1. Карактеристики на анаеробите
2. Дијагностика на ЕМКАР
1. Распределба на анаеробни микроорганизми во природата.
Анаеробни микроорганизми се наоѓаат насекаде каде што органската материја се распаѓа без пристап до О2: во различни слоеви почва, во крајбрежна тиња, во купишта ѓубриво, во зреење сирење итн.
Анаеробите може да се најдат и во добро газирана почва, доколку има аероби кои апсорбираат О2.
Во природата се наоѓаат и корисни и штетни анаероби. На пример, во цревата на животните и луѓето има анаероби кои имаат корист за домаќинот (B. bifidus), кој игра улога на антагонист на штетната микрофлора. Овој микроб ферментира гликоза и лактоза и произведува млечна киселина.
Но, постојат гнили и патогени анаероби во цревата. Тие ги разградуваат протеините, предизвикуваат гнили и различни видовиферментација, ослободуваат токсини (B. Putrificus, B. Perfringens, B. tetani).
Разградувањето на влакна во телото на животното се врши со анаероби и актиномицети. Во основа, овој процес се одвива во дигестивен тракт. Анаеробите главно се наоѓаат во желудникот и дебелото црево.
Во почвата се наоѓаат голем број анаероби. Покрај тоа, некои од нив може да се најдат во почвата во вегетативна форма и да се размножуваат таму. На пример, B. perfringens. Како по правило, анаеробите се микроорганизми кои формираат спори. Спорните форми се многу отпорни на надворешни фактори(хемиски супстанции).
2. Анаеробиоза на микроорганизми.
И покрај различноста физиолошки карактеристикимикроорганизми - хемиски составтие се, во принцип, исти: протеини, масти, јаглени хидрати, неоргански материи.
Регулирањето на метаболичките процеси го врши ензимскиот апарат.
Терминот анаеробиоза (негација, воздух - воздух, биос - живот) е воведен од Пастер, кој прв го открил анаеробниот микроб кој носи спори B. Buturis, способен да се развива во отсуство на слободен О2 и факултативни, кој се развива во средина која содржи 0,5% O2 и може да ја врзе (на пример, B. chauvoei).
Анаеробни процеси - за време на оксидацијата, се случуваат низа дехидрогенации, во кои „2H“ секвенцијално се пренесуваат од една молекула во друга (на крајот е вклучен О2).
Во секоја фаза се ослободува енергија, која клетката ја користи за синтеза.
Пероксидазата и каталазата се ензими кои промовираат употреба или отстранување на H2O2 формиран за време на оваа реакција.
Строгите анаероби немаат механизми за врзување со молекули на кислород, така што тие не го уништуваат H2O2 Анаеробното дејство на каталазата и H2O2 се сведува на анаеробна редукција на каталазното железо со водород пероксид и. аеробна оксидацијаМолекула О2.
3. Улогата на анаеробите во патологијата на животните.
Во моментов, следните болести предизвикани од анаероби се сметаат за утврдени:
EMKAR – B. Chauvoei
Некробацилоза – B. necrophorum
Предизвикувачкиот агенс на тетанус е B. Tetani.
Тешко е да се разликуваат овие болести врз основа на нивниот тек и клинички знаци и само бактериолошки истражувањаовозможуваат да се изолира соодветниот патоген и да се утврди причината за болеста.
Некои анаероби имаат неколку серотипови и секој од нив предизвикува разни болести. На пример, B. perfringens - 6 серогрупи: A, B, C, D, E, F - кои се разликуваат во биолошки својстваи формирање на токсини и предизвикуваат разни болести. Значи
B. perfringens тип А – гасна гангрена кај луѓето.
B. perfringens тип Б – Б. јагнешко – дизентерија – анаеробна дизентеријаво јагниња.
B. perfringens тип C – (B. paludis) и тип D (B. ovitoxicus) – инфективна ентероксемија кај овците.
B. perfringens тип Е – интестинална интоксикација кај телињата.
Анаеробите играат одредена улога во појавата на компликации кај други болести. На пример, со свинска чума, паратифус, шап и сл., како резултат на што процесот станува покомплициран.
4. Методи за создавање анаеробни услови за одгледување анаероби.
Постојат: хемиски, физички, биолошки и комбинирани.
Хранливи медиуми и одгледување анаероби на нив.
1.Течни хранливи материи.
А) Месен пептон супа од црн дроб - медиум Кит-Тороза - е главниот течен хранлив медиум
За да го подготвите, употребете 1000 гр говедски црн дроб, кој се прелива со 1,л вода од чешма и се стерилизира 40 минути. На t=110 C
Разредете со 3 пати поголема количина на MPB
Поставив pH = 7,8-8,2
За 1 л. чорба 1,25 гр
Додадете мали парчиња црн дроб
На површината на медиумот се става вазелин масло.
Автоклав t=10-112 C – 30-45 мин.
Б) Мозочна средина
Состојки: свеж говедски мозок (најдоцна до 18 часа), излупен и мелено во мелница за месо
Се меша со вода 2:1 и се поминува низ сито
Смесата се истура во епрувети и се стерилизира 2 часа на t=110
Медиуми за цврста култура
А) Зеизмер агар за шеќер во крвта се користи за изолирање на чиста култура и одредување на шемата на раст.
Цајслер формула за агар
3% MPA се флашира во 100 ml. и стерилизирајте
Додадете стерилен во стопениот агар! 10 мл. 20% гликоза (т.с. 2%) и 15-20 ml. стерилна крв од овци, говеда, коњи
Исушени
Б) желатин - во колона
За да се одреди типот на анаероби, неопходно е да се проучат нивните следниве карактеристики:
Морфолошки, културолошки, патолошки и серолошки, земајќи го предвид нивниот потенцијал за варијабилност.
Морфолошки и биохемиски својства на анаеробите
Морфолошките карактеристики се карактеризираат со изразена разновидност. Формите на микроби во размаските подготвени од органи остро се разликуваат од формите на микроби добиени во вештачки хранлив медиум. Почесто имаат форма на прачки или конци, а поретко коки. Истиот патоген може да биде во форма на прачки или во групирани нишки. Во старите култури може да се најде во форма на коки (на пример, B. Necrophorum).
Најголеми се B. Gigas и B. Perfringens со должина до 10 микрони. И ширината е 1-1,5 микрони.
Нешто помалку од B. Oedematiens 5-8 x 0,8 -1,1. Во исто време, должината на филаментите Vibrion Septicum достигнува 50-100 микрони.
Меѓу анаеробите, повеќето се микроорганизми кои формираат спори. Спорите се наоѓаат различно кај овие микроорганизми. Но почесто е од типот Clostridium (клостер - вретено Спорите можат да имаат тркалезна овална форма). Локацијата на спорите е карактеристична за одредени видови бактерии: во центарот - прачки B. Perfringens, B. Oedematiens итн., или субтерминално (нешто поблиску до крајот) - Vibrion Septicum, B. Histolyticus итн. терминално Б. Тетани
Спорите се произведуваат едно по едно по клетка. Спорите обично се формираат по смртта на животното. Оваа карактеристика е поврзана со функционалната намена на спорите како зачувување на видот во неповолни услови.
Некои анаероби се подвижни, а флагелите се распоредени во перитрична шема.
Капсулата има заштитна функција и содржи резервни хранливи материи.
Основни биохемиски својства на анаеробните микроорганизми
Врз основа на нивната способност да разградуваат јаглени хидрати и протеини, анаеробите се поделени на сахаролитички и протеолитички.
Опис на најважните анаероби.
Фесер - 1865 година во поткожното ткиво на крава.
B. Schauvoei е предизвикувачкиот агенс на акутна бесконтактна инфективна болест која главно ги погодува говедата и овците. Патогенот е откриен во 1879-1884 година. Арлуенк, Корневен, Томас.
Морфологија и боење: кај размаски подготвени од патолошки материјал (едематозна течност, крв, зафатени мускули, серозни мембрани) B. Schauvoei има изглед на шипки со заоблени краеви 2-6 микрони. x 0,5-0,7 микрони. Обично стапчињата се наоѓаат поединечно, но понекогаш може да се најдат кратки синџири (2-4). Не формира нишки. Има полиморфна форма и често има облик на отечени бацили, лимони, сфери и дискови. Полиморфизмот е особено јасно забележан кај размаските подготвени од животинско ткиво и медиуми богати со протеини и свежа крв.
B. Schauvoei е подвижна прачка со 4-6 флагели на секоја страна. Не формира капсули.
Спорите се големи, со кружен до долгнавест облик. Спорот се наоѓа централно или подтерминално. Спорите се формираат и во ткивата и надвор од телото. На вештачки хранливи материи, спорите се појавуваат во рок од 24-48 часа.
B. Schauvoei е обоен со речиси сите бои. Во младите култури G+, кај старите -G- стапчињата ја перцепираат бојата гранули.
Болестите на EMCAR се од септичка природа и затоа Cl. Schauvoei се наоѓаат не само во органи со патолошки абнормалности, туку и во перикарден ексудат, плеврата, бубрезите, црниот дроб, слезината, лимфните јазли, коскена срж, во кожата и епителниот слој, во крвта.
Во неотворен труп, бацилите и другите микроорганизми брзо се размножуваат и затоа се изолира мешана култура.
Културни својства. На IPPB Cl. Chauvoei произведува изобилен раст за 16-20 часа. Во првите часови има униформа заматеност, до 24 часа има постепено расчистување, а до 36-48 часа колоната за чорба е целосно проѕирна, а на дното на епрувета има талог од микробни тела. Со силно тресење, седиментот се распаѓа во униформа заматеност.
На чорбата на Мартин - по 20-24 часа раст, се забележува заматеност и изобилство на еволуција на гасови. По 2-3 дена има снегулки на дното, медиумот се чисти.
Cl. Chauvoei расте добро на мозочниот медиум, формирајќи бр голем број нагасови Поцрнување на медиумот не се јавува.
На Zeismer агар (крв) формира колонии слични на копче од мајка на бисер или лист од грозје, рамни, со подигнат хранлив медиум во центарот, бојата на колониите е бледо виолетова.
B. Schauvoei го коагулира млекото во рок од 3-6 дена. Коагулираното млеко има изглед на мека, сунѓереста маса. Пептонизација на млекото не се јавува. Не го втечнува желатинот. Не ја втечнува замрзнатата сурутка. Индол не се формира. Нитритите не се редуцираат на нитрати.
Вирулентноста на вештачките хранливи материи брзо се губи. За да се одржи, неопходно е да се изврши премин низ телото заморчиња. Во парчиња исушени мускули ја задржува својата вирулентност многу години.
B. Schauvoei ги разградува јаглехидратите:
Гликоза
Галактоза
Левулез
Сахароза
Лактоза
Малтоза
Не се распаѓа - манитол, дулцит, глицерин, инулин, салицин. Сепак, мора да се признае дека односот на Cl. Chauvoei да јаглехидрати е непостојана.
На Veillon агар + 2% гликоза или серумски агар, се формираат кружни или слични на леќа колонии со ластари.
Антигенска структура и формирање на токсини
Cl. Chauvoei има O - соматско-термостабилен антиген, неколку H-антигени - термолабилен, како и спори S-антиген.
Cl. Chauvoei - предизвикува формирање на аглутинини и врзувачки антитела за комплементот. Формира голем број силни хемолитички, некротизирачки и смртоносни протеински токсини кои ја одредуваат патогеноста на патогенот.
Отпорот се должи на присуството на спори. Во гнили трупови опстојува до 3 месеци, во купишта ѓубриво со остатоци од животинско ткиво - 6 месеци. Спорите опстојуваат во почвата до 20-25 години.
Врие во зависност од хранливата средина 2-12 минути (мозок), чорби култури 30 минути. – t=100-1050С, во мускулите – 6 часа, во говедско месо – 2 години, директна сончева светлина – 24 часа, 3% раствор на формалин – 15 минути, 3% раствор на карболна киселина слабо делува на спорите, 25% NaOH – 14 часа, 6% NaOH – 6-7 дена. Ниска температуранема ефект врз споровите.
Чувствителност на животните.
ВО природни условистрада од добиток на возраст од 3 месеци или повеќе. до 4 години. Животни до 3 месеци не се разболуваат (колострален имунитет), над 4 години – се разболеле животните латентна форма. Не може да се исклучи болеста до 3 месеци. и над 4 години.
Се разболуваат и овци, биволи, кози и елени, но ретко.
Камилите, коњите, свињите се имуни (забележани се случаи).
Луѓето, кучињата, мачките, кокошките се имуни.
Лабораториски животни - заморчиња.
Периодот на инкубација е 1-5 дена. Прогресијата на болеста е акутна. Болеста започнува неочекувано, температурата се зголемува на 41-43 C. Тешка депресија престанува да џвака мастика. Честопати симптомите се безпричинска куцане, што укажува на оштетување на длабоките слоеви на мускулите.
Воспалителни тумори се појавуваат во торзото, долниот дел на грбот, рамото, поретко градната коска, вратот, субмандибуларниот простор - тврди, жешки, болни и набргу стануваат ладни и безболни.
Ударни - темпо звук
Палпација - крупација.
Кожата добива темно сина боја. Овци - на местото на туморот излегува волна.
Времетраењето на болеста е 12-48 часа, поретко 4-6 дена.
Пат. анатомија: трупот е многу отечен. Од носот се ослободува крвава пена со кисело мирис Поткожното ткиво на местото на оштетување на мускулите содржи инфилтрати, хеморагии и гасови. Мускулите се во црно-црвена боја, покриени со хеморагии, суви, порозни и крцкаат кога се притискаат. Школки со хеморагии. Слезината и црниот дроб се зголемени.
Анаеробни организми
Аеробните и анаеробните бактерии се прелиминарно идентификувани во течен хранлив медиум според градиентот на концентрацијата на O 2:
1. Задолжително аеробик(гладни за кислород) бактерии најмногусе собираат на врвот на цевката за да се апсорбираат максимален износкислород. (Исклучок: микобактерии - растење како филм на површината поради восочно-липидната мембрана.)
2. Задолжителна анаеробнабактериите се собираат на дното за да избегнат кислород (или не растат).
3. Факултативнобактериите се собираат главно во горниот дел (најповолни од гликолизата), но тие можат да се најдат низ целиот медиум, бидејќи тие не зависат од О2.
4. Микроаерофилисе собираат во горниот дел на епрувета, но нивниот оптимум е ниска концентрација на кислород.
5. АеротолерантенАнаеробите не реагираат на концентрациите на кислород и се рамномерно распоредени низ епрувета.
Анаероби- организмите кои добиваат енергија во отсуство на кислород преку фосфорилација на подлогата, финалните производи од нецелосната оксидација на подлогата можат да се оксидираат за да се произведе повеќе енергија во форма на АТП во присуство на финалниот акцептор на протон од организми кои вршат оксидативна фосфорилација.
Анаеробите се голема група на организми, и на микро и на макро ниво:
- анаеробни микроорганизми- голема група прокариоти и некои протозои.
- макроорганизми - габи, алги, растенија и некои животни (класа на фораминифери, повеќето хелминти (класа на метили, тенија, кружни црви (на пример, кружни црви)).
Покрај тоа, анаеробната оксидација на гликозата игра важна улога во функционирањето на напречно-пругастите мускули на животните и луѓето (особено во состојба на ткивна хипоксија).
Класификација на анаероби
Според утврдената класификација во микробиологијата, постојат:
- Факултативни анаероби
- Капнеистички анаероби и микроаерофили
- Аеротолерантни анаероби
- Умерено строги анаероби
- Задолжителни анаероби
Ако организмот може да се префрли од еден на друг метаболички пат (на пример, од анаеробно во аеробно дишење и назад), тогаш тој условно се класифицира како факултативни анаероби .
До 1991 година по микробиологија имаше час капнеични анаероби, барајќи намалена концентрација на кислород и зголемена концентрација на јаглерод диоксид (Говедски тип Brucella - B. abortus)
Умерено строг анаеробен организам преживува во средина со молекуларен О 2, но не се размножува. Микроаерофилите се способни да преживеат и да се размножуваат во средина со низок парцијален притисок од O 2.
Ако организмот не може да се „префрли“ од анаеробно во аеробно дишење, но не умре во присуство на молекуларен кислород, тогаш тој припаѓа на групата аеротолерантни анаероби. На пример, млечна киселина и многу бактерии на маслена киселина
ЗадолжителноАнаеробите умираат во присуство на молекуларен кислород О2 - на пример, претставници на родот бактерии и археи: Бактериоиди, Фусобактериум, Бутиривибрио, Метанобактерија). Таквите анаероби постојано живеат во средина без кислород. Задолжителни анаероби вклучуваат некои бактерии, квасци, флагелати и цилијати.
Токсичност на кислородот и неговите форми за анаеробни организми
Околината што содржи кислород е агресивна кон органските форми на живот. Ова се должи на формирањето на реактивни кислородни видови за време на животни процеси или под влијание на различни форми јонизирачко зрачење, значително потоксичен од молекуларниот кислород O 2 . Факторот што ја одредува одржливоста на организмот во кислородна средина е присуството на функционален антиоксидативен систем способен да елиминира: супероксид анјон (O 2 -), водороден пероксид (H 2 O 2), единечен кислород (O.), како како и молекуларен кислород ( O 2) од внатрешно опкружувањетело. Најчесто, таквата заштита е обезбедена од еден или повеќе ензими:
- супероксид дисмутаза, елиминирајќи го супероксидниот анјон (O 2 -) без енергетска корист за телото
- каталаза, елиминирајќи го водород пероксид (H 2 O 2) без енергетска корист за телото
- цитохром- ензим одговорен за пренос на електрони од NAD H во O 2. Овој процес обезбедува значителни енергетски придобивки за телото.
Аеробните организми најчесто содржат три цитохроми, факултативните анаероби - еден или два, облигационите анаероби не содржат цитохроми.
Анаеробните микроорганизми можат активно да влијаат на животната средина, создавајќи соодветен редокс потенцијал на околината (на пр. Cl. perfringens). Некои инокулирани култури на анаеробни микроорганизми, пред да почнат да се размножуваат, ја намалуваат рН 20 од вредност на
Во исто време, гликолизата е карактеристична само за анаеробите, кои, во зависност од производите на финалната реакција, се поделени на неколку видови на ферментација:
- ферментација на млечна киселина - род Лактобацилус ,Стрептокок , Бифидобактерија, како и некои ткива на повеќеклеточни животни и луѓе.
- алкохолна ферментација - Saccharomycetes, Candida (организми од габичното царство)
- мравја киселина - семејство на ентеробактерии
- маслен киселина - некои видови на клостридија
- пропионска киселина - пропионобактерии (на пример, Propionibacterium acnes)
- ферментација со ослободување на молекуларен водород - некои видови на Clostridia, Stickland ферментација
- ферментација на метан - на пр. Метанобактерија
Како резултат на распаѓањето на гликозата, се трошат 2 молекули и се синтетизираат 4 молекули на АТП. Така, вкупниот принос на ATP е 2 ATP молекули и 2 NADH 2 молекули. Пируватот добиен за време на реакцијата клетката различно го користи во зависност од тоа каков тип на ферментација следи.
Антагонизам помеѓу ферментација и гниење
Во процесот на еволуција, беше формиран и консолидиран биолошкиот антагонизам на ферментативната и гнилостната микрофлора:
Разградувањето на јаглехидратите од страна на микроорганизмите е придружено со значително намалување на животната средина, додека разградувањето на протеините и амино киселините е придружено со зголемување (алкализација). Прилагодувањето на секој организам на одредена еколошка реакција игра витална улога во природата и човечкиот живот, на пример, благодарение на процесите на ферментација, се спречува гниењето на силажата, ферментираниот зеленчук и млечните производи.
Одгледување на анаеробни организми
Изолацијата на чиста култура на анаероби е шематски
Одгледувањето на анаеробни организми е главно задача на микробиологијата.
За одгледување на анаероби, се користат специјални методи, чија суштина е да се отстрани воздухот или да се замени со специјализирана гасна мешавина (или инертни гасови) во запечатени термостати - анаеростати .
Друг начин за одгледување на анаероби (најчесто микроорганизми) на хранливи материи е да се додадат редуцирачки супстанции (гликоза, натриум мравја киселина итн.) кои го намалуваат потенцијалот за редокс.
Заеднички медиум за култура за анаеробни организми
За општа средина Вилсон - Блеросновата е агар-агар со додавање на гликоза, натриум сулфит и железен хлорид. Клостридиите формираат црни колонии на оваа средина поради редукцијата на сулфитот во сулфиден анјон, кој се комбинира со катјоните на железо (II) за да произведе црна сол. Како по правило, црните колонии на овој медиум се појавуваат во длабочините на колоната на агарот.
среда Кита - Тароцисе состои од супа од месо-пептон, 0,5% гликоза и парчиња црн дроб или мелено месо за апсорпција на кислород од околината. Пред сеидбата, медиумот се загрева во врела водена бања 20 - 30 минути за да се отстрани воздухот од медиумот. По сеидбата, хранливата средина веднаш се покрива со слој од парафин или вазелин за да се изолира од кислород.
Општи методи на култура за анаеробни организми
ГасПак- систем хемискиобезбедува постојана гасна мешавина прифатлива за раст на повеќето анаеробни микроорганизми. Во затворен сад, водата реагира со натриум борохидрид и таблети натриум бикарбонат за да произведе водород и јаглерод диоксид. Водородот потоа реагира со кислородот во мешавината на гас на паладиум катализатор за да формира вода, која потоа реагира по втор пат во реакцијата на хидролиза на борохидридот.
Овој метод беше предложен од Бруер и Алгаер во 1965 година. Програмерите воведоа торбичка за еднократна употреба за генерирање на водород, која подоцна ја развија во кесички кои генерираат јаглерод диоксид и содржат внатрешен катализатор.
Цајслер методсе користи за изолирање на чисти култури на анаероби кои формираат спори. За да го направите ова, инокулирајте на медиумот Kitt-Tarozzi, загрејте го 20 минути на 80 °C (да се уништи вегетативната форма), наполнете го медиумот со вазелин масло и инкубирајте 24 часа во термостат. Потоа тие се инокулираат на агар за шеќер во крвта за да се добијат чисти култури. По 24-часовно одгледување, колониите од интерес се проучуваат - тие се субкултурираат на медиумот Кит-Тароци (проследени со следење на чистотата на изолираната култура).
Фортнер метод
Фортнер метод- инокулациите се вршат на петриева чинија со задебелен слој од медиум, поделен на половина со тесен жлеб исечен во агарот. Една половина се сее со култура аеробни бактерии, од друга - анаеробни. Рабовите на садот се полнат со парафин и се инкубираат во термостат. Во почетокот се забележува растот на аеробната микрофлора, а потоа (по апсорпцијата на кислород) растот на аеробната микрофлора нагло престанува и започнува растот на анаеробната.
Вајнберг методсе користи за добивање чисти култури на задолжителни анаероби. Културите што се одгледуваат на подлогата Kitta-Tarozzi се пренесуваат во шеќерна супа. Потоа, со помош на пастер пипета за еднократна употреба, материјалот се пренесува во тесни епрувети (Вигнал цевки) со шеќерен месен-пептон агар, потопувајќи ја пипетата до дното на епрувета. Инокулираните цевки брзо се ладат, што овозможува бактерискиот материјал да се фиксира во дебелината на стврднатиот агар. Цевките се инкубираат во термостат, а потоа се испитуваат одгледуваните колонии. Кога ќе се најде колонија од интерес, на негово место се прави рез, материјалот брзо се избира и се инокулира на медиумот Kitta-Tarozzi (со последователна контрола на чистотата на изолираната култура).
метод Перец
метод Перец- во стопениот и изладен шеќерен агар-агар се додава култура на бактерии и се истура под стакло поставено на стапчиња од плута (или фрагменти од кибрит) во петриева чинија. Методот е најмалку сигурен од сите, но прилично едноставен за употреба.
Диференцијални дијагностички хранливи материи
- среда Гиса(„разновиден ред“)
- среда Ресел(Расел)
- среда Плоскиреваили бактоагар „Ј“
- Бизмут сулфит агар
Хис медиуми: Во 1% пептонска вода, додадете 0,5% раствор од одреден јаглени хидрати (гликоза, лактоза, малтоза, манитол, сахароза, итн.) и киселинско-базниот индикатор на Андреде, истурете во епрувети во кои се става плови за заробување гасовити производи формирани при распаѓање на јаглеводороди.
Околината на Расел(Расел) се користи за проучување на биохемиските својства на ентеробактериите (Шигела, салмонела). Содржи хранлив агар агар, лактоза, гликоза и индикатор (бромотимол сино). Бојата на околината е тревна зелена. Обично се подготвува во епрувети од 5 ml со закосена површина. Сеидбата се изведува со боцкање во длабочината на столбот и шарење по закосената површина.
Среда Плоскирева(bactoagar F) е диференцијален дијагностички и селективен медиум, бидејќи го инхибира растот на многу микроорганизми и го промовира растот патогени бактерии(предизвикувачки агенси на тифусна треска, паратифусна треска, дизентерија). Лактоза-негативните бактерии формираат безбојни колонии на овој медиум, додека лактоза-позитивните бактерии формираат црвени колонии. Медиумот содржи агар, лактоза, блескаво зелена, жолчни соли, минерални соли, индикатор (неутрално црвено).
Бизмут сулфит агаре наменет за изолација на салмонела во чиста форма од инфициран материјал. Содржи триптичен хидролизат, гликоза, фактори за раст на салмонела, брилијантен зелен и агар. Диференцијалните својства на медиумот се засноваат на способноста на салмонелата да произведува водород сулфид и на нивната отпорност на присуство на сулфид, брилијантна зелена боја и бизмут цитрат. Колониите се означени црно со бизмут сулфид (техниката е слична на медиумот Вилсон - Блер).
Метаболизам на анаеробни организми
Метаболизмот на анаеробните организми има неколку различни подгрупи:
Анаеробен енергетски метаболизам во ткивата лицеИ животни
Анаеробно и аеробно производство на енергија во човечки ткива
Некои животински и човечки ткива се високо отпорни на хипоксија (особено мускулното ткиво). Во нормални услови, синтезата на АТП се случува аеробно, и под интензивен стрес мускулна активностКога доставувањето на кислород до мускулите е тешко, во состојба на хипоксија, како и при воспалителни реакции во ткивата, доминираат анаеробни механизми на регенерација на АТП. Во скелетните мускули, идентификувани се 3 типа на анаеробни и само еден аеробен пат за регенерација на АТП.
3 типа на анаеробни патишта за синтеза на АТП
Анаеробните вклучуваат:
- Механизам на креатин фосфатаза (фосфогена или алактатна) - рефосфорилација помеѓу креатин фосфат и АДП
- Миокиназа - синтеза (инаку ресинтеза) ATP во реакцијата на трансфосфорилација на 2 ADP молекули (аденилат циклаза)
- Гликолитично - анаеробно разградување на резервите на гликоза или гликоген во крвта, што резултира со формирање
Организмите кои можат да добијат енергија во отсуство на кислород се нарекуваат анаероби. Покрај тоа, групата анаероби вклучува и микроорганизми (протозои и група прокариоти) и макроорганизми, кои вклучуваат некои алги, габи, животни и растенија. Во нашата статија ќе ги разгледаме подетално анаеробните бактерии кои се користат за третман на отпадни води во локалните постројки за третман на отпадни води. Бидејќи аеробните микроорганизми можат да се користат заедно со нив во постројките за третман на отпадни води, ние ќе ги споредиме овие бактерии.
Сфативме што се анаероби. Сега вреди да се разбере на кои типови се поделени. Во микробиологијата се користи следната табела за класификација на анаеробите:
- Факултативни микроорганизми. Факултативните анаеробни бактерии се бактерии кои можат да го променат својот метаболички пат, односно можат да го променат дишењето од анаеробно во аеробно и обратно. Може да се тврди дека живеат опционално.
- Капнеистички претставници на групатаспособни да живеат само во средини со ниска содржина на кислород и зголемена содржинајаглерод диоксид.
- Умерено строги организмиможе да преживее во средини што содржат молекуларен кислород. Меѓутоа, овде тие не се во можност да се репродуцираат. Макроаерофилите можат и да преживеат и да се репродуцираат во средини со намален парцијален притисок на кислород.
- Аеротолерантни микроорганизмисе разликуваат по тоа што не можат да живеат факултативно, односно не се во можност да преминат од анаеробно во аеробно дишење. Сепак, тие се разликуваат од групата на факултативни анаеробни микроорганизми по тоа што не умираат во средина со молекуларен кислород. Оваа група ги вклучува повеќето бактерии на маслен киселина и некои видови микроорганизми на млечна киселина.
- Задолжителни бактериибрзо умираат во средина која содржи молекуларен кислород. Тие се способни да живеат само во услови на целосна изолација од него. Оваа група вклучува цилијати, флагелати, некои видови бактерии и квасец.
Ефект на кислородот врз бактериите
Секоја средина која содржи кислород има агресивен ефект врз органските форми на живот. Работата е дека за време на животот на различни форми на живот или поради влијанието на одредени видови јонизирачко зрачење, се формираат реактивни кислородни видови, кои се потоксични од молекуларните супстанции.
Главниот одлучувачки фактор за опстанокот на живиот организам во кислородна средина е присуството на антиоксиданс функционален систем, кој е способен за елиминација. Обично вака заштитни функциисе обезбедуваат од еден или неколку ензими одеднаш:
- цитохром;
- каталаза;
- супероксид дисмутаза.
Покрај тоа, некои анаеробни бактерии од факултативен вид содржат само еден вид ензим - цитохром. Аеробните микроорганизми имаат дури три цитохроми, па затоа напредуваат во кислородна средина. А задолжителните анаероби воопшто не содржат цитохром.
Сепак, некои анаеробни организми можат да влијаат на нивната околина и да создадат соодветен потенцијал за редокс. На пример, пред да почнат да се размножуваат, одредени микроорганизми ја намалуваат киселоста на околината од 25 на 1 или 5. Тоа им овозможува да се заштитат со посебна бариера. И аеротолерантни анаеробни организми, кои ослободуваат водороден пероксид за време на нивните животни процеси, можат да ја зголемат киселоста на околината.
Важно: за да се обезбеди дополнителна антиоксидантна заштита, бактериите синтетизираат или акумулираат антиоксиданти со мала молекуларна тежина, кои вклучуваат витамини А, Е и Ц, како и лимонска и други видови киселини.
Како анаеробите добиваат енергија?
- Некои микроорганизми добиваат енергија преку катаболизам на различни аминокиселински соединенија, како што се протеини и пептиди, како и на самите амино киселини. Вообичаено, овој процес на ослободување енергија се нарекува гниење. И самата средина, во енергетската размена на која се забележуваат многу процеси на катаболизам на аминокиселинските соединенија и самите аминокиселини, се нарекува гнилостна средина.
- Други анаеробни бактерии се способни да разградуваат хексози (гликоза). Во овој случај, може да се користат различни патеки за разделување:
- гликолиза После тоа, во околината се случуваат процеси на ферментација;
- оксидативен пат;
- Реакциите на Ентнер-Дудороф, кои се одвиваат во услови на манан, хексуронска или глуконска киселина.
Покрај тоа, само анаеробните претставници можат да користат гликолиза. Може да се подели на неколку видови на ферментација во зависност од производите што се формираат по реакцијата:
- алкохолна ферментација;
- ферментација на млечна киселина;
- Видови на мравја киселина Enterobacterium;
- ферментација на маслен киселина;
- реакција на пропионска киселина;
- процеси со ослободување на молекуларен кислород;
- ферментација на метан (се користи во септички јами).
Карактеристики на анаероби за септичка јама
Анаеробните септички јами користат микроорганизми кои се способни да преработуваат отпадна вода без пристап до кислород. Како по правило, во одделот каде што се наоѓаат анаеробите, процесите на распаѓање на отпадните води значително се забрзуваат. Како резултат на овој процес, цврстите соединенија паѓаат на дното во форма на седимент. Во исто време, течната компонента на отпадната вода е квалитативно прочистена од различни органски подмножества.
Во текот на животот на овие бактерии се формираат голем број цврсти соединенија. Сите тие се сместуваат на дното на локалната пречистителна станица, па затоа и треба редовно чистење. Доколку чистењето не се изврши навремено, ефективната и координирана работа на пречистителната станица може целосно да се наруши и да се стави надвор од функција.
Внимание: тињата добиена по чистење на септичка јама не треба да се користи како ѓубриво, бидејќи содржи штетни микроорганизми кои можат да и наштетат на животната средина.
Бидејќи анаеробните претставници на бактерии произведуваат метан во текот на нивните животни процеси, постројките за третман на отпадни води кои работат со користење на овие организми мора да бидат опремени со ефективен систем за вентилација. Во спротивно, непријатниот мирис може да го расипе околниот воздух.
Важно: ефикасноста на третман на отпадни води со помош на анаероби е само 60-70%.
Недостатоци на користење анаероби во септички јами
Анаеробните претставници на бактерии кои се дел од различни биолошки производи за септички јами ги имаат следните недостатоци:
- Отпадот што се создава по преработката на отпадните води од бактерии не е погоден за ѓубрење на почвата поради содржината на штетни микроорганизми во неа.
- Бидејќи за време на животот на анаеробите се формира голема количина густ талог, неговото отстранување мора да се врши редовно. За да го направите ова, ќе мора да ги повикате правосмукалките.
- Прочистувањето на отпадните води со помош на анаеробни бактерии не се случува целосно, туку само до максимум 70 проценти.
- Пречистителна станица која работи со употреба на овие бактерии може да испушта многу непријатен мирис, што се должи на фактот што овие микроорганизми испуштаат метан во текот на нивните животни процеси.
Разлика помеѓу анаеробите и аеробите
Главната разлика помеѓу аеробите и анаеробите е тоа што првите се способни да живеат и да се размножуваат во услови со висока содржина на кислород. Затоа, таквите септички јами мора да бидат опремени со компресор и аератор за пумпање воздух. Вообичаено, овие пречистителни станици на самото место не испуштаат таков непријатен мирис.
Спротивно на тоа, анаеробните претставници (како што покажува микробиолошката табела опишана погоре) не бараат кислород. Покрај тоа, некои од нивните видови можат да умрат кога висока содржинана оваа супстанца. Затоа, таквите септички јами не бараат пумпање воздух. За нив е важно само да се отстрани добиениот метан.
Друга разлика е количеството на формиран талог. Во аеробните системи, количината на седимент е многу помала, така што структурата може да се чисти многу поретко. Покрај тоа, септичката јама може да се исчисти без да се повика правосмукалка. За да го отстраните густиот талог од првата комора, можете да земете обична мрежа, а за да ја испумпате активираната тиња формирана во последната комора, доволно е да користите пумпа за одводнување. Покрај тоа, активираната тиња од пречистителна станица со користење на аероби може да се користи за оплодување на почвата.
Анаеробната инфекција е брзо развиен патоген процес кој влијае на различни органи и ткива во телото и често доведува до смрт. Сите луѓе се подложни на тоа, без разлика на пол или возраст. Навремената дијагноза и третман може да го спасат животот на една личност.
Што е тоа?
Анаеробната инфекција е заразна болест која се јавува како компликација на разни повреди. Нејзините предизвикувачки агенси се микроорганизми кои формираат спори или кои не формираат спори кои добро се развиваат во средина без кислород или со мала количина на кислород.Анаеробите се секогаш присутни во нормалната микрофлора, мукозните мембрани на телото, во гастроинтестиналниот тракт и генитоуринарен систем. Тие се класифицирани како опортунистички микроорганизми бидејќи се природни жители на биотопите на живиот организам.
Со намалување на имунитетот или влијание на негативни фактори, бактериите почнуваат активно да се размножуваат неконтролирано, а микроорганизмите се претвораат во патогени и стануваат извори на инфекција. Нивните отпадни производи се опасни, токсични и доста агресивни материи. Тие се способни лесно да навлезат во клетките или другите органи на телото и да ги инфицираат.
Во телото, некои ензими (на пример, хијалуронидаза или хепариназа) ја зголемуваат патогеноста на анаеробите, како резултат на што вторите почнуваат да ги уништуваат влакната на мускулите и сврзното ткиво, што доведува до нарушување на микроциркулацијата. Садовите стануваат кревки, црвените крвни зрнца се уништуваат. Сето ова предизвикува развој на имунопатолошко воспаление на крвните садови - артерии, вени, капилари и микротромбоза.
Опасноста од болеста е поврзана со висок процент на смртни случаи, па затоа е исклучително важно навреме да се забележи почетокот на инфекцијата и веднаш да се започне со нејзино лекување.
Причини за развој на инфекција
Постојат неколку главни причини зошто се јавува инфекција:
- Создавање соодветни условиза животот на патогените бактерии. Ова може да се случи:
- кога стерилните ткива се изложени на активна внатрешна микрофлора;
- при употреба на антибиотици кои немаат ефект врз анаеробните грам-негативни бактерии;
- во случај на проблеми со циркулацијата, на пример, во случај на хируршка интервенција, тумори, повреди, влез на туѓо тело, васкуларни заболувања, ткивна некроза.
- Инфекција на ткиво со аеробни бактерии. Тие, пак, создаваат потребните условиза животот на анаеробните микроорганизми.
- Хронични заболувања.
- Некои тумори кои се локализирани во цревата и главата често се придружени со оваа болест.
Видови анаеробни инфекции
Се разликува во зависност од тоа кои агенси е испровоцирано и во која област:Хируршка инфекција или гасна гангрена
Анаеробна хируршка инфекција или гасна гангрена- ова е сложена комплексна реакција на телото на влијанието на специфични патогени. Ова е една од најтешките и често неизлечиви компликации на раните. Во овој случај, пациентот е загрижен за следниве симптоми:- зголемена болка со чувство на исполнетост, бидејќи се јавува формирање на гас во раната;
- непријатен мирис;
- излез од раната на гнојна хетерогена маса со меурчиња од гас или прошарани со маснотии.
Анаеробната хируршка инфекција е ретка, а нејзината појава е директно поврзана со нарушување на антисептикот и санитарни стандардисо правење хируршки операции.
Анаеробни клостридијални инфекции
Предизвикувачките агенси на овие инфекции се задолжителни бактерии кои живеат и се размножуваат во средина без кислород - претставници на клостридии кои формираат спори (Грам-позитивни бактерии). Друго име за овие инфекции е клостридиоза.Во овој случај, патогенот влегува во човечкото тело од надворешна средина. На пример, ова се следниве патогени:
- тетанус;
- ботулизам;
- гасна гангрена;
- токсични инфекции поврзани со конзумирање на неквалитетна контаминирана храна.
Анаеробни не-клостридијални инфекции
За разлика од задолжителните бактерии, претставниците на факултативните видови се способни да преживеат во присуство на кислородна средина. Предизвикувачките агенси се:- (глобуларни бактерии);
- шигела;
- Ешерихија;
- Јерсинија.
Во гинекологија
Микрофлората на женскиот генитален тракт е богата со различни микроорганизми, вклучително и анаероби. Тие се дел од сложениот микроеколошки систем кој придонесува за нормално функционирањегениталиите на жената. Анаеробната микрофлора е директно поврзана со појавата на тешки гнојно-воспалителни гинеколошки заболувања, на пример, акутен бартолинитис, акутен салпингитис и пиосалпинкс.Пенетрацијата на анаеробната инфекција во женското тело е олеснета со:
- повреди на меките ткива на вагината и перинеумот, на пример, за време на породување, за време на абортус или инструментални прегледи;
- разни вагинитис, цервицитис, цервикална ерозија, тумори на гениталниот тракт;
- остатоци од мембрани, плацента, згрутчување на крвта по раѓањето во матката.
Квалификација на анаеробни инфекции според локализацијата на нејзиниот извор
Истакнете следните типовианаеробни инфекции:
- Инфекција на меките ткива и кожата . Оваа болест е предизвикана од анаеробни грам-негативни бактерии. Станува збор за површни заболувања (целулит, заразени чиреви на кожата, последици од основните болести - егзема, шуга и други), како и поткожни или постоперативни инфекции - поткожни улкуси, гасна гангрена, рани од каснување, изгореници, заразени чирови кај дијабетес, васкуларни заболувања. Со длабока инфекција, се јавува некроза на меките ткива, во која има акумулација на гас, сив гној со грд мирис.
- Инфекција на коските. Септичниот артритис често е последица на напреднат Винсент, остеомиелитис - болест од гноен-некротична природа која се развива во коските или коскената срцевина и околните ткива.
- Инфекции на внатрешните органи, вклучително и жените може да искусат бактериска вагиноза, септичен абортус, апсцеси во гениталниот апарат, интраутерини и гинеколошки инфекции.
- Инфекции на крвотокот- сепса. Се шири низ крвотокот;
- Инфекции на серозни шуплини- перитонитис, односно воспаление на перитонеумот.
- Бактериемија- присуство на бактерии во крвта кои влегуваат таму егзогено или ендогено.
Аеробна хируршка инфекција
За разлика од анаеробните инфекции, аеробните патогени не можат да постојат без кислород. Предизвикува инфекција:- диплококи;
- Понекогаш ;
- Ешерихија коли и тифус коли.
- furuncle;
- фурункулоза;
- карбункул;
- хидраденитис;
- еризипели.
Дијагностика
За да се постави навремена дијагноза, неопходно е правилно да се процени клиничка сликаи да се обезбеди потребната помош што е можно побрзо Медицинска нега. Во зависност од локацијата на изворот на инфекција, дијагнозата ја вршат различни специјалисти - хирурзи од различни специјалности, отоларинголози, гинеколози, трауматолози.Само микробиолошки студииможе со сигурност да го потврди учеството на анаеробните бактерии во патолошки процес. Сепак, негативен одговор за присуството на анаероби во телото не го исклучува нивното можно учество во патолошкиот процес. Според експертите, околу 50% од анаеробните претставници на микробиолошкиот свет денес се необработливи.
ДО методи со висока прецизностИндикациите за анаеробна инфекција вклучуваат гасно-течна хроматографија и масена спектрометриска анализа, која ја одредува количината на испарливи течни киселини и метаболити - супстанции формирани за време на метаболичкиот процес. Не помалку ветувачки методи се определувањето на бактерии или нивните антитела во крвта на пациентот со помош на имуносорбентна анализа поврзана со ензимот.
Тие исто така користат експресна дијагностика. Биоматеријалот се проучува под ултравиолетова светлина. Изведете:
- бактериолошко сеење на содржината на апсцес или дел од рана што може да се одвои во хранлив медиум;
- хемокултура за присуство на бактерии од анаеробни и аеробни типови;
- земање крв за биохемиска анализа.
На Х-зраци испитувањеоткривање на акумулација на гасови во оштетеното ткиво или телесна празнина.
При дијагностицирање, неопходно е да се исклучи присуството на еризипел во телото на пациентот - заразна болест на кожата, длабока венска тромбоза, гнојно-некротично ткиво поради друга инфекција, пневмоторакс, ексудативен еритем, смрзнатини фази 2-4.
Третман на анаеробна инфекција
За време на третманот, мерките како што се:Хируршка интервенција
Раната се сецира, мртвото ткиво е целосно сушено, а раната се третира со раствор од калиум перманганат, хлорхексидин или водород пероксид. Постапката обично се спроведува под општа анестезија. Екстензивната ткивна некроза може да бара ампутација на екстремитетот.Терапија со лекови
Вклучува:- земање лекови против болки, витамини и антикоагуланси - супстанции кои го спречуваат затнувањето на крвните садови со згрутчување на крвта;
- антибактериска терапија - земање антибиотици, а препишувањето на одреден лек се случува откако ќе се изврши анализа на чувствителноста на патогените на антибиотици;
- давање анти-гангренозен серум на пациентот;
- трансфузија на плазма или имуноглобулин;
- администрација на лекови кои ги отстрануваат токсините од телото и ги елиминираат негативни влијанијана телото, односно го детоксифицираат телото.
Физиотерапија
Во физиотерапевтскиот третман раните се третираат со ултразвук или ласер. Се пропишува озонотерапија или хипербарична оксигенација, односно делуваат со кислород под висок притисокна телото за медицински цели.Превенција
За да се намали ризикот од развој на болеста, висок квалитет примарна обработкарани, отстранете туѓо тело од меките ткива. При изведување на хируршки операции, строго се почитуваат правилата за асепса и антисепса. За големи површини на оштетување, се спроведува антимикробна профилакса и специфична имунизација - превентивни вакцини.Каков ќе биде резултатот од третманот? Ова во голема мера зависи од типот на патогенот, локацијата на изворот на инфекција, навремена дијагнозаи правилно избран третман. Лекарите обично даваат претпазлива, но поволна прогноза за такви болести. Во напредната фаза на болеста, голема е веројатноста дека пациентот ќе умре.
Следна статија.
Анаеробните бактерии се оние кои, за разлика од аеробните бактерии, се способни да преживеат и да растат во средина со малку или без кислород. Многу од овие микроорганизми живеат на мукозните мембрани (уста, вагина) и во човечките црева, предизвикувајќи инфекција кога ткивото е оштетено.
Примери за повеќето познати болестиа условите до кои водат такви бактерии се синузитис, орални инфекции, акни, воспаление на средното уво, гангрена и апсцеси. Тие можат да навлезат и однадвор преку рана или со јадење контаминирана храна, предизвикувајќи страшни болести како што е ботулизмот. Но, покрај штетата, некои видови имаат корист за луѓето, на пример, со претворање на токсични шеќери во дебелото црево растително потеклокорисни за ферментација. Исто така, анаеробните бактерии, заедно со аеробните бактерии, играат важна улога во екосистемот, учествувајќи во распаѓањето на остатоците од живите суштества, но не толку големи како габите во овој поглед.
Класификација
Анаеробните бактерии, пак, се поделени во 3 групи според толеранцијата на кислород и потребата за кислород:
- Факултативно - способно да расте аеробно или анаеробно, т.е. во присуство или отсуство на О2.
- Микроаерофилите - бараат ниска концентрација на кислород (на пример, 5%), а многу од нив бараат висока концентрација CO 2 (на пример, 10%); во целосно отсуство на кислород тие растат многу слабо.
- Задолжително (задолжително, строго) – неспособни за аеробен метаболизам (се развиваат во присуство на кислород), но имаат различна толеранција на O 2 (способност да преживеат некое време).
Задолжителните анаероби напредуваат во области со низок редокс потенцијал (на пример, некротично, мртво ткиво). Кислородот е токсичен за нив. Постои нивна класификација според неговата преносливост:
- Строг - издржува само ≤0,5% O 2 во воздухот.
- Умерено – 2-8% O 2 .
- Аеротолерантни анаероби - толерираат атмосферски O2 ограничено време.
Просечен процент на кислород во земјината атмосфера – 21.
Примери на строги анаеробни бактерии
Задолжителни анаеробни бактерии , кои најчесто предизвикуваат инфекции, можат да толерираат атмосферски O2 најмалку 8 часа и често до 3 дена. Тие се главните компоненти нормална микрофлорана мукозните мембрани, особено во устата, долните делови гастроинтестиналниот тракти вагината; овие бактерии предизвикуваат болест кога се нарушуваат нормалните мукозни бариери.
Грам-негативни анаероби
- Бактериоиди или лат. Бактериоиди (најчести): интра-абдоминални инфекции;
- Fusobacterium: апсцеси, инфекции на рани, белодробни и интракранијални инфекции;
- Профиромонас или порфиромонас: аспирациона пневмонијаи периодонтитис;
- Prevotella или Prevotella: инфекции на интра-абдоминални и меки ткива.
Грам-позитивни анаеробиа некои од инфекциите што тие ги предизвикуваат вклучуваат:
- Актиномицети или Актиномицес: инфекции во главата и вратот, абдоминалните и карличните области, како и аспирациона пневмонија (актиномикоза);
- Клостридија или Клостридиум: интра-абдоминални инфекции (на пример, клостридијален некротизирачки ентеритис), инфекции на меките ткива и гасна гангрена предизвикана од C. perfringens; труење со храна поради C. perfringens тип А; ботулизам поради C. botulinum; тетанус поради C. tetani; Difficile – индуцирана дијареа (псевдомембранозен колитис);
- Peptostreptococcus или Peptostreptococcus: орални, респираторни и интраабдоминални инфекции;
- Propionibacterium или Propionibacterium – инфекции на туѓо тело (на пр. при бајпас хирургија) цереброспиналната течност, протетски зглоб или срцев уред).
Анаеробните инфекции се обично гнојни, предизвикувајќи формирање на апсцес и ткивна некроза, а понекогаш и септичен тромбофлебитис или формирање гасови, или и двете. Многу анаероби произведуваат ензими кои го разградуваат ткивото, како и некои од најмоќните паралитички токсини познати денес.
На пример, ботулинскиот токсин, произведен од бактеријата Clostridium botulinum, која предизвикува ботулизам кај луѓето, се користи во козметологијата во форма на инјекции за измазнување на брчките, бидејќи ги парализира поткожните мускули.
Типично, неколку видови на анаероби се присутни во заразените ткива, а често се присутни и аероби (полимикробни или мешани инфекции).
Знаци дека е предизвикана инфекција анаеробни бактерии:
- Полимикробни резултати од грам боење или бактериско обложување.
- Формирање на гас во гнојни или инфицирани ткива.
- Гноен мирис од заразени ткива.
- Некроза (смрт) на заразените ткива.
- Местото на инфекција е во близина на мукозната мембрана, каде што обично се наоѓа анаеробната микрофлора.
Дијагностика
Примероците од анаеробна култура треба да се добијат со аспирација или биопсија од области кои вообичаено не ги содржат. Испораката во лабораторијата мора да биде брза, а опремата за транспорт мора да обезбеди средина без кислород со јаглерод диоксид, водород и азот. Брисевите најдобро се транспортираат во анаеробно стерилизиран полуцврст медиум како што е транспортниот медиум Кери-Блер (специјален раствор кој содржи минимум хранливи материиза пролиферација на бактерии и супстанции кои можат да ги убијат).
Се вчитува...