A HIV-fertőzés diagnosztizálásának modern módszerei. Modern módszerek a HIV-fertőzés analitikai és diagnosztikai jellemzők diagnosztizálására

1 célkészlet

1.1 A készlet az első és a második típusú (HIV-1 és HIV-2) humán immunhiányos vírusának (HIV-1 és HIV-2) humán immunhiányos vírusának és a szérumban és a humán fűtési plazmának a humán immunhiányos vírusának egyidejű detektálására szolgál, közvetett módszerrel Szilárd fázisú immunoassay.

2 Jellemző és a beállítás elv

2.1 Tárcsázási összetétel:

Az összetevő neve	szám
Immunszorbens.	2 tabletta
Pozitív kontrollminta (K + AT)	1 injekciós üveg, 3 ml
Pozitív kontroll minta AG (K + AG)	3 palack, liofilizált gyógyszer
Negatív kontrollminta (K -)	2 palack 3 ml
Konjugált oldat №1 (Rk-1)	1 injekciós üveg, 12 ml
Konjugátum №2. (Kg-2)	1 injekciós üveg, 1 ml
Megoldás tenyésztési konjugátumhoz2 (PP-K2)	2 palack 18 ml
A szubsztrátum pufferoldat ( Bras)	2 palack 18 ml
Kromogén tmb	1 injekciós üveg, 1 ml
A foszfát-só pufferoldat zsinórral koncentrál (FSB-T × 25)	2 palack 50 ml
Stop reagens	1 injekciós üveg, 12 ml
Fürdőkészlet Reagensekhez a többcsatornás pipettákhoz	1 szett
Ragasztófilm

2.2 Az "IFA-HIV 1.2 AGAT" készlet fő komponensei immunszorbent, az 1. konjugátum és a 2-es konjugátum oldata.

Immunszorbens. Ez egy polisztirol tabletta, amelynek kutak szorbeálódik keverékével rekombináns antigének HIV-1 (GP41) és HIV-2 (GP36) és monoklonális antitestek antigén R24 HIV-1.

Konjugált oldat №1 Ez a címkézett biotin monoklonális humán antitestek keveréke az antigén P24 HIV-1 ellen, és a HIV-1 és a HIV-2 biotin rekombináns fehérjékkel jelölt.

Konjugátum №2. A torma peroxidázzal konjugált streptavidin.

Pozitív kontrollminta - Emberi vér antitesteket tartalmazó szérumot a HIV-1 és HIV-2, amely nem tartalmaz antitesteket hepatitis C vírus és a Treponema pallidum, antigén P24 HIV-1 és a HBs-antigénre, inaktiváljuk, 3 órán át 56 ° C-on.

Pozitív kontroll minta AG - humán vérszérumban tartalmazó natív antigén P24 HIV-1, nem tartalmaz antitesteket a HIV-1, HIV-2, a hepatitis C vírus és Treponema pallidum és a HBs-antigén, melegítve inaktiválódik 3 órán át 56 ° C-on.

Negatív kontrollminta - emberi vér szérum, amely nem tartalmaz anti-HIV-1, HIV-2, HCV, antigén P24 HIV-1 és a HBs-antigénre, inaktiváljuk, 3 órán át 56 ° C-on.

A készlet működésének elvét. Az 1. számú konjugátum oldatának és a szérumfertőzött vér mintáinak megoldásának megoldása során az antigén P24 mindkét specifikus antitesthez kötődik a szilárd fázisban és a monoklonális biotinilezett anti-P24 antitestekkel, amelyek az oldat részét képezik az 1. konjugátum; HIV specifikus antitestek összefüggésben mind a rekombináns HIV-1 és HIV-2 antigéneket, és antigének szerepelnek a konjugátum-oldatot No. 1, alkotó antigén-antitest komplexeket. Az anti-P24-es specifikus antitestek és a P24 antigén immunkomplexeit a 2. konjugátummal detektáljuk. A nem kötött komponensek mosása után peroxidáz szubsztrát (hidrogén-peroxid) és TMB-kromogén oldatát adjuk a kutakhoz.

A peroxidáz reakciót leállítjuk leállító reagenst (0,9 M kénsav oldat), és a festési intenzitást az oldat a lyukakban mért a spektrofotométer, mint az értéke az optikai sűrűség (OP) egy 450 nm hullámhosszon .

Az OP nagysága közvetlenül arányos a specifikus antitestek és / vagy a P24 antigén koncentrációjával a szérumban vagy plazmapintában. Minél magasabb az antitesttartalom és / vagy a P24 antigén a szérummintában, annál nagyobb a festés intenzitása.

2.3 A készlet az elvégzésére szolgál 24 előadások IFA: 1 beállítása - 1 szalag (8 lyuk). Teljes - 192 definíciók, beleértve az ellenőrzési mintákat.

3 óvintézkedések, amikor egy készletet dolgozunk

3.1 Az alkalmazott koncentrációkban lévő összes komponense nem toxikus. Az emberi vér vérének összes vizsgálati szérumával (plazmával), amelyet potenciálisan fertőzöttnek kell tekinteni, képesnek kell tekinteni a HIV, a hepatitis B vírus vagy bármely más vírusfertőzés bármely más okozati oktatószerének fenntartására és továbbítására és folyadékok, az elemzési folyamatban szennyezett különböző berendezések bizonyos biztonsági intézkedéseket igényelnek a készlet használatakor:

A munkát speciálisan felszerelt szobában kell elvégezni;

Személyi védőfelszerelések használatával és az óvintézkedésekkel való megfeleléssel kell dolgoznia a követelményeknek megfelelően, és.

3.2 A kénsavat tartalmazó reagensnek az irritáló hatású. Ha eljutsz a bőrre és a nyálkahártyákra, azonnal öblítse le bő vízzel.

3.3 Ha munkát végeznek, ellátási és kipufogószellőzést kell biztosítani.

3.4 A készletekkel rendelkező laboratóriumokban dolgozó valamennyi személynek kötelező orvosi vizsgálatnak kell lennie a követelményeknek megfelelően.

3.5 Az orvosi hulladék és / vagy fel nem használt készletek ártalmatlanítását a követelményeknek megfelelően kell elvégezni.

4 Szabályok a készlethez való munkavégzésre

4.1 A hamis eredmények kiküszöbölésére a vizsgálati mintákat el kell készíteni és tárolni a bakteriális szektor megelőzésére vonatkozó körülmények között. Szükséges szérummintákat kell megvilágítani, amely aggregált szérumot vagy csapadék komponenseket tartalmaz, centrifugálással (5-10) perc sebességgel 3000 fordulat / perc sebességgel. A szérummintákat 2-8 ° C hőmérsékleten tárolhatjuk, legfeljebb 5 napig. Fagyasztott minták (előnyösen legalább mínusz 20 ° C) tárolhatók legfeljebb 1 év. Szükséges elkerülni a fagyasztási minták ismétlődő ciklusait.

Emlékeztetni kell arra, hogy a hemolízis, a hiperlipidémia, a bakteriális fogaskerék, valamint a hosszú hajú fagyasztás nélküli minták nem alkalmasak elemzésre.

Az eredmények megbízhatósága a következő szabályoktól függ:

A lejárati idő után nem engedélyezett egy készlet használata, valamint a különböző sorozatkészletek összetevőinek összekeverése;

Minden reagens előállítására külön tartályt kell alkalmazni;

A reagensek előállításához használt összes edények nem jelentenek Dees-medencékkel és mosószerrel. Szükség esetén öblítse le vízzel történő ivás futás közben, majd ötször öblítse le desztillált vízzel;

A kromogén TMB és PX-vel való munkához különálló tartályokat kell használni megoldásokhoz, pipettákhoz, ételekhez.

Szükség van a reagensek alapos keverésére;

A tablettaoldatok és reagensek kútjai kitöltése és kiürítése közötti idő legalább 30 másodpercig kell lennie. A lyukakat az IFA nyilatkozatának minden szakaszában nem szabad szárítani;

Ha az alátétet használja a tartály állapotának megfigyelésére a tabletta mosására és a tömlők összekapcsolására szolgáló oldathoz: nem kell bakteriális vagy gombás növekedést jelölni;

Szükséges pipettákat alkalmazni az automatikus cserélhető tippekkel, amelyeket a pipettázási eredmények átlagos dózisának és konvergenciájának igazolásával tanúsítottak (Hiba nem több, mint 3%);

Az adagolók és a munkafelületek kezelése egy olyan oldattal, amely etil-alkohol 70% -os térfogatrátával kezelhető. Ne használjon klór- és más klórtartalmú anyagokat;

A vizsgált és kontrollmintákkal való együttműködéshez ajánlott eldobható pipetta tippeket használni. Mindegyik szérummintát, valamint a toborzási reagenseket külön csúcsaként kell kiválasztani.

A Kazah Köztársaság kutakba vezetett be, amely lehetetlen a tabletta felületének pipetta felületének és a kutakban elhelyezkedő oldatnak.

Az elemzés során el kell kerülni a közvetlen napfényt a munkafelületen.

4.2 A liofilizált komponensek kinyitása és feloldásakor ellenőrizni kell, hogy a palackok fedelén és falaiban ne legyen szárazanyag.

5 Az elemzéshez szükséges eszközök és anyagok

5.1 Spektrofotométer Függőleges szkennelés, amely lehetővé teszi a tabletták optikai sűrűségének mérését a tabletta lyukakban 450 nm hullámhosszon;

Fél- vagy automatikus eszköz a tabletták mosásához (rosszabb);

TS-80 m2 típusa típusa, amely a tulajdonságok (37 ± 1) ° C, vagy hasonló a jellemzők szerint;

Egycsatornás automatikus pipetták cserélhető tippekkel, lehetővé téve a folyadék térfogatát 0,01-5,0 ml;

Pipetták 8 csatorna automatikus cserélhető tippekkel, lehetővé téve a folyadék térfogatát 0,5 ml-re;

2000 ml-es kapacitású dimenziós henger;

Lombik laboratóriumi kapacitás 2000 ml;

20 ml-es kapacitású üvegpalackok;

Reagensek vagy Petri edények fürdője (100 mm átmérő);

Higroszkópos orvosi gyapjú;

Szűrőpapír;

Gumi kesztyű Sebészeti;

Oldat etil-alkohol 70% -os térfogatrátával;

Oldat a 6% -os hidrogén-peroxid tömegrészével;

Ionmentesített vagy desztillált víz;

Tartály szilárd hulladék gyűjtésére;

Tartály a folyékony hulladék elvezetésére.

6 Előkészítés elemzésre

6.1 A reagens beállítása előtt elemzés, távolítsa el a hűtőszekrényből, nyissa ki a doboz fedelét és ellenálljon a beállított alkatrészek hőmérsékleten (18-25) ° C 30 percig.

Minden szérumminta (plazma) és reagens alaposan keverje össze az elemzés előtt.

A felvételi reagensek áramlási sebességét az analízis elemzésére, amelyet az alkalmazott szalagok számával határozunk meg, az A.1. Melléklet A.1. Táblázatában adják meg.

6.2 A tabletta mosásához oldatos előkészítése

Figyelem!Megoldás a tabletta mosásához 15 perccel az elemzés megkezdése előtt!

Ha az FSB-T × 25 palack csapadékot tartalmaz, akkor felmelegedni kell, mielőtt hőmérsékleten (37 ± 1) ° C, amíg a csapadék teljesen fel nem oldódik. 2000 ml-es kapacitású mérőhengerben készítsük el a palack tartalmát FSB-T × 25-vel, majd adjunk hozzá desztillált vizet a címkével. 1250 ml és óvatosan keverje össze az oldatot. Az oldatot (2-8) ° C hőmérsékleten tárolhatjuk 72 órán át.

Az FSB-T × 25 tartalmának intenzíven rázza az FSB-T × 25 tartalmát intenzíven rázza intenzíven (20-30) c-re, válassza ki az oldat kívánt térfogatát (A.1. Táblázat) egy mérőüvegre vagy hengerre, adjunk hozzá A szükséges mennyiségű desztillált víz és keverjük össze az oldatot. A fel nem használt FSB-T × 25 tárolható zárt palackban (2-8) ° C hőmérsékleten a készlet eltarthatósága alatt.

6.3 Immunoszorbens elkészítése

Az immunoszorgens készen áll a használatra.

Nyissa ki a csomagot, és telepítse a szükséges szalagot a keretre. A maradék keverékeket szorosan zárt csomagolásban tárolják, nedvességelnyelővel 2-8 ° C hőmérsékleten 3 hónapig.

6.4 K + AT, K -, RK-1, RR-K2, BRS és Stop reagens előkészítése

K + AT, K -, RK-1, RR-K2, BRS és Stop reagens készen áll a használatra.

Figyelem!Egy palackban RK-1, csapadék lehetséges. Elemzéshez szükség van egy felülúszó használatára.

Fel nem használt RK-1, RR-K2, BRS és stop reagens Az injekciós üvegek kinyitása után zárt injekciós üvegekben tárolható (2-8) ° C alatt a készlet eltarthatósága alatt.

Az injekciós üveg kinyitása után a K + AT és K - záró palackokban (2-8) ° C hőmérsékleten tárolható a készlet eltarthatósága alatt.

6.5 Az oldat elkészítése K + AG

Figyelem!Megoldás K + AG főzés 15 perccel az elemzés megkezdése előtt!

A liofilizált K + AG visszaállítása az injekciós üveg kinyitása előtt, az injekciós üveg vagy a forgalmi dugók falához tapadt részecskék kissé megérinti. Nyissa ki a palackot, és tegyen egy dugót egy száraz felületre. Tegyen 0,8 ml desztillált vizet az injekciós üvegbe. A palackot egy dugóval zárva tartjuk, hogy 10 percig tartsanak 10 percig (18-25) ° C hőmérsékleten, és óvatosan billentse és forgassa a palackot, keverje meg tartalmát a teljes oldódásig, elkerülve a habképződését.

A visszaállított K + AG tárolható zárt palackban (2-8) ° C hőmérsékleten egy hónapig, mínusz 20 ° C hőmérsékleten - hat hónapig. A visszanyert K + AG egyszeri fagyasztás-felolvasztása megengedett.

6.6 A kg-2 megoldás elkészítése a működő tenyésztésben

Az injekciós üvegből KG-2-el, válassza ki az A.1 Táblázatban megadott hangerőt, és transzfer a palackba PP-K2-vel. A palack tartalma alaposan keverjük össze, nem engedélyezve a habképződését.

Abban az esetben, egy vagy több csíkot egy tiszta fiolába, hogy válassza ki a kívánt mennyiségű PP-K2, add kg-2 táblázat szerinti A.1 és keverjük össze az oldatot, megakadályozva a habképződést.

Figyelem! A kg-2 megoldása a működő tenyésztésben közvetlenül használat előtt készül! A CG-2 oldat a működő hígításban 15 percig tárolható (18-25) ° C hőmérsékleten. Csak egy új fürdőt használjon reagensekre és új tippekre!

A KG-2 maradékát zárt palackban (2-8) ° C hőmérsékleten tárolhatjuk a készlet eltarthatósága alatt.

6.7 A szubsztrát munkaoldat előkészítése

A TMB-kromogén palacknak \u200b\u200bmelegítés előtt felmelegednie kell (37 ± 1)° C A kristályok teljes feloldásaig.

A TMB-kromogén injekciós üvegből kiválaszthatja az A.1 térfogatban megadott hangerőt és az injekciós üvegbe történő átvitelét BRC-vel. A palack tartalma alaposan keverjük össze, nem engedélyezve a habképződését.

Ha egy vagy több sztrippelést használunk egy tiszta injekciós üvegben a szükséges BRS-es mennyiség kiválasztásához, adjunk hozzá egy TMB-kromogént az A.1 táblázatnak megfelelően, és keverjük össze az oldatot, ne engedje el a habképződést.

Figyelem! A hordozó munkaoldatát közvetlenül a fényvédett helyen való használat előtt készítjük el! Az oldatot 20 percig tárolhatjuk (18-25) ° C hőmérsékleten fényvédett helyen.

Az oldatot védeni kell a fénytől és a fémek vagy fémionok közötti érintkezésből. Használat előtt a szubsztrátoldatnak színtelennek kell lennie. Az edények, amelyek a reakció során a szubsztrátoldattal érintkeznek, szintetikus detergensek használata nélkül mossuk. Csak egy új fürdőt használjon reagensekre és új tippekre!

A kromogén TMB maradékát zárt palackban tárolhatjuk (2-8) ° C hőmérsékleten a készlet eltarthatósága során.

7 A tabletta mosására vonatkozó követelmények

A mosás minden szakaszában meg kell őrizni a folyadék összes kútjának és teljes eltávolításának (aspirációjának) kitöltését;

Mindegyik kimossa az összes kútot, hogy töltse ki a szélek (0,30-0,35 ml jól), túlfolyó és folyadék áramlása nélkül a szomszédos lyukakból;

Szükségesnek kell ellenállniuk a tabletta mosásához, 30 másodpercig;

Mindegyik törekvéssel óvatosan távolítsa el a folyadék maradékait a lyukakból, úgy, hogy a vázlatot a szűrőpapír mentén a szűrőpapír mentén rögzíti, a polietilén lapon helyezve;

A tabletta rock minőségű mosása hibás eredményekhez vezet.

8 Elemzés

8.1 Bármely két lyuk tabletta add 0,07 ml (70 μl) K +.két másik kutakban 0,07 ml (70 μl) K + ag, Három másik kutak - 0,07 ml (70 μl) K -.

Figyelem!Ha egy ELISA-t ugyanabban a szalagon végez, akkor k - - két kúthoz használható K +-egy lyukhoz, K + AG-hez - egy lyukhoz.

A tabletta kútjainak hátralévő részében 0,07 ml (70 μl) az emberi vér szérum (plazma) vizsgált mintáinak.

Figyelem! Minden mintát egy eldobható csúcs segítségével kell kiválasztani!

8.2 A tabletta összes kutakájához a kontrollminták felett és a vizsgált szérumminták (plazma) azonnal letét 0,05 ml (50 μl) Rk-1.. A kutak tartalma gondosan megérinti a tabletta széleit.

8.3 (37 ± 1) ° Belül 60 perc.

Figyelem!Az inkubálás végéig (1-2) bányák esetében kg-2 oldatot készítsünk a működő hígításban (P 6.6).

8.4 Távolítsa el a lyukak tartalmát egy alátétjal, majd öblítse le a konzolkútokat a tabletta mosásához (P 6.2) hétszer.

8.5 Add hozzá az összes kút tabletta 0,15 ml (150 μl) oldat Kg-2 Munka tenyésztésben (p 6.6).

8.6 Tabletta a filmet, vagy zárja be a fedelet és inkubáljon egy termosztátban egy hőmérsékleten (37 ± 1) ° Belül 10 perc.

8.7 Távolítsa el a tabletták tartalmát egy alátétjal, majd öblítse ki a tabletták kútját a tabletta mosásához (P 6.2) hétszer.

8.8 Az összes kút tabletta 0,15 ml (150 μl) munkaoldat szubsztrát (P 6.7).

A szubsztrátum munkaterülése (6.7. F. lacon kromogén TMB-vel kell felmelegedni, mielőtt (3-5) percet használni (37± 1) ° С a kristályok feloldásához.

8.9 Tabletta a filmet, vagy zárja be a fedelet és inkubáljon egy termosztátban egy hőmérsékleten (37 ± 1) ° TÓL TŐL sötét helyen 15 perc.

Figyelem!A HIV-1 és / vagy HIV-2 és / vagy HIV-2 antitestek, valamint / vagy antigén R24 HIV-1 antitesteket tartalmazó szérummintákban való inkubálás befejezése után az oldat színe színtelen és kék különböző intenzitását változik a antitestek és / vagy antigén a vizsgált szérummintában.

8.10 Állítsa le a peroxidáz reakciót az összes kútba való belépéssel 0,05 ml (50 μl) stop reagens.

Figyelem!A HIV-1 és / vagy HIV-2 antitesteket tartalmazó szérummintákban és / vagy a P24 HIV-1 antitestek, az oldat színének kék színű sárga színű változás történik.

8.11 Legkésőbb (1-2) Min, miután megállította a reakciót, hogy a Wells-ot a Wells-ben a WELFOWH-ot egyidejűleg határozza meg 450 nm.

9 Feldolgozási elemzés eredményei

9.2 Az eredmények csak akkor tekinthetők, ha:

Az OPS érték - nem haladja meg a 0,2 OE-t;

Az OPC különálló értéke nem térhet el az OPS-től - több mint 30% -kal. Ha az OP három értékének egyike - kijön ebből a határértékből, akkor ki kell zárni az opciók számításából -. Ha az opció három értékének kettője - jön ki erre a határértékre, akkor az elemzést meg kell ismételni az új beállított reagenseken;

Az OPS K + értéke több mint 1,0 oh;

Az OPS K + AG értéke több mint 1,0 oe.

9.3 A fenti feltételek mellett kiszámolja a kritikus értéket (OPKRIT.), OE az (1) képlet szerint:

Opkrit. \u003d OPS - + 0,14 (1).

10 Analitikai és diagnosztikai jellemzők

Érzékenység Reagensek készlete IFA-HIV 1.2 AGAT Az Antigen P24 HIV-1 azonosítása -

Specifitás Reagensek készlete IFA-HIV 1.2 AGAT - 100% -os szabvány (-) HIV. Standard szérumpanel, amely nem tartalmaz antitesteket az első és a második típusú (HIV-1,2) és a HIV-1 antigén (P24) humán immunhiányos vírusára (P24). Software42-28-214-02p.Katuins-20. CJSC "MBS".

11 formanyomtatvány formája

11.1 A készlet öt beállítással készül a konfigurációhoz:

1 Állítsa 1p - elemzés kézzel. A készlet úgy van kialakítva, hogy 12 IFA teljesítményt tartson az összecsukható táblagépen: 1 Beállítás - 1 szalag (8 lyuk). Összesen - 96 definíció, beleértve az ellenőrzési mintákat;

2 Állítsa be a 2M-elemzést manuális módon. A készletet 2 IFA teljesítményre tervezték monolit tablettákon: 1 formuláció - 1 tabletta. Összesen - 192 definíció, beleértve az ellenőrzési mintákat;

3 Állítsa be a 2P-t. - Kézi elemzés. A készlet úgy van kialakítva, hogy tartsa 24 előadások IFA 2. Összecsukhatóx tabletták: 1 Beállítás - 1 szalag (8 lyuk). Teljes - 192 Fogalommeghatározások, beleértve az ellenőrzési mintákat;

4 KIT A2M - Vezető elemzés automatikus elemzőn. A készletet 2 IFA teljesítményre tervezték monolit tablettákon: 1 formuláció - 1 tabletta. Összesen - 192 definíció, beleértve az ellenőrzési mintákat;

5 A2R SET - Automatikus analizátoron végzett elemzés. A készletet 24 IFA teljesítményre tervezték, 2 összecsukható lemezen: 1 szakasz 1 csík (8 lyuk). Összesen - 192 Fogalommeghatározások, beleértve az ellenőrzési mintákat.

12 tárolási és alkalmazási feltételek

12.1 A készletet tiszta, nedvességtől védve, a helyiség fényétől védve, 2-8 ° C hőmérsékleten (2-8) ° C alatt a teljes lejárati idő alatt. Ne fagyassza le a készlet összetevőit.

12.2 Megbízható eredmények beszerzése érdekében meg kell felelnie a készlet alkalmazásának utasításainak.

12.3 A készlet eltarthatósága - 12 hónap.

A Függelék.

A.1. Táblázat - Elisa reagensfogyasztás

reagens, ml

A használt szalagok száma, PC-k.

A tabletta mosásához szükséges oldat előkészítése

FSB-T × 25

Desztillált víz

A kg-2 megoldásának előkészítése a működő tenyésztésben

PR-K2.

Főzés munka szubsztrát

Kromogén tmb

Bibliográfia

	Egészségügyi szabályok	A Fehérorosz Köztársaság Egészségügyi Minisztériumának rendelete 1998. december 16-án, 351 A HIV / AIDS-re vonatkozó kérdésekre vonatkozó osztályok felülvizsgálatáról
	A Fehérorosz Köztársaság Egészségügyi Minisztériumának rendelete 2002. november 25-én 165. A fertőtlenítés és a sterilizálás során az egészségügyi intézmények
	A Fehérorosz Köztársaság Egészségügyi Minisztériumának megoldása 2010. április 04. № 47 A Fehérorosz Köztársaság Egészségügyi Minisztériumának egyes döntéseinek a munkakörülményekre vonatkozó kötelező orvosi vizsgálatok elvégzésére vonatkozó utasítások jóváhagyásakor

Egyedülálló rendszerleíró adatbázis

Orvosi regisztrációs szám

FSR 2011/10182.

Az orvosi termék állami nyilvántartásának időpontja

Orvosi termék neve

Milab-Ifa-HIV-Agate Reagensek Reagensek Vizsgálati rendszer IMMUNUCENTIVATE VÉGREHAJTÁSÁNAK ANTIFIEL az emberi immunhiányt okozó vírusok az 1. és 2. típusú (HIV-1 és HIV-2), HIV-1 csoport O és antigén R24 HIV-1 TU 9398 -187 -05941003-2017
részben: - Immunoszorbens - tabletta polisztirol 96 - jól összecsukható a sztripperekhez (vagy kutakhoz), amelynek kútjai vannak sorozódott mesterséges antigének - GP160, GP41, P31 HIV-1, GP41 HIV-1 csoport O, GP36 HIV-2 és antitestek Antigen P24 HIV-1: 1 (1 tabletta) beállítása (2 tabletta), beállítva 3 (5 tabletta), - konjugátum-1: Kit 1 (1 vaku 1,2 ml), 2 (1 fl. 1,2 ml) , 3. ábra (1 fl. 3,6 ml vagy 3 fl. 1,2 ml), - konjugátum-2: 1-es készlet (1 fl. 2,0 ml), 2 (1 fl. 2,0 ml) beállítva, 3 (1 fl. 4,0 ml) vagy 2 fl. 2,0 ml), - RRK-1 - oldat tenyészkonjugátum-1: 1-es készlethez (1 fl. 12,0 ml), 2 (1 fl. 12,0 ml) beállítva, 3 (3 fl. 12,0 ml) , - RRK-2 - A tenyésztési konjugátum-2 oldat: 1. készlet (1 fl. 20,0 ml), 2 (1 fl. 20,0 ml) beállítva, 3 (2 fl. 20,0 ml), - K + AT - A Vezérlési pozitív minta, amely antitesteket tartalmaz a HIV-hez: 1 készlet (1 fl. 2,0 ml), 2 (1 fl. 2,0 ml) beállítva, 3 (1 fl. 4,0 ml vagy 2 fl. 2,0 ml), - K + AG - Con Troller pozitív minta, amely mesterséges antigént tartalmaz P24 HIV-1: Kit 1 (1 fl. 2,0 ml), 2-es készlet (1 fl. 2,0 ml), 3 (1 fl. 4,0 ml vagy 2 pl. 2,0 ml), - K- szabályozható negatív minta: 1. készlet (1 fl. 2,5 ml), Set 2 (1 fl. 2,5 ml), 3 (1 fl. 5,0 ml vagy 2 fl. 2,5 ml), - PR-mosási oldat: 1 készlet (1 fl. 50,0 ml), 2 (1 fl. 120,0 ml) ), 3 (2 fl. 120,0 ml), - stop reagens: 1 készlet (1 fl. 25,0 ml), 2 (2 fl. 25,0 ml) beállítva, 3 (2 fl. 50,0 ml vagy 4 pl 25,0 ml) , - SAT - szubsztrátpufferoldat: 1. készlet (1 fl. 25, 0 ml), beállítva 2 (1 fl. 25,0 ml), beállítani 3 (2 pl. 50,0 ml vagy 3 pl. 25,0 ml), - TMB - oldat 3,3 ", 5,5" -tetrametil-benzidin: 1. készlet (1 fl. 2,5 ml), 2 (1 fl. 2,5 ml) beállítva, 3 (2 fl. 3,5 ml vagy 3 fl. 2,5 ml). Tartozékok: - Polisztirolba 96-lyukú lemezek: Set 1 (1 db.), Set 2 (2 db), beállítva 3 (5 db) vagy - védőfóliát az IFA tablettákhoz: Set 1 (2 db.), Set 2 (4 db), beállítva 3 (10 db), - eldobható tippek: készlet 1 (16 db), beállítva 2 (32 db), beállítva 3 (80 db) - Műanyag fürdők a folyékony reagensekhez: Set 1 (2 db), beállítva 2 (4 db), beállítva 3 (10 db), polietilén csomagok zip-lock zárral: 1 (1 db.) Beállítva 2 (2 db). (3 db.).

A szervezet neve - az orvosi termék kérelmezője

A szervezet-pályázó orvosi termék helye

A pályázó szervezet jogi címe

603014, Oroszország, Nizhny Novgorod, ul. Comintern, d. 47

Orvosi termék vagy orvosi termék gyártójának neve

NPO diagnosztikai rendszerek

Az orvosi termék vagy szervezet szervezeti termelője - az orvosi termék gyártója

603093, Oroszország, Nizhny Novgorod, ul. Yablonaeva, 22, A / I 69

Orvosi termék vagy szervezet szervezeti termelője - az orvosi termék gyártója

A HIV-fertőzés időszerű diagnosztizálása rendkívül fontos intézkedéssé válik, hiszen korábban a kezelés kezdete nagymértékben előre meghatározhatja a betegség további fejlődését és kiterjesztheti a beteg életét. Az elmúlt években jelentős előrelépés figyelhető meg a szörnyű betegség azonosításában: fejlettebb, a felmérési módszerek a régi tesztrendszerek helyettesítésére kerülnek, és pontosságuk jelentősen növekszik.

Ebben a cikkben elmondjuk a HIV-fertőzés diagnosztizálásának modern módszereit, amely hasznos a probléma időben történő kezeléséhez és a betegség normális életminőségének fenntartásához.

HIV diagnosztikai technikák

Oroszországban szabványos eljárást végeznek a HIV-fertőzés diagnosztizálására, amely két szintet tartalmaz:

• ELISA tesztrendszer (szűrési elemzés);
• immunrendszer (Ib).

Más technikák alkalmazhatók a diagnosztikára is:

• expressz tesztek.

IFA tesztrendszer

A diagnosztika első szakaszában egy szűrővizsgálatot (ELISA) alkalmazzák a HIV-fertőzés kimutatására, amely a laboratóriumokban létrehozott HIV-fehérjékre épül, amely a testben keletkező specifikus antitesteket rögzíti a fertőzésre válaszul. A reagensek (enzimek) kölcsönhatása után a vizsgálati rendszer megváltoztatja az indikátor színét. Ezután ezeket a színváltozást speciális hardveren dolgozzák fel, amely meghatározza az elvégzett elemzés eredményét.

Az ilyen IFA tesztek a HIV-fertőzés bevezetése után néhány héttel később megmutathatják az eredményt. Ez az elemzés nem határozza meg a vírus jelenlétét, de feltárja az antitestek termelését. Néha az emberi testben a HIV antitestek előállítása 2 hét után kezdődik a fertőzés területén, de a legtöbb ember későbbi határidőkben, 3-6 hét után készül.

Az IFA tesztek négy generációja különböző érzékenységgel rendelkezik. Az utóbbi években a III és IV generációk vizsgálati rendszereit gyakran használják, amelyek szintetikus peptideken vagy rekombináns fehérjéken alapulnak, és nagyobb specifitással és pontossággal rendelkeznek. Felhasználhatók a HIV-fertőzés diagnosztizálására, a HIV-prevalencia és a biztonság ellenőrzésére, ha ellenőrzik a donor vért. Az IFA tesztrendszerei III és IV generáció pontossága 93-99% (a nyugati országokban termelt érzékeny tesztek - 99%).

Az IFA teszt végrehajtásához 5 ml vért veszünk a beteg vénájából. Az utolsó étkezés és az analízis között legalább 8 órát kell elvégeznie (szabályként, azt egy üres gyomorban kell elvégezni). Ez a vizsgálat nem ajánlott az állítólagos fertőzés után 3 héttel az állítólagos fertőzés után (például a nem védett szexuális közösülés után új szexuális partnerrel).

Az IFA tesztek eredményeit 2-10 nap után kapjuk meg:

• negatív eredmény: jelzi a HIV-fertőzés hiányát, és nem igényel hozzáférést egy szakemberhez;
• hamis negatív eredmény: a fertőzés (legfeljebb 3 hétig) megfigyelhető (legfeljebb 3 hét), az AIDS későbbi szakaszaiban, a mentességről és helytelenül végzett vérkészítéssel rendelkező támogatások későbbi szakaszaiban;
• hamis-pozitív eredmény: bizonyos betegségekben megfigyelhető és helytelenül elvégzett vérkészítéssel;
• pozitív eredmény: A HIV-fertőzés fertőzését jelzi, megköveteli az IB és a páciens forgalmát az AIDS-központ szakemberéhez.

Miért ad egy IFA teszt hamis pozitív eredményeket?

Az IFA-tesztek hamis-pozitív eredményei a HIV-ről a helytelen vérfeldolgozással vagy az ilyen körülmények között és betegségekben szenvedő betegeknél megfigyelhetők:

• myeloma multiplex;
• az Epstein-Barr vírus által kiváltott fertőző betegségek;
• állapot után;
• autoimmun betegség;
• a terhesség hátterében;
• a vakcinázás után.

A fentiekben ismertetett vér, a nemspecifikus térhálósító antitestek jelen lehetnek, amelyek előállítása nem vált ki a HIV-fertőzés.

Az utóbbi években, a frekvencia a hamis pozitív eredmények jelentősen csökkent használata miatt a generációs vizsgálati rendszerek III és IV, amelyek érzékenyebbek peptid és rekombináns fehérjék (szintetizáljuk őket in vitro génsebészeti). Az ilyen IFA tesztek használatának megkezdése után a hamis pozitív eredmények gyakorisága jelentősen csökkent, és körülbelül 0,02-0,5%.

A hamis pozitív eredmény azonosítása nem jelenti azt, hogy egy személy HIV-vel fertőzött. Ilyen esetekben, akik egy másik IFA tesztet javasolnak (szükséges IV generáció).

A páciens véreit a referencia vagy a választottbírósági laboratóriumba küldi egy "ismétlés" megjegyzéssel, és az IFA tesztrendszer IV generációjára vizsgálták. Ha egy új elemzés eredménye negatív, akkor az első eredményt hibás (hamis pozitív), és az IB-t nem hajtják végre. A második vizsgálat során pozitív vagy kétes eredmény esetén a páciens szükségszerűen hozzárendeli az IB-t 4-6 hét után, hogy megerősítse vagy megjavítsa a HIV-fertőzést.

Immunbloting

A HIV-fertőzés végső diagnózisa csak az immunblot (Ib) pozitív eredményének (IB) pozitív eredményét követően telepíthető. Nitrocellulóz-szalagot használ, amelyen vírusfehérjéket alkalmaznak.

Az IB vérkeresztezését vénákból végezzük. Ezután a speciális feldolgozásnak van kitéve, és a szérumban lévő fehérjék különálló gélben vannak elválasztva töltésük és molekulatömege szerint (manipulációt végezzünk speciális berendezésen az elektromos mező hatása alatt). Nitrocellulóz szalagot vetünk fel egy vérszérum gélre és blokkolásra ("károsodás") egy speciális kamrában. A szalagot feldolgozzák, és ha vannak antitestek a HIV-hez az alkalmazott anyagokban, akkor az IB antigén csíkokhoz kapcsolódnak, és vonalakként manifesztálják magukat.

Az IB pozitívnak tekinthető, ha:

• az amerikai CDC kritériumok szerint - két vagy három vonal GP41, P24, GP120 / GP160;
• az amerikai FDA kritériumai szerint - a szalagon két, P24, P31 és egy GR41 vagy GR120 / GR160 vonal van.

Az esetek 99,9% -ában az IB pozitív eredménye HIV-fertőzést jelez.

A vonalak hiányában - IB negatív.

A GR160, GR120 és GR41- IB vonalak azonosításakor kétséges. Ez az eredmény kimutatható:

• onkológiai betegségek;
• terhesség;
• gyakori vér transzfuszok.

Ilyen esetekben ajánlott újbóli tanulmányt végrehajtani egy másik cég halmazával. Ha további IB után az eredmény továbbra is kétséges, akkor hat hónapig kell megfigyelni (az IB-t 3 havonta tartják).

Polimeráz láncreakció

A PCR tesztje meghatározhatja a vírus RNS-jét. Az érzékenysége elég magas, és lehetővé teszi a HIV-fertőzés azonosítását 10 nap elteltével a fertőzés után. Bizonyos esetekben a PCR hamis pozitív eredményeket adhat, mivel nagy érzékenysége reagálhat az antitestekre más fertőzésekre.

Ez a diagnosztikai technika drága, speciális felszerelést és magas szakembereket igényel. Ezek az okok nem teszik lehetővé, hogy a lakosság tömeges tesztelésével végezzük.

A PCR ilyen esetekben érvényes:

• a HIV-fertőzött anyáktól származó újszülöttek HIV azonosítása;
• a HIV azonosítása az "ablakidőszakban" vagy kétes IB-vel;
• a HIV koncentrációjának szabályozása a vérben;
• a donor vérkutatáshoz.

Csak a PCR-teszten, a HIV nem készült, de további diagnosztikai módszerként történik ellentmondásos helyzetek megoldására.

Expressz módszerek

Expressz tesztek, amelyek eredményeit 10-15 perc elteltével értékelhetjük a HIV diagnosztizálásának egyik innovációja. A leghatékonyabb és pontos eredményeket a kapilláris áramlás elvén alapuló immunkromatográfiás vizsgálatok alkalmazásával állítjuk elő. Különleges csíkok, amelyeken a vért alkalmazzák vagy más vizsgált folyadékot (nyál, vizelet). Ha HIV-hez van antitestek, 10-15 perccel később, egy színes és vezérlőcsík jelenik meg a teszten - pozitív eredmény. Negatív eredménnyel - csak a vezérlőcsík jelenik meg.

Az IFA tesztek után az expressz tesztek eredményeit az IB analízissel meg kell erősíteni. Csak ezt követően diagnosztizálható HIV-fertőzéssel.

Vannak kifejezett készlet az otthoni teszteléshez. Teszt Orasure Technologies1 (USA) jóváhagyott FDA, eladott vény nélkül, és felhasználható HIV azonosítására. A tesztelés után pozitív eredmény esetén a beteg ajánlott egy speciális középpontban felmérésben, hogy megerősítse a diagnózist.

A fennmaradó hazai teszteket még nem hagyták jóvá az FDA, és eredményük nagyon kétes lehet.

Annak ellenére, hogy az expressz tesztek alacsonyabbak az IV generációk IFA tesztjeinél, széles körben használják a további népességvizsgálathoz.

A HIV-fertőzés azonosítása bármely poliklinika, CRH vagy szakosodott AIDS-központokban. Oroszországban teljesen bizalmasak vagy névtelenül vannak. Minden beteg számíthat az orvosi vagy pszichológiai tanácsadás megszerzésére analízis előtt vagy után. Csak a kereskedelmi orvosi intézményekben fizetnie kell a HIV-teszteket, és teljesülnek a nyilvános klinikákban és a kórházakban.

Arról, hogy milyen módon fertőzhet fertőzött HIV-fertőzéssel, és mely mítoszok léteznek a fertőzött lehetőségekről, olvashatók