PREGĂTIRE
EVALUAREA NOUULUI SISTEM DE TEST ELISA
"Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.
1 „Vector” FGUN SSC VB din Rospotrebnadzor, așezarea Koltsovo, regiunea Novosibirsk;
2 Institutul de biologie chimică și medicină fundamentală, Novosibirsk;
3 Institutul de Stat pentru Standardizare și Control al Produselor Biologice Medicale numit după V.I. LA. Tarasevichag Moscova
Sunt prezentate rezultatele testării sensibilității, specificității și reproductibilității unui nou set de reactivi „Rotavirus-antigen-IFA-BEST” dezvoltat la CJSC „Vector-Best” (Novosibirsk). Datele obținute fac posibilă prezicerea fiabilității diagnostice a rezultatelor atunci când se utilizează acest sistem de testare pentru a detecta antigenul grupului A rotavirus în materialul clinic.
Cuvinte cheie: sistem de testare ELISA, eficiență, rotavirus A
Rotavirusurile din grupa A (familia Reoviridae, genul Rotavirus) sunt cea mai frecventă cauză de gastroenterită severă la copiii mici din întreaga lume. Adulții cu un sistem imunitar slăbit se îmbolnăvesc adesea. Infecția cu rotavirus (RVI) este o boală extrem de contagioasă cu multiple căi de transmitere. Sursa infecției este o persoană cu o formă evidentă sau asimptomatică a bolii, precum și un purtător de virus. În rândul copiilor și adulților, RVI se poate manifesta sub formă de cazuri sporadice, boli de grup locale, focare și este răspândit. Mecanismul fecal-oral de transmitere a acestei infecții se realizează prin alimente (lapte și produse lactate, hrană pentru copii), apă și căi de contact-gospodărie.
Diagnosticul gastroenteritei cu rotavirus după tabloul clinic, în special cu morbiditate sporadică, prezintă o anumită dificultate, deoarece simptomele caracteristice acestei infecții diferă puțin de simptomele altor infecții intestinale acute (AEI) de diferite etiologii. Diagnosticul diferențial la pacienții cu gastroenterită cu rotavirus se efectuează atât cu infecții toxice alimentare, cât și cu alte AEI virale (norovirusuri, astrovirusuri, adenovirusuri, coronavirusuri, enterovirusuri Coxsackie și ECHO) și bacteriene (salmoneloză, dizenterie, microorganisme ale holerei) etiologie. Din păcate, nu toate instituțiile medicale specializate ale Federației Ruse efectuează diagnosticarea infecției cu rotavirus.
Metodele de diagnostic pentru RVI au ca scop detectarea virionilor întregi, a antigenului viral sau a ARN-ului specific virusului în fecale. O abordare promițătoare a detectării directe a virușilor atât în materialul clinic, cât și în obiectele de mediu este metoda transcripției inverse - reacția în lanț a polimerazei (RT-PCR). În ultimii ani, sistemele de testare au fost create pe baza dezvoltărilor științifice moderne cu o combinație de diverse metode de detectare a rotavirusurilor: PCR multiplex cu hibridizare-detectare fluorescentă a produselor de amplificare „la punctul final”; end-based immuno-PCR (IPCR) cu detectare în timp real; RT-PCR cantitativ cu detectare în timp real. Laboratoarele de cercetare folosesc microscopia electronică pentru a detecta rapid rotavirusurile. Cu toate acestea, toate metodele de mai sus sunt destul de laborioase și necesită instrumente costisitoare și personal înalt calificat. Prin urmare, atunci când se efectuează diagnostice de laborator în spitale și în ambulatoriu, se acordă preferință metodelor bazate pe detectarea antigenului viral în fecale utilizând testul imunosorbent legat de enzime (ELISA) cu anticorpi mono și policonali împotriva rotavirusurilor. Această metodă este disponibilă pentru laboratoarele practice, este ușor de configurat și vă permite să obțineți rapid un rezultat.
Scopul acestei lucrări este de a studia eficiența diagnosticului unui nou set de reactivi "Rotavirus-antigen-IFA-BEST" dezvoltat la SA "Vector-Best", Novosibirsk.
^ Septembrie-decembrie
Materiale și metode
Materialul studiului a fost probele de fecale ale copiilor mici cu diagnostic de AEI și fără manifestări clinice de infecție intestinală, care au fost spitalizați în departamentele de infecții intestinale și infecții respiratorii ale Spitalului Clinic nr. 3 din orașul copiilor, Novosibirsk. Probele fecale au fost colectate în recipiente de plastic sterile de unică folosință într-un volum de 2-3 ml la internarea pacienților la secția spitalului și depozitate la - 20 ° C timp de 15 zile. Depozitarea mai lungă a materialului a fost efectuată la - 70 ° C.
Un panou de 104 probe fecale a fost testat preliminar pentru prezența agenților patogeni OCI. Dintre ei:
30 de probe în care doar rotavirusurile din grupa A au fost detectate prin ELISA și RT-PCR; genotiparea prin RT-PCR a arătat că probele fecale conțineau rotavirusuri ale genotipului PG1 (18 probe), PG2 (4 probe), PG3 (3 probe), PG4 (2 probe), PG4 (1 probă), PG9 (1 probă), PG3 (1 probă);
14 eșantioane în care au fost detectate numai norovirusuri din al doilea genotip prin RT-PCR, ceea ce a fost confirmat prin determinarea secvenței de nucleotide 5 "- regiunea genei capsidei situată pe genomul norovirusurilor în regiunea de 5085-5485 h .;
15 eșantioane în care au fost detectate numai Astrovirusuri prin RT-PCR, ceea ce a fost confirmat prin determinarea secvenței de nucleotide 5 "- regiunea genei capsidei situată pe genomul Astrovirus în regiunea 4526 - 4955 n .; 15 probe în care numai adenovirusurile au fost detectate prin PCR;
30 de probe fecale (martor) de la copii fără manifestări clinice de infecție intestinală, internați în secția respiratorie a spitalului; analiza preliminară nu a relevat agenții patogeni virali de mai sus în aceste probe.
Probele au fost testate pentru prezența sau absența putregaiului, noro-, astro- și adenovirusurilor prin RT-PCR folosind kituri comerciale „AmpliSens No go virus 1, 2 genotipuri - 306/322”, „AmpliSens Astrovirus -165” înregistrate în Federația Rusă, "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (produs de Institutul Central de Cercetare Epidemiologie FGUN, RF). Probele au fost examinate în conformitate cu instrucțiunile de utilizare a kiturilor respective de reactivi pe durata de valabilitate. Probele pozitive pentru prezența rotavirusului au fost genotipate prin RT-PCR. Determinarea prezenței sau absenței antigenului rotavirusului a fost, de asemenea, efectuată de ELISA utilizând un sistem de testare comercială IDEIA ™ Rotavirus, (DakoCytomation, Marea Britanie) în conformitate cu instrucțiunile kitului.
La testarea kitului de reactivi Rota-virus-antigen-ELISA-BEST, toate probele de mai sus (104) au fost criptate și testate de trei ori cu kitul de testare. La finalizarea testelor, probele au fost decodate și rezultatele analizate.
rezultate si discutii
Sensibilitatea kitului de reactiv "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" a fost evaluată prin numărul de coincidențe ale rezultatelor pozitive (în%) ale probelor de testare utilizând sistemul de testare testat și medicamentele de referință. În același timp, s-a dezvăluit că, atunci când se utilizează setul de reactivi "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST", toate cele 30 de probe cu prezență confirmată de rotavirus A au fost pozitive (Tabelul 1). În consecință, sensibilitatea kitului de testare pentru detectarea rotavirusului A a fost de 100%. Trebuie remarcat faptul că panoul a inclus probe cu șapte genotipuri diferite de rotavirusuri și toate au fost detectate cu succes cu setul de reactivi Rotavirus - antigen - I FAB-EST.
Specificitatea sistemului de testare a fost evaluată prin numărul de coincidențe ale rezultatelor negative (în%) testarea probelor folosind sistemul de testare testat cu studiile preliminare depuse. Pentru a evalua specificitatea, panoul utilizat a inclus 30 de probe în care nu au fost detectați agenți patogeni virali, precum și 14 probe în care au fost detectate numai norovirusurile celui de-al doilea genotip folosind metoda RT-PCR, 15 probe în care metoda RT-PCR a fost detectat doar astrovirusuri; 15 probe în care doar adenovirusurile au fost detectate prin PCR. S-a stabilit că în 69 din 74 de eșantioane negative, valorile densității optice în timpul detectării cu kitul de reactiv Rotavirus-antigen-ELISA-BEST pentru prezența rotavirusului A nu depășeau valorile de fundal, adică valorile obținută ca urmare a măsurării densității optice în probele negative de control. Două probe care conțin astrovirusuri, o probă - norovirusul celui de-al doilea genotip, o probă - adenovirus și două probe în care nu a fost detectat niciunul dintre agenții patogeni virali de mai sus, au arătat indici de densitate optică pozitivi. Trebuie remarcat faptul că în probele în care niciunul dintre agenții patogeni virali nu a fost detectat anterior, semnalele pozitive au fost înregistrate numai într-unul dintre studiile repetate (Tabelul 2). Astfel, specificitatea setului de reactivi Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST a fost de 93,2%.
În cursul testelor a fost evaluată reproductibilitatea rezultatelor obținute folosind trusa de testare a reactivilor „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” pe materialul clinic - toate probele au fost examinate de trei ori în diferite experimente pentru a determina variația rezultatelor . În aproape toate cazurile, s-au obținut rezultate similare: sistemul de testare a detectat toate probele negative și pozitive în același mod. Excepția a fost de două probe, în care niciunul dintre agenții patogeni virali nu a fost detectat anterior: într-una dintre replicile pentru ambele probe, valorile densității optice au depășit ODcrit. Trebuie remarcat faptul că excesul a fost nesemnificativ (Tabelul 2). Astfel, reproductibilitatea rezultatelor a fost de 98,8%.
Rezultatele testelor efectuate au arătat că setul de teste al reactivilor „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” în eficiența sa de diagnostic - specificitate, sensibilitate și reproductibilitate - este comparabil cu diagnosticul disponibil în Federația Rusă.
folosind trusa testată de reactivi „Rotavirus-antigen-ELISA-BEST” pentru detectarea antigenului rotavirusului grupei A în materialul clinic.
Literatură
1. Bogomolov B.P. // „Boli infecțioase: diagnostic, tratament, prevenire de urgență”. - M., New-diamed. - 2007.
2. Vasiliev B.Ya., Vasiliev RI, Lobzin Yu.V. // „Boli intestinale acute. Rotavirusuri și infecție cu rotavirus ”. - S.-Pb., Lan. - 2000.
3. Zhirakovskaya EV, Tikunov A.Yu., Bodnev O.A. și colab. // "BIOPreparations". - 2008 - Nr. 2. - p. 15 - 18.
4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.C. și alții. // ZhMEI - 2008 - Nr. 4. - cu. 12 - 16.
5. Ignatyuk TE, Golutvin IA, Nasikan NS, și colab. // "Întrebări de virologie". - 2003. - v. 48. - Nr. 6. - p. 1721.
6. Novikova H.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chuprova A.B. // „Întrebări de virologie”. - 2007 .-- v. 52. -№ 3 - p. 19-23.
7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A., și colab. //
"Boli infecțioase". - 2004. - v. 2. - Nr. 4. - p. 85 -91.
8. Podkolzin AT, Fenske EB, Abramycheva N.Yu., și colab. // "Arhiva terapeutică". - 2007. - v. 79. - Nr. 11. -p. 10-16.
9. Sergevnin VI, Woldschmidt NB, Sarmometov EV și colab. // Epidemiologie și boli infecțioase. -2004.-№ 6.-p. 17-20.
10. Sergeevnin V.I., Woldschmidt N.B., Sarmometov E.V., și colab. // Igienă și igienizare. - 2007. - Nr. 1. - pag. 56 -58.
11. Arcangeletti MC, De Conto E, Pinardi F., la al. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76 (3). - P. 165 -170.
12. Gladstone B. P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., at al. // Epidemiol. Infecta. - 2008. V. 136 (3). - P. 399-405.
13. Min B. S., NohY J., Shin J. H., atal. // J. Virol. Metode. -2006. - V. 137 (2). - P. 280 - 286.
14. Santos N., Honma S., Timenetsky Mdo C., la al. // J. Clin. Microbiol. - 2008. V. 46 (2). - P. 462 - 469.
15 Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F., la al. // Apl. Mediu Microbiol. - 2008. - V. 74 (7). - P. 2069 - 2078.
16. Stockman L. J., Staat M. A., Holloway M., la al. // J. Clin. Microbiol. - 2008. - V. 46 (5). - P. 1842 - 1843.
Evaluarea sensibilității și specificității kitului de reactivi "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
tabelul 1
Număr de probe Număr de probe Rezultate ale detectării cu medicamente de referință IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Rezultate de detectare cu kitul "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST"
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
Evaluarea specificității kitului de reactivi "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" -
masa 2
PCR AmpliSens
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus
0,443 1,306 0,676 0,418
Rotavirus-antigen-IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
£ septembrie
Decembrie 2009
AmpliSens
rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus rotavirus astravirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPKrit = 0.150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
Rotavirus
OPKrit 0,250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
antigen-ELISA-BEST "Vector-Best"
OPKrit OPKrit 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0.150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EecT"
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
Decembrie 2009
PCR AmpliSens
adenovirus adenovirus adenovirus adenovirus negat neglijare neglijare negativ
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPKrit = 0.150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Rotavirus - antigen - IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
Tratamentul helmintiazei la copii este extrem de important, deoarece consecințele acesteia pot fi un decalaj în dezvoltarea proceselor fizice și mentale, patologice ale organelor și sistemelor interne și chiar a morții. În plus, infestațiile helmintice sunt foarte contagioase, motiv pentru care se răspândesc atât de ușor în instituțiile preșcolare și școlare. Pe baza acestui fapt, este clar cât de important este tratamentul în timp util al helmintiazei la copii.
Primele semne ale helmintilor la copii
Viermii sunt agenți patogeni condiționați ai corpului uman, viermi pentru care o persoană este proprietarul final. În plus, în această chestiune, vârsta proprietarului nu joacă niciun rol, pot fi observate diferite tipuri de helmintiază atât la copii, cât și la pacienții adulți.
De ce helmintiaza este periculoasă pentru un copil?
După cum sa menționat mai devreme, helmintii la copii pot provoca boli și patologii grave, ca urmare a căror dezvoltare mentală și fizică încetinește. Complicațiile posibile pentru fiecare tip de helmintiază pot fi complet diferite, de exemplu:
Prin urmare, helmintiasele copiilor necesită și mai multă atenție, asistență medicală în timp util, urmărire pe termen lung de către un specialist și prevenire.
Principalele simptome la copii
Simptomele helmintiazei la un copil pot fi diferite, în funcție de tipul de viermi:
1. Viermii rotunzi se manifestă imediat ca o reacție alergică, febră și greață la copil. Primele apariții sunt de obicei strălucitoare, dar cedează rapid. După aceea, pot fi observate următoarele simptome: 
- colici și disbioză și nou-născuți;
- la copii cu vârsta sub 1 an, durere în buric, probleme cu scaunele, alergii și diateză;
- copiii mai mari au probleme de somn, comportament neliniștit, coșmaruri;
- copiii de 3-7 ani se caracterizează prin greață, febră, tuse și dureri abdominale, erupții cutanate.
2. Enterobiaza, al cărei agent cauzal sunt oxiuri, se manifestă ca un tablou clinic șters. Și numai după o lună, pot fi observate următoarele simptome:
- la nou-născuți, inflamație, umflături și roșeață a anusului, refuzul de a mânca, plâns noaptea, lipsa poftei de mâncare;
- copiii sub un an sunt caracterizați de aceleași simptome, precum și mâncărime severă a anusului noaptea (de la 23.00 la 1.00), fetele suferă de inflamație a organelor genitale;
- la copiii mai mari, dureri abdominale în apropierea buricului, tulburări de somn, mâncărime la nivelul feselor.
3. Simptomele toxocariazei sunt greu de recunoscut, cu excepția temperaturii corporale scăzute și a reacțiilor alergice (erupții cutanate, urticarie, mâncărime și umflături). După infecție, poate apărea o tuse, care provoacă în continuare pneumonie sau bronșită, în special la cei mai mici pacienți. 
Trichinoza sugerează semne ușoare la nou-născuți, în caz contrar sunt observate următoarele semne:
- stare febrilă;
- umflarea feței;
- dureri musculare;
- reactii alergice;
- copiii cu vârsta de 5 ani și peste pot avea amigdale mărite, splină, erupții cutanate și dureri în gât.
Este cel mai dificil să se diagnosticheze simptomele helmintiazei la copii cu vârsta de 2 ani și mai mici, deoarece copilul nu își poate explica comportamentul și starea. Prin urmare, pentru orice manifestare și comportament atipic al copilului, este mai bine să arătați medicului.
Care este primul lucru de făcut?
Viermii care au fost găsiți în scaunul unui copil sunt cel mai important simptom al bolii, după care trebuie să solicitați imediat ajutorul unui medic. Nici un tratament cu helminți nu poate avea succes fără un diagnostic efectuat corespunzător. În acest caz, metodele de anchetă ar trebui să fie complexe, incluzând următoarele proceduri: 
- luând o răzuire din anus;
- studiul fecalelor copilului;
- test de sange;
- biopsie musculară în cazuri rare cu suspiciune de trihinoză;
- test serologic de sânge;
- Radiografie, ultrasunete, tomografie;
- ELISA pentru detectarea anticorpilor din sânge.
Metode de tratament
Tratamentul helmintiazei la copii trebuie să fie cuprinzător, bine gândit, prescris cu doze precise și frecvența administrării medicamentului. Acest lucru se datorează faptului că medicamentele cu componente toxice sunt utilizate pentru efectul antihelmintic, ceea ce înseamnă că utilizarea irațională poate duce la efecte secundare. În plus, acasă, este adecvat tratamentul alternativ cu plante medicinale.
Remedii populare
Tratamentul modern cu remedii populare pentru astfel de boli pentru copii implică 4 moduri eficiente: 
Orice metodă de tratament la domiciliu trebuie discutată în prealabil cu medicul dumneavoastră. Trebuie să ne amintim că există contraindicații pentru plante și remedii populare sub formă de intoleranță individuală.
Tratament medicamentos
- Odată cu enterobiaza și ascariaza, se folosesc de obicei medicamente precum Pirantel și Mebendazol. Luarea Pirantel este adecvată într-o doză de 10 mg de substanță pentru fiecare kilogram de greutate din oxiuri și 5 mg / kg din ascaris. Mebendazolul se administrează de două ori pe zi la 50 mg pentru copiii de 2-3 ani timp de trei zile la rând, de două ori pentru 100 mg timp de trei zile la rând pentru copiii peste 3 ani, după 3 săptămâni se repetă terapia.
- Cu toxocariază, Mebendazolul este prescris într-o doză diferită - pentru copii cu vârsta de 2 ani și peste, de două ori pe zi, 100 mg timp de 14-10 zile.
- Tratamentul cu triinoză acceptă Mebendazol 5 mg pe kilogram de greutate, după care doza este împărțită în trei doze pe zi. Cursul tratamentului este de 1 săptămână sub supravegherea strictă a unui medic.
Prevenirea helmintiazei
- spălarea mâinilor imediat după contactul cu animalele, după stradă și gropi de nisip, mers la toaletă și înainte de a mânca;
- consumul numai de alimente curate;
- tratamentul termic efectuat corespunzător al produselor din carne și pește;
- consumul de apă fiartă;
- respectarea igienei și igienei personale;
- deparazitarea regulată a animalelor de companie;
- efectuarea deparazitării preventive la copiii cu vârsta de peste 2 ani.
Test de sânge pentru toxocars
Caracteristicile infecției umane cu toxocariază
Purtătorii infecției sunt câinii, mai rar pisicile. Ouăle Toxocara sunt distribuite împreună cu fecalele câinilor fără stăpân. Odată ajunși pe pământ, în apă sau zăbovind pe blana unui animal, acestea sunt introduse într-un corp sănătos în diferite moduri.
Reacție la intruziune
Din statisticile medicale se știe că adulții sunt mai puțin susceptibili de a contracta toxocarioză, cu excepția cazului în care ocupația lor este în pericol. Copiii sunt mult mai predispuși să prindă o infecție.
Cele mai frecvente simptome ale toxocariazei:
- Febra fără nicio boală.
- Creșterea temperaturii.
- Creșterea și scăderea durerii în cap sau abdomen.
- Apariția unei erupții cutanate care nu poate fi eliminată.
- Umflarea feței.
- O creștere a nivelului de eozinofile din sânge, relevată de o analiză generală.
Pentru a face un diagnostic precis, este prescris un test imunologic pentru toxocars. Prezența compușilor proteici în sânge, care transportă informațiile genetice ale helmintului (antigeni), provoacă imunitate la producerea de anticorpi din clasa igg. Acesta este primul semn al infecției cu toxocarioză.
Diagnostic preliminar
Etapa inițială a istoriei pacientului este colectivă. Înainte de a trimite un pacient să facă un test de sânge pentru toxocarioză, este necesar să se studieze istoricul bolii și să se efectueze o examinare preliminară.
Diagnostic primar:
- Studiul circumstanțelor agravante care ar putea provoca infecții - lucrări specifice cu animale sau prezența unui animal de companie, săpături în zone potențial periculoase, copii care se joacă în locuri în care câinii merg.
- Examenul fizic al pacientului. Examinarea pielii pentru invazia subcutanată de toxocari, pleoape și globi oculari, palpare.
- Numirea unui test de sânge detaliat. În timpul infecției cu toxocarioză, este caracteristică o creștere semnificativă a unor indicatori - eozinofile (70-80%), limfocite, VSH. În timp ce nivelul hemoglobinei scade semnificativ.
- Recoltarea probelor de ficat. În cazul unei invazii severe, afectează încărcarea ficatului, care se manifestă printr-un salt puternic al bilirubinei.
Este imposibil să se obțină confirmarea directă a invaziei Toxocar folosind teste de rutină (sânge, coprogramă, frotiu). De asemenea, studiul duodenal nu este informativ, deoarece larvele sunt dificil de migrat.
După primirea rezultatelor unei examinări preliminare, indicând o posibilă infecție cu toxocars și diferențierea presupusului diagnostic de bolile cu simptome similare, pacientul este repartizat pentru a fi supus unui ELISA pentru toxocariază.
Test imunosorbent legat
Scopul principal al acestui studiu este confirmarea prezenței toxocarelor în corpul uman. Anticorpii împotriva acestor helminți se găsesc în plasma sanguină, deci este preluat dintr-o venă.
Analiza pentru toxocars necesită o anumită pregătire:
- Nu consumați alimente grase sau grele cu o zi înainte de procedura dumneavoastră.
- Nu beți băuturi zaharoase, carbogazoase sau alcoolice în timpul zilei înainte de a vizita laboratorul.
- Luați probe pe stomacul gol.
- Nu luați medicamente în ziua precedentă și în ziua în care este programat testul.
Trebuie remarcat faptul că acest mod foarte informativ de detectare a unei invazii poate fi influențat de anumite circumstanțe. Un rezultat fals pozitiv poate apărea dacă pacientul are:
- Boli oncologice.
- Tuberculoza pulmonara.
- Patologii hepatice severe.
- Sindromul autoimun.
- Sindromul antifosfolipidic.
- Sarcina.
În acest caz, nu va fi posibil să se obțină o analiză de confirmare 100%, deoarece în aceste condiții, sistemul de apărare produce și imunoglobuline (anticorpi). Este necesar să se efectueze diagnostice suplimentare și să se diferențieze toxocariaza de factorii enumerați.
Concentrația imunoglobulinelor (titrul) din clasa IgG atinge valoarea maximă posibilă după 2-3 luni de la începutul invaziei. Cu cât infecția este mai severă, cu atât este mai mare această cifră.
Rezultatele ELISA
Pentru a face un diagnostic, o imunoanaliză enzimatică este studiată cu atenție, rezultatele obținute sunt comparate cu valorile de referință. Norma este un titru de anticorpi de 1: 100 cu un indice de pozitivitate mai mic de 0,9.
Valorile numerice ale titlurilor
Rezultatele obținute pot fi negative, pozitive, slab pozitive sau discutabile. Numărul titrilor AT depinde de gravitatea invaziei și de vârsta apariției acesteia.
Decodare analiză:
- Titru AT până la 1: 100 - rezultatul este negativ. Nu s-au găsit larve toxocare în corpul pacientului.
- Titru AT până la 1: 400 - rezultatul este slab pozitiv. Pacientul are o invazie slabă sau se dezvoltă forma oculară de toxocarioză. În unele cazuri, indicatorul vorbește despre o infecție recentă.
- Titru AT până la 1: 600 - rezultatul este pozitiv. O persoană suferă de o formă clinică de helmintiază, la depistarea căreia este necesară terapia imediată.
- Titru AT până la 1: 800 - rezultatul este pozitiv. Vorbește despre o invazie severă de natură progresivă și o proporție ridicată a probabilității dezvoltării unui proces patologic al organelor interne.
Cu rare excepții, studiile ELISA relevă o formă neglijată de invazie cu un amestec de helmintiaze de altă origine. În acest caz, totalul anticorpilor poate fi mai mare de 1: 800.
Coeficientul de pozitivitate
Într-un test imunosorbent legat de enzime pentru toxocariază cu titru de 1: 400 - 1: 600 pentru a diferenția invazia de factorii secundari, indicatorii obținuți sunt comparați cu valoarea de referință. Diferența dintre aceste numere se numește de obicei indicele sau coeficientul de pozitivitate.
De obicei, sub forma unui ELISA efectuat, un indicator stă opus celuilalt. Prima este norma, a doua poate însemna:
- Până la 0,9 - rezultatul este negativ. Nu s-au găsit larve toxocare.
- 0.9-1.1 - rezultatul este dubios. În acest caz, sunt alocate diagnostice repetate.
- 1.1-2.2 - rezultatul este slab pozitiv. O persoană este un purtător cu o invazie slabă.
- 2.2-4.2 - rezultatul este pozitiv. Toxocariaza moderată se dezvoltă de mult timp.
- Peste 4.4 - rezultatul indică apogeul invaziei helmintice sau al helmintiazei recente.
KP cu un rezultat de 4,4 și o creștere detectată a eozinofiliei cu 10% poate indica dezvoltarea formei oculare de toxocarioză și prezența anticorpilor la invaziile încrucișate, total la toxocarioză.
Răspunsul imun și densitatea optică a anticorpilor (coeficientul de pozitivitate) depind de gradul de infecție cu toxocari și de localizarea acestora. Cel mai mic titru și indicatorul CP ne permite doar să presupunem absența helminților, dar nu să afirmăm acest lucru.
Informațiile furnizate nu pot servi drept sursă pentru autodiagnosticare sau auto-medicare. Rezultatele ELISA în combinație cu o examinare preliminară pot spune doar unui specialist despre prezența unei probleme. În laboratorul Invitro, diagnosticul de sânge se efectuează cu o precizie ridicată, rezultatul analizei este însoțit de comentarii de la specialiști cu privire la coeficientul de pozitivitate. Acest lucru îl ajută foarte mult pe medic să facă un diagnostic mai precis.
Numărul de determinări 96 (48 în duplicate)
Formatul tabletei de lucru: dezbrăcat 12x8, rupând 1 gaură.
Sensibilitate: 1,5 U / ml.
Domeniu de măsurare: 0-400 U / ml.
Volumul probei de testare nu depășește 25 μl.
Standardizarea condițiilor pentru efectuarea unei reacții enzimatice cu un cromogen într-un agitator termostatat la 37 ° C.
Setul include:
1. Placă dungată 12 x 8 godeuri, gata de utilizare - 1 buc.
2. Probele de calibrare gata de utilizare (0-400 U / ml) colorate cu intensitate variabilă în funcție de concentrație - 6 flacoane.
3. Proba de control - 1 sticlă.
4. Conjugat cu un singur component, gata de utilizare, nu necesită diluare - 1 sticlă.
5. Soluție de diluție serică - 1 sticlă.
6. Substrat cromogen, monocomponent - soluție de tetrametilbezidină plus (TMB +), gata de utilizare, nu necesită diluare - 1 sticlă.
7. Soluție tampon fosfat-ser fiziologic cu tween - 2 flacoane.
8. Opriți reactivul, gata de utilizare - 1 sticlă.
9. Film pentru sigilarea tabletei - 1 buc.
10. Șablon pentru construirea unui grafic de calibrare - 1 buc.
11. Baie reactivă - 2 buc.
12. Sfaturi de pipetă pentru 5-200 µl - 16 buc.
Ambalaje pentru tablete - geantă de tec cu fermoar.
Stabilitatea soluției de lucru FST-T timp de cel puțin 5 zile la o temperatură de +2 ... 8 ° C.
Păstrați kitul la o temperatură de +2 ... 8 ° C. Data expirării - 1 an de la data producției.
Înregistrat la Roszdravnadzor.
Principalii producători ruși În segmentul kiturilor de reactivi pentru diagnosticarea infecțiilor: - CJSC Vector-Best, Novosibirsk; - LLC NPO Diagnostic Systems, N. Novgorod; - CJSC „Ecolab”, Electrogorsk, regiunea Moscovei. În domeniul kiturilor de reactivi pentru diagnosticarea bolilor neinfecțioase și a condițiilor fiziologice: - LLC "Alkor-Bio", Sankt Petersburg; - CJSC „Vector-Best”, Novosibirsk; - LLC „Hema-Medica”, Moscova. În segmentul reactivilor pentru diagnosticul de laborator al alergiilor: - LLC "Alkor-Bio", Sankt Petersburg; - CJSC „Vector-Best”, Novosibirsk; - LLC NPO Immunotex, Stavropol. Producția de echipamente de laborator: - LLC "Pikon, Moscova
Evaluarea gradului de substituție posibilă a importului prin nomenclatura testelor Nomenclatura analiților, unităților Aprobat pentru utilizare în RF Produs în RF Grad de posibilă substituție a importului Markeri de boli infecțioase% Markeri de boli neinfecțioase și indicatori de stări fiziologice% Markeri de alergie% Total:%
Evaluarea gradului de substituție a importului cu volumul pieței pentru produse pentru tablete ELISA Segmente de piață Volumul pieței în Federația Rusă, mln. Volumul vânzărilor producătorilor autohtoni, mln frecare. Ponderea substituției de import Markeri de boli infecțioase% Markeri de boli netransmisibile și indicatori de stări fiziologice% Markeri de alergie% Echipamente 50051% Total:%
Evaluarea gradului de substituție a importului cu volumul pieței pentru produse pentru metode imunochimice în ansamblu Segmente de piață Volumul pieței în Federația Rusă, mln. Volumul vânzărilor producătorilor autohtoni, mln frecare. Ponderea substituției de import Markeri de boli infecțioase% Markeri de boli netransmisibile și indicatori de stări fiziologice% Markeri de alergie% Echipamente% Total:%
Probleme ale producătorilor autohtoni din industrie: metoda ELISA devine învechită. Există o înlocuire treptată a reactivilor IF domestici cu chimioluminescenți importați; Sistemul existent de achiziții publice stimulează fie achiziționarea celor mai ieftine bunuri, fie produse importate cu caracteristici unice; Unul dintre principalele motive pentru subdezvoltarea producătorilor autohtoni de echipamente automate și localizarea producției de produse importate este bariera administrativă vamală; Principala problemă a vremurilor recente este prăbușirea sistemului de înregistrare de stat a noilor produse în RZN. Admiterea de noi produse pe piață s-a oprit practic, iar acei producători străini care s-au înregistrat anterior pe liste lungi continuă să aibă un avantaj față de cele interne; Principalul motiv al decalajului tehnologic este incapacitatea de a obține dreptul de a produce produse compatibile pentru echipamente moderne; Gradul scăzut de consolidare a producătorilor autohtoni și războaiele constante de prețuri între ei nu fac posibilă dezvoltarea de produse avansate și concurența cu jucători de frunte pe picior de egalitate, inclusiv pe piețele externe.
Propuneri: Introducerea unei proceduri necompetitive pentru achizițiile publice de dispozitive medicale în cadrul FCC, urmată de publicarea pozițională. Determinarea limitelor de finanțare pe baza prețului mediu de piață va oferi anumite avantaje producătorilor interni, va permite limitarea consumului de reactivi importați scumpi și controlul mai eficient al utilizării fondurilor bugetare; Promovarea extinderii și consolidării producătorilor autohtoni pentru a concentra resursele pe dezvoltarea de produse moderne și pentru a intra pe piața internațională. Procedura de achiziție publică neconcurențială va lăsa rapid pe piață doar întreprinderi cu adevărat competitive; Să aloce fonduri de stat pentru a stimula, pe principiile parteneriatului public-privat, dezvoltarea unei game de teste suficiente pentru a asigura siguranța biologică a țării; Avantajele vamale ar trebui să fie pentru componente și nu pentru produse finite; Armonizați sistemul de înregistrare cu cel european, unde dispozitivele medicale cu un nivel scăzut de risc potențial sunt înregistrate pe baza unei declarații de conformitate.
Se încarcă ...