Танините (танините) са растителни фенолни съединения с високо молекулно тегло, способни да утаяват протеини и имат стипчив вкус.

Терминът "танини" се е развил исторически, благодарение на способността на тези съединения да превръщат суровите животински кожи в здрава кожа, устойчива на влага и микроорганизми. Да се ​​използва този термин, официално предложен през 1796 г. от Сегуин, за да се обозначават в екстрактите от някои растения вещества, способни да извършват процеса на дъбене.

Дъбилът е сложно химично взаимодействие на танидите с колагеновите молекули - основният протеин на съединителната тъкан. Тъбилните свойства се притежават от многоядрени феноли, съдържащи повече от един хидроксил в молекулата. С плоско подреждане на танид върху протеинова молекула, между тях възникват стабилни водородни връзки:

Фрагмент от протеинова молекула Фрагмент от танидна молекула

Силата на взаимодействието на танида с протеина зависи от броя на водородните връзки и е ограничена от размера на молекулата на полифенолното съединение. Молекулното тегло на танините може да бъде до 20 000. В същото време в танидите има 1-2 фенолни хидрокси групи на 100 единици молекулно тегло. Следователно броят на образуваните водородни връзки е многоброен и процесът на дъбене е необратим. Хидрофобните радикали, ориентирани към външната среда, правят кожата недостъпна за влага и микроорганизми.

Не всички танини са способни на истински тен. С това свойство се отличават съединения с молекулно тегло 1000 или повече. Полифенолните съединения с маса по-малка от 1000 не са способни да дъбенят кожата и имат само стягащо действие.

Танините се използват широко в промишлеността. Достатъчно е да се каже, че световното производство на танини надхвърля 1 500 000 тона годишно, а делът на растителните таниди е до 50-60% от общия брой.

Разпространение в растителния свят и ролята на танините в растенията. Танините се срещат широко в представители на покрити и голосеменни растения, водорасли, гъби, лишеи, в лимфоиди и папрати. Те се срещат в много висши растения, особено двусемеделни. Най-голям е техният брой при редица представители на семействата Fabaceae, Myrtaceae, Rosaceae, Anacardiaceae, Fagaceae, Polygonaceae.

Танините в растението се намират в клетъчните вакуоли и по време на стареенето на клетките се адсорбират върху клетъчните стени. Те се натрупват в големи количества в подземните органи, кората, но могат да бъдат в листата и плодовете.

Танините изпълняват основно защитни функции в растенията. При механично увреждане на тъканите започва засилено образуване на танини, придружено от тяхната окислителна кондензация в повърхностните слоеве, като по този начин предпазва растението от по-нататъшно увреждане и отрицателното влияние на патогени. Поради голямото количество фенолни хидроксилни групи, танините имат изразени бактериостатични и фунгицидни свойства, като по този начин предпазват растителните организми от различни заболявания.

Класификация на танините. През 1894 г. Г. Проктер, изучавайки крайните продукти от пиролизата на танините, открива 2 групи съединения - пирогалова (образува се пирогалол) и пирокатехол (пирокатехол се образува при разлагане):

К. Фройденберг през 1933 г. изяснява класификацията на G. Procter. Той, подобно на Проктър, класифицира танините по крайните продукти от тяхното разпадане, но не при условия на пиролиза, а при киселинна хидролиза. В зависимост от способността за хидролиза, К. Фройденберг предлага да се разграничат две групи танини: хидролизиран и кондензиран.В момента по-често се използва класификацията на К. Фройденберг.

Към групата хидролизиращи се таниниСъединенията са конструирани според вида на естерите и се разлагат по време на киселинна хидролиза на съставните им компоненти. Централната връзка най-често е глюкозата, по-рядко други захари или алициклични съединения (например хининова киселина). Алкохолните хидроксилни групи на централния остатък могат да бъдат свързани с етерна връзка с галова киселина, като по този начин образуват група галотанини, или елагова киселина, образуваща група елагитанини.

Галотанини- естери на галовата киселина, най-често срещани в групата на хидролизиращите се танини. Има моно-, ди-, три-, тетра-, пента- и полихалоилови етери. Представител на моногалоил етери е b-D-глюкогалин:

Пример за полихалоил етери е китайският танин, чиято структура е установена за първи път през 1963 г. от Hawors:

Елагитаниниса естери на захар и елагова киселина или техни производни. Елаговата киселина се образува при окисляването на две молекули галова киселина до хексаоксидифенова киселина, която веднага образува лактон - елагова киселина:

Както и в предишния случай, глюкозата най-често е захарният компонент на елагитанините.

Естери на галова киселина без захарса естери на галовата киселина и не-захарен компонент като хининова киселина, хидроксиканелена киселина и др. Пример за тази група вещества е 3,4,5-трихалоилхинова киселина.

Кондензирани таниниТе се различават от хидролизиращите се по това, че по време на киселинна хидролиза не се разпадат на съставните си компоненти, а напротив, под действието на минерални киселини се образуват плътни червено-кафяви полимеризационни продукти - флобафени.

Кондензираните танини се образуват главно от катехини и левкоцианидини и много по-рядко от други редуцирани форми на флавоноиди. Кондензираните танини не принадлежат към групата "гликозиди": в кондензираните танини няма захарен компонент.

Образуването на кондензирани танини може да се случи по два начина. К. Фройденберг (30-те години на XX век) установява, че образуването на кондензирани танини е неензимен процес на автокондензация на катехини или левкоцианидини (или тяхната кръстосана кондензация) в резултат на излагане на атмосферен кислород, топлина и кисела среда . Автокондензацията е придружена от разкъсване на пирановия пръстен на катехините и въглеродният атом С-2 на една молекула е свързан чрез въглерод-въглеродна връзка с въглеродния атом С-6 или С-8 на друга молекула. В този случай може да се образува достатъчно дълга верига:

Според друг учен, D. Hatuei, кондензирани танини могат да се образуват в резултат на ензимна окислителна кондензация на молекули от „глава до опашка“ (пръстен A към пръстен B) или „опашка до опашка“ (пръстен B към пръстен B) видове:

Растенията, съдържащи кондензирани танини, трябва да имат своите предшественици – свободни катехини или левкоцианидини. Смесени кондензирани полимери на катехини и левкоцианидини са често срещани.

По правило в растенията едновременно присъстват танини както от кондензирани, така и от хидролизиращи се групи.

Физикохимични свойства на танините. Танините се отличават с високо молекулно тегло - до 20 000. Естествените танини, с малки изключения, са известни досега само в аморфно състояние. Причината за това е, че тези вещества са смеси от съединения, които са сходни по химическа структура, но се различават по молекулно тегло.

Танините са жълти или кафяви съединения, които образуват колоидни разтвори във вода. Разтворим в етанол, ацетон, бутанол и неразтворим в разтворители с изразена хидрофобност - хлороформ, бензен и др.

Галотанините са слабо разтворими в студена вода и относително добре разтворими в гореща вода.

Танините имат оптична активност и лесно се окисляват във въздуха.

Поради наличието на фенолни хидроксилни групи те се утаяват със соли на тежки метали и образуват оцветени съединения с Fe +3.

Изолиране на танини от растителни материали. Тъй като танините са смес от различни полифеноли, тяхното изолиране и анализ представлява известна трудност.

Често, за да се получи общото количество танини, суровината се екстрахира с гореща вода (танините са слабо разтворими в студена вода) и охладеният екстракт се обработва с органичен разтворител (хлороформ, бензол и др.) за отстраняване на липофилните вещества. След това танините се утаяват със соли на тежки метали, последвано от разрушаване на комплекса със сярна киселина или сулфиди.

За да получите фракция от танини, сходни по химическа структура, можете да използвате екстракцията на суровини с диетилов етер, метил или етилов алкохол с предварително отстраняване на липофилни компоненти с помощта на разтворители с изразена хидрофобност - петролев етер, бензен, хлороформ.

Изолирането на някои компоненти на танините чрез утаяване от водни или водно-алкохолни разтвори с оловни соли е широко разпространено. След това получените утайки се обработват с разредена сярна киселина.

При изолиране на отделни компоненти на танините се използват хроматографски методи: адсорбционна хроматография върху целулоза, полиамид; йонообмен на различни катионообменници; разпределение върху силикагел; гел филтрация върху молекулярни сита.

Идентифицирането на отделните компоненти на танините се извършва с помощта на хроматография върху хартия или в тънък слой сорбент, като се използва спектрален анализ, качествени реакции и изследване на продуктите на разцепване.

Качествен анализ на танините. Качествените реакции към танините могат да бъдат разделени на две групи: реакции на утаяване и цветни реакции. За извършване на висококачествени реакции суровините най-често се извличат с гореща вода.

Реакции на утаяване. 1. Когато танините взаимодействат с 1% разтвор на желатин, приготвен в 10% разтвор на натриев хлорид, се образува утайка или разтворът става мътен. Когато се добави излишък от желатин, мътността изчезва.

2. Танидите дават обилно утаяване с алкалоиди (кофеин, пахикарпин), както и някои азотни основи (уротропин, новокаин, дибазол).

3. При взаимодействие с 10% разтвор на оловен ацетат, танините от хидролизиращата се група образуват флокулираща утайка.

4. Кондензираните танини образуват флокулентна утайка в реакция с бромна вода.

Цветни реакции.Танините от хидролизуемата група с разтвор на амониево желязо стипца образуват черно-синьо оцветени съединения, а от кондензираната група - черно-зелено.

Ако растението съдържа едновременно танини както на хидролизиращата, така и на кондензираната група, тогава хидролизиращите се таниди първо се утаяват с 10% разтвор на оловен ацетат, утайката се филтрира и след това филтратът взаимодейства с разтвор на амониево желязо стипца. Появата на тъмнозелен цвят показва наличието на кондензирани групови вещества.

Количествено определяне на танините. Въпреки факта, че има около 100 различни метода за количествено определяне на танините, точният количествен анализ на тази група биологично активни вещества е труден.

Сред широко използвания метод за количествено определяне на танините могат да се разграничат следните.

1. Гравиметричен - на базата на количественото утаяване на танини с желатин, соли на тежки метали и др.

2. Титриметричен - базиран на окислителни реакции, предимно с калиев перманганат.

3. Фотоелектрична колориметрия – базирана на способността на танините да образуват стабилни оцветени реакционни продукти със соли на железен оксид, фосфоровфрамова киселина и др.

Държавната фармакопея на X и XI издания препоръчва титриметричен метод за количествено определяне на танини.

Съдържание

OFS.1.5.3.0008.15 Определяне съдържанието на танини в лечебни растителни суровини и лечебни билкови препарати

Вместо чл. GF XI

Определянето на съдържанието на танини в лечебните растителни суровини и лекарствените растителни препарати се извършва чрез титриметрични и/или спектрофотометрични методи. Титриметричният метод е да се определи количеството танини по отношение на танина, а спектрофотометричният метод ви позволява да определите количеството танини по отношение на пирогалол.

Метод 1. Определяне на количеството танини по отношение на танините

Около 2 g (точно претеглени) натрошен лечебен растителен материал или лечебен билков препарат, пресети през сито с отвори 3 mm, се поставят в конична колба с вместимост 500 ml, налива се 250 ml вода, загрята до кипене и варени под обратен хладник на електрически котлон със затворена спирала в продължение на 30 минути при периодично разбъркване. Полученият екстракт се охлажда до стайна температура и се филтрира през памучна вата в мерителна колба с вместимост 250 ml, така че частиците от суровината / препарата да не попаднат в колбата, довеждайте обема на разтвора до маркировката с вода и смесете. 25,0 ml от получения воден екстракт се поставят в конична колба с вместимост 1000 ml, добавят се 500 ml вода, 25 ml разтвор на индигосулфонова киселина и се титруват при непрекъснато разбъркване на калиев перманганат с разтвор от 0,02 M до златисто жълт цвят. оцветяване.

Успоредно с това се провежда контролен опит: 525 ml вода, 25 ml разтвор на индигосулфонова киселина се поставят в конична колба с вместимост 1000 ml и се титруват при постоянно разбъркване на калиев перманганат с разтвор от 0,02 M до златисто жълто оцветяване.

1 ml разтвор на калиев перманганат 0,02 M съответства на 0,004157 g танини по отношение на танин.

(V – V 1 ) 0,004157 250 100 100

х = ————————————————— ,

а· 25 · (100 - У)

V- обемът на разтвора на калиев перманганат 0,02 М, изразходван за титруване на водна екстракция, ml;

V 1 - обемът на разтвора на калиев перманганат 0,02 М, изразходван за титруване в контролния опит, ml;

0,004157 - количеството танини, съответстващо на 1 ml разтвор на калиев перманганат 0,02 M (по отношение на танин), g;

а- тегло на суровината или растителния лекарствен продукт, g;

У- съдържание на влага на лечебни растения или билкови лекарствени продукти, %;

250 - общ обем на водната екстракция, ml;

25 - обем на водния екстракт, взет за титруване, мл.

Забележка.Приготвяне на разтвор на индигосулфонова киселина. 1 g индиго кармин се разтваря в 25 ml концентрирана сярна киселина, след което се добавят още 25 ml концентрирана сярна киселина и се разрежда с вода до 1000 ml, като полученият разтвор се излива внимателно във вода, в мерителна колба с вместимост 1000 мл, разбъркайте.

Метод 2. Определяне на количеството танинипо отношение на пирогалол

Около 0,5 - 1,0 g (точно претеглено или по друг начин посочено във фармакопейната монография или нормативната документация) натрошен лечебен растителен материал или билков лекарствен продукт, пресети през сито с отвори 0,18 mm, се поставят в конична колба с вместимост 250 ml. , добавете 150 ml вода и кипете под обратен хладник на водна баня за 30 минути. Полученият воден екстракт в колбата се охлажда до стайна температура, филтрира се през памучна вата в мерителна колба с вместимост 250 ml, така че частиците на суровината да не попаднат в колбата, обемът на разтвора се довежда до маркировката с вода и се разбърква. Полученият разтвор се филтрира през хартиен филтър с диаметър около 125 mm, като първите 50 ml от филтрата се изхвърлят.

Определянето се извършва на тъмно място.

Определяне на количеството танини... 5,0 ml от филтрата се поставят в мерителна колба от 25 ml, обемът на разтвора се довежда до маркировката с вода и се разбърква. Поставете 2,0 ml от получения разтвор в мерителна колба от 25 ml, добавете 1 ml фосфомолибден-волфрамов реагент, 10 ml вода и доведете обема на разтвора до маркировката с натриев карбонат с 10,6% разтвор (тестов разтвор) . След 30 минути се измерва оптичната плътност на тестовия разтвор (А1) на спектрофотометър при дължина на вълната 760 nm в кювета с дебелина на слоя 10 mm, като се използва вода като еталонен разтвор.

Определяне на количеството танини, които не се адсорбират от пудрата за кожата.Към 10,0 ml от филтрата се добавят 0,1 g кожен прах, разбърква се получената смес в продължение на 60 минути и се филтрира през хартиен филтър. 5,0 ml от получения филтрат се поставят в мерителна колба от 25 ml, обемът на разтвора се довежда до маркировката с вода и се разбърква. Поставете 2,0 ml от получения разтвор в мерителна колба от 25 ml, добавете 1 ml фосфоромолибден-волфрамов реагент, 10 ml вода, разредете обема на разтвора до маркировката с натриев карбонат с 10,6% разтвор и разбъркайте (тестов разтвор ). След 30 минути се измерва оптичната плътност на тестовия разтвор (А2) на спектрофотометър при дължина на вълната 760 nm в кювета с дебелина на слоя 10 mm, като се използва вода като еталонен разтвор.

Паралелно се измерва оптичната плътност на стандартния разтвор.

2,0 ml разтвор на пирогалол CO се поставят в мерителна колба от 25 ml, добавя се 1 ml фосфомолибден-волфрамов реагент, 10 ml вода, обемът на разтвора се довежда до маркировката на натриев карбонат с 10,6% разтвор и се разбърква (стандартен разтвор). След 30 минути се измерва оптичната плътност на стандартния разтвор (A 3) на спектрофотометър при дължина на вълната 760 nm в кювета с дебелина на слоя 10 mm, като се използва вода като еталонен разтвор.

А 1- оптичната плътност на изпитвания разтвор при определяне на количеството танини;

А 2 -оптичната плътност на тестовия разтвор при определяне на количеството танини, които не се адсорбират от кожата на праха, изчислена като пирогалол;

А 3— оптична плътност на стандартен разтвор;

а- претеглено количество лекарствени растителни суровини или билков лекарствен продукт, g;

а 0 - тегло на CRM пирогалол, g;

У- съдържание на влага в лечебни растения или билкови лекарствени продукти,%.

Забележка. Приготвяне на разтвор на пирогалол CO... 0,05 g (точно претеглено) пирогалол CO се поставя в мерителна колба с вместимост 100 ml, разтваря се във вода, обемът на разтвора се довежда до маркировката с вода и се разбърква. 5,0 ml от получения разтвор се поставят в мерителна колба с вместимост 100 ml, обемът на разтвора се довежда до марката с вода и се разбърква. Разтворът се използва прясно приготвен.

Въведение
В растенията една от най-разпространените групи биологично активни вещества (БАВ) са танините (танините), които имат широк спектър на фармакологична активност.таниниимат хемостатичен, стягащ, противовъзпалителен, антимикробен ефект, а също така проявяват висока активност на P-витамин, антисклеротичен и антихипоксичен ефект. Кондензираните танини са антиоксиданти и имат противотуморно действие. таниниизползва се като антидот при отравяне с гликозиди, алкалоиди, соли на тежки метали. В медицината танините се използват за лечение на заболявания като стоматит, гингивит, фарингит, тонзилит, колит, ентероколит, дизентерия, използват се и при изгаряния, маточни, стомашни и хемороидални кръвоизливи..
Определение на съдържаниетотанините са важен компонент при установяване на качеството на растителните материали, съдържащи танини. Съществуват различни методи за определяне на танините, но най-често се използват титриметрични и спектрофотометрични методи.
Обективен- валидираща оценка на методите за количествено определяне на танините по отношение на сближаване, коректност, линейност.
Материали и методи на изследване
Като обект на изследване е използвана суровината - въздушно-суха трева.обикновен маншет (Alchemilla vulgaris L.) фам. Розоцветни (Rosaceae).
За оценка на валидиране на методи за количествено определяне на танини във въздушно суха тревабяха избрани два метода: перманганатометрично титруване и спектрофотометрично определяне на базата на реакцията с реактива Folin-Ciocalteu. Изборът на техники е оправдан от честотата на тяхното използване на практика.
Въздушно суха треваобикновен маншетнабавени в Септември 2015 г. в Приморски район на Архангелска област, който беше суровината за изследване и количествено определяне на танини (танини).
Методът за перманганатометрично определяне е фармакопеен, т.евъз основа на реакцията на окисление на танините с разтвор на калиев перманганат.Около 2 g (точно претеглени), натрошена суровина, пресята през сито с размер на отвора 3 mm, се поставя в конична колба с вместимост 500 ml, добавят се 250 ml вода, загрята до кипене и кипва под обратен хладник на електрическа печка със затворена спирала за 30 минути с периодично разбъркване. Полученият екстракт се охлажда до стайна температура и 250 ml конична колба се филтрира през памучна вата, така че частиците от суровината да не попаднат в колбата. Пипетирайте 25 ml от получения екстракт и прехвърлетев друга конична колба с вместимост 750 ml се добавят 500 ml вода, 25 ml разтвор на индигосулфонова киселина и се титрува при непрекъснато разбъркване с разтвор на калийперманганат (0,02 mol / l) до златисто жълто оцветяване.
Паралелно беше проведен и контролен експеримент.
1 ml разтвор на калиев перманганат (0,02 mol / l) съответства на 0,004157 g танини по отношение на танин.
Съдържанието на танини (X), като процент, по отношение на абсолютна суха суровина, се изчислява по формулата (1):

Къде (1)

V е обемът на разтвора на калиев перманганат (0,02 mol/l), изразходван за титруване на екстракцията, ml;
- обем на разтвора на калиев перманганат (0,02 mol / l), изразходван за титруване в контролния опит, ml;
0,004157 - количеството танини, съответстващо на 1 ml разтвор на калиев перманганат (0,02 mol / l) (по отношение на танин), g;
250 - общ екстракционен обем, ml;
25 - обем на екстракция, взет за титруване, ml.
м- тегло на суровините, g;
У- загуба на маса при сушене на суровини, g;
За количественото определяне на танините чрез спектрофотометрия, около 1 g (точно претеглен) от изследвания растителен материал, натрошен до големина на частиците, преминаващ през сита с размер на отвора 1 mm, се поставя в конична колба с тънко сечение с вместимост 50 ml, се добавят 25 ml смес ацетон-вода в съотношение 7:3 (70% разтвор на ацетон). Колбата се затваря и се поставя в лабораторна бъркалка (LAB PU-2, Русия) за 60 минути. Полученият екстракт се филтрува в мерителна колба от 50 ml и обемът се довежда до марката със 70% разтвор на ацетон (разтвор А).
В мерителна колба с вместимост 10 ml се поставя 1 ml разтвор А, обемът на разтвора в колбата се довежда до маркировката с пречистена вода (разтвор Б).
В мерителна колба от 10 ml се поставят 0,5 ml разтвор B, 2 ml пречистена вода, 0,25 ml реагент Folen-Chocalteu, 1,25 ml 20% разтвор на натриев карбонат и обемът на разтвора се довежда до маркирайте с вода. Колбата се оставя за 40 минути, защитена от светлина. Оптичната плътност на разтвора се определя при дължина на вълната 750 nm. Като еталонен разтвор се използва смес от реагенти без добавяне на екстракция.
Съдържанието на танини в екстракти от растителни суровини е изчислено от стойностите на калибровъчната графика, за изграждането на която е използван 0,1 mg/ml разтвор на стандартна проба от CO танин. За целта 0,05 g (точно тегло) CO танин се поставят в мерителна колба от 100 ml, разтварят се в 30 ml вода и обемът в колбата се довежда до маркировката със същия разтворител (разтвор А).
1 ml от получения разтвор се прехвърля в мерителна колба от 10 ml. Обемът на разтвора в колбата се довежда до марката с вода (разтвор В).
Серия от разтвори, съдържащи по 1 всеки; 2; 3; 4; 5 μg / ml CO танин се приготвя чрез поставяне на претеглени порции от разтвор B в мерителни колби от 10 ml, добавят се реактивът Folin – Chocalteu и 20% воден разтвор на натриев карбонат и обемът на разтворите в колбата се регулира до маркировката с вода.
Разтворите се смесват, колбите се затварят и се държат при стайна температура, защитени от светлина в продължение на 40 минути.
Оптичната плътност на получените разтвори се определя спектрофотометрично в кварцови кювети с дебелина на слоя 1 cm при дължина на вълната 725 nm спрямо еталонния разтвор.
Референтният разтвор беше смес от реагенти без добавяне на CO танин (разтвор В).
Въз основа на резултатите от изследванията е изградена графика на зависимостта на оптичната плътност от концентрацията на танин (фиг. 1).

Като се вземат предвид получените стойности, сумата на танините се изчислява по отношение на танините по формулата:

, където

резултати
Резултатите от количественото определяне на танините чрез титруване са представени в табл. един.

Таблица 1. Резултати от количествено определяне на танини чрез перманганатометрия

Тегло на пробата от растителни суровини, g	Обемът на калиев перманганат (0,02 mol / l), изразходван за титруване на получения екстракт от растителни суровини, мл	Количеството танини,% (Xи)
2,10250		15,34892	15,72% 0,154 Δ = 0,395 ε = 2,52% S r = 0,024
2,03255		15,21262
2,18345		15,84713
2,24350		16,24333
2,12465		15,85257
2,07055		15,80574

Средната стойност на съдържанието на танини в суровината е 15,7%. Изчислената стойност на стойността на относителното стандартно отклонение (0,024%), която не надвишава 2%, което характеризира задоволителното сближаване на резултатите.
Методът на добавяне беше използван за определяне на правилността на процедурата. За тази цел, 1 ml от 0,05%, 0,1% и 0,15% CO танин се добавя към колбата за титруване и се титрува три пъти за всеки случай. Резултатите от изследванията са представени в табл. 2.

Таблица 2. Определяне на коректността на метода на перманганатометрично титруване на танини

Количеството добавен CO танин, g	Тегло на суровината, g	Изчислено количество танини, гр	Установено количество танини, g	Процент на отваряне,%	Метрологични характеристики
0,0005	2,2435	0,0357	0,0353	98,87	99,91% 1,198 0,399 t изчислен. = 0,23 t раздел. = 2,31
	2,1247	0,0339	0,0340	100,29
	2,0706	0,0330	0,0337	102,12
0,001	2,2435	0,0362	0,0357	98,61
	2,1247	0,0344	0,0340	98,84
	2,0706	0,0335	0,0336	100,51
0,0015	2,2435	0,0367	0,0366	99,73
	2,1247	0,0349	0,0353	101,14
	2,0706	0,0340	0,0337	99,12

Получените резултати показват, че изчисленият коефициент на Студент е по-малък от табличната стойност иметодът не съдържа системна грешка, което ни позволява да заключим, че е правилен.
За изследване на линейността беше определена зависимостта на намерените стойности на количественото съдържание на танини от претеглената част от изследвания растителен материал. За целта е извършено количествено определяне на танините в шест претеглени порции въздушно-суха суровина от общия маншет, различни по тегло (Таблица 3).

Таблица 3. Зависимост на намереното съдържание на танини от теглото на пробата от растителни суровини чрез перманганатометрия

Тегло на суровината, g	Обемът на калиевия перманганат, използван за титруване, ml
2,0706		0,3159
3,0013	10,8	0,4490
4,0595	13,0	0,5404
5,1180	15,3	0,6360
6,1385	18,2	0,7566

Въз основа на получените в хода на изследванията данни е нанесена графика на зависимостта на определено съдържание на танини от теглото на пробата от изследвания растителен материал (фиг. 2) и е изчислен коефициентът на корелация.

Ориз. 2. Графиката на зависимостта на намереното количество танини от теглото на пробата въздушно суха суровина на маншета обикновен

Изчисленият коефициент на корелация не надвишава 0,95, което показва линейността на резултатите от определяне съдържанието на изследваните вещества от теглото на пробата от анализирания растителен материал в посочения концентрационен диапазон.
В табл. 4.

Таблица 4. Резултати от количествено определяне на танини чрез спектрофотометрия

Тегло на пробата, g	Оптическа плътност на разтвора		Установено количество танини,% (Xи)	Метрологични характеристики
1,02755	0,5957	7,30920	7,87340	7,84% 0,11 Δ = 0,28 ε = 3,61% S r = 0,034%
0,99745	0,6130	7,52147	8,34656
1,0068	0,5678	6,96687	7,65932
0,99580	0,5742	7,04539	7,83120
1,0060	0,5750	7,05521	7,76261
1,00670	0,5617	6,89202	7,57779

Средната стойност на съдържанието на танини в растителните материали е 7,8% с относително стандартно отклонение (0,034%) не повече от 2%, което характеризира задоволителното сближаване на резултатите.
Методът на добавяне беше използван за определяне на правилността на процедурата. За тази цел към колбата с първична ацетонова екстракция се добавят 1 ml 0,05%, 0,1% и 0,15% CO разтвор на танин и след това количественото определяне на танините се извършва три пъти за всяка концентрация. Резултатите от изследванията са представени в табл. 5.

Притежатели на патент RU 2439568:

Изобретението се отнася до областта на фармакологията и може да се използва за определяне на танини в растителни материали. Методът за определяне на танините в растителните суровини се състои във факта, че проба от суровини се екстрахира с вода по време на кипене, охлажда се, филтрира, оптичната плътност на аликвотна проба се измерва при дължина на вълната 277 nm и съдържанието на сумата от всички танини се изчислява по определена формула, след което към аликвотната проба от филтрата се добавя 1% разтвор на колаген в 1% оцетна киселина, разклаща се, филтрува се, измерва се оптичната плътност на филтрата при дължина на вълната 277 nm и се изчислява съдържанието на утаени танини по определена формула. Методът подобрява точността на определяне на съдържанието на танини в растителните суровини и избирателно определя утаените и неутаените танини в растителните суровини.

Изобретението се отнася до химико-фармацевтичната промишленост, областта на фармакогнозията и фармацевтичната химия и може да се използва за контрол на качеството на растителни суровини, съдържащи танини.

Известен метод за определяне на танини в лечебните растителни суровини (ЛР) по метода на кулометрията по отношение на танините (С. Г. Абдулина и др. Кулометрично определяне на танини в лечебните растителни суровини. // Аптека. № 4. - 2010г. - С.13 -15).

Недостатъкът на този метод е използването на допълнително оборудване (кулометър), специфичен титрант (калиев хипойодид), който е близък до калиевия перманганат по своите окислителни свойства и не прави възможно разграничаването на танини с високо и ниско молекулно тегло.

Известен е и метод за определяне съдържанието на танин и производни на галова киселина в чая чрез кондуктометрия (Патент № 2127878. Метод за разделно определяне на танини и катехини (по отношение на галовата киселина) в чая. М.: 1999) .

Недостатъкът на този метод е използването на токсични органични разтворители (изобутилов алкохол), както и използването на цветна реакция с Fe (III), чийто продукт е оцветено съединение, което е нестабилно на цвят във времето.

Известен е и метод за количествено определяне на танини по отношение на танините в листата на скумпия и сумах чрез комплексометричен метод след утаяване на танини с цинкови соли (GOST 4564-79. Scumpia leaf. Specifications; GOST 4565-79. лист. Спецификации).

Недостатъкът на този метод е продължителността на анализа и трудността при определяне на точката на еквивалентност.

Известен е и метод за количествено определяне на танините чрез спектрофотометричен метод след реакцията с реактива Фолин-Шокалтеу по отношение на галова киселина (Указания за методи за контрол на качеството и безопасността на биологично активните хранителни добавки. Ръководство. P 4.1. 1672-03 - М. - 2004. - с. 94-95).

Недостатъкът на този метод е невъзможността за разделно определяне на танини с ниско и високо молекулно тегло.

Най-близкият до предложения метод е, че танините се определят чрез спектрофотометрия по отношение на галова киселина (Указания за методи за контрол на качеството и безопасност на биологично активните хранителни добавки. Ръководство. R 4.1.1672-03. - М. - 2004 - стр. 120 ).

Недостатъкът на този метод е многократното разреждане на тестовата проба, в резултат на което концентрацията на танини в разтвора се определя лошо. Също така при този метод референтният разтвор е буферен разтвор, което усложнява анализа. Освен това този метод не дава възможност за отделно определяне на съдържанието на танини с ниско молекулно тегло и високомолекулни танини.

Целта на изобретението е да се подобри точността на определяне на танини и възможността за разделно определяне на утаени и неутаени танини в растителни суровини.

Проблемът се решава с факта, че проба от суровини се екстрахира с вода по време на кипене, охлажда се, филтрира, оптичната плътност на аликвотна проба се измерва при дължина на вълната 277 nm, а съдържанието на сумата от всички танини е изчислено по формулата

50 - обемът на колбата, ml,

W - съдържание на влага в суровините,%,

1% разтвор на колаген в 1% оцетна киселина се добавя към аликвотна проба от филтрата, разклаща се, филтрира се, оптичната плътност на филтрата се измерва при дължина на вълната 277 nm и съдържанието на утаените танини се изчислява по формулата

D 1 - оптична плътност на разтвор 1,

D 2 - оптична плътност на разтвор 2,

m nav - тегло на пробата суровина, g,

V a е обемът на аликвотна проба, ml,

250 - общ екстракционен обем, мл,

50 - обемът на колбата, ml,

508 - специфичен индекс на абсорбция на галова киселина (оптична плътност на 1% разтвор на галова киселина 1 mg / ml),

W - съдържание на влага в суровините,%.

На практика методът се осъществява по следния начин. Около 2,0 (точно претеглени) от натрошената суровина, пресята през сито с диаметър на отвора 3 mm, се поставя в колба с вместимост 500 ml, налива се 250 ml загрята до кипене вода и се вари 30 минути под обратен хладник с периодично разбъркване. Охлажда се до стайна температура, довежда се до 250 ml с вода, филтрира се през памучна вата, така че частиците от суровината да не попаднат във водния екстракт. Изхвърлете първите 50 ml филтрат.

1-4 ml воден екстракт се поставят в мерителна колба с вместимост 50 ml, доведена до маркировката с вода (разтвор 1). Оптичната плътност на разтвор 1 се измерва при дължина на вълната 277 nm. Водата се използва за сравнение.

30 ml воден екстракт се поставят в мерителен съд с вместимост 50 ml, добавят се 2-10 ml от утаителния реагент, разклащат се 30-60 минути, утаяват се, филтруват се. 1-4 ml от получения филтрат се прехвърлят в колба с вместимост 50 ml, доведена до маркировката с вода (разтвор 2). Оптичната плътност на разтвор 2 се измерва при дължина на вълната 277 nm. Водата се използва за сравнение.

Изобретението се илюстрира със следните примери.

Пример 1. За анализа се взема растителна суровина - дъбова кора.

Около 2,0 (точно претеглени) натрошена сурова дъбова кора, пресята през сито с диаметър на отвора 3 mm, се поставя в колба с вместимост 500 ml, налива се 250 ml загрята до кипене вода и се вари 30 минути под обратен хладник с периодично разбъркване. Охлажда се до стайна температура, довежда се до 250 ml с вода, филтрира се през памучна вата, така че частиците от суровината да не попаднат във водния екстракт. Изхвърлете първите 50 ml филтрат.

2 ml воден екстракт от дъбова кора се поставят в мерителна колба с вместимост 50 ml, доведена до маркировката с вода (разтвор 1). Оптичната плътност на разтвор 1 се измерва при дължина на вълната 277 nm. Водата се използва за сравнение. D 1 за дъбова кора е 0,595.

30 ml воден екстракт се поставят в мерителен съд с вместимост 50 ml, добавят се 2 ml от утаителния реагент, разклащат се 30 минути, утаяват се, филтруват се. 2 ml от получения филтрат се прехвърлят в колба с вместимост 50 ml, доведена до маркировката с вода (разтвор 2). Оптичната плътност на разтвор 2 се измерва при дължина на вълната 277 nm. Водата се използва за сравнение. D 2 за дъбова кора е 0,276.

Пример 2. За анализа е взет растителен материал от коренищата на намотка.

Около 2,0 (точно претеглени) от натрошената суровина от коренището на рулона, пресята през сито с диаметър на отвора 3 mm, се поставя в колба с вместимост 500 ml, налива се 250 ml вода, загрята до кипене и кипи 30 минути под обратен хладник с периодично разбъркване. Охлажда се до стайна температура, довежда се до 250 ml с вода, филтрира се през памучна вата, така че частиците от суровината да не попаднат във водния екстракт. Изхвърлете първите 50 ml филтрат.

1 ml воден екстракт от коренището на бобината се поставя в мерителна колба с вместимост 50 ml, доведена до маркировката с вода (разтвор 1). Оптичната плътност на разтвор 1 се измерва при дължина на вълната 277 nm. Водата се използва за сравнение.

30 ml воден екстракт се поставят в мерителен съд с вместимост 50 ml, добавят се 7 ml от утаителния реагент, разклаща се в продължение на 60 минути, утаява се, филтрира се. 1 ml от получения филтрат се прехвърля в колба с вместимост 50 ml, доведена до маркировката с вода (разтвор 2). Оптичната плътност на разтвор 2 се измерва при дължина на вълната 277 nm. Водата се използва за сравнение.

Предложеният метод подобрява точността на определяне на съдържанието на танини в растителните суровини и избирателно определя утаените и неутаените танини в растителните суровини.

Метод за определяне на танините в растителните суровини по отношение на галова киселина, който се състои във факта, че проба от суровини се екстрахира с вода по време на кипене, охлажда се, филтрира, оптичната плътност на аликвотна проба се измерва при дължина на вълната от 277 nm, а съдържанието на сумата от всички танини се изчислява по формулата:

където x a - съдържанието на сумата от танини по отношение на галова киселина, %;




50 - обемът на колбата, ml;
508 - специфична скорост на абсорбция на галова киселина (оптична плътност на 1% разтвор на галова киселина 1 mg / ml);
W - съдържание на влага в суровините,%,
1% разтвор на колаген в 1% оцетна киселина се добавя към аликвотна проба от филтрата, разклаща се, филтрува се, оптичната плътност на филтрата се измерва при дължина на вълната 277 nm и съдържанието на утаените танини се изчислява с помощта на формула:

където X е съдържанието на утаени танини по отношение на галова киселина, %;
D 1 - оптична плътност на разтвор 1;
D 2 - оптична плътност на разтвор 2;
m nav - тегло на проба от суровини, g;
V a е обемът на аликвотната проба, ml;
250 - общ екстракционен обем, ml;
50 - обемът на колбата, ml;
508 - специфична скорост на абсорбция на галова киселина (оптична плътност на 1% разтвор на галова киселина 1 mg / ml);
W - съдържание на влага в суровините,%.

Подобни патенти:

Изобретението се отнася до медицината, а именно до психоневрологията, и описва метод за прогнозиране на възстановяването на неврологични функции при пациенти в острия период на исхемичен инсулт чрез провеждане на клинични и биохимични изследвания на общата концентрация на албумин (OCA) в серума в g / l, където допълнително до 5-7 ден на заболяването се определя ефективната концентрация на албумин (ECA), изчислява се резервът на свързване на албумин (PCA) и ако този индикатор е по-малък от единица, отрицателен резултат от възстановяването на неврологичните функции при пациенти в острия период на исхемичен инсулт.

Изобретението се отнася до медицината, до биологични изследвания в онкологията и може да се използва за определяне на развитието на злокачествен процес при мозъчни тумори след хирургично лечение.

Изобретението се отнася до медицината, по-специално до онкологията, и описва метод за оценка на ефективността на неоадювантната химиотерапия при рак на пикочния мехур чрез изследване на пациент, при което се записва максималният интензитет на автофлуоресценция на туморни тъкани в зелената област на спектъра при етап на първична диагноза и 1 месец след предоперативна химиотерапия и при повишаване на стойностите на пациента на максималния интензитет на автофлуоресценция на туморната тъкан с 15% от първоначалната и повече, ефективността на лечението се оценява като частична регресия на тумора процес, при липса на промени в интензитета на автофлуоресценция на туморната тъкан спрямо оригинала, се определя стабилизиране на процеса, с намаляване на интензитета на автофлуоресценция на туморната тъкан с 15% и повече от първоначалния знак прогресията на туморния процес.