Antigen cardiolipinic pentru reacția de microprecipitare. Diagnosticul serologic nespecific al sifilisului Microreacția precipitațiilor cu antigen cardiolipinic (rmp). Testele serologice de confirmare diagnostice

Analiza sângelui pentru cancerul vezicii urinare - ce este? Ce înseamnă acest acronim? În ce măsură este completă această analiză pentru diagnosticarea sifilisului?

Cum este diagnosticată sifilisul?

Agentul cauzal al sifilisului sau al treponemului palid produce mai multe tipuri de proteine ​​străine agresive, care se numesc antigene. Este un antigen proteic care este bine recunoscut de sistemul imunitar, un antigen polizaharidic care nu este utilizat în diagnosticare și un antigen lipidic foarte important. Această substanță are o asemănare semnificativă cu fosfolipidele, care fac parte din membranele celulelor umane.

Acest antigen reprezintă aproximativ 30% din masa totală a agentului cauzal al sifilisului și tocmai pentru acesta se produc anticorpi speciali la începutul celei de-a doua luni după infecție, care se numesc reagine. Privind în perspectivă, putem spune că această similitudine a antigenului cu fosfolipidele membranelor umane provoacă posibile reacții fals pozitive, mai ales dacă pacientul are o patologie autoimună, așa-numitul sindrom antifosfolipidic.

Diagnosticul sifilisului se bazează pe două mari grupuri de metode. În primul caz, ei caută direct agentul patogen la microscop, obiectele de studiu sunt diverse descărcări - de la ulcere, eroziuni, de la fundul gingiei, de la elemente ale erupției cutanate. În al doilea rând, detectează anticorpii care apar în serul sau plasma pacientului la antigenii menționați anterior.

În acest caz, metodele de diagnosticare serologică (din latină ser - ser) sunt împărțite în două grupuri. În prima dintre ele se utilizează antigene treponemice specifice, care se obțin din culturi pure de microorganisme sifilitice. Și reacțiile serologice nespecifice utilizează antigeni similari, dar nu se obțin decât din agenți patogeni și similari cu aceștia - așa-numitul antigen cardiolipin, care se obține din inimile bovine. Este foarte similar cu antigenul lipidic al agentului cauzal al sifilisului și poate „provoca” un răspuns imun în prezența anticorpilor în sângele pacientului.

Aceste teste non-treponemale (în care reactivii nu sunt „reali”) nu necesită antigene specifice scumpe, deci sunt ieftine, accesibile și rapide. Scopul lor este screeningul, cercetarea primară sau reacțiile de screening. Aceste teste non-treponemale includ reacția de microprecipitare sau cancerul de vezică urinară.

Pentru a stabili în cele din urmă diagnosticul, nu sunt suficiente doar testele non-treponemice. Dacă pacientul are un răspuns pozitiv, în acest caz, se utilizează întregul arsenal de studii pentru sifilis - începând de la și terminând cu metode speciale de cercetare - aceasta este o reacție de hemaglutinare pasivă și metoda imunoblot. Acestea includ, de asemenea, metode de imunofluorescență indirectă, precum și reacția de imobilizare a treponemului.

Ultimele două metode sunt utilizate de specialiștii din instituții specializate, deoarece nu o substanță din inima bovină este deja utilizată ca antigen, ci microorganisme sifilitice vii special cultivate la iepuri în aceste scopuri. Să luăm în considerare mai detaliat ce este o microprecipitare sau o micro-reacție.

Test de sânge cu microreacție - ce este?

Există un număr mare de cereri pe Runet, a căror semnificație se reduce la următoarele: test de sânge pentru cancerul vezicii urinare - ce este? Răspundem la întrebarea pusă. Reacția de precipitare este stabilită nu numai pentru studiul sifilisului, ci servește microbiologie și imunologie de mai multe decenii. Tradus din latină, aceasta înseamnă reacție de precipitare.

În timpul studiului, antigenele sunt amestecate, care sunt introduse în soluție în prealabil. În acest caz, vorbim despre antigenul cardiolipinei. Apoi serul de sânge luat de la pacient este adăugat la această soluție. Și dacă acest sânge conține anticorpi care s-au dezvoltat la un antigen similar al agentului cauzal al sifilisului, atunci aceștia „ca o cheie a unei încuietori” se vor apropia de centrele active ale moleculelor de antigen. Ca urmare, apar structuri mari, interconectate, ale complexelor imune, care se numesc precipitate. Acestea sunt molecule de antigen, „agățate” de anticorpi. Sunt mai mari și mai grele și, ca rezultat, vor fi observabile sau turbiditatea soluțiilor transparente sau precipitațiile lor.

Într-un caz specific, atunci când se efectuează o reacție de microprecipitare pentru sifilis, se observă apariția fulgilor albi. Există o mare varietate de reacții de precipitare care pot fi efectuate nu numai într-o eprubetă, ci și într-un gel semilichid, în diferite medii de cultură și în alte moduri.

RPR - modificare

De asemenea, în laboratoarele moderne puteți întâlni un alt nume similar - testul RPR. Aceasta este deja o modificare modernă a precipitațiilor, în care se găsesc reagine plasmatice rapide. Acești reactivi sunt numiți anticorpi aparținând claselor de imunoglobuline G și M.

Este testul RPR (al doilea nume al acestuia este un test nespecific antifosfolipidic sau reagin) care este recomandat prin ordin al Ministerului Sănătății al Federației Ruse pentru screening sau testare primară pentru sifilis. Prin urmare, dacă aveți de ales: să faceți un RMP sau să efectuați un RPR, atunci este mai bine să decideți în favoarea celei de-a doua metode.

RPR - metoda de cercetare permite identificarea a aproape 80% din persoanele cu evoluția infecției primare și a aproape 100% a persoanelor care suferă de sifilis secundar sau forme latente (latente). RPR - reacția poate detecta sifilisul încă din 7 zile de la apariția sifilomului primar, de exemplu, un șancru dur. Acest lucru se poate face de obicei la o lună după infecție.

Indicații pentru cercetare și reguli pentru prelevarea de sânge

Cum se donează sânge pentru cancerul vezicii urinare - un test pentru sifilis? Cum să vă pregătiți pentru studiu? Ca în majoritatea cazurilor de donare de sânge, nu sunt necesare măsuri pregătitoare speciale pentru pacient. Cel mai important lucru este că sângele este luat pe stomacul gol, ceea ce se face de obicei dimineața devreme. În cazul în care această regulă nu poate fi respectată, atunci sângele poate fi donat la 4 ore după o masă ușoară. Consumul de lichid este permis dacă este curat, necarbonat și nu apă minerală. Toate celelalte tipuri de lichide precum sucurile, cafeaua și ceaiul sunt nedorite pentru a evita reacțiile false.

Este prezentată reacția de microprecipitare și RPR-ul său analogic mai perfect, cu suspiciunea primară de sifilis. De asemenea, aceste reacții sunt necesare pentru efectuarea, în primul rând, pentru diagnosticarea sifilisului latent. Ca metodă de screening, aceste teste sunt utilizate pentru screening-ul donatorilor și pur și simplu la vizita inițială. Trebuie subliniat faptul că valoarea pozitivă a acestor teste nu este în niciun fel echivalentă cu diagnosticul de sifilis, deoarece antigenul nu a fost sifilitic, ci pur și simplu „similar”. Aceste rezultate trebuie confirmate prin teste treponemale sau alte metode moderne de diagnostic, de exemplu.

Interpretarea și interpretarea rezultatelor

Decodarea unui test de sânge pentru cancerul de vezică urinară implică eliberarea unui rezultat nu cantitativ, ci calitativ: „pozitiv” sau „negativ” - anticorpii au fost detectați sau nu au fost detectați.

În cazul sifilisului primar, această reacție poate fi pozitivă deja în 60% din cazuri și mai mult. În cazul sifilisului secundar, atunci când există o mulțime de anticorpi în organism, reacția devine sigură sută la sută. Dacă sifilisul se desfășoară latent sau latent, dar pentru o perioadă destul de lungă, atunci reacția de microprecipitare va fi fiabilă în 80% din cazuri.

Cu sifilisul terțiar, gama de valori poate varia de la 37% la 94%. La urma urmei, dacă sifilisul durează foarte mult, literalmente ani, atunci anticorpii din diverse motive pot dispărea din sânge sau înceta să mai fie produși.

Deoarece reacția de microprecipitare este o metodă de screening, trebuie luată în considerare următoarea circumstanță foarte importantă. Această reacție se manifestă prin formarea de complexe imune-precipită numai dacă anticorpii și antigenul sunt în sânge în proporții stricte, ar trebui să existe suficient pentru ca anticorpii să se lege complet de întreaga cantitate de antigen și să nu existe exces în soluție a oricăruia dintre reactivi.

Dacă există semnificativ mai mulți anticorpi, atunci reacția poate să nu apară deloc. Acest fenomen a devenit cunoscut în studiul sifilisului congenital. Bebelușii cu infecție congenitală au atât de mulți anticorpi în sânge încât reacția pur și simplu nu apare.

Acesta este motivul pentru care interpretarea rezultatelor cancerului de vezică urinară la sugari trebuie abordată foarte atent.

Ce boli pot provoca rezultate fals pozitive? Lista lor este destul de mare:

  • boli ale țesutului conjunctiv sistemic și leziuni reumatice;
  • sarcină (rareori);
  • gută și hiperuricemie;
  • alcoolism cronic;
  • Diabet;
  • deoarece micobacteriile și treponema pallidus au antigene similare;
  • dependență de droguri intravenoase;
  • amigdalită limfocitară sau;
  • alte infecții virale și bacteriene (hepatită virală sau diaree enterovirală, scarlatină, rujeolă);
  • pneumonie virală sau bacteriană;
  • tiroidita autoimună;
  • vârstnici și vârstă senilă.

De asemenea, această reacție poate fi fals pozitivă după diferite vaccinări și vaccinări.

Cu toate acestea, în cazul în care reacția de microprecipitare sau analogul său mai perfect - RPR - este negativă, atunci aceasta nu poate indica fără echivoc absența infecției sifilitice. Un pacient se poate infecta cu sifilis literalmente cu două-trei zile, o săptămână sau două înainte de examinare, iar apoi anticorpii din sânge pur și simplu nu au timp să apară. Această afecțiune se numește sifilis precoce seronegativ. Este posibilă și o situație complet opusă, când pacientul este bolnav de 10 sau 20 de ani și are sifilis terțiar tardiv cu absența anticorpilor în plasma sanguină.

Dacă RMP sau RPR sunt pozitive

Desigur, ceea ce îi îngrijorează cel mai mult pe oameni este dacă cancerul vezicii urinare este pozitiv.

În acest caz, este necesar să se efectueze teste de confirmare suplimentare, care au fost menționate mai sus. Dacă subiectul ales este și, atunci specificitatea lor este mult mai mare și este 100% cu o sensibilitate de 95%. Dar chiar și aceste metode suplimentare pot da, de asemenea, un rezultat fals pozitiv, mai ales în cazul bolilor inflamatorii concomitente, precum și a proceselor autoimune. De aceea, în practica clinică, diagnosticul de sifilis este în mod necesar confirmat folosind două metode suplimentare. Aceasta poate fi o reacție de imunofluorescență sau imobilizarea agenților patogeni ai sifilisului (RIBT). Dar aceste studii sunt costisitoare și rareori folosite.

Este posibil să se utilizeze reacția de fixare a complementului (CSC), care utilizează un antigen treponemal specific. Este prezentată o pată imună, care ajută în cazurile îndoielnice cu tablou clinic neclar. În cele din urmă, reacția în lanț a polimerazei vine în ajutor, cu ajutorul căreia este posibilă determinarea prezenței ADN-ului spirochetei palide în corpul pacientului.

Dacă se suspectează sifilisul, medicii prescriu un test de sânge pentru anticorpi la antigenul cardiolipinei. Această analiză este o versiune îmbunătățită a reacției Wasserman (RW). În forma sa clasică, testul RW nu a fost folosit de aproximativ 30 de ani. În prezent, acest studiu este realizat exclusiv prin metode imunologice. Care sunt valorile normale pentru acest eșantion? Și cum să-i descifrez corect rezultatele? Vom lua în considerare aceste întrebări în articol.

Ce este?

Antigenul cardiolipinei este o substanță asemănătoare lipidelor. În compoziția sa, este similar cu proteinele agentului cauzal al sifilisului - treponema pal. Un astfel de medicament este utilizat pentru diagnosticarea precoce a acestei boli periculoase cu transmitere sexuală. Vă permite să identificați patologia în stadiile incipiente.

Pentru cercetare, sângele venos este luat și amestecat cu antigenul cardiolipinei. Reacția de interacțiune dintre biomaterial și medicament se numește Dacă o persoană este sănătoasă, atunci sângele său nu produce anticorpi împotriva antigenului. Dacă pacientul suferă de sifilis, atunci în corpul său se formează activ imunoglobuline din clasa M și G. În acest caz, fulgii apar în amestecul de sânge și medicament. Acest precipitat este o acumulare de complexe antigen-anticorp (precipitat).

Formarea imunoglobulinelor la o persoană infectată începe la 7-10 zile de la apariția unui șancre (ulcer nedureros) pe piele sau membrană mucoasă. Acesta este un simptom timpuriu al sifilisului. Producția de anticorpi are loc de obicei la 2-3 săptămâni de la infecție.

Pentru test, se folosește un set de "antigen cardiolipinic". Se obține din inima unui taur. Extractul de organ este amestecat cu colesterol și lecitină. Substanța rezultată are proprietăți similare cu proteinele treponema pal. Este capabil să provoace formarea de imunoglobuline atunci când reacționează cu sângele unui pacient cu sifilis.

Indicații

Analiza cu antigen cardiolipin este prescrisă în următoarele cazuri:

  • în prezența contactului sexual neprotejat al pacientului cu partenerii ocazionali;
  • în timpul contactelor casnice cu pacienții cu sifilis;
  • cu simptome ale etapelor primare și secundare ale sifilisului (șancru, erupții pe corp);
  • cu suspiciune de neurosifilis (tulburări mentale și neurologice);
  • copiii născuți de femei infectate;
  • pentru a monitoriza eficacitatea terapiei antisifilitice.

Acest test nu este întotdeauna informativ pentru formele avansate (terțiare) de patologie. În etapele ulterioare ale sifilisului, producția de anticorpi este redusă semnificativ.

În timpul sarcinii trebuie efectuat un test cu antigen cardiolipin. În plus, un astfel de studiu este necesar pentru donatorii și persoanele care întocmesc o carte medicală.

Cum se face cercetarea?

Este foarte important să vă pregătiți cu atenție pentru analiză. Acest test oferă rezultate fals pozitive destul de des. Cu două zile înainte de a dona sânge, trebuie să excludeți complet:

  • utilizarea băuturilor alcoolice (chiar și cu conținut scăzut de alcool);
  • consumul de droguri cu digitală;
  • alimente grase.

Analiza trebuie făcută dimineața pe stomacul gol. Studiul ia 8-10 ml de sânge venos. Rezultatele testelor sunt de obicei disponibile în 1-2 zile.

Normă

Dacă pacientul nu suferă de sifilis, atunci sângele său nu reacționează cu antigenul cardiolipinei. Un rezultat negativ al testului în majoritatea cazurilor înseamnă că persoana este sănătoasă. În decriptarea testului, acest lucru este indicat de semnul „-” sau „RW-”. Aceasta este considerată norma.

Cu toate acestea, chiar și cu rezultate negative ale testelor, nu se poate exclude complet faptul că o persoană este infectată cu treponema palidă. La urma urmei, anticorpii nu sunt produși în timpul perioadei de incubație a patologiei. O producție foarte slabă de imunoglobuline se remarcă și în forma terțiară a sifilisului. Prin urmare, dacă o persoană cu o reacție negativă Wasserman are semne de patologie, atunci analiza este prescrisă din nou.

Posibile abateri

Să ne uităm la decodarea analizei. Severitatea unei reacții pozitive este indicată în forma rezultatelor testului cu semne „+”. Următoarele date de testare sunt considerate anomalii:

  • „+” - rezultat dubios (se recomandă reluarea analizei).
  • „++” este o reacție slab pozitivă.
  • „+++” este un rezultat pozitiv.
  • „++++” este un test puternic pozitiv.

Ce se întâmplă dacă testul cardiolipinei este pozitiv? Sifilisul nu este de obicei diagnosticat numai de Wasserman. În acest caz, medicii prescriu întotdeauna studii suplimentare.

Acest test în 70% din cazuri relevă stadiul primar al sifilisului, iar în 100% din cazuri prezintă forma secundară a bolii. Cu toate acestea, rezultatele pozitive ale studiului nu indică întotdeauna infecția cu treponema palidă. Mulți factori pot influența datele din această analiză. Vor fi discutate în continuare.

Rezultate false

Deseori există cazuri când testul Wasserman arată formarea de anticorpi, dar persoana nu suferă de sifilis. O reacție fals pozitivă este observată în următoarele boli și condiții:

  • sarcina;
  • mononucleoza infectioasa;
  • gută;
  • diabetul zaharat;
  • malarie;
  • pojar;
  • scarlatină;
  • bruceloză;
  • pneumonie;
  • chlamydia;
  • infecție cu micoplasmă;
  • hepatita virala;
  • tuberculoză;
  • tumori maligne;
  • tiroidita;
  • boli autoimune (lupus eritematos sistemic, sclerodermie, poliartrită reumatoidă);
  • infecție cu enterovirusuri;
  • vaccinări recente;
  • la pacienții vârstnici (în 10% din cazuri);
  • consumul de alcool în ajunul studiului;
  • dependența de droguri.

Se poate concluziona că lista bolilor și afecțiunilor în care sunt observate rezultate false ale testelor este destul de extinsă. Prin urmare, pentru un diagnostic precis, este prescris un test de sânge cu imunofluorescență. Vă permite să identificați mai sigur prezența imunoglobulinelor G la treponema pallidum. De asemenea, se efectuează un test de sânge folosind metoda de diagnostic PCR. Arată prezența fragmentelor de ADN treponema pallidum la pacient. Medicul pune diagnosticul final numai pe baza unui studiu cuprinzător.

Ultima descriere actualizată de producător 31.07.1996

Lista filtrabilă

Compoziția și forma eliberării

Un set de 5 fiole de antigen cardiolipinic, care conține 2 ml de medicament și o sticlă de soluție de clorură de colină care conține 5 ml de medicament; în pachet 2 seturi. 1 set este conceput pentru 200-240 de determinări.

Caracteristică

O soluție de trei lipide foarte purificate: cardiolipină, lecitină, colesterol în alcool etilic absolut. Soluție transparentă incoloră cu miros specific de alcool.

efect farmacologic

efect farmacologic- diagnostic.

Detectarea anticorpilor împotriva agentului cauzal al sifilisului.

Indicații pentru medicamentul antigen Cardiolipin pentru reacția de microprecipitare (RMP)

Diagnosticul sifilisului (studiu al plasmei active sau al serului inactivat într-o reacție de microprecipitare).

Condiții de depozitare Antigenul cardiolipinei pentru reacția de microprecipitare (RMP)

Într-un loc întunecat la o temperatură de 6-22 ° C.

A nu se lasa la indemana copiilor.

Data de expirare Antigenul cardiolipinei pentru reacția de microprecipitare (RMP)

1 an.

A nu se utiliza după data de expirare tipărită pe ambalaj.

Este un test de screening pentru screeningul în masă al populației pentru sifilis.

Punere în scenă: plasmă sau ser de sânge inactivat + antigen special de cardiolipină (extract de inimă bovină îmbogățit cu colesterol și lecitină). Se formează un precipitat (complex antigen-anticorp), care precipită sub formă de fulgi albi.

Cancerul vezicii urinare poate fi, de asemenea, efectuat folosind o metodă cantitativă cu diluarea serului sanguin.

Avantajele metodei expres:

    răspuns rapid (30-40 minute),

    o cantitate mică de sânge necesară pentru analiză (2-3 picături de plasmă sau ser).

Surse de erori la setarea RMP:

    colectarea necorespunzătoare a sângelui dintr-un deget (prezența bulelor de aer în capilarul pipetei);

    concentrația inegală de antigen în emulsie datorită amestecului insuficient înainte de utilizare;

    contaminarea bacteriană a emulsiei;

    încălcarea termenilor și condițiilor de depozitare a serului de plasmă și sânge, antigen și emulsia acestuia, soluții;

    utilizarea de eprubete, pipete, plăci, soluții contaminate la instalarea reacțiilor.

Erorile de mai sus pot duce atât la rezultate de reacție fals negative, cât și la rezultate fals pozitive.

După terminarea terapiei, cancerul vezicii urinare este plasat, iar dinamica procesului infecțios și eficacitatea terapiei sunt evaluate de scăderea titrului.

Confirmarea eficacității terapiei este considerată a fi o scădere a titlului de 4 sau mai multe ori în decurs de 1 an; la sfârșitul acestei perioade, se efectuează aceeași reacție specifică ca la examinarea inițială.

Testele serologice de confirmare diagnostice

ELISA, RIF și RPGA sunt reacții extrem de sensibile și foarte specifice la sifilis.

Datorită sensibilității diferite în diferite forme de sifilis, a specificității și complexității decorului, fiecare dintre aceste reacții are propriul său scop.

Screeningul preventiv al populației pentru sifilis poate fi efectuat utilizând RMP, ELISA și RPGA.

Dacă se obține un rezultat pozitiv al cancerului de vezică urinară, pacientul trebuie examinat de un dermatovenerolog cu un test de sânge repetat în orice test de diagnosticare pentru sifilis.

Atunci când trebuie utilizat examenul profilactic pentru sifilisul pacienților cu ochi, neuropsihiatrice, spitale cardiologice, femei gravide, ELISA sau RPGA.

La examinarea donatorilor, este necesar să se utilizeze ELISA sau RPHA, dar întotdeauna în combinație cu cancerul vezicii urinare. Afirmarea a două reacții în același timp se datorează responsabilității ridicate a acestui studiu.

Testele specifice de mai sus sunt utilizate pentru a diagnostica toate formele de sifilis, în special latente, precum și pentru a recunoaște rezultatele fals pozitive obținute în cancerul de vezică urinară.

Trebuie avut în vedere faptul că testele treponemice specifice pot rămâne pozitive (nu negative) timp de câțiva ani și, în unele cazuri, pot rămâne pozitive pe viață.

Imunotest pentru diagnosticarea serului și a lichiorului sifilisului

"■); // U! £ // -

Principiu: - shshsha T. pallidum este sensibilizat la suprafața purtătorului în fază solidă (godeuri de panou). Se adaugă serul de testare. În prezența anticorpilor împotriva T. pallidum, se formează un complex antigen-anticorp, care este legat de suprafața purtătorului. În etapa următoare, un ser anti-specie (împotriva imunoglobulinelor umane) marcat cu o enzimă (peroxidază sau fosfatază alcalină) este turnat în godeuri. Anticorpii marcați interacționează cu complexul antigen-anticorp pentru a forma un complex nou. Pentru a o detecta, o soluție de substrat (acid 5-aminosalicyic) este turnată în godeuri. Sub acțiunea enzimei, substratul își schimbă culoarea, ceea ce indică un rezultat pozitiv.

Optim în cazul utilizării ELISA este utilizarea simultană a trei dintre opțiunile sale:

    detectarea AT total (CAT)

    determinarea ulterioară diferențiată a IgM și IgG specifice treponemului.

Apariția anticorpilor anti-sifilitici are loc în conformitate cu modelele generale ale răspunsului imun. IgM apare pentru prima dată la 2-4 săptămâni după infecție și dispare la pacienții netratați după aproximativ 18 luni; în tratamentul sifilisului precoce după 3-6 luni; târziu - un an mai târziu. Pe măsură ce boala progresează, începe să predomine sinteza IgG, care apare la 4 săptămâni după infecție, ating titruri mai mari și persistă mult timp chiar și după vindecarea clinică.

Surse de erori la utilizarea sistemelor de testare ELISA:

    încălcări ale tehnicilor de colectare a sângelui, condiții de transport și depozitare a sistemelor de testare și a probelor.

    munca de calitate slabă a tehnicienilor de laborator,

    orice abateri de la instrucțiunile de utilizare a sistemului de testare,

    funcționarea defectuoasă a instrumentelor și dispozitivelor,

Se încarcă ...Se încarcă ...