Antigène cardiolipine pour la réaction de microprécipitation. Diagnostic sérologique non spécifique de la syphilis Microréaction de précipitation avec l'antigène cardiolipine (rmp). Tests sérologiques de confirmation diagnostique

Test sanguin pour le cancer de la vessie - qu'est-ce que c'est? Que signifie cet acronyme ? Dans quelle mesure cette analyse est-elle complète pour le diagnostic de la syphilis ?

Comment diagnostique-t-on la syphilis ?

L'agent causal de la syphilis, ou tréponème pâle, produit plusieurs types de protéines étrangères agressives appelées antigènes. C'est un antigène protéique bien reconnu par le système immunitaire, un antigène polysaccharidique qui n'est pas utilisé en diagnostic et un antigène lipidique très important. C'est cette substance qui présente des similitudes importantes avec les phospholipides, qui font partie des membranes des cellules humaines.

Cet antigène représente environ 30% de la masse totale de l'agent causal de la syphilis, et c'est contre lui que sont produits des anticorps spéciaux au début du deuxième mois après l'infection, appelés réagines. Pour l'avenir, on peut dire que c'est cette similitude de l'antigène avec les phospholipides des membranes humaines qui provoque d'éventuelles réactions faussement positives, surtout si le patient a une pathologie auto-immune, le syndrome dit des antiphospholipides.

Le diagnostic de la syphilis repose sur deux grands groupes de méthodes. Dans le premier cas, ils recherchent directement l'agent pathogène au microscope, les objets d'étude sont divers écoulements - des ulcères, des érosions, du fond de la gencive, des éléments de l'éruption cutanée. Deuxièmement, il détecte les anticorps qui apparaissent dans le sérum ou le plasma du patient contre les antigènes susmentionnés.

Dans ce cas, les méthodes de diagnostic sérologique (du latin sérum - sérum) sont divisées en deux groupes. Dans le premier d'entre eux, des antigènes tréponémiques spécifiques sont utilisés, qui sont obtenus à partir de cultures pures de micro-organismes syphilitiques. Et les réactions sérologiques non spécifiques utilisent des antigènes similaires, mais uniquement obtenus non à partir d'agents pathogènes et similaires à eux - le soi-disant antigène cardiolipine, qui est obtenu à partir de cœurs de bovins. Il est très similaire à l'antigène lipidique de l'agent causal de la syphilis et peut « provoquer » une réponse immunitaire en présence d'anticorps dans le sang du patient.

Ces tests non tréponémiques (dans lesquels les réactifs ne sont pas "réels") ne nécessitent pas d'antigènes spécifiques coûteux, ils sont donc bon marché, abordables et rapides. Leur but est le criblage, la recherche primaire ou le criblage de réactions. Ces tests non tréponémiques incluent la réaction de microprécipitation ou le cancer de la vessie.

Pour établir définitivement le diagnostic, les tests non tréponémiques seuls ne suffisent pas. Si le patient a une réponse positive, dans ce cas, tout l'arsenal d'études sur la syphilis est utilisé - à partir de et se terminant par des méthodes de recherche spéciales - il s'agit d'une réaction d'hémagglutination passive et de la méthode d'immunotransfert. Ceux-ci incluent également des méthodes d'immunofluorescence indirecte, ainsi que la réaction d'immobilisation du tréponème.

Les deux dernières méthodes sont utilisées par des spécialistes d'institutions spécialisées, car ce n'est pas une substance provenant d'un cœur de bovin qui est déjà utilisée comme antigène, mais des micro-organismes syphilitiques vivants spécialement cultivés chez le lapin à ces fins. Considérons plus en détail ce qu'est une microprécipitation ou microréaction.

Test sanguin de microréaction - qu'est-ce que c'est?

Il y a un grand nombre de demandes sur le Runet, dont la signification se résume à ce qui suit : prise de sang pour le cancer de la vessie - qu'est-ce que c'est ? Nous répondons à la question posée. La réaction de précipitation est définie non seulement pour l'étude de la syphilis, elle sert la microbiologie et l'immunologie depuis de nombreuses décennies. Traduit du latin, cela signifie - réaction de précipitation.

Au cours de l'étude, des antigènes sont mélangés, qui sont introduits à l'avance dans la solution. Dans ce cas, nous parlons de l'antigène cardiolipine. Ensuite, le sérum sanguin prélevé sur le patient est ajouté à cette solution. Et si ce sang contient des anticorps qui se sont développés contre un antigène similaire de l'agent causal de la syphilis, alors ils "comme la clé d'un verrou" s'approcheront des centres actifs des molécules d'antigène. En conséquence, de grandes structures interconnectées de complexes immuns apparaissent, appelées précipités. Ce sont des molécules d'antigène, "accrochées" d'anticorps. Ils sont plus gros et plus lourds et, par conséquent, il y aura soit une turbidité des solutions transparentes, soit leur précipitation.

Dans un cas particulier, lorsque la réaction de microprécipitation de la syphilis est réalisée, l'apparition de flocons blancs est perceptible. Il existe une grande variété de réactions de précipitation qui peuvent être effectuées non seulement dans un tube à essai, mais également dans un gel semi-liquide, dans divers milieux nutritifs et d'autres manières.

RPR - modification

Dans les laboratoires modernes, vous pouvez également rencontrer un autre nom similaire - le test RPR. Il s'agit déjà d'une modification moderne de la précipitation, dans laquelle se trouvent des réactifs plasmatiques rapides. Ces réactifs sont appelés anticorps appartenant aux classes d'immunoglobulines G et M.

C'est le test RPR (son deuxième nom est un test d'antiphospholipide ou de réagine non spécifique) qui est recommandé par arrêté du ministère de la Santé de la Fédération de Russie pour le dépistage ou le test primaire de la syphilis. Par conséquent, si vous avez le choix : faire un RMP ou effectuer un RPR, alors il vaut mieux opter pour la seconde méthode.

RPR - la méthode de recherche permet d'identifier près de 80% des personnes en cours d'infection primaire et près de 100% des personnes souffrant de syphilis secondaire ou de formes latentes (latentes). RPR - la réaction peut détecter la syphilis dès 7 jours après le début du syphilome primaire, par exemple un chancre dur. Cela peut généralement être fait un mois après l'infection.

Indications pour la recherche et règles de prélèvement sanguin

Comment donner du sang pour le cancer de la vessie - un test pour la syphilis ? Comment se préparer à l'étude ? Comme dans la plupart des cas de don de sang, aucune mesure préparatoire particulière n'est requise pour le patient. Le plus important est que le sang soit prélevé à jeun, ce qui se fait généralement tôt le matin. Dans le cas où cette règle ne peut pas être respectée, le sang peut être donné 4 heures après un repas léger. Il est permis de boire le liquide s'il s'agit d'eau propre, non gazeuse et non minérale. Tous les autres types de liquides tels que les jus, le café et le thé sont indésirables afin d'éviter les fausses réactions.

La réaction de microprécipitation est montrée, et son analogue RPR plus parfait, avec la suspicion primaire de syphilis. En outre, ces réactions sont nécessaires pour effectuer, tout d'abord, le diagnostic de la syphilis latente. En tant que méthode de dépistage, ces tests sont utilisés pour dépister les donneurs et simplement lors de la visite initiale. Il faut souligner que la valeur positive de ces tests n'est en aucun cas équivalente au diagnostic de syphilis, car l'antigène n'était pas syphilitique, mais simplement « similaire ». Ces résultats doivent être confirmés par des tests tréponémiques ou d'autres méthodes de diagnostic modernes, par exemple.

Interprétation et interprétation des résultats

Le décodage d'un test sanguin pour le cancer de la vessie implique la délivrance d'un résultat non pas quantitatif, mais qualitatif : « positif » ou « négatif » - des anticorps ont été détectés ou non.

Dans le cas de la syphilis primaire, cette réaction peut déjà être positive dans 60% des cas et plus. Dans le cas de la syphilis secondaire, lorsqu'il y a beaucoup d'anticorps dans le corps, la réaction devient fiable à cent pour cent. Si la syphilis évolue de manière latente ou latente, mais assez longtemps, la réaction de microprécipitation sera fiable dans 80% des cas.

Avec la syphilis tertiaire, la plage de valeurs peut aller de 37% à 94%. Après tout, si la syphilis dure très longtemps, littéralement des années, les anticorps pour diverses raisons peuvent disparaître du sang ou cesser de s'accumuler.

La réaction de microprécipitation étant une méthode de criblage, la circonstance très importante suivante doit être prise en compte. Cette réaction se manifeste par la formation de complexes immuns-précipités uniquement si les anticorps et l'antigène sont dans le sang dans des proportions strictes, il doit y en avoir juste assez pour que les anticorps se lient complètement à toute la quantité d'antigène et qu'il n'y ait pas d'excès dans le solution de l'un des réactifs.

S'il y a beaucoup plus d'anticorps, la réaction peut ne pas se produire du tout. Ce phénomène est devenu connu dans l'étude de la syphilis congénitale. Les bébés atteints d'une infection congénitale ont tellement d'anticorps dans leur sang que la réaction ne se produit tout simplement pas.

C'est pourquoi l'interprétation des résultats du cancer de la vessie chez les nourrissons doit être abordée avec beaucoup de prudence.

Quelles maladies peuvent provoquer des résultats faussement positifs ? Leur liste est assez longue :

  • maladies systémiques du tissu conjonctif et lésions rhumatismales ;
  • grossesse (rarement);
  • goutte et hyperuricémie;
  • alcoolisme chronique;
  • Diabète;
  • puisque les mycobactéries et Treponema pallidus ont des antigènes similaires ;
  • toxicomanie intraveineuse;
  • amygdalite lymphocytaire ou;
  • autres infections virales et bactériennes (hépatite virale ou diarrhée entérovirale, scarlatine, rougeole);
  • pneumonie virale ou bactérienne;
  • thyroïdite auto-immune;
  • âge âgé et sénile.

De plus, cette réaction peut être faussement positive après diverses vaccinations et vaccinations.

Cependant, dans le cas où la réaction de microprécipitation ou son analogue plus parfait - RPR - est négative, cela ne peut pas indiquer sans équivoque l'absence d'infection syphilitique. Un patient peut être infecté par la syphilis littéralement deux à trois jours, une semaine ou deux avant l'examen, et alors les anticorps dans le sang n'ont tout simplement pas le temps d'apparaître. Cette condition est appelée syphilis précoce séronégative. Une situation complètement opposée est également possible, lorsque le patient est malade depuis 10 ou 20 ans et a une syphilis tertiaire tardive avec absence d'anticorps dans le plasma sanguin.

Si RMP ou RPR est positif

Bien sûr, ce qui inquiète le plus les gens, c'est si le cancer de la vessie est positif.

Dans ce cas, il est nécessaire d'effectuer des tests de confirmation supplémentaires, qui ont été mentionnés ci-dessus. Si le sujet de choix est and, alors leur spécificité est beaucoup plus élevée et est de 100 % avec une sensibilité de 95 %. Mais même ces méthodes supplémentaires peuvent également donner un résultat faussement positif, en particulier dans le cas de maladies inflammatoires concomitantes, ainsi que de processus auto-immuns. C'est pourquoi, en pratique clinique, le diagnostic de syphilis est nécessairement confirmé par deux méthodes supplémentaires. Il peut s'agir d'une réaction d'immunofluorescence ou d'une immobilisation d'agents pathogènes de la syphilis (RIBT). Mais ces études sont coûteuses et rarement utilisées.

Il est possible d'utiliser la réaction de fixation du complément (CSC), qui utilise un antigène tréponémique spécifique. Un immunoblot est montré, ce qui aide dans les cas douteux avec un tableau clinique peu clair. Enfin, la réaction en chaîne par polymérase vient à la rescousse, à l'aide de laquelle il est possible de déterminer la présence de l'ADN du spirochète pallidum dans le corps du patient.

En cas de suspicion de syphilis, les médecins prescrivent un test sanguin pour les anticorps dirigés contre l'antigène cardiolipine. Cette analyse est une version améliorée de la réaction de Wasserman (RW). Dans sa forme classique, le test RW n'a pas été utilisé depuis environ 30 ans. De nos jours, cette étude est réalisée exclusivement par des méthodes immunologiques. Quelles sont les valeurs normales pour cet échantillon ? Et comment décrypter correctement ses résultats ? Nous examinerons ces questions dans l'article.

Ce que c'est?

L'antigène cardiolipine est une substance lipidique. Dans sa composition, il est similaire aux protéines de l'agent causal de la syphilis - le tréponème pâle. Un tel médicament est utilisé pour le diagnostic précoce de cette dangereuse maladie sexuellement transmissible. Il vous permet d'identifier la pathologie à un stade précoce.

Pour la recherche, du sang veineux est prélevé et mélangé à l'antigène cardiolipine. La réaction d'interaction entre le biomatériau et le médicament s'appelle Si une personne est en bonne santé, son sang ne produit pas d'anticorps contre l'antigène. Si le patient souffre de syphilis, il se forme activement dans son corps des immunoglobulines des classes M et G. Dans ce cas, des flocons apparaissent dans le mélange de sang et de médicament. Ce précipité est une accumulation de complexes antigène-anticorps (précipité).

La formation d'immunoglobulines chez une personne infectée commence 7 à 10 jours après l'apparition d'un chancre (ulcère indolore) sur la peau ou les muqueuses. C'est un symptôme précoce de la syphilis. La production d'anticorps se produit généralement 2 à 3 semaines après l'infection.

Pour effectuer le test, un ensemble "Antigène Cardiolipine" est utilisé. Il est obtenu à partir d'un cœur de taureau. L'extrait d'organe est mélangé avec du cholestérol et de la lécithine. La substance résultante a des propriétés similaires aux protéines du tréponème pâle. Il est capable de provoquer la formation d'immunoglobulines lorsqu'il réagit avec le sang d'un patient atteint de syphilis.

Les indications

L'analyse avec l'antigène cardiolipine est prescrite dans les cas suivants:

  • en présence de rapports sexuels non protégés du patient avec des partenaires occasionnels;
  • lors de contacts familiaux avec des patients atteints de syphilis;
  • avec des symptômes des stades primaire et secondaire de la syphilis (chancre, éruptions cutanées sur le corps);
  • avec suspicion de neurosyphilis (troubles mentaux et neurologiques);
  • les enfants nés de femmes infectées ;
  • contrôler l'efficacité du traitement antisyphilitique.

Ce test n'est pas toujours informatif pour les formes avancées (tertiaires) de pathologie. Dans les derniers stades de la syphilis, la production d'anticorps est considérablement réduite.

Un test avec un antigène cardiolipine doit être effectué pendant la grossesse. De plus, une telle étude doit passer par les donneurs et les personnes qui rédigent un livre médical.

Comment se déroule la recherche ?

Il est très important de bien préparer l'analyse. Ce test donne assez souvent des faux positifs. Deux jours avant le don de sang, vous devez exclure complètement :

  • la consommation de boissons alcoolisées (même à faible teneur en alcool) ;
  • prendre des médicaments avec de la digitaline;
  • les aliments gras.

L'analyse doit être effectuée le matin à jeun. L'étude prend 8-10 ml de sang veineux. Les résultats des tests sont généralement disponibles en 1 à 2 jours.

Norme

Si le patient ne souffre pas de syphilis, son sang ne réagit pas avec l'antigène cardiolipine. Un résultat de test négatif dans la plupart des cas signifie que la personne est en bonne santé. Dans le décryptage du test, cela est indiqué par le signe "-" ou "RW-". Ceci est considéré comme la norme.

Cependant, même avec des résultats de test négatifs, il ne peut pas être complètement exclu qu'une personne soit infectée par le tréponème pâle. Après tout, les anticorps ne sont pas produits pendant la période d'incubation de la pathologie. Une très faible production d'immunoglobulines est également notée dans la forme tertiaire de la syphilis. Par conséquent, si une personne présentant une réaction de Wasserman négative présente des signes de pathologie, l'analyse est à nouveau prescrite.

Déviations possibles

Considérez le décryptage d'analyse. La gravité d'une réaction positive est indiquée sur le formulaire de résultats du test par des signes "+". Les données de test suivantes sont considérées comme des anomalies :

  • "+" - résultat douteux (il est recommandé de reprendre l'analyse).
  • "++" est une réaction faiblement positive.
  • "+++" est un résultat positif.
  • "++++" est un test fortement positif.

Et si le test de cardiolipine est positif ? La syphilis n'est généralement pas diagnostiquée par Wasserman seul. Dans ce cas, les médecins prescrivent toujours des études supplémentaires.

Ce test révèle dans 70% des cas le stade primaire de la syphilis, et dans 100% des cas il montre la forme secondaire de la maladie. Cependant, les résultats positifs de l'étude n'indiquent pas toujours une infection par le tréponème pâle. De nombreux facteurs peuvent influencer les données de cette analyse. Ils seront discutés plus loin.

Faux résultats

Il y a souvent des cas où le test de Wasserman montre la formation d'anticorps, mais la personne ne souffre pas de syphilis. Une réaction faussement positive est observée dans les maladies et affections suivantes :

  • grossesse;
  • mononucléose infectieuse;
  • goutte;
  • diabète sucré;
  • paludisme;
  • rougeole;
  • scarlatine;
  • brucellose;
  • pneumonie;
  • chlamydia;
  • infection à mycoplasmes;
  • hépatite virale;
  • tuberculose;
  • tumeurs malignes;
  • thyroïdite;
  • maladies auto-immunes (lupus érythémateux disséminé, sclérodermie, polyarthrite rhumatoïde);
  • infection par des entérovirus;
  • vaccinations récentes;
  • chez les patients âgés (dans 10 % des cas) ;
  • boire de l'alcool la veille de l'étude;
  • la toxicomanie.

On peut en conclure que la liste des maladies et conditions dans lesquelles de faux résultats de test sont notés est assez longue. Par conséquent, pour un diagnostic précis, un test sanguin d'immunofluorescence est prescrit. Il vous permet d'identifier de manière plus fiable la présence d'immunoglobulines G contre le tréponème pallidum. Une prise de sang est également réalisée à l'aide de la méthode de diagnostic PCR. Il montre la présence de fragments d'ADN de tréponème pallidum chez le patient. Le médecin ne pose le diagnostic final que sur la base d'une étude approfondie.

La dernière description mise à jour par le fabricant 31.07.1996

Liste filtrée

Composition et forme de libération

Un ensemble de 5 ampoules d'antigène cardiolipine, contenant 2 ml de médicament, et une bouteille de solution de chlorure de choline contenant 5 ml de médicament ; dans le paquet 2 ensembles. 1 jeu est conçu pour 200-240 déterminations.

Caractéristique

Une solution de trois lipides hautement purifiés : cardiolipine, lécithine, cholestérol dans l'alcool éthylique absolu. Solution transparente incolore avec une odeur spécifique d'alcool.

effet pharmacologique

effet pharmacologique- diagnostiquer.

Détection d'anticorps dirigés contre l'agent causal de la syphilis.

Indications du médicament Antigène cardiolipine pour la réaction de microprécipitation (RMP)

Diagnostic de la syphilis (étude du plasma actif ou du sérum inactivé dans une réaction de microprécipitation).

Conditions de conservation Antigène cardiolipine pour la réaction de microprécipitation (RMP)

Dans un endroit sombre à une température de 6-22 ° C.

Garder hors de la portée des enfants.

Date de péremption Antigène cardiolipine pour la réaction de microprécipitation (RMP)

1 année.

Ne pas utiliser après la date de péremption imprimée sur l'emballage.

Il s'agit d'un test de dépistage pour le dépistage de masse de la syphilis dans la population.

Mise en scène: plasma ou sérum sanguin inactivé + antigène spécial cardiolipine (extrait de cœur bovin, enrichi en cholestérol et lécithine). Il se forme un précipité (complexe antigène-anticorps) qui précipite sous forme de flocons blancs.

Le cancer de la vessie peut également être réalisé en utilisant une méthode quantitative avec dilution de sérum sanguin.

Les avantages de la méthode express :

    réponse rapide (30-40 minutes),

    une petite quantité de sang nécessaire pour l'analyse (2-3 gouttes de plasma ou de sérum).

Sources d'erreurs lors du paramétrage du RMP :

    mauvaise collecte de sang d'un doigt (présence de bulles d'air dans le capillaire de la pipette);

    concentration inégale d'antigène dans l'émulsion en raison d'un mélange insuffisant avant utilisation ;

    contamination bactérienne de l'émulsion ;

    violation des termes et conditions de stockage du plasma et du sérum sanguin, de l'antigène et de son émulsion, des solutions;

    utilisation de tubes à essai, pipettes, plaques, solutions contaminés lors de la mise en place des réactions.

Les erreurs ci-dessus peuvent conduire à des résultats de test à la fois faux négatifs et faux positifs.

Après la fin du traitement, le cancer de la vessie est placé et la dynamique du processus infectieux et l'efficacité du traitement sont jugées par la diminution du titre.

La confirmation de l'efficacité du traitement est considérée comme une diminution du titre de 4 fois ou plus en 1 an ; à l'issue de cette période, la mise en place de la même réaction spécifique est effectuée que lors de l'examen initial.

Tests sérologiques de confirmation diagnostique

ELISA, RIF et RPGA sont des réactions hautement sensibles et hautement spécifiques à la syphilis.

En raison de la sensibilité différente des différentes formes de syphilis, de la spécificité et de la complexité du cadre, chacune de ces réactions a son propre objectif.

Le dépistage préventif de la syphilis dans la population peut être réalisé par RMP, ELISA et RPGA.

Si un résultat positif pour le cancer de la vessie est obtenu, le patient doit être examiné par un dermatovénérologue avec un test sanguin répété dans tout test de diagnostic de la syphilis.

Lors de l'examen prophylactique de la syphilis chez les patients atteints d'un œil, les hôpitaux neuropsychiatriques, cardiologiques, les femmes enceintes, ELISA ou RPGA doivent être utilisés.

Lors de l'examen des donneurs, il est nécessaire d'utiliser ELISA ou RPHA, mais toujours en association avec un cancer de la vessie. L'énoncé de deux réactions à la fois est dû à la haute responsabilité de cette étude.

Les tests spécifiques ci-dessus sont utilisés pour diagnostiquer toutes les formes de syphilis, en particulier latente, ainsi que pour reconnaître les faux positifs obtenus dans le cancer de la vessie.

Il convient de garder à l'esprit que des tests tréponémiques spécifiques peuvent rester positifs (non négatifs) pendant plusieurs années et, dans certains cas, rester positifs à vie.

Dosage immunologique pour le diagnostic sérique et alcoolique de la syphilis

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Principe : - chut T. pallidum est sensibilisé à la surface du support en phase solide (puits du panneau). Le sérum à tester est ajouté. En présence d'anticorps contre T. pallidum, un complexe antigène-anticorps se forme, qui se lie à la surface du support. A l'étape suivante, un sérum anti-espèce (contre les immunoglobulines humaines) marqué par une enzyme (peroxydase ou phosphatase alcaline) est versé dans les puits. Les anticorps marqués interagissent avec le complexe antigène-anticorps pour former un nouveau complexe. Pour l'identifier, une solution de substrat (acide 5-aminosalicyique) est versée dans les puits. Sous l'action de l'enzyme, le substrat change de couleur, ce qui indique un résultat positif.

L'optimisation dans le cas de l'utilisation d'ELISA est l'utilisation simultanée de trois de ses options :

    détection de l'AT totale (CAT)

    détermination différenciée ultérieure des IgM et IgG spécifiques du tréponème.

L'apparition d'anticorps anti-syphilitiques se produit conformément aux schémas généraux de la réponse immunitaire. L'IgM apparaît pour la première fois 2 à 4 semaines après l'infection et disparaît chez les patients non traités après environ 18 mois ; dans le traitement de la syphilis précoce après 3-6 mois; tard - un an plus tard. Au fur et à mesure que la maladie progresse, la synthèse d'IgG commence à prédominer, qui apparaissent 4 semaines après l'infection, atteignent des titres plus élevés et persistent longtemps même après la guérison clinique.

Sources d'erreurs lors de l'utilisation des systèmes de test ELISA :

    violations des techniques de collecte de sang, des conditions de transport et de stockage des systèmes de test et des échantillons.

    travail de mauvaise qualité des techniciens de laboratoire,

    tout écart par rapport aux instructions d'utilisation du système de test,

    dysfonctionnement des outils et appareils,

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