الطرق الحديثة لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية. الأساليب الحديثة لتشخيص خصائص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية والخصائص التشخيصية

1 الغرض من المجموعة

1.1 المجموعة مخصصة للكشف المتزامن للأجسام المضادة للفيروس نقص المناعة البشرية بالأنواع الأولى والثانية (HIV-1 و HIV-2) و HIV-1 Antigen R24 في المصل وبلازما التدفئة البشرية من خلال طريقة غير مباشرة مرحلة صلبة المناعة.

2 خصائص ومبدأ الإعداد

2.1 تكوين الطلب:

اسم المكون

عدد

مناعة.

2 حبة

عينة التحكم الإيجابي في (K + AT)

1 قارئ، 3 مل

عينة التحكم الإيجابي AG (K + AG)

3 زجاجات، دواء مجفف

عينة التحكم السلبي (ك -)

زجاجتين من 3 مل

حل متقاربة №1. (RK-1)

1 قارورة، 12 مل

conjugate №2. (كجم - 2)

1 قارورة، 1 مل

حل لتربية الاقتران №2 (PP-K2)

زجاجتين من 18 مل

حل مؤقت للركيزة ( برأس)

زجاجتين من 18 مل

chromogen tmb.

1 قارورة، 1 مل

التركيز الحلول المخزنة بالفوسفات والملال مع خيوط (FSB-T × 25)

زجاجتين من 50 مل

وقف كاشف

1 قارورة، 12 مل

حمام كيت للكواشف مع نصائح لموافذ متعددة القنوات

1 مجموعة

فيلم لاصق

2.2 المكونات الرئيسية لمجموعة "IFA-HIV 1.2 AGAT" هي المناعة، وهو حل بالتزازية رقم 1 والترافق رقم 2.

مناعة. إنه قرص للبوليسترين، حيث يتم مسح آباره بواسطة مزيج من مستضدات HIV-1 (GP41) HIV-1 (GP41) و HIV-2 (GP36) والأجسام المضادة أحادية النسيلة إلى Antigen R24 HIV-1.

حل متقاربة №1. إنه مزيج من الأجسام المضادة للإنسان البيولوجي البيولوجي المسمى ضد Antigen P24 HIV-1 ومسمى البروتينات الحيوية المؤتلف HIV-1 و HIV-2.

conjugate №2. إنه متبادل Streptavidine مع Peroxidase الفجل.

عينة التحكم الإيجابي في - مصل الدم البشري يحتوي على الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية-1 وفيروس نقص المناعة البشرية - 2، لا يحتوي على أجسام مضادة للفيروسات التهاب الكبد والبليدوم الروائي، المستضد P24 HIV-1 و HBS Antigen، معطينا بالتسخين لمدة 3 ساعات عند درجة حرارة 56 درجة مئوية.

عينة التحكم الإيجابي AG - مصل الدم البشري يحتوي على مستضد الأطفال الأصليين P24 HIV-1، لا يحتوي على الأجسام المضادة للفيروسات المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية-1، فيروس نقص المناعة البشرية-2، فيروس التهاب الكبد الوبائي والبليدوم الريثام و HBS Antigen، معطينا بالتسخين لمدة 3 ساعات عند درجة حرارة 56 درجة مئوية.

عينة التحكم السلبي - مصل الدم البشري، غير المحتوي على الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية-1، HIV-2، HCV، Antigen P24 HIV-1 و HBS Antigen، تعطيل بالتسخين لمدة 3 ساعات عند درجة حرارة 56 درجة مئوية.

مبدأ تشغيل المجموعة. عند تقديم حل محلول حل من حل المرافق رقم 1 وعينات الدم المصاب بالمصل، يرتبط المستضد P24 على حد سواء للأجسام المضادة المحددة على المرحلة الصلبة ومع أجسام مضادة للألواح الحيوية المضادة لل P24 التي هي جزء من الحل من الاقتران رقم 1؛ ترتبط الأجسام المضادة المحددة بفيروس نقص المناعة البشرية مع مستضدات HIV-1 HIV-1 مؤرفة، ومع مستضدات مضمنة في الحل المقترن رقم 1، تشكيل مجمعات Antigen المضادة للأجهزة المضادة. يتم اكتشاف مجمعات المناعة من الأجسام المضادة المحددة المضادة لل P24 والمستضد P24 من قبل Backrowate No. 2. بعد غسل المكونات غير المنفصلة، \u200b\u200bيضاف محلول الركيزة Peroxidase (بيروكسيد الهيدروجين) وكروموجين TMB إلى الآبار.

يتم إيقاف تفاعل Peroxidase عن طريق إضافة كاشف توقف (0.9 م محلول حمض الكبريتيك)، ويتم قياس شدة تلطيخ الحل في الآبار على مقياس الطيف كقيمة الكثافة البصرية (OP) على طول موجي 450 نانومتر وبعد

إن حجم المرجع يتناسب مباشرة مع تركيز الأجسام المضادة المحددة و / أو المستضد P24 في عينة المصل أو البلازما. كلما ارتفعت محتوى الأجسام المضادة و / أو المستضد P24 في عينة المصل، كلما ارتفعت كثافة تلطيخ.

2.3 تم تصميم المجموعة لتنفيذ 24 عروض IFA: 1 الإعداد - 1 قطاع (8 ثقوب). مجموع - 192 تعريفات، بما في ذلك عينات التحكم.

3 الاحتياطات عند العمل مع مجموعة

3.1 جميع مكونات المجموعة في التركيزات المستخدمة غير سامة. ومع ذلك، فإن العمل مع جميع مصل الاختبار (البلازما) من دم البشر البشري، والذي ينبغي اعتباره أنه يحتمل أنه يحتمل أن يحتفظ بنقل فيروس نقص المناعة البشرية ونقل فيروس التهاب الكبد، أو أي وكيل سببي آخر للعدوى الفيروسية، مع الحلول المستهلكة والسوائل، والمعدات المختلفة التي يمكن أن تكون ملوثة في عملية التحليل تتطلب بعض التدابير الأمنية عند استخدام مجموعة:

يجب أن يتم العمل في غرفة مجهزة خصيصا؛

من الضروري العمل مع استخدام المعدات الحماية الشخصية والامتثال للاحتياطات وفقا للمتطلبات، و.

3.2 إيقاف الكاشف الذي يحتوي على حمض الكبريتيك لديه عمل مهيج. إذا وصلت إلى الجلد والأغشية المخاطية، شطف فورا مع الكثير من الماء.

3.3 عند العمل مع مجموعة من الوظائف، يجب تقديم تهوية التوريد والعادم.

3.4 يجب أن يكون جميع الأشخاص الذين يعملون في المختبرات مع مجموعات فحص طبي إلزامي وفقا للمتطلبات.

3.5 يجب إجراء التخلص من النفايات الطبية و / أو مجموعات غير مستخدمة مع تاريخ انتهاء الصلاحية وفقا للمتطلبات.

4 قواعد للعمل مع مجموعة

4.1 للقضاء على النتائج الخاطئة، يجب إعداد عينات الاختبار وتخزينها في الظروف التي تمنع قطاع البكتيريا. من الضروري إلقاء الضوء على عينات المصل التي تحتوي على مكونات مصل مجمع أو مكونات مترجة باستخدام الطرد المركزي لمدة (5-10) دقيقة بسرعة تدوير 3000 دورة في الدقيقة. يمكن تخزين عينات المصل في درجة حرارة (2-8) درجة مئوية من لا تزيد عن 5 أيام. يمكن تخزين العينات المجمدة (ويفضل أن تكون درجة حرارة على الأقل ناقص 20 درجة مئوية) لا يمكن تخزينها أكثر من سنة واحدة. من الضروري تجنب الدورات المتكررة من عينات ذوبان التجمد.

يجب أن نتذكر أن العينات ذات الانحلال الدمى، فرط ضغط الدم، والعتاد البكتيري، وكذلك الشعر الذي طال أمده دون التجميد غير مناسب للتحليل.

تعتمد موثوقية النتائج على القواعد التالية:

لا يسمح باستخدام مجموعة بعد تاريخ انتهاء الصلاحية، وكذلك خلط مكونات مجموعات سلسلة مختلفة؛

لإعداد كل كاشف، يجب استخدام حاوية منفصلة؛

جميع الأواني المستخدمة لإعداد الكواشف لا تعالج مع أحواض المصطلح والمنظفات. إذا لزم الأمر، شطف مع تشغيل مياه الشرب، ثم شطفه خمس مرات بالماء المقطر؛

للعمل مع Chromogen TMB و PX، من الضروري استخدام حاويات منفصلة للحلول، نصائح للمصابيح، الأطباق.

من الضروري الانتباه إلى خلط شامل للكواشف؛

يجب أن يكون الوقت بين ملء وإفراغ آبار حلول الكمبيوتر اللوحي والكواشف ما لا يقل عن 30 ثانية. لا يسمح بتجفيف الثقوب في جميع مراحل بيان IFA؛

عند استخدام غسالة لمراقبة حالة الحاوية للحل لغسل الجهاز اللوحي وربط الخراطيم: يجب ألا يكون لديهم علامات على النمو البكتيري أو الفطري؛

من الضروري استخدام الماصات تلقائيا مع نصائح قابلة للتبديل، معتمدة من معنى الجرعة المتوسطة وتقارب نتائج الماصة (الخطأ لا يزيد عن 3٪)؛

موزعات وأسطح العمل للتعامل مع حل مع جزء صغير من الكحول الإيثيلي 70٪. لا تستخدم الكلور وغيرها من المواد التي تحتوي على الكلور؛

للعمل مع عينات الدراسة والتحكم، يوصى باستخدام نصائح ماصة المتاح. يجب اختيار كل عينة مصل، بالإضافة إلى كواشف التجنيد، من خلال طرف منفصل.

عند تقديمها في آبار جمهورية كازاخستان، من المستحيل أن يثير القلق من طرف سطح الماصة لسطح الجهاز اللوحي والحل الموجود في الآبار.

أثناء التحليل، يجب تجنب أشعة الشمس المباشرة على سطح العمل.

4.2 عند فتح وإذابة مكونات مجمعة، من الضروري مراقبة بحيث لا توجد مسألة جافة على غطاء وجدران الزجاجات.

5 المعدات والمواد اللازمة للتحليل

5.1 المسح العمودي الطيفي، والذي يسمح بقياس الكثافة البصرية للحلول في الثقوب اللوحي عند طول موجة 450 نانومتر؛

جهاز نصف أو أوتوماتيكي لغسل أقراص (تزوأ)؛

Sucho-aging Thermostat نوع TS-80 M2، الذي يحافظ على درجة حرارة (37 ± 1) درجة مئوية، أو مشابه لها وفقا للخصائص؛

الماصات التلقائية قناة واحدة مع نصائح قابلة للاستبدال، مما يسمح بتحديد حجم السائل من 0.01 إلى 5.0 مل؛

Pipettes 8 قنوات تلقائية مع نصائح قابلة للاستبدال، مما يسمح بتحديد حجم السائل إلى 0.5 مل؛

اسطوانة الأبعاد بسعة 2000 مل؛

قدرة مختبر القارورة 2000 مل؛

زجاجات الزجاج بسعة 20 مل؛

الحمامات للكواشف أو أطباق بتري (قطرها 100 مم)؛

الصوف الطبي الخلطي.

ورق الترشيح؛

قفازات مطاطية جراحية؛

حل مع حجم حجم الكحول الإيثيلي 70٪؛

حل مع جزء كبير من بيروكسيد الهيدروجين 6٪؛

الماء منزوع الأيونات أو المقطر؛

حاوية لجمع النفايات الصلبة؛

حاوية لاستنزاف النفايات السائلة.

6 التحضير للتحليل

6.1 مجموعة الكاشف قبل تحليلها، قم بإزالة من الثلاجة، افتح غطاء المربع وتحمل مكونات المجموعة عند درجات حرارة (18-25) درجة مئوية لمدة 30 دقيقة.

جميع عينات المصل (البلازما) والكواشف مزيج جيدا تماما قبل تحليلها.

يتم تقديم معدل تدفق الكواشف في التوظيف لتحليل التحليل، الذي يحدده عدد الشريط المستخدم، في الجدول A.1 من الملحق أ.

6.2 إعداد حل لغسل الجهاز اللوحي

انتباه!حل لغسل الجهاز اللوحي تحضير 15 دقيقة قبل بدء التحليل!

إذا كانت الزجاجة مع FSB-T × 25 تحتوي على ترسب، يجب أن تكون الاحماء قبل الاستخدام عند درجة حرارة (37 ± 1) درجة مئوية حتى يتم حل السبع تماما. في اسطوانة قياس بسعة 2000 مل. اجعل محتويات الزجاجة مع FSB-T × 25، ثم أضف الماء المقطر إلى الملصق. 1250 مل وخلط بلطف الحل. يمكن تخزين الحل عند درجة حرارة (2-8) درجة مئوية لمدة 72 ساعة.

في حالة استخدام واحد أو أكثر تجريد محتويات FSB-T × 25 يهز بشكل مكثف لمدة (20-30) ج، حدد الحجم المطلوب للحل (الجدول A.1) إلى زجاج قياس أو اسطوانة، أضف المبلغ المطلوب من الماء المقطر وخلط الحل. يمكن تخزين FSB-T × 25 غير المستخدمة في زجاجة مغلقة عند درجة حرارة (2-8) ° مئوية خلال عمر الرف للمجموعة.

6.3 إعداد المناعة

immunosorbent جاهز للاستخدام.

افتح الحزمة وتثبيت العدد المطلوب من الشريط على الإطار. يتم تخزين الإقلهام المتبقية في حزمة مغلقة بإحكام مع امتصاص الرطوبة عند درجة حرارة (2-8) درجة مئوية لمدة 3 أشهر.

6.4 التحضير K + AT، K -، RK-1، RR-K2، BRS وإيقاف الكاشف

K + AT، K -، RK-1، RR-K2، BRS وإيقاف الكاشف جاهزة للاستخدام.

انتباه!في زجاجة مع RK-1، هناك مترسبة ممكنة. للتحليل، من الضروري استخدام طاف.

يمكن تخزين RK-1، RR-K2، RR-K2، BRS وإيقاف الكاشف بعد فتح القوارير في قوارير مغلقة عند درجة حرارة (2-8) درجة مئوية خلال عمر الرف للمجموعة.

يمكن تخزين بقايا K + AT و K - بعد فتح القارورة، في زجاجات مغلقة عند درجة حرارة (2-8) درجة مئوية خلال عمر الرف للمجموعة.

6.5 إعداد الحل K + AG

انتباه!الحل K + AG الطبخ 15 دقيقة قبل بدء التحليل!

لاستعادة K + AG Lyophilized قبل فتح القارورة، فإن الجزيئات الشائكة على جدران القارورة أو الاختناقات المرورية هي التنصت قليلا. افتح الزجاجة ووضع قابس مقلوب على سطح جاف. اصنع 0.8 مل من الماء المقطر في القارورة. يتم إغلاق الزجاجة مع قابس، لتحمل لمدة 10 دقائق عند درجة حرارة (18-25) درجة مئوية وإمالة زجاجة بلطف وتدويرها، وخلط محتوياتها حتى حل كامل، وتجنب تكوين الرغوة.

يمكن تخزين K + AG Restored في زجاجة مغلقة عند درجة حرارة (2-8) درجة مئوية لمدة شهر واحد، عند درجة حرارة ناقص 20 درجة مئوية - لمدة ستة أشهر. يسمح بمرة واحدة بتجميد K + AG المسترد.

6.6 إعداد حل KG-2 في أعمال التربية

من القارورة مع KG-2، حدد وحدة التخزين المحددة في الجدول A.1 وحدة التخزين والنقل إلى الزجاجة باستخدام PP-K2. محتويات المزيج تماما، لا يسمح بتشكيل الرغوة.

في حالة استخدام واحد أو أكثر تجريد في قارورة نظيفة لتحديد المبلغ المطلوب من PP-K2، أضف KG-2 وفقا للجدول A.1 وخلط الحل، ومنع تكوين الرغاوي.

انتباه! يتم إعداد حل KG-2 في تربية العمل مباشرة قبل الاستخدام! يمكن تخزين محلول CG-2 في تخفيف العمل لمدة 15 دقيقة عند درجة حرارة (18-25) ° C. استخدام فقط حمام جديد للكواشف والنصائح الجديدة!

يمكن تخزين بقايا KG-2 في زجاجة مغلقة عند درجة حرارة (2-8) درجة مئوية خلال عمر الصرف في المجموعة.

6.7 إعداد حل العمل الركائي

يجب أن تكون زجاجة الكروموجين TMB قبل الاستخدام عند درجات حرارة (37 ± 1)° ج حتى حل كاملة من البلورات.

من TMB Chromogen Vial لتحديد وحدة التخزين المحددة في الجدول A.1 وحدة التخزين والنقل إلى القارورة مع BRC. محتويات المزيج تماما، لا يسمح بتشكيل الرغوة.

في حالة استخدام واحد أو أكثر تجريد في قارورة نظيفة لتحديد المبلغ المطلوب من BRS، أضف chromogen TMB وفقا للجدول A.1 وخلط الحل، وليس السماح بتكوين الرغاوي.

انتباه! تم إعداد حل العمل للركيزة مباشرة قبل الاستخدام في المكان المحمي بالضوء! يمكن تخزين الحل لمدة 20 دقيقة عند درجات حرارة (18-25) درجة مئوية في المكان المحمي بالضوء.

يجب حماية الحل من الضوء والاتصال مع المعادن أو الأيونات المعدنية. قبل الاستخدام، يجب أن يكون حل الركيزة عديم اللون. الأطباق التي ستكون في سياق رد الفعل على الاتصال بحل الركيزة، وغسل دون استخدام المنظفات الاصطناعية. استخدام فقط حمام جديد للكواشف والنصائح الجديدة!

يمكن تخزين بقايا Chromogen TMB في زجاجة مغلقة عند درجة حرارة (2-8) ° مئوية خلال عمر الرف للمجموعة.

7 متطلبات لغسل اللوحي

في جميع مراحل الغسيل، من الضروري السيطرة على ملء جميع الآبار وإزالة كاملة (طموح) سائلهم؛

من الضروري في كل غسل جميع الآبار لملء حل الحواف (0.30-0.35 مل في البئر)، دون تجاوز وتدفق السائل من الثقوب المجاورة؛

من الضروري تحمل الآبار المملوءة بحل لغسل الجهاز اللوحي، لمدة 30 ثانية؛

مع كل طموح، قم بإزالة مخلفات السائل بعناية بعناية من الثقوب عن طريق النقر على الإطار مع الشرائط في الموضع المقلوب على طول ورقة المرشح، وضعت على ورقة البولي إيثيلين؛

غسل الصخور ذات جودة الصخور يؤدي إلى نتائج غير صحيحة.

8 تحليل

8.1 في أي اثنين من الثقوب قرص إضافة 0.07 مل (70 ميكرولتر) K + في.في اثنين آخرين 0.07 مل (70 ميكرولتر) K + AG.، ثلاثة آبار أخرى - 0.07 مل (70 ميكرولتر) ك -.

انتباه!عند إجراء ELISA على نفس الشريط، يسمح باستخدامه ل K - - وجهان، ل K + AT - ثقب واحد، ل K + AG - ثقب واحد.

في بقية آبار الجهاز اللوحي 0.07 مل (70 ميكرولتر) من العينات المدروسة من المصل (البلازما) من الدم البشري.

انتباه! يجب اختيار كل عينة من خلال نصيحة يمكن التخلص منها!

8.2 لجميع آبار الجهاز اللوحي فوق عينات التحكم وعينات مصل دراستها (البلازما) من الدم فورا الوديعة 0.05 مل (50 ميكرولتر) RK-1.وبعد محتويات الآبار مزيج النقر بعناية على طول حواف الجهاز اللوحي.

8.3 (37 ± 1) ° مع داخل 60 دقيقة.

انتباه!ل (1-2) مناجم حتى نهاية الحضانة، قم بإعداد حل KG-2 في تخفيف العمل (P 6.6).

8.4 إزالة محتويات الآبار مع غسالة، ثم شطف آبار القوس مع حل لغسل الجهاز اللوحي (P 6.2) سبع مرات.

8.5 أضف إلى كل اللوحي Wells 0.15 مل (150 ميكرولتر) KG-2. في أعمال التربية (P 6.6).

8.6 اللوحي عفريت الفيلم أو أغلق الغطاء واحتضان في ترموستات عند درجة حرارة (37 ± 1) ° مع داخل 10 دقائق.

8.7 قم بإزالة محتويات الثقوب اللوحي مع غسالة، ثم شطف آبار أقراص مع حل لغسل الجهاز اللوحي (P 6.2) سبع مرات.

8.8 لجميع أجهزة الكمبيوتر اللوحي الآبار 0.15 مل (150 ميكرولتر) الركيزة حل الحل (ص 6.7).

في إعداد حل العمل للركيزة (P.6.7) F. لاكون مع Chromogen TMB بحاجة إلى الاحماء قبل الاستخدام لمدة (3-5) دقيقة في درجات حرارة (37± 1) ° С لإكمال حل البلورات.

8.9 اللوحي عفريت الفيلم أو أغلق الغطاء واحتضان في ترموستات عند درجة حرارة (37 ± 1) ° من عند في مكان مظلم خلال 15 دقيقة.

انتباه!عند الانتهاء من الحضانة في الآبار مع عينات المصل التي تحتوي على الأجسام المضادة إلى HIV-1 و / أو HIV-2، و / أو Antigen R24 HIV-1، تغيير في لون الحل من عديم اللون إلى الأزرق الكثافة المختلفة اعتمادا على تركيز الأجسام المضادة و / أو المستضد في عينة المصل دراستها.

8.10 إيقاف رد فعل بيروكسيدز عن طريق الدخول في جميع الآبار 0.05 مل (50 ميكرولتر) وقف كاشف.

انتباه!في الآبار مع عينات SERA تحتوي على أجسام مضادة إلى HIV-1 و / أو HIV-2، و / أو Antigen P24 HIV-1، حدث تغيير في لون الحل مع الأزرق على كثافة مختلفة أصفر.

8.11 في موعد لا يتجاوز (1-2) دقيقة بعد إيقاف التفاعل لتحديد المرجع في الآبار في الوضع المتزامن مع الطول الموجي 450 نانومتر.

9 نتائج تحليل المعالجة

9.2 النتائج تنظر إلا إذا:

قيمة OPS إلى - لا تتجاوز 0.2 OE؛

يجب أن لا تنحرف كل قيمة منفصلة ل OPC من العمليات المعوضة إلى - بأكثر من 30٪. إذا كان أحد القيم الثلاث من المرجع المراد - يخرج من هذا الحد، فيجب استبعاده من حساب العمليات المعوضة. إذا كان اثنان من القيم الثلاثة لبرنامج OP K - يخرج لهذا الحد، يجب أن يتكرر التحليل في كواشف المجموعة الجديدة؛

قيمة OPS K + بأكثر من 1.0 أوه؛

قيمة OPS K + AG أكثر من 1.0 OE.

9.3 مع مراعاة الشروط المذكورة أعلاه، احسب القيمة الحرجة (OPKRIT)، OE، وفقا للبيض (1):

Opkrit. \u003d ops إلى - + 0,14 (1).

10 خصائص تحليلية وتشخيصية

حساسية مجموعة من الكواشف IFA-HIV 1.2 Agat لتحديد Antigen P24 HIV-1 -

النوعية مجموعة من الكواشف IFA-HIV 1.2 Agat - معيار 100٪ في (-) فيروس نقص المناعة البشرية. لوحة المصل القياسية لا تحتوي على أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية من الأنواع الأولى والثانية (HIV-1،2) و HIV-1 Antigen (P24). Software42-28-214-02P.kat№ins-20. CJSC "MBS".

11 نموذج إصدار نموذج

11.1 يتم إنتاج المجموعة في خمس خيارات للتكوين:

1 مجموعة 1P - التحليل باليد. تم تصميم المجموعة لعقد 12 عروض IFA على جهاز لوحي قابل للطي: 1 الإعداد 1 - 1 قطاع (8 ثقوب). المجموع - 96 تعريفات، بما في ذلك عينات التحكم؛

2 مجموعة 2M - التحليل عن طريق الطريقة اليدوية. تم تصميم المجموعة لتقدير 2 IFA على أقراص متجانسة: 1 صياغة - قرص واحد. المجموع - 192 تعريفات، بما في ذلك عينات التحكم؛

3 تعيين 2p. - إجراء التحليل باليد. تم تصميم المجموعة لعقد 24 عروض IFA في 2. انهيارx Tablets: 1 الإعداد - 1 قطاع (8 ثقوب). مجموع - 192 التعاريف، بما في ذلك عينات التحكم؛

4 كيت A2M - إجراء تحليل على محلل تلقائي. تم تصميم المجموعة لتقدير 2 IFA على أقراص متجانسة: 1 صياغة - قرص واحد. المجموع - 192 تعريفات، بما في ذلك عينات التحكم؛

5 مجموعة A2R - إجراء تحليل على محلل تلقائي. تم تصميم المجموعة لمدة 24 إطار عمل IFA على لوحين قابل للطي: 1 مرحلة 1 قطاع (8 ثقوب). المجموع - 192 تعريفات، بما في ذلك عينات التحكم.

12 شروط التخزين والتطبيق

12.1 يجب تخزين المجموعة نقية محمية من الرطوبة وخفيفة الغرفة عند درجة حرارة (2-8) ° مئوية خلال تاريخ انتهاء الصلاحية بأكملها. لا تجمد مكونات المجموعة.

12.2 للحصول على نتائج موثوقة، من الضروري الامتثال للتعليمات لتطبيق مجموعة.

12.3 حياة الرف للمجموعة - 12 شهر.

الملحق أ.

جدول A.1 - استهلاك الكاشف ل Elisa

كاشف، مل

عدد الشريط المستخدمة، أجهزة الكمبيوتر.

إعداد الحل لغسل الجهاز اللوحي

FSB-T × 25

مقطر

ماء

إعداد حل KG-2 في أعمال التربية

PR-K2.

الطبخ الركيزة العاملة

chromogen tmb.

فهرس

قواعد صحية

قرار وزارة الصحة في جمهورية بيلاروسيا بتاريخ 16 ديسمبر 1998 رقم 351

حول مراجعة لوائح الإدارات التي تحكم القضايا المتعلقة بفيروس نقص المناعة البشرية / الإيدز

قرار وزارة الصحة في جمهورية بيلاروسيا بتاريخ 25 نوفمبر 2002 رقم 165

على سلوك التطهير والتعقيم من خلال مرافق الرعاية الصحية

قرار وزارة الصحة في جمهورية بيلاروسيا بتاريخ 04.28.2010 № 47

عند الموافقة على تعليمات الإجراءات المتعلقة بإجراء الامتحانات الطبية الإلزامية للعمل والاعتراف بموجب القوة غير المرئية لبعض قرارات وزارة الصحة في جمهورية بيلاروسيا

عدد فريد من السجل

رقم التسجيل الطبي

FSR 2011/10182.

تاريخ تسجيل الدولة للمنتج الطبي

اسم المنتج الطبي

MILAP-IFA-IFA-HIV-AGATE الكواشف نظام اختبار الجهاز المناعي لتنفيذ Antifiel لفيروس نقص المناعة البشرية 1 و 2 أنواع (HIV-1 و HIV-2)، HIV-1 Group O Andigen R24 HIV-1 ON TU 9398 -187 -05941003-2017.
كجزء: - المناعة - بوليستورين - بوليشتيرين اللوحي - قابل للطي بشكل جيد لأخصائيي (أو إلى الآبار)، في آباره من المستضد الاصطناعي - GP160، GP41، P31 HIV-1، GP41 HIV-1 GROUP O، GP36 HIV-2 والأجساد المضادة Antigen P24 HIV-1: تعيين 1 (جهاز لوحي 1)، مجموعة 2 (حوامل)، مجموعة 3 (5 حبة)، - conjugate-1: KIT 1 (1 Flash 1.2 ML)، SET 2 (1 FL. 1.2 مل) ، مجموعة 3 (1 فلوريدا. 3.6 مل أو 3 فلوريدا. 1.2 مل)، - conjugate-2: Kit 1 (1 fl. 2.0 ml)، set 2 (1 fl. 2.0 ml)، set 3 (1 fl. 4.0 ml أو 2 فلوريدا. 2.0 مل)، - RRK-1 - حل لتربية التكرار -1: كيت 1 (1 فلوريدا. 12.0 مل)، تعيين 2 (1 فلوريدا 12.0 مل)، مجموعة 3 (3 فلوريدا 12.0 مل) - - RRK-2 - حل لتربية التكاثر-2: تعيين 1 (1 فلوريدا. 20.0 مل)، مجموعة 2 (1 فلوريدا. 20.0 مل)، مجموعة 3 (2 فلوريدا. في 20.0 مل)، - K + AT - A السيطرة على عينة إيجابية تحتوي على الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية: كيت 1 (1 فلوريدا 2.0 مل)، مجموعة 2 (1 فلوريدا 2.0 مل)، مجموعة 3 (1 فلوريدا. 4.0 مل أو 2 فلوريدا. 2.0 مل)، - K + AG - CON عينة إيجابية Troller تحتوي على Antigen الاصطناعي P24 HIV-1: KIT 1 (1 FL. 2.0 مل)، كيت 2 (1 فلوريدا. 2.0 مل)، مجموعة 3 (1 فلوريدا. 4.0 مل أو 2 رر. 2.0 مل)، - K- - التحكم في العينة السلبية: KIT 1 (1 FL. 2.5 مل)، مجموعة 2 (1 فلوريدا. 2.5 مل)، مجموعة 3 (1 فلوريدا. 5.0 مل أو 2 فلوريدا. 2.5 مل)، - PR - محلول الغسيل: كيت 1 (1 فلوريدا. 50.0 مل)، مجموعة 2 (1 فلوريدا. 120.0 مل )، مجموعة 3 (2 فلوريدا. 120.0 مل)، - توقف الكاشف: كيت 1 (1 فلوريدا. 25.0 مل)، SET 2 (2 فلوريدا. 25.0 مل)، SET 3 (2 FL 50.L أو 4 PL 25.0 مل) - - SAT - SUT - SUTTRATE SUPER SOLUTION: SET 1 (1 FL. 25، 0 ML)، SET 2 (1 FL. 25.0 مل)، مجموعة 3 (2 رر. 50.0 مل أو 3 ر. 25.0 مل)، - حل TMB - الحل تحتوي على 3.3 "، 5.5" - الترام إيمتيلبنزيدين: كيت 1 (1 فلوريدا. 2.5 مل)، مجموعة 2 (1 فلوريدا. 2.5 مل)، مجموعة 3 (2 فلوريدا. 3.5 مل أو 3 فلوريدا. 2.5 مل). الملحقات: - يغطي لوحات البوليسترين 96-Well: تعيين 1 (كمبيوتر شخصي.)، تعيين 2 (2 جهاز كمبيوتر شخصى).، تعيين 3 (5 قطع.) أو - فيلم واقية لأقراص IFA: تعيين 1 (2 قطعة)، تعيين 2 (4 قطع.)، مجموعة 3 (10 قطع.)، - نصائح يمكن التخلص منها: كيت 1 (16 جهاز كمبيوتر شخصى)، مجموعة 2 (32 قطعة)، مجموعة 3 (80 جهاز كمبيوتر شخصى) - حمامات بلاستيكية للكواشف السائلة: تعيين 1 (2 جهاز كمبيوتر شخصى).، تعيين 2 (4 قطع.)، مجموعة 3 (10 قطع.)، وحزم البولي إيثيلين مع قفل قفل الرمز البريدي: تعيين 1 (كمبيوتر واحد)، تعيين 2 (2 قطعة.)، مجموعة 3 (3 قطع.).

اسم المنظمة - مقدم الطلب للمنتجات الطبية

موقع المنتج الطبي مقدم الطلب

العنوان القانوني لمنظمة مقدم الطلب

603014، روسيا، نيجني نوفغورود، ul. Comintern، د. 47

اسم المنظمة المنتج للمنتجات الطبية أو الشركة المصنعة للمنتجات الطبية

أنظمة التشخيص NPO.

موقع المنظمة المنتج للمنتجات الطبية أو المنظمة - الشركة المصنعة للمنتجات الطبية

603093، روسيا، نيجني نوفغورود، ul. Yablaonaeeva، 22، A / I 69

العنوان القانوني لمنظمة المنتج أو المنظمة الطبية - الشركة المصنعة للمنتجات الطبية

يصبح التشخيص في الوقت المناسب لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية تدبيرا مهما للغاية، حيث أن بداية العلاج في السابق يمكن أن تكون سلفا إلى حد كبير من تطوير المرض وتوسيع نطاق حياة المريض. في السنوات الأخيرة، لوحظ تقدم كبير في مجال تحديد هذا المرض الرهيب: أكثر تقدما، تأتي أساليب المسح لاستبدال أنظمة الاختبار القديمة، وتزيد دقةهم بشكل كبير.

في هذه المقالة، سوف نقول بالطرق الحديثة لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، وهي مفيدة لمعالجة هذه المشكلة في الوقت المناسب والحفاظ على الجودة الطبيعية لحياة المرض.

تقنيات تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية

في روسيا، يتم إجراء إجراء قياسي لتشخيص الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية، والذي يتضمن مستويين:

  • نظام اختبار ELISA (تحليل الفرز)؛
  • لطخة المناعة (IB).

يمكن أيضا تطبيق التقنيات الأخرى على التشخيص:

  • اختبارات صريحة.

نظام اختبار IFA

في المرحلة الأولى من التشخيص، يتم استخدام اختبار فحص (ELISA) للكشف عن إصابة فيروس نقص المناعة البشرية، والتي تعتمد على بروتينات فيروس نقص المناعة البشرية التي تم إنشاؤها في المختبرات، مما أسفر عن الأجسام المضادة المحددة التي تم إنشاؤها في الجسم استجابة للعدوى. بعد تفاعلهم مع الكواشف (الإنزيمات)، يغير نظام الاختبار لون المؤشر. بعد ذلك، تتم معالجة هذه التغييرات بالألوان هذه في أجهزة خاصة، والتي تحدد نتيجة التحليل المنجزة.

هذه الاختبارات IFA قادرة على إظهار النتيجة بعد بضعة أسابيع من إدخال عدوى فيروس نقص المناعة البشرية. لا يحدد هذا التحليل وجود فيروس، لكنه يكشف عن إنتاج الأجسام المضادة إليه. في بعض الأحيان، في الجسم البشري، يبدأ إنتاج الأجسام المضادة لفيروس نقص المناعة البشرية بعد أسبوعين في مجال الإصابة، ولكن يتم إنتاج معظم الناس في المواعيد النهائية اللواتية، بعد 3-6 أسابيع.

هناك أربعة أجيال من اختبارات IFA مع حساسية مختلفة. في السنوات الأخيرة، غالبا ما تستخدم أنظمة الاختبار III و ID، والتي تعتمد على الببتيدات الاصطناعية أو البروتينات المؤرخة ولديها خصوصية ودقة أكبر. يمكن استخدامها لتشخيص عدوى فيروس نقص المناعة البشرية ومراقبة انتشار فيروس نقص المناعة البشرية والأمن عند فحص الدم المانحين. دقة أنظمة اختبار IFA الثالث والجيل الرابع توليد 93-99٪ (اختبارات أكثر حساسية يتم إنتاجها في الدول الغربية - 99٪).

بالنسبة لتنفيذ اختبار IFA، يتم أخذ 5 مل من الدم من عروق المريض. بين الوجبة الأخيرة والتحليل يجب أن يستغرق ما لا يقل عن 8 ساعات (كقاعدة عامة، يتم تنفيذها في الصباح على معدة فارغة). يوصى بهذا الاختبار ألا يستغرق الأمر في وقت سابق من 3 أسابيع من الإصابة المزعومة (على سبيل المثال، بعد الاتصال الجنسي غير المحمي مع شريك جنسي جديد).

يتم الحصول على نتائج اختبارات IFA في 2-10 أيام:

  • النتيجة السلبية: تشير إلى عدم وجود عدوى فيروس نقص المناعة البشرية ولا تتطلب الوصول إلى أخصائي؛
  • نتيجة سلبية كاذبة: قد يلاحظ في الشروط المبكرة من العدوى (ما يصل إلى 3 أسابيع)، في المراحل اللاحقة من الإيدز مع قمع مناعة واضحة للمناعة ومع إجراء إعداد دمي بشكل غير صحيح؛
  • النتيجة الإيجابية الخاطئة: قد يلاحظ في بعض الأمراض ومع إعداد دماء بشكل غير صحيح؛
  • النتيجة الإيجابية: تشير إلى إصابة عدوى فيروس نقص المناعة البشرية، وتتطلب IB وتداول المريض إلى أخصائي في مركز الإيدز.

لماذا اختبار IFA يعطي نتائج إيجابية كاذبة؟

يمكن ملاحظة نتائج إيجابية خاطئة اختبارات IFA على فيروس نقص المناعة البشرية بمعالجة الدم غير الصحيحة أو المرضى الذين يعانون من مثل هذه الظروف والأمراض:

  • المايلوما المتعددة؛
  • الأمراض المعدية التي أثارها فيروس إبستين بار؛
  • حالة بعد؛
  • أمراض المناعة الذاتية؛
  • ضد خلفية الحمل؛
  • حالة بعد التطعيم.

مع الأسباب الموصوفة أعلاه للدم، قد تكون أجسام مضادة تقاطع غير محددة غير محددة، فإن إنتاجه لم يثير الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

في السنوات الأخيرة، انخفض وتيرة النتائج الإيجابية الخاطئة بشكل كبير بسبب استخدام أنظمة اختبار الجيل الثالث والرابع، والتي تحتوي على البروتينات الببتيد والمؤكدة أكثر حساسية (يتم تصنيعها في الهندسة الوراثية المختبرية). بعد بدء استخدام هذه الاختبارات IFA، انخفض تردد النتائج الإيجابية الخاطئة بشكل كبير وهو حوالي 0.02-0.5٪.

لا يعني تحديد نتيجة إيجابية كاذبة أن الشخص مصاب بفيروس نقص المناعة البشرية. في مثل هذه الحالات، يوصي اختبار IFA آخر (مطلوب جيل الرابع).

يتم إرسال دم المريض إلى مختبر المرجع أو التحكيم مع ملاحظة "كرر" ويتم التحقيق في جيل نظام اختبار IFA الرابع. إذا كانت نتيجة تحليل جديد سلبي، فمن المعروف أن النتيجة الأولى معترف بها على أنها خاطئة (إيجابية خاطئة) ولم يتم تنفيذ IB. مع نتيجة إيجابية أو مشكوك فيها، خلال الاختبار الثاني، يتم تعيين المريض بالضرورة لإجراء IB بعد 4-6 أسابيع لتأكيد أو تدحض عدوى فيروس نقص المناعة البشرية.

المناعة النهرية

يمكن تثبيت التشخيص النهائي لعدوى فيروس نقص المناعة البشرية إلا بعد تلقي النتيجة الإيجابية للنزخة المناعية (IB). يستخدم شريط نيتروسيليولوجي يتم تطبيق البروتينات الفيروسية.

يتم إجراء سياج الدم ل IB من الأوردة. بعد ذلك، يتعرض للمعالجة الخاصة والبروتينات الواردة في مصلها منفصلا في هلام خاص وفقا لشحنهم والوزن الجزيئي (يتم التلاعب بالمعدات الخاصة تحت تأثير المجال الكهربائي). يتم فرض شريط Nitrocellulose على هلام مصل الدم والحظر ("الضرر") في غرفة خاصة. تتم معالجة الشريط وإذا كان هناك أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية في المواد المستخدمة، فهي مرتبطة بخطوط مستضدة على IB وأظهر أنفسهم كوسائل.

تعتبر IB إيجابية إذا:

  • وفقا لمعايير CDC الأمريكية - هناك خطوطان أو ثلاثة خطوط GP41، P24، GP120 / GP160؛
  • وفقا لمعايير إدارة الأغذية والعقاقير الأمريكي - على الشريط هناك خطين P24، P31 وخط GR41 أو GR120 / GR160.

في 99.9٪ من الحالات، تشير النتيجة الإيجابية ل IB إلى عدوى فيروس نقص المناعة البشرية.

في غياب الخطوط - IB سلبية.

عند تحديد الخطوط باستخدام GR160، GR120 و GR41- IB أمر مشكوك فيه. يمكن اكتشاف هذه النتيجة في:

  • أمراض الأكرول؛
  • حمل؛
  • تحويل الدم المتكرر.

في مثل هذه الحالات، يوصى بإجراء عملية إعادة الدراسة باستخدام مجموعة من شركة أخرى. إذا كان ذلك، بعد IB إضافية، تظل النتيجة مشكوك فيها، فمن الضروري أن نلاحظ لمدة ستة أشهر (محتجز IB كل 3 أشهر).

تفاعل سلسلة بوليميريز

اختبار على PCR يمكن تحديد الحمض النووي الريبي من الفيروس. حساسيةها مرتفعة بما فيه الكفاية وتسمح لك بتحديد عدوى فيروس نقص المناعة البشرية بعد 10 أيام بعد الإصابة. في بعض الحالات، يمكن ل PCR تقديم نتائج إيجابية كاذبة، لأن حساسيةها العالية يمكن أن تتفاعل مع الأجسام المضادة للالتهابات الأخرى.

هذه التقنية التشخيصية مكلفة، تتطلب معدات خاصة ومؤهلات عالية للمتخصصين. هذه الأسباب لا تسمح لها بإجراءها مع اختبار جماعي للسكان.

ينطبق PCR في مثل هذه الحالات:

  • لتحديد فيروس نقص المناعة البشرية في حديثي الولادة الذين ولدوا من الأمهات المصابين بفيروس نقص المناعة البشرية؛
  • لتحديد فيروس نقص المناعة البشرية في "فترة النافذة" أو مع IB مشكوك فيها؛
  • للسيطرة على تركيز فيروس نقص المناعة البشرية في الدم؛
  • لأبحاث الدم المانحة.

فقط على اختبار PCR، لم يتم إجراء فيروس نقص المناعة البشرية، ولكن يتم تنفيذها كطريقة تشخيصية إضافية لحل المواقف المثيرة للجدل.


طرق صريحة

الاختبارات السريعة التي يمكن تقييم نتائجها بعد 10-15 دقيقة أصبحت واحدة من الابتكارات في تشخيص فيروس نقص المناعة البشرية. يتم الحصول على النتائج الأكثر فعالية ودقيقة باستخدام اختبارات غير منتوعة على أساس مبدأ تدفق الشعيرات الدموية. إنها شرائط خاصة يتم تطبيق الدم أو غيرها من السوائل التي تمت دراستها (اللعاب والبول). إذا كان هناك أجسام مضادة لفيروس نقص المناعة البشرية، فقد بعد 10-15 دقيقة، تظهر شريط الألوان والتحكم في الاختبار - نتيجة إيجابية. مع نتيجة سلبية - يظهر قطاع التحكم فقط.

كما بعد اختبارات IFA، يجب تأكيد نتائج الاختبارات السريعة عن طريق تحليل IB. فقط بعد ذلك قد يتم تشخيص إصابة بفيروس نقص المناعة البشرية.

هناك مجموعات صريحة لاختبار المنزل. اختبار Orasure Technologies1 (الولايات المتحدة الأمريكية) المعتمدة من FDA، تباع دون وصفة طبية ويمكن استخدامها لتحديد فيروس نقص المناعة البشرية. بعد الاختبار، في حالة وجود نتيجة إيجابية، يوصى بالمريض للخضوع لمسح في مركز متخصص لتأكيد التشخيص.

لم تتم الموافقة على الاختبارات المحلية المتبقية بعد من قبل إدارة الأغذية والعقاقير ونتائجها يمكن أن تكون مشكوك فيها للغاية.

على الرغم من حقيقة أن الاختبارات السريعة هي أدنى من اختبارات IFA للأجيال الرابعة، فإنها تستخدم على نطاق واسع للاختبار السكاني الإضافي.

يمكنك تمرير الاختبارات لتحديد الإصابة بفيروس نقص المناعة البشرية في أي مستوصف، CRH أو في مراكز الإيدز المتخصصة. في روسيا، يتم تنفيذها سرية مطلقة أو مجهولة. يمكن لكل مريض الاعتماد على الحصول على المشورة الطبية أو النفسية قبل أو بعد التحليل. سيتعين عليك الدفع مقابل اختبارات فيروس نقص المناعة البشرية فقط في المؤسسات الطبية التجارية، ويتم الوفاء بها في العيادات والمستشفيات العامة.

حول ما هي الطرق التي يمكنك الحصول عليها مع عدوى فيروس نقص المناعة البشرية وتوجر الأساطير عن الاحتمالات التي تصيبها، وقراءة في

جار التحميل ...جار التحميل ...