés fokozódik.

Ha az eredményt 1 (+) értékkel írjuk, akkor ez azt jelzi, hogy nincs fehérjefelesleg, a következmény az, hogy a daganat rossz állapotban van.

2 (++) esetén általában egy második vizsgálatot írnak elő.

3-nál (+++) pozitív daganatnak számít, amelyet általában gyógyszeres kezeléssel kezelnek.

Az ER uPR ez a típusú hormon serkenti a kóros szövetek növekedését. Ha ezek a mutatók megemelkednek, akkor ez a helyes kezelést jelzi, hogy a daganat reagál a hormonterápiára. Ezért, ha ezeket a mutatókat csökkentik, akkor a gyógyszerek rossz kiválasztásáról beszélhetünk. A daganat tovább fejlődik.

Ki - 67, ezen mutató szerint értékelik a daganat stádiumát és jellemzőit. Ha az eredmény függő számokat ad, akkor ez a betegség gyors lefolyását, a metasztázisok jelenlétét jelzi, és sajnos egyáltalán nem jó prognózist. Ezt az eredményt százalékban jegyezzük fel. Például:

11% - elég jó prognózis (gyógyulás 93%);
21% - 50-50% -ként beszélünk róla, minden az emberi testtől függ;
minden mutató 30% -ra - súlyos stádiumnak értékelve - erősen agresszív;
90% - gyógyíthatatlan, halálhoz vezet.

Ezenkívül ez az index segít meghatározni a kezelés kiválasztását.

A p53 gén segít megelőzni a kóros szövetek növekedését. Ez a gén akadályozza a betegségeket. A betegség kialakulásához génmutációt használnak, például öröklődést vagy a fehérjemátrix megsértését.

A VEGF egy fehérje, amelynek feladata a szövetek létfontosságú tevékenységének szabályozása elégtelen vérkeringés esetén. Ennek a fehérjének a magas szintje a daganatszövet növekedését jelzi a „jó” szövettáplálkozás eredményeként.

Főleg 4 típusú rák létezik:

Luminális A - ugyanakkor: a receptorok pozitívak a női hormonokra, negatívak a HER2-re, a ki- indikátor 65-13%-kal kisebb.
Luminális B - ugyanakkor: a receptorok pozitívak a női hormonokra, negatívak a HER2-re, a ki-indikátor 65-15%-kal kisebb.
Erb - B2 - ugyanakkor: a receptorok reakciója a progeszteronra (ösztrogénre) negatív, a HER2-re - pozitív.
Basal-szerű - negatív minden kategóriában.

PD-1, PDL-1 és PDL-2 fehérjék expressziójának meghatározása

Úgy gondolják, hogy a PD-1, PDL-1 és PDL-2 felelős magáért a daganatért. De előfordulhat, hogy nem minden patológiás szövetben jelen vannak. Annak érdekében, hogy pontosan meghatározzák és előírják a helyes terápiát minden olyan beteg számára, akinél közvetlenül immunterápia szükséges, olyan vizsgálatot végeznek, mint a PD-1, PDL-1 és PDL-2 fehérjék expressziója.

Ezt a vizsgálatot FISH fluoreszcens hibridizációval végezzük. Az expresszió jelenléte következtében immunterápiát írnak elő olyan gyógyszerekkel, mint: Nivolumab, Atezolizumab, Pembrolizumab.

Immunhisztokémiai vizsgálat ára

Az immunhisztokémia egy nagyon összetett vizsgálat, amely többféle tumormarkert használ.

A kutatás költsége az ellenőrzött tényezők számától függ. A kutatás ára 4 ezer rubeltől 20 ezer rubelig kezdődik.

Videó: Immunhisztokémiai vizsgálatok

medik-24.ru

Immunhisztokémiai vizsgálat: dekódolás és a magatartás jellemzői

A rák diagnózisának legfontosabb pontja az immunhisztokémiai vizsgálat. Naponta bejutnak az emberi szervezetbe azok a mikroorganizmusok, amelyek beindíthatják a kóros folyamat kialakulását. A védelem ezt ellensúlyozza azáltal, hogy antitesteket képez. Ez a reakció képezte az IHC-tanulmány megalkotásának alapját.

A módszer lényege

Ez a módszer a rák diagnosztizálására a legmodernebb és legmegbízhatóbb. A daganatos folyamat kialakulása során a szervezet számára idegen fehérjék - antigének - keletkeznek. Ugyanakkor az immunrendszer antitesteket termel, amelyek fő célja a kórokozó mikroorganizmusok szaporodásának megakadályozása.

Az immunhisztokémiai kutatások feladata a rákos sejtek időben történő kimutatása. Ehhez a páciens biológiai anyagát különféle antitestekkel dolgozzák fel, majd mikroszkóp alatt gondosan megvizsgálják. Ha ezek a fehérjevegyületek kötődnek a tumorsejtekhez, láthatóvá válik a fluoreszcenciájuk. A fluoreszcens hatás megjelenése rákos sejtek jelenlétét jelzi a szervezetben.

Napjainkban az IHC-kutatást végző szakembereknek szinte az összes különböző típusú daganat elleni antitest a rendelkezésükre áll, ami a megbízható eredmények megszerzésének kulcsa.

Lehetőségek

A modern típusú diagnosztika lehetővé teszi a következők meghatározását:

a daganatos folyamat terjedése;
a rosszindulatú daganatok növekedési üteme;
a daganat típusa;
metasztázisok forrása;
a rosszindulatú daganatok szintje.

Emellett immunhisztokémiai vizsgálatok segítségével felmérhető a rákkezelés hatékonyságának mértéke.

Javallatok és ellenjavallatok

Ezzel a módszerrel az emberi test bármely szövetét tanulmányozhatjuk. Az immunhisztokémiai vizsgálat kinevezésének fő oka a rosszindulatú daganat jelenlétének gyanúja.

Ebben az esetben a módszert a következőkre használják:

a daganat típusának és lokalizációjának meghatározása;
metasztázisok kimutatása;
a daganatos folyamat aktivitásának felmérése;
patológiás mikroorganizmusok azonosítása.

Ezenkívül az elemzés hatékony a fogantatással kapcsolatos problémák esetén.

Az endometrium immunhisztokémiai vizsgálata a következő esetekben javasolt:

meddőség;
a méh betegségei;
patológiák jelenléte a reproduktív rendszer szerveiben;
vetélés;
az endometrium krónikus betegségei.

Ezenkívül az IHC-vizsgálatot olyan betegek számára írják fel, akik többszöri in vitro megtermékenyítési kísérlet után sem esnek teherbe. A módszer lehetővé teszi annak meghatározását, hogy vannak-e olyan sejtek a szervezetben, amelyek csökkentik a fogantatás valószínűségét.

Az IHC vizsgálatnak nincs ellenjavallata. Az egyetlen tényező, amely lehetetlenné teszi az elemzés elvégzését, az a leküzdhetetlen nehézség a páciens bioanyagának felvételében.

Hogy van

Először is biopsziás módszerrel mintát veszünk a páciens szövetéből. Ritkábban endoszkópos vizsgálat vagy műtét során gyűjtik össze az anyagot. A mintavétel módja a daganat típusától és elhelyezkedésétől függ.

Fontos árnyalat, hogy a kezdeti vizsgálat során az anyagmintavételt a kezelés megkezdése előtt kell elvégezni. Ellenkező esetben a vizsgálat eredményei torzulhatnak.

A bioanyagból mintavétel után formalinba helyezik és a laboratóriumba küldik, ahol a következő feldolgozásnak vetik alá:

A szövetmintát zsírtalanítjuk és paraffinba ágyazzuk. Ebben a formában a biológiai anyag nagyon hosszú ideig tárolható, aminek köszönhetően az IHC vizsgálat megismételhető.
A mintából több vékony metszetet gyűjtenek, és speciális poharakba helyezik át.
Rajtuk a bioanyagot különféle antitestek oldataival festik meg. Ebben a szakaszban egy kis és egy nagy panel is használható. Az első esetben a reakciókat 5 típusú antitest felhasználása után vizsgálják, a másodikban - akár több tucatig.
Bármely szerv rákos megbetegedésének immunhisztokémiai kutatása során fluoreszcens hatás jelenik meg, amely lehetővé teszi a szakember számára a rosszindulatú sejtek típusának meghatározását.

Az eredmények értelmezése

A következtetés általában 7-15 napon belül készen áll. A kifejezés a használt panel típusától függ (kicsi vagy nagy). A fejlett módszer tovább tart.

A bioanyag metszetek vizsgálatát patológus végzi, aki rendelkezik az elemzéshez szükséges ismeretekkel és készségekkel (hivatalos dokumentummal megerősítve).

Az eredmények értelmezésekor különös figyelmet fordítanak a Ki-67 indikátorra. Ő az, aki információt ad a folyamat rosszindulatúságának mértékéről. Például, ha az emlőrák immunhisztokémiai vizsgálata után egy indikátor eredménye nem haladja meg a 15% -ot, akkor a prognózis több mint kedvező. A 30%-os szint a daganatos folyamat aktivitását jelzi, azaz. fejlődésének gyors üteméről. Általában a kemoterápia után megszűnik.

Egyes statisztikák szerint, ha a Ki-67 kevesebb, mint 10%, a betegség kimenetele kedvező lesz (az esetek 95% -ában). A 90%-os vagy annál nagyobb jel majdnem 100%-os halált jelent.

A rosszindulatú daganat indikátora mellett a következtetés a következőket jelzi:

antitestek, amelyekhez hasonlóságot (tropizmust) azonosítottak;
a rákos sejtek típusa, mennyiségi jelentősége.

Fontos megérteni, hogy a pontos diagnózist az összes elvégzett diagnosztikai eljárás során összegyűjtött információk átvétele és tanulmányozása után állítják fel. Annak ellenére, hogy az IHC analízist a szövettanhoz képest a leginformatívabb módszernek tekintik, néha mindkét módszer alkalmazása szükséges. Az immunhisztokémiai vizsgálat dekódolását kizárólag az onkológus végzi.

Végül

A modern orvoslásban különös figyelmet fordítanak a rák diagnosztizálására. A legmodernebb és leginformatívabb módszer az immunhisztokémiai vizsgálat. Segítségével nemcsak a rákos sejtek jelenlétét, hanem azok típusát és a rosszindulatú folyamat fejlődési ütemét is meghatározzák. Ezenkívül az eredményeket felhasználják az előírt kezelés hatékonyságának értékelésére.

fb.ru

Az emlőmirigy IHC-vizsgálata - átirat

Az immunhisztokémiai vizsgálat (IHC) az emlő mirigyszövetének vizsgálatára szolgáló módszer, amelyben speciális reagenssel a sejtek teljes jellemzését kapják:

megállapítja a tumorsejtek eredetét;
határozza meg szerkezetét;
az alapfokú oktatás diagnosztizálása a meglévő metasztázisok alapján;
pontosan kiszámítja a betegség időtartamát, a duzzadt korát;
meghatározza a megfelelő kezelési módszert.

Az emlő IHC elemzését mind onkológiai folyamat gyanúja esetén, mind annak lefolyása során írják elő az elvégzett kemoterápiás kezelés hatékonyságának diagnosztizálására.

Mi teszi lehetővé az IHC meghatározását?

Először is meg kell mondani, hogy az emlőmirigy IHC-vizsgálatának eredményének dekódolásában csak orvosnak kell részt vennie. Csak ő tudja értelmezni az eredményt, teljes mértékben ismerve a betegség lefolyásának jellemzőit.

Az emlőrákban végzett IHC meghatározza a daganat természetét. Az emlőmirigy IHC-je során leggyakrabban a receptorok meghatározását használják:

ösztrogén (ER);
progeszteron (PR).

Megállapítást nyert, hogy az ilyen receptorokat nagy mennyiségben tartalmazó daganat nem agresszíven viselkedik és inaktív. Ennek a formának a kezelésekor a hormonterápia jelentősen hatékony. Az esetek 75%-ában kedvező prognózis.

Az emlőmirigy IHC-analízisének eredményeinek dekódolásakor százalékos mértékegységeket használnak. Ebben az esetben meghatározzuk az expresszióval (érzékenységgel) rendelkező sejtek számának az ösztrogénhez és a progeszteronhoz viszonyított arányát, a tumorsejtek teljes számát. Ebben az esetben az eredmény a festett sejtek és a nem festett sejtmagok számának arányaként jelenik meg, 100 sejtre összesítve.

Tekintettel az ilyen számítások értelmezésük bonyolultságára, az eredmény értékelését kizárólag szakemberek végzik.

Kapcsolódó cikkek:

A mellkas megnagyobbodott és fáj A hormonális ingadozások befolyásolják a nő közérzetét, a hormonszint változása erősen tükröződik a mellekben. Ezután megvitatjuk, miért nőhetnek meg hirtelen a mellek és miért fájhatnak.	A mell rendkívül érzékeny a szervezetben előforduló bármilyen hormonális ingadozásra, és elsőként reagál szokatlan érzésekkel. Nem ritka, hogy egy nő bizsergő vagy erős szúró fájdalmat érez. Hogy ez mihez köthető - a továbbiakban kitaláljuk.
Miért nő a szőr a mellkasomon? Gyakran, különösen egy baba születése után, a nők és a fiatal lányok nem kívánt szőrszálakat találnak a mellükön. Mi az oka a szőrnövekedésnek ezen az intim testrészen, cikkünkben megtudjuk.	Mell ductctasia - mi ez? A reproduktív rendszer egyes működési zavarai az emlőmirigyek csatornáinak kóros kiterjedéséhez vezethetnek. Ahhoz, hogy tisztában legyünk a problémával, érdemes részletesebben tanulmányozni, mi ez - ductectasia.

womanadvice.ru

Immunhisztokémiai vizsgálat mellrákban

Ha a beteg rosszindulatú daganatot gyanít az emlőmirigy belsejében, az orvosnak átfogó vizsgálatot kell előírnia a szerv beteg részének. A vizsgálatok egy része szabványos, és a mellkasi onkológia kimutatására szolgáló orvosi protokoll alapját képezi. Nem minden, a mellben talált daganatot lehet azonnal rosszindulatúnak diagnosztizálni. Egy ilyen következtetés levonásához az onkológusnak el kell küldenie egy nőt az emlőrák immunhisztokémiai vizsgálatára.

Csak azután, hogy a daganat biológiai anyagában megtalálhatók az aktív osztódásra és az emlőmirigyen kívülre terjedő patogén tulajdonságokkal rendelkező rákos sejtek - a daganat rosszindulatúvá válik.

Hogyan zajlik a mell immunhisztokémiai vizsgálata

Miután az emlőmirigyben új képződményt észleltek, az egyik kötelező vizsgálat az immunhisztokémia. Megvalósításának lényege abban rejlik, hogy az orvosok kis műtéti beavatkozást végeznek.

A beteg emlőn mikrometszést végeznek, amelybe speciális berendezést vezetnek, amely kiválasztja a daganatszövet egy részét. A beteg érzéstelenítés hatása alatt áll. Miután megkapta a neoplazma biológiai anyagát, specifikus antitestekkel kezelik. A rosszindulatú daganat agresszív ágenseit termeli, amelyek fehérjeszerkezettel rendelkeznek.

Emellett képesek kölcsönhatásba lépni más biológiai anyagokkal, megkötni őket, és egyetlen szövetet alkotnak velük. A daganatos anyag antigénekkel történő feldolgozását követően a szövetet mikroszkóp alá helyezzük részletes vizuális vizsgálat céljából.

A jóindulatú daganat fragmentuma az antitestekkel végzett kezelés után nem változtatja meg a színét, és a biopath és az antitestek sejtszerkezete változatlan marad, nincs aktív kapcsolat közöttük. A rosszindulatú sejtek egészen más módon viselkednek, és ez jól látható a mikroszkóp lencséjén keresztül.

Az emlőrák a nők leggyakoribb rákja, és a rákkal összefüggő halálozás második leggyakoribb oka. A korai diagnózis, az időben történő és megfelelő kezelés jelentősen növelheti a gyógyulás esélyeit. A hagyományos immunhisztokémiai (IHC) technikák nagyon kis szövetmintákkal is működhetnek. Ez a körülmény, kombinálva a daganatsejtek antigénjére specifikus antitestek alkalmazásával, hatékony eszközzé teszi ezt a módszert az onkológiai betegségek diagnosztizálásával és lefolyásának prognózisával foglalkozó patomorfológus kezében.

Ösztrogén receptor
Progeszteron receptor
HER-2 / neu
Ki-67
p120 Catenin
CadherinE
Az emlődaganatok diagnosztizálásának "arany standardja" a PR, ER, HER-2 / neu, Ki-67 hormonális profil.- Ez az összes rendelkezésre álló receptor diagnózisa, amely felelős a rákos szövetek aktivitásáért. Több mutató tanulmányozását is tartalmazza.
PR, ER specifikus receptorfehérjék, amelyek reagálnak az ösztrogén és progeszteron termelésére. A legtöbb emlőrák (körülbelül 80 százaléka) aktívan reagál a hormonszint változásaira. E receptorok reaktivitásának meghatározása kritikus szerepet játszik a hormonterápia lehetőségeinek értékelésében.
HER-2 / neu egy génfehérje szerkezet, amely a rákos szövetben található. Ez egy olyan receptor, amely specifikus antitestek termelésére reagál. Ezt a paramétert a rákkezelés prognózisának meghatározása szempontjából célszerű tanulmányozni. Magas HER-2/neu aktivitás esetén a daganat nehezen kezelhető, először is monoklonális terápia szükséges e szerkezet aktivitásának elnyomására.
Ki-67 egy fehérjeszerkezet, amely képes aktiválódni az aktív tumornövekedés során. Ennek a mutatónak a tanulmányozása lehetővé teszi a beteg életének prognózisának felmérését. Minél magasabbak a Ki-67 expressziós jellemzői, annál kisebb a tumor differenciálódása, annál kisebb az esélye a beteg nőnek a felépülésre.

A prosztata daganatai

A prosztatarák az egyik leggyakoribb daganatos betegség a világon. A legtöbb esetet (50-70%) 3-4 szakaszban diagnosztizálják, beleértve a 25% -át - a daganatos folyamat általánosításával. Sajnos a rák korai diagnosztizálása nehéz a jellegzetes tünetek gyakori hiánya miatt. A klinikai módszerek mellett a leginformatívabb a prosztata mirigy biopsziájának szövettani vizsgálatának módszere.

Főbb diagnosztikai markerek:

p63;
PSAP (prosztatasav-foszfatáz);
PSA (prosztata specifikus antigén);
P504s (= AMACR – alfa-metil-acil-CoA-racemáz);
Citokeratin nagy molekulatömegű (34betaE12);
ERG (ETS kapcsolódó gén);
PSMA (prosztata specifikus membrán antigén);
Androgén receptor;
Bcl-X;
Citokeratin 5 és 6;
Citokeratin serpenyő;
Keratin 8;
Citokeratin 8 és 18;
Ki-67;
53. o;
Szinaptofizin;
Basal Cell Cocktail - Cytokeratin HMW + p63.

Tüdődaganatok

A tüdőrák az egyik leggyakoribb halálok. Évente körülbelül 1 millió ember hal meg ebben a betegségben a világon. Férfiaknál a tüdőrák az esetek 85-90%-ában a dohányzással függ össze. A tüdőrák prognózisa továbbra is rossz. A diagnózis felállításától számított kezelés hiányában a betegek 90% -a 2 éven belül meghal. Sebészeti kezeléssel az 5 éves túlélési arány körülbelül 30%. A sugár- és gyógyszeres kezeléssel kombinált sebészeti kezelés 40%-kal növeli az 5 éves túlélési arányt. A metasztázisok jelenléte jelentősen rontja a prognózist. A tüdőrákos betegek modern diagnosztikája és kezelése nem nélkülözheti a daganat morfológiai igazolását, a daganatsejtek szövettani szerkezetének és anaplasia (differenciálódás) mértékének tisztázásával. Az immunhisztokémiai módszer továbbra is az egyik leginkább informatív módszer a diagnózis ezen szakaszában.

Főbb diagnosztikai markerek:

Pajzsmirigy transzkripciós faktor-1;
citokeratin 7;
NEM KISSEJTES TÜDŐRÁK
- ALK (DE5F3);
ZUKGOLÁSSJTES TÜDŐRÁK
- citokeratin 14;
- citokeratin 5/6;
- EGFR;
A TÜDŐ KISSEJTES RÁK
- kromograninA;
- szinaptofizin;
TÜDŐ ADENOCARCINOMA
- CytokeratinPan.

Melanóma

A melanoma (lat. Melanoma, melanoma malignum az ógörögből. Μέλας - "fekete") (száj. Melanoblasztóma) egy rosszindulatú daganat, amely melanocitákból - melanint termelő pigmentsejtekből - fejlődik ki. A bőrrák három típusának egyike, és a legveszélyesebb közülük. Főleg a bőrben, ritkábban a szem retinájában, a nyálkahártyákon (szájüreg, hüvely, végbél) lokalizálódik. Az egyik legveszélyesebb humán rosszindulatú daganat, gyakran visszatérő és metasztatikus limfogén és hematogén szinte minden szervben. A bőr melanoma és metasztázisainak igazolása továbbra is az egyik legnehezebb feladat az onkomorfológus számára. A nem pigmentált melanómák között vannak göbös, felszínen terjedő, például lentigo, tiszta sejtes, orsósejtes, pleomorf, kissejtes, myxoid, "nevoid", cricoid és egyéb formák.

Főbb diagnosztikai markerek:

Melanoma Associated Antigen (MAA);
CD63;
Melanoma marker (HMB45);
MART-1 / Melan-A;
Melanoma (gp100);
Tirozináz;
Mikroftalmia transzkripciós faktor (MiTF);
Ideg növekedési faktor receptor (NGFR);
S100;
Melanoma Pan (HMB45 + A103 + T311);
MART-1 + tirozináz;
Vimentin.

A standard panel körülbelül öt immunhisztokémiai markert tartalmaz:

53. o- a melanoma mitózis aktivitásának mértéke;
Ki-67- a proliferáció intenzitásának felmérése, meghatározza a betegség prognózisát;
bcl-2- egy fehérje, amely megakadályozza a bőr melanoma természetes apoptózisát, a metasztázis valószínűségét becsülik;
HMB-45- a melanociták működésének felmérése;
S-100- egy tipikus, csak a melanomában található antigén, amely lehetővé teszi annak megkülönböztetését más daganatoktól vagy jóindulatú formációktól.

Limfoproliferatív rendellenességek

A limfóma a nyirokrendszer rosszindulatú daganatos betegsége. A limfómák közül a lymphogranulomatosis (Hodgkin-limfóma) különböztethető meg, az összes többi limfóma pedig non-Hodgkin limfóma (NHL). A limfoid sejtek típusától függően, amelyekből a daganat származik, B-, T- és (ritkán) NK-sejtes limfómákat izolálnak. A legtöbb limfóma B-sejtes. A limfoproliferatív betegségek diagnosztikája jelenleg a modern patológia élvonalába tartozik, és az egyik legkiterjedtebb marker panelt igényli. A non-Hodgkin limfómák összes típusának összesített előfordulása az európai országokban 12-15 eset/100 ezer lakos évente. Előfordulásuk kockázata az életkorral növekszik. Az Epstein-Barr vírus fertőzése a különböző típusú limfómák, köztük a Burkitt-limfóma kialakulásának fokozott kockázatával jár. Gyermekeknél a non-Hodgkin limfómák viszonylag ritkák: az összes NHL-es eset legfeljebb 5%-a tartozik gyermek- és serdülőkorhoz. A limfómák azonban még mindig a harmadik helyet foglalják el a gyermekkori rosszindulatú betegségek szerkezetében - a leukémia és a központi idegrendszer daganatai után.

Főbb diagnosztikai markerek:

A gyomor-bél traktus stromális daganatai (SOGT)

A gyomor-bél traktus elsősorban a gyomorban (60%) és a vékonybélben (25%) fordul elő, de megfigyelhető a végbélben (5%), a nyelőcsőben (5%) és számos más helyen (5%), beleértve a vakbél, epehólyag, mesenterium és omentum. Az érintett betegek életkora serdülőkortól 90 éves korig terjed, de a legtöbb beteg idősebb, 60 év körüli a csúcs. A legtöbb tanulmányban van egy enyhe hajlam a férfiakra. 1998-ban kimutatták, hogy az OGHT a tirozin kináz receptor KIT-et (CD117) expresszálja. A Cajal intersticiális sejtjei (ICC) okozták ezeket a daganatokat. A GST-hez hasonlóan a Cajal-sejtek KIT-et expresszálnak, és a legtöbb pozitív CD34-re. A számos különböző laboratóriummal végzett későbbi vizsgálatok megerősítették, hogy a KIT a MINDKETŐ egyetlen legspecifikusabb markere. Az immunválasztható KIT az esetek körülbelül 90%-ában jelen van a sejtfelszínen és/vagy a tumorsejtek citoplazmájában a gyomor-bél traktusban. A daganatok túlnyomó többségében a KIT expressziója erős és homogén, de néhány esetben csak fokálisan pozitív reaktivitás mutatható ki, és a KIT hiányzik a daganatok egy kis alcsoportjában (~ 5%), ami megfelel az OGTI-nek más morfológiai és immunfenotípusos esetekben. jellemzők. A KIT-pozitív SALFA-k közül az esetek 60-70%-ában a CD34 expressziója határozható meg, míg 30-40%-uk reagál pozitívan a simaizom aktinra (SMA), 5%-uk pedig az S-100 fehérjére. Ezen antigének egyike sem specifikus a gyomor-bél traktusra. A desmin expressziója valódi KIT-pozitív SAT-ban rendkívül ritka (az esetek 1-2%-ában), és általában fokális. A rák ezen formáját nehéz morfológiailag diagnosztizálni. A modern marker panelek segítségével egyértelműen és ésszerűen diagnosztizálható a leírt patológia különböző formái. Az immunhisztokémia kötelező.

Főbb diagnosztikai markerek:

CD117 c-kit;
CD34;
Desmin;
Béta-katenin;
S100;
Gfap;
CD99;
ActinSmoothMuscle.

Colorectalis rák

A vastag- és végbélrák a harmadik leggyakrabban diagnosztizált rák az Egyesült Államokban (a bőrrák kivételével) mind a férfi, mind a női populációban. A vastag- és végbélrák előfordulási aránya az elmúlt két évtizedben csökkent (az 1985-ös 66,3 eset/100 000 esetről 2006-ban 45,5 esetre). Ez a vastag- és végbél szűrővizsgálatok fokozott használatának tudható be, amelyek lehetővé teszik a gyomor-bélrendszeri polipok kimutatását és eltávolítását, mielőtt azok rákos megbetegedést okoznának. A teljes visszaeséssel szemben az 50 év alatti fiatal felnőtt lakosság körében, akiknek a mérsékelt kockázat miatt nem javasolt a szűrés, a vastag- és végbélrák előfordulása 1994 óta évente mintegy 2%-kal nőtt férfiak és nők körében. 2016-ban az Egyesült Államokban a vastagbélrák okozta halálozási arány 49 500 volt. A vastag- és végbélrák okozta halálozás mind a férfiak, mind a nők csoportjában csökkent az elmúlt néhány évtizedben, az utóbbi időben meredekebb visszaeséssel. Ez a csökkenés a megbetegedési arányok csökkenését, valamint a korai diagnózis és kezelés javulását tükrözi. A vastag- és végbélrák korai stádiuma általában tünetmentes, ezért gyakran szűrésre van szükség a betegség ilyen korai stádiumában történő felismeréséhez. A betegség progressziója végbélvérzést, vér megjelenését a székletben, bélmozgás megváltozását, görcsös fájdalmat okozhat az alhasban. Az IHC használatát vastagbélrákban több szinten is mérlegelik: daganatok (endokrin vagy epiteliális típusú), örökletes hajlam jellemzésére és prognózis céljára. Az IHC túlnyomórészt a lehetséges vagy feltételezett metasztázisok azonosítása, amelyekben a vastagbél a lehetséges elsődleges. A vastagbélmetasztázisok tipikus helyei a máj és a tüdő, mindkettő olyan szerv, amely a vastagbél-metasztázisokkal azonos morfológiát képes produkálni. Az IHC-t (az FDA szabályozásának I. osztálya) a kezdeti daganat-diagnózis után használják kórszövettani vizsgálattal, és nem szerepel a klinikusok számára független vizsgálatként.

Főbb diagnosztikai markerek:

Béta-katenin;
BRAF;
CDX-2;
COX-2;
citokeratin 7;
citokeratin 19;
citokeratin 20;
MLH1;
MLH2;
MLH6;
MSLN;
MUC1;
MUC2.

Áttétes karcinóma

Az immunhisztokémia leggyakoribb alkalmazása a májdaganatok vizsgálatában az áttétek forrásának meghatározása, amikor a daganat elsődleges lokalizációja nem ismert. Az immunfestő panel fejlesztése és alkalmazása szinte minden diagnosztikai probléma megoldásában segíthet. 2-6 Citokeratinok (CK) 7 és CK 20 - számos daganat azonosításának első lépése, és a női és férfi nemi szervek daganataira viszonylag specifikus további immunválaszok gyakran lehetővé teszik az áttétes elsődleges lokalizációjának azonosítását. tumor.

Főbb diagnosztikai markerek:

Különböző molekulatömegű citokeratinek (CK 18, CK 19, CK 7 és CK 20 stb.).

HER2 / neu- egy membránfehérje, amelyet az ERBB2 gén kódol. Kifejezésének fokozása fontos bizonyos rosszindulatú folyamatok patogenezisében és progressziójában. Ennek a receptornak a tesztelése fontos biológiai markere a gyomor-, mell-, méh- és függelékrákra nézve.
Ki-67- nukleáris antigén, amely két polipeptid láncból áll, és amely a magmátrix fő része. Kifejezése lehetővé teszi a sejt életciklusának aktív fázisában lévő, szaporodó daganatsejtek izolálását. Ez a marker lehetővé teszi a tumornövekedés fenotípusának és sebességének, a metasztázis kockázatának, a terápiás intézkedésekre adott lehetséges válasznak és a kóros folyamat kimenetelének meghatározását.

A gyomor daganatai.

Immunhisztokémiai vizsgálatok (IHC) általában nem szükségesek a jó- és rosszindulatú gyomorhámdaganatok értékeléséhez, mivel a hisztopatológia általában diagnosztizálja, de az IHC-re van szükség a metasztatikus gyomorrák tanulmányozása során, ha a daganat forrása nem tisztázott, vagy ha makroszkópos / X A daganat megnyilvánulásai zavaróak (például a gyomorrák közvetlenül és széles körben behatol a májba, és szövettanilag nem különböztethető meg a cholangiocarcinomától). Ezenkívül az IHC hasznos lehet a gyomorrák számos változatának azonosítására, beleértve a hepatoid adenocarcinomát is, amelyekben a máj differenciálódása pozitív AFP-válaszsal igazolható. A gyomor adenokarcinómák számos anti-keratin antitesttel reagálnak, beleértve a CK 18-at, CK 19-et, CK 7-et és CK 20-at. Ha CK 7-et és CK 20-at együtt alkalmaznak, sok gyomor adenokarcinóma megfesti a CK 7-et és a CK 20-at is. Körülbelül 25% esetek fenotípusa CK 7 + / CK 20- vagy CK 7- / CK 20+), és néhány eset mindkét markerre negatív lesz. Eredetileg úgy gondolták, hogy a CDX-2, a vastagbélrák specifikus markere az esetek több mint 50%-ában reaktív lesz, és kevésbé invazivitást jelezhet. A gyomor adenokarcinómája, mind a bél-, mind a pecsétes gyűrűsejtes karcinóma neuroendokrin differenciálódással járhat, és ez a szövettani kép alapján nem nyilvánvaló, de kromograninnal és/vagy szinaptofizinnel való festődésben nyilvánul meg

Az EGFR receptor expresszió meghatározása epithelialis tumorokban

Az EGFR receptor expressziójának immunhisztokémiai (IHC) meghatározását vastag- és végbélrákban és tüdődaganatokban, valamint nyak- és fejdaganatokban a kemoterápiás kezelési módok megfelelő megválasztása érdekében végezzük.

Az EGFR (Epidermal Growth Factor Receptor) az egyik transzmembrán receptor, amely a hámsejtek felszínén expresszálódik, és részt vesz a sejtek növekedésének és differenciálódásának szabályozásában. Jelenlétében a sejtosztódás sokkal gyorsabban megy végbe. Amikor az EGFR receptor a növekedési faktorokhoz (EGF és TGF-a) való kötődés után aktiválódik, beindulnak a tumornövekedéshez vezető mechanizmusok és fokozódik a rákos sejtek proliferációja, valamint a metasztázis folyamata is. hogy a tumor növekedése az epidermális növekedési faktor receptorának stimulált aktivitása. Mivel a receptor aktivációja magának a daganatnak az anyagai miatt következik be, helyesebb lenne a daganat általi EGFR expressziójáról beszélni.Az EGFR expressziója a következő rákformákban fordul elő: tüdő, nyak és fej, vastag- és végbél. Az EGFR expressziójának immunhisztokémiai meghatározása lehetővé teszi ezen receptorok állapotának megállapítását és a kezelés előírását. Az EGFR expressziója közvetlenül összefügg a rosszindulatú daganat mértékével és a daganat fejlődési stádiumával, a szakember a kapott immunhisztokémiai adatok alapján a daganatot EGFR-negatív vagy EGFR-pozitív kategóriába sorolja.

Az EGFR túlzott expressziója magas malignitást, késői tumorfejlődést és metasztatikus folyamatokat jelez. Ez a tényező a betegség prognózisa szempontjából kedvezőtlen, és a daganat magas proliferatív aktivitását, agresszivitását és terápiával szembeni rezisztenciáját jelzi.

Az EGFR-expresszió alacsony foka a tumor regresszióját jelzi, pozitív dinamikával a kezelésben.

Az endometrium ösztrogénre és progeszteronra való receptorérzékenységének immunhisztokémiai vizsgálata

Az endometrium ösztrogén és progeszteron receptorok érzékenységének immunhisztokémiai vizsgálatát a termékenység hiányának okainak azonosítására, valamint a méh szöveteiben zajló folyamatok rosszindulatúságának felmérésére végezzük. A vizsgálat összetett, tervszerűen történik, megfelelő patológus végzettség szükséges.

Ösztrogén (ER) és progeszteron (PR) receptorok- ezek érzékeny markerek, amelyek reagálnak bizonyos hormonok ingadozására, amelyek befolyásolják a daganatok növekedését és a méhnyálkahártya hiperplasztikus folyamatainak kialakulását. Mind a méh epitéliumának szöveteiben, mind az emlőmirigy sejtjeiben találhatók. Meghatározásuk lehetővé teszi a hormonális tényezők rosszindulatú növekedés előrehaladására gyakorolt hatásának felmérését, valamint a méhen kívül más aktivitási gócok jelenlétének azonosítását is. Bekerülnek az infiltratív rákaktivitás gyanújával rendelkező beteg nők kötelező szűrési programjába.

Az immunhisztokémiai vizsgálatot a következőkkel végezzük:

meddőség;
endometriális daganatok;
a menstruáció diszfunkciója;
hiperplasztikus folyamatok az endometriumban.

Meddőség esetén a technika lehetővé teszi, hogy megtudja, hogy a megtermékenyített petesejt a méh falához tapadhat-e. A rák esetében a módszer nem korai diagnózis. A receptor aktivitás értékelése lehetővé teszi a metasztázisok jelenlétének azonosítását és a méhüregben végzett kezelés hatékonyságának értékelését. Peteérési zavarok esetén a technika kideríti a hormonterápia hatékonyságát. A méh üregében bekövetkező hiperplasztikus természetű változásokkal az ösztrogén és a progeszteron receptorok aktivitásának növekedése rosszul differenciált daganatok kialakulását jelzi, amelyek potenciálisan veszélyesek a nő életére.

Az eredmény általános elve- minél nagyobb a receptor aktivitás kifejeződése, annál nagyobb a valószínűsége a tumor progressziójának. Minél alacsonyabb az aktivitás, annál kisebb a természetes megtermékenyítés lehetősége.

Krónikus endometritis

A krónikus endometritist a méh nyálkahártya-rétegének gyulladásának nevezik, amelyet különféle vírusok vagy kórokozó mikroorganizmusok provokálnak. A kóros fókuszban az endometrium morfológiai és funkcionális elváltozásai következnek be A krónikus endometritis olyan klinikai és morfológiai szindróma, amelyben a méhnyálkahártya fertőző ágens általi károsodása következtében többszörös másodlagos morfológiai és funkcionális változások lépnek fel, amelyek megzavarják a ciklikus biotranszformációt. a méh nyálkahártyájának károsodása, ami a menstruációs és generatív funkciók tartós zavarához vezet, a krónikus endometritis előfordulása a lakosság körében 2,6-51%. Ezen túlmenően ezeknek a nőknek a 60,4%-a terméketlen, és 37%-ban sikertelen IVF- és embrióátültetési kísérletet észleltek. 2006-ban a Nemzetközi Nőgyógyászati és Szülészeti Szövetség azonosította a "fejletlen terhesség" és a "krónikus endometritis" fogalmát.

A krónikus endometritis okai:

a kismedencei szervek, a hüvely és a méhnyakcsatorna fertőzései;
méhen belüli eszköz;
korai intim kapcsolatok;
a kismedencei szervek radioterápiája;
sebészeti beavatkozás a méh üregében;
alkoholizmus és dohányzás.

A szakemberek a kismedencei szervekben előforduló gyulladásos folyamatokat autoimmun patológiának nevezik. A rendellenességek természetének meghatározására és az endometrium gyulladását kiváltó immunrendszer kóros reakciójában szenvedő betegek azonosítására immunhisztokémiai vizsgálatot írnak elő, amelyet monoklonális antitestek standard paneljével végeznek: CD16, CD20, CD138, CD56, HLA-DR.

Az endometrium befogadóképességének immunhisztokémiai vizsgálata (beültetési ablak)

Az endometrium receptivitása az endometrium szerkezeti és funkcionális jellemzőinek komplexuma, amely meghatározza annak beágyazódási képességét. A múlt század 90-es éveinek eleje óta az "endometrium fogékonyságának" fogalma kezdi elnyerni modern jelentését, mint az endometrium és az embrió közötti komplex integráció és többszintű "párbeszéd" folyamata az "implantációs ablak" egy meghatározott időszakában. Az „implantációs ablak” időtartama emberben átlagosan 4 nap: az LH szekréció csúcsát követő 6. naptól a 8-10. napig, vagy a menstruációs ciklus 20-24 napja (28 napos menstruáció esetén Jelenleg a fogékonyságnak három szintje van: genetikai, proteomikai és szövettani. Ha az endometriumban megnyílik a "beültetés ablaka", 395 gén (ApoE, PLA2) expressziója megnövekszik, és 186 gén (ITF, különböző proteázok, extracelluláris mátrix fehérjék stb.) expressziója csökken. A méhnyálkahártya-receptivitáshoz kapcsolódó proteomikus markerek közül különböző adhéziós molekulákat, növekedési faktorokat, citokineket és receptorokat különböztetnek meg: az IL-1 családot, LIF és LIF-R, αVβ3, TNF-α, IFN-γ stb. A legtöbbet vizsgált leukémia-gátló faktor (LIF) az IL-6 család tagja. Maximális expressziója az endometriumban a ciklus 20. napján figyelhető meg, a receptivitás harmadik szintje szövettani. A méhnyálkahártya "beültetési ablaka" a menstruációs ciklus szekréciós fázisának középső szakaszának felel meg. Az endometrium csak akkor rendelkezhet receptív tulajdonságokkal, ha a receptivitás molekuláris markerei pontosan a menstruációs ciklus szekréciós fázisának középső szakaszában észlelhetők. A receptivitás kialakulásában szerepet játszó egyik kulcsfontosságú ultrastrukturális képződmény a pinopodiák. Ezek az endometrium felszíni hám csúcsi részének mikroszkopikus kiemelkedései, amelyek az "implantációs ablakban" a mikrobolyhok helyén képződnek és a méh üregébe nyúlnak ki. Feltételezhető, hogy a blasztociták kötődésének fő receptorai a pinopodia felszínén helyezkednek el, ahol a LIF is koncentrálódik.A szteroid receptorok expressziójának bármilyen egyensúlyhiánya az endometrium morfofunkcionális tulajdonságainak, befogadóképességének megzavarásához vezethet. Ezért a szekréciós fázis középső szakaszában az ER és PR szintjének meghatározása lehetővé teszi az endometrium morfológiai vizsgálatának kiegészítését, befogadóképességének felmérését. Normális esetben a PR / ER aránya a stromában 2 és 4 között mozog. A szekréciós fázis középső szakaszában az ERα szintjének fiziológiás csökkenése figyelhető meg az endometriumban. Ez egy kritikus esemény, amely megszabadít bizonyos géneket az elsöprő befolyástól, és jelet ad a méhen belüli fogékonyság megindulásához.

Az ER α túlzott expressziója a szekréciós fázis középső szakaszában az implantáció biológiai markereinek expressziójának megsértését okozza, megzavarja az endometrium befogadóképességét.

A komplex vizsgálati program a következő antitest-panelből áll: ER, PgR, CD56, CD138, LIF, valamint a pinopodiák számának számlálása.