НАРКОТИЦИ
ОЦЕНКА НА НОВА ТЕСТ СИСТЕМА ELISA
"Ротавирус-антиген-ELISA-BEST"
12Жираковская Е.В., 3Игнатиев Г.М., 3Индикова И.Н., 12Тикунова Н.В.
1 Федерална държавна научна институция SSC VB "Вектор" на Роспотребнадзор, селище Колцово, Новосибирска област;
2 Институт по химическа биология и фундаментална медицина, Новосибирск;
3 Държавен институт за стандартизация и контрол на медицински биологични препарати им Ел Ей Тарасевичаг Москва
Представени са резултатите от тестване на чувствителността, специфичността и възпроизводимостта на нов набор от реагенти "Ротавирус-антиген-ELISA-BEST", разработен в JSC "Vector-Best" (Новосибирск). Получените данни позволяват да се предвиди диагностичната надеждност на резултатите при използване на тази тестова система за откриване на ротавирусен антиген от група А в клиничния материал.
Ключови думи: ELISA тест система, ефективност, ротавирус А
Ротавирусите от група А (семейство Reoviridae, род Rotavirus) са най-честата причина за тежък гастроентерит при малки деца в световен мащаб. Възрастните с отслабен имунитет също често се разболяват. Ротавирусната инфекция (RVI) е силно заразно заболяване с множество пътища на разпространение. Източникът на инфекцията е човек с манифестна или асимптоматична форма на заболяването, както и носител на вируса. Сред децата и възрастните RVI може да се прояви под формата на спорадични случаи, локални групови заболявания, огнища и е широко разпространен. Фекално-оралният механизъм на предаване на тази инфекция се осъществява чрез храна (мляко и млечни продукти, бебешка храна), вода и контактни битови пътища.
Диагнозата на ротавирусния гастроентерит според клиничната картина, особено със спорадична заболеваемост, представлява известна трудност, тъй като симптомите, характерни за тази инфекция, се различават малко от симптомите на други остри чревни инфекции (ОЧИ) с различна етиология. Диференциалната диагноза при пациенти с ротавирусен гастроентерит се провежда както с хранителни токсични инфекции, така и с други вирусни (норовируси, астровируси, аденовируси, коронавируси, ентеровируси на Коксаки и ECHO) и бактериални (салмонелоза, дизентерия, холера, йерсиниоза) микроорганизми, опорунистични инфекции). етиология. За съжаление, не всички специализирани медицински заведения на Руската федерация извършват диагностика на ротавирусна инфекция.
Диагностичните методи за RVI са насочени към откриване на цели вириони, вирусен антиген или вирус-специфична РНК в изпражненията. Обещаващ подход за директно откриване на вируси както в клиничен материал, така и в обекти на околната среда е методът на полимеразна верижна реакция с обратна транскрипция (RT-PCR). През последните години бяха създадени тест-системи на базата на съвременни научни разработки с комбинация от различни методи за откриване на ротавируси: мултиплексна PCR с хибридизационно-флуоресцентно откриване на продукти на амплификация „по крайна точка“; крайна точка имуно-PCR (IPCR) с откриване в реално време; количествен RT-PCR с откриване в реално време. В изследователските лаборатории електронната микроскопия се използва за бързо откриване на ротавируси. Всички горепосочени методи обаче са доста трудоемки и изискват скъпи инструменти и висококвалифициран персонал. Ето защо при провеждане на лабораторна диагностика в болници и амбулаторно се дава предпочитание на методи, основани на откриване на вирусен антиген в изпражненията с помощта на ензимно-свързан имуносорбентен анализ (ELISA) с моно- и полипонни антитела срещу ротавируси. Този метод е достъпен за практически лаборатории, лесен е за настройка и ви позволява бързо да получите резултата.
Целта на тази работа е да се изследва диагностичната ефективност на нов набор от реагенти "Ротавирус-антиген-ELISA-BEST", разработен в JSC "Vector-Best", Новосибирск.
^септември-декември
Материали и методи
Материалът за изследването са проби от фекалии на малки деца с диагноза AII и без клинични прояви на чревна инфекция, които са хоспитализирани в отделенията по чревни инфекции и респираторни инфекции на Детска градска клинична болница № 3 на Новосибирск. Фекалните проби се събират в стерилни пластмасови контейнери за еднократна употреба в обем 2-3 ml при постъпване на пациентите в болничното отделение и се съхраняват при -20 °C в продължение на 15 дни. По-продължителното съхранение на материала се извършва при -70 °C.
В работата беше използван панел от 104 фекални проби, предварително тествани за наличието на AII патогени. От тях:
30 проби, в които само ротавируси от група А са открити чрез ELISA и RT-PCR; генотипирането чрез RT-PCR показа, че фекалните проби съдържат ротавируси от генотип PG1 (18 проби), PG2 (4 проби), PG3 (3 проби), PG4 (2 проби), PG4 (1 проба), PG9 (1 проба) , PG3 (1 проба);
14 проби, в които само норовируси от втория генотип бяха открити чрез RT-PCR, което беше потвърдено чрез определяне на нуклеотидната последователност на 5" региона на капсидния ген, разположен върху генома на норовирусите в областта от 5085-5485 h .;
15 проби, в които са открити само астровируси чрез RT-PCR, което е потвърдено чрез определяне на нуклеотидната последователност на 5" региона на капсидния ген, разположен върху генома на астровируса в областта от 4526-4955 bp; 15 проби, в които само аденовируси са открити чрез PCR;
30 фекални проби (контролни) от деца без клинични прояви на чревна инфекция, хоспитализирани в респираторното отделение на болницата; предварителният анализ не разкри горепосочените вирусни патогени в тези проби.
Пробите бяха тествани за наличието или отсъствието на рота-, норо-, астро- и аденовируси чрез RT-PCR с помощта на търговски комплекти, регистрирани в Руската федерация "AmpliSense No virus 1, 2 genotypes - 306/322", "AmpliSense Astrovirus -165 ", "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (произведен от Централния изследователски институт по епидемиология, РФ). Изследването на пробите е извършено в съответствие с инструкциите за използване на съответните комплекти реактиви по време на срока на годност. Проби, положителни за ротавирус, бяха генотипирани чрез RT-PCR. Определянето на присъствието или отсъствието на ротавирусния антиген също се извършва чрез ELISA, като се използва търговска тестова система IDEIA™ Rotavirus, (DakoCytomation, UK) в съответствие с инструкциите за комплекта.
При тестване на комплекта реагенти "Rota-virus-antigen-ELISA-BEST" всички горепосочени проби (104) бяха криптирани и тествани три пъти с тестовия комплект. След приключване на тестовете пробите бяха декодирани и резултатите бяха анализирани.
Резултати и дискусия
Чувствителността на комплекта реагенти "Ротавирус-антиген-ELISA-BEST" беше оценена чрез броя на съвпаденията на положителните резултати (в %) на пробите за тестване, използвайки тестваната тестова система и референтни лекарства. В същото време беше установено, че при използване на комплекта реагенти "Ротавирус-антиген-ELISA-BEST", всички 30 проби с потвърдено наличие на ротавирус А са положителни (Таблица 1). Следователно, чувствителността на тестовия набор от реагенти за откриване на ротавирус А е 100%. Трябва да се отбележи, че панелът включваше проби със седем различни ротавирусни генотипа и всички те бяха успешно открити от Rota virus - antigen - И FAB EST реактивен комплект.
Специфичността на тестовата система беше оценена по броя на съвпаденията на отрицателните резултати (в %) на пробите за изпитване, използвайки тестваната тестова система с данни от предварителни проучвания. За да се оцени специфичността, използваният панел включва 30 проби, в които не са открити вирусни патогени, както и 14 проби, в които са открити само норовируси от втория генотип с помощта на RT-PCR метода, 15 проби, в които методът RT-PCR открити само астровируси; 15 проби, в които чрез PCR са открити само аденовируси. Установено е, че в 69 от 74 отрицателни проби, стойностите на оптичните плътности при открити от комплекта с реагент Rotavirus-antigen-ELISA-BEST за наличие на ротавирус А не надвишават фоновите стойности, т.е. получен в резултат на измерване на оптичната плътност в контролни отрицателни проби. Две проби, съдържащи астровируси, една проба - норовирус от втори генотип, една проба - аденовирус и две проби, в които не е открит нито един от посочените по-горе вирусни патогени, показват положителни стойности на оптична плътност. Трябва да се отбележи, че в проби, в които преди това не е открит нито един от вирусните патогени, положителни сигнали са регистрирани само в едно от повторните изследвания (Таблица 2). Така специфичността на комплекта реагенти "Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST" е 93,2%.
По време на тестовете беше оценена възпроизводимостта на резултатите, получени с помощта на тестовия набор от реагенти "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" върху клиничен материал - всички проби бяха изследвани три пъти в различни експерименти, за да се определи вариацията в резултатите. В почти всички случаи са получени сходни резултати: тестовата система открива всички отрицателни и положителни проби по един и същи начин. Изключение правят две проби, в които нито един от вирусните патогени не е бил открит преди това: в едно от повторенията за двете проби стойностите на оптичната плътност надвишават ODcrit. Трябва да се отбележи, че излишъкът е незначителен (Таблица 2). Така възпроизводимостта на резултатите е 98,8%.
Резултатите от проведените тестове показаха, че тестваният набор от реагенти "Ротавирус-антиген-ELISA-BEST" по отношение на своята диагностична ефективност - специфичност, чувствителност и възпроизводимост - е сравним с наличните в Руската федерация диагностика.
използвайки тестовия комплект "Ro-tavirus-antigen-ELISA-BEST" за откриване на ротавирусен антиген от група А в клиничен материал.
литература
1. Богомолов Б.П. // "Инфекциозни болести: спешна диагностика, лечение, профилактика". - М., Нов диам. - 2007 г.
2. Василиев Б.Я., Василиева Р.И., Лобзин Ю.В.// „Остри чревни заболявания. Ротавируси и ротавирусна инфекция. - S.-Pb., Lan. - 2000 г.
3. Жираковская Е.В., Тикунов А.Ю., Боднев О.А. и др.// "БИОпрепарати". - 2008 - бр. 2. - с. 15 - 18.
4. Жираковская Е.В., Малеев В.В., Боднев А.С. и други // JMEI - 2008 - No4. - от. 12 - 16.
5. Игнатюк Т.Е., Голутвин И.А., Насикан Н.С. и др. // Проблеми на вирусологията. - 2003. - т. 48. - бр. 6. - с. 1721 г.
6. Новикова Н.А., Федорова О.Ф., Епифанова Н.В., Чуп-рова А.Б. // "Проблеми на вирусологията". - 2007. - т.52. -№ 3 - с. 19-23.
7. A. T. Podkolzin, A. A. Mukhina, G. A. Shipulin и др.//
"Инфекциозни заболявания". - 2004. - т. 2. - бр. 4. - с. 85-91.
8. Подколзин А.Т., Фенске Е.Б., Абрамичева Н.Ю. и др.// Терапевтичен архив. - 2007. - т. 79. - бр. 11. -с. 10-16.
9. Сергевнин V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., et al. // Епидемиология и инфекциозни болести. -2004.-бр.6.-с. 17-20.
10. Сергевнин V.I., Voldshmidt N.B., Sarmometov E.V., и др. // Хигиена и санитария. - 2007. - бр. 1. - с. 56-58.
11. Arcangeletti M.C., De Conto E, Pinardi F., и др. // Acta Biomed. Атенео. Parmense. - 2005.-В. 76(3). - С. 165-170.
12. Gladstone B.P., Iturriza-Gomara M., Ramani S. и др. // Епидемиол. Инфектирайте. - 2008. Т. 136(3). - С. 399-405.
13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. //J. Вирол. методи. -2006 г. - Т. 137 (2). - С. 280 - 286.
14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., и др. //J. Clin. микробиол. - 2008. Т. 46 (2). - С. 462 - 469.
15 Schets F.M., van Wijnen J.H., Schijven J.F., и др. //Прилож. Околна среда. микробиол. - 2008. - Т. 74 (7). - С. 2069 - 2078.
16. Stockman L.J., Staat M.A., Holloway M., и др. // J. Clin. микробиол. - 2008. - Т. 46 (5). - С. 1842 - 1843.
Оценка на чувствителността и специфичността на комплекта реагенти "Ротавирус-антиген-ELISA-BEST"
маса 1
№ № Брой проби Резултати от откриване с лекарства за сравнение IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Резултати за откриване с комплекта Rotavirus-antigen-ELISA-BEST
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
Оценка на специфичността на комплекта реагенти "Ротавирус-антиген-ELISA-BEST> -
таблица 2
PCR AmpliSense
ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус
0,443 1,306 0,676 0,418
Ротавирус-антиген-IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPCrit OPCrit OPCrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
£ септември
декември 2009 г
AmpliSense
ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус ротавирус астровирус астровирус астровирус астровирус астровирус астровирус астровирус
IDEA Rotavirus DakoCytomation RPC = 0,150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
ротавирус-
OPcrit 0,250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
антиген-ELISA-BEST "Vector-Best"
OPcrit OPcrit 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
астровирус астровирус астровирус астровирус астровирус астровирус астровирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус норовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус
IDEA Ротавирус DakoCytomation OIIKpHT = 0,150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKtop-EecT"
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
декември 2009 г
PCR AmpliSense
аденовирус аденовирус аденовирус аденовирус отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен отрицателен
IDEA Rotavirus DakoCytomation RPC = 0,150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Ротавирус - антиген - ELISA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPCrit O P Crit OPCrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
Лечението на хелминтози при деца е изключително важно, тъй като последствията от това могат да бъдат изоставане в развитието на физически и психически, патологични процеси на вътрешните органи и системи, дори смърт. Освен това хелминтните инвазии са силно заразни, поради което се разпространяват толкова лесно в предучилищните и училищните институции. Въз основа на това става ясно колко важно е навременното лечение на хелминтоза при деца.
Първите признаци на хелминти при деца
Червеите са опортюнистични агенти на човешкото тяло, червеи, за които човек е краен гостоприемник. Освен това възрастта на собственика не играе никаква роля по този въпрос, различни видове хелминтиази могат да се наблюдават както при деца, така и при възрастни пациенти.
Колко опасна е хелминтозата за дете?
Както бе споменато по-рано, хелминтите при децата могат да причинят сериозни заболявания и патологии, в резултат на което умственото и физическото развитие се забавя. Възможните усложнения за всеки вид хелминтиаза могат да бъдат напълно различни, например:
Следователно, детските хелминтози изискват още повече внимание, навременна медицинска помощ, дългосрочно наблюдение при специалист и профилактика.
Основни симптоми при деца
Симптомите на хелминтоза при дете могат да бъдат различни в зависимост от вида на червеите:
1. Аскаридите веднага се проявяват като алергична реакция, треска и гадене при детето. Първите изяви обикновено са ярки, но бързо отшумяват. Тогава могат да се появят следните симптоми: 
- колики и дисбактериоза и новородени;
- при бебета под 1 година, болка в пъпа, проблеми с изпражненията, алергии и диатеза;
- по-големите деца имат проблеми със съня, неспокойно поведение, кошмари;
- за деца 3-7 години са характерни гадене, треска, кашлица и коремна болка, обрив.
2. Ентеробиозата, чийто причинител са острици, се проявява като изтрита клинична картина. И само след 1 месец можете да забележите следните симптоми:
- при новородени, възпаление, подуване и зачервяване на ануса, отказ от хранене, плач през нощта, липса на апетит;
- деца под една година имат същите симптоми, както и силен сърбеж на ануса през нощта (от 23 часа до 1 часа сутринта), момичетата страдат от възпаление на гениталните органи;
- при по-големи деца, болка в корема близо до пъпа, нарушение на съня, сърбеж в областта на седалището.
3. Симптомите на токсокарозата са трудни за разпознаване, с изключение на лека телесна температура и алергични реакции (обрив, копривна треска, сърбеж и подуване). След заразяване може да се появи кашлица, която по-късно причинява пневмония или бронхит, особено при най-малките пациенти. 
Трихинелозата предполага леки признаци при новородени, в противен случай се наблюдават следните признаци:
- трескаво състояние;
- подуване на лицето;
- мускулна болка;
- алергични реакции;
- деца на 5 и повече години може да имат увеличени сливици, далак, обрив и възпалено гърло.
Най-трудно е да се диагностицират симптомите на хелминтоза при деца на 2 години и по-малки, тъй като детето не може да обясни своето поведение и състояние. Ето защо при всякакви нетипични прояви и поведение на детето е по-добре да се покаже на лекаря.
Какво трябва да се направи първо?
Червеите, открити в изпражненията на дете, са най-важният признак на заболяването, след което трябва незабавно да потърсите помощ от лекар. Никакво лечение на хелминти не може да бъде успешно без правилна диагноза. Методите на изследване в този случай трябва да бъдат изчерпателни, включително следните процедури: 
- вземане на остъргване от ануса;
- изследване на изпражненията на детето;
- кръвен тест;
- мускулна биопсия в редки случаи със съмнение за трихинелоза;
- серологичен кръвен тест;
- рентгенова, ултразвукова, томография;
- ELISA за откриване на антитела в кръвта.
Методи за лечение
Лечението на хелминтоза при деца трябва да бъде изчерпателно, добре обмислено, планирано с точни дозировки и честота на приемане на лекарства. Това се дължи на факта, че лекарства с токсични компоненти се използват за антихелминтичен ефект, което означава, че нерационалната употреба може да доведе до странични ефекти. Освен това у дома е подходящо алтернативно лечение с лечебни растения.
Народни средства
Съвременното лечение с народни средства за лечение на такива заболявания за деца включва 4 ефективни начина: 
Всеки метод на домашно лечение трябва да се обсъди предварително с Вашия лекар. Трябва да се помни, че за билки и народни средства са предвидени противопоказания под формата на индивидуална непоносимост.
Медицинско лечение
- При ентеробиоза и аскариоза обикновено се използват лекарства като Pirantel и Mebendazole. Приемането на Pirantel е подходящо в доза от 10 mg от веществото на килограм тегло от острици и 5 mg / kg от кръгли червеи. Мебендазол се приема два пъти дневно по 50 mg за деца на 2-3 години в продължение на три дни подред, два пъти по 100 mg за три дни подред за деца над 3 години, след 3 седмици терапията се повтаря.
- При токсокароза Mebendazole се предписва в различна доза - за деца на 2 години и повече, 100 mg два пъти дневно в продължение на 14-10 дни.
- Лечението на трихинелоза приема мебендазол 5 mg на килограм тегло, след което дозата се разделя на три дози на ден. Курсът на лечение е 1 седмица под строго наблюдение на лекар.
Профилактика на хелминтози
- измиване на ръцете веднага след контакт с животни, след улицата и пясъчниците, ходене до тоалетна и преди хранене;
- яде само чисти храни;
- правилно проведена топлинна обработка на месни и рибни продукти;
- пиене на преварена вода;
- спазване на лична хигиена и санитарни условия;
- редовно обезпаразитяване на домашни любимци;
- превантивно обезпаразитяване при деца на 2 години и повече.
Кръвен тест за токсокара
Характеристики на човешката инфекция с токсокароз
Преносители на инфекция са кучета, по-рядко котки. Яйцата на Toxocara се разпространяват с изпражненията на бездомните кучета. Веднъж попаднали на земята, във вода или задържани върху козината на животно, те се въвеждат в здравия организъм по различни начини.
Реакция на натрапник
От медицинската статистика е известно, че възрастните са по-малко склонни да се заразят с токсокароза, освен ако професията им не е застрашена. Децата са много по-склонни да получат инфекция.
Най-честите симптоми на токсокарозата са:
- Треска без признаци на заболяване.
- Покачване на температурата.
- Нарастваща и затихваща болка в главата или корема.
- Появата на кожен обрив, който не може да бъде елиминиран.
- Подпухналост на лицето.
- Повишаване на нивото на еозинофилите в кръвта, разкрито в общия анализ.
За да се постави точна диагноза, се предписва имунологичен анализ за токсокар. Наличието на протеинови съединения в кръвта, които носят генетичната информация на хелминта (антигени), провокира имунитет да произвежда антитела от клас igg. Това е първият признак на инфекция с токсокароз.
Предварителна диагностика
Началният етап от анамнезата на пациента е колективен. Преди да изпратите пациент да вземе кръвен тест за токсокароз, е необходимо да се проучи историята на заболяването и да се направи предварителен преглед.
Първична диагноза:
- Разследване на утежняващи обстоятелства, които биха могли да предизвикат инфекция - специфична работа с животни или присъствие на домашен любимец, разкопки в потенциално опасни зони, игра на деца в места за разходка на кучета.
- Физикален преглед на пациента. Изследване на кожата за подкожна инвазия от токсокар, клепачи и очни ябълки, палпация.
- Назначаване на подробен кръвен тест. По време на инфекция с токсокароза е характерно значително увеличение на някои показатели - еозинофили (70–80%), лимфоцити, ESR. Докато нивото на хемоглобина пада значително.
- Вземане на проби от черния дроб. При тежка инвазия се засяга натоварването на черния дроб, което се проявява със силен скок на билирубина.
Невъзможно е да се получи директно потвърждение за инвазия на токсокар с помощта на конвенционални тестове (кръв, копрограма, намазка). Дуоденалното изследване също е неинформативно, тъй като е трудно за мигриращия характер на ларвите.
След получаване на резултатите от предварителен преглед, показващ възможна инфекция с токсокар и разграничаване на предполагаемата диагноза от заболявания със сходни симптоми, на пациента се предписва ELISA за токсокароза.
Свързан имуносорбентен анализ
Основната цел на това изследване е да се потвърди наличието на токсокар в човешкото тяло. Антитела към тези хелминти се намират в кръвната плазма, така че се взема от вена.
Анализът на Toxocara изисква известна подготовка:
- Не яжте мазни и тежки храни в деня преди процедурата.
- Не пийте сладки, газирани и алкохолни напитки през деня преди посещение в лабораторията.
- Дайте тестове на гладно.
- Не използвайте лекарства в предишния ден и деня, в който е насрочен анализът.
Трябва да се отбележи, че този много информативен метод за откриване на инвазия може да бъде повлиян от някои обстоятелства. Фалшиво положителен резултат може да възникне, ако пациентът има:
- Онкологични заболявания.
- Туберкулоза на белите дробове.
- Тежки чернодробни патологии.
- автоимунен синдром.
- Антифосфолипиден синдром.
- Бременност.
В този случай няма да е възможно да се получи 100% потвърждаващ анализ, тъй като при изброените обстоятелства защитната система също произвежда имуноглобулини (антитела). Необходимо е да се извърши допълнителна диагностика и да се разграничи токсокарозата от изброените фактори.
Концентрацията на имуноглобулини (титър) от клас IgG достига максималната възможна стойност след 2-3 месеца от началото на инвазията. Колкото по-тежка е инфекцията, толкова по-висок е този процент.
Резултати от ELISA
За да се постави диагноза, ензимният имуноанализ се проучва внимателно, получените резултати се сравняват с референтни стойности. Нормата е титър на антитела 1:100 с индекс на положителност по-малък от 0,9.
Числови стойности на заглавията
Получените резултати могат да бъдат отрицателни, положителни, слабо положителни или съмнителни. Броят на титрите на антителата зависи от тежестта на инвазията и продължителността на нейното възникване.
Препис от анализа:
- AT титър до 1:100 - резултатът е отрицателен. В тялото на пациента не са открити ларви на Toxocara.
- AT титър до 1:400 - резултатът е слабо положителен. Пациентът има слаба инвазия или развива очна форма на токсокароз. В някои случаи индикаторът показва скорошна инфекция.
- AT титър до 1:600 - резултатът е положителен. Човек страда от клинична форма на хелминтиаза, при откриване на която е необходима незабавна терапия.
- AT титър до 1:800 - резултатът е положителен. Това говори за тежка инвазия с прогресиращ характер и висока степен на вероятност от развитие на патологичен процес на вътрешните органи.
С редки изключения, изследването на ELISA разкрива пренебрегвана форма на инвазия с примес на хелминтиази от друг произход. В този случай общите антитела могат да бъдат по-високи от 1:800.
Коефициент на положителност
При ензимен имуноанализ за токсокароза с титър 1:400 - 1:600 за диференциране на инвазията от страничните фактори, получените показатели се сравняват с референтната стойност. Разликата между тези цифри обикновено се нарича индекс или коефициент на позитивност.
Обикновено под формата на проведен ELISA един индикатор е срещу другия. Първото е норма, второто може да означава:
- До 0,9 - резултатът е отрицателен. Ларвите на Toxocara не са открити.
- 0,9-1,1 - резултатът е съмнителен. В този случай се назначава повторна диагноза.
- 1.1-2.2 - резултатът е леко положителен. Човек е носител със слаба инвазия.
- 2.2-4.2 - резултатът е положителен. Токсокароза с умерена тежест се развива дълго време.
- Над 4,4 - резултатът показва пика на хелминтна инвазия или скорошна хелминтоза.
КП с резултат 4,4 и установено увеличение на еозинофилията с 10% може да показва развитие на очна форма на токсокарозата и наличие на антитела срещу кръстосана инвазия, общо до токсокарозата.
Имунният отговор и оптичната плътност на антителата (коефициент на позитивност) зависят от степента на инфекция с Toxocara и мястото на тяхната локализация. Най-ниският титър и CP индикатор позволява само да се предположи липсата на хелминти, но не и да се твърди това.
Представената информация не може да служи като източник за самодиагностика или самолечение. Резултатите от ELISA, заедно с предварителния преглед, могат да кажат само на специалист за наличието на проблем. В лабораторията Invitro кръвната диагностика се извършва с висока точност, резултатът от анализа е придружен от коментари на специалисти относно коефициента на положителност. Това значително помага на лекаря да постави по-точна диагноза.
Брой дефиниции 96 (48 в два екземпляра)
Формат на работната таблетка: отрязан 12x8, счупен 1 кладенче.
Чувствителност: 1,5 U/ml.
Обхват на измерване: 0-400 U/ml.
Обемът на тестовата проба е не повече от 25 µl.
Стандартизиране на условията за провеждане на ензимна реакция с хромоген в термостатично контролиран шейкър при 37ºС.
Комплектова композиция:
1. Раирана плоча 12 х 8 отвора, готова за употреба - 1 бр.
2. Готови за употреба калибровъчни проби (0-400 U/ml), оцветени с различна степен на интензитет в зависимост от концентрацията - 6 флакона.
3. Контролна проба - 1 флакон.
4. Еднокомпонентен конюгат, готов за употреба, не изискващ разреждане - 1 флакон.
5. Разтвор за серумно разреждане - 1 флакон.
6. Хромогенен субстрат, еднокомпонентен - разтвор на тетраметилбезидин плюс (ТМВ+) готов за употреба, не изискващ разреждане - 1 флакон.
7. Фосфатно-физиологичен буферен разтвор с двойни - 2 бутилки.
8. Стоп реагент, готов за употреба - 1 флакон.
9. Филм за залепване на таблета - 1 бр.
10. Шаблон за конструиране на калибровъчна графика - 1 бр.
11. Тава за реактива - 2 бр.
12. Накрайници за пипети за 5-200 µl - 16 бр.
Опаковката на таблета е пакет от тиково дърво "zip-lock".
Стабилността на работния разтвор FST-T е най-малко 5 дни при температура от +2...8°C.
Съхранявайте комплекта при +2...8°C. Срок на годност - 1 година от датата на производство.
Регистриран в Росздравнадзор.
Водещи руски производители В сегмента на комплекти реагенти за диагностициране на инфекции: - CJSC Vector-Best, Новосибирск; - LLC NPO Diagnostic Systems, Н.Новгород; - CJSC "Ecolab", Elektrogorsk MO. В областта на комплектите реактиви за диагностика на незаразни заболявания и физиологични състояния: - Алкор-Био LLC, Санкт Петербург; - CJSC Vector-Best, Новосибирск; - Хема-Медика LLC, Москва. В сегмента на реагентите за лабораторна диагностика на алергии: - Alkor-Bio LLC, Санкт Петербург; - CJSC Vector-Best, Новосибирск; - NPO Immunoteks LLC, Ставропол. Производство на лабораторно оборудване: - ООО Пикон, Москва
Оценка на степента на възможно заместване на вноса според номенклатурата на изпитванията Номенклатура на аналитите, ед. Одобрен за употреба в Руската федерация Произведен в Руската федерация Степен на възможно заместване на внос Маркери за инфекциозни болести % Маркери за неинфекциозни заболявания и показатели за физиологични състояния % Маркери за алергия % Общо: %
Оценка на степента на заместване на вноса от обема на пазара на продукти за таблет ELISA Пазарни сегменти Обем на пазара в Руската федерация, млн. евро. Обем на продажбите на местни производители, милиони рубли Дял на заместване на вноса Маркери за инфекциозни болести % Маркери за незаразни болести и показатели за физиологични състояния % Маркери за алергия % Оборудване50051% Общо: %
Оценка на степента на заместване на вноса по отношение на обема на пазара на продукти за имунохимични методи като цяло Пазарни сегменти Обем на пазара в Руската федерация, млн. евро. Обем на продажбите на местни производители, милиони рубли Дял на заместване на вноса Маркери за инфекциозни болести % Маркери за незаразни болести и показатели за физиологични състояния % Маркери за алергия % Оборудване % Общо: %
Проблеми на местните производители в индустрията: Методът ELISA става остарял. Наблюдава се постепенна подмяна на местните IF реактиви с вносни хемилуминесцентни; Съществуващата система за обществени поръчки стимулира или закупуването на най-евтините стоки, или вносни продукти с уникални характеристики; Една от основните причини за недостатъчното развитие на местните производители на автоматична техника и локализирането на производството на вносни продукти е митническата административна бариера; Основният скорошен проблем е сривът на системата за държавна регистрация на нови продукти в RZN. Допускането на нови продукти на пазара на практика е спряно и тези чуждестранни производители, които преди това са се регистрирали с дълги списъци, продължават да имат предимство пред местните; Основната причина за технологичната изостаналост е невъзможността да се получи право за производство на съвместими продукти за съвременно оборудване; Ниската степен на консолидация на местните производители и постоянните ценови войни помежду си не позволяват да се разработват модерни продукти и да се конкурират на равни начала с водещи играчи, включително на чуждестранни пазари.
Предложения: В рамките на FCC да се въведе безконкурентна процедура за обществена поръчка на медицински изделия с последващо детайлизирано публикуване. Определянето на лимити за финансиране на базата на средната пазарна цена ще даде определени предимства на местните производители, ще позволи да се ограничи потреблението на скъпи вносни реагенти и по-ефективно да се контролира развитието на бюджетните средства; Насърчаване на разширяването и консолидирането на местните производители с цел концентриране на ресурсите върху разработването на съвременни продукти и навлизане на международния пазар. Една неконкурентна процедура за възлагане на обществени поръчки бързо ще остави на пазара само наистина конкурентни предприятия; Отпускане на държавни средства за стимулиране, на принципите на публично-частното партньорство, разработването на набор от тестове, достатъчни за гарантиране на биологичната безопасност на страната; Митническите изключения следва да бъдат за компоненти, а не за готови продукти; Хармонизиране на системата за регистрация с европейската, където медицински изделия с ниско ниво на потенциален риск се регистрират въз основа на декларация за съответствие.
Зареждане...