1 eesmärk
1.1 Komplekt on ette nähtud esimese ja teise tüüpi immuunpuudulikkuse viiruse antikehade samaaegseks avastamiseks (HIV-1 ja HIV-2) ja HIV-1 antigeen R24 seerumis ja inimkuumutamise plasmas kaudse meetodi abil Tahkefaasiline immunoanalüüs.
2 Omadused ja seadistamise põhimõte
2.1 Valimise koosseis:
|
Komponendi nimi |
number |
|
Immunosorbent. |
2 tabletti |
|
Positiivne kontrollproov (K + at) |
1 viaal, 3 ml |
|
Positiivne kontrollproovi ag (K + AG) |
3 pudelit, lüofiliseeritud ravimit |
|
Negatiivne kontrollproov (K -) |
2 pudelit 3 ml |
|
Konjugaadi lahendus №1 (RK-1) |
1 viaal, 12 ml |
|
Konjugaat №2. (Kg-2) |
1 viaal, 1 ml |
|
Lahendus aretamiseks konjugeeritud №2 (PP-K2) |
2 pudelit 18 ml |
|
Puhverlahus substraadile ( Rinnahoidja) |
2 pudelit 18 ml |
|
Chromogen TMB |
1 viaal, 1 ml |
|
Fosfaat-soolapuhvri lahus kontsentreerige nööriga (FSB-T × 25) |
2 pudelit 50 ml |
|
Peatus reaktiiv |
1 viaal, 12 ml |
|
Vannikomplekt reaktiivide jaoks Näpunäiteid mitmekanaliliste pipettide jaoks |
1 komplekt |
|
Kleepkile |
2.2 "IFA-HIV 1.2 AGAT" komplekti peamised komponendid on immunosorbent, konjugaadi nr 1 ja konjugaadi nr 2 lahus.
Immunosorbent. See on polüstüreen tablett, mille süvendites soritakse rekombinantsete antigeenide HIV-1 (GP41) ja HIV-2 (GP36) ja monoklonaalsete antikehade segu seguga antigeen R24 HIV-1-ni.
Konjugaadi lahendus №1 See on segu märgistatud biotiin monoklonaalsete inimese antikehade antigeeni P24 HIV-1 ja märgistatud biotiin rekombinantsete valkude HIV-1 ja HIV-2.
Konjugaat №2. See on mädarõika peroksidaasiga konjugeeritud strepavidiin.
Positiivne kontrollproov - Inimese vereseerum sisaldavad antikehi HIV-1 ja HIV-2, mis ei sisalda C-hepatiidi viiruse ja Treponema pallidumi antikehi, antigeeni P24 HIV-1 ja HBS antigeeni, inaktiveeritud kuumutamisega 3 tundi temperatuuril 56 ° C.
Positiivne kontrollproovi ag - Inimese vereseerum, mis sisaldab kohalikku antigeeni P24 HIV-1, ei sisalda HIV-1, HIV-2, C-hepatiidi viiruse ja Treponema Pallidumi ja HBS antigeeni antikehi, inaktiveeritud kuumutamisel 3 tundi temperatuuril 56 ° C.
Negatiivne kontrollproov - Inimese vereseerum, mis ei sisalda HIV-1, HIV-2, HCV, antigeeni P24 HIV-1 ja HBS antigeeni antikehi, inaktiveeritud kuumutamisel 3 tundi temperatuuril 56 ° C.
Komplekti toimimise põhimõte. Antigeeniga nakatunud vere konjugaadi nr 1 ja proovide lahuse lahuse lisamisel on antigeenp24 seonduv nii spetsiifiliste antikehadega tahke faasi ja monoklonaalsete biotinüülitud anti-p24 antikehadega, mis on lahuse osa konjugaadi nr 1; HIV-spetsiifilised antikehad on seotud nii rekombinantsete HIV-1 kui HIV-2 antigeenidega ning antigeenidega, mis kuuluvad konjugaadi lahusesse nr 1, moodustades antigeeni antikeha komplekse. Anti-P24 spetsiifiliste antikehade immuunseerimisseadmed ja antigeenp24 tuvastatakse konjugaadi nr 2 abil. Pärast sidumata komponentide peroksidaasi substraadi (vesinikperoksiidi) lahuse ja TMB kromogeeni lahust lisatakse süvenditesse.
Peroksidaasi reaktsioon peatatakse peatusreagendi (0,9 M väävelhappe lahuse) lisamisega ja lahuste värvimise intensiivsuse süvendites mõõdetakse spektrofotomeetril optilise tiheduse (OP) väärtusena lainepikkusel 450 nm .
OP suurus on otseselt proportsionaalne spetsiifiliste antikehade kontsentratsiooniga ja / või antigeeni P24 kontsentratsiooniga seerumis või plasmaproovis. Mida kõrgem on seerumis proovi antikeha sisaldus ja / või antigeenp24, seda suurem on värvimise intensiivsus.
2.3 Komplekt on mõeldud läbiviimiseks 24 etendusi IFA: 1 seadistus - 1 riba (8 auku). Kokku - 192 määratlused, sealhulgas kontrollproovid.
3 Ettevaatusabinõud, kui töötate koos komplektiga
3.1 Kõik komplekti komponendid kasutatud kontsentratsioonides on mittetoksilised. Kuid töötavad kõik katseseerumi (plasma) vere vere vereringe, mida tuleb pidada potentsiaalselt nakatunud, mis on võimelised säilitama ja edastama HIV-hepatiidi viiruse või mis tahes muu põhjusliku agensi viirusinfektsiooni, koos kasutatud lahendustega ja vedelikud, erinevad seadmed, mis võivad analüüsiprotsessis saastunud, nõuab komplekti kasutamisel teatavaid turvameetmeid:
Töö peab toimuma spetsiaalselt varustatud ruumis;
On vaja töötada isikukaitsevahendite kasutamisega ja ettevaatusabinõude järgimisega vastavalt nõuetele ja. \\ T
3.2 Stop reaktiivi sisaldava väävelhapet on ärritav toime. Kui jõuad nahale ja limaskestadele, loputage kohe rohke veega.
3.3 Töökohtade kogumiga töötamisel peaks olema varustatud pakkumise ja väljalaskeava ventilatsiooniga.
3.4 Kõik isikud, kes töötavad laboratooriumides, peavad olema kohustuslikud tervisekontroll vastavalt nõuetele.
3.5 Meditsiiniliste jäätmete kõrvaldamine ja / või kasutamata komplektide kõrvaldamine aegumiskuupäevaga tuleks teha vastavalt nõuetele.
4 komplekti töötamise eeskirjad
4.1 Vale tulemuste kõrvaldamiseks tuleb katsenäidised valmistada ja säilitada bakteri sektori takistavate tingimustes. On vaja valgustada seerumiproove, mis sisaldavad agregeeritud seerumit või sademeid, kasutades tsentrifuugimist (5-10) minuti jooksul pöörlemiskiirusel 3000 p / min. Seerumiproove saab hoida temperatuuril (2-8) ° C kuni 5 päeva. Külmutatud proovid (eelistatavalt temperatuurini vähemalt miinus 20 ° C) võib salvestada mitte rohkem kui 1 aasta. On vaja vältida korduvate tsüklite külmutamine sulatamise proovide.
Tuleb meeles pidada, et hemolüüsi, hüperlipideemia, bakterite käiguga, samuti pikakarvaliste proovide proovid ei sobi analüüsiks.
Tulemuste usaldusväärsus sõltub järgmistest reeglitest:
Kasutamine komplekti ei ole lubatud pärast aegumiskuupäeva, samuti segades komponentide komplektid erinevate seeria;
Iga reaktiivi valmistamiseks tuleks kasutada eraldi konteinerit;
Kõik reagentide valmistamiseks kasutatavad nõud ei tööta Deesi kraanikausside ja pesuvahendiga. Vajadusel loputage veega joomine ja seejärel loputage see viis korda destilleeritud veega;
Kromogeen TMB ja PX töötamiseks on vaja kasutada lahenduste jaoks eraldi konteinereid, näpunäiteid pipettide, roogade jaoks.
On vaja pöörata tähelepanu reaktiivide põhjalikule segamisele;
Tabletilahuste ja reaktiivide süvendite täitmise ja tühjendamise aeg peab olema vähemalt 30 s. IFA avalduse kõigis etappides ei tohi avasid kuivatada;
Kui kasutate pesumasinat, et jälgida mahuti seisundit tableti pesemiseks ja voolikute pesemiseks: neil ei tohiks olla bakterite või seente kasvu märke;
On vaja kasutada pipetraate automaatseid vahetatavate nõuandetega, mis on sertifitseeritud pipeteerimistulemuste keskmise annuse ja lähenemise tähendusega (viga mitte rohkem kui 3%);
Dosaatorid ja tööpinnad Etüülalkoholi mahust fraktsiooniga 70%. Ärge kasutage kloori ja muid kloori sisaldavaid aineid;
Uuritud ja kontrollproovidega töötamiseks on soovitatav kasutada ühekordselt kasutatavaid pipeti nõuandeid. Iga seerumi proov, samuti värbaja reaktiivid, peavad olema valitud eraldi otsaga.
Kui tutvustatakse Kasahstani Vabariigi süvenditesse, on tableti pinnapinna pipetipinna otsimine puudutada ja süvendites asuvat lahust.
Analüüsi käigus tuleks vältida otsese päikesevalguse tööpinnale.
4.2 Lüofiliseeritud komponentide avamisel ja lahustamisel on vaja jälgida nii, et pudelite kaanele ja seintele ei ole kuivainet.
5 Analüüsimiseks vajalikud seadmed ja materjalid
5.1 Spektrofotomeeter vertikaalne skaneerimine, mis võimaldab mõõta lahenduste optilist tihedust tableti aukudes lainepikkusel 450 nm;
Pool- või automaatne seade tablettide pesemiseks (halvem);
Suhe-vananemisvastane termostaat TS-80 m2, mis säilitab temperatuuri (37 ± 1) ° C või sellega sarnane vastavalt omadustele;
Ühe kanali automaatsed pipettid asendatavate nõudega, mis võimaldavad valida vedeliku mahtu 0,01 kuni 5,0 ml;
Pipette 8 kanalid automaatselt asendatavate nõudega, mis võimaldab valida maht vedeliku kuni 0,5 ml;
Mõõtmeline silinder võimsusega 2000 ml;
Kolb laboratooriumi võimsus 2000 ml;
Klaaspudelid 20 ml võimsusega;
Vannid reaktiive või Petri tasside jaoks (läbimõõt 100 mm);
Hügroskoopne meditsiinivill;
Filtripaber;
Kummi kindad kirurgilised;
Lahus mahuosa etüülalkoholi 70%;
Lahus vesinikperoksiidi massiosaga 6%;
Vee deioniseeritud või destilleeritud;
Konteiner tahkete jäätmete kogumiseks;
Konteiner vedelate jäätmete tühjendamiseks.
6 Analüüsi ettevalmistamine
6.1 Reagentide komplekt enne analüüsitud, eemaldage külmkapis, avage kasti kate ja taluma komplekti komponente temperatuuril (18-25) ° C 30 minutit.
Kõik seerumiproovid (plasma) ja reaktiivid segatakse enne analüüsitud põhjalikult põhjalikult põhjalikult.
Voolukiirus värbamisreaktiive analüüsi analüüsi analüüsi, mis määratakse kasutatud ribade arv, on esitatud tabelis A.1 lisa A.1
6.2 Lahuse valmistamine tableti pesemiseks
Tähelepanu!Lahendus Tableti pesemiseks Valmistage ette 15 minutit enne analüüsi algust!
Kui FSB-T × 25-ga pudel sisaldab sademeid, peab see olema soojenemine enne temperatuuri (37 ± 1) ° C juures, kuni sade on täielikult lahustunud. Mõõtesilindris mahuga 2000 ml. Tehke pudeli sisu FSB-T × 25-ga, seejärel lisage märgisele destilleeritud vesi. 1250 ml ja segage lahus õrnalt. Lahust võib säilitada temperatuuril (2-8) ° C 72 tundi.
Juhul ühe või mitme eemaldamise sisu FSB-t × 25 intensiivselt raputada intensiivselt (20-30) C, valige soovitud maht lahuse (tabel A.1) mõõteklaasi või silindri lisamiseks nõutav destilleeritud vee kogus ja lahuse segamiseks. Kasutamata FSB-t × 25 saab hoida suletud pudelis temperatuuril (2-8) ° C komplekti säilivusaja jooksul.
6.3 Immunosorbendi valmistamine
Immunosorbent on kasutusvalmis.
Avage pakett ja installige raami vajaliku riba. Ülejäänud segamine hoitakse tihedalt suletud pakendis niiskuse absorbeeriga temperatuuril (2-8) ° C juures 3 kuud.
6.4 Valmistamine K + at, K-, RK-1, RR-K2, BRS ja STOP-reaktiiv
K + at, K -, RK-1, RR-K2, BRS ja STOP-reaktiiv on kasutatavad.
Tähelepanu!RK-1 pudelis on võimalik sade. Analüüsimiseks on vaja kasutada supernatanti.
Kasutamata RK-1, RR-K2, BRS ja Stop reaktiiv Pärast viaali avamist saab säilitada suletud viaalides temperatuuril (2-8) ° C komplektis kõlblikkusaeg.
Jääk K + at ja K - pärast viaali avamist saab hoida suletud pudelites temperatuuril (2-8) ° C komplekti säilivusaja jooksul.
6.5 Lahuse valmistamine K + AG
Tähelepanu!Lahendus K + AG keetmine 15 minutit enne analüüsi algust!
Lüofiliseeritud K + AG taastamiseks enne viaali avamist on viaali või liiklusummikute seintele kleepuvad osakesed veidi koputavad. Avage pudel ja pange pistik kuivale pinnale ümber pööratud. Teha viaali 0,8 ml destilleeritud vett. Pudel on suletud pistikuga, et taluda 10 minutit temperatuuril (18-25) ° C ja pudelit õrnalt kallutades ja pöörates, segage selle sisu lõpuni lõpuni, vältides vahu moodustumist.
Taastatud K + AG-d saab salvestada suletud pudelis temperatuuril (2-8) ° C ühe kuu jooksul, miinus 20 ° C juures - kuus kuud. Ühekordne külmutamine-sulatamine taastunud K + AG on lubatud.
6.6 KG-2 lahenduse ettevalmistamine töörežiimis
Viaalist kg-2-ga valige tabelis A.1 maht ja ülekandmine pudelisse PP-K2-ga. Pudeli sisu segatakse põhjalikult, mis ei võimalda vahtu moodustumist.
Kui kasutate ühe või enama eemaldamise puhtasse viaalisse, et valida nõutav kogus PP-K2, lisage kg-2 vastavalt tabelile A.1 ja segage lahus, vältides vahu moodustumist.
Tähelepanu! KG-2 lahus töötava aretusel valmistatakse vahetult enne kasutamist! CG-2 lahust töölahjendus võib hoida 15 minutit temperatuuril (18-25) ° C. Kasutage reagentide ja uute nõuandeid ainult uut vanni!
KG-2 jääki saab hoida suletud pudelis temperatuuril (2-8) ° C komplekti säilivusaja jooksul.
6.7 Substraadi töölahendus
TMB Chromogeenpudel peab enne kasutamist temperatuuril olema soojenemine (37 ± 1)° C kuni kristallide täieliku lahustumiseni.
TMB-kromogeenviaalist, et valida tabelis A.1 mahus ja ülekandmine viaali BRC-ga. Pudeli sisu segatakse põhjalikult, mis ei võimalda vahtu moodustumist.
Kui kasutate ühe või mitme eemaldamise puhtas viaalis, et valida vajaliku koguse BRS-i koguse, lisage TMB kromogeen vastavalt tabelile A.1 ja segage lahus, mis ei võimalda vahu moodustumist.
Tähelepanu! Substraadi töölahus valmistatakse vahetult enne kasutamist valguse kaitstud kohas! Lahust saab hoida 20 minutit temperatuuril (18-25) ° C valguse kaitstud kohas.
Lahus tuleb kaitsta valguse ja kokkupuute eest metallide või metallide ioonidega. Enne kasutamist peab substraadi lahendus olema värvitu. Nõuded, mis on reaktsiooni käigus substraadi lahusega kokkupuutel, peske ilma sünteetiliste detergentide kasutamiseta. Kasutage reagentide ja uute nõuandeid ainult uut vanni!
Kromogeen TMB jääki saab hoida suletud pudelis temperatuuril (2-8) ° C komplekti säilivusaja jooksul.
7 Nõuded tableti pesemiseks
Kõigil pesemispunktidel on vaja kontrollida kõigi vedeliku kõigi süvendite ja täieliku eemaldamise (aspiratsiooni) täitmist;
See on vaja igal pesta kõik kaevud, et täita servade lahuse (0,30-0,35 ml süvendis), ilma ülevooluta ja vedeliku voolu voolamise kõrval;
Tableti pesemiseks on vaja taluda süvendeid, mis on täis lahendusega tableti pesemiseks 30 sekundi jooksul;
Iga aspiratsiooni korral eemaldage hoolikalt vedeliku jäägid augudest, koputades raami ribadega ümberpööratud asendis piki filtripaberit, mis on paigutatud polüetüleenile lehele;
Tableti rock-kvaliteediga pesemine viib valede tulemusteni.
8 Analüüs
8.1 Iga kahe augu tableti lisas 0,07 ml (70 ui) K + at.kahes teises kaevusel 0,07 ml (70 ui) K + AG, kolm muud kaevu - 0,07 ml (70 ui) K -.
Tähelepanu!Elisa teostamisel samal ribal on lubatud kasutada K - - kaks süvendit K + at - ühe augu jaoks K + AG - One auk.
Ülejäänud tableti süvendites 0,07 ml (70 ui) inimese vere seerumi (plasma) uuritud proovidest.
Tähelepanu! Iga proov peab valima ühekordselt kasutatava otsaga!
8.2 Kõigile tableti süvenditele kontrolli proovide ja uuritud seerumi proovide (plasma) veres viivitamata deposiit 0,05 ml (50 ui) RK-1.. Süvendite sisu segatakse hoolikalt tableti servades.
8.3 (37 ± 1) ° Sees 60 min.
Tähelepanu!Sest (1-2) kaevanduste inkubatsiooni lõpuni valmistada lahust KG-2 töölahjendus (P 6.6).
8.4 Eemaldage süvendite sisu pesuriga, seejärel loputage klambri kaevud tableti pesemiseks lahusega (P 6.2) seitse korda.
8.5 Lisage kõikidele Wells tablettidele 0,15 ml (150 ui) lahust Kg-2. Töökasvatus (P 6.6).
8.6 Tahvelarvuti löögi kile või sulgege kaas ja inkubeerige termostaadis temperatuuril (37 ± 1) ° Sees 10 min.
8.7 Eemaldage tableti aukude sisu pesuriga, seejärel loputa tablettide süvendid tableti pesemiseks (P 6.2) seitse korda.
8.8 Kõigile süvendite tabletile 0,15 ml (150 ui) töölahuse substraat (P 6.7).
Substraadi töölahuse ettevalmistamisel (lk.6.7) F. lase Chromogen TMB-ga peavad soojendama enne kasutamist (3-5) min temperatuuril (37± 1) ° С kristallide lahustumise lõpetamiseks.
8.9 Tahvelarvuti löögi kile või sulgege kaas ja inkubeerige termostaadis temperatuuril (37 ± 1) ° Alates pimedas kohas 15 minutit.
Tähelepanu!Pärast süvendite inkubeerimist süvendites, kus seerumi proovid sisaldavad HIV-1 ja / või HIV-2 ja / või antigeen R24 HIV-1 antikehi, muutust lahuse värvi muutus värvitu sinise erineva intensiivsusega sõltuvalt Uuritud seerumi proovis antikehad ja / või antigeen.
8.10 Peatage peroksidaasi reaktsiooni sisestades kõik süvendid 0,05 ml (50 ui) peatus reaktiiv.
Tähelepanu!Sellides, kus seerumid sisaldasid HIV-1 ja / või HIV-2 ja / või HIV-2 ja / või Antigeeni P24 HIV-1 antikehi, tekib sinise värvusega lahuse värvi muutus sinise värvusega.
8.11 Hiljemalt (1-2) min pärast reaktsiooni peatamist, et määrata süvendites süvendites samaaegselt lainepikkusega 450 nm.
9 töötlemise analüüsi tulemused
9.2 Tulemused kaaluvad ainult siis, kui:
OPS väärtus - ei ületa 0,2 OE;
OPC iga eraldi väärtus ei tohiks OPS-lt kõrvale kalduda - rohkem kui 30% võrra. Kui üks kolmest väärtusest OP-i - väljub sellest piirist, tuleks see välja jätta OPS-i arvutamisest -. Kui kaks OP K-i kolme väärtust - tulevad selle piiri jaoks välja, tuleks analüüsi korrata uute seadistatud reaktiivide juures;
Väärtus OPS K + rohkem kui 1,0 OH;
OPS K + AG väärtus on üle 1,0 OE.
9.3 Vastavalt ülaltoodud tingimustele arvuta kriitilise väärtuse (OPKRIT), OE vastavalt valemile (1):
OPKRIT. \u003d OPS to - + 0,14 (1).
10 Analüütilised ja diagnostilised omadused
Tundlikkus Reagentide komplekt IFA-HIV 1.2 Agat Antigeeni P24 HIV-1 tuvastamiseks -
Eripära Reagentide komplekt IFA-HIV 1.2 Agat - 100% standard (-) HIV. Standardne seerumi paneel, mis ei sisalda esimese ja teise tüüpi immuunpuudulikkuse viiruse antikehi (HIV-1,2) ja HIV-1 antigeeni (P24). Tarkvara42-28-214-02p.Katlehts-20. CJSC "MBS".
11 Vormi vabastamise vorm
11.1 Set on toodetud viie konfiguratsiooni valikuvõimalusega:
1 Määra 1P - analüüs käsitsi. Komplekt on mõeldud 12 IFA etenduste hoidmiseks kokkupandaval tahvelarvutis: 1 seadistamine - 1 riba (8 auku). Kokku - 96 määratlust, sealhulgas kontrollproove;
2 Määrake 2M - analüüs käsitsi teel. Komplekt on mõeldud 2 IFA etendustele monoliitilistel tablettidel: 1 preparaat - 1 tablett. Kokku - 192 määratlust, sealhulgas kontrollproove;
3 seadke 2p. - analüüsi läbiviimine käsitsi käsitsi. Komplekt on mõeldud hoidmiseks 24 etendusi IFA 2. kokkuulatuvx tabletid: 1 seadistus - 1 riba (8 auku). Kokku - 192 Mõisted, sealhulgas kontrollproovid;
4 Kit A2M - automaatse analüsaatori analüüsi läbiviimine. Komplekt on mõeldud 2 IFA etendustele monoliitilistel tablettidel: 1 preparaat - 1 tablett. Kokku - 192 määratlust, sealhulgas kontrollproove;
5 A2R SET - Analüsaatori analüüsi läbiviimine. Komplekt on mõeldud 24 IFA etendustele 2 kokkupandaval plaadil: 1 etapp 1 riba (8 auku). Kokku - 192 mõistet, sealhulgas kontrollproove.
12 Hoidmise ja rakenduse tingimused
12.1 Komplekti tuleb säilitada puhas, kaitstud niiskuse ja ruumi valguse eest temperatuuril (2-8) ° C kogu aegumiskuupäeva jooksul. Ärge külmutage komplektide komponente.
12.2 Usaldusväärsete tulemuste saavutamiseks on vaja järgida komplekti kohaldamise juhiseid.
12.3 Seade säilivusaeg - 12 kuud.
A lisa A.
Tabel A.1 - ELISA reaktiivi tarbimine
|
reaktiiv, ml |
Kasutatud ribade arv, tk. |
|||||||||||
|
Lahuse valmistamine tableti pesemiseks |
||||||||||||
|
FSB-T × 25 |
||||||||||||
|
Destilleeritud vesi |
||||||||||||
|
KG-2 lahuse valmistamine töötava aretusel |
||||||||||||
|
PR-K2. |
||||||||||||
|
Töö substraadi valmistamine |
||||||||||||
|
Chromogen TMB |
||||||||||||
Bibliograafia
|
Sanitaarreeglid |
Valgevene Vabariigi tervishoiu ministeeriumi korraldus 16. detsember 1998 nr 351 HIV-/ AIDSi küsimusi reguleerivate osakondade läbivaatamise kohta |
|
|
Valgevene Vabariigi tervishoiu ministeeriumi korraldus 25. november 2002 nr 165 Desinfitseerimise läbiviimise ja tervishoiuasutuste steriliseerimise kohta |
||
|
Valgevene Vabariigi Terviseministeeriumi otsus 04.28.2010 № 47 Valgevene Vabariigi tervishoiuse Siseministeeriumi tööministeeriumi töö- ja tunnustamise juhiste heakskiitmise juhiste heakskiitmisel \\ t |
||
Unikaalne registri number
Meditsiinilise registreerimisnumber
FSR 2011/10182.
Medical toote riigi registreerimise kuupäev
Meditsiinilise toote nimi
MILAB-IFA-HIV-HIV-ahhaat reaktiive reaktiive testimissüsteem ImmuuencentivAte Antifieli rakendamiseks inimese immuunpuudulikkuse viirustele 1 ja 2 tüüpi (HIV-1 ja HIV-2), HIV-1 rühm O ja antigeen R24 HIV-1 kohta TU 9398 -187 -05941003-2017
osana: - Immunosorbent - tablett polüstüreen 96-hästi kokkupandav eemaldajaid (või süvendid), kelle süvendites on sorteeritud kunstlikud antigeenid - GP160, GP41, P31 HIV-1, GP41 HIV-1 rühm O, GP36 HIV-2 ja antikehad Antigeen P24 HIV-1: Seadista 1 (1 tablett), Seadistage 2 (2 tabletti), seadistage 3 (5 tabletti), - konjugaat-1: komplekt 1 (1 Flash 1,2 ml), komplekti 2 (1 fl. 1,2 ml) , Määra 3 (1 fl. 3,6 ml või 3 fl. 1,2 ml), - konjugaat-2: komplekt 1 (1 fl. 2,0 ml), komplekt 2 (1 fl. 2,0 ml), seadistatud 3 (1 fl. 4,0 ml) või 2 fl. 2,0 ml), - RRK-1 - lahendus aretusjugaadi-1: komplekt 1 (1 fl. 12,0 ml), komplekti 2 (1 fl. 12,0 ml), seadistatud 3 (3 fl. 12,0 ml) , - RRK-2 - Lahendus konjugaat-2: Seadistatud 1 (1 fl. 20,0 ml), komplekt 2 (1 fl. 20,0 ml), seadistatud 3 (2 fl. 20,0 ml), - K + a-a HIV-i antikehade antikehade (1 fl. 2,0 ml) antikehade kontrollimine (1 fl. 2,0 ml), komplekt 3 (1 fl. 4,0 ml või 2 fl. 2,0 ml), - K + ag - con Troller Positiivne proov, mis sisaldab kunstlikku antigeeni P24 HIV-1: komplekt 1 (1 fl. 2,0 ml), komplekti 2 (1 fl. 2,0 ml), seadistatud 3 (1 fl. 4,0 ml või 2 pl. 2,0 ml), - k- - negatiivse proovi kontrollimine: komplekt 1 (1 fl. 2,5 ml), seadistatud 2 (1 fl. 2,5 ml), 3 (1 fl. 5,0 ml või 2 fl. 2,5 ml), - PR - pesemislahus: komplekt 1 (1 fl. 50,0 ml), komplekt 2 (1 fl. 120,0 ml) ), seadistatud 3 (2 fl. 120,0 ml), - peatusreagendi: komplekt 1 (1 fl. 25,0 ml), komplekti 2 (2 fl. 25,0 ml), seadistatud 3 (2 fl. 50,0 ml või 4 pl 25,0 ml) , - SAT - substraadipuhverlahus: Seadista 1 (1 fl. 25, 0 ml), komplekti 2 (1 fl. 25,0 ml), seadistage 3 (2 pl. 50,0 ml või 3 pl. 25,0 ml), - TMB - lahus Sisaldab 3,3 ", 5,5" -thetrametüülbensidiini: komplekt 1 (1 fl. 2,5 ml), komplekt 2 (1 fl. 2,5 ml), seadistatud 3 (2 fl. 3,5 ml või 3 fl. 2,5 ml). Tarvikud: - Polüstüreeni 96-süvendiga plaatide katted: Seadistage 1 (1 tk.), Määra 2 (2 tk) Seadistage 2 (4 tk.), Määra 3 (10 tk.), - Ühekordselt kasutatavad näpunäited: komplekt 1 (16 tk.), Määra 2 (32 tk.), Määra 3 (80 tk.) - plastist vannid vedelate reagentide jaoks: \\ t Seadistage 1 (2 tk.), Määra 2 (4 tk.), Set 3 (10 tk.), Polüetüleenpaketid Zip-Lock Lock: Seadista 1 (1 tk.), Määra 2 (2 tk.), Set 3 (3 tk.).
Organisatsiooni nimi - meditsiinilise toote taotleja
Organisatsiooni taotleja meditsiinilise toote asukoht
Hageja organisatsiooni õiguslik aadress
603014, Venemaa, Nizhny Novgorod, ul. Comintern, d. 47
Meditsiinilise toote või meditsiinilise toote tootja nimi-tootja nimi
NPO diagnostika süsteemid
Meditsiinilise toote või organisatsiooni organisatsiooni asukoht - meditsiinilise toote tootja
603093, Venemaa, Nizhny Novgorod, ul. Yablonaeva, 22, A / I 69
Meditsiiniprodukti või organisatsiooni organisatsiooni-tootja õiguslik aadress - meditsiinitoodete tootja
HIV-nakkuse õigeaegne diagnoosimine muutub äärmiselt oluliseks meetmeks, kuna varem ravi algus võib suuresti ette valmistada haiguse edasist arengut ja pikendada patsiendi eluiga. Viimastel aastatel on selle kohutava haiguse tuvastamise valdkonnas märkimisväärseid edusamme täheldatud olulisi edusamme: rohkem arenenud uurimismeetodid tulevad asendama vana testisüsteemide asendamine ja nende täpsus suureneb oluliselt.
Selles artiklis me räägime HIV-nakkuse diagnoosimise kaasaegsetest meetoditest, mis on kasulik selle probleemi õigeaegseks käsitlemiseks ja haiguse normaalse elukvaliteedi säilitamiseks.
HIV-diagnostika tehnikate
Venemaal viiakse HIV-infektsiooni diagnoosimiseks läbi standardprotseduur, mis sisaldab kahte taset:
- ELISA testisüsteem (sõeluuringute analüüs);
- immun-blot (IB).
Teisi tehnikaid saab kasutada ka diagnostikale:
- express testid.
IFA testisüsteem
Diagnostika esimeses etapis kasutatakse HIV-nakkuse tuvastamiseks skriinimiskatse (ELISA), mis põhineb laborites loodud HIV-valkudel, hõivamiseks organismis tekkinud spetsiifiliste antikehade vastuseks infektsioonile. Pärast nende suhtlemist reaktiividega (ensüümid) muudab testisüsteem indikaatorit värvi. Seejärel töödeldakse neid värvimuutusi spetsiaalsele riistvarale, mis määrab läbi analüüsi tulemuse.
Sellised IFA testid suudavad näidata tulemust pärast mõne nädala pärast HIV-nakkuse kasutuselevõttu. See analüüs ei määra viiruse olemasolu, vaid paljastab antikehade tootmise sellele. Mõnikord algab inimkehas HIV-i antikehade tootmine 2 nädala pärast nakkuse valdkonnas, kuid enamik inimesi toodetakse hiljem 3-6 nädala pärast.
Erineva tundlikkusega on neli IFA testide põlvkonda. Viimastel aastatel kasutatakse sageli testimissüsteeme III ja IV põlvkondi, mis põhinevad sünteetilistel peptiidetel või rekombinantsetel valkudel ning neil on suurem spetsiifilisus ja täpsus. Neid saab kasutada HIV-nakkuse diagnoosimiseks, HIV-i levimuse ja turvalisuse jälgimiseks doonori vere kontrollimisel. IFA testisüsteemide III ja IV põlvkonna täpsus on 93-99% (tundlikumad testid, mis on toodetud lääneriikides - 99%).
IFA-testi täitmiseks võetakse patsiendi veenide 5 ml verd. Viimase söögi ja analüüsi vahel peaks kestma vähemalt 8 tundi (reeglina, teostatakse see hommikul tühja kõhuga). Selline test on soovitatav mitte võtta varem kui 3 nädalat pärast väidetavat nakkuse (näiteks pärast kaitsmata seksuaalvahekorda uue seksuaalse partneriga).
IFA testide tulemused saadakse 2-10 päeva pärast:
- negatiivne tulemus: näitab HIV-nakkuse puudumist ja ei vaja juurdepääsu spetsialistile;
- valega negatiivne tulemus: võib täheldada infektsiooni alguses (kuni 3 nädalat), aidavate abivahendite hilisematel etappidel, millel on immuunsuse väljendunud pärssimine ja valesti läbi viidud verepreparaat;
- false-positiivne tulemus: võib täheldada teatud haigustes ja valesti läbi viidud verepreparaadiga;
- positiivne tulemus: Näitab HIV-nakkuse nakkuse, nõuab IB ja patsiendi ringlust AIDS-keskuse spetsialisti.
Miks annab IFA test valesti positiivseid tulemusi?
Vale positiivseid tulemusi IFA testide HIV võib täheldada sobimatu vere töötlemise või patsientidel sellistel tingimustel ja haigustega:
- mitu müeloomi;
- epsteini-Barri viiruse põhjustanud nakkushaigused;
- seisund pärast;
- autoimmuunhaigused;
- raseduse taustal;
- pärast vaktsineerimist.
Ülalkirjeldatud vere põhjustega võib esineda mittespetsiifilised ristsiduvad antikehad, mille tootmist ei provotseerinud HIV-nakkusega.
Viimastel aastatel on valede positiivsete tulemuste sagedus oluliselt vähenenud tootmise testisüsteemide III ja IV kasutamise tõttu, mis sisaldavad tundlikumat peptiidi ja rekombinantseid valke (need sünteesitakse in vitro geneetilise inseneriga). Pärast selliste IFA-testide kasutamise algust on valede positiivsete tulemuste sagedus oluliselt vähenenud ja on umbes 0,02-0,5%.
Valepositiivse tulemuse identifitseerimine ei tähenda, et inimene on nakatunud HIV-iga. Sellistel juhtudel soovitab IFA test (nõutav IV genereerimine).
Patsiendi verd saadetakse viite- või vahekohtulaborile koos märkus "Korda" ja seda uuritakse IFA testisüsteemi IV põlvkonnale. Kui uue analüüsi tulemus on negatiivne, kajastatakse esimene tulemus eksliku (valepositiivse) ja IB-ga. Positiivse või kahtlase tulemusega, teise katse ajal patsient on tingimata määranud IB-d pärast 4-6 nädalat HIV-nakkuse kinnitamiseks või ümberlükkamiseks.
Immun blotting
HIV-infektsiooni lõplikku diagnoosi saab paigaldada alles pärast immuunseisundi (IB) positiivse tulemuse saamist. See kasutab nitrotsellulooli riba, millele viirusvalgu rakendatakse.
Vere tara IB teostatakse veenidest. Seejärel allutatakse see spetsiaalse töötlemise ja selle seerumis sisalduvate valkude suhtes eraldatakse spetsiaalses geelis vastavalt nende laadimisele ja molekulmassile (manipulatsioon viiakse läbi spetsiaalsete seadmetega elektrivälja mõju all). Nitrotselluloosi ribad on määratud vere seerumi geelile ja blokeerides ("kahju") spetsiaalses kambris. Riba töödeldakse ja kui kasutatavate materjalide HIV-is on HIV-i antikehi, on need seotud antigeensete triipudega IB-sse ja ilmneb liinidena.
IB-d peetakse positiivseks, kui:
- ameerika CDC kriteeriumide kohaselt on kaks või kolm rida GP41, P24, GP120 / GP160;
- vastavalt American FDA kriteeriumidele - ribal on kaks rida P24, P31 ja joon GR41 või GR120 / GR160.
99,9% juhtudest näitab IB positiivne tulemus HIV-nakkuse.
Ridade puudumisel on IB negatiivne.
GR160-ga jooniste tuvastamisel on GR120 ja GR41- IB kaheldav. See tulemus võib tuvastada aadressil:
- onkoloogilised haigused;
- rasedus;
- sagedased vereülekanded.
Sellistel juhtudel on soovitatav teha uuesti uurimist kasutades komplekti teise firma. Kui pärast täiendavat IB-d on tulemus kaheldav, siis on vaja kuue kuu jooksul vaja jälgida (IB iga kolme kuu järel).
Polümeraasi ahelreaktsioon
PCR-i test võib määrata viiruse RNA. Selle tundlikkus on piisavalt suur ja see võimaldab teil tuvastada HIV-nakkuse 10 päeva pärast nakatamist. Mõnel juhul võib PCR anda valesti positiivseid tulemusi, kuna selle kõrge tundlikkus võib reageerida antikehadele teistele infektsioonidele.
See diagnostikatehnoloogia on kallis, nõuab spetsiaalsete spetsialistide ja kõrge kvalifikatsiooni. Need põhjused ei võimalda tal seda läbi viia rahvastuse massikatsetusega.
PCR kehtib sellistel juhtudel:
- tuvastada HIV vastsündinutel, kes sündisid HIV-nakkusega emadest;
- tuvastada HIV-i "aknaperioodil" või kahtlase IB-ga;
- hIV kontsentratsiooni kontrollimiseks veres;
- doonori vereuuringute jaoks.
Ainult PCR-testi puhul ei tehta HIV-i, vaid viiakse läbi täiendava diagnostilise meetodi lahendamiseks vastuoluliste olukordade lahendamiseks.
Express meetodid
Express testid, mille tulemusi saab hinnata pärast 10-15 minutit sai üheks uuendusi diagnoosimise HIV. Kõige tõhusamad ja täpsemad tulemused saadakse immunokromatograafiliste testide abil, mis põhinevad kapillaarivooluse põhimõttel. Nad on spetsiaalsed ribad, millele vedeldakse või muud uuritud vedelikke (sülje, uriini). Kui HIV-is on antikehi, ilmuvad testile 10-15 minutit hiljem värvi- ja juhtriba - positiivne tulemus. Negatiivse tulemusega ilmub ainult juhtriba.
Nagu pärast IFA teste, tuleb Express testide tulemusi kinnitada IB analüüs. Alles pärast seda võib diagnoosida HIV-nakkuse.
Kodu testimiseks on ekspresseeritud komplekte. Testige orasure Technologies1 (USA) Heakskiidetud FDA, müüdud ilma retseptita ja seda saab kasutada HIV-i tuvastamiseks. Pärast katsetamist positiivse tulemuse puhul soovitatakse patsienti teha diagnoosi kinnitamiseks spetsialiseeritud keskuses uuringu.
Ülejäänud siseriiklikud testid ei ole FDA poolt veel heaks kiidetud ja nende tulemus võib olla väga kahtlane.
Hoolimata asjaolust, et väljendavad testid on IV põlvkondade IFA testide halvemad, kasutatakse neid laialdaselt täiendavate rahvastiku testimise jaoks.
Te saate läbida teste, et tuvastada HIV-nakkuse mis tahes polükliinilises, CRH-s või spetsialiseeritud AIDS-keskustes. Venemaal viiakse nad läbi absoluutselt konfidentsiaalsena või anonüümselt. Iga patsient võib loota meditsiiniliste või psühholoogiliste nõuannete saamiseks enne või pärast analüüsi. Te peate maksma HIV-testide eest ainult kaubanduslikele meditsiiniasutustele ja nad on täidetud avalikel kliinikus ja haiglates.
Selle kohta, millisel moel saate nakatuda HIV-nakkusega nakatunud ja millised müüdid eksisteerivad nakatumise võimaluste kohta, loe
Laadimine ...