Ar perisinusoidinės ląstelės gali būti regioninės kepenų kamieninės ląstelės? Kepenų ito ląstelių poveikio kamieninėms ląstelėms tyrimas

Genai ir ląstelės: V tomas, Nr. 1, 2010, psl.: 33-40

Autoriai

Gumerova A.A., Kiyasov A.P.

Regeneracinė medicina yra viena iš sparčiausiai besivystančių ir perspektyvių medicinos sričių, kuri remiasi iš esmės nauju požiūriu į pažeisto organo atkūrimą stimuliuojant ir (ar) naudojant kamienines (pirmtakes) ląsteles regeneracijai paspartinti. Norint pritaikyti šį metodą praktikoje, būtina žinoti, kas yra kamieninės ląstelės, ypač regioninės kamieninės ląstelės, koks jų fenotipas ir stiprumas. Daugelio audinių ir organų, tokių kaip epidermis ir skeleto raumenys, kamieninės ląstelės jau buvo nustatytos ir aprašytos jų nišos. Tačiau kepenys – organas, kurio regeneraciniai gebėjimai žinomi nuo seno, kol kas neatskleidė savo pagrindinės paslapties – kamieninės ląstelės paslapties. Šioje apžvalgoje, remdamiesi savo ir literatūros duomenimis, aptariame iškeltą hipotezę, kad perisinusoidinės žvaigždžių ląstelės gali pretenduoti į kepenų kamieninių ląstelių vaidmenį.

Perisinusoidinės kepenų ląstelės (Ito ląstelės, žvaigždžių ląstelės, lipocitai, riebalus kaupiančios ląstelės, vitaminą A kaupiančios ląstelės) yra vienas paslaptingiausių kepenų ląstelių tipų. Šių ląstelių tyrimo istorija siekia daugiau nei 130 metų ir vis dar yra daug daugiau klausimų, susijusių su jų fenotipu ir funkcijomis, nei atsakymų. Ląsteles 1876 m. aprašė Kupfferis, pavadinęs žvaigždžių ląstelėmis ir priskirtas makrofagams. Vėliau tikri sėslūs kepenų makrofagai gavo Kupfferio vardą.

Visuotinai pripažįstama, kad Ito ląstelės yra Disse erdvėje, tiesiogiai kontaktuodamos su hepatocitais, kaupia vitaminą A ir gali gaminti tarpląstelinės medžiagos makromolekules, o taip pat, turėdamos kontraktilinį aktyvumą, reguliuoja kraujotaką sinusoidiniuose kapiliaruose, tokiuose kaip pericitai. Gyvūnų Ito ląstelių identifikavimo auksinis standartas yra juose esančio citoskeleto tarpinio gijų baltymo, būdingo raumeniniam audiniui – desminui, identifikavimas. Kiti gana dažni šių ląstelių žymenys yra neuronų diferenciacijos žymenys – rūgštinis glijos fibrilinis baltymas (Glial fibrillary acid protein, GFAP) ir nestinas.

Daugelį metų Ito ląstelės buvo vertinamos tik iš jų dalyvavimo kepenų fibrozės ir cirozės vystyme. Taip yra dėl to, kad dėl kepenų pažeidimo šios ląstelės visada suaktyvėja, o tai reiškia, kad padidėja desmino ekspresija, proliferacija ir transdiferenciacija į miofibroblastų tipo ląsteles, išreiškiančias lygiųjų raumenų aktiną (--GMA) ir sintezuojant didelius kiekius. tarpląstelinės medžiagos, ypač I tipo kolageno. Būtent tokių suaktyvėjusių Ito ląstelių veikla, daugelio tyrinėtojų nuomone, lemia fibrozės ir kepenų cirozės vystymąsi.

Kita vertus, pamažu kaupiasi faktai, leidžiantys pažvelgti į Ito ląsteles iš visiškai netikėtų pozicijų, būtent kaip į svarbiausią mikroaplinkos komponentą hepatocitų, cholangiocitų ir kraujo ląstelių vystymuisi kepenų hematopoezės stadijoje. ir, be to, kaip galimas kamienines (pirmtakes) kepenų ląsteles. Šios apžvalgos tikslas – išanalizuoti dabartinius duomenis ir nuomones apie šių ląstelių prigimtį ir funkcinę reikšmę, įvertinant jų galimą priklausymą kepenų kamieninių (progenitorinių) ląstelių populiacijai.

Ito ląstelės yra svarbus parenchimos atsistatymo dalyvis kepenų regeneracijos metu dėl jų gaminamų ekstraląstelinės matricos makromolekulių ir jos remodeliavimosi, taip pat augimo faktorių gamybos. Pirmosios abejonės dėl nusistovėjusios teorijos, kuri Ito ląsteles laiko išskirtinai pagrindinėmis kepenų fibrozės kaltininkėmis, teisingumu, atsirado, kai buvo nustatyta, kad šios ląstelės gamina nemažai morfogeninių citokinų. Tarp jų didelę grupę sudaro citokinai, kurie yra potencialūs mitogenai hepatocitams.

Svarbiausias šioje grupėje yra hepatocitų augimo faktorius – hepatocitų mitogenas, būtinas ląstelių dauginimuisi, išlikimui ir judrumui (dar žinomas kaip sklaidos faktorius – sklaidos faktorius. Šio augimo faktoriaus ir (ar) jo C-met receptoriaus defektas pelėms sukelia kepenų hipoplaziją ir jos parenchimos sunaikinimą dėl hepatoblastų proliferacijos slopinimo, padidėjusios apoptozės ir nepakankamo ląstelių adhezijos.

Be hepatocitų augimo faktoriaus, Ito ląstelės gamina kamieninių ląstelių faktorių. Tai buvo parodyta kepenų regeneracijos modelyje po dalinės hepatektomijos ir 2-acetoaminofluoreno poveikio. Taip pat buvo nustatyta, kad Ito ląstelės išskiria transformuojantį augimo faktorių ir epidermio augimo faktorių, kurie vaidina svarbų vaidmenį tiek hepatocitų proliferacijoje regeneracijos metu, tiek stimuliuoja pačių Ito ląstelių mitozę. Hepatocitų dauginimąsi taip pat skatina Ito ląstelių ekspresuojamas mezenchiminis morfogeninis baltymas epimorfinas, atsirandantis jose po dalinės hepatektomijos, bei pleiotropinas.

Be parakrininių hepatocitų ir Ito ląstelių sąveikos mechanizmų, tam tikrą vaidmenį atlieka ir tiesioginiai tarpląsteliniai šių ląstelių kontaktai su hepatocitais. Tarpląstelinių kontaktų tarp Ito ląstelių ir epitelio pirmtakų svarba buvo įrodyta in vitro, kai auginimas mišrioje kultūroje buvo veiksmingesnis pastarųjų diferenciacijai į albuminą gaminančius hepatocitus, nei kultivuojant ląsteles, atskirtas membrana, kai jos galėjo keistis tik tirpiais. veiksniai per kultūrinę aplinką. Išskirta iš pelės vaisiaus kepenų 13,5 dienos. nėštumo metu, mezenchiminės ląstelės, kurių fenotipas Thy-1 +/C049!±/vimentin+/desmin+/ --GMA+, užmezgus tiesioginius tarpląstelinius kontaktus, paskatino primityvių kepenų endoderminių ląstelių populiacijos diferenciaciją - į hepatocitus (turinčius glikogeną, ekspresuojančius mRNR). tirozino aminotransferazės ir triptofanoksigo pavadinimai). Thy-1+/desmin+ mezenchiminių ląstelių populiacija neišreiškė hepatocitų, endotelio ir Kupffer ląstelių žymenų ir, greičiausiai, buvo atstovaujama Ito ląstelių. In vivo žiurkės ir žmogaus prenatalinėse kepenyse buvo pastebėtas didelis desminui teigiamų Ito ląstelių tankis ir jų vieta glaudžiai kontaktuojant su besiskiriančiais hepatocitais. Taigi, visi šie faktai leidžia daryti išvadą, kad šis ląstelių tipas yra svarbiausias mikroaplinkos komponentas, būtinas normaliam hepatocitų vystymuisi ontogenezėje ir jų atsistatymui reparacinės regeneracijos procese.

Pastaraisiais metais buvo gauta duomenų, rodančių reikšmingą Ito ląstelių poveikį hematopoetinių kamieninių ląstelių diferenciacijai. Taigi Ito ląstelės gamina eritropoetiną ir neurotrofiną, kurie turi įtakos ne tik kepenų epitelio ląstelių, bet ir hematopoetinių kamieninių ląstelių diferenciacijai. Žiurkių ir žmonių vaisiaus kraujodaros tyrimas parodė, kad būtent šios ląstelės sudaro kraujodaros salelių mikroaplinką kepenyse. Ito ląstelės ekspresuoja kraujagyslių ląstelių adhezijos molekulę-1 (VCAM-1), pagrindinę molekulę, palaikančią kraujodaros pirmtakų sukibimą su kaulų čiulpų stromos ląstelėmis. Be to, jie taip pat išreiškia stromos faktorių-1 – (Stromal derived factor-1 –, SDF-1 –) – potencialų chemoatraktantą kraujodaros kamieninėms ląstelėms, skatinančius jų migraciją į kraujodaros vietą dėl sąveikos su specifiniu receptoriumi Cystein- X-cisteino receptorius 4 (CXR4), taip pat homeobox baltymas Hlx, esant defektui, kai sutrinka ir pačių kepenų vystymasis, ir kepenų hematopoezė. Labiausiai tikėtina, kad VCAM-1 ir SDF-1 a ekspresija vaisiaus Ito ląstelėse skatina kraujodaros pirmtakų ląstelių įdarbinimą vaisiaus kepenyse tolesnei diferenciacijai. Ito ląstelių sukaupti retinoidai taip pat yra svarbus hematopoetinių ląstelių ir epitelio morfogenezės veiksnys. Neįmanoma nepaminėti Ito ląstelių poveikio mezenchiminėms kamieninėms ląstelėms. Ito ląstelės, išskirtos iš žiurkių kepenų ir visiškai suaktyvintos, po 2 savaičių moduliuoja mezenchiminių kamieninių ląstelių (daugiapotencinių mezenchiminių stromos ląstelių) diferenciaciją kaulų čiulpuose į hepatocitus panašias ląsteles (akumuliuojančias glikogeną ir ekspresuojančias tetazę bei fosfoenolpiruvato karboksikinazę). bendras auginimas.

Taigi, sukaupti moksliniai faktai leidžia daryti išvadą, kad Ito ląstelės yra vienas iš svarbiausių ląstelių tipų, būtinų kepenų vystymuisi ir regeneracijai. Būtent šios ląstelės sukuria mikroaplinką tiek vaisiaus kepenų hematopoezei, tiek hepatocitų diferenciacijai prenatalinio vystymosi metu, taip pat epitelio ir mezenchiminių pirmtakų diferenciacijai į hepatocitus in vitro sąlygomis. Šiuo metu šie duomenys nekelia abejonių ir yra pripažinti visų kepenų tyrinėtojų. Kas tada buvo atspirties taškas straipsnio pavadinime iškeltai hipotezei?

Visų pirma, jo atsiradimą palengvino kepenų aptikimas ląstelių, vienu metu ekspresuojančių tiek epitelio hepatocitų žymenis, tiek mezenchiminius Ito ląstelių žymenis. Pirmasis darbas šioje srityje buvo atliktas tiriant žinduolių kepenų prenatalinę histo- ir organogenezę. Būtent vystymosi procesas yra pagrindinis įvykis, kurio tyrimas leidžia natūraliomis sąlygomis atsekti pirminio galutinio įvairių organo ląstelių tipų fenotipo formavimosi dinamiką naudojant specifinius žymenis. Šiuo metu tokių žymeklių asortimentas gana platus. Darbuose, skirtuose šiai problemai tirti, buvo naudojami įvairūs mezenchiminių ir epitelio ląstelių, atskirų kepenų ląstelių populiacijų, kamieninių (įskaitant kraujodaros) ląstelių žymenys.

Atliktų tyrimų metu nustatyta, kad žiurkių vaisių desminui teigiamos Ito ląstelės praeina 14-15 dienų. nėštumo metu išreiškiami epitelio žymenys, būdingi hepatoblastams, tokiems kaip citokeratinai 8 ir 18. Kita vertus, hepatoblastai tuo pačiu vystymosi metu išreiškia ląstelių žymeklį Ito desmin. Būtent tai leido manyti, kad kepenyse intrauterinio vystymosi metu yra ląstelių, turinčių pereinamąjį fenotipą, išreiškiantį ir mezenchiminius, ir epitelio žymenis, ir todėl apsvarstyti galimybę sukurti Ito ląsteles ir hepatocitus iš to paties šaltinio ir ( arba) laikyti šias ląsteles vienu ir tuo pačiu ląstelių tipu skirtinguose vystymosi etapuose. Tolesni histogenezės tyrimo tyrimai, atlikti su žmogaus embriono kepenų medžiaga, parodė, kad 4-8 savaites. Žmogaus kepenų vaisiaus vystymuisi Ito ląstelės išreiškė 18 ir 19 citokeratinus, o tai patvirtino dvigubas imunohistocheminis dažymas, o hepatoblastuose buvo pastebėtas silpnas teigiamas desmino dažymas.

Tačiau 2000 m. paskelbtame darbe autoriams nepavyko aptikti desmino ekspresijos hepatoblastuose pelių vaisiaus kepenyse ir E-kadherino bei citokeratinų Ito ląstelėse. Autoriai gavo teigiamą citokeratinų dažymą Ito ląstelėse tik nedidele dalimi atvejų, kuriuos jie susiejo su nespecifiniu pirminių antikūnų kryžminiu reaktyvumu. Šių antikūnų pasirinkimas kelia tam tikrą sumišimą – darbe buvo naudojami antikūnai prieš vištų desminą ir galvijų citokeratinus 8 ir 18.

Be desmino ir citokeratinų, kitas mezenchiminis žymeklis, kraujagyslių ląstelių adhezijos molekulė VCAM-1, yra įprastas Ito ląstelių ir pelių bei žiurkių vaisiaus hepatoblastų žymuo. VCAM-1 yra unikalus paviršiaus žymeklis, išskiriantis Ito ląsteles nuo miofibroblastų suaugusių žiurkių kepenyse, taip pat esantis keliose kitose mezenchiminės kilmės kepenų ląstelėse, tokiose kaip endoteliocitai arba miogeninės ląstelės.

Kitas įrodymas, patvirtinantis nagrinėjamą hipotezę, yra Ito ląstelių, išskirtų iš suaugusių žiurkių kepenų, mezenchiminės epitelio transdiferenciacijos (konversijos) galimybė. Pažymėtina, kad literatūroje daugiausiai kalbama apie epitelio-mezenchiminę, o ne mezenchiminę-epitelinę transdiferenciaciją, nors abi kryptys pripažįstamos kaip galimos, ir dažnai terminas „epitelinis-mezenchiminis transdiferenciacija“ vartojamas kalbant apie transdiferenciaciją bet kuria iš krypčių. Išanalizavę mRNR ir atitinkamų baltymų ekspresijos profilį Ito ląstelėse, išskirtose iš suaugusių žiurkių kepenų po anglies tetrachlorido (CTC) poveikio, autoriai jose aptiko ir mezenchiminius, ir epitelio žymenis. Tarp mezenchiminių žymenų nestinas, --GMA, matricinė metaloproteinazė-2 (Matrix Metalloproteinase-2, MMP-2), o tarp epitelio žymenų – raumenų piruvato kinazė (Muscle pyruvate kinase, MRK), būdinga ovalinėms ląstelėms, citokeratinas 19. , a-FP, E-kadherinas, taip pat transkripcijos faktorius Hepatocitų branduolinis faktorius 4- (HNF-4-), būdingas ląstelėms, kurioms lemta tapti hepatocitais. Taip pat nustatyta, kad pirminėje žmogaus epitelio kepenų progenitorinių ląstelių kultūroje vyksta Itonestino ląstelių žymenų mRNR ekspresija, GFAP – epitelio pirmtakai koekspresuoja ir epitelio, ir mezenchiminius žymenis. Mezenchiminės epitelio transdiferenciacijos galimybę patvirtina Ito ląstelėse atsiradimas su integrinu susietos kinazės (ILK), fermento, būtino tokiai transdiferenciacijai, atsiradimas.

Mezenchiminė epitelio transdiferenciacija taip pat buvo atskleista mūsų in vitro eksperimentuose, kuriuose buvo pasirinktas originalus metodas, siekiant auginti gryną Ito ląstelių populiaciją, išskirtą iš žiurkių kepenų, kol susidarys tankus ląstelių monosluoksnis. Po to ląstelės nustojo ekspresuoti desminą ir kitus mezenchiminius žymenis, įgijo epitelio ląstelių morfologiją ir pradėjo ekspresuoti hepatocitams būdingus žymenis, ypač citokeratinus 8 ir 18. Panašūs rezultatai taip pat gauti organotipiškai auginant vaisiaus žiurkės kepenis.

Per pastaruosius metus buvo paskelbti du straipsniai, kuriuose Ito ląstelės laikomos ovalinių ląstelių potipiu arba jų dariniais. Ovalios ląstelės yra mažos, ovalios formos ląstelės su siauru citoplazmos kraštu, kurios atsiranda kepenyse kai kuriuose toksinio kepenų pažeidimo modeliuose ir šiuo metu laikomos bipotentinėmis progenitorinėmis ląstelėmis, galinčiomis diferencijuotis ir į hepatocitus, ir į cholangiocitus. Remdamiesi tuo, kad genai, kuriuos ekspresuoja išskirtos Ito ląstelės, sutampa su ovalinių ląstelių ekspresuojamais genais ir tam tikromis Ito ląstelių auginimo sąlygomis atsiranda hepatocitų ir tulžies latakų ląstelių, autoriai patikrino hipotezę, kad Ito ląstelės yra ovalios ląstelės, galinčios generuoti hepatocitus, kad regeneruotų pažeistas kepenis. Transgeninės GFAP-Cre / GFP (žaliojo fluorescencinio baltymo) pelės buvo šeriamos metionino cholino trūkumu / etioninu praturtintu maistu, kad suaktyvintų Ito ląsteles ir ovaliąsias ląsteles. Poilsio Ito ląstelės turėjo GFAP+ fenotipą. Po to, kai Ito ląstelės buvo suaktyvintos dėl sužalojimo ar kultūros, jų GFAP ekspresija sumažėjo ir jie pradėjo ekspresuoti ovalių ir mezenchiminių ląstelių žymenis. Ovalios ląstelės išnyko, kai atsirado GFP+ hepatocitai, kurie pradėjo ekspresuoti albuminą ir galiausiai pakeitė didelius kepenų parenchimos plotus. Remdamiesi savo išvadomis, autoriai iškėlė hipotezę, kad Ito ląstelės yra ovalių ląstelių potipis, kuris per "mezenchiminę" fazę diferencijuojasi į hepatocitus.

Eksperimentuose, atliktuose su tuo pačiu ovalinių ląstelių aktyvavimo modeliu, kai pastarosios buvo išskirtos iš žiurkių kepenų, buvo nustatyta, kad in vitro ovalios ląstelės ekspresuoja ne tik tradicinius žymenis 0V-6, BD-1/BD-2 ir M2RK ir tarpląstelinės matricos žymenys, įskaitant kolagenus, matricos metaloproteinazes ir metaloproteinazių audinių inhibitorius - Ito ląstelių žymenų ypatybės. Po poveikio TGF-pl ląstelėms, be augimo slopinimo ir morfologinių pokyčių, padidėjo šių genų, taip pat desmino ir GFAP genų ekspresija, atsirado sraigės transkripcijos faktoriaus, atsakingo už epitelį, ekspresija. -mezenchiminė transdiferenciacija ir E-kadherino ekspresijos nutraukimas, o tai rodo ovalinių ląstelių „atvirkštinės“ transdiferenciacijos į Ito ląsteles galimybę.

Kadangi ovalios ląstelės tradiciškai laikomos bipotentiniais hepatocitų ir cholangiocitų pirmtakais, buvo bandoma nustatyti pereinamųjų formų tarp intrahepatinių tulžies latakų epitelio ląstelių ir Ito ląstelių egzistavimo galimybę. Taigi buvo įrodyta, kad normaliose ir pažeistose kepenyse mažos duktalinio tipo struktūros nusidažė teigiamai Ito ląstelių žymeniui – GMA, tačiau straipsnyje pateiktose nuotraukose, kuriose atsispindi imunofluorescencinio dažymo rezultatai, galima pastebėti, kad. nustatyti, kas tai iš tikrųjų yra – GMA+ latakų struktūros – tulžies latakai ar kraujagyslės – neįmanoma. Tačiau buvo paskelbti kiti rezultatai, rodantys Ito ląstelių žymenų ekspresiją cholangiocituose. Jau minėtame L. Yang darbe buvo parodyta Ito ląstelių žymens GFAP ekspresija tulžies latakų ląstelėmis. Citoskeleto tarpinių gijų baltymas sineminas, esantis normaliose kepenyse Ito ląstelėse ir kraujagyslių ląstelėse, atsirado latakų ląstelėse, dalyvaujančiose latakų reakcijos vystyme; jis taip pat buvo išreikštas cholangi karcinomos ląstelėse. Taigi, jei yra daug įrodymų apie Ito ląstelių ir hepatocitų abipusės transdiferenciacijos galimybę, tai su cholangiocitais tokie stebėjimai vis dar yra pavieniai ir ne visada vienareikšmiški.

Apibendrinant galima teigti, kad mezenchiminių ir epitelio žymenų raiškos dėsniai tiek kepenų histo- ir organogenezės metu, tiek įvairiomis eksperimentinėmis sąlygomis tiek in vivo, tiek in vitro rodo tiek mezenchiminio-epitelinio, tiek epitelio-mezenchialinio mažo tikimybę. perėjimai tarp Ito ląstelių/ovalinių ląstelių/hepatocitų, todėl leidžia Ito ląsteles laikyti vienu iš hepatocitų vystymosi šaltinių. Šie faktai neabejotinai rodo neatskiriamą ryšį tarp šių ląstelių tipų ir taip pat rodo didelį Ito ląstelių fenotipinį plastiškumą. Fenomenalų šių ląstelių plastiškumą liudija ir daugybės nervinių baltymų, tokių kaip jau minėtas GFAP, nestinas, neurotrofinai ir jiems skirti receptoriai, neuronų ląstelių adhezijos molekulės (N-CAM), sinaptofizino, nervų augimo faktoriaus, ekspresija. (Nervų augimo faktorius, NGF), smegenų kilmės neurotrofinis faktorius (BDNF), kuriuo remdamiesi daugelis autorių aptaria galimybę sukurti Ito ląsteles iš nervų keteros. Tačiau per pastarąjį dešimtmetį mokslininkai didelį dėmesį patraukė kitai versijai – galimybei sukurti hepatocitus ir Ito ląsteles iš hematopoetinių ir mezenchiminių kamieninių ląstelių.

Pirmąjį darbą, kuriame ši galimybė buvo įrodyta, paskelbė V.E. Petersen ir kt., kurie parodė, kad hepatocitai gali išsivystyti iš kraujodaros kamieninių ląstelių. Vėliau šis faktas ne kartą buvo patvirtintas kitų mokslininkų darbuose, o kiek vėliau buvo parodyta ir mezenchiminių kamieninių ląstelių diferenciacijos į hepatocitus galimybė. Kaip tai atsitinka – donorų ląstelėms susiliejus su recipientinėmis kepenų ląstelėmis arba jų transdiferenciacija – vis dar neaišku. Tačiau mes taip pat nustatėme, kad žmogaus virkštelės kraujo hematopoetinės kamieninės ląstelės, persodintos į žiurkių, kurioms buvo atlikta dalinė hepatektomija, blužnį, kolonizuoja kepenis ir gali diferencijuotis į hepatocitus ir sinusoidines kepenų ląsteles, kaip rodo žmogaus ląstelių žymenys šiose ląstelėse. tipai. Be to, pirmą kartą parodėme, kad preliminarus virkštelės kraujo ląstelių genetinis modifikavimas reikšmingai neįtakoja jų pasiskirstymo ir diferenciacijos galimybės recipiento kepenyse po transplantacijos. Kalbant apie tikimybę išsivystyti hepatocitai iš kraujodaros kamieninių ląstelių prenatalinės histogenezės metu, nors šios galimybės negalima visiškai atmesti, vis dėlto atrodo mažai tikėtina, nes šių ląstelių morfologija, lokalizacija ir fenotipas labai skiriasi nuo kepenų ląstelių. Matyt, jei toks kelias egzistuoja, jis neturi reikšmingo vaidmens formuojantis epitelio ir sinusoidinėms ląstelėms ontogenezės metu. Naujausių tyrimų, tiek in vivo, tiek in vitro, rezultatai kelia abejonių dėl nusistovėjusios teorijos apie hepatocitų vystymąsi tik iš priekinės žarnos endoderminio epitelio, dėl kurio kilo prielaida, kad regioninė kepenų kamieninė ląstelė. gali būti tarp jo mezenchiminių ląstelių. Ar Ito ląstelės gali būti tokiomis ląstelėmis?

Atsižvelgdami į unikalias šių ląstelių savybes, jų fenomenalų plastiškumą ir ląstelių, turinčių pereinamąjį fenotipą iš Ito ląstelių į hepatocitus, egzistavimą, darome prielaidą, kad šios ląstelės yra pagrindinės šio vaidmens pretendentės. Papildomi argumentai, patvirtinantys šią galimybę, yra tai, kad šios ląstelės, kaip ir hepatocitai, gali būti suformuotos iš kraujodaros kamieninių ląstelių, ir tai yra vienintelės sinusinės kepenų ląstelės, galinčios išreikšti kamieninių (progenitorinių) ląstelių žymenis.

2004 metais buvo nustatyta, kad Ito ląstelės gali išsivystyti ir iš kraujodaros kamieninių ląstelių. Persodinus GFP pelių kaulų čiulpų ląsteles, GFP+ ląstelės atsirado pelių recipientės, ekspresuojančios Ito ląstelių žymenį GFAP, kepenyse, o šių ląstelių procesai prasiskverbė tarp hepatocitų. Jei recipiento kepenys buvo pažeistos CTC, persodintos ląstelės taip pat išreiškė blastų tipo Ito ląsteles. Kai neparenchiminių ląstelių frakcija buvo išskirta iš pelių recipientų kepenų, GFP+ ląstelės su lipidų lašeliais sudarė 33,4+2,3% išskirtų ląstelių; jie išreiškė desminą ir GFAP, o po 7 d. auginimas

Kita vertus, persodinus kaulų čiulpų ląsteles susidaro ne tik Ito ląstelės, bet ir I tipo kolageno genas, kurio pagrindu buvo padaryta išvada, kad tokia transplantacija prisideda prie fibrozės išsivystymo. Tačiau yra ir darbų, kuriuose kepenų fibrozės sumažėjimas buvo įrodytas dėl persodintų ląstelių migracijos į pluoštines pertvaras ir šių ląstelių gamybos matricos metaloproteinazės-9 (Matrix Metalloproteinase-9, MMP-9), kuri yra viena iš svarbiausios Ito ląstelių savybės. Mūsų preliminarūs duomenys taip pat parodė, kad pacientams, sergantiems lėtiniu hepatitu ir sunkia kepenų fibroze, sumažėjo miofibroblastų skaičius ir sumažėjo fibrozės lygis po periferinio kraujo mononuklearinės frakcijos autotransplantacijos. Be to, dėl hematopoetinių kamieninių ląstelių transplantacijos recipiento kepenyse gali atsirasti kitų ląstelių tipų, galinčių gaminti tarpląstelinę matricą. Taigi, esant kepenų pažeidimui, kurį sukelia tulžies latakų perrišimas, persodintos diferencijuotų fibrocitų ląstelės, ekspresuojančios kolageną, ir tik tada, kai jos auginamos esant TGF-pl, diferencijuojasi-miofibroblastai, galintys prisidėti prie fibrozės. Taigi autoriai susiejo kepenų fibrozės riziką po kaulų čiulpų ląstelių transplantacijos ne su Ito ląstelėmis, o su „unikalia fibrocitų populiacija“. Dėl gautų duomenų nenuoseklumo diskusijose kilo dar vienas klausimas – ar Ito ląstelės, atsiradusios dėl transplantuotų kraujodaros kamieninių ląstelių diferenciacijos, prisidės prie fibrozės išsivystymo, ar užtikrins visišką kepenų audinio ir fibrozės mažinimas. Pastaraisiais metais tapo akivaizdu (taip pat ir iš aukščiau pateiktų duomenų), kad miofibroblastų kilmė kepenyse gali būti skirtinga – nuo ​​Ito ląstelių, nuo vartų takų fibroblastų ir net iš hepatocitų. Taip pat nustatyta, kad įvairios kilmės miofibroblastai skiriasi daugybe savybių. Taigi aktyvuotos Ito ląstelės skiriasi nuo vartų trakto miofibroblastų vitaminų kiekiu, susitraukimo aktyvumu, atsaku į citokinus, ypač TGF-β, ir gebėjimu spontaniškai apoptozei. Be to, šios ląstelių populiacijos yra skirtingos ir, jei įmanoma, išreiškia kraujagyslių ląstelių adhezijos molekulę VCAM-1, kuri yra Ito ląstelėse ir nėra miofibroblastuose. Negalima sakyti, kad be tarpląstelinių matricos baltymų gamybos, aktyvuotos Ito ląstelės gamina ir matricos metaloproteinazes, kurios naikina šią matricą. Taigi Ito ląstelių, įskaitant susidariusias iš kraujodaros kamieninių ląstelių, vaidmuo fibrozės vystymuisi toli gražu nėra toks nedviprasmiškas, kaip manyta anksčiau. Matyt, jie ne tiek skatina fibrozę, kiek pertvarko tarpląstelinę matricą kepenų atstatymo procese po sužalojimo, taip suteikdami jungiamojo audinio karkasą kepenų parenchiminių ląstelių regeneracijai.

normalios ir pažeistos žiurkių kepenys. Žiurkės Ito ląstelės taip pat išreiškia kitą kamieninių (progenitorinių) ląstelių žymenį - CD133, ir demonstruoja pirmtakų ląstelių, galinčių diferencijuotis į įvairius tipus priklausomai nuo sąlygų, savybes - 2) pridedant citokinų, palengvinančių diferenciaciją į endotelio ląsteles, formuoja šakotas kanalėlių struktūras su indukcija. žymenų ekspresijos endotelio ląstelės - endotelio NO-sintazė ir kraujagyslių endotelio kadherinas; 3) kai naudojami citokinai, skatinantys kamieninių ląstelių diferenciaciją į hepatocitus – į apvalias ląsteles, ekspresuojančias hepatocitų žymenis – FP ir albuminą. Taip pat žiurkės Ito ląstelės ekspresuoja 0ct4, būdingą pluripotentinėms kamieninėms ląstelėms. Įdomu tai, kad tik dalį Ito ląstelių populiacijos galima išskirti magnetiniu rūšiuotoju, naudojant anti-CD133 antikūnus; tačiau po standartinės (pronazės / kolagenazės) išskyrimo visos plastiku pritvirtintos ląstelės išreiškė CD133 ir 0kt4. Kitas progenitorinių ląstelių žymeklis Bcl-2 ekspresuojamas desmin+ ląstelėse žmogaus kepenų prenatalinio vystymosi metu.

Taigi įvairūs tyrinėtojai parodė galimybę Ito ląstelėse išreikšti tam tikrus kamieninių (progenitorinių) ląstelių žymenis. Be to, neseniai buvo paskelbtas straipsnis, kuriame pirmą kartą buvo iškelta hipotezė, kad pamatinės membranos baltymų, endotelio ląstelių ir hepatocitų suformuota Disse erdvė, kurioje yra Ito ląstelės, gali sudaryti pastarųjų mikroaplinką, veikiančią. kaip „niša“ kamieninėms ląstelėms. Tai liudija keli bruožai, būdingi kamieninių ląstelių nišai ir identifikuoti Ito ląstelių mikroaplinkos komponentuose. Taigi ląstelės, esančios arti stiebo, turi gaminti tirpius faktorius, taip pat vykdyti tiesioginę sąveiką, kuri išlaiko kamieninę ląstelę nediferencijuotoje būsenoje ir išlaiko ją nišoje, dažnai esančioje ant pamatinės membranos. Iš tiesų, kepenų sinusoidinių kapiliarų endotelio ląstelės sintezuoja tirpų SDF-1, kuris specifiškai jungiasi prie Ito ląstelių receptoriaus CXR4 ir stimuliuoja šių ląstelių migraciją in vitro. Ši sąveika atlieka pagrindinį vaidmenį kraujodaros kamieninėms ląstelėms migruojant į galutinę nišą kaulų čiulpuose ontogenezės metu ir nuolat gyvenant juose, taip pat mobilizuojant į periferinį kraują. Logiška manyti, kad tokia sąveika gali atlikti panašų vaidmenį kepenyse, išlaikant Ito ląsteles Disse erdvėje. Ankstyvosiose kepenų regeneracijos stadijose padidėjusi SDF-1 ekspresija taip pat gali padėti įdarbinti papildomų kūno kamieninių ląstelių skyrių. Nišinių ląstelių inervacija turėtų apimti simpatinę nervų sistemą, kuri yra susijusi su kraujodaros kamieninių ląstelių įdarbinimo reguliavimu. Simpatinės nervų sistemos noradrenerginiai signalai vaidina lemiamą vaidmenį atliekant GCSF (Granulocitų kolonijas stimuliuojančių faktorių sukelta hematopoetinių kamieninių ląstelių mobilizacija iš kaulų čiulpų. Nervų galūnėlių išsidėstymas artimoje Ito ląstelių kaimynystėje buvo patvirtintas keliuose darbuose. Taip pat nustatyta, kad reaguodamos į simpatinę stimuliaciją Ito ląstelės išskiria prostaglandinus F2a ir D, kurie aktyvina glikogenolizę šalia esančiose parenchiminėse ląstelėse.Šie faktai rodo, kad simpatinė nervų sistema gali turėti įtakos Ito ląstelių nišai.Kita stiebo funkcija. ląstelių niša yra palaikyti „lėtą“ ląstelių ciklą ir nediferencijuotą kamieninių ląstelių būklę. Ito ląstelių nediferencijuotos būklės palaikymą in vitro sąlygomis palengvina parenchiminės kepenų ląstelės – kultivuojant šias dvi membrana atskirtas ląstelių populiacijas, Ito ląstelėse išsaugoma kamieninių ląstelių žymenų CD133 ir 0kt4 ekspresija, tuo tarpu kai nėra hepatocitų, Ito ląstelės įgyja miofibroblastų fenotipą ir praranda kamieninių ląstelių žymenis. Taigi, kamieninių ląstelių žymenų ekspresija neabejotinai yra ramybės būsenos Ito ląstelių požymis. Taip pat nustatyta, kad parenchiminių ląstelių įtaka Ito ląstelėms gali būti pagrįsta hepatocitų sintezuojamų parakrininių faktorių Wnt ir Jag1 sąveika su atitinkamais receptoriais (Myc, Notchl) Ito ląstelių paviršiuje. Wnt / b-catenin ir Notch signalizacijos keliai palaiko kamieninių ląstelių gebėjimą savarankiškai atsinaujinti lėtai simetriškai dalijantis be vėlesnės diferenciacijos. Kitas svarbus nišos komponentas yra bazinės membranos baltymai lamininas ir kolagenas IV, kurie palaiko Ito ląstelių ramybės būseną ir slopina jų diferenciaciją. Panaši situacija susidaro raumenų skaidulose ir vingiuotuose sėkliniuose kanalėliuose, kur palydovinės ląstelės (raumeninio audinio kamieninės ląstelės) ir nediferencijuota spermatogonija glaudžiai liečiasi su bazine raumenų skaidulos membrana arba „spermatogeniniu epiteliu“. Akivaizdu, kad kamieninių ląstelių sąveika su ekstraląstelinės matricos baltymais slopina jų galutinę diferenciaciją. Todėl gauti duomenys leidžia Ito ląsteles laikyti kamieninėmis ląstelėmis, niša, kuriai gali pasitarnauti Disse erdvė.

Mūsų duomenys apie Ito ląstelių kamieninį stiprumą ir hepatocitų susidarymo galimybę iš šių ląstelių buvo patvirtinti eksperimentais, tiriant kepenų regeneraciją in vivo dalinės hepatektomijos ir toksinio kepenų pažeidimo su švino nitratu modeliais. Tradiciškai manoma, kad šiuose kepenų regeneracijos modeliuose kamieninis skyrius nėra aktyvuojamas ir nėra ovalių ląstelių. Tačiau pavyko nustatyti, kad abiem atvejais galima stebėti ne tik Ito ląstelių aktyvavimą, bet ir kito kamieninių ląstelių žymens, būtent C-kit kamieninių ląstelių faktoriaus receptoriaus, ekspresiją. Kadangi C-kit ekspresija taip pat buvo pastebėta pavieniuose hepatocituose (kuriuose ji buvo mažiau intensyvi), daugiausia esančiuose sąlytyje su C-kit teigiamomis Ito ląstelėmis, galima daryti prielaidą, kad šie hepatocitai skiriasi nuo C-kit+ Ito ląstelių. Akivaizdu, kad šis ląstelių tipas ne tik sudaro sąlygas atkurti hepatocitų populiaciją, bet ir užima kamieninių regioninių kepenų ląstelių nišą.

Taigi dabar nustatyta, kad Ito ląstelės išreiškia mažiausiai penkis kamieninių ląstelių žymenis įvairiomis vystymosi, regeneracijos ir auginimo sąlygomis. Visi iki šiol sukaupti duomenys rodo, kad Ito ląstelės gali atlikti regioninių kepenų kamieninių ląstelių vaidmenį, nes jos yra vienas iš hepatocitų (ir galbūt cholangiocitų) vystymosi šaltinių, taip pat yra svarbiausias mikroaplinkos komponentas kepenų morfogenezei ir kepenų hematopoezė. Nepaisant to, atrodo per anksti daryti vienareikšmiškas išvadas apie šių ląstelių priklausomybę kepenų kamieninių (progenitorinių) ląstelių populiacijai. Tačiau akivaizdu, kad reikia naujų šios krypties tyrimų, kurių sėkmės atveju atsivers perspektyvos sukurti efektyvius kepenų ligų gydymo metodus, pagrįstus kamieninių ląstelių transplantacija.

Šiuo atveju šios ląstelės proliferuodamos reaguoja į citokinų, augimo faktorių ir chemokinų (prouždegiminių citokinų), kuriuos gamina pažeistos kepenys, poveikį. Lėtinis žvaigždžių ląstelių aktyvinimas, reaguojant į oksidacinį stresą, kurį sukelia HBV ir HCV replikacija, gali prisidėti prie fibrogenezės ir padidėjusio hepatocitų, chroniškai užkrėstų HBV ir HCV, proliferacijos.

Taigi, žvaigždžių ląstelės dalyvauja reguliuojant hepatocitų augimą, diferenciaciją ir cirkuliaciją, o tai kartu su MAP kinazių aktyvavimu gali sukelti kepenų vėžio išsivystymą [Block, 2003].

Nuorodos:

Atsitiktinis piešimas

Dėmesio! Informacija svetainėje

skirtas tik edukaciniams tikslams

Kepenų Ito ląstelių poveikio kamieninėms ląstelėms tyrimas

Tarpląstelinis ryšys gali būti realizuotas parakrinine sekrecija ir tiesioginiais ląstelių kontaktais. Yra žinoma, kad kepenų perisinusoidinės ląstelės (HPC) nustato regioninę kamieninių ląstelių nišą ir nustato jų diferenciaciją. Tuo pačiu metu HPC išlieka prastai apibūdinamas molekuliniu ir ląstelių lygiu.

Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kiyasov A.P.

SEI HPE "Federalinės sveikatos ir socialinės plėtros agentūros Kazanės valstybinis medicinos universitetas"

Eksperimentinis rekombinantinio kaulo morfogenetinio baltymo osteoinduktyvumo įvertinimas

Ląstelių technologijos gydant degeneracines-distrofines kaulų ir sąnarių ligas

Ito narvas

Ramus Ir aktyvuota. Suaktyvintos Ito ląstelės

rami būsena

perisinusoidinis(subendotelinis) ir tarphepatoceliulinis. Pirmieji palieka ląstelės kūną ir tęsiasi palei sinusoidinio kapiliaro paviršių, padengdami jį plonomis į pirštą panašiomis šakomis. Perisinusoidinės ataugos yra padengtos trumpais gaureliais ir turi būdingus ilgus mikroiškyšulius, besitęsiančius dar toliau išilgai kapiliarinio endotelio vamzdelio paviršiaus. Interhepatoceliulinės ataugos, įveikusios hepatocitų plokštelę ir pasiekusios gretimą sinusoidą, skirstomos į kelias perisinusoidines ataugas. Taigi Ito ląstelė vidutiniškai apima šiek tiek daugiau nei du gretimus sinusoidus.

aktyvuota būsena

kepenų ląstelės

Žmogaus kepenys susideda iš ląstelių, kaip ir bet kuris organinis audinys. Gamta taip išsidėsčiusi, kad šis organas atlieka svarbiausias funkcijas, valo organizmą, gamina tulžį, kaupia ir kaupia glikogeną, sintetina plazmos baltymus, valdo medžiagų apykaitos procesus, dalyvauja normalizuojant cholesterolio ir kitų reikalingų komponentų kiekį. kūno gyvybei.

Kad įvykdytų savo paskirtį, kepenų ląstelės turi būti sveikos, stabilios struktūros, kiekvienas žmogus turi jas apsaugoti nuo sunaikinimo.

Apie kepenų skilčių struktūrą ir tipus

Kūno ląstelių sudėčiai būdinga įvairovė. Kepenų ląstelės sudaro skilteles, segmentus sudaro skiltelės. Organo struktūra tokia, kad hepatocitai (pagrindinės kepenų ląstelės) išsidėstę aplink centrinę veną, nuo jos atsišakoja, jungiasi vienas su kitu, sudarydami sinusoidus, tai yra tarpus, užpildytus krauju. Kraujas per juos juda kaip kapiliarai. Kepenys tiekiamos krauju iš vartų venos ir arterijos, esančios organe. Kepenų skiltelės gamina tulžį ir perneša ją į tulžies latakus.

Kiti kepenų ląstelių tipai ir jų paskirtis

1. Endotelio - ląstelės, išklojančios sinusoidus ir turinčios fenestrą. Pastarosios yra skirtos sudaryti laiptuotą barjerą tarp sinusoido ir Disse erdvės.
2. Pati Disse erdvė užpildyta žvaigždžių ląstelėmis, kurios užtikrina audinių skysčio nutekėjimą į portalinių zonų limfagysles.
3. Kupferio ląstelės yra susijusios su endoteliu, prie jo prisitvirtina, jų funkcija – apsaugoti kepenis, kai į organizmą patenka generalizuota infekcija, susižeidus.
4. Duobės ląstelės yra viruso paveiktų hepatocitų žudikai, be to, jos turi citotoksinį poveikį naviko ląstelėms.

Žmogaus kepenys susideda iš 60% hepatocitų ir 40% kitų ląstelių junginių. Hepatocitai atrodo kaip daugiakampis, jų yra mažiausiai 250 mlrd. Normalus hepatocitų funkcionavimas yra dėl komponentų spektro, kurį išskiria sinusoidinės ląstelės, užpildančios sinusoidinį skyrių. Tai yra aukščiau išvardytos Kupfferio, žvaigždžių ir duobučių ląstelės (intrahepatiniai limfocitai).

Endotelio ląstelės yra filtras tarp kraujo sinusoidinėje erdvėje ir plazmos Disse erdvėje. Šis biologinis filtras išskiria didelius, per daug turinčius retinolio ir cholesterolio junginius ir jų nepraleidžia, o tai naudinga organizmui. Be to, jų funkcija yra apsaugoti kepenis (būtent hepatocitus) nuo mechaninių kraujo ląstelių pažeidimų.

Mūsų nuolatinis skaitytojas rekomendavo veiksmingą metodą! Naujas atradimas! Novosibirsko mokslininkai nustatė geriausią priemonę kepenims valyti. 5 metai tyrimų. Savarankiškas gydymas namuose! Atidžiai peržiūrėję, nusprendėme pasiūlyti jūsų dėmesiui.

Kūno elementų sąveikos procesas

Tarp visų kūno dalelių vyksta sąveika, kurios schema yra gana sudėtinga. Sveikoms kepenims būdingas ląstelinių junginių stabilumas, patologinių procesų metu mikroskopu galima atsekti ekstraląstelinę matricą.

Organų audiniai, veikiami toksinų, tokių kaip alkoholis, virusai, keičiasi. Jie yra tokie:

• produktų nusėdimas organizme dėl medžiagų apykaitos sutrikimų;
• ląstelių distrofija;
• hepatocitų nekrozė;
• kepenų audinių fibrozė;
• uždegiminis kepenų procesas;
• cholestazė.

Apie organų patologijos gydymą

Kiekvienam pacientui naudinga žinoti, ką reiškia organo pokyčiai. Ne visi jie yra katastrofiški. Pavyzdžiui, distrofija gali būti lengva arba sunki. Abu šie procesai yra grįžtami. Šiuo metu yra vaistų, kurie atkuria ląsteles ir ištisus kepenų segmentus.

Cholestazę galima išgydyti net liaudiškomis priemonėmis – nuovirais ir užpilais. Jie prisideda prie bilirubino sintezės normalizavimo ir pašalina tulžies nutekėjimo į dvylikapirštę žarną sutrikimus.

Su ciroze pradiniame etape gydymas prasideda dieta, tada skiriamas gydymas hepatoprotektoriais. Veiksmingiausias būdas cirozei ir fibrozei gydyti yra kamieninės ląstelės, kurios suleidžiamos į bambos veną arba į veną, jos atkuria įvairių agentų pažeistus hepatocitus.

Pagrindinės kepenų ląstelių mirties priežastys yra piktnaudžiavimas alkoholiu, narkotikų poveikis, įskaitant narkotikus, vaistus. Bet koks toksinas, patekęs į organizmą, naikina kepenis. Todėl turėtumėte atsisakyti žalingų įpročių, kad jūsų kepenys būtų sveikos.

Kas sakė, kad sunkių kepenų ligų išgydyti neįmanoma?

• Išbandyta daug metodų, bet niekas nepadeda.
• O dabar esate pasiruošę pasinaudoti bet kokia galimybe, kuri suteiks jums ilgai lauktą gerą sveikatą!

Yra veiksminga priemonė kepenų ligai gydyti. Sekite nuorodą ir sužinokite, ką rekomenduoja gydytojai!

Taip pat skaitykite:

Išsilavinimas: Rostovo valstybinis medicinos universitetas (RostGMU), Gastroenterologijos ir endoskopijos katedra.

ENDOTELINĖS LĄSTELĖS, KUPFER IR ITO LĄSTELĖS

Endotelio ląstelių, Kupfferio ir Ito ląstelių, struktūrą nagrinėsime dviejų paveikslų pavyzdžiu.

Teksto dešinėje esančiame paveikslėlyje pavaizduoti sinusoidiniai kepenų kapiliarai (SC) - sinusoidinio tipo intralobuliniai kapiliarai, didėjantys nuo įvesties venulių iki centrinės venos. Kepenų sinusoidiniai kapiliarai sudaro anastomozinį tinklą tarp kepenų sluoksnių. Sinusoidinių kapiliarų gleivinę sudaro endotelio ląstelės ir Kupfferio ląstelės.

Teksto kairėje esančiame paveikslėlyje kepenų plokštelė (LP) ir du kepenų sinusoidiniai kapiliarai (SC) yra nupjauti vertikaliai ir horizontaliai, kad būtų parodytos perisinusoidinės Ito ląstelės (CI). Paveiksle taip pat pavaizduoti nupjauti tulžies latakai (LC).

ENDOTELIO LĄSTELĖS

Endotelio ląstelės (EC) yra labai suplotos suragėjusios ląstelės su pailgu mažu branduoliu, nepakankamai išsivysčiusiomis organelėmis ir daugybe mikropinocitinių pūslelių. Citomembrana yra išmarginta nenuolatinėmis skylėmis (O) ir fenestra, dažnai sugrupuota į kriaukles (RP). Šios angos leidžia prasiskverbti pro kraujo plazmą, bet ne kraujo ląsteles, todėl jai patenka į hepatocitus (D). Endotelio ląstelės neturi bazinės membranos ir neturi fagocitozės. Jie yra sujungti vienas su kitu naudojant nedidelius jungčių kompleksus (neparodyta). Kartu su Kupffer ląstelėmis endotelio ląstelės sudaro vidinę Disse erdvės (PD) ribą; jo išorinę sieną sudaro hepatocitai.

KUPFER CELLS

Kupffer ląstelės (CC) yra didelės, nenuolatinės žvaigždinės ląstelės, esančios kepenų sinusoidiniuose kapiliaruose, iš dalies jų bifurkacijose.

Kupferio ląstelių procesai praeina be jokių jungiamųjų įtaisų tarp endotelio ląstelių ir dažnai kerta sinusoidų spindį. Kupferio ląstelėse yra ovalus branduolys, daug mitochondrijų, gerai išvystytas Golgi kompleksas, trumpos granuliuoto endoplazminio tinklo cisternos, daug lizosomų (L), liekamųjų kūnų ir retų žiedinių plokštelių. Kupferio ląstelėse taip pat yra didelių fagolizosomų (PL), kuriose dažnai yra pasenusių eritrocitų ir svetimkūnių. Taip pat gali būti aptikta hemosiderino arba geležies intarpų, ypač dažant supravitalinį poveikį.

Kupferio ląstelių paviršiuje matomos netaisyklingos suplotos citoplazminės raukšlės, vadinamos lamellipodijomis (LP) – lameliniai stiebeliai, taip pat procesai, vadinami filopodijomis (F) ir mikrovilliais (MV), padengti glikokaliksu. Plazlema sudaro vermiforminius kūnus (CT) su centre esančia tankia linija. Šios struktūros gali reikšti kondensuotą glikokaliksą.

Kupffer ląstelės yra makrofagai, greičiausiai sudarantys nepriklausomą ląstelių gentį. Paprastai jie kilę iš kitų Kupfferio ląstelių dėl pastarųjų mitozinio dalijimosi, bet gali atsirasti ir iš kaulų čiulpų. Kai kurie autoriai mano, kad tai yra aktyvuotos endotelio ląstelės.

Kartais atsitiktinis autonominis nervinis pluoštas (NF) praeina per Disse erdvę. Kai kuriais atvejais skaidulos liečiasi su hepatocitais. Hepatocitų kraštus riboja tarphepatocitinės įdubos (MU), išmargintos mikrovilliukais.

ITO LĄSTELĖS

Tai yra žvaigždžių ląstelės, lokalizuotos Disse (PD) erdvėse. Jų branduoliuose gausu kondensuoto chromatino ir dažniausiai juos deformuoja dideli lipidų lašai (LA). Pastarieji yra ne tik perikarione, bet ir ląstelės procesuose bei matomi iš išorės kaip sferiniai išsikišimai. Organelės yra prastai išvystytos. Perisinusoidinės ląstelės rodo silpną endocitinį aktyvumą, tačiau joms trūksta fagosomų. Ląstelės turi keletą ilgų procesų (O), kurie liečiasi su kaimyniniais hepatocitais, bet nesudaro jungiamųjų kompleksų.

Procesai apgaubia sinusoidinius kepenų kapiliarus ir kai kuriais atvejais praeina per kepenų sluoksnius, kontaktuodami su gretimais kepenų sinusoidais. Procesai nėra pastovūs, šakoti ir ploni; jie taip pat gali būti išlyginti. Kaupdamos lipidų lašų grupes, jie pailgėja ir įgauna vynuogių šepetėlio išvaizdą.

Manoma, kad perisinusoidinės Ito ląstelės yra menkai diferencijuotos mezenchiminės ląstelės, kurios gali būti laikomos kraujodaros kamieninėmis ląstelėmis, nes patologinėmis sąlygomis gali transformuotis į riebalines ląsteles, aktyvias kraujo kamienines ląsteles arba fibroblastus.

Normaliomis sąlygomis Ito ląstelės dalyvauja riebalų ir vitamino A kaupime, taip pat intralobulinių tinklinių ir kolageno skaidulų (KB) gamyboje.

Psichologija ir psichoterapija

Šioje skiltyje bus straipsniai apie tyrimų metodus, vaistus ir kitus komponentus, susijusius su medicinos temomis.

Nedidelė svetainės dalis, kurioje yra straipsnių apie originalius daiktus. Laikrodžiai, baldai, dekoratyviniai daiktai – visa tai rasite šioje skiltyje. Skyrius nėra pagrindinė svetainės dalis, veikiau įdomiai papildo žmogaus anatomijos ir fiziologijos pasaulį.

Ito kepenų ląstelės

Visuotinė populiariųjų mokslų internetinė enciklopedija

KEPENYS

KEPENYS, didžiausia liauka stuburinių gyvūnų kūne. Žmonėms jis sudaro apie 2,5% kūno svorio, vidutiniškai 1,5 kg suaugusiems vyrams ir 1,2 kg moterims. Kepenys yra dešinėje viršutinėje pilvo ertmės dalyje; jis raiščiais pritvirtintas prie diafragmos, pilvo sienelės, skrandžio ir žarnyno ir yra padengtas plona pluoštine membrana – glissono kapsule. Kepenys yra minkštas, bet tankus raudonai rudos spalvos organas ir paprastai susideda iš keturių skilčių: didelės dešinės skilties, mažesnės kairiosios ir daug mažesnių uodeginių ir kvadratinių skilčių, sudarančių užpakalinį apatinį kepenų paviršių.

Funkcijos.

Kepenys yra gyvybiškai svarbus organas, atliekantis daugybę skirtingų funkcijų. Vienas pagrindinių – skaidraus oranžinio arba geltono skysčio tulžies susidarymas ir išskyrimas. Tulžyje yra rūgščių, druskų, fosfolipidų (riebalų, kuriuose yra fosfatų grupės), cholesterolio ir pigmentų. Tulžies druskos ir laisvosios tulžies rūgštys emulsina riebalus (t. y. suskaido juos į mažus lašelius), todėl jie lengviau virškinami; riebalų rūgštis paversti vandenyje tirpiomis formomis (o tai būtina tiek pačioms riebalų rūgštims, tiek riebaluose tirpiems vitaminams A, D, E ir K pasisavinti); turi antibakterinį poveikį.

Visos maistinės medžiagos, patekusios į kraują iš virškinamojo trakto – angliavandenių, baltymų ir riebalų, mineralinių medžiagų ir vitaminų virškinimo produktai – pereina per kepenis ir jose apdorojami. Tuo pačiu metu dalis aminorūgščių (baltymų fragmentų) ir dalis riebalų virsta angliavandeniais, todėl kepenys yra didžiausias glikogeno „sandėlis“ organizme. Sintetina kraujo plazmos baltymus – globulinus ir albuminus, taip pat vyksta aminorūgščių konversijos reakcijos (deamininimas ir transamininimas). Deamininimas – azoto turinčių amino grupių pašalinimas iš aminorūgščių – leidžia pastarąsias panaudoti, pavyzdžiui, angliavandenių ir riebalų sintezei. Transaminacija yra amino grupės perkėlimas iš aminorūgšties į keto rūgštį, kad susidarytų kita aminorūgštis ( cm. MEDŽIAGA). Kepenys taip pat sintetina ketoninius kūnus (riebalų rūgščių apykaitos produktus) ir cholesterolį.

Kepenys dalyvauja reguliuojant gliukozės (cukraus) kiekį kraujyje. Jei šis lygis pakyla, kepenų ląstelės gliukozę paverčia glikogenu (į krakmolą panašia medžiaga) ir kaupia. Jei gliukozės kiekis kraujyje nukrenta žemiau normos, glikogenas suskaidomas ir gliukozė patenka į kraują. Be to, kepenys geba sintetinti gliukozę iš kitų medžiagų, pavyzdžiui, amino rūgščių; šis procesas vadinamas gliukoneogeneze.

Kita kepenų funkcija yra detoksikacija. Vaistai ir kiti potencialiai toksiški junginiai kepenų ląstelėse gali virsti vandenyje tirpia forma, kuri leidžia jiems pasišalinti su tulžimi; juos taip pat galima sunaikinti arba konjuguoti (sujungti) su kitomis medžiagomis, kad susidarytų nekenksmingi produktai, kurie lengvai pasišalina iš organizmo. Kai kurios medžiagos laikinai nusėda Kupferio ląstelėse (specialios ląstelės, kurios sugeria pašalines daleles) arba kitose kepenų ląstelėse. Kupferio ląstelės ypač efektyviai pašalina ir sunaikina bakterijas ir kitas pašalines daleles. Jų dėka kepenys atlieka svarbų vaidmenį imuninėje organizmo gynyboje. Kepenys, turinčios tankų kraujagyslių tinklą, taip pat tarnauja kaip kraujo rezervuaras (jose nuolat yra apie 0,5 litro kraujo) ir dalyvauja reguliuojant kraujo tūrį ir kraujotaką organizme.

Apskritai kepenys atlieka daugiau nei 500 skirtingų funkcijų, o jų veiklos dirbtinai atkurti dar negalima. Šio organo pašalinimas neišvengiamai sukelia mirtį per 1–5 dienas. Tačiau kepenys turi didžiulį vidinį rezervą, turi nuostabų gebėjimą atsigauti po pažeidimų, todėl žmonės ir kiti žinduoliai gali išgyventi net pašalinus 70% kepenų audinio.

Struktūra.

Sudėtinga kepenų struktūra puikiai pritaikyta jos unikalioms funkcijoms. Akcijos susideda iš nedidelių struktūrinių vienetų – lobulių. Žmogaus kepenyse jų yra apie šimtą tūkstančių, kurių kiekvienas yra 1,5–2 mm ilgio ir 1–1,2 mm pločio. Lobulę sudaro kepenų ląstelės - hepatocitai, išsidėstę aplink centrinę veną. Hepatocitai jungiasi vienos ląstelės storio sluoksniais – taip vadinama. kepenų plokštelės. Jie radialiai skiriasi nuo centrinės venos, šakojasi ir jungiasi vienas su kitu, sudarydami sudėtingą sienų sistemą; siauri tarpai tarp jų, užpildyti krauju, žinomi kaip sinusoidai. Sinusoidai prilygsta kapiliarams; pereidami vienas į kitą, jie sudaro ištisinį labirintą. Kepenų skiltys aprūpinamos krauju iš vartų venos ir kepenų arterijos šakų, o skiltelėse susidariusi tulžis patenka į kanalėlių sistemą, iš jų į tulžies latakus ir pasišalina iš kepenų.

Kepenų vartų vena ir kepenų arterija suteikia kepenims neįprastą dvigubą kraujo tiekimą. Maistinių medžiagų turtingas kraujas iš skrandžio, žarnyno ir kelių kitų organų kapiliarų surenkamas į vartų veną, kuri, užuot nešusi kraują į širdį, kaip ir dauguma kitų venų, neša jį į kepenis. Kepenų skiltelėse vartų vena skyla į kapiliarų (sinusoidų) tinklą. Terminas „portalinė vena“ nurodo neįprastą kraujo transportavimo kryptį iš vieno organo kapiliarų į kito organo kapiliarus (inkstai ir hipofizė turi panašią kraujotakos sistemą).

Antrasis kraujo tiekimas į kepenis, kepenų arterija, perneša deguonies prisotintą kraują iš širdies į išorinius skilčių paviršius. Vartų vena suteikia 75-80%, o kepenų arterija 20-25% viso kepenų aprūpinimo krauju. Apskritai per minutę per kepenis praeina apie 1500 ml kraujo, t.y. ketvirtadalis širdies išeigos. Kraujas iš abiejų šaltinių patenka į sinusoidus, kur susimaišo ir patenka į centrinę veną. Iš centrinės venos prasideda kraujo nutekėjimas į širdį per skilties venas į kepenis (nepainioti su kepenų vartų vena).

Tulžį kepenų ląstelės išskiria į mažiausius tarp ląstelių esančius kanalėlius – tulžies kapiliarus. Per vidinę kanalėlių ir latakų sistemą jis surenkamas į tulžies lataką. Dalis tulžies patenka tiesiai į bendrąjį tulžies lataką ir išeina į plonąją žarną, tačiau didžioji jos dalis per cistinį lataką grąžinama į tulžies pūslę – mažą, raumeningomis sienelėmis maišelį, pritvirtintą prie kepenų, saugoti. Kai maistas patenka į žarnyną, tulžies pūslė susitraukia ir išmeta turinį į bendrą tulžies lataką, kuris atsiveria į dvylikapirštę žarną. Žmogaus kepenys per dieną pagamina apie 600 ml tulžies.

Portalo triada ir acinus.

Vartų venos, kepenų arterijos ir tulžies latako šakos yra viena šalia kitos, ties išorine skilties riba, ir sudaro vartų triadą. Kiekvienos skilties periferijoje yra keletas tokių portalų triadų.

Funkcinis kepenų vienetas yra acinusas. Tai audinio dalis, kuri supa portalo triadą ir apima limfinius kraujagysles, nervines skaidulas ir gretimus dviejų ar daugiau skiltelių sektorius. Viename acinus yra apie 20 kepenų ląstelių, esančių tarp vartų triados ir kiekvienos skiltelės centrinės venos. Dvimačiame vaizde paprastas acinusas atrodo kaip kraujagyslių grupė, apsupta gretimų skilčių sričių, o trimačiame – kaip uoga (acinus – lot. uoga), kabanti ant kraujo ir tulžies stiebo. laivai. Acinusas, kurio mikrovaskulinis rėmas susideda iš aukščiau nurodytų kraujo ir limfinių kraujagyslių, sinusoidų ir nervų, yra kepenų mikrocirkuliacijos vienetas.

kepenų ląstelės

(hepatocitai) turi daugiakampių formą, tačiau turi tris pagrindinius funkcinius paviršius: sinusoidinius, nukreiptus į sinusoidinį kanalą; vamzdinis - dalyvauja formuojant tulžies kapiliaro sienelę (jis neturi savo sienelės); ir tarpląstelinės – tiesiogiai besiribojančios su kaimyninėmis kepenų ląstelėmis.

Ito narvas

Ito ląstelės (sinonimai: kepenų žvaigždžių ląstelė, riebalus kaupianti ląstelė, lipocitas, angl. Kepenų žvaigždžių ląstelė, HSC, Ito ląstelė, Ito ląstelė) - pericitai, esantys perisinusoidinėje kepenų skilties erdvėje, galintys funkcionuoti dviem skirtingomis būsenomis. Ramus Ir aktyvuota. Suaktyvintos Ito ląstelės vaidina pagrindinį vaidmenį fibrogenezėje – rando audinio susidarymo metu kepenų pažeidimo atveju.

Nepažeistose kepenyse randamos žvaigždžių ląstelės rami būsena. Šioje būsenoje ląstelės turi keletą ataugų, apimančių sinusoidinį kapiliarą. Kitas skiriamasis ląstelių bruožas yra vitamino A (retinoido) atsargų buvimas jų citoplazmoje riebalų lašelių pavidalu. Ramios Ito ląstelės sudaro 5–8% visų kepenų ląstelių.

Ito ląstelių ataugos skirstomos į du tipus: perisinusoidinis(subendotelinis) ir tarphepatoceliulinis. Pirmieji palieka ląstelės kūną ir tęsiasi palei sinusoidinio kapiliaro paviršių, padengdami jį plonomis į pirštą panašiomis šakomis. Perisinusoidinės ataugos yra padengtos trumpais gaureliais ir turi būdingus ilgus mikroiškyšulius, besitęsiančius dar toliau išilgai kapiliarinio endotelio vamzdelio paviršiaus. Interhepatoceliulinės ataugos, įveikusios hepatocitų plokštelę ir pasiekusios gretimą sinusoidą, skirstomos į kelias perisinusoidines ataugas. Taigi Ito ląstelė vidutiniškai apima šiek tiek daugiau nei du gretimus sinusoidus.

Kai kepenys yra pažeistos, Ito ląstelės tampa aktyvuota būsena. Aktyvuotam fenotipui būdingas proliferacija, chemotaksė, susitraukimas, retinoidų atsargų praradimas ir miofibroblastinių ląstelių susidarymas. Aktyvintos kepenų žvaigždžių ląstelės taip pat rodo padidėjusį naujų genų, tokių kaip α-SMA, ICAM-1, chemokinų ir citokinų, kiekį. Aktyvinimas rodo ankstyvos fibrogenezės stadijos pradžią ir yra prieš padidėjusią ECM baltymų gamybą. Paskutiniam kepenų gijimo etapui būdinga padidėjusi aktyvuotų Ito ląstelių apoptozė, dėl kurios jų skaičius smarkiai sumažėja.

Norint vizualizuoti Ito ląsteles mikroskopu, naudojamas dažymas aukso chloridu. Taip pat buvo nustatyta, kad patikimas šių ląstelių diferenciacijos nuo kitų miofibroblastų žymuo yra jų reelino baltymo ekspresija.

Istorija

1876 ​​m. Karlas von Kupferis aprašė ląsteles, kurias pavadino „Sternzellen“ (žvaigždinės ląstelės). Dažant aukso oksidu, ląstelių citoplazmoje buvo matomi intarpai. Klaidingai laikydamas jas eritrocitų fragmentais, užfiksuotais fagocitozės būdu, Kupferis 1898 m. peržiūrėjo savo požiūrį į „žvaigždinę ląstelę“ kaip atskirą ląstelių tipą ir priskyrė jas fagocitams. Tačiau vėlesniais metais reguliariai pasirodė ląstelių, panašių į Kupfferio „žvaigždines ląsteles“, aprašymai. Jiems buvo suteikti įvairūs pavadinimai: intersticinės ląstelės, parasinusoidinės ląstelės, lipocitai, pericitai. Šių ląstelių vaidmuo išliko paslaptis 75 metus, kol profesorius Toshio Ito atrado kai kurias ląsteles, kuriose yra riebalų dėmių žmogaus kepenų perisinusoidinėje erdvėje. Ito jas pavadino „shibo-sesshu saibo“ – riebalus sugeriančiomis ląstelėmis. Supratęs, kad inkliuzai yra riebalai, kuriuos gamina ląstelės iš glikogeno, jis pakeitė pavadinimą į „shibo-chozo saibo“ – riebalus kaupiančios ląstelės. 1971 m. Kenjiro Wake'as įrodė Kupfferio „Sternzellen“ ir Ito riebalus kaupiančių ląstelių tapatybę. Wake'as taip pat nustatė, kad šios ląstelės atlieka svarbų vaidmenį kaupiant vitaminą A (iki tol buvo manoma, kad vitaminas A nusėda Kupfferio ląstelėse). Netrukus po to Kentas ir Popperis pademonstravo glaudų Ito ląstelių ryšį su kepenų fibroze. Šie atradimai pradėjo išsamų Ito ląstelių tyrimą.

taip pat žr

Parašykite apžvalgą apie straipsnį "Ito narvas"

Nuorodos

• Young-O Queon, Zachary D. Goodman, Jules L. Dienstag, Eugene R. Schiff, Nathaniel A. Brown, Elmar Burkhardt, Robert Skunkhoven, David A. Brenner, Michael W. Fried (2001). Žurnalas Haepotology 35; 749-755. - Straipsnio vertimas žurnale „Infekcijos ir antimikrobinė terapija“, 04/N 3/2002, Consilium-Medicum svetainėje.
• Popper H: vitamino A pasiskirstymas audiniuose, parodytas fluorescencine mikroskopija. Physiol Rev 1944, 24:.

Pastabos

1. Geerts A. (2001) Ramių kepenų žvaigždžių ląstelių istorija, nevienalytiškumas, vystymosi biologija ir funkcijos. Seminas Kepenų Dis. 21(3):311-35. PMID
2. Wake, K. (1988) Kepenų perivaskulinės ląstelės, atskleistos aukso ir sidabro impregnavimo metodu ir elektroniniu mikroskopu. Kepenų biopatologijoje. Ultrastruktūrinis požiūris“ (Motta, P. M., red.) p. 23-36, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, Nyderlandai
3. Stanciu A, Cotutiu C, Amalinei C. (2002) Nauji duomenys apie ITO ląsteles. Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi. 107(2):235-9. PMID
4. Johnas P. Iredale'as (2001 m.) Kepenų žvaigždžių ląstelių elgesys sprendžiant kepenų pažeidimą. Seminars in Liver Disease, 21(3):PMID- on Medscape.
5. Kobold D, Grundmann A, Piscaglia F, Eisenbach C, Neubauer K, Steffgen J, Ramadori G, Knittel T. (2002) Reelino ekspresija kepenų žvaigždžių ląstelėse ir kepenų audinių taisymo metu: naujas žymeklis, skirtas HSC diferencijuoti nuo kitų kepenų miofibroblastų. J Hepatol. 36(5):607-13. PMID
6. Adrianas Reubenas (2002 m.) hepatologija. 35 tomas, 2 leidimas, 503-504 psl
7. Suematsu M, Aiso S. (2001) Profesorius Toshio Ito: aiškiaregis pericitų biologijoje. Keio J Med. 50(2):66-71. PMID
8. Querner F: Der mikroskopische Nachweis von Vitamin A im animalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung. Klin Wschr 1935, 14:.

Ito narvą apibūdinanti ištrauka

Po pusvalandžio Kutuzovas išvyko į Tatarinovą, o Benigsenas su palyda, įskaitant Pierre'ą, važiavo palei liniją.

Benigsenas iš Gorkio nuėjo aukštu keliu prie tilto, prie kurio pareigūnas nuo piliakalnio nurodė Pjerą kaip pozicijos centrą, o šalia kurio krante gulėjo šienu dvokiančios žolės eilės. Jie nuvažiavo tiltu į Borodino kaimą, iš ten pasuko į kairę ir pro daugybę karių bei ginklų nuvažiavo į aukštą piliakalnį, ant kurio milicininkai kasė žemę. Tai buvo redutas, kuris dar neturėjo pavadinimo, tada jis buvo vadinamas Raevskio redutu arba pilkapio baterija.

Pierre'as į šį redutą daug dėmesio nekreipė. Jis nežinojo, kad ši vieta jam įsimins labiau nei visos vietos Borodino lauke. Tada jie nuvažiavo per daubą iki Semjonovskio, kur kareiviai traukė paskutinius trobelių ir tvartų rąstus. Paskui nuokalnėn ir įkalnėn važiavo pirmyn per skaldytus rugius, išmuštus kaip kruša, keliu į flushus [savotiškas įtvirtinimas. (L.N. Tolstojaus pastaba.) ], taip pat tada dar iškastas.

Benigsenas sustojo ties skraidyklėmis ir ėmė žiūrėti į priekį į Ševardinskio redutą (kuris buvo mūsų vakar), ant kurio buvo matyti keli raiteliai. Pareigūnai pasakė, kad ten buvo Napoleonas arba Muratas. Ir visi nekantriai žiūrėjo į šį raitelių būrį. Pierre'as taip pat žiūrėjo ten, bandydamas atspėti, kuris iš šių vos matomų žmonių yra Napoleonas. Galiausiai raiteliai nuvažiavo nuo piliakalnio ir dingo.

Benigsenas kreipėsi į generolą, kuris priėjo prie jo, ir ėmė aiškinti visą mūsų kariuomenės padėtį. Pierre'as klausėsi Benigseno žodžių, įtempdamas visas savo protines galias, kad suprastų būsimo mūšio esmę, tačiau su apmaudu jautė, kad jo protinių gebėjimų tam nepakanka. Jis nieko nesuprato. Bennigsenas nustojo kalbėti ir, pastebėjęs besiklausančią Pierre'o figūrą, staiga pasakė, atsisukęs į jį:

- Tau, manau, neįdomu?

„O, priešingai, tai labai įdomu“, - ne visai tiesą pakartojo Pierre'as.

Iš paplūdimių jie dar labiau patraukė į kairę keliu, vingiuodami per tankų, žemą beržyną. Jo viduryje

miške, prieš juos kelyje iššoko rudasis kiškis baltomis kojomis ir, išsigandęs daugybės arklių trakštelėjimo, buvo toks sutrikęs, kad ilgai šokinėjo keliu priešais juos sujaudindamas generolą. dėmesio ir juoko, o tik keliems balsams sušukus puolė į šalį ir pasislėpė tankmėje. Pavažiavę dvi verstas per mišką, jie išvažiavo į proskyną, kurioje stovėjo Tučkovo korpuso, turėjusio apsaugoti kairįjį flangą, kariuomenė.

Čia, kraštutiniame kairiajame flange, Bennigsenas kalbėjo daug ir karštai ir padarė, kaip Pierre'ui atrodė, svarbų įsakymą kariniu požiūriu. Prieš Tučkovo kariuomenės dislokavimą buvo pakilimas. Šios aukštumos kariuomenės neužėmė. Bennigsenas garsiai kritikavo šią klaidą, sakydamas, kad kvaila palikti aukštumą neužimtą ir po ja pastatyti kariuomenę. Kai kurie generolai išreiškė tą pačią nuomonę. Vienas ypač su kariniu įniršiu kalbėjo, kad jie čia buvo pasodinti paskersti. Bennigsenas įsakė savo vardu perkelti kariuomenę į aukštumas.

Šis įsakymas kairiajame sparne privertė Pierre'ą dar labiau suabejoti savo gebėjimu suprasti karinius reikalus. Klausydamasis Bennigseno ir generolų, kurie smerkė kariuomenės padėtį po kalnu, Pierre'as juos visiškai suprato ir pasidalino jų nuomone; bet kaip tik dėl to jis negalėjo suprasti, kaip tas, kuris juos čia patalpino po kalnu, galėjo padaryti tokią akivaizdžią ir šiurkščią klaidą.

Pierre'as nežinojo, kad šie būriai buvo siunčiami ne ginti pozicijos, kaip manė Bennigsenas, o buvo patalpintos į paslėptą vietą pasalai, tai yra, kad būtų nepastebėtas ir staiga smogtų besiveržiančiam priešui. Bennigsenas to nežinojo ir dėl ypatingų priežasčių pervedė kariuomenę į priekį, apie tai nepasakydamas vyriausiajam vadui.

Šį giedrą rugpjūčio 25 d. vakarą princas Andrejus gulėjo, pasirėmęs ant rankos, sudaužytame tvarte Knyazkovo kaime, savo pulko pakraštyje. Pro skylę įlūžusioje sienoje jis žiūrėjo į trisdešimtmečių beržų juostą, palei tvorą nupjautomis apatinėmis šakomis, į ariamąją žemę, ant kurios buvo išdaužtomis avižų krūvomis, ir į krūmus, palei kuriuos tvorą. matėsi gaisrų dūmai – kareivių virtuvės.

Kad ir kokia ankšta ir niekam nereikalinga ir kad ir kokia sunki dabar jo gyvenimas atrodė princui Andrejui, jis, kaip ir prieš septynerius metus Austerlice mūšio išvakarėse, jautėsi susijaudinęs ir susierzinęs.

Įsakymus rytojaus mūšiui jis davė ir gavo. Daugiau jam nebuvo ką veikti. Tačiau pačios paprasčiausios, aiškiausios ir todėl baisiausios mintys nepaliko ramybėje. Jis žinojo, kad rytojaus mūšis bus baisiausias iš visų tų, kuriuose jis dalyvavo, ir mirties galimybė pirmą kartą gyvenime, neatsižvelgdamas į pasaulietiškumą, negalvodamas, kaip tai paveiks kitus, bet tik santykį su savimi, su savo siela, gyvai, beveik užtikrintai, paprastai ir siaubingai, ji jam prisistatė. Ir nuo šios idėjos viršūnės viskas, kas jį anksčiau kankino ir užėmė, staiga nušvito šalta balta šviesa, be šešėlių, be perspektyvos, be kontūrų skirtumo. Visas gyvenimas jam atrodė kaip stebuklingas žibintas, į kurį jis ilgą laiką žiūrėjo pro stiklą ir dirbtinėje šviesoje. Dabar jis staiga ryškioje dienos šviesoje be stiklo pamatė šiuos blogai nudažytus paveikslus. „Taip, taip, čia jie, tie netikri vaizdai, kurie mane jaudino, džiugino ir kankino“, – sakė jis sau, vaizduotėje vartydamas pagrindinius savo stebuklingo gyvenimo žibinto paveikslus, dabar žvelgdamas į juos šioje šaltoje baltoje dienos šviesoje. - aiški mintis apie mirtį. – Štai jos, šiurkščiai nupieštos figūros, kurios atrodė kažkas gražaus ir paslaptingo. Šlovė, viešasis gėris, meilė moteriai, pačiai tėvynei – kokie puikūs man atrodė šios nuotraukos, kokia gili prasmė jie atrodė kupini! Ir viskas taip paprasta, blyšku ir grubu to ryto šaltoje baltoje šviesoje, kad jaučiu, kaip man kyla. Jo dėmesį patraukė trys pagrindiniai jo gyvenimo vargai. Jo meilė moteriai, tėvo mirtis ir prancūzų invazija, užėmusi pusę Rusijos. "Meilė. Ši mergina, kuri man atrodė kupina paslaptingų galių. Kaip aš ją mylėjau! Kuriau poetinius planus apie meilę, apie laimę su ja. O brangus berniukas! – piktai pasakė jis garsiai. - Kaip! Tikėjau kažkokia idealia meile, kuri turėjo išlaikyti ją man ištikimą visus mano nebuvimo metus! Kaip švelnus pasakos balandis, ji tikriausiai nuvyto nuo manęs. Ir visa tai daug paprasčiau... Visa tai siaubingai paprasta, šlykštu!

Tarpląstelinis ryšys gali būti realizuotas parakrinine sekrecija ir tiesioginiais ląstelių kontaktais. Yra žinoma, kad kepenų perisinusoidinės ląstelės (HPC) nustato regioninę kamieninių ląstelių nišą ir nustato jų diferenciaciją. Tuo pačiu metu HPC išlieka prastai apibūdinamas molekuliniu ir ląstelių lygiu.

Projekto tikslas buvo ištirti žiurkių kepenų perisinusoidinių ląstelių sąveiką su įvairiomis kamieninėmis ląstelėmis, tokiomis kaip žmogaus virkštelės kraujo mononuklearinė ląstelių frakcija (UCB-MC) ir iš žiurkės kaulų čiulpų gautų daugiapotencinių mezenchiminių stromos ląstelių (BM-MMSC).

medžiagos ir metodai. Žiurkės BM-MSC ir HPC, žmogaus UCB-MC ląstelės buvo gautos naudojant standartinius metodus. Norėdami ištirti HPC parakrininį reguliavimą, kartu auginome UCB-MC arba BM-MMSC ląsteles su HPC, naudodami Boyden kameras ir kondicionuotas HPC ląstelių terpes. Skirtingai pažymėtos ląstelės buvo auginamos kartu, o jų sąveika buvo stebima fazinio kontrasto fluorescencine mikroskopija ir imunocitochemija.

rezultatus. Pirmąją auginimo savaitę buvo vitamino A autofluorescencija dėl PHC gebėjimo kaupti riebalus. BM-MMSC parodė didelį gyvybingumą visuose bendros kultūros modeliuose. Po 2 dienų inkubacijos kondicionuotoje terpėje kartu su BM-MMSC kultūra su HPC pastebėjome MMSC morfologijos pokyčius – sumažėjo jų dydis ir trumpėjo jų daigai. α-Smooth Muscle Aktino ir desmino ekspresija buvo panaši į miofibroblastą – tarpinę Ito ląstelių kultūros formą in vitro. Šie pokyčiai gali atsirasti dėl parakrininės stimuliacijos HPC. Didžiausias HPC poveikis UCB-MC ląstelėms buvo pastebėtas bendroje kontaktinėje kultūroje, todėl UCB-MC ląstelėms svarbu sukurti tiesioginius kontaktus tarp ląstelių, kad būtų išlaikytas jų gyvybingumas. Mes nepastebėjome jokio ląstelių sintezės tarp HPC / UCB ir HPC / BM-MMSC ląstelių bendrose kultūrose. Tolesniuose eksperimentuose planuojame ištirti HPC gaminamus augimo faktorius, skirtus kamieninių ląstelių diferencijavimui kepenyse.

Įvadas.

Tarp įvairių kepenų ląstelių ypač domina perisinusoidinės kepenų ląstelės (Ito ląstelės). Dėl augimo faktorių ir ekstraląstelinės matricos komponentų išskyrimo jie sukuria hepatocitų mikroaplinką, o daugybė mokslinių tyrimų įrodė kepenų žvaigždžių ląstelių gebėjimą formuoti mikroaplinką pirmtakinėms ląstelėms (įskaitant kraujodaros) ir daryti įtaką jų diferenciacijai į hepatocitai. Šių ląstelių populiacijų tarpląstelinė sąveika gali būti vykdoma parakrinine augimo faktorių sekrecija arba tiesioginiais tarpląsteliniais kontaktais, tačiau šių procesų molekulinis ir ląstelinis pagrindas lieka neištirtas.

Tyrimo tikslas.

Sąveikos mechanizmų tyrimas Ito ląstelės su hematopoetinėmis (HSC) ir mezenchiminėmis (MMSC) kamieninėmis ląstelėmis in vitro sąlygomis.

Medžiagos ir metodai.

Žiurkių kepenų Ito ląstelės buvo išskirtos dviem skirtingais fermentiniais metodais. Tuo pačiu metu stromos MMSC buvo gauti iš žiurkių kaulų čiulpų. Hematopoetinių kamieninių ląstelių mononuklearinė frakcija, išskirta iš žmogaus virkštelės kraujo. Ito ląstelių parakrininis poveikis buvo tiriamas kultivuojant MMSC ir HSC terpėje, kurioje augo Ito ląstelės, ir kartu kultivuojant ląsteles, atskirtas pusiau pralaidžia membrana. Ištirta tarpląstelinių kontaktų įtaka bendrai auginant ląsteles. Siekiant geriau vizualizuoti, kiekviena populiacija buvo pažymėta individualia fluorescencine etikete. Ląstelių morfologija buvo įvertinta faziniu kontrastu ir fluorescencine mikroskopija. Kultivuojamų ląstelių fenotipinės savybės buvo tiriamos imunocitochemine analize.

Rezultatai.

Per savaitę po perisinusoidinių ląstelių išskyrimo pastebėjome jų gebėjimą autofluorescencuoti dėl jų gebėjimo kaupti riebalus. Tada ląstelės perėjo į tarpinę augimo fazę ir įgavo žvaigždžių formą. Pradinėse Ito ląstelių auginimo su žiurkės kaulų čiulpų MMSC stadijose MMSC gyvybingumas buvo išlaikytas visuose auginimo variantuose. Antrą dieną, auginant MMSC Ito ląstelių auginimo terpėje, pasikeitė MMSC morfologija – sumažėjo jų dydis, sutrumpėjo procesai. Alfa lygiųjų raumenų aktino ir desmino ekspresija MMSC padidėjo, o tai rodo jų fenotipinį panašumą su miofibroblastais, tarpine aktyvuotų Ito ląstelių augimo stadija in vitro. Mūsų duomenys rodo Ito ląstelių išskiriamų parakrininių faktorių poveikį MMSC savybėms kultūroje.

Remiantis hematopoetinių kamieninių ląstelių auginimu kartu su Ito ląstelėmis, buvo įrodyta, kad kraujodaros kamieninės ląstelės išlieka gyvybingos tik tada, kai jos kartu auginamos su Ito ląstelėmis. Remiantis mišrių kultūrų fluorescencine analize, skirtingų populiacijų ląstelių susiliejimo reiškinys nebuvo atskleistas.

Išvados. Norint išlaikyti hematopoetinių kamieninių ląstelių gyvybingumą, tiesioginis tarpląstelinis kontaktas su Ito ląstelėmis yra lemiamas veiksnys. Parakrininis reguliavimas buvo pastebėtas tik tada, kai MMSC buvo auginami maistinėje terpėje, kurioje augo Ito ląstelės. Ito ląstelių gaminamų specifinių veiksnių įtakos HSC ir MMSC diferenciacijai ląstelių kultūroje tyrimą planuojama atlikti būsimuose tyrimuose.

Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kiyasov A.P.
SEI HPE "Federalinės sveikatos ir socialinės plėtros agentūros Kazanės valstybinis medicinos universitetas"

Pagrindinis endotoksinų šaltinis organizmeyra gramneigiama žarnyno flora. Šiuo metu neabejotina, kad kepenys yra pagrindinis organas endotoksinų valymas. Endotoksiną pirmiausia pasisavina ląstelė Kami Kupffer (KK), sąveikaujantis su membranos receptoriumi CD 14. Gali prisijungti prie receptoriaus kaip pats lipopolisacharidas(LPS), ir jo kompleksas su lipidą A jungiančiu baltymu plazmos gumulas. LPS sąveika su kepenų makrofagais sukelia reakcijų kaskadą, pagrįstą jų gamyba ir išsiskyrimu. citokinų ir kitų biologiškai aktyvių jonų tarpininkai.

Yra daug publikacijų apie makro vaidmenįkepenyse (LK) įsisavinant ir pašalinant bakterijų LPS, tačiau endotelio sąveika su kitais mezenchiminis ląstelės, ypač perisinusoidinis Ito ląstelių, praktiškai nėra tiriamas.

TYRIMO METODAS

Baltiesiems žiurkių patinams, sveriantiems 200 g, buvo sušvirkšta į pilvaplėvės ertmę 1 ml sterilaus fiziologinio tirpalo. labai išgrynintas liofilizuotas LPS E. coli padermė 0111 0,5 dozėmis,2,5, 10, 25 ir 50 mg/kg. 0,5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 valandų ir 1 savaitės laikotarpiais vidaus organai buvo pašalinti anestezijos metu ir patalpinti į buferinį 10% formaliną. Medžiaga buvo įterpta į parafino blokus. 5 µm storio pjūviai buvo nudažyti imunohistocheminisstreptavidinas-biotinas antikūnų prieš desminą metodu, α - sklandžiai - raumenų aktinas (A-GMA) ir branduolinis antigenas gerai besidauginančios ląstelės ( PCNA“, Dako"). Desminas buvo naudojamas kaip žymeklis perisinusoidinisIto ląstelės, A-GMA - kaipžymeklis ve miofibroblastai, PCNA - proliferuojančios ląstelės. Endotoksinui kepenų ląstelėse aptikti, išgrynintas anti-Re-glikolipidasantikūnų (Bendrosios ir klinikinės patologijos institutas KDO, Maskva).

TYRIMO REZULTATAI

Vartojant 25 mg/kg ir didesnę dozę, mirtinas šokas buvo pastebėtas praėjus 6 valandoms po LPS vartojimo. Ūmus LPS poveikis kepenų audiniui sukėlė Ito ląstelių aktyvavimą, kuris pasireiškė jų skaičiaus padidėjimu. Skaičius desminpozityvus ląstelės padidėjo nuo 6 valandų po LPS injekcijos ir pasiekė maksimumą ma iki 48-72 h (1 pav., a, b).

Ryžiai. 1. Žiurkių kepenų skyriai sy, apdorotas LSAB -aš- chennymiantikūnai prieš des mano(grupė α - sklandžiai gimdos kaklelio aktinas (c), x400 (bet, b) x200 (c).

a – prieš endotoksino įvedimąįjungtas, vienišas desminpozityvusIto ląstelės periportalinėje zonoje; b– 72 valpo endotoksino vartojimo apie: daug desminpozityvus Ito ląstelės; in- 120 valandų po en įvedimo dotoksinas: α - lygiųjų raumenų yra tik ny aktinoco lygiųjų raumenų ląstelėse kah laivai.

1 savaitės numeris desminpozityvus ląstelių sumažėjo, betbuvo didesnis nei etaloniniai rodikliai. At Šiuo atveju mes nepastebėjome atsiradimo A-GMA teigiamas ląstelės sinusuose dah kepenys. vidinis teigiamas kontrolė, kai dažomas antikūnais prieš A-GMA padeda nustatyti lygiųjų raumenų ląstelesvartų takų veninės kraujagyslės, kuriose yra A-GMA (1 pav., in). Todėl, nepaisant Ito ląstelių skaičiaus padidėjimo, vieną kartą LPS poveikis nelemia transformacijos ( transdiferenciacija) į miofibroblastus.

Ryžiai. 2. Kepenų sekcijosžiurkės, gydomos LSAB - pažymėti antikūnai prieš PCNA. a – prieš įvedant en dotoksinas: vienasdauginančių genų patocitų, x200; b - 72 valandos po endotoksino įvedimo: daug proliferuojančių hepatocitų, x400.

Didėjantis kiekis desminpozityvus ląstelės prasidėjo portalo zonoje. Nuo 6 iki 24 val. po LPS vartojimo perisinusoidinis ląstelės buvo aptiktos tik aplink vartų takus, t.y. 1-oje aci zonoje noosa. 48-72 val., kai buvo pastebėtos aguonosmaksimalus kiekis desminpozityvus klijai srovė, jie atsirado ir kitose acino zonose; nepaisant to, dauguma Ito ląstelių vis dar buvo periportaliai.

Galbūt taip yra dėl to, kad periportaliaiesantys CC yra pirmieji fiksuojami endotoksinas, patenkantis iš žarnyno per vartų veną arba iš sisteminės kraujotakos. Ak tityvuotas QC gamina platų asortimentą citokinų, kurie, kaip manoma, skatina Ito ląstelių aktyvavimą ir transdiferenciacija juos į miofibroblastus. Akivaizdu, kad todėl Ito ląstelės, esančios šalia aktyvuotų kepenų makrofagų (1-oje acinuso zonoje), pirmosios reaguoja į citokinų išsiskyrimą. Tačiau savo tyrime jų nepastebėjome. transdiferenciacija in miofibroblastai, ir tai rodo, kad CK ir hepatocitų išskiriami citokinai gali būti veiksnys, palaikantis jau prasidėjusį procesą. transdiferenciacija, bet jie tikriausiai negali to sukelti, kai kepenys veikia vieną kartą LPS.

Ląstelių proliferacinio aktyvumo padidėjimas taip pat buvo pastebėtas daugiausia 1-oje acinuso zonoje. Tai tikriausiai reiškia, kad visi (arba beveik visi) procesai yra skirti apie- ir parakrininis tarpląstelinės sąveikos reguliavimas, tęsiasi periportalinėse zonose. Pastebėtas proliferuojančių ląstelių skaičiaus padidėjimas praėjus 24 val. po LPS vartojimo; teigiamų ląstelių skaičius padidėjo iki 72 val. (maksimalus proliferacinis aktyvumas, 2 pav. a, b). Daugėjo ir hepatocitai, ir sinusoidinės ląstelės. Tačiau dažymas PCNA neduoda gebėjimas nustatyti proliferacijos tipą vairuojant sinusoidines ląsteles. Remiantis literatūra, endotoksino veikimas padidina QC numeris. Jie mano, kad tai apie gaunama tiek dėl kepenų makrofagų dauginimosi, tiek dėl monocitų migracijos iš kitų organų. CK išskiriami citokinai gali padidinti Ito ląstelių proliferacinį pajėgumą. Todėl logiška manyti, kad besidauginančias ląsteles vaizduoja perisinusoidinis Ito ląstelės. Mūsų užfiksuotas jų skaičiaus padidėjimas, matyt, būtinas norint padidinti augimo faktorių sintezę ir atkurti tarpląstelinę matricą pažeidimo sąlygomis. Tai gali būti viena iš kompensacinių-regeneracinių kepenų reakcijų grandžių, nes Ito ląstelės yra pagrindinis ekstraląstelinės matricos komponentų, kamieninių ląstelių faktoriaus ir hepatocitų augimo faktoriaus, dalyvaujančių atstatyme ir diferenciacijoje, šaltinis. rovka kepenų epitelio ląstelės. Nėra ta pati Ito ląstelių transformacija į miofibroblastai rodo, kad vieno endotoksinų agresijos epizodo nepakanka kepenų fibrozei išsivystyti.

Taigi, ūminis endotok poveikis sina sukelia skaičiaus padidėjimą desminpozityvus Ito ląstelės, kurios yra netiesioginis kepenų pažeidimo požymis. Kiekis perisinusoidinis ląstelių daugėja, matyt, dėl jų dauginimosi. Vienas endotoksinų agresijos epizodas sukelia apsisukimą mano aktyvinimas perisinusoidinis Ito ląstelės ir nepriveda prie transdiferenciacijaį miofibroblastus. Šiuo atžvilgiu galima daryti prielaidą, kad aktyvavimo mechanizmuose ir transdiferenciacija Ito ląstelėse dalyvauja ne tik endotoksinas ir citokinai, bet ir kai kurie kiti tarpląstelinės sąveikos veiksniai.

LITERATŪRA

1. Majanskis D.N., Wisse E., Decker K. // Naujos sienos hepatologija. Novosibirskas, 1992 m.

2. Salachovas I.M., Ipatovas A.I., Konevas Yu.V., Jakovlevas M.Yu. // Pasiseka šiuolaikiškai, biol. 1998. T. 118, leidimas. 1. S. 33-49.

3. Jakovlevas M. Yu. // Kazanė . m vienetų žurnalas 1988. Nr. 5. S. 353-358.

4. Freudenbergas N., Piotraschke J., Galanos C. et al. // Virchows Arch. [b]. 1992 m. t. 61.P. 343-349.

5. Gressneris A. M. // Hepatogastronerologija. 1996 t. 43. P. 92-103.

6. Schmidtas C, Bladt F., Goedecke S. ir kt. // Gamta. 1995 t. 373, Nr.6516. P. 699-702.

7. protingas E., Braet F., Luo D. ir kt. // Toksikolis. Pathol. 1996 m. t. 24, Nr.1. P. 100-111.

Raktažodžiai

Kepenys / ITO STAR CELLS/ MORFOLOGIJA / CHARAKTERISTIKOS / VITAMINAS A / FIBROZĖ

anotacija mokslinis straipsnis apie fundamentinę mediciną, mokslinio darbo autorius - Tsyrkunovas V.M., Andrejevas V.P., Kravčukas R.I., Kondratovičius I.A.

Įvadas. Ito žvaigždžių ląstelių (ISC) vaidmuo apibrėžiamas kaip vienas iš pirmaujančių kepenų fibrozės vystymuisi, tačiau intravitalinė ITO struktūros vizualizacija klinikinėje praktikoje naudojama minimaliai. Darbo tikslas: remiantis intravitalinių kepenų biopsijos mėginių citologinio identifikavimo rezultatais, pateikti HCI struktūrines ir funkcines charakteristikas. Medžiagos ir metodai. Naudoti klasikiniai biopsijos mėginių šviesos ir elektroninės mikroskopijos metodai bei originalūs metodai, naudojant itin plonus pjūvius, fiksavimą ir dažymą. Rezultatai. Lėtiniu hepatitu C sergančių pacientų kepenų biopsijos mėginių šviesos ir elektroninės mikroskopijos fotoiliustracijos rodo struktūrines HSC ypatybes įvairiuose etapuose (poilsio, aktyvacijos) ir virsmo miofibroblastais procese. Išvados. Originalių klinikinio morfologinio identifikavimo ir HCI funkcinės būklės vertinimo metodų panaudojimas pagerins kepenų fibrozės diagnostikos ir prognozavimo kokybę.

Susijusios temos fundamentinės medicinos moksliniai darbai, mokslinio darbo autorius - Tsyrkunovas V.M., Andrejevas V.P., Kravčukas R.I., Kondratovičius I.A.

• Klinikinė kepenų citologija: Kupffer ląstelės

  2017 / Tsyrkunovas V.M., Andrejevas V.P., Kravčiukas R.I., Prokopčikas N.I.

• Autologinių mezenchiminių kamieninių ląstelių, persodintų į kepenis sergant virusine ciroze, morfologinio poveikio stebėjimas (klinikinis stebėjimas)

  2018 / Aukashnk S.P., Alenikova O.V., Tsyrkunov V.M., Isaykina Ya.I., Kravchuk R.I.

• Klinikinė kepenų morfologija: nekrozė

  2017 / Tsyrkunov V.M., Prokopchik N.I., Andreev V.P., Kravchuk R.I.

• Kepenų žvaigždžių ląstelių polimorfizmas ir jų vaidmuo fibrogenezėje

  2008 / Aidagulova S.V., Kapustina V.I.

• Sinusoidinių kepenų ląstelių struktūra pacientams, užsikrėtusiems ŽIV / hepatito C virusu

  2013 / Matievskaya N. V., Tsyrkunov V. M., Kravchuk R. I., Andreev V. P.

• Mezenchiminės kamieninės ląstelės kaip perspektyvus kepenų fibrozės/cirozės gydymo metodas

  2013 / Lukashik S. P., Aleinikova O. V., Tsyrkunov V. M., Isaykina Ya. I., Romanova O. N., Shimansky A. T., Kravchuk R. I.

• Žiurkių kepenų miofibroblastų išskyrimas ir auginimas eksplantacijos būdu

  2012 / Miyanovich O., Shafigullina A. K., Rizvanov A. A., Kiyasov A. P.

• Patologiniai kepenų fibrozės susidarymo aspektai sergant HCV infekcija ir kitais kepenų pažeidimais: šiuolaikinės koncepcijos

  2009 / Lukašikas S. P., Tsyrkunovas V. M.

• Žiurkių miofibroblastų, gautų iš kepenų vartų takų struktūrų eksplantacijos būdu, analizė

  2013 / Miyanovich O., Katina M. N., Rizvanov A. A., Kiyasov A. P.

• Persodintos kepenų žvaigždžių ląstelės dalyvauja organų regeneracijoje po dalinės hepatektomijos be pavojaus išsivystyti kepenų fibrozei

  2012 / Shafigullina A. K., Gumerova A. A., Trondin A. A., Titova M. A., Gazizov I. M., Burganova G. R., Kaligin M. S., Andreeva D. I., Rizvanov A. A., Mukhammedov A. R., Kiyasov A. P.

įžanga. Ito žvaigždžių ląstelių (Hepatic Stellate Cells, HSC) vaidmuo buvo nustatytas kaip vienas iš pirmaujančių kepenų fibrozės vystymosi srityje, tačiau klinikinėje praktikoje HSC struktūrų intravitalinės vizualizacijos naudojimas yra minimalus. Darbo tikslas – remiantis intravitalinių kepenų biopsijos mėginių citologinės identifikacijos išvadomis, pristatyti struktūrinę ir funkcinę HSC charakteristiką. medžiagos ir metodai. Taikyti klasikiniai biopsijos mėginių šviesos ir elektroninės mikroskopijos metodai, naudojant originalią ultraplonų pjūvių, fiksavimo ir dažymo metodiką. rezultatus. Lėtiniu hepatitu C sergančių pacientų kepenų biopsijos mėginių HSC struktūrinės charakteristikos pateiktos šviesos ir elektroninės mikroskopijos nuotraukų iliustracijose. HSC vaizduojami skirtinguose etapuose (poilsio, aktyvacijos) ir transformacijos į miofibroblastus proceso metu. Išvados. Originalių HSC klinikinio ir morfologinio identifikavimo bei funkcinės būklės vertinimo metodų panaudojimas leidžia pagerinti kepenų fibrozės diagnostikos ir prognozės kokybę.

Mokslinio darbo tekstas tema "Klinikinė kepenų citologija: Ito stellate ląstelės"

UDC 616.36-076.5

KLINIKINĖ KEPENŲ CITOLOGIJA: ITO žvaigždžių ląstelės

Tsyrkunovas V. M. ( [apsaugotas el. paštas]), Andrejevas V.P. ( [apsaugotas el. paštas]), Kravčiukas R. I. ( [apsaugotas el. paštas]), Kondratovičius I. A. ( [apsaugotas el. paštas]) EE "Grodino valstybinis medicinos universitetas", Gardinas, Baltarusija

Įvadas. Ito žvaigždžių ląstelių (ISC) vaidmuo apibrėžiamas kaip vienas iš pirmaujančių kepenų fibrozės vystymuisi, tačiau intravitalinė ITO struktūros vizualizacija klinikinėje praktikoje naudojama minimaliai.

Darbo tikslas: remiantis intravitalinių kepenų biopsijos mėginių citologinės identifikacijos rezultatais, pateikti HCI struktūrines ir funkcines charakteristikas.

Medžiagos ir metodai. Naudoti klasikiniai biopsijos mėginių šviesos ir elektroninės mikroskopijos metodai bei originali technika naudojant itin plonus pjūvius, fiksavimą ir dažymą.

Rezultatai. Lėtiniu hepatitu C sergančių pacientų kepenų biopsijos mėginių šviesos ir elektroninės mikroskopijos fotoiliustracijos rodo struktūrines HSC ypatybes įvairiuose etapuose (poilsio, aktyvacijos) ir virsmo miofibroblastais procese.

Išvados. Originalių klinikinio morfologinio identifikavimo ir HCI funkcinės būklės vertinimo metodų panaudojimas pagerins kepenų fibrozės diagnostikos ir prognozavimo kokybę.

Raktažodžiai: kepenys, Ito žvaigždžių ląstelės, morfologija, charakteristikos, vitaminas A, fibrozė.

Įvadas

Nepalanki daugumos įvairių etiologijų lėtinių difuzinių kepenų pažeidimų, įskaitant lėtinį hepatitą C (CHC), baigtis yra kepenų fibrozė, kurios vystymosi pagrindiniai dalyviai yra aktyvuoti fibroblastai, kurių pagrindinis šaltinis yra aktyvuotos Ito stellate ląstelės (SSC). .

HSC, sinonimas – kepenų žvaigždžių ląstelės, riebalus kaupiančios ląstelės, perisinusoidiniai lipocitai, žvaigždinės ląstelės (angl. Hepatic Stellate Cell, HSC, Cell of Ito, Ito cell). Pirmą kartą ZKI 1876 metais aprašė K. Kupfferis ir pavadino žvaigždinėmis ląstelėmis ("Stemzellen"). T. Ito, radęs juose riebalų lašelių, iš pradžių pavadino juos riebalus sugeriančiais („shibo-sesshusaibo“), o paskui, nustatęs, kad riebalus pačios ląstelės gamina iš glikogeno, riebalus kaupiančių ląstelių („shibo“). -chozosaibo“). 1971 metais K. Wake'as įrodė Kupferio žvaigždžių ląstelių ir riebalus kaupiančių Ito ląstelių tapatumą ir kad šios ląstelės „saugo“ vitaminą A.

Apie 80 % organizme esančio vitamino A kaupiasi kepenyse, o iki 80 % visų kepenų retinoidų nusėda HKI riebaliniuose lašuose. Chilomikronų sudėtyje esantys retinolio esteriai patenka į hepatocitus, kur paverčiami retinoliu, sudarydami vitamino A kompleksą su retinolį rišančiu baltymu (RBP), kuris išskiriamas į perisinusoidinę erdvę, iš kur jį nusodina ląstelės.

K. Popperio nustatytas glaudus HCI ryšys su kepenų fibroze parodė jų dinaminę, o ne statinę funkciją – galimybę tiesiogiai dalyvauti intralobulinės perihepatoceliulinės matricos remodeliavime.

Pagrindinis kepenų morfologinio tyrimo metodas, atliekamas siekiant įvertinti intravitalinių biopsijos mėginių pokyčius, yra šviesos mikroskopija, kuri klinikinėje praktikoje leidžia nustatyti reprodukcijos aktyvumą.

deginimas ir chroniškumo stadija. Metodo trūkumas – maža skiriamoji geba, neleidžianti įvertinti ląstelių struktūrinių ypatybių, tarpląstelinių organelių, inkliuzų, funkcinių savybių. Intravitalinis elektroninis mikroskopinis ultrastruktūrinių kepenų pakitimų tyrimas leidžia papildyti šviesos mikroskopijos duomenis ir padidinti jų diagnostinę vertę.

Šiuo atžvilgiu kepenų HSC identifikavimas, jų fenotipo tyrimas transdiferenciacijos procese ir jų dauginimosi intensyvumo nustatymas yra svarbiausias indėlis prognozuojant kepenų ligų pasekmes, taip pat į patomorfologiją ir fibrogenezės patofiziologija.

Tikslas – pateikti HCI struktūrines ir funkcines charakteristikas remiantis intravitalinių kepenų biopsijos mėginių citologinio identifikavimo rezultatais.

medžiagos ir metodai

Intravitalinė kepenų biopsija buvo gauta atliekant aspiracinę kepenų biopsiją pacientams, sergantiems CHC (HCV+ RNR), iš kurių buvo gautas raštiškas informuotas sutikimas.

Pusiau plonų pjūvių šviesos mikroskopijai 0,5 × 2 mm dydžio pacientų kepenų biopsijos mėginiai buvo fiksuoti dviguba fiksacija: pirmiausia pagal Sato Taizan metodą, po to audinių mėginiai papildomai 1 valandą fiksuojami 1 proc. osmio fiksatorius, paruoštas ant 0,1 M fosfato Sorenseno buferio, pH 7,4. Kalio dichromato (K2Cr207) arba chromo anhidrido kristalų (1 mg/ml) buvo pridėta į 1% osmio tetroksidą, kad būtų geriau atskleistos tarpląstelinės struktūros ir tarpinė medžiaga pusiau plonose pjūviuose. Po to, kai mėginiai buvo dehidratuoti didėjančios koncentracijos alkoholinių tirpalų ir acetono serijoje, jie buvo sudėti į iš anksto polimerizuotą butilmetakrilato ir stireno mišinį ir polimerizuoti 55 ° C temperatūroje. Pusiau plonos sekcijos (1 µm storio) buvo nudažytos nuosekliai

azure II-bazinis fuksinas. Mikrografijos buvo padarytos naudojant skaitmeninę vaizdo kamerą (Leica FC 320, Vokietija).

Atliktas elektronų mikroskopinis tyrimas su 0,5x1,0 mm dydžio kepenų biopsijos mėginiais, fiksuotais 1 % osmio tetroksido tirpalu 0,1 M Millonig buferyje, pH 7,4, +40 C temperatūroje 2 valandas. Po dehidratacijos kylančiuose alkoholiuose ir acetone mėginiai buvo supilti į aralditą. Iš gautų blokų Leica EM VC7 ultramikrotomu (Vokietija) buvo paruoštos semitino sekcijos (400 nm) ir nudažytos metileno mėlynu. Preparatai buvo ištirti šviesos mikroskopu ir parinkta vieno tipo vieta tolesniam ultrastruktūrinių pokyčių tyrimui. Itin plonos pjūviai (35 nm) buvo nudažyti 2% uranilo acetatu 50% metanolyje ir švino citratu pagal E. S. Reynoldsą. Elektronų mikroskopiniai preparatai buvo tiriami naudojant JEM-1011 elektroninį mikroskopą (JEOL, Japonija), padidinus 10 000–60 000, esant 80 kW greitėjimo įtampai. Vaizdams gauti buvo naudojamas Olympus MegaViewIII skaitmeninio fotoaparato (Vokietija) ir iTEM vaizdo apdorojimo programinės įrangos (Olympus, Vokietija) kompleksas.

Rezultatai ir DISKUSIJA

HSC yra perisinusoidinėje erdvėje (Disse) kišenėse tarp hepatocitų ir endotelio ląstelių; jie turi ilgus procesus, prasiskverbiančius giliai tarp hepatocitų. Daugumoje publikacijų, skirtų šiai HSC populiacijai, pateikiamas jų schematiškas vaizdas, leidžiantis nurodyti tik „teritorinę“ HSC priklausomybę kepenyse ir aplinkinių „kaimynų“ atžvilgiu (1 pav.).

HSC glaudžiai liečiasi su endotelio ląstelėmis per neužbaigtos bazinės membranos komponentus ir intersticines kolageno skaidulas. Nervų galūnės prasiskverbia tarp SC ir parenchiminių ląstelių, todėl Disse erdvė apibrėžiama kaip erdvė tarp parenchiminių ląstelių plokštelių ir

HCl ir endotelio ląstelių kompleksas.

Manoma, kad HSC atsiranda iš prastai diferencijuotų mezenchiminių ląstelių besivystančių kepenų skersinėje pertvaroje. Eksperimento metu nustatyta, kad kraujodaros kamieninės ląstelės dalyvauja formuojant HSC ir kad šis procesas nėra dėl ląstelių susiliejimo.

Sinusoidinės ląstelės (SC), pirmiausia HSC, vaidina pagrindinį vaidmenį visų tipų kepenų regeneracijoje. Fibrozinis kepenų regeneravimas vyksta dėl HSC ir kaulų čiulpų kamieninių ląstelių kamieninių funkcijų slopinimo. Žmogaus kepenyse HSC sudaro 5–15%, tai yra viena iš 4 mezenchiminės kilmės SC atmainų: Kupferio ląstelės, endoteliocitai ir Pb ląstelės. SC telkinyje taip pat yra 20-25% leukocitų.

HCl citoplazmoje yra riebalų intarpų su retinoliu, trigliceridais, fosfolipidais, cholesteroliu, laisvosiomis riebalų rūgštimis, a-aktinu ir desminu. ZKI vizualizuojamas naudojant aukso chlorido dažymą. Eksperimento metu buvo nustatyta, kad HKI diferenciacijos nuo kitų miofibroblastų žymuo yra jų reelino baltymo ekspresija.

HSC egzistuoja ramybės ("neaktyvių HSC"), trumpalaikių ir ilgalaikių aktyvuotų būsenų, kurių kiekvienai būdinga genų ekspresija ir fenotipas (α-IgMA, ICAM-1, chemokinai ir citokinai).

Neaktyvios būsenos HSC turi apvalią, šiek tiek pailgą arba netaisyklingą formą, didelį branduolį ir ryškų regėjimo ženklą - lipidų inkliuzus (lašus), kuriuose yra retinolio (2 pav.).

Lipidų lašelių skaičius neaktyviame HSC siekia 30 ir daugiau, jie yra artimo dydžio, greta vienas kito, spaudžiasi į branduolį ir stumia jį į periferiją (2 pav.). Maži inkliuzai gali būti tarp didelių lašų. Lašelių spalva priklauso nuo fiksatoriaus ir medžiagos spalvos. Vienu atveju jos yra šviesios (2a pav.), kitu – tamsiai žalios (2b pav.).

1 pav. ICH (žvaigždinė ląstelė, perisinusoidinis lipocitas) išsidėstymo Disse perisinusoidinėje erdvėje schema (Disse erdvė), interneto šaltinis

2 pav. – CCI neaktyvios būsenos

a - apvalios formos HCI su dideliu kiekiu šviesių lipidų lašelių (baltos rodyklės), hepatocitų (Hz) su sunaikinta citoplazma (juoda rodyklė); b - HCl su tamsiais lipidų lašeliais, glaudžiai kontaktuojantis su makrofagu (Mf); a-b - pusiau plonos sekcijos. Azure II dažymas - pagrindinė purpurinė. Mikrografijos. Padidėjęs 1000; c - HCl su lipidų lašelių gausa (daugiau nei 30), netaisyklingos formos (6000 dydžio); d-ultrastruktūriniai HCI komponentai: l-lipidų lašai, mitochondrijos (oranžinės rodyklės), GRES (žalios rodyklės), Golgi kompleksas (raudona rodyklė), sw. 15 000; c-d – elektronogramos

Naudojant elektroninę mikroskopiją, šviesaus lipidinio substrato fone susidaro labiau osmiofilinis kraštinis apvadas (5a pav.). Daugumoje „poilsio“ HSC, kartu su dideliais lipidų inkliuzais, yra pastebimai mažas kiekis citoplazminės matricos, kurioje yra mažai mitochondrijų (Mx) ir granuliuoto endoplazminio tinklo (GRES). Tuo pačiu metu aiškiai matomi vidutiniškai išsivysčiusio Golgi komplekso skyriai 3–4 suplotų cisternų su šiek tiek praplatintais galais krūvos pavidalu (2d pav.).

Tam tikromis sąlygomis aktyvuoti HSC įgyja mišrų arba pereinamąjį fenotipą, derindami tiek lipidų turinčių, tiek į fibroblastus panašių ląstelių morfologines savybes (3 pav.).

Pereinamasis HCI fenotipas taip pat turi savo morfologinių ypatybių. Ląstelė įgauna pailgą formą, sumažėja lipidų intarpų, sumažėja nukleolemų invaginacijų. Citoplazmos tūris didėja, joje yra daug GRES cisternų su surištomis ribosomomis ir laisvomis ribosomomis, Mx. Yra sluoksninio Golgi komplekso komponentų hiperplazija, kurią sudaro keli 3–8 suplotų cisternų krūvelės, padidėjęs lizosomų, dalyvaujančių skaidyme, skaičius.

3 pav. – ZKI pereinamojoje būsenoje

a - ZKI (baltos rodyklės). Perpjauta pusiau. Azure II dažymas - pagrindinė purpurinė. Mikrografas. Padidėjęs 1000; b - pailgos formos ZKI su nedideliu kiekiu lipidų lašų; uv. 8000; c - HCI kontaktuojantis su Kupfferio ląstelėmis (CC) ir limfocitais (Lc), SW. 6000. (Hz - hepatocitas, l - lipidų lašai, E - eritrocitas); d - mitochondrijos (oranžinės rodyklės), GRES (žalios rodyklės), c.Goldji (raudona rodyklė), lizosomos (mėlynos rodyklės), magn. b, c, d – elektronų difrakcijos modeliai

lipidų lašeliai (3d pav.). GRES komponentų ir Golgi komplekso hiperplazija yra susijusi su fibroblastų gebėjimu sintetinti kolageno molekules, taip pat modeliuoti jas po transliacijos hidroksilinimo ir glikozilinimo būdu endoplazminiame tinkle ir Golgi komplekso elementuose.

Nepažeistose kepenyse HCI, būdami ramios būsenos, savo procesais padengia sinusoidinį kapiliarą. HCl procesai skirstomi į 2 tipus: perisinusoidinius (subendotelinius) ir tarpląstelinius (4 pav.).

Pirmieji palieka ląstelės kūną ir tęsiasi palei sinusoidinio kapiliaro paviršių, padengdami jį plonomis į pirštą panašiomis šakomis. Jie yra padengti trumpais gaureliais ir turi būdingus ilgus mikroiškyšulius, besitęsiančius dar toliau išilgai kapiliarinio endotelio vamzdelio paviršiaus. Interhepatoceliulinės ataugos, įveikusios hepatocitų plokštelę ir pasiekusios gretimą sinusoidą, skirstomos į kelias perisinusoidines ataugas. Taigi FQI vidutiniškai apima daugiau nei du gretimus sinusoidus.

Pažeidus kepenis, suaktyvėja HSC ir vyksta fibrogenezės procesas, kuriame išskiriamos 3 fazės. Jie vadinami iniciacija, pailgėjimu ir skyrimu (pluoštinio audinio išsiskyrimu). Šį „poilsio“ HSC transformacijos į fibrozuojančius miofibroblastus procesą inicijuoja citokinai (^-1, ^-6,

4 pav. Perisinusoidiniai (subendoteliniai) ir tarphepatoceliuliniai procesai (ataugos) HCI

a) ZKI (geltonos rodyklės), atsirandančios iš ląstelės kūno, procesas, uv. 30 000; b - HCI procesas, esantis palei sinusoidinio kapiliaro paviršių, kuriame yra lipidų lašas, SW. 30 000; c) subendoteliškai išsidėstę HCI procesai. Endotelio ląstelių procesai (rožinės rodyklės); d - tarphepatoceliulinis HCI procesas; HCI ir hepatocitų membranų sunaikinimo sritis (juodos rodyklės), patinusi 10 000. Elektronogramos

TOT-a), nepakankamai oksiduoti medžiagų apykaitos produktai, reaktyvios deguonies rūšys, azoto oksidas, endotelinas, trombocitus aktyvinantis faktorius (PDGF), plazminogeno aktyvatorius, transformuojantis augimo faktorius (TGF-1), acetaldehidas ir daugelis kitų. Tiesioginiai aktyvatoriai yra oksidacinio streso būsenos hepatocitai, Kupferio ląstelės, endoteliocitai, leukocitai, trombocitai, gaminantys citokinus (parakrininiai signalai) ir pats ZKI (autokrininė stimuliacija). Aktyvaciją lydi naujų genų ekspresija (įtraukimas į darbą), ekstraląstelinės matricos citokinų ir baltymų sintezė (I, III, Y tipo kolagenai).

Šiame etape HSC aktyvavimo procesas gali būti baigtas stimuliuojant HSC priešuždegiminių citokinų susidarymą, kurie slopina makrofagų TOT-a gamybą pažeistoje vietoje. Dėl to smarkiai sumažėja HSC skaičius, jie patiria apoptozę, o kepenyse nesivysto fibrozės procesai.

Antroje fazėje (ilgai), esant ilgalaikiam nuolatiniam parakrininiam ir autokrininiam aktyvuojančių dirgiklių poveikiui, HSC „išlaikomas“ aktyvuotas fenotipas, kuriam būdinga HSC transformacija į susitraukiančias miofibroblastines ląsteles, kurios sintetina ekstraląstelinį fibrilinį kolageną.

Aktyvuotam fenotipui būdingas proliferacija, chemotaksė, susitraukimas, retinoidų atsargų praradimas ir ląstelių, panašių į miofibroblastines ląsteles, susidarymas. Aktyvuoti HSC taip pat rodo padidėjusį naujų genų, tokių kaip a-SMA, ICAM-1, chemokinų ir citokinų, kiekį. Ląstelių aktyvacija rodo ankstyvą fibrogenezės stadiją ir yra prieš padidėjusią ECM baltymų gamybą. Susidarę pluoštiniai audiniai pertvarkomi dėl matricos skilimo, naudojant matricos metaloproteinazes (matricosmetaloproteinazes – MMP). Savo ruožtu matricos irimą reguliuoja MMP audinių inhibitoriai (matricos metaloproteinazių audinių inhibitoriai – TIMP). MMP ir TIMP yra nuo cinko priklausomų fermentų šeimos nariai. MMP yra sintetinami HSC kaip neaktyvūs profermentai, kurie aktyvuojami skilus propeptidui, bet yra slopinami sąveikaujant su endogeniniais TIMP, TIMP-1 ir TIMP-2. HSC gamina 4 tipų membranos tipo MMP, kuriuos aktyvuoja IL-1 p. Tarp MMP ypač svarbi yra MMP-9, neutrali matricos metaloproteinazė, kuri veikia prieš 4 tipo kolageną, kuris yra bazinės membranos dalis, taip pat prieš iš dalies denatūruotus 1 ir 5 tipo kolagenus.

HCI populiacijos padidėjimas su įvairiais kepenų pažeidimais vertinamas pagal daugelio mitogeninių faktorių, susijusių tirozino kinazės receptorių ir kitų nustatytų mitogenų, sukeliančių ryškiausią HKI proliferaciją, aktyvumą: endotelinas-1, trombinas, FGF. fibroblastų augimo faktorius, PDGF – endotelio augimo faktoriaus kraujagyslės, IGF – į insuliną panašus augimo faktorius. HSC kaupiasi kepenų pažeidimo vietose ne tik dėl šių ląstelių dauginimosi, bet ir dėl jų nukreiptos migracijos į šias zonas chemotaksės būdu, dalyvaujant chemoatraktantams, tokiems kaip PDGF ir leukocitų chemoatraktantas-MCP (monocitų chemotaktinis baltymas). 1) .

Aktyvuotuose HSC lipidų lašelių skaičius sumažėja iki 1–3, kai jie yra priešinguose ląstelės poliuose (5 pav.).

Aktyvuoti HSC įgauna pailgą formą, reikšmingas citoplazmos sritis užima Golgi kompleksas, atsiskleidžia gana daug GRES cisternų (baltymų sintezės rodiklis eksportui). Sumažėja kitų organelių skaičius: randama mažai laisvų ribosomų ir polisomų, pavienės mitochondrijos, netaisyklingos lizosomos (6 pav.).

2007 m. HSC pirmą kartą buvo pavadintos kepenų kamieninėmis ląstelėmis, nes jos išreiškia vieną iš hematopoetinių mezenchiminių kamieninių ląstelių žymenų – CD133.

5 pav. – CCI aktyvuotos būsenos

a, b - HCI (mėlynos rodyklės) su atskirais lipidų intarpais, lokalizuotais priešinguose branduolio poliuose. Perisinusoidinis jungiamasis audinys (6a pav.) ir tarpląstelinis matricos sluoksnis aplink hepatocitus (6b pav.) nusidažo raudonai. Citotoksiniai limfocitai (violetinės rodyklės). Endotelio ląstelė (balta rodyklė). Glaudus kontaktas tarp plazmos ląstelės (raudona rodyklė) ir hepatocitų. Pusiau ploni pjūviai. Azure II dažymas - pagrindinė purpurinė. Mikrografijos. Padidėjęs 1000; c, d - ultrastruktūriniai HCI komponentai: mitochondrijos (oranžinės rodyklės), Golgi kompleksas (raudona rodyklė), jo osmiofiliškesnės cis pusės cisternos, nukreiptos į išplėstinius granuliuoto endoplazminio tinklo elementus (žalios rodyklės), lizosoma (mėlyna rodyklė) (didelis). 10 000 ir 20 000 atitinkamai); c, d – elektronų difrakcijos modeliai

Miofibroblastai, kurių normaliose kepenyse nėra, galimi trys šaltiniai: pirma, kepenų intrauterinio vystymosi metu, vartų traktuose miofibroblastai supa kraujagysles ir tulžies latakus jų brendimo metu, o visiškai išsivystę kepenims, jie išnyksta. ir vartų traktuose yra pakeičiami vartų fibroblastais; antroji - su kepenų pažeidimu, jie susidaro dėl portalinių mezenchiminių ląstelių ir ramybės būsenos HSC, rečiau dėl pereinamųjų epitelio-mezenchiminių ląstelių. Jiems būdingas CD45-, CD34-, Desmin+, glijos fibrilinis baltymas, susijęs su (GFAP)+ ir Thy-1+.

Naujausi tyrimai parodė, kad hepatocitai, cholangiocitai ir endotelio ląstelės gali tapti miofibroblastais per epitelio arba endotelio-mezenchiminį perėjimą (EMT). Šios ląstelės apima žymenis, tokius kaip CD45-, albuminas+ (ty hepatocitai), CD45-, CK19+ (ty cholangiocitai) arba Tie-2+ (endotelio ląstelės).

6 pav. – Didelis HSC fibrozinis aktyvumas

a, b - miofibroblastas (Mfb), ląstelėje yra didelis branduolys, GRES elementai (raudonos rodyklės), daugybė laisvų ribosomų, polimorfinių pūslelių ir granulių, pavienės mitochondrijos ir ryškus vizualizacijos ženklas - aktino gijų pluoštas citoplazmoje (geltonos spalvos). rodyklės); nuvedė. 12 000 ir 40 000; c, d, e, f - didelis fibrozinis HSC aktyvumas, kai citoplazmoje išlieka retinoidų turinčių lipidų lašeliai. Daugybė kolageno fibrilių pluoštų (baltos rodyklės) išlaikė (a) ir prarado (d, e, f) specifinį skersinį dryželį; nuvedė. 25 000, 15 000, 8 000, 15 000. Elektronogramos

Be to, kaulų čiulpų ląstelės, susidedančios iš fibrocitų ir cirkuliuojančių mezenchiminių ląstelių, gali transformuotis į miofibroblastus. Tai CD45+ (fibrocitai), CD45+/- (cirkuliuojančios mezenchiminės ląstelės), 1+ tipo kolagenas, CD11d+ ir 11+ klasės MHC (7 pav.).

Literatūros duomenys patvirtina ne tik glaudų ryšį tarp ovalinių ląstelių proliferacijos ir sinusoidinių ląstelių dauginimosi, bet ir duomenis apie galimą HSC diferenciaciją į kepenų epitelį, kuri buvo vadinama perisinusoidinių ląstelių mezenchimine-epiteline transformacija.

Fibrogeninės aktyvacijos būsenoje į miofibroblastus panašūs HSC, kartu su lipidų lašelių skaičiaus sumažėjimu ir vėlesniu išnykimu, pasižymi židinio proliferacija (8 pav.), fibroblastų tipo žymenų, įskaitant lygiųjų raumenų α-aktiną, imunohistochemine ekspresija. , ir periląstelinių kolageno fibrilių susidarymas Disse erdvėse.

Fibrozės vystymosi fazėje didėjanti kepenų audinio hipoksija tampa papildomos priešuždegiminių adhezijos molekulių - 1CAM-1, 1CAM-2, VEGF, priešuždegiminių - kamieninių ląstelių pertekliaus veiksniu.

Kanalinių kepenų progenitorinių ląstelių sąveika su kepenų miofibroblastais

Į miofibroblastus panašūs HSC fibrogeninės aktyvacijos būsenoje.

7 pav. – HSC miofibroblastinės aktyvacijos dalyviai

stiprūs chemoattraktantai - M-CSF, MCP-1 (monocitų chemotaktinis baltymas-1) ir SGS (citokinų sukeltas neutrofilų chemoattraktantas) ir kiti, skatinantys priešuždegiminių citokinų susidarymą (TGF-b, PDGF, FGF, PAF, SCF, ET-1) ir sustiprina fibrogenezės procesus kepenyse, sudarant sąlygas nuolatiniam HSC ir fibrogenezės procesų aktyvavimui.

Naudojant mikroskopinius preparatus, perikapiliarinė fibrozė pasireiškia perisinusoidinio jungiamojo audinio ir tarpląstelinio matricos sluoksnio aplink hepatocitus (dažnai miršta) ryškiai raudona spalva. Ant elektroninių mikroskopinių preparatų fibroziniai pokyčiai vizualizuojami arba susidariusių didelių kolageno skaidulų pluoštų, išlaikiusių skersinį dryžuotumą, arba masyvių pluoštų pavidalu.

Disse skaidulinės masės, kuri yra išbrinkusios kolageno skaidulos, praradusios periodinį dryžuotumą, erdvėje (9 pav.).

Remiantis šiuolaikinėmis sampratomis, fibrozė yra dinamiškas procesas, kuris gali progresuoti ir regresuoti (10 pav.).

Pastaruoju metu buvo pasiūlyta keletas specifinių ICD žymenų: vitamino A (VA) žydėjimas lipidų lašeliuose, GFAP, p75 NGF receptorius ir sinaptofizinas. Atliekami kepenų HCI dalyvavimo kepenų kamieninių ląstelių proliferacijoje ir diferenciacijoje tyrimai.

Ištyrėme retinolį surišančio baltymo (RBP-4), kuris sudaro kompleksą su VA, kurio koncentracija kraujo plazmoje paprastai koreliuoja su organizmo aprūpinimu VA, kiekį, kurio 80% yra HCl. .

Santykis tarp turinio

8 pav. – Židinio HSC proliferacija fibrogeninės aktyvacijos būsenoje

a - HCI hiperplazija (baltos rodyklės) išsiplėtusių sinusoidų spindyje; b - transdiferencijuotų HSC (baltos rodyklės), endotelio ląstelės (rožinė rodyklė) proliferacija. Pusiau ploni pjūviai. Azure II dažymas - pagrindinė purpurinė. Mikrografijos. Padidėjęs 1000

9 pav. – paskutinė HSC miofibroblastinio aktyvavimo stadija

a, b - perisinusoidinė fibrozė (baltos rodyklės). Persinusoidinis jungiamasis audinys ir tarpląstelinis matricos sluoksnis aplink hepatocitus (b) nudažomas raudonai baziniu fuksinu. HSC aktyvuojami ir transformuojami į fibroblastus (mėlynos rodyklės). Hz pav. a – hepatocitas su sunaikinta citoplazma. Pusiau ploni pjūviai. Azure II dažymas - pagrindinė purpurinė. Mikrografijos. Padidėjęs 1000; c, d - perizinusoidinė ir perihepatoceliulinė fibrozė kepenų skiltyje, padidėjęs kolageno skaidulų fibrilių elektronų tankis; mitochondrijų matricos kondensacija hepatocituose (oranžinė rodyklė). Padidinkite atitinkamai 8 000 ir 15 000. elektronogramos

1 lentelė. RBP-4 kiekio rodikliai pacientams, sergantiems įvairių etiologijų kepenų ciroze (LC) ir lėtiniu hepatitu (CH), ng/ml (M±m)

Grupė n M±m p

Kepenų cirozė 17 23,6±2,29<0,05

CG, AsAT norma 16 36,9±2,05* >0,05

CG, ASAT >2 normos 13 33,0±3,04* >0,05

CG, ALT norma 13 37,5±3,02* >0,05

CG, ALT >2 normos 21 35,9±2,25* >0,05

Kontrolė 15 31,2±2,82

Pastaba: p – reikšmingi skirtumai su kontrole (p<0,05); * - достоверные различия между ЦП и ХГ (р<0,05)

Klaidinga skiltelė, apsupta pluoštinės pertvaros su pluoštine pertvara. Dažymas pagal Masso - netikros skilties ratas. Dažymas pagal u.Uv.x50 Masson. Padidinti x200

10 paveikslas. Virusine ciroze sergančio paciento netikrosios skilties įvykių dinamika praėjus 6 mėnesiams po autologinių mezenchiminių kamieninių ląstelių transplantacijos į kepenis

Aš valgau RBP-4 ir 4 stadijos fibrozę (cirozę), priešingai nei lėtinis hepatitas, kurio metu tokios priklausomybės nebuvo pastebėta, nepaisant biocheminių uždegimo aktyvumo žymenų kepenyse.

Į šį faktą būtina atsižvelgti pagrindžiant pakaitinę terapiją, siekiant pašalinti VA trūkumą organizme, kuris gali atsirasti dėl HSC potencialo išeikvojimo dėl fibrozės progresavimo kepenyse.

1. Maksimalų HCI struktūrinės ir funkcinės būklės įvertinimo efektyvumą užtikrina intravitalinės biopsijos mėginio morfologinis tyrimas, tuo pačiu metu naudojant ląstelių vizualizavimo metodų kompleksą (šviesos, itin plonų pjūvių elektroninę mikroskopiją ir originalius tyrimo metodus). fiksavimas ir dažymas).

2. HCI morfologinio tyrimo rezultatai leidžia gerinti fibrozės diagnostikos in vivo kokybę, ją stebėti ir prognozuoti lėtinių difuzinių kepenų pakitimų baigtis aukštesniu šiuolaikiniu lygiu.

3. Morfologinių išvadų rezultatai leis gydytojui, formuluojant galutinę diagnozę, terapijos eigoje papildomai įtraukti patikslintus duomenis apie chroniškumo stadiją (fibrozės stabilizavimąsi, progresavimą ar išnykimą).

Literatūra

1. Ivashkin, V. T. Klinikiniai priešfibrozinių pokyčių simptomai: visos Rusijos vidaus ligų specialistų interneto kongreso paskaitos stenograma / V. T. Ivashkin, A. O. Bueverov // INTERENAS: Nacionalinė vidaus medicinos specialistų interneto draugija. - 2013. - Prieigos režimas: http://internistas. ru/publications/detail/6569/. - Priėjimo data: 2016-11-21.

2. Kiyasov, A. P. Ovalios ląstelės – spėjamos kepenų kamieninės ląstelės ar hepatoblastai? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Ląstelių transplantacija ir audinių inžinerija. - 2006. - V. 2, Nr. 4. - S. 55-58.

1. Ivashkin, VT Klinicheskaya simptomatika dofibroticheskih izmenenij: stenogramma lekcii Vserossijskogo Internet-Kongressa specialistov po vnutrennim boleznyam / VT Ivashkin, AO Bueverov // INTERNIST: Nacional "noe Internet-Obshchestrenni 3 po. ru/publications/detail/6569/ - Duomenys peržiūrėti: 2016-11-21.

2. Kiyasov, AP ovalus "nye kletki - predpolagaemye stvolovye kletki pecheni arba gepatoblasty? / AP Kiyasov, AA Gumerova, MA Titova // Kletochnaya transplantologiya i tkanevaya inzheneriya. - 2006. - T. 5 ., S. 5 . – 58.

3. Apie sinusoidinių kepenų ląstelių ir kaulų čiulpų ląstelių vaidmenį teikiant sveikų ir pažeistų kepenų regeneracinę strategiją / A. V. Lundup [et al.] // Transplantologijos ir dirbtinių organų biuletenis. -2010 m. - T. XII, Nr. 1. - S. 78-85.

4. Serovas, V. V. Morfologiniai kriterijai, skirti įvertinti virusinio lėtinio hepatito B ir C etiologiją, aktyvumo laipsnį ir proceso stadiją / V. V. Serovas, L. O. Severgina // Patologijos archyvas. - 1996. - Nr. 4. - S. 61-64.

5. Kepenų žvaigždžių ląstelių struktūrinės ir funkcinės charakteristikos fibrozės dinamikoje / OA Postnikova [et al.] // Fundamentalieji tyrimai. - 2011. - Nr. 10.

6. Ultrastruktūrinis ir imunohistocheminis kepenų žvaigždžių ląstelių tyrimas infekcinės-virusinės genezės fibrozės ir cirozės dinamikoje / G. I. Nepomnyashchikh [et al.] // Eksperimentinės biologijos ir medicinos biuletenis. - 2006. - T. 142, Nr. 12. - S. 681-686.

7. Shcheglev, AI Struktūrinės ir metabolinės sinusoidinių kepenų ląstelių charakteristikos / AI Shcheglev, OD Mishnev // Šiuolaikinės biologijos sėkmė. - 1991. - V. 3, Nr. 1. - S. 73-82.

10. Dietinių retinoidų ir trigliceridų poveikis žiurkių kepenų žvaigždžių ląstelių ir žvaigždžių ląstelių lipidų lašelių lipidų sudėčiai / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - T. 29. - R. 1523-1534.

13. Friedman, S. Hepatic fibrosis 2006: Report of the Third AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - T. 45 straipsnio 1 dalį. - R. 242-249.

18. Iredale, J. P. Kepenų žvaigždžių ląstelių elgsena sprendžiant kepenų pažeidimą / J. P. Iredale // Semin. LiverDis. -2001 m. – t. 21 straipsnio 3 dalį. - R. 427-436.

19. Kobold, D. Reelino ekspresija kepenų žvaigždžių ląstelėse ir kepenų audinių atstatymo metu: naujas žymuo, skirtas HSC diferencijuoti nuo kitų kepenų miofibroblastų / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - T. 36 straipsnio 5 dalį. - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Žmogaus kepenų miofibroblastai vystymosi metu ir ligos, daugiausia dėmesio skiriant portalui (myo)

3. O roli sinusoidinis "nyh kletok pecheni i kletok kostnogo mozga v obespechenii regeneratornoj strategii zdorovoj i povrezhdennoj pecheni / AV Lyundup // Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov. - 2010, Nr. .

4. Serov, V. V. Morfologicheskie kriterii ocenki ehtiologii, stepeni aktivnosti i stadii processa pri virusnyh chrononicheskih gepatitah V i S / V. V. Serov, L. O. Severgina // Arhiv patologii.

1996. - Nr. 4. - S. 61-64.

5. Struktūrinis-funkcionalus "naya harakteristika zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza / O. A. Postnikova // Fundamental" nye issledovaniya. - 2011. - Nr. 10. - C. 359-362.

6. Ul "trastrukturnoe i immunogistohimicheskoe issledovanie zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza i cirroza pecheni infekcionno-virusnogo geneza / GI Nepomnyashchih // Byulleten" ehk eksperimentinis "S. S. 2. No. .., T. 20 i medicina. 681 -686.

7. SHCHeglev, A. I. Struktūrinė-metabolinė sinusoidinė charakteristika "nyh kletok pecheni / A. I. SHCHeglev, O. D. Mishnev // Uspekhi sovremennoj biologii. - 1991. - T. 3, No. 1. - S. 8.

8. CD34 kepenų žvaigždžių ląstelės yra progenitorinės ląstelės / C. Kordes // Biochem., Biophys. Res. Dažnas. - 2007. -T. 352 straipsnio 2 dalis. - P. 410-417.

9. Matricos baltymų degradacija sergant kepenų fibroze / M. J. Arthur // Pathol. Res. Praktika. - 1994. - T. 190(9-10).

10. Dietinių retinoidų ir trigliceridų poveikis žiurkių kepenų žvaigždžių ląstelių ir žvaigždžių ląstelių lipidų lašelių lipidų sudėčiai / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - T. 29. - R. 1523-1534.

11. Vaisiaus kepenys susideda iš epitelio-mezenchiminio perėjimo ląstelių / J. Chagraoni // Kraujas. - 2003. - T. 101. - P. 2973-2982.

12. Biologinių mėginių fiksavimas, dehidratacija ir įterpimas / A. M. Glauert // Praktiniai elektroninės mikroskopijos metodai. - Niujorkas: Am. Elsevier, 1975. – T. 3, 1 dalis.

13. Friedman, S. Hepatic fibrosis 2006: Report of the Third AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - T. 45 straipsnio 1 dalį. - R. 242-249.

14. Gaga, M. D. Žmogaus ir rathepatinės žvaigždžių ląstelės gamina kamieninių ląstelių faktorių: galimas stiebo ląstelių pritraukimo mechanizmas sergant kepenų fibroze / M. D. Gaga // J. Hepatol. - 1999. - T. 30, Nr. 5. - P. 850-858.

15. Glauert, A. M. Araldite as embedding medium for elektronin microscopy / A. M. Glauert, R. H. Glauert // J. Biophys. Biochem. Citol. - 1958. - T. 4. - P. 409-414.

16. Kepenų žvaigždžių ląstelės ir vartų fibroblastai yra pagrindiniai kolagenų ir lizilo oksidazių šaltiniai normaliose kepenyse ir anksti po sužalojimo / M. Perepelyuk // Am. J Physiol. virškinimo traktas. Kepenų fiziol. - 2013. - T. 304 straipsnio 6 dalį. - P. 605614.

17. Hepatito C viruso branduolys ir nestruktūriniai baltymai sukelia fibrogeninį poveikį kepenų žvaigždžių ląstelėse / R. Bataller // Gastroenterologija. - 2004. - T. 126, iss. 2. - P. 529-540.

18. Iredale, J. P. Kepenų žvaigždžių ląstelių elgsena sprendžiant kepenų pažeidimą / J. P. Iredale // Semin. LiverDis. -2001 m. – t. 21 straipsnio 3 dalį. - R. 427-436.

19. Kobold, D. Reelino ekspresija kepenų žvaigždžių ląstelėse ir kepenų audinių atstatymo metu: naujas žymuo, skirtas HSC diferencijuoti nuo kitų kepenų miofibroblastų / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - T. 36 straipsnio 5 dalį. - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Žmogaus kepenų miofibroblastai vystymosi metu ir ligos, daugiausia dėmesio skiriant portaliniams (mio) fibroblastams / S. Lepreux, A. Desmouliére

fibroblastai / S. Lepreux, A. Desmoulière // Front. fiziol. – 2015. – Prieigos būdas: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Priėjimo data: 2016-10-31.

22. Su HCV susijusia kepenų ciroze sergančių pacientų mezenchiminių kaulų čiulpų kamieninių ląstelių transplantacija / S. Lukashyk // J. Clin. Vertimas Hepatol. - 2014. - T. 2, iss. 4. - P. 217-221.

23. Millonig, G. A. Fosfatinio buferio privalumai osmio tetroksido tirpalams fiksuojant / G. A. Millonig // J. Appl. Fizika. - 1961. - T. 32. - P. 1637-1643.

t. 158. - P. 1313-1323.

t. 24. - P. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis von Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - T. 14. - P. 1213-1217.

30. Naujausi miofibroblastų biologijos pokyčiai: jungiamojo audinio remodeliavimo paradigmos / B. Hinz // Am. J. Patholas. - 2012. - T. 180. - P. 1340-1355.

35. Iš pertvaros transversum kilęs mezotelis sukuria kepenų žvaigždžių ląsteles ir perivaskulines mezenchimines ląsteles besivystančiose pelių kepenyse / K. Asahina // Hepatologija. -2011 m. – t. 53.-P. 983-995.

t. 50.-P. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatinė angiogenezė ir sinusoidinė remodeliacija sergant lėtinėmis kepenų ligomis: nauji portalinės hipertenzijos gydymo tikslai? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - T. 53. - P. 976-980.

39. Wake, K. Kepenų žvaigždžių ląstelės: trimatė struktūra, lokalizacija, nevienalytiškumas ir vystymasis / K.

// priekis. fiziol. – 2015. – Prieigos būdas: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Priėjimo data: 2016-10-31.

21. Peroksisomų proliferatorių aktyvuojamų receptorių gama modulio-profibrogeninio ir priešuždegiminio poveikio ligandai kepenų žvaigždžių ląstelėse / F. Marra // Gastroenterologija. -2000. – t. 119. - P. 466-478.

22. Su HCV susijusia kepenų ciroze sergančių pacientų mezenchiminių kaulų čiulpų kamieninių ląstelių transplantacija / S. Lukashyk // J. Clin. Vertimas Hepatol. - 2014. - T. 2, iss. 4.-R. 217-221.

23. Millonig, G. A. Fosfatinio buferio privalumai osmio tetroksido tirpalams fiksuojant / G. A. Millonig // J. Appl. Rizika. - 1961. - T. 32. - P. 1637-1643.

24. Anksti proliferuojančių ovalinių ląstelių kilmė ir struktūrinė raida žiurkės kepenyse / S. Paku // Am. J. Hepatol. – 2001 m.

t. 158. - P. 1313-1323.

25. Miofibroblastų kilmė sergant kepenų fibroze / D. A. Brenneris // Fibrogenesis Tissue Repair. - 2012. - T. 5 tiekimas. 1. - S. 17.

26. Kepenų miofibroblastų kilmė ir funkcijos / S. Lemoinne // Biochim. Biofizė. acta. - 2013. - T. 1832 (7). - P. 948-954.

27. Pinzani, M. PDGF ir signalo perdavimas kepenų žvaigždžių ląstelėse / M. Pinzani // Front. biosci. - 2002. - T. 7. - P. 1720-1726.

28. Popper, H. Vitamino A pasiskirstymas audiniuose, kaip nustatyta fluorescencine mikroskopija / H. Popper // Physiol. Rev. – 1944 m.

t. 24.-R. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis von Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - T. 14. - R. 1213-1217.

30. Naujausi miofibroblastų biologijos pokyčiai: jungiamojo audinio remodeliavimo paradigmos / B. Hinz // Am. J. Patholas. - 2012. - T. 180. - R. 1340-1355.

31. Reynolds, E. S. Švino citrato panaudojimas esant aukštam pH kaip elektroninė dėmė elektronų mikroskopijoje / E. S. Reynolds // J. Cell. Biol. - 1963. - T. 17. - P. 208-212.

32. Safadi, R. Imuninė kepenų fibrogenezės stimuliacija CD8 ląstelėmis ir transgeninio interleukino-10 susilpninimas iš hepatocitų / R. Safadi // Gastroenterologija. - 2004. - T. 127 straipsnio 3 dalį. - P. 870-882.

33. Sato, T. Ilgesnį laiką fosfatu buferuotame formaline fiksuoto mėginio elektronų mikroskopinis tyrimas / T. Sato, I. Takagi // J. Electron Microsc. - 1982. - T. 31, Nr. 4. - P. 423-428.

34. Senoo, H. Vitamin A-Storing Cells (Stellate Cells) / H. Senoo, N. Kojima, M. Sato // Vitam. Horm. - 2007. - T. 75.

35. Iš pertvaros transversum kilęs mezotelis sukuria kepenų žvaigždžių ląsteles ir perivaskulines mezenchimines ląsteles besivystančiose pelių kepenyse / K. Asahina // Hepatologija. -2011 m. – t. 53.-R. 983-995.

36. Stanciu, A. New data about ITO cell / A. Stanciu, C. Cotutiu, C. Amalinei, Rev. Med. Chir. soc. Med. Nat. Iasi. -2002 m. – t. 107, Nr. 2. - P. 235-239.

37. Suematsu, M. Profesorius Toshio Ito: aiškiaregis pericitų biologijoje / M. Suematsu, S. Aiso // Keio J. Med. – 2000.

t. 50.-R. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatinė angiogenezė ir sinusoidinė remodeliacija sergant lėtinėmis kepenų ligomis: nauji portalinės hipertenzijos gydymo tikslai? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - T. 53.-R. 976-980.

39. Wake, K. Kepenų žvaigždžių ląstelės: trimatė struktūra, lokalizacija, heterogeniškumas ir raida / K. Wake // Proc. Jpn. akad. Ser. B, fiz. Biol. sci. - 2006. - T.

Wake // Proc. Jpn. akad. Ser. B, fiz. Biol. sci. - 2006. - T. 82 straipsnio 4 dalį. - P. 155-164.

82 straipsnio 4 dalį. - P. 155-164.

40. Wake, K. In Cells of the Hepatic sinusoid / K. Wake, H. Senoo // Kupffer Cell Foundation (Rijswijk, Nyderlandai). - 1986. - T. 1. - P. 215-220.

41. Watson, M. L. Audinių pjūvių dažymas elektroniniams mikroelementams sunkiaisiais metalais / M. L. Watson // J. Biophys. Biochem. Cyt. - 1958. - T. 4. - P. 475-478.

KLINIKINĖ KEPENŲ CITOLOGIJA: ŽVAIGŽDŽIGŽDŽIŲ LĄSTELĖS

Tsyrkunovas V. M., Andrejevas V. P., Kravčiukas R. I., Kandratovičius I. A. Mokymo įstaiga „Gardino valstybinis medicinos universitetas“, Gardinas, Baltarusija

įžanga. Ito žvaigždžių ląstelių (Hepatic Stellate Cells, HSC) vaidmuo buvo nustatytas kaip vienas iš pirmaujančių kepenų fibrozės vystymosi srityje, tačiau klinikinėje praktikoje HSC struktūrų intravitalinės vizualizacijos naudojimas yra minimalus.

Darbo tikslas – remiantis intravitalinių kepenų biopsijos mėginių citologinės identifikacijos išvadomis, pristatyti struktūrinę ir funkcinę HSC charakteristiką.

medžiagos ir metodai. Taikyti klasikiniai biopsijos mėginių šviesos ir elektroninės mikroskopijos metodai, naudojant originalią ultraplonų pjūvių, fiksavimo ir dažymo metodiką.

rezultatus. Lėtiniu hepatitu C sergančių pacientų kepenų biopsijos mėginių HSC struktūrinės charakteristikos pateiktos šviesos ir elektroninės mikroskopijos nuotraukų iliustracijose. HSC vaizduojami skirtinguose etapuose (poilsio, aktyvacijos) ir transformacijos į miofibroblastus proceso metu.

Išvados. Originalių HSC klinikinio ir morfologinio identifikavimo bei funkcinės būklės vertinimo metodų panaudojimas leidžia pagerinti kepenų fibrozės diagnostikos ir prognozės kokybę.