Кардиолипинов антиген за реакция на микропреципитация. Неспецифична серологична диагностика на сифилис Микрореакция на утаяване с кардиолипинов антиген (rmp). Диагностични потвърждаващи серологични тестове

Кръвен тест за рак на пикочния мехур - какво е това? Какво означава това съкращение? До каква степен този анализ е завършен за диагностициране на сифилис?

Как се диагностицира сифилис?

Причинителят на сифилис или бледа трепонема произвежда няколко вида агресивни чужди протеини, които се наричат ​​антигени. Това е протеинов антиген, който е добре разпознат от имунната система, полизахариден антиген, който не се използва в диагностиката, и много важен липиден антиген. Това вещество има значително сходство с фосфолипидите, които са част от мембраните на човешките клетки.

Този антиген съставлява около 30% от общата маса на причинителя на сифилис и именно към него се произвеждат специални антитела още в началото на втория месец след заразяването, които се наричат ​​реагини. Гледайки напред, можем да кажем, че именно това сходство на антигена с фосфолипидите на човешките мембрани причинява възможни фалшиво положителни реакции, особено ако пациентът има автоимунна патология, т. Нар. Антифосфолипиден синдром.

Диагнозата на сифилис се основава на две големи групи методи. В първия случай те директно търсят патогена под микроскоп, обектите на изследване са различни изхвърляния - от язви, ерозии, от дъното на венеца, от елементите на обрива. Второ, той открива антитела, които се появяват в серума или плазмата на пациента към гореспоменатите антигени.

В този случай методите на серологична (от латински серум - серум) диагностика се разделят на две групи. В първия от тях се използват специфични трепонемални антигени, които се получават от чисти култури от сифилитични микроорганизми. А неспецифичните серологични реакции използват подобни антигени, но само получени не от патогени и подобни на тях - т. Нар. Кардиолипинов антиген, който се получава от телета на говеда. Той е много подобен на липидния антиген на причинителя на сифилис и може да „провокира” имунен отговор в присъствието на антитела в кръвта на пациента.

Тези нетрепонемни тестове (при които реагентите не са "истински") не изискват скъпи специфични антигени, така че са евтини, достъпни и бързи. Тяхната цел е скрининг, първично изследване или скрининг реакции. Тези нетрепонемни тестове включват реакция на микропреципитация или рак на пикочния мехур.

За да се установи окончателно диагнозата, само нетрепонемалните тестове не са достатъчни. Ако пациентът има положителен отговор, в този случай се използва целият арсенал от изследвания за сифилис - от и завършва със специални методи на изследване - това е пасивна реакция на хемаглутинация и имуноблот метод. Те включват също методи за непряка имунофлуоресценция, както и реакцията на обездвижване на трепонема.

Последните два метода се използват от специалисти в специализирани институции, тъй като не вещество от говеждо сърце вече се използва като антиген, а живи сифилитични микроорганизми, специално отглеждани при зайци за тези цели. Нека разгледаме по -подробно какво е микропреципитация или микрореакция.

Микрореакционен кръвен тест - какво е това?

В Рунета има голям брой искания, чието значение се свежда до следното: кръвен тест за рак на пикочния мехур - какво е това? Отговаряме на поставения въпрос. Реакцията на утаяване е настроена не само за изследване на сифилис, тя служи на микробиологията и имунологията в продължение на много десетилетия. В превод от латински това означава - реакция на утаяване.

По време на изследването се смесват антигени, които се въвеждат предварително в разтвора. В този случай говорим за кардиолипиновия антиген. След това към този разтвор се добавя кръвният серум, взет от пациента. И ако тази кръв съдържа антитела, които са се развили до подобен антиген на причинителя на сифилис, тогава те "като ключ към ключалка" ще се доближат до активните центрове на молекулите на антигена. В резултат на това се появяват големи, взаимосвързани структури на имунни комплекси, които се наричат ​​утайки. Това са антигенни молекули, "закачени" с антитела. Те са по -големи и по -тежки и в резултат на това ще има забележима или мътност на прозрачните разтвори, или тяхното утаяване.

В конкретен случай при провеждане на реакция на микропреципитация за сифилис се забелязва появата на бели люспи. Има голямо разнообразие от реакции на утаяване, които могат да се проведат не само в епруветка, но и в полутечен гел, в различни хранителни среди и по други начини.

RPR - модификация

Също така в съвременните лаборатории можете да попаднете на друго подобно име - RPR тест. Това вече е модерна модификация на валежите, при която се откриват бързи плазмени реагини. Тези реактиви се наричат ​​антитела, принадлежащи към класовете имуноглобулини G и M.

Именно RPR тестът (второто му име е неспецифичен антифосфолипиден или реагинов тест) се препоръчва със заповед на Министерството на здравеопазването на Руската федерация за скрининг или първично изследване за сифилис. Ето защо, ако имате избор: да направите RMP или да извършите RPR, тогава е по -добре да вземете решение в полза на втория метод.

RPR - методът на изследване позволява да се идентифицират почти 80% от лицата с протичане на първична инфекция и почти 100% от лицата, които страдат от вторичен сифилис или латентни (латентни) форми. RPR - реакцията може да открие сифилис още 7 дни след появата на първичен сифилом, например твърд шанкър. Обикновено това може да се направи един месец след заразяването.

Показания за изследване и правила за вземане на кръвни проби

Как да даря кръв за рак на пикочния мехур - тест за сифилис? Как да се подготвя за изследването? Както в повечето случаи на кръводаряване, не се изискват специални подготвителни мерки за пациента. Най -важното е, че кръвта се взема на гладно, което обикновено се прави рано сутрин. В случай, че това правило не може да бъде спазено, кръвта може да се дари 4 часа след лека храна. Пиенето на течността е разрешено, ако е чиста, негазирана и не минерална вода. Всички други видове течности като сокове, кафе и чай са нежелателни, за да се избегнат фалшиви реакции.

Показана е реакцията на микропреципитация и нейният по -перфектен аналог RPR, с първично подозрение за сифилис. Също така, тези реакции са необходими за провеждане, преди всичко, за диагностика на латентен сифилис. Като метод за скрининг, тези тестове се използват за скрининг на донорите и просто при първоначалното посещение. Трябва да се подчертае, че положителната стойност на тези тестове по никакъв начин не е еквивалентна на диагнозата сифилис, тъй като антигенът не е бил сифилитичен, а просто „подобен“. Тези резултати трябва да бъдат потвърдени чрез трепонемални тестове или други съвременни диагностични методи, например.

Тълкуване и интерпретация на резултатите

Декодирането на кръвен тест за рак на пикочния мехур включва издаването на не количествен, а качествен резултат: „положителни“ или „отрицателни“ - антителата са открити или не са открити.

В случай на първичен сифилис, тази реакция може да бъде положителна вече в 60% и повече случаи. В случай на вторичен сифилис, когато в тялото има много антитела, реакцията става надеждно сто процента. Ако сифилисът протича латентно или латентно, но за доста дълго време, тогава реакцията на микропреципитация ще бъде надеждна в 80% от случаите.

При третичен сифилис диапазонът от стойности може да варира от 37% до 94%. В крайна сметка, ако сифилисът трае много дълго, буквално години, тогава антителата по различни причини могат да изчезнат от кръвта или да престанат да се произвеждат.

Тъй като реакцията на микропреципитация е скринингов метод, трябва да се вземат предвид следните много важни обстоятелства. Тази реакция се проявява чрез образуване на имунни комплекси-утайки само ако антителата и антигенът са в кръвта в строги пропорции, трябва да има точно толкова, че антителата да се свържат напълно с цялото количество антиген и да няма излишък в разтвора на някой от реагентите.

Ако има значително повече антитела, тогава реакцията може изобщо да не настъпи. Това явление стана известно при изследването на вроден сифилис. Бебетата с вродена инфекция имат толкова много антитела в кръвта, че реакцията просто не възниква.

Ето защо тълкуването на резултатите от рак на пикочния мехур при кърмачета трябва да се подхожда много внимателно.

Какви заболявания могат да причинят фалшиво положителни резултати? Списъкът им е доста голям:

  • системни заболявания на съединителната тъкан и ревматични лезии;
  • бременност (рядко);
  • подагра и хиперурикемия;
  • хроничен алкохолизъм;
  • диабет;
  • тъй като микобактериите и трепонема палидус имат сходни антигени;
  • интравенозна наркомания;
  • лимфоцитен тонзилит или;
  • други вирусни и бактериални инфекции (вирусен хепатит или ентеровирусна диария, скарлатина, морбили);
  • вирусна или бактериална пневмония;
  • автоимунен тиреоидит;
  • възрастна и старческа възраст.

Също така тази реакция може да бъде фалшиво положителна след различни ваксинации и ваксинации.

Въпреки това, в случай че реакцията на микропреципитация или нейният по -съвършен аналог - RPR - е отрицателна, това не може недвусмислено да показва липсата на сифилитична инфекция. Пациентът може да се зарази със сифилис буквално два или три дни, седмица или две преди изследването и тогава антителата в кръвта просто нямат време да се появят. Това състояние се нарича серонегативен ранен сифилис. Възможна е и напълно обратна ситуация, когато пациентът е болен 10 или 20 години и има късен третичен сифилис с липса на антитела в кръвната плазма.

Ако RMP или RPR са положителни

Разбира се, най -много притеснява хората, ако ракът на пикочния мехур е положителен.

В този случай е необходимо да се извършат допълнителни потвърдителни тестове, които бяха споменати по -горе. Ако обектът на избор е и, тогава тяхната специфичност е много по -висока и е 100% с чувствителност 95%. Но дори и тези допълнителни методи също могат да дадат фалшиво положителен резултат, особено в случай на съпътстващи възпалителни заболявания, както и автоимунни процеси. Ето защо в клиничната практика диагнозата сифилис задължително се потвърждава с помощта на два допълнителни метода. Това може да бъде имунофлуоресцентна реакция или обездвижване на патогени на сифилис (RIBT). Но тези изследвания са скъпи и рядко се използват.

Възможно е да се използва реакция на фиксиране на комплемента (CSC), която използва специфичен трепонемален антиген. Показано е имунно петно, което помага при съмнителни случаи с неясна клинична картина. И накрая, на помощ идва полимеразната верижна реакция, с помощта на която е възможно да се определи наличието на ДНК на бледата спирохета в тялото на пациента.

Ако се подозира сифилис, лекарите предписват кръвен тест за антитела към кардиолипиновия антиген. Този анализ е подобрена версия на реакцията на Васерман (RW). В класическата си форма RW тестът не се използва от около 30 години. В днешно време това изследване се провежда изключително чрез имунологични методи. Какви са нормалните стойности за тази проба? И как правилно да дешифрираме резултатите му? Ще разгледаме тези въпроси в статията.

Какво е?

Кардиолипиновият антиген е подобно на липиди вещество. В състава си той е подобен на протеините на причинителя на сифилис - трепонема бледа. Такова лекарство се използва за ранна диагностика на това опасно полово предавано заболяване. Тя ви позволява да идентифицирате патологията в ранните етапи.

За изследване се взема венозна кръв и се смесва с кардиолипинов антиген. Реакцията на взаимодействие между биоматериала и лекарството се нарича Ако човек е здрав, тогава кръвта му не произвежда антитела към антигена. Ако пациентът страда от сифилис, тогава в тялото му активно се образуват имуноглобулини от клас М и G. В този случай в сместа от кръв и лекарството се появяват люспи. Тази утайка е натрупване на комплекси антиген-антитяло (утайка).

Образуването на имуноглобулини при заразен човек започва 7-10 дни след появата на шанкър (безболезнена язва) върху кожата или лигавицата. Това е ранен симптом на сифилис. Производството на антитела обикновено се случва 2-3 седмици след заразяването.

За теста се използва набор "Кардиолипинов антиген". Получава се от бичи сърце. Екстрактът от органи се смесва с холестерол и лецитин. Полученото вещество има сходни свойства с протеините на трепонема бледо. Той е способен да предизвика образуването на имуноглобулини, когато реагира с кръвта на пациент със сифилис.

Показания

Анализът с кардиолипинов антиген се предписва в следните случаи:

  • при наличие на незащитен полов акт на пациента с случайни партньори;
  • по време на домакински контакти с пациенти със сифилис;
  • със симптоми на първичен и вторичен стадий на сифилис (шанкър, обриви по тялото);
  • със съмнение за невросифилис (психични и неврологични разстройства);
  • деца, родени от заразени жени;
  • за проследяване на ефективността на антисифилитичната терапия.

Този тест не винаги е информативен за напреднали (третични) форми на патология. В по -късните стадии на сифилис производството на антитела е значително намалено.

По време на бременност трябва да се направи тест с кардиолипинов антиген. В допълнение, такова проучване е необходимо, за да премине през донори и хора, които съставят медицинска книжка.

Как се прави изследването?

Много е важно да се подготвите старателно за анализа. Този тест дава фалшиво положителни резултати доста често. Два дни преди даряването на кръв трябва напълно да изключите:

  • употребата на алкохолни напитки (дори слабоалкохолни);
  • приемане на лекарства с дигиталис;
  • Вредни храни.

Анализът трябва да се прави сутрин на празен стомах. Изследването взема 8-10 ml венозна кръв. Резултатите от тестовете обикновено са налични след 1-2 дни.

Норма

Ако пациентът не страда от сифилис, кръвта му не реагира с кардиолипиновия антиген. Отрицателният резултат от теста в повечето случаи означава, че човекът е здрав. При декодирането на теста това се обозначава със знака "-" или "RW-". Това се счита за норма.

Въпреки това, дори при отрицателни резултати от теста, не може да се изключи напълно, че човек е заразен с бледна трепонема. В края на краищата, антителата не се произвеждат по време на инкубационния период на патологията. Много слабо производство на имуноглобулини се отбелязва и при третичната форма на сифилис. Следователно, ако човек с отрицателна реакция на Васерман има признаци на патология, тогава анализът се предписва отново.

Възможни отклонения

Нека разгледаме декодирането на анализа. Тежестта на положителната реакция е посочена във формуляра за резултатите от теста със знаци "+". Следните тестови данни се считат за аномалии:

  • "+" - съмнителен резултат (препоръчва се анализът да се повтори).
  • "++" е слабо положителна реакция.
  • „+++“ е положителен резултат.
  • „++++“ е силно положителен тест.

Ами ако кардиолипиновият тест е положителен? Сифилисът обикновено не се диагностицира само от Васерман. В този случай лекарите винаги предписват допълнителни изследвания.

Този тест в 70% от случаите разкрива първичния стадий на сифилис, а в 100% от случаите показва вторичната форма на заболяването. Положителните резултати от изследването обаче не винаги показват инфекция с бледа трепонема. Много фактори могат да повлияят на данните в този анализ. Те ще бъдат обсъдени допълнително.

Фалшиви резултати

Често има случаи, когато тестът на Вассерман показва образуването на антитела, но човекът не страда от сифилис. Фалшиво положителна реакция се наблюдава при следните заболявания и състояния:

  • бременност;
  • инфекциозна мононуклеоза;
  • подагра;
  • захарен диабет;
  • малария;
  • дребна шарка;
  • скарлатина;
  • бруцелоза;
  • пневмония;
  • хламидия;
  • микоплазмена инфекция;
  • вирусен хепатит;
  • туберкулоза;
  • злокачествени тумори;
  • тиреоидит;
  • автоимунни заболявания (системен лупус еритематозус, склеродермия, ревматоиден артрит);
  • инфекция с ентеровируси;
  • скорошни ваксинации;
  • при пациенти в напреднала възраст (в 10% от случаите);
  • пиене на алкохол в навечерието на изследването;
  • наркомания.

Може да се заключи, че списъкът с болести и състояния, при които се отбелязват фалшиви резултати от тестове, е доста обширен. Следователно, за точна диагноза се предписва имунофлуоресцентен кръвен тест. Тя ви позволява по -надеждно да идентифицирате наличието на имуноглобулини G към трепонема палидум. Провежда се и кръвен тест с помощта на PCR диагностичния метод. Той показва наличието на фрагменти от ДНК на трепонема палидум при пациента. Лекарят поставя окончателната диагноза само въз основа на цялостно проучване.

Последно актуализирано описание от производителя 31.07.1996

Списък, който може да се филтрира

Състав и форма на освобождаване

Комплект от 5 ампули кардиолипинов антиген, съдържащ 2 ml от лекарството, и една бутилка разтвор на холин хлорид, съдържащ 5 ml от лекарството; в опаковката 2 комплекта. 1 комплект е предназначен за 200-240 определяния.

Характеристика

Разтвор на три високо пречистени липида: кардиолипин, лецитин, холестерол в абсолютен етилов алкохол. Прозрачен безцветен разтвор със специфична миризма на алкохол.

фармакологичен ефект

фармакологичен ефект- диагностични.

Откриване на антитела към причинителя на сифилис.

Показания за лекарството Кардиолипинов антиген за реакция на микропреципитация (RMP)

Диагностика на сифилис (изследване на активна плазма или инактивиран серум в реакция на микропреципитация).

Условия за съхранение Кардиолипинов антиген за реакция на микропреципитация (RMP)

На тъмно място при температура 6-22 ° C.

Да се ​​пази извън обсега на деца.

Срок на годност Кардиолипинов антиген за реакция на микропреципитация (RMP)

Една година.

Не използвайте след срока на годност, отпечатан върху опаковката.

Това е скринингов тест за масов скрининг на населението за сифилис.

Постановка:плазма или инактивиран кръвен серум + специален кардиолипинов антиген (екстракт от говеждо сърце, обогатен с холестерол и лецитин). Образува се утайка (комплекс антиген-антитяло), която се утаява под формата на бели люспи.

Ракът на пикочния мехур може да се извърши и по количествен метод с разреждане на кръвен серум.

Предимствата на експресния метод:

    бърза реакция (30-40 минути),

    малко количество кръв, необходимо за анализ (2-3 капки плазма или серум).

Източници на грешки при настройката на RMP:

    неправилно събиране на кръв от пръст (наличие на въздушни мехурчета в капиляра на пипетата);

    неравномерна концентрация на антиген в емулсията поради недостатъчно смесване преди употреба;

    бактериално замърсяване на емулсията;

    нарушение на сроковете и условията за съхранение на плазма и кръвен серум, антиген и неговата емулсия, разтвори;

    използване на замърсени епруветки, пипети, чинии, разтвори при настройване на реакции.

Горните грешки могат да доведат както до фалшиво отрицателни, така и до фалшиво положителни резултати от реакцията.

След края на терапията се поставя рак на пикочния мехур и динамиката на инфекциозния процес и ефективността на терапията се оценяват по намаляването на титъра.

Потвърждение за ефективността на терапията се счита за намаляване на титъра с 4 или повече пъти в рамките на 1 година; в края на този период се извършва настройката на същата специфична реакция, както при първоначалния преглед.

Диагностични потвърждаващи серологични тестове

ELISA, RIF и RPGA са силно чувствителни и силно специфични реакции към сифилис.

Поради различната чувствителност при различните форми на сифилис, специфичността и сложността на обстановката, всяка от тези реакции има своя собствена цел.

Превантивният скрининг на популацията за сифилис може да се извърши с помощта на RMP, ELISA и RPGA.

Ако се получи положителен резултат от рак на пикочния мехур, пациентът трябва да бъде прегледан от дерматовенеролог с повторен кръвен тест във всеки диагностичен тест за сифилис.

При профилактичен преглед за сифилис на пациенти с очни, невропсихиатрични, кардиологични болници, бременни жени трябва да се използват ELISA или RPGA.

При изследване на донори е необходимо да се използва ELISA или RPHA, но винаги в комбинация с рак на пикочния мехур. Твърдението за две реакции едновременно се дължи на високата отговорност на това изследване.

Горните специфични тестове се използват за диагностициране на всички форми на сифилис, по -специално латентни, както и за разпознаване на фалшиво положителни резултати, получени при рак на пикочния мехур.

Трябва да се има предвид, че специфичните трепонемални тестове могат да останат положителни (не отрицателни) в продължение на няколко години, а в някои случаи да останат положителни за цял живот.

Имунологичен анализ за серумна и алкохолна диагностика на сифилис

"■); // U! £ // -

Принцип: - шшша T. pallidum са сенсибилизирани към повърхността на твърдофазния носител (панелни ямки). Добавя се тестовият серум. В присъствието на антитела срещу T. pallidum се образува комплекс антиген-антитяло, който е свързан с повърхността на носителя. На следващия етап в ямките се излива антивидов серум (срещу човешки имуноглобулини), белязан с ензим (пероксидаза или алкална фосфатаза). Белязаните антитела взаимодействат с комплекса антиген-антитяло, за да образуват нов комплекс. За да го открие, в ямките се излива субстратен разтвор (5-аминосалицилова киселина). Под действието на ензима субстратът променя цвета си, което показва положителен резултат.

Оптимално в случай на използване на ELISA е едновременното използване на три от неговите опции:

    откриване на общ AT (CAT)

    последващо диференцирано определяне на трепонема-специфични IgM и IgG.

Появата на антисифилитични антитела се случва в съответствие с общите модели на имунния отговор. IgM се появява за първи път 2-4 седмици след инфекцията и изчезва при нелекувани пациенти след около 18 месеца; при лечение на ранен сифилис след 3-6 месеца; късно - година по -късно. С напредването на болестта започва да преобладава синтеза на IgG, който се появява 4 седмици след заразяването, достига по -високи титри и продължава дълго време дори след клинично излекуване.

Източници на грешки при използване на тестови системи ELISA:

    нарушения на техниките за вземане на кръв, условията за транспортиране и съхранение на тестови системи и проби.

    некачествена работа на лаборанти,

    всички отклонения от инструкциите за използване на тестовата система,

    неизправност на инструменти и устройства,

Зареждане ...Зареждане ...