Kardiolipin antigen za reakciju mikroprecipitacije. Nespecifična serološka dijagnoza sifilisa Mikroreakcija precipitacije sa kardiolipinskim antigenom (rmp). Dijagnostički potvrdni serološki testovi

Test krvi za rak mokraćne bešike - šta je to? Šta znači ovaj akronim? U kojoj mjeri je ova analiza potpuna za dijagnozu sifilisa?

Kako se dijagnosticira sifilis?

Uzročnik sifilisa ili blijede treponeme proizvodi nekoliko vrsta agresivnih stranih proteina, koji se nazivaju antigeni. Riječ je o proteinskom antigenu koji dobro prepoznaje imuni sistem, polisaharidnom antigenu koji se ne koristi u dijagnostici i vrlo važnom lipidnom antigenu. Upravo ova tvar ima značajnu sličnost s fosfolipidima, koji su dio membrana ljudskih stanica.

Ovaj antigen čini oko 30% ukupne mase uzročnika sifilisa, a na njega se već početkom drugog mjeseca nakon infekcije stvaraju posebna antitijela, koja se nazivaju reaginima. Gledajući unaprijed, možemo reći da upravo ta sličnost antigena s fosfolipidima ljudskih membrana uzrokuje moguće lažno pozitivne reakcije, posebno ako pacijent ima autoimunu patologiju, takozvani antifosfolipidni sindrom.

Dijagnoza sifilisa zasniva se na dvije velike grupe metoda. U prvom slučaju, direktno traže patogen pod mikroskopom, predmeti proučavanja su različiti iscjedak - iz čireva, erozija, sa dna desni, iz elemenata osipa. Drugo, otkriva antitijela koja se pojavljuju u serumu ili plazmi pacijenta na gore navedene antigene.

U ovom slučaju, metode serološke (od latinskog serum - serum) dijagnostike dijele se u dvije grupe. U prvom od njih koriste se specifični treponemski antigeni koji se dobivaju iz čistih kultura sifilitičkih mikroorganizama. I nespecifične serološke reakcije koriste slične antigene, ali samo dobivene ne od patogena i slične njima - takozvani kardiolipin antigen, koji se dobiva iz goveđeg srca. Vrlo je sličan lipidnom antigenu uzročnika sifilisa i može "isprovocirati" imunološki odgovor u prisustvu antitijela u krvi pacijenta.

Ovi ne-treponemski testovi (u kojima reagensi nisu "pravi") ne zahtijevaju skupe specifične antigene, tako da su jeftini, pristupačni i brzi. Njihova svrha je skrining, primarno istraživanje ili skrining reakcije. Ovi netreponemski testovi uključuju reakciju mikroprecipitacije ili rak mokraćne bešike.

Da bi se konačno postavila dijagnoza, samo netreponemski testovi nisu dovoljni. Ako pacijent ima pozitivan odgovor, u ovom slučaju se koristi cijeli arsenal studija za sifilis - od i završavajući posebnim metodama istraživanja - to je reakcija pasivne hemaglutinacije i imunoblot metoda. Tu spadaju i metode indirektne imunofluorescencije, kao i reakcija imobilizacije treponema.

Posljednje dvije metode koriste stručnjaci u specijaliziranim ustanovama, jer se kao antigen već ne koristi tvar iz goveđeg srca, već živi sifilički mikroorganizmi posebno uzgojeni kod zečeva za te svrhe. Razmotrimo detaljnije što je mikroprecipitacija ili mikroreakcija.

Mikroreakcioni test krvi - šta je to?

Na Runetu postoji veliki broj zahtjeva, čije se značenje svodi na sljedeće: test krvi za rak mokraćne bešike - šta je to? Odgovaramo na postavljeno pitanje. Reakcija precipitacije je postavljena ne samo za proučavanje sifilisa, već dugi niz decenija služi mikrobiologiji i imunologiji. U prijevodu s latinskog to znači - reakcija padavina.

Tokom studije, antigeni se miješaju, koji se unaprijed uvode u otopinu. U ovom slučaju govorimo o kardiolipinskom antigenu. Zatim se ovoj otopini dodaje krvni serum uzet od pacijenta. A ako ova krv sadrži antitijela koja su se razvila na sličan antigen uzročnika sifilisa, onda će se "kao ključ od brave" približiti aktivnim centrima molekula antigena. Kao rezultat, pojavljuju se velike, međusobno povezane strukture imunoloških kompleksa, koje se nazivaju precipitati. To su molekuli antigena, "ovješeni" antitelima. Oni su veći i teži pa će kao rezultat biti primjetno ili zamućenje prozirnih otopina, odnosno njihovo taloženje.

U specifičnom slučaju, prilikom provođenja reakcije mikroprecipitacije za sifilis, primjetna je pojava bijelih pahuljica. Postoji veliki broj reakcija taloženja koje se mogu izvesti ne samo u epruveti, već iu polutečnom gelu, u raznim hranljivim medijima i na druge načine.

RPR - modifikacija

Također u modernim laboratorijama možete naići na još jedno slično ime - RPR test. Ovo je već moderna modifikacija precipitacije, u kojoj se nalaze brzi reagini plazme. Ovi reagensi se nazivaju antitijela koja pripadaju klasama imunoglobulina G i M.

To je RPR test (njegovo drugo ime je nespecifični antifosfolipidni ili reagin test) koji se preporučuje naredbom Ministarstva zdravlja Ruske Federacije za skrining ili primarno testiranje na sifilis. Stoga, ako imate izbor: napraviti RMP ili izvršiti RPR, onda je bolje odlučiti se u korist druge metode.

RPR - metoda istraživanja omogućava identifikaciju gotovo 80% osoba s tokom primarne infekcije i gotovo 100% osoba koje boluju od sekundarnog sifilisa ili latentnih (latentnih) oblika. RPR - reakcija može otkriti sifilis već 7 dana nakon pojave primarnog sifiloma, na primjer, tvrdi šankr. To se obično može uraditi mjesec dana nakon infekcije.

Indikacije za istraživanje i pravila za uzimanje uzoraka krvi

Kako donirati krv za rak mokraćne bešike - test na sifilis? Kako se pripremiti za studij? Kao iu većini slučajeva davanja krvi, za pacijenta nisu potrebne posebne pripremne mjere. Najvažnije je da se krv uzima na prazan želudac, što se obično radi rano ujutru. U slučaju da se ovo pravilo ne može poštovati, krv se može dati 4 sata nakon laganog obroka. Pijenje tečnosti je dozvoljeno ako je čista, negazirana i nije mineralna voda. Sve druge vrste tečnosti kao što su sokovi, kafa i čaj su nepoželjne kako bi se izbegle lažne reakcije.

Prikazana je reakcija mikroprecipitacije, te njen savršeniji analog RPR, uz primarnu sumnju na sifilis. Također, ove reakcije su potrebne za provođenje, prije svega, za dijagnozu latentnog sifilisa. Kao metoda skrininga, ovi testovi se koriste za skrining donatora i to jednostavno prilikom prve posjete. Treba naglasiti da pozitivna vrijednost ovih testova ni na koji način nije ekvivalentna dijagnozi sifilisa, jer antigen nije bio sifilitičan, već jednostavno „sličan“. Ovi rezultati moraju biti potvrđeni treponemskim testovima ili drugim modernim dijagnostičkim metodama, na primjer.

Interpretacija i interpretacija rezultata

Dešifriranje krvnog testa za rak mokraćnog mjehura uključuje izdavanje ne kvantitativnog, već kvalitativnog rezultata: "pozitivno" ili "negativno" - antitijela su otkrivena ili nisu otkrivena.

U slučaju primarnog sifilisa ova reakcija može biti pozitivna već u 60% slučajeva i više. U slučaju sekundarnog sifilisa, kada u tijelu ima puno antitijela, reakcija postaje pouzdano stopostotna. Ako sifilis teče latentno ili latentno, ali prilično dugo, tada će reakcija mikroprecipitacije biti pouzdana u 80% slučajeva.

Kod tercijarnog sifilisa, raspon vrijednosti može se kretati od 37% do 94%. Uostalom, ako sifilis traje jako dugo, doslovno godinama, tada antitijela iz različitih razloga mogu nestati iz krvi ili prestati proizvoditi.

Budući da je reakcija mikroprecipitacije metoda skrininga, mora se uzeti u obzir sljedeća vrlo važna okolnost. Ova reakcija se manifestuje stvaranjem imunoloških kompleksa-precipitata samo ako su antitijela i antigen u krvi u strogom omjeru, treba ih biti tek toliko da se antitijela u potpunosti vežu za cjelokupnu količinu antigena i da nema viška u krvi. otopina bilo kojeg od reagensa.

Ako ima znatno više antitijela, reakcija se možda uopće neće dogoditi. Ovaj fenomen je postao poznat u proučavanju kongenitalnog sifilisa. Bebe s urođenom infekcijom imaju toliko antitijela u krvi da reakcija jednostavno ne dolazi.

Zbog toga tumačenju rezultata raka mokraćne bešike kod novorođenčadi treba pristupiti vrlo pažljivo.

Koje bolesti mogu uzrokovati lažno pozitivne rezultate? Njihova lista je prilično velika:

  • sistemske bolesti vezivnog tkiva i reumatske lezije;
  • trudnoća (rijetko);
  • giht i hiperurikemija;
  • hronični alkoholizam;
  • dijabetes;
  • budući da mikobakterije i treponema pallidus imaju slične antigene;
  • intravenska ovisnost o drogama;
  • limfocitni tonzilitis ili;
  • druge virusne i bakterijske infekcije (virusni hepatitis ili enterovirusna dijareja, šarlah, boginje);
  • virusna ili bakterijska pneumonija;
  • autoimuni tiroiditis;
  • starije i senilne dobi.

Također, ova reakcija može biti lažno pozitivna nakon raznih vakcinacija i vakcinacija.

Međutim, u slučaju da je reakcija mikroprecipitacije ili njen savršeniji analog - RPR - negativna, onda to ne može nedvosmisleno ukazivati ​​na odsutnost sifilitičke infekcije. Pacijent može da se zarazi sifilisom bukvalno dva do tri dana, nedelju ili dve pre pregleda, a tada se antitela u krvi jednostavno ne pojave. Ovo stanje se naziva seronegativni rani sifilis. Moguća je i potpuno suprotna situacija, kada je pacijent bolestan 10 ili 20 godina i ima kasni tercijarni sifilis sa odsustvom antitijela u krvnoj plazmi.

Ako je RMP ili RPR pozitivan

Naravno, ono što najviše brine ljude je ako je rak mokraćne bešike pozitivan.

U tom slučaju potrebno je provesti dodatne potvrdne testove, koji su gore navedeni. Ako je predmet izbora i, onda je njihova specifičnost mnogo veća i iznosi 100% uz osjetljivost od 95%. Ali i ove dodatne metode mogu dati i lažno pozitivan rezultat, posebno u slučaju popratnih upalnih bolesti, kao i autoimunih procesa. Zato se u kliničkoj praksi dijagnoza sifilisa nužno potvrđuje korištenjem dvije dodatne metode. To može biti reakcija imunofluorescencije ili imobilizacija patogena sifilisa (RIBT). Ali ove studije su skupe i rijetko se koriste.

Moguće je koristiti reakciju fiksacije komplementa (CSC) koja koristi specifični antigen treponeme. Prikazan je imunološki blot koji pomaže u sumnjivim slučajevima s nejasnom kliničkom slikom. Konačno, u pomoć dolazi lančana reakcija polimeraze, uz pomoć koje je moguće utvrditi prisustvo DNK blijede spirohete u tijelu pacijenta.

Ako se sumnja na sifilis, liječnici propisuju analizu krvi na antitijela na kardiolipin antigen. Ova analiza je poboljšana verzija Wassermanove reakcije (RW). U svom klasičnom obliku, RW test nije korišten oko 30 godina. Danas se ovo istraživanje provodi isključivo imunološkim metodama. Koje su normalne vrijednosti za ovaj uzorak? I kako ispravno dešifrirati njegove rezultate? Ova pitanja ćemo razmotriti u članku.

Šta je to?

Kardiolipin antigen je supstanca slična lipidima. Po svom sastavu sličan je proteinima uzročnika sifilisa - treponema blijeda. Takav lijek se koristi za ranu dijagnozu ove opasne polno prenosive bolesti. Omogućava vam da identifikujete patologiju u ranim fazama.

Za istraživanje se uzima venska krv i miješa s kardiolipinskim antigenom. Reakcija interakcije između biomaterijala i lijeka naziva se Ako je osoba zdrava, tada njegova krv ne proizvodi antitijela na antigen. Ako pacijent boluje od sifilisa, tada se u njegovom tijelu aktivno formiraju imunoglobulini klase M i G. U tom slučaju se pojavljuju ljuspice u mješavini krvi i lijeka. Ovaj precipitat je akumulacija kompleksa antigen-antitijelo (precipitat).

Stvaranje imunoglobulina kod zaražene osobe počinje 7-10 dana nakon pojave šankra (bezbolnog čira) na koži ili sluzokoži. Ovo je rani simptom sifilisa. Proizvodnja antitijela se obično javlja 2-3 sedmice nakon infekcije.

Za test se koristi set "Cardiolipin antigen". Dobija se iz bikovog srca. Ekstrakt organa je pomešan sa holesterolom i lecitinom. Dobivena tvar ima slična svojstva kao i proteini treponema blijede. Sposoban je izazvati stvaranje imunoglobulina kada reagira s krvlju bolesnika sa sifilisom.

Indikacije

Analiza kardiolipinskim antigenom propisuje se u sljedećim slučajevima:

  • u prisustvu nezaštićenog seksualnog odnosa pacijenta sa povremenim partnerima;
  • tokom kućnih kontakata sa pacijentima sa sifilisom;
  • sa simptomima primarne i sekundarne faze sifilisa (šankr, osip na tijelu);
  • sa sumnjom na neurosifilis (mentalni i neurološki poremećaji);
  • djeca rođena od zaraženih žena;
  • za praćenje efikasnosti antisifilitičke terapije.

Ovaj test nije uvijek informativan za uznapredovale (tercijarne) oblike patologije. U kasnijim fazama sifilisa, proizvodnja antitijela je značajno smanjena.

Test na kardiolipin antigen se mora uraditi tokom trudnoće. Osim toga, takva studija je potrebna za donatore i ljude koji sastavljaju medicinsku knjigu.

Kako se radi istraživanje?

Veoma je važno pažljivo se pripremiti za analizu. Ovaj test prilično često daje lažno pozitivne rezultate. Dva dana prije davanja krvi morate potpuno isključiti:

  • upotreba alkoholnih pića (čak i slabog alkohola);
  • uzimanje lijekova s ​​digitalisom;
  • masnu hranu.

Analiza se mora uzeti ujutro na prazan želudac. Studija uzima 8-10 ml venske krvi. Rezultati testa su obično dostupni za 1-2 dana.

Norm

Ako pacijent ne boluje od sifilisa, tada njegova krv ne reagira s kardiolipinskim antigenom. Negativan rezultat testa u većini slučajeva znači da je osoba zdrava. U dešifriranju testa, to je označeno znakom "-" ili "RW-". Ovo se smatra normom.

Međutim, čak i uz negativne rezultate testa, ne može se potpuno isključiti da je osoba zaražena treponemom blijedom. Uostalom, antitijela se ne proizvode tokom perioda inkubacije patologije. Vrlo slaba proizvodnja imunoglobulina je također zabilježena u tercijarnom obliku sifilisa. Stoga, ako osoba s negativnom Wassermanovom reakcijom ima znakove patologije, onda se analiza ponovno propisuje.

Moguća odstupanja

Pogledajmo dekodiranje analize. Ozbiljnost pozitivne reakcije je naznačena u obrascu rezultata testa sa znakovima "+". Sljedeći podaci testa smatraju se abnormalnostima:

  • "+" - sumnjiv rezultat (preporučuje se ponovno polaganje analize).
  • "++" je slabo pozitivna reakcija.
  • "+++" je pozitivan rezultat.
  • "++++" je jako pozitivan test.

Šta ako je kardiolipin test pozitivan? Sifilis obično ne dijagnosticira samo Wasserman. U ovom slučaju, liječnici uvijek propisuju dodatne studije.

Ovaj test u 70% slučajeva otkriva primarni stadijum sifilisa, au 100% slučajeva pokazuje sekundarni oblik bolesti. Međutim, pozitivni rezultati studije ne ukazuju uvijek na infekciju treponemom blijedom. Mnogi faktori mogu uticati na podatke u ovoj analizi. O njima će se dalje raspravljati.

Lažni rezultati

Često postoje slučajevi kada Wassermanov test pokazuje stvaranje antitijela, ali osoba ne boluje od sifilisa. Lažno pozitivna reakcija se uočava kod sljedećih bolesti i stanja:

  • trudnoća;
  • infektivna mononukleoza;
  • giht;
  • dijabetes melitus;
  • malarija;
  • ospice;
  • šarlah;
  • bruceloza;
  • upala pluća;
  • klamidija;
  • infekcija mikoplazmama;
  • virusni hepatitis;
  • tuberkuloza;
  • maligni tumori;
  • tiroiditis;
  • autoimune bolesti (sistemski eritematozni lupus, skleroderma, reumatoidni artritis);
  • infekcija enterovirusima;
  • nedavne vakcinacije;
  • kod starijih pacijenata (u 10% slučajeva);
  • pijenje alkohola uoči studije;
  • ovisnost o drogi.

Može se zaključiti da je lista bolesti i stanja kod kojih se bilježe lažni rezultati testova prilično opsežna. Stoga se za tačnu dijagnozu propisuje imunofluorescentni test krvi. Omogućava vam da pouzdanije identificirate prisustvo imunoglobulina G u treponema pallidum. Test krvi se također provodi PCR dijagnostičkom metodom. Pokazuje prisustvo fragmenata DNK treponema pallidum kod pacijenta. Doktor postavlja konačnu dijagnozu samo na osnovu sveobuhvatne studije.

Posljednji ažurirani opis od strane proizvođača 31.07.1996

Lista koja se može filtrirati

Sastav i oblik oslobađanja

Set od 5 ampula kardiolipin antigena, koji sadrži 2 ml lijeka, i jednu bocu otopine kolin hlorida koja sadrži 5 ml lijeka; u pakovanju 2 seta. 1 set je dizajniran za 200-240 određivanja.

Karakteristično

Rastvor tri visoko prečišćena lipida: kardiolipin, lecitin, holesterol u apsolutnom etil alkoholu. Prozirna bezbojna otopina sa specifičnim mirisom alkohola.

farmakološki efekat

farmakološki efekat- dijagnostički.

Detekcija antitijela na uzročnika sifilisa.

Indikacije za lijek Cardiolipin antigen za reakciju mikroprecipitacije (RMP)

Dijagnoza sifilisa (proučavanje aktivne plazme ili inaktiviranog seruma u reakciji mikroprecipitacije).

Uslovi skladištenja Kardiolipin antigen za reakciju mikroprecipitacije (RMP)

Na tamnom mestu na temperaturi od 6-22°C.

Čuvati van domašaja djece.

Datum isteka Kardiolipin antigen za reakciju mikroprecipitacije (RMP)

1 godina.

Ne koristiti nakon isteka roka trajanja odštampanog na pakovanju.

To je skrining test za masovni skrining populacije na sifilis.

Inscenacija: plazma ili inaktivirani krvni serum + poseban kardiolipin antigen (ekstrakt goveđeg srca obogaćen holesterolom i lecitinom). Formira se precipitat (kompleks antigen-antitijelo) koji se taloži u obliku bijelih pahuljica.

Rak mokraćne bešike se takođe može izvesti kvantitativnom metodom sa razblaženjem krvnog seruma.

Prednosti ekspresne metode:

    brz odgovor (30-40 minuta),

    mala količina krvi potrebna za analizu (2-3 kapi plazme ili seruma).

Izvori grešaka pri postavljanju RMP-a:

    nepravilno prikupljanje krvi iz prsta (prisustvo mjehurića zraka u kapilari pipete);

    neujednačena koncentracija antigena u emulziji zbog nedovoljnog miješanja prije upotrebe;

    bakterijska kontaminacija emulzije;

    kršenje rokova i uslova skladištenja plazme i krvnog seruma, antigena i njegove emulzije, rastvora;

    upotreba kontaminiranih epruveta, pipeta, ploča, rastvora pri postavljanju reakcija.

Gore navedene greške mogu dovesti do lažno negativnih i lažno pozitivnih rezultata reakcije.

Po završetku terapije postavlja se karcinom mokraćne bešike, a dinamika infektivnog procesa i efikasnost terapije se sudi po smanjenju titra.

Potvrdom efikasnosti terapije smatra se smanjenje titra za 4 ili više puta u toku 1 godine; na kraju ovog perioda, vrši se postavljanje iste specifične reakcije kao kod inicijalnog pregleda.

Dijagnostički potvrdni serološki testovi

ELISA, RIF i RPGA su visoko osjetljive i visoko specifične reakcije na sifilis.

Zbog različite osjetljivosti kod različitih oblika sifilisa, specifičnosti i složenosti okruženja, svaka od ovih reakcija ima svoju svrhu.

Preventivni skrining populacije na sifilis može se provesti korištenjem RMP, ELISA i RPGA.

Ako se dobije pozitivan nalaz karcinoma mokraćne bešike, pacijenta treba pregledati dermatovenerolog uz ponovljeni test krvi u bilo kom dijagnostičkom testu na sifilis.

Prilikom profilaktičkog pregleda na sifilis pacijenata sa očnim, neuropsihijatrijskim, kardiološkim bolnicama, trudnica treba koristiti ELISA ili RPGA.

Prilikom pregleda donora potrebno je koristiti ELISA ili RPHA, ali uvijek u kombinaciji sa rakom mokraćne bešike. Konstatacija dvije reakcije u isto vrijeme je zbog velike odgovornosti ove studije.

Navedeni specifični testovi se koriste za dijagnosticiranje svih oblika sifilisa, posebno latentnog, kao i za prepoznavanje lažno pozitivnih rezultata dobijenih kod raka mokraćne bešike.

Treba imati na umu da specifični treponemski testovi mogu ostati pozitivni (ne negativni) niz godina, au nekim slučajevima i doživotno.

Imunološki test za dijagnostiku seruma i likvora sifilisa

"■); // U! £ // -

Princip: - shshsha T. pallidum su senzibilizirane na površinu čvrstog nosača (panel bunari). Doda se test serum. U prisustvu antitela protiv T. pallidum formira se kompleks antigen-antitelo, koji je vezan za površinu nosača. U sljedećoj fazi, serum protiv vrsta (protiv humanih imunoglobulina) obilježen enzimom (peroksidaza ili alkalna fosfataza) se sipa u jažice. Obilježena antitijela stupaju u interakciju sa kompleksom antigen-antitijelo kako bi formirali novi kompleks. Da bi se to otkrilo, u jažice se sipa rastvor supstrata (5-aminosalicilna kiselina). Pod djelovanjem enzima supstrat mijenja boju, što ukazuje na pozitivan rezultat.

Optimalno u slučaju korištenja ELISA-e je istovremena upotreba tri njegove opcije:

    detekcija ukupnog AT (CAT)

    naknadno diferencirano određivanje IgM i IgG specifičnih za treponemu.

Pojava antisifilitičkih antitijela javlja se u skladu s općim obrascima imunološkog odgovora. IgM se prvi put pojavljuje 2-4 sedmice nakon infekcije i nestaje kod neliječenih pacijenata nakon otprilike 18 mjeseci; u liječenju ranog sifilisa nakon 3-6 mjeseci; kasno - godinu dana kasnije. Kako bolest napreduje, počinje da prevladava sinteza IgG, koji se javlja 4 sedmice nakon infekcije, dostiže veće titre i perzistira dugo čak i nakon kliničkog izlječenja.

Izvori grešaka pri korištenju ELISA test sistema:

    kršenja tehnika uzimanja krvi, uslova transporta i skladištenja test sistema i uzoraka.

    nekvalitetan rad laboratorijskih tehničara,

    sva odstupanja od uputstava za upotrebu testnog sistema,

    kvar alata i uređaja,

Učitavanje ...Učitavanje ...