Numărul de determinări 96 (48 în duplicate)
Format de tabletă de lucru: stripate 12x8, sparge 1 orificiu.
Sensibilitate: 1,5 U/ml.
Domeniu de măsurare: 0-400 U/ml.
Volumul probei de testat nu depășește 25 μl.
Standardizarea condițiilor pentru efectuarea unei reacții enzimatice cu un cromogen într-un agitator termostatat la 37 ° C.
Setul include:
1. Placă cu dungi 12 x 8 godeuri, gata de utilizare - 1 buc.
2. Probe de calibrare gata de utilizare (0-400 U/ml) colorate cu intensitate variabila in functie de concentratie - 6 fiole.
3. Proba de control - 1 sticlă.
4. Conjugat cu un singur component, gata de utilizare, nu necesită diluare - 1 sticlă.
5. Soluție de diluție serică - 1 sticlă.
6. Substrat cromogen, monocomponent - soluție de tetrametilbezidină plus (TMB +), gata de utilizare, nu necesită diluare - 1 flacon.
7. Soluție tampon fosfat-salină cu tween - 2 fiole.
8. Opriți reactivul, gata de utilizare - 1 flacon.
9. Film pentru etanșarea tabletei - 1 buc.
10. Stencil pentru construirea unui grafic de calibrare - 1 buc.
11. Baie de reactiv - 2 buc.
12. Vârfuri de pipetă pentru 5-200 µl - 16 buc.
Ambalaj tabletă - geantă de tec cu fermoar.
Stabilitatea soluției de lucru FST-T timp de cel puțin 5 zile la o temperatură de +2 ... 8 ° C.
Depozitați kitul la o temperatură de +2 ... 8 ° C. Data expirării - 1 an de la data producției.
Înregistrat la Roszdravnadzor.
Tratamentul helmintiazelor la copii este extrem de important, deoarece consecințele acestui lucru pot fi o întârziere în dezvoltarea proceselor fizice și mentale, patologice ale organelor și sistemelor interne și chiar moartea. În plus, infestațiile helmintice sunt foarte contagioase, motiv pentru care se răspândesc atât de ușor în instituțiile preșcolare și școlare. Pe baza acestui fapt, este clar cât de important este tratamentul în timp util al helmintiazelor la copii.
Primele semne de helminți la copii
Viermii sunt agenți patogeni condiționat ai corpului uman, viermi pentru care o persoană este proprietarul final. În plus, în această chestiune, vârsta proprietarului nu joacă niciun rol, diferite tipuri de helmintiază pot fi observate atât la copii, cât și la pacienții adulți.
De ce helmintiaza este periculoasă pentru un copil?
După cum am menționat mai devreme, helminții la copii pot provoca boli și patologii grave, în urma cărora dezvoltarea mentală și fizică încetinește. Complicațiile posibile pentru fiecare tip de helmintiază pot fi complet diferite, de exemplu:
Prin urmare, helmintiazele copiilor necesită și mai multă atenție, asistență medicală în timp util, urmărire pe termen lung de către un specialist și prevenire.
Principalele simptome la copii
Simptomele helmintiazelor la un copil pot fi diferite, în funcție de tipul de viermi:
1. Viermii rotunzi se manifestă imediat ca o reacție alergică, febră și greață la copil. Primele apariții sunt de obicei luminoase, dar se sting rapid. După aceea, pot fi observate următoarele simptome: 
- colici și disbioză și nou-născuți;
- la bebelușii sub 1 an, dureri la buric, probleme cu scaunele, alergii și diateză;
- copiii mai mari au probleme de somn, comportament neliniştit, coşmaruri;
- copiii de 3-7 ani se caracterizează prin greață, febră, tuse și dureri abdominale, erupții cutanate.
2. Enterobiaza, al cărei agent cauzal sunt oxiuri, se manifestă ca un tablou clinic șters. Și numai după 1 lună, pot fi observate următoarele simptome:
- la nou-născuți, inflamație, umflare și roșeață a anusului, refuz de a mânca, plâns noaptea, lipsă de apetit;
- copiii sub un an sunt caracterizați de aceleași simptome, precum și de mâncărimi severe ale anusului pe timp de noapte (de la 23.00 la 1.00), fetele suferă de inflamație a organelor genitale;
- la copiii mai mari, dureri abdominale în apropierea buricului, tulburări de somn, mâncărime în fese.
3. Simptomele Toxocariozelor sunt greu de recunoscut, cu excepția temperaturii scăzute a corpului și a reacțiilor alergice (erupții cutanate, urticarie, mâncărime și umflături). După infecție, poate apărea o tuse, care provoacă în continuare pneumonie sau bronșită, în special la cei mai mici pacienți. 
Trichinoza sugerează semne ușoare la nou-născuți, altfel sunt observate următoarele semne:
- stare febrilă;
- umflarea feței;
- dureri musculare;
- reactii alergice;
- copiii cu vârsta de peste 5 ani pot avea amigdalele mărite, splina, erupții cutanate și dureri în gât.
Cel mai dificil este să diagnosticați simptomele helmintiazelor la copiii cu vârsta de 2 ani și mai mici, deoarece copilul nu poate explica comportamentul și starea sa. Prin urmare, pentru orice manifestări și comportament atipice al copilului, este mai bine să arătați medicului.
Care este primul lucru de făcut?
Viermii care au fost găsiți în scaunul unui copil sunt cel mai important simptom al bolii, după care trebuie să solicitați imediat ajutor de la un medic. Niciun tratament cu helminți nu poate avea succes fără un diagnostic corect efectuat. Metodele de anchetă în acest caz ar trebui să fie complexe, inclusiv următoarele proceduri: 
- luând o răzuire din anus;
- studiul fecalelor copilului;
- test de sange;
- biopsie musculară în cazuri rare cu suspiciune de trichineloză;
- test serologic de sânge;
- radiografie, ecografie, tomografie;
- ELISA pentru detectarea anticorpilor în sânge.
Metode de tratament
Tratamentul helmintiazelor la copii trebuie să fie cuprinzător, bine gândit, prescris cu doze precise și frecvență de administrare a medicamentelor. Acest lucru se datorează faptului că medicamentele cu componente toxice sunt utilizate pentru efectul antihelmintic, ceea ce înseamnă că utilizarea irațională poate duce la efecte secundare. În plus, la domiciliu, este adecvat tratamentul popular cu plante medicinale.
Remedii populare
Tratamentul modern cu remedii populare pentru astfel de boli pentru copii implică 4 moduri eficiente: 
Orice metodă de tratament la domiciliu trebuie discutată în prealabil cu medicul dumneavoastră. Trebuie amintit că există contraindicații pentru plante și remedii populare sub formă de intoleranță individuală.
Tratament medicamentos
- Cu enterobiaza și ascariaza, se folosesc de obicei medicamente precum Pirantel și Mebendazol. Luarea Pirantel este adecvată la o doză de 10 mg de substanță pentru fiecare kilogram de greutate din oxiuri și 5 mg / kg din ascaris. Mebendazolul se ia de două ori pe zi la 50 mg la copiii de 2-3 ani timp de trei zile la rând, de două ori la 100 mg timp de trei zile la rând la copiii de peste 3 ani, după 3 săptămâni terapia se repetă.
- Cu toxocariază, Mebendazolul este prescris într-o doză diferită - pentru copii cu vârsta de 2 ani și peste, de două ori pe zi, 100 mg timp de 14-10 zile.
- Tratamentul trichinelozei acceptă Mebendazol 5 mg pe kilogram de greutate, după care doza este împărțită în trei doze pe zi. Cursul tratamentului este de 1 săptămână sub supravegherea strictă a unui medic.
Prevenirea helmintiazelor
- spălarea mâinilor imediat după contactul cu animalele, după stradă și gropi cu nisip, mersul la toaletă și înainte de a mânca;
- consumul numai de alimente curate;
- tratamentul termic efectuat în mod corespunzător al produselor din carne și pește;
- bea apă fiartă;
- respectarea igienei și igienei personale;
- deparazitarea regulată a animalelor de companie;
- efectuarea deparazitarii preventive la copii de la 2 ani si peste.
Test de sânge pentru toxocars
Caracteristicile infecției umane cu toxocariază
Purtătorii infecției sunt câinii, mai rar pisicile. Ouăle Toxocara sunt distribuite împreună cu fecalele câinilor fără stăpân. Odată ajunse la pământ, în apă sau zăbovind pe blana unui animal, acestea sunt introduse într-un organism sănătos în diverse moduri.
Reacția la intruziune
Din statisticile medicale se știe că adulții sunt mai puțin susceptibili de a contracta toxocarioză, cu excepția cazului în care ocupația lor este în pericol. Copiii sunt mult mai susceptibili de a lua o infecție.
Cele mai frecvente simptome ale toxocarozei:
- Febră fără nicio boală.
- Creșterea temperaturii.
- Creșterea și scăderea durerii în cap sau abdomen.
- Apariția unei erupții cutanate care nu poate fi eliminată.
- Umflarea feței.
- O creștere a nivelului de eozinofile din sânge, evidențiată de o analiză generală.
Pentru a face un diagnostic precis, este prescris un test imunologic pentru toxocars. Prezența compușilor proteici în sânge, purtând informațiile genetice ale helminților (antigeni), provoacă imunitate la producerea de anticorpi din clasa igg. Acesta este primul semn al infecției cu toxocarioză.
Diagnosticare preliminară
Etapa inițială a istoriei pacientului este colectivă. Înainte de a trimite un pacient pentru a face un test de sânge pentru toxocaroză, este necesar să se studieze istoricul bolii și să se facă o examinare preliminară.
Diagnosticul primar:
- Studiul circumstanțelor agravante care ar putea provoca infecția - lucru specific cu animale sau prezența unui animal de companie, excavare în zone potențial periculoase, copii care se joacă în locurile în care se plimbă câinii.
- Examenul fizic al pacientului. Examinarea pielii pentru invazia subcutanată de către toxocars, pleoape și globi oculari, palpare.
- Numirea unui test de sânge detaliat. În timpul infecției cu toxocarioză, este caracteristică o creștere semnificativă a unor indicatori - eozinofile (70-80%), limfocite, VSH. În timp ce nivelul hemoglobinei scade semnificativ.
- Prelevarea de probe de ficat. Cu o invazie severă, afectează încărcarea ficatului, care se manifestă printr-un salt puternic în bilirubină.
Este imposibil să se obțină confirmarea directă a invaziei cu Toxocar folosind teste de rutină (sânge, coprogram, frotiu). De asemenea, studiul duodenal este neinformativ, deoarece larvele sunt dificil de migrat.
După primirea rezultatelor unei examinări preliminare, care indică o posibilă infecție cu toxocară și diferențiază presupusul diagnostic de boli cu simptome similare, pacientului i se atribuie un ELISA pentru toxocariază.
Test imunosorbent legat
Scopul principal al acestui studiu este de a confirma prezența toxocarilor în corpul uman. Anticorpii împotriva acestor helminți se găsesc în plasma sanguină, deci este prelevat dintr-o venă.
Analiza pentru toxocars necesită o anumită pregătire:
- Nu mâncați alimente grase sau grele cu o zi înainte de procedura.
- Nu beți băuturi dulci, băuturi carbogazoase și băuturi alcoolice în timpul zilei înainte de a vizita laboratorul.
- Luați mostre pe stomacul gol.
- Nu luați medicamente în ziua și ziua anterioară în care este programat testul.
Trebuie remarcat faptul că acest mod foarte informativ de detectare a unei invazii poate fi influențat de anumite circumstanțe. Un rezultat fals pozitiv poate apărea dacă pacientul are:
- Boli oncologice.
- Tuberculoza pulmonara.
- Patologii hepatice severe.
- Sindromul autoimun.
- Sindromul antifosfolipidic.
- Sarcina.
În acest caz, nu se va putea obține o analiză de confirmare 100%, întrucât în aceste condiții sistemul de apărare produce și imunoglobuline (anticorpi). Este necesar să se efectueze diagnostice suplimentare și să se diferențieze toxocariaza de factorii enumerați.
Concentrația de imunoglobuline (titru) din clasa IgG atinge valoarea maximă posibilă după 2-3 luni de la începutul invaziei. Cu cât infecția este mai gravă, cu atât este mai mare această cifră.
Rezultate ELISA
Pentru a pune un diagnostic, un imunotest enzimatic este atent studiat, rezultatele obținute sunt comparate cu valorile de referință. Norma este un titru de anticorpi de 1: 100 cu un indice de pozitivitate mai mic de 0,9.
Valorile numerice ale titlurilor
Rezultatele obținute pot fi negative, pozitive, slab pozitive sau discutabile. Numărul de titruri AT depinde de severitatea invaziei și de vârsta apariției acesteia.
Decodificarea analizei:
- Titrul AT până la 1: 100 - rezultatul este negativ. Nu s-au găsit larve toxocare în corpul pacientului.
- AT titru până la 1: 400 - rezultatul este slab pozitiv. Pacientul are o invazie slabă sau se dezvoltă forma oculară de toxocaroză. În unele cazuri, indicatorul vorbește despre o infecție recentă.
- Titrul AT până la 1: 600 - rezultatul este pozitiv. O persoană suferă de o formă clinică de helmintiază, la detectarea căreia este necesară o terapie imediată.
- Titrul AT până la 1: 800 - rezultatul este pozitiv. Vorbește despre o invazie severă de natură progresivă și o proporție ridicată a probabilității dezvoltării unui proces patologic al organelor interne.
Cu rare excepții, studiile ELISA relevă o formă neglijată de invazie cu un amestec de helmintiază de altă origine. În acest caz, numărul total de anticorpi poate fi mai mare de 1: 800.
Coeficientul de pozitivitate
Într-un test imunosorbent legat de enzime pentru toxocaroză cu un titru de 1: 400 - 1: 600 pentru a diferenția invazia de factorii secundari, indicatorii obținuți sunt comparați cu valoarea de referință. Diferența dintre aceste numere se numește de obicei indice sau coeficient de pozitivitate.
De obicei, sub forma unui ELISA efectuat, un indicator stă opus celuilalt. Prima este norma, a doua poate însemna:
- Până la 0,9 - rezultatul este negativ. Nu au fost găsite larve de toxocara.
- 0,9-1,1 - rezultatul este îndoielnic. În acest caz, sunt atribuite diagnostice repetate.
- 1.1-2.2 - rezultatul este slab pozitiv. O persoană este un transportator cu o invazie slabă.
- 2.2-4.2 - rezultatul este pozitiv. Toxocarioza moderată se dezvoltă de mult timp.
- Peste 4.4 - rezultatul indică apogeul invaziei helmintice sau al helmintiazei recente.
KP cu un rezultat de 4,4 și o creștere detectată a eozinofiliei cu 10% poate indica dezvoltarea formei oculare a toxocariozelor și prezența anticorpilor la invaziile încrucișate, total la toxocaroza.
Răspunsul imun și densitatea optică a anticorpilor (coeficientul de pozitivitate) depind de gradul de infecție cu toxocars și de localizarea acestora. Cel mai mic titru și indicator CP ne permit doar să presupunem absența helminților, dar nu să afirmăm acest lucru.
Informațiile furnizate nu pot servi ca sursă de autodiagnostic sau automedicație. Rezultatele ELISA în combinație cu o examinare preliminară pot spune doar unui specialist despre prezența unei probleme. În laboratorul Invitro, diagnosticarea sângelui este efectuată cu mare precizie, rezultatul analizei este însoțit de comentarii ale specialiștilor despre coeficientul de pozitivitate. Acest lucru ajută foarte mult medicul să facă un diagnostic mai precis.
Principalii producători ruși Pe segmentul kiturilor de reactivi pentru diagnosticarea infecțiilor: - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - SRL NPO Diagnostic Systems, N. Novgorod; - CJSC „Ecolab”, Electrogorsk, regiunea Moscova. În domeniul truselor de reactivi pentru diagnosticarea bolilor neinfecțioase și a afecțiunilor fiziologice: - SRL „Alkor-Bio”, Sankt Petersburg; - CJSC „Vector-Best”, Novosibirsk; - SRL „Hema-Medica”, Moscova. În segmentul de reactivi pentru diagnosticarea de laborator a alergiilor: - SRL „Alkor-Bio”, Sankt Petersburg; - CJSC "Vector-Best", Novosibirsk; - SRL NPO Immunotex, Stavropol. Producția de echipamente de laborator: - SRL „Pikon, Moscova
Evaluarea gradului de substituție posibilă a importului prin nomenclatura testelor Nomenclatura analiților, unităților Aprobat pentru utilizare în RF Produs în RF Grad de posibilă substituție de import Markeri ai bolilor infecțioase% Markeri ai bolilor neinfecțioase și indicatori ai stărilor fiziologice% Markeri ai alergiei% Total:%
Evaluarea gradului de substituție a importului cu volumul pieței pentru produse pentru tablete ELISA Segmente de piață Volumul pieței în Federația Rusă, mln. Volumul vânzărilor producătorilor autohtoni, mln rub. Ponderea înlocuirii importurilor Markeri ai bolilor infecțioase% Markerii bolilor netransmisibile și indicatori ai stărilor fiziologice% Markerii alergiei% Echipamente 50051% Total:%
Evaluarea gradului de substituție a importului cu volumul pieței pentru produse pentru metode imunochimice în ansamblu Segmente de piață Volumul pieței în Federația Rusă, mln. Volumul vânzărilor producătorilor autohtoni, mln rub. Ponderea substituției de import Markeri de boli infecțioase% Markeri de boli netransmisibile și indicatori de stări fiziologice% Markeri de alergie% Echipamente% Total:%
Probleme ale producătorilor autohtoni din industrie: Metoda ELISA devine învechită. Există o înlocuire treptată a reactivilor IF autohtoni cu chemiluminiscenți importați; Sistemul existent de achiziții publice stimulează fie achiziționarea celor mai ieftine mărfuri, fie produse de import cu caracteristici unice; Unul dintre principalele motive pentru subdezvoltarea producătorilor autohtoni de echipamente automate și localizarea producției de produse importate este bariera administrativă vamală; Principala problemă a vremurilor recente este prăbușirea sistemului de înregistrare de stat a noilor produse în RZN. Admiterea de noi produse pe piață practic a încetat și acei producători străini care s-au înscris anterior pe liste lungi continuă să aibă un avantaj față de cei autohtoni; Principalul motiv al decalajului tehnologic este incapacitatea de a obține dreptul de a produce produse compatibile pentru echipamente moderne; Gradul scăzut de consolidare a producătorilor autohtoni și războaiele constante ale prețurilor între ei fac imposibilă dezvoltarea produselor avansate și concurența cu jucători de frunte pe picior de egalitate, inclusiv pe piețele externe.
Propuneri: Introducerea unei proceduri necompetitive pentru achizițiile publice de dispozitive medicale în cadrul FCC, urmată de publicarea pozițională. Determinarea limitelor de finanțare pe baza prețului mediu de piață va oferi anumite avantaje producătorilor autohtoni, va permite limitarea consumului de reactivi scumpi importați și controlul mai eficient în utilizarea fondurilor bugetare; Promovarea extinderii și consolidarea producătorilor autohtoni pentru a concentra resursele pe dezvoltarea de produse moderne și pentru a intra pe piața internațională. Procedura de achiziție publică neconcurențială va lăsa rapid doar întreprinderile cu adevărat competitive pe piață; Să aloce fonduri de stat pentru a stimula, pe principiile parteneriatului public-privat, dezvoltarea unei game de teste suficiente pentru a asigura siguranța biologică a țării; Beneficiile vamale ar trebui să fie pentru componente și nu pentru produsele finite; Armonizarea sistemului de înregistrare cu cel european, unde dispozitivele medicale cu un nivel de risc potențial scăzut sunt înregistrate pe baza unei declarații de conformitate.
PREPARATE
EVALUAREA NOUULUI SISTEM DE TEST ELISA
„Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”
12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.
1 FGUN SSC VB „Vector” din Rospotrebnadzor, așezarea Koltsovo, regiunea Novosibirsk;
2 Institutul de Biologie Chimică și Medicină Fundamentală, Novosibirsk;
3 Institutul de Stat pentru Standardizarea și Controlul Produselor Medicale Biologice denumit după V.I. LA. Tarasevichag Moscova
Sunt prezentate rezultatele testării sensibilității, specificității și reproductibilității unui nou set de reactivi „Rotavirus-antigen-IFA-BEST” dezvoltat la JSC „Vector-Best” (Novosibirsk). Datele obținute fac posibilă prezicerea fiabilității diagnosticului a rezultatelor atunci când se utilizează acest sistem de testare pentru a detecta antigenul rotavirusului de grup A în materialul clinic.
Cuvinte cheie: sistem de testare ELISA, eficiență, rotavirus A
Rotavirusurile din grupa A (familia Reoviridae, genul Rotavirus) sunt cea mai frecventă cauză a gastroenteritei severe la copiii mici din întreaga lume. Adulții cu un sistem imunitar slăbit se îmbolnăvesc adesea. Infecția cu rotavirus (RVI) este o boală foarte contagioasă cu mai multe căi de transmitere. Sursa de infecție este o persoană cu o formă deschisă sau asimptomatică a bolii, precum și un purtător de virus. În rândul copiilor și adulților, RVI se poate manifesta sub formă de cazuri sporadice, boli de grup local, focare și este larg răspândită. Mecanismul de transmitere fecal-oral al acestei infecții se realizează prin alimente (lapte și produse lactate, alimente pentru copii), apă și căi de contact-gospodărie.
Diagnosticul gastroenteritei cu rotavirus prin tabloul clinic, în special cu morbiditatea sporadică, este de o oarecare dificultate, deoarece simptomele caracteristice acestei infecții diferă puțin de simptomele altor infecții intestinale acute (IAE) de diverse etiologii. Diagnosticul diferențial la pacienții cu gastroenterită cu rotavirus se realizează atât cu toxicoinfectii alimentare, cât și cu alte AEI virale (norovirusuri, astrovirusuri, adenovirusuri, coronavirusuri, enterovirusuri Coxsackie și ECHO) și bacteriene (salmoneloză, dizenterie, microorganisme holerice). Din păcate, nu toate instituțiile medicale specializate din Federația Rusă efectuează diagnosticarea infecției cu rotavirus.
Metodele de diagnosticare pentru RVI au ca scop detectarea virionilor întregi, antigenului viral sau ARN-ului specific virusului în fecale. O abordare promițătoare pentru detectarea directă a virușilor atât în materialul clinic, cât și în obiectele de mediu este metoda transcripției inverse - reacția în lanț a polimerazei (RT-PCR). În ultimii ani, sistemele de testare au fost create pe baza dezvoltărilor științifice moderne, cu o combinație de diverse metode de detectare a rotavirusurilor: PCR multiplex cu hibridizare-detectare fluorescentă a produselor de amplificare „la punctul final”; imuno-PCR bazat pe punct final (IPCR) cu detectare în timp real; RT-PCR cantitativ cu detectare în timp real. Laboratoarele de cercetare folosesc microscopia electronică pentru a detecta rapid rotavirusurile. Cu toate acestea, toate metodele de mai sus sunt destul de laborioase și necesită instrumente scumpe și personal înalt calificat. Prin urmare, atunci când se efectuează diagnostice de laborator în spitale și în ambulatoriu, se acordă preferință metodelor bazate pe detectarea antigenului viral în fecale folosind testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) cu anticorpi mono- și policonali împotriva rotavirusurilor. Această metodă este disponibilă pentru laboratoarele practice, este ușor de configurat și vă permite să obțineți rapid un rezultat.
Scopul acestei lucrări este de a studia eficiența de diagnosticare a unui nou set de reactivi „Rotavirus-antigen-IFA-BEST” dezvoltat la JSC „Vector-Best”, Novosibirsk.
^ septembrie-decembrie
Materiale și metode
Materialul studiului au fost probele de fecale de la copii mici cu diagnostic de AEI și fără manifestări clinice de infecție intestinală, care au fost internați în secțiile de infecții intestinale și infecții respiratorii ale Spitalului Clinic nr. 3 al orașului pentru copii, Novosibirsk. Probele de fecale au fost colectate în recipiente de plastic steril de unică folosință în volum de 2-3 ml la internarea pacienților în secția spitalului și păstrate la -20 ° C timp de 15 zile. Depozitarea mai lungă a materialului a fost efectuată la - 70 ° C.
Un grup de 104 probe de fecale a fost testat preliminar pentru prezența agenților patogeni OCI. Dintre ei:
30 de probe în care doar rotavirusurile din grupa A au fost detectate prin ELISA și RT-PCR; genotiparea prin RT-PCR a arătat că probele fecale au conținut rotavirusuri de genotip PG1 (18 probe), PG2 (4 probe), PG3 (3 probe), PG4 (2 probe), PG4 (1 eșantion), PG9 (1 eșantion) , PG3 (1 probă);
14 probe în care au fost detectate doar norovirusuri din al doilea genotip prin RT-PCR, ceea ce a fost confirmat prin determinarea secvenței de nucleotide 5 "- regiunea genei capsidei situată pe genomul norovirusurilor în regiunea 5085-5485 h .;
15 probe în care au fost detectate doar Astrovirusuri prin RT-PCR, ceea ce a fost confirmat prin determinarea secvenței de nucleotide 5 "- regiunea genei capsidei situată pe genomul Astrovirusului în regiunea 4526 - 4955 n.; 15 probe în care doar adenovirusurile au fost detectate prin PCR;
30 de probe de fecale (control) de la copii fără manifestări clinice de infecție intestinală, internați în secția respiratorie a spitalului; analiza preliminară nu a evidențiat agenții patogeni virali de mai sus în aceste probe.
Probele au fost testate pentru prezența sau absența putregaiului, noro-, astro- și adenovirusurilor prin RT-PCR folosind kituri comerciale „AmpliSens No go virus 1, 2 genotypes - 306/322”, „AmpliSens Astrovirus -165” înregistrate în Federația Rusă, "AmpliSens Adenovirus - 462", "AmpliSens Rotavirus - 290" (produs de Institutul Central de Cercetare în Epidemiologie FGUN, RF). Probele au fost examinate în conformitate cu instrucțiunile de utilizare a truselor de reactivi corespunzătoare în perioada de valabilitate. Probele pozitive pentru prezența rotavirusului au fost genotipate prin RT-PCR. Determinarea prezenței sau absenței antigenului rotavirus a fost de asemenea efectuată prin ELISA utilizând un sistem comercial de testare IDEIA™ Rotavirus, (DakoCytomation, UK) în conformitate cu instrucțiunile trusei.
La testarea trusei de reactiv Rota-virus-antigen-ELISA-BEST, toate probele de mai sus (104) au fost criptate și testate de trei ori cu kitul de testare. La finalizarea testelor, probele au fost decodate și rezultatele analizate.
rezultate si discutii
Sensibilitatea trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” a fost evaluată prin numărul de coincidențe ale rezultatelor pozitive (în %) ale probelor de testare folosind sistemul de testare testat și medicamentele de referință. În același timp, s-a dezvăluit că la utilizarea trusei de reactiv „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST”, toate cele 30 de probe cu prezența confirmată a rotavirusului A au fost pozitive (Tabelul 1). În consecință, sensibilitatea trusei de testare pentru detectarea rotavirusului A a fost de 100%. Trebuie remarcat faptul că panoul a inclus probe cu șapte genotipuri diferite de rotavirusuri și toate au fost detectate cu succes cu kitul de reactiv Rotavirus - antigen - I FAB-EST.
Specificitatea sistemului de testare a fost evaluată prin numărul de coincidențe ale rezultatelor negative (în %) ale probelor de testare folosind sistemul de testare testat cu studiile preliminare depuse. Pentru evaluarea specificității, panelul utilizat a inclus 30 de probe în care nu au fost detectați agenți patogeni virali, precum și 14 probe în care au fost detectate doar norovirusuri din al doilea genotip folosind metoda RT-PCR, 15 probe în care metoda RT-PCR au fost detectate doar astrovirusuri; 15 probe în care au fost detectate doar adenovirusuri prin PCR. S-a stabilit că în 69 din 74 de probe negative valorile densității optice în timpul detectării cu kitul de reactivi Rotavirus-antigen-ELISA-BEST pentru prezența rotavirusului A nu au depășit valorile de fond, adică valorile obţinută ca urmare a măsurării densităţii optice în probele de control negative. Două probe care conțin astrovirusuri, o probă - norovirus al doilea genotip, o probă - adenovirus și două probe în care niciunul dintre agenții patogeni virali de mai sus nu a fost detectat, au prezentat indici de densitate optică pozitivi. Trebuie remarcat faptul că în probele în care niciunul dintre agenții patogeni virali nu a fost detectat anterior, semnalele pozitive au fost înregistrate numai într-unul dintre studiile repetate (Tabelul 2). Astfel, specificitatea trusei de reactivi Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST a fost de 93,2%.
Pe parcursul testelor, a fost evaluată reproductibilitatea rezultatelor obținute cu ajutorul trusei de testare cu reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” pe material clinic - toate probele au fost examinate de trei ori în diferite experimente pentru a determina variația rezultatelor. . În aproape toate cazurile, s-au obținut rezultate similare: sistemul de testare a detectat toate probele negative și pozitive în același mod. Excepția au fost două probe, în care niciunul dintre agenții patogeni virali nu a fost detectat anterior: într-una dintre repetări pentru ambele probe, valorile densității optice au depășit ODcritul. De remarcat faptul că excesul a fost nesemnificativ (Tabelul 2). Astfel, reproductibilitatea rezultatelor a fost de 98,8%.
Rezultatele testelor efectuate au arătat că setul de test de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” în eficiența sa de diagnosticare - specificitate, sensibilitate și reproductibilitate - este comparabil cu diagnosticele disponibile în Federația Rusă.
folosind kitul de reactivi testat „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” pentru detectarea antigenului rotavirusului grupului A în materialul clinic.
Literatură
1. Bogomolov B.P. // „Boli infecțioase: diagnostic de urgență, tratament, prevenire”. - M., Nou-diamed. - 2007.
2. Vasiliev B.Ya., Vasilieva R.I., Lobzin Yu.V. // „Bolii intestinale acute. Rotavirusuri și infecție cu rotavirus ”. - S.-Pb., Lan. - 2000.
3. Zhirakovskaya EV, Tikunov A.Yu., Bodnev O.A. și colab. // "BIOPreparations". - 2008 - Nr. 2. - p. 15 - 18.
4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.C. și alții. // ZhMEI - 2008 - Nr. 4. - cu. 12 - 16.
5. Ignatyuk TE, Golutvin IA, Nasikan NS, și colab. // "Întrebări de virologie". - 2003. - v. 48. - Nr. 6. - str. 1721.
6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chuprova A.B. // „Întrebări de virologie”. - 2007 .-- v. 52. -№ 3 - p. 19-23.
7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A., și colab. //
"Boli infecțioase". - 2004. - v. 2. - Nr. 4. - str. 85 -91.
8. Podkolzin AT, Fenske EB, Abramycheva N.Yu., și colab. // „Arhiva terapeutică”. - 2007. - v. 79. - Nr. 11. -p. 10-16.
9. Sergevnin VI, Woldschmidt NB, Sarmometov EV, et al. // Epidemiologie și boli infecțioase. -2004.-№ 6.-p. 17-20.
10.Sergevnin V.I., Woldschmidt N.B., Sarmometov E.V., ș.a. // Igienă și Sanitare. - 2007. - Nr. 1. - str. 56 -58.
11. Arcangeletti MC, De Conto E, Pinardi F., at al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76 (3). - P. 165 -170.
12. Gladstone B. P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., at al. // Epidemiol. Infecta. - 2008. V. 136 (3). - P. 399-405.
13. Min B.S., NohYJ., Shin J.H., atal. // J. Virol. Metode. -2006. - V. 137 (2). - P. 280 - 286.
14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., la al. // J. Clin. Microbiol. - 2008. V. 46 (2). - P. 462 - 469.
15 Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F., at al. // Appl. Mediul. Microbiol. - 2008. - V. 74 (7). - P. 2069 - 2078.
16. Stockman L. J., Staat M. A., Holloway M., at al. // J. Clin. Microbiol. - 2008. - V. 46 (5). - P. 1842 - 1843.
Evaluarea sensibilității și specificității kitului de reactivi "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
tabelul 1
Număr de probe Număr de probe Rezultate detecție cu ajutorul medicamentelor de comparație IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Rezultate de detecție cu setul "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
Evaluarea specificității trusei de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” -
masa 2
PCR AmpliSens
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus
0,443 1,306 0,676 0,418
Rotavirus-antigen-IFA-BEST CJSC „Vector-Best”
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
£ septembrie
decembrie 2009
AmpliSens
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astravirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0.150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
Rotavirus
OPKrit 0,250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
antigen-ELISA-BEST "Vector-Best"
OPKrit OPKrit 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO „BeKTop-EecT”
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
decembrie 2009
PCR AmpliSens
adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus negat neglig neglig negativ
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPCrit = 0.150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Rotavirus - antigen - IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
Se încarcă ...