ETTEVALMISTUSED
UUE ELISA KATSESÜSTEEMI HINDAMINE
"Rotaviiruse antigeen-ELISA-PARIM"
12Zhirakovskaja E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.
1 FGUN SSC VB "Vektor" Rospotrebnadzorist, Koltsovo asula, Novosibirski piirkond;
2 Keemilise bioloogia ja põhimeditsiini instituut, Novosibirsk;
3 Riiklik meditsiiniliste bioloogiliste toodete standardimise ja kontrolli instituut L.A. Tarasevichag Moskva
Esitatakse CJSC "Vector-Best" (Novosibirsk) välja töötatud uue reaktiivikomplekti "Rotavirus-antigen-IFA-BEST" tundlikkuse, spetsiifilisuse ja reprodutseeritavuse testimise tulemused. Saadud andmed võimaldavad prognoosida tulemuste diagnostilist usaldusväärsust, kui seda katsesüsteemi kasutatakse A -rühma rotaviiruse antigeeni tuvastamiseks kliinilises materjalis.
Märksõnad: ELISA testisüsteem, efektiivsus, rotaviirus A
A -rühma rotaviirused (perekond Reoviridae, perekond Rotavirus) on väikelaste raske gastroenteriidi kõige levinum põhjus kogu maailmas. Nõrgenenud immuunsüsteemiga täiskasvanud haigestuvad sageli. Rotaviiruse infektsioon (RVI) on väga nakkav haigus, millel on mitu ülekandeteed. Nakkuse allikas on inimene, kellel on haiguse ilmne või asümptomaatiline vorm, samuti viiruse kandja. Laste ja täiskasvanute seas võib RVI avalduda juhuslike juhtumite, kohalike rühmahaiguste, puhangute kujul ja on laialt levinud. Selle nakkuse edasikandumise fekaalne-suuline mehhanism realiseerub toidu (piim ja piimatooted, imikutoit), vee ja leibkonna kaudu.
Rotaviiruse gastroenteriidi diagnoosimine kliinilise pildi järgi, eriti juhusliku haigestumuse korral, on mõnevõrra raskendatud, kuna sellele infektsioonile iseloomulikud sümptomid erinevad vähe erinevate etioloogiate teiste ägedate sooleinfektsioonide (AEI) sümptomitest. Rotaviiruse gastroenteriidiga patsientide diferentsiaaldiagnostika viiakse läbi nii toidutoksiliste infektsioonide kui ka teiste viiruslike AEI -de (noroviirused, astroviirused, adenoviirused, koronaviirused, Coxsackie enteroviirused ja ECHO) ja bakteriaalsete (salmonelloos, düsenteeria, koolera mikroorganismid) etioloogiaga. Kahjuks ei teosta kõik Vene Föderatsiooni spetsialiseeritud meditsiiniasutused rotaviiruse nakkuse diagnostikat.
RVI diagnostiliste meetodite eesmärk on avastada väljaheites terveid virioone, viiruse antigeeni või viirusspetsiifilist RNA-d. Paljutõotav lähenemisviis viiruste otseseks avastamiseks nii kliinilises materjalis kui ka keskkonnaobjektides on pöördtranskriptsiooni meetod - polümeraasi ahelreaktsioon (RT -PCR). Viimastel aastatel on loodud kaasaegsetele teaduslikele arengutele tuginevad katsesüsteemid koos erinevate meetoditega rotaviiruste avastamiseks: mitmekordne PCR koos amplifikatsioonisaaduste hübridisatsioon-fluorestsentsdetektoriga "lõpp-punktis"; lõpp-punktil põhinev immuno-PCR (IPCR) koos reaalajas tuvastamisega; kvantitatiivne RT-PCR reaalajas tuvastamisega. Uurimislaborid kasutavad rotaviiruste kiireks avastamiseks elektronmikroskoopiat. Kõik ülaltoodud meetodid on aga üsna töömahukad ning nõuavad kalleid instrumente ja kõrgelt kvalifitseeritud personali. Seetõttu eelistatakse haiglates ja ambulatoorselt laboratoorset diagnostikat tehes meetodeid, mis põhinevad viiruse antigeeni avastamisel väljaheites, kasutades ensüümiga seotud immunosorbentanalüüsi (ELISA) koos rotaviiruste mono- ja polükonaalsete antikehadega. See meetod on saadaval praktilistes laborites, seda on lihtne seadistada ja see võimaldab teil kiiresti tulemust saada.
Selle töö eesmärk on uurida uue reaktiivide komplekti "Rotavirus-antigen-IFA-BEST" diagnostilist tõhusust, mis on välja töötatud JSC "Vector-Best", Novosibirskis.
^ September-detsember
materjalid ja meetodid
Uuringu materjaliks olid AEI diagnoosiga ja sooleinfektsiooni kliiniliste ilminguteta väikelaste väljaheidete proovid, kes hospitaliseeriti Laste Linna kliinilise haigla nr 3 Novosibirskis sooleinfektsioonide ja hingamisteede infektsioonide osakondadesse. Fekaaliproovid koguti patsientide haiglaosakonda lubamisel 2-3 ml mahus ühekordselt kasutatavates steriilsetes plastmahutites ja hoiti 15 päeva temperatuuril -20 ° C. Materjali pikem ladustamine viidi läbi temperatuuril -70 ° C.
104 fekaaliproovi paneeli testiti esialgu OCI patogeenide olemasolu suhtes. Nendest:
30 proovi, milles ELISA ja RT-PCR abil tuvastati ainult A-rühma rotaviirused; genotüpiseerimine RT-PCR abil näitas, et väljaheiteproovid sisaldasid rotaviiruseid genotüübist PG1 (18 proovi), PG2 (4 proovi), PG3 (3 proovi), PG4 (2 proovi), PG4 (1 proov), PG9 (1 proov), PG3 (1 proov);
14 proovi, milles RT-PCR abil tuvastati ainult teise genotüübi noroviirused, mida kinnitas 5 "nukleotiidjärjestuse määramine-kapsovi geeni piirkond, mis asub noroviiruste genoomis vahemikus 5085-5485 h .;
15 proovi, milles RT-PCR abil tuvastati ainult astroviirused, mida kinnitas 5 "nukleotiidjärjestuse määramine- kapsiidgeeni piirkond, mis asub astroviiruste genoomis piirkonnas 4526-4955 n; 15 proovi kus PCR abil tuvastati ainult adenoviirused;
30 väljaheiteproovi (kontroll) lastelt, kellel ei olnud sooleinfektsiooni kliinilisi ilminguid, hospitaliseeriti haigla hingamisteede osakonda; esialgne analüüs ei näidanud nendes proovides ülaltoodud viiruspatogeene.
Proove testiti mädaniku-, noro-, astro- ja adenoviiruste olemasolu või puudumise suhtes RT-PCR abil, kasutades kaubanduslikke komplekte "AmpliSens No go virus 1, 2 genotüübid-306/322", "AmpliSens Astrovirus -165" Venemaa Föderatsioon, "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (tootja FGUN Epidemioloogia Keskasutusinstituut, RF). Proove uuriti vastavalt vastavate reaktiivikomplektide kasutusjuhendile säilivusaja jooksul. Rotaviiruse esinemise suhtes positiivsed proovid genotüpiseeriti RT-PCR abil. Rotaviiruse antigeeni olemasolu või puudumise määramine viidi läbi ka ELISA abil, kasutades kaubanduslikku testimissüsteemi IDEIA ™ Rotavirus (DakoCytomation, UK) vastavalt komplekti juhistele.
Rota-viiruse-antigeeni-ELISA-BEST reaktiivikomplekti testimisel krüptiti kõik ülaltoodud proovid (104) ja testiti kolm korda testikomplektiga. Pärast testide lõpetamist dekodeeriti proovid ja analüüsiti tulemusi.
Tulemused ja arutlus
Reaktiivikomplekti "Rotaviirus-antigeen-ELISA-BEST" tundlikkust hinnati testitud proovisüsteemi ja võrdlusravimeid kasutavate proovide positiivsete tulemuste kokkulangevuste arvu (%) järgi. Samal ajal selgus, et reaktiivikomplekti "Rotaviirus-antigeen-ELISA-BEST" kasutamisel olid kõik 30 proovi, millel oli kinnitatud rotaviiruse A olemasolu, positiivsed (tabel 1). Järelikult oli testikomplekti tundlikkus rotaviiruse A tuvastamiseks 100%. Tuleb märkida, et paneel sisaldas seitsme erineva rotaviiruse genotüübiga proove ja kõik need tuvastati edukalt reagendikomplektiga "Rotaviirus - antigeen - I FAB - EST".
Katsesüsteemi spetsiifilisust hinnati negatiivsete tulemuste (%) kokkulangevuste arvu järgi (protsentides) testitud testisüsteemi kasutades koos esitatud eeluuringutega. Spetsiifilisuse hindamiseks kasutas paneel 30 proovi, milles viiruslikke patogeene ei tuvastatud, samuti 14 proovi, milles tuvastati ainult teise genotüübi noroviirused, kasutades RT-PCR meetodit, 15 proovi, milles RT-PCR meetod avastati ainult astroviirused; 15 proovi, milles PCR abil tuvastati ainult adenoviirused. Tehti kindlaks, et 69-st 74-st negatiivsest proovist ei ületanud Rotaviirus-antigeeni-ELISA-BEST-reaktiivikomplektiga tuvastatud optilise tiheduse väärtused rotaviiruse A esinemist taustväärtusi, st väärtusi saadud kontroll -negatiivsete proovide optilise tiheduse mõõtmise tulemusena. Kaks proovi, mis sisaldasid astroviirusi, üks proov - teise genotüübi noroviirus, üks proov - adenoviirus ja kaks proovi, milles ei leitud ühtegi ülaltoodud viiruspatogeeni, näitasid positiivseid optilise tiheduse indekseid. Tuleb märkida, et proovides, milles ühtegi viiruslikku patogeeni varem ei tuvastatud, registreeriti positiivsed signaalid ainult ühes korduvuuringus (tabel 2). Seega oli reaktiivikomplekti Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST spetsiifilisus 93,2%.
Katsete käigus hinnati kliiniliste materjalide reaktiivide testikomplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" kasutamisel saadud tulemuste reprodutseeritavust-kõik proovid uuriti kolm korda erinevates katsetes, et teha kindlaks tulemuste varieeruvus. Peaaegu kõigil juhtudel saadi sarnased tulemused: katsesüsteem tuvastas kõik negatiivsed ja positiivsed proovid ühtemoodi. Erandiks olid kaks proovi, milles ühtegi viiruslikku patogeeni varem ei tuvastatud: mõlema proovi ühes korduses ületasid optilise tiheduse väärtused ODcrit. Tuleb märkida, et ülejääk oli ebaoluline (tabel 2). Seega oli tulemuste korratavus 98,8%.
Läbiviidud testide tulemused näitasid, et reagentide testikomplekt "Rotaviirus-antigeen-ELISA-BEST" oma diagnostilise efektiivsuse-spetsiifilisuse, tundlikkuse ja reprodutseeritavuse-poolest on võrreldav Vene Föderatsioonis saadaoleva diagnostikaga.
keemilised katsesüsteemid, mis võimaldab prognoosida tulemuste diagnostilist usaldusväärsust, kui kasutatakse uuritud reagentide komplekti "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" A-rühma rotaviiruse antigeeni avastamiseks kliinilises materjalis.
Kirjandus
1. Bogomolov B.P. // "Nakkushaigused: erakorraline diagnostika, ravi, ennetamine". - M., New-diamed. - 2007.
2. Vasiliev B.Ya., Vasilieva R.I., Lobzin Yu.V. // “Ägedad soolehaigused. Rotaviirused ja rotaviiruse infektsioon ”. - S.-Pb., Lan. - 2000.
3. Zhirakovskaya EV, Tikunov A.Yu., Bodnev O.A. et al. // "BIOPreparations". - 2008 - nr 2. - lk. 15-18.
4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.C. ja teised. // ZhMEI - 2008 - nr 4. - koos. 12-16.
5. Ignatyuk TE, Golutvin IA, Nasikan NS, et al. // "Küsimused viroloogiast". - 2003. - s 48. - nr 6. - lk. 1721.
6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chuprova A.B. // "Viroloogia küsimused". - 2007.- s. 52. Nr 3 - lk. 19-23.
7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A. jt //
"Nakkushaigused". - 2004. - v. 2. - nr 4. - lk. 85-91.
8. Podkolzin AT, Fenske EB, Abramycheva N.Yu. et al. // "Terapeutiline arhiiv". - 2007. - v 79. - nr 11. -lk. 10-16.
9. Sergevnin VI, Woldschmidt NB, Sarmometov EV jt // Epidemioloogia ja nakkushaigused. -2004.-№ 6.-lk. 17-20.
10. Sergevnin V.I., Woldschmidt N.B., Sarmometov E.V. et al. // Hügieen ja kanalisatsioon. - 2007. - nr 1. - lk. 56-58.
11. Arcangeletti MC, De Conto E, Pinardi F., jt. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76 (3). - lk 165-170.
12. Gladstone B. P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., jt. // Epidemiol. Nakatada. - 2008. V. 136 (3). - lk 399-405.
13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. J. Virol. Meetodid. -2006. - V. 137 (2). - lk 280 - 286.
14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., al. J. Clin. Mikrobiol. - 2008. V. 46 (2). - lk 462–469.
15 Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F., jt. // rakend. Environ. Mikrobiol. - 2008. - V. 74 (7). - lk 2069–2078.
16. Stockman L. J., Staat M. A., Holloway M., al. J. Clin. Mikrobiol. - 2008. - V. 46 (5). - lk 1842 - 1843.
Reaktiivikomplekti "Rotaviirus-antigeen-ELISA-BEST" tundlikkuse ja spetsiifilisuse hindamine
Tabel 1
Proovide arv Proovide arv Tuvastamistulemused võrdluspreparaatidega IDEIA Rotaviirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Tuvastustulemused komplektiga "Rotaviirus-antigeen-ELISA-BEST"
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
Reaktiivikomplekti "Rotaviirus-antigeen-ELISA-BEST" spetsiifilisuse hindamine-
tabel 2
PCR AmpliSens
rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus
0,443 1,306 0,676 0,418
Rotaviiruse antigeen-IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
£ septembris
Detsember 2009
AmpliSens
rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus rotaviirus astroviirusastro
IDEIA rotaviirus DakoCytomation OPCrit = 0,150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
Rotaviirus
OPKrit 0,250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
antigeen-ELISA-PARIM "Vektor-parim"
OPKrit OPKrit 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus astroviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus
IDEIA Rotaviirus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EecT"
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
Detsember 2009
PCR AmpliSens
adenoviirus adenoviirus adenoviirus adenoviirus tähtsusetult ebaoluline
IDEIA rotaviirus DakoCytomation OPCrit = 0,150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Rotaviirus - antigeen - IFA -BEST CJSC "Vector -Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
Laste helmintiaasi ravi on äärmiselt oluline, kuna selle tagajärjed võivad olla viivitus füüsiliste ja vaimsete, siseorganite ja süsteemide patoloogiliste protsesside arengus ja isegi surm. Lisaks on helmintilised nakatumised väga nakkavad, mistõttu nad levivad nii kergesti koolieelsetes ja kooliasutustes. Selle põhjal on selge, kui oluline on laste helmintiaasi õigeaegne ravi.
Esimesed helmintide tunnused lastel
Ussid on inimkeha tinglikult patogeensed ained, ussid, mille lõplik omanik on inimene. Lisaks ei mängi selles küsimuses omaniku vanus mingit rolli, erinevat tüüpi helmintiaasi võib täheldada nii lastel kui ka täiskasvanud patsientidel.
Miks on helmintiaas lapsele ohtlik?
Nagu varem mainitud, võivad laste helmintid põhjustada tõsiseid haigusi ja patoloogiaid, mille tagajärjel vaimne ja füüsiline areng aeglustub. Igat tüüpi helmintiaasi võimalikud tüsistused võivad olla täiesti erinevad, näiteks:
Seetõttu vajavad laste helmintiaasid veelgi suuremat tähelepanu, õigeaegset arstiabi, spetsialisti pikaajalist jälgimist ja ennetustööd.
Peamised sümptomid lastel
Sõltuvalt usside tüübist võivad lapse helmintiaasi sümptomid olla erinevad:
1. Ümarussid avalduvad kohe lapse allergilise reaktsiooni, palaviku ja iiveldusena. Esimesed esinemised on tavaliselt eredad, kuid vaibuvad kiiresti. Pärast seda võib täheldada järgmisi sümptomeid: 
- koolikud ja düsbioos ning vastsündinud;
- alla 1 -aastastel imikutel, valu nabas, probleemid väljaheitega, allergiad ja diatees;
- vanematel lastel on unehäired, rahutu käitumine, õudusunenäod;
- 3-7-aastaseid lapsi iseloomustab iiveldus, palavik, köha ja kõhuvalu, lööve.
2. Enterobioos, mille tekitajaks on pinworms, avaldub kustutatud kliinilise pildina. Ja alles 1 kuu pärast võib täheldada järgmisi sümptomeid:
- vastsündinutel, päraku põletik, turse ja punetus, söömisest keeldumine, öine nutmine, isutus;
- alla üheaastaseid lapsi iseloomustavad samad sümptomid, samuti tugev päraku sügelus öösel (kella 23.00-1.00), tüdrukud kannatavad suguelundite põletiku all;
- vanematel lastel kõhuvalu naba lähedal, unehäired, tuharate sügelus.
3. Toksokariaasi sümptomeid on raske ära tunda, välja arvatud madal kehatemperatuur ja allergilised reaktsioonid (lööve, nõgestõbi, sügelus ja turse). Pärast nakatumist võib tekkida köha, mis põhjustab veelgi kopsupõletikku või bronhiiti, eriti kõige väiksematel patsientidel. 
Trihhinoos näitab vastsündinutel kergeid märke, vastasel juhul täheldatakse järgmisi märke:
- palavikuline seisund;
- näo turse;
- lihasvalu;
- allergilised reaktsioonid;
- 5 -aastastel ja vanematel lastel võivad olla suurenenud mandlid, põrn, lööve ja kurguvalu.
Helmintiaasi sümptomeid on kõige raskem diagnoosida 2 -aastastel ja noorematel lastel, kuna laps ei oska oma käitumist ja seisundit selgitada. Seetõttu on lapse ebatüüpiliste ilmingute ja käitumise korral parem arstile näidata.
Mis on esimene asi, mida teha?
Ussid, mis leiti lapse väljaheitest, on haiguse kõige olulisem sümptom, pärast mida peate viivitamatult abi otsima arstilt. Ükski helmintravi ei saa olla edukas ilma korralikult läbi viidud diagnoosita. Uurimismeetodid peaksid sel juhul olema keerulised, sealhulgas järgmised protseduurid: 
- kraapimise võtmine pärakust;
- lapse väljaheidete uurimine;
- vereanalüüsi;
- lihaste biopsia harvadel juhtudel, kui kahtlustatakse trihhinoosi;
- seroloogiline vereanalüüs;
- Röntgen, ultraheli, tomograafia;
- ELISA antikehade tuvastamiseks veres.
Ravi meetodid
Laste helmintiaasi ravi peaks olema kõikehõlmav, läbimõeldud, ette nähtud täpsete annuste ja ravimi manustamise sagedusega. See on tingitud asjaolust, et anthelmintilise toime jaoks kasutatakse mürgiste komponentidega ravimeid, mis tähendab, et ebaratsionaalne kasutamine võib põhjustada kõrvaltoimeid. Lisaks on kodus sobiv alternatiivne ravi ravimtaimedega.
Rahvapärased abinõud
Kaasaegne laste haiguste ravi rahvapäraste ravimitega hõlmab 4 tõhusat viisi: 
Kõiki koduseid ravimeetodeid tuleb eelnevalt arstiga arutada. Tuleb meeles pidada, et ravimtaimedele ja rahvapärastele ravimitele on individuaalse talumatuse kujul vastunäidustusi.
Narkootikumide ravi
- Enterobioosi ja askariaasiga kasutatakse tavaliselt selliseid ravimeid nagu Pirantel ja Mebendasole. Piranteli võtmine on sobiv annuses 10 mg ainet iga kehakaalu kilogrammi kohta ja 5 mg / kg ascaris'e korral. Mebendasooli võetakse kaks korda päevas annuses 50 mg 2-3-aastastele lastele kolm päeva järjest, kaks korda 100 mg-ni kolm päeva järjest üle 3-aastastele lastele, pärast 3 nädala möödumist ravi korratakse.
- Toksokariaasi korral määratakse mebendasool erinevas annuses - 2 -aastastele ja vanematele lastele kaks korda päevas, 100 mg 14-10 päeva.
- Trihhinoosi raviks võetakse 5 mg mebendasooli kilogrammi kehakaalu kohta, seejärel jagatakse annus kolmeks annuseks päevas. Ravi kestus on 1 nädal arsti range järelevalve all.
Helmintiaasi ennetamine
- käte pesemine kohe pärast kokkupuudet loomadega, pärast tänavat ja liivakaste, tualetti minekut ja enne söömist;
- süüa ainult puhast toitu;
- liha- ja kalatoodete nõuetekohane kuumtöötlus;
- keedetud vee joomine;
- isikliku hügieeni ja sanitaartingimuste järgimine;
- lemmikloomade regulaarne deworming;
- ennetava ussirohu läbiviimine lastel alates 2. eluaastast.
Vereanalüüs toksokaaride suhtes
Inimese nakatumise tunnused toksokariaasiga
Nakkuse kandjad on koerad, harvem kassid. Mürgiste koerte väljaheitega jagatakse toksoksamune. Kui nad on maapinnal, vees või looma karusnahal püsinud, viiakse nad erinevatel viisidel tervislikku kehasse.
Reaktsioon sissetungimisele
Meditsiinistatistikast on teada, et täiskasvanud haigestuvad harvemini toksokariaasi, välja arvatud juhul, kui nende amet on ohus. Lapsed nakatuvad palju tõenäolisemalt.
Toksokariaasi kõige levinumad sümptomid:
- Palavik ilma haigusteta.
- Temperatuuri tõus.
- Valu suurenemine ja vähenemine peas või kõhus.
- Nahalööbe välimus, mida ei saa kõrvaldada.
- Näo turse.
- Eosinofiilide taseme tõus veres, mida näitab üldine analüüs.
Täpse diagnoosi tegemiseks on ette nähtud toksokaride immunoloogiline test. Valguühendite olemasolu veres, kandes helminti (antigeenide) geneetilist teavet, kutsub esile immuunsuse igg -klassi antikehade tootmise suhtes. See on esimene märk toksokariaasi infektsioonist.
Esialgne diagnostika
Patsiendi ajaloo esialgne etapp on kollektiivne. Enne patsiendi saatmist toksokariaasi vereanalüüsi võtmiseks on vaja uurida haiguse ajalugu ja teha esialgne uuring.
Esmane diagnoos:
- Uuring raskendavate asjaolude kohta, mis võivad provotseerida nakatumist - konkreetne töö loomadega või lemmiklooma olemasolu, kaevamine potentsiaalselt ohtlikes piirkondades, lapsed mängivad kohtades, kus koerad jalutavad.
- Patsiendi füüsiline läbivaatus. Naha uurimine nahaaluse sissetungi suhtes toksokaaride, silmalaugude ja silmamunade poolt, palpatsioon.
- Üksikasjaliku vereanalüüsi määramine. Toksokariaasiga nakatumise ajal on iseloomulik mõnede näitajate märkimisväärne tõus - eosinofiilid (70-80%), lümfotsüüdid, ESR. Hemoglobiini tase langeb märgatavalt.
- Maksaproovide võtmine. Raske sissetungi korral mõjutab maksa koormus, mis väljendub bilirubiini tugevas hüppes.
Tavaliste testide (veri, koprogramm, määrimine) abil on võimatu saada otsest kinnitust toksokari sissetungile. Samuti ei ole kaksteistsõrmiksoole uuring informatiivne, kuna vastseid on raske rännata.
Pärast esialgse läbivaatuse tulemuste saamist, mis viitab võimalikule nakatumisele toksokaaridega ja väidetava diagnoosi eristamist sarnaste sümptomitega haigustest, määratakse patsiendile toksokariaasi ELISA test.
Lingitud immunosorbentanalüüs
Selle uuringu peamine eesmärk on kinnitada toksokaaride olemasolu inimkehas. Nende helmintide antikehi leidub vereplasmas, seega võetakse see veenist.
Toksokaaride analüüs nõuab mõningast ettevalmistust:
- Päeval enne protseduuri ärge sööge rasvast ega rasket toitu.
- Ärge jooge päeva jooksul enne laboratooriumi külastamist magusaid, gaseeritud ega alkohoolseid jooke.
- Võtke proovid tühja kõhuga.
- Ärge võtke ravimeid eelmisel päeval ja päeval, mil analüüs on ette nähtud.
Tuleb märkida, et seda väga informatiivset sissetungi avastamise viisi võivad teatud asjaolud mõjutada. Valepositiivne tulemus võib ilmneda, kui patsiendil on:
- Onkoloogilised haigused.
- Kopsutuberkuloos.
- Rasked maksa patoloogiad.
- Autoimmuunne sündroom.
- Antifosfolipiidide sündroom.
- Rasedus.
Sel juhul ei ole võimalik saada 100% kinnitavat analüüsi, kuna sellistel tingimustel toodab kaitsesüsteem ka immunoglobuliine (antikehi). On vaja läbi viia täiendav diagnostika ja eristada toksokariaas loetletud teguritest.
IgG klassi immunoglobuliinide kontsentratsioon (tiiter) saavutab maksimaalse võimaliku väärtuse 2-3 kuu möödumisel invasiooni algusest. Mida tõsisem on infektsioon, seda suurem on see näitaja.
ELISA tulemused
Diagnoosi seadmiseks uuritakse hoolikalt ensüümi immuunanalüüsi, võrreldakse saadud tulemusi võrdlusväärtustega. Norma on antikehade tiiter 1: 100 positiivsuse indeksiga alla 0,9.
Pealkirjade arvväärtused
Saadud tulemused võivad olla negatiivsed, positiivsed, nõrgalt positiivsed või küsitavad. AT tiitrite arv sõltub sissetungi tõsidusest ja selle esinemise vanusest.
Analüüsi dekodeerimine:
- Tiiter kuni 1: 100 - tulemus on negatiivne. Patsiendi kehast toksocara vastseid ei leitud.
- Tiitriga kuni 1: 400 - tulemus on nõrgalt positiivne. Patsiendil on nõrk invasioon või areneb toksokariaasi silma vorm. Mõnel juhul näitab indikaator hiljutist nakkust.
- Tiiter kuni 1: 600 - tulemus on positiivne. Inimene põeb helmintiaasi kliinilist vormi, mille avastamisel on vaja viivitamatut ravi.
- Tiitril kuni 1: 800 - tulemus on positiivne. See räägib tõsisest progresseeruva iseloomuga invasioonist ja suurest osast siseorganite patoloogilise protsessi arengu tõenäosusest.
ELISA uuringud näitavad harvaesinevate eranditega sissetungi tähelepanuta jäetud vormi koos erineva päritoluga helmintiaaside segunemisega. Sellisel juhul võib antikehade koguarv olla suurem kui 1: 800.
Positiivsuse koefitsient
Ensüümidega seotud immunosorbentanalüüsis toksokariaasi tiitriga 1: 400 - 1: 600, et eristada invasiooni kõrvalteguritest, võrreldakse saadud näitajaid võrdlusväärtusega. Nende numbrite erinevust nimetatakse tavaliselt indeksiks või positiivsuse koefitsiendiks.
Tavaliselt on ELISA vormis üks näitaja teise vastas. Esimene on norm, teine võib tähendada:
- Kuni 0,9 - tulemus on negatiivne. Toksokaara vastseid ei leitud.
- 0,9-1,1 - tulemus on kaheldav. Sel juhul määratakse korduv diagnostika.
- 1.1-2.2 - tulemus on nõrgalt positiivne. Inimene on nõrga sissetungiga kandja.
- 2.2-4.2 - tulemus on positiivne. Mõõdukas toksokariaas on arenenud juba pikka aega.
- Eespool 4.4 - tulemus näitab helmintia invasiooni või hiljutise helmintiaasi tippu.
KP tulemusega 4,4 ja tuvastatud eosinofiilia suurenemine 10% võrra võib viidata toksokariaasi silma vormi kujunemisele ja ristinvasioonide vastaste antikehade esinemisele, kokku toksokariaasile.
Antikehade immuunvastus ja optiline tihedus (positiivsuse koefitsient) sõltuvad toksokaaridega nakatumise astmest ja nende asukohast. Väikseim tiiter ja CP näitaja võimaldab meil eeldada ainult helmintide puudumist, kuid mitte seda väita.
Esitatud teave ei saa olla enesediagnostika ega iseravimise allikaks. ELISA tulemused koos esialgse eksamiga võivad spetsialistile rääkida ainult probleemi olemasolust. Invitro laboris viiakse vere diagnostika läbi suure täpsusega, analüüsi tulemusega kaasnevad spetsialistide kommentaarid positiivsuskoefitsiendi kohta. See aitab arstil oluliselt täpsemat diagnoosi teha.
Määramiste arv 96 (48 kahes eksemplaris)
Töötab tahvelarvuti formaat: eemaldatud 12x8, purustades 1 augu.
Tundlikkus: 1,5 U / ml.
Mõõtmisvahemik: 0-400 U / ml.
Uuritava proovi maht ei ületa 25 μl.
Tingimuste standardimine ensümaatilise reaktsiooni läbiviimiseks kromogeeniga termostaadiga loksutis temperatuuril 37 ° C.
Komplekti kuulub:
1. Triibuline plaat 12 x 8 süvendit, kasutusvalmis - 1 tk.
2. Kasutusvalmis kalibreerimisproovid (0-400 U / ml), mis on värvitud erineva intensiivsusega sõltuvalt kontsentratsioonist-6 viaali.
3. Kontrollproov - 1 pudel.
4. Ühekomponentne konjugaat, kasutusvalmis, ei vaja lahjendamist - 1 pudel.
5. Seerumi lahjenduslahus - 1 pudel.
6. Kromogeenne substraat, ühekomponentne - tetrametüülbezidine plus (TMB +) lahus, kasutusvalmis, ei vaja lahjendamist - 1 pudel.
7. Puhverlahus fosfaat -soolalahus kahe kuni kahe viaaliga.
8. Stoppreagent, kasutusvalmis - 1 pudel.
9. Kile tableti sulgemiseks - 1 tk.
10. Trafarett kalibreerimisgraafiku koostamiseks - 1 tk.
11. Reagentvann - 2 tk.
12. Pipettotsikud 5-200 µl - 16 tk.
Tableti pakend - tõmblukuga teakott.
FST-T töölahuse stabiilsus vähemalt 5 päeva temperatuuril +2 ... 8 ° C.
Hoidke komplekti temperatuuril +2 ... 8 ° C. Kõlblikkusaeg - 1 aasta alates tootmise kuupäevast.
Registreeritud Roszdravnadzoris.
Venemaa juhtivad tootjad Infektsioonide diagnoosimiseks kasutatavate reaktiivikomplektide segmendis: - CJSC Vector -Best, Novosibirsk; - LLC mittetulundusühingute diagnostikasüsteemid, N. Novgorod; - CJSC "Ecolab", Electrogorsk, Moskva piirkond. Mitte-nakkushaiguste ja füsioloogiliste seisundite diagnoosimiseks kasutatavate reaktiivikomplektide valdkonnas:-LLC "Alkor-Bio", Peterburi; - CJSC "Vector-Best", Novosibirsk; - OÜ "Hema-Medica", Moskva. Allergiate laboratoorseks diagnostikaks kasutatavate reagentide segmendis: - LLC "Alkor -Bio", Peterburi; - CJSC "Vector-Best", Novosibirsk; - LLC NPO Immunotex, Stavropol. Laboratoorsete seadmete tootmine: - LLC "Pikon, Moskva
Impordi võimaliku asendamise astme hindamine testide nomenklatuuri abil Analüütide nomenklatuur, ühikud Heakskiidetud kasutamiseks raadiosageduslikus raadiosageduslikus piirkonnas Toodetud RF-s Võimaliku impordi asendamise aste Nakkushaiguste markerid% Mitteinfektsioossete haiguste markerid ja füsioloogiliste seisundite näitajad% Allergia markerid% Kokku:%
Hinnang impordi asendamise astmele tahvelarvutite toodete turu mahu järgi ELISA Turusegmendid Turu maht Vene Föderatsioonis, mln. Kodumaiste tootjate müügimaht, miljonit hõõruda. Impordi asendamise osakaal Nakkushaiguste markerid% Mittenakkuslike haiguste markerid ja füsioloogiliste seisundite näitajad% Allergia markerid% Varustus 50051% Kokku:%
Hinnang impordi asendamise astmele immunokeemiliste meetodite toodete turu mahu järgi tervikuna Turusegmendid Turu maht Vene Föderatsioonis, mln. Kodumaiste tootjate müügimaht, miljonit hõõruda. Impordi asendamise osakaal Nakkushaiguste markerid% Mittenakkuslike haiguste markerid ja füsioloogiliste seisundite näitajad% Allergia markerid% Seadmed% Kokku:%
Kodumaiste tootjate probleemid tööstuses: ELISA meetod on vananemas. Kodused IF-reaktiivid asendatakse järk-järgult imporditud kemoluminestsentsiga; Olemasolev riigihankesüsteem stimuleerib kas odavaima kauba või ainulaadsete omadustega imporditud toodete ostmist; Kodumaiste automaatseadmete tootjate vähearenemise ja imporditud toodete tootmise lokaliseerimise üks peamisi põhjusi on tolli haldusbarjäär; Viimase aja peamine probleem on uute toodete riikliku registreerimise süsteemi kokkuvarisemine RZN -is. Uute toodete turule laskmine on praktiliselt peatunud ja neil välismaistel tootjatel, kes varem registreerusid pikkade nimekirjadega, on jätkuvalt eelis kodumaiste toodete ees; Tehnoloogilise mahajäämuse peamine põhjus on suutmatus saada õigust kaasaegsete seadmete jaoks ühilduvate toodete tootmiseks; Kodumaiste tootjate madal konsolideerumisaste ja pidevad hinnasõjad omavahel ei võimalda arenenud toodete väljatöötamist ja võrdsetel alustel konkureerimist juhtivate tegijatega, sealhulgas välisturgudel.
Ettepanekud: kehtestada FCC raames mittekonkureeriv menetlus meditsiiniseadmete riigihankeks, millele järgneb positsiooniline avaldamine. Rahastamislimiitide kindlaksmääramine keskmise turuhinna alusel annab teatavaid eeliseid kodumaistele tootjatele, võimaldab piirata kallite imporditud reaktiivide tarbimist ja kontrollida tõhusamalt eelarvevahendite kasutamist; Edendada kodumaiste tootjate laienemist ja konsolideerimist, et koondada ressursid kaasaegsete toodete arendamisele ja siseneda rahvusvahelisele turule. Konkurentsivaba riigihankemenetlus jätab kiiresti turule vaid tõeliselt konkurentsivõimelised ettevõtted; Eraldada riigi rahalisi vahendeid, et stimuleerida avaliku ja erasektori partnerluse põhimõtetel mitmete katsete väljatöötamist, mis on piisavad riigi bioloogilise ohutuse tagamiseks; Tolliõigused peaksid kehtima komponentidele, mitte valmistoodetele; Harmoniseerida registreerimissüsteem Euroopa süsteemiga, kus vastavusdeklaratsiooni alusel registreeritakse madala potentsiaalse riskiga meditsiiniseadmed.
Laadimine ...