1. Понятие об иммунном статусе

2.

3.

4. Методы оценки иммунного статуса

1. Состояние функциональной активности иммунной системы чело­века в целом имеет жизненно важное значение для организма и обозначается понятием "иммунный статус ".

Иммунный статус - это количественная и качественная харак­теристика состояния функциональной активности органов им­мунной системы и некоторых неспецифических механизмов про-тивомикробной защиты.

Нарушения иммунного статуса и способности к нормальному иммунному ответу на разные антигены называют иммунодефи-цитными состояниями (иммунодефицитами), которые делятся .

На первичные (врожденные, наследственные);

Вторичные (приобретенные).

2. Первичный иммунодефицит человека - генетически обусловлен­ная неспособность организма реализовать то или иное звено им­мунитета. Проявляются вскоре после рождения, наследуются, как правило, по рецессивному типу.

Первичные иммунодефицитные состояния могут выражаться в поражениях В- и Т-системы иммунитета и вспомогательных клеток (антителообразование и клеточные формы) иммунного ответа, а могут быть и комбинированными, но все они назы­ваются специфическими, в отличие от наследственно обуслов­ленных дефектов неспецифических факторов защиты - фаго­цитоза, системы комплемента и др.

Наиболее характерным клиническим проявлением первичных иммунодефицитных состояний являются рецидивирующие ин­фекции верхних дыхательных путей и пищеварительного трак­та, пиодермии, артриты, остеомиелиты.

При недостаточности гуморального иммунитета преобладают бактериальные инфекции; при недостаточности клеточного - вирусные и грибковые.

3. Вторичные иммунодефицитные состояния возникают как след­ствие нарушений иммунорегуляции и других патологических про­цессов, сопровождаются лимфопенией и гипогаммаглобулинемией.

Вторичные иммунодефициты связаны со следующими обстоя­тельствами :

Перенесенными инфекционными заболеваниями (корь, грипп, проказа, кандидоз);

Соматическими (с нефротическим синдромом);

Онкологическими (опухоли лимфоретикулярной природы) за­болеваниями;

Ожогами;

Тяжелыми травмами;

Обширными хирургическими вмешательствами;

Некоторыми лечебными воздействиями (рентгеновское облуче­ние, лучевая терапия опухолей, терапия кортикостероидами, цитостатиками и иммунодепрессантами при трансплантации тканей и органов, тимэктомия, спленэктомия и др.).

При хроническом лимфолейкозе, миеломе, макроглобулине -мии и заболеваниях, сопровождающихся потерей белка, пре­имущественно страдает В-система иммунитета.

При лимфогранулематозе, болезни Ходжкина, проказе, вирус­ных инфекциях - Т-система.

Старость представляет собой выраженный Т-иммунодефицит.

4. Для выявления иммунодефицитных состояний возникает необхо­димость оценки показателей функциональной активности им­мунной системы, т. е. иммунного статуса. Оценка иммунного статуса слагается из нескольких этапов :

клинико-лабораторного, который включает в себя:

Сбор и оценку иммунологического анамнеза (частота ин­фекционных заболеваний, характер их течения, выражен­ность температурной реакции, наличие очагов хронической инфекции, реакции на вакцинации или введение лекарст­венных средств);

Оценку результатов общего клинического анализа крови (содержание гранулоцитов, моноцитов, лимфоцитов);

Выявление с помощью бактериологических, вирусологиче­ских и/или серологических исследований бактерионоси­тельства и вирусоносительства;

лабораторно-иммунологического. На этом этапе в иммунологи­ческой лаборатории проводятся исследования, целью которых, собственно, и является качественная и количественная оценка функциональной активности иммунной системы (иммуннокомпетентных клеток). Для этого разработан ряд (набор) тес­тов, которые делят на тесты 1-го (ориентировочного) и 2-го (аналитического) уровней.

Тесты 1-го уровня являются ориентировочными и позволяют выявить грубые нарушения деятельности иммунной системы.

Они включают в себя определение :

Общего и относительного числа лимфоцитов;

Основных субпопуляций (Т- и В-клетки);

Фагоцитарной активности лейкоцитов;

Концентрации иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови.

Общее (абсолютное) и относительное число лимфоцитов опре­деляют по данным клинического анализа крови. Содержание Т- и В-лимфоцитов подсчитывают в реакции иммунофлюорес-ценции, используя меченые моноклональные флюоресцирую­щие сыворотки к специфическим поверхностным антигенным маркерам, обозначаемым символами CD (claster differentiation). Таких антигенных маркеров известно несколько десятков, но отдельные из них характерны для того или иного типа клеток :

Рецептор CD3 - всех Т-лимфоцитов;

Рецепторы CD19, 20, 21, 72 - В-лимфоцитов;

Рецепторы CD4 - Т-хелперы;

Рецепторы CD8 - Т-супрессоры;

Рецепторы CD16 - NK-клетки (натуральные киллеры).

Более доступным и простым, но менее точным и устаревшим является метод розеткообразования. Он основан на том, что В-лимфоциты могут адсорбировать на своей поверхности эрит­роциты мышей, а Т-лимфоциты - эритроциты барана (их также могут образовывать NK-клетки). Лимфоцит с прилип­шими к нему эритроцитами - это и есть розетка, их подсчи­тывают в окрашенных по Романовскому-Гимзе мазках из смеси лимфоцитов и соответствующих эритроцитов.

Для оценки фагоцитарной активности нейтрофилов крови оп­ределяют процент фагоцитирующих клеток и фагоцитарный по­казатель (среднее количество микробных клеток, поглощен­ных одним лейкоцитом).

Концентрацию (уровень) иммуноглобулинов разных классов G, М, А и Е в сыворотке крови определяют в реакции преципитащи в геле {радиальная иммунодиффузия по Манчини) с анти-глобулиновыми сыворотками к IgG, IgM, IgA, IgE, но этот метод дает достаточно большую ошибку при определении: ± 15%.

Тесты 2-го уровня позволяют провести более глубокий анализ состояния иммунной системы и уточнить характер дефектов, выявленных с помощью тестов 1-го уровня. К ним относятся, например, определение отдельных субклассов иммуноглобули­нов (особенно IgG, секреторного IgA) и В-лимфоцитов, регу-ляторных и эффекторных клеток.

Кроме того, с помощью иммуноферментных и радиоиммунных методов можно определить концентрации отдельных цитоки-нов - главных регуляторных молекул, определяющих тип им­мунного ответа.

Например, интерлейкин-2 является обязательным компонентом иммун-I ного ответа на любые антигены, в том числе микробные, так как обеспечивает пролиферацию и дифференцировку Т-лимфоцитов.

Назначение исследования иммунологического статуса проводится при любом подозрении на неадекватную иммунной системы: при наличии хронических или часто проявляющихся инфекционных заболеваний, при тяжелом течении инфекций, наличии очагов хронических воспалений, заболеваний соединительной ткани, аутоиммунных процессов и др. В этих случаях необходимо обратиться к иммунологу. Доктор назначит на иммунитет. По результатам исследования составляется , расшифровку которой лечащий врач.

Оценка иммунного статуса производится при помощи скрининговых тестов. Стандартный тест включает в себя подсчет абсолютного количества нейтрофилов, лейкоцитов, тромбоцитов и лимфоцитов, концентрации сывороточных иммуноглобулинов (IgG, IgA и IgM), проведение кожных тестов на гиперчувствительность замедленного типа. Отклонения показателей могут быть нормальной реакцией организма на действие патологических или физиологических факторов, также они отражают истощение иммунной системы или чрезмерную активацию.

При более детальном изучении иммунного статуса проводится определение функциональной активности и количества гуморального и клеточного звеньев иммунной системы.

Что показывает иммунный статус

Этот вид исследования позволяет узнать информацию о состоянии звеньев иммунитета. Он используется в диагностике первичных и вторичных иммунодефицитов, лимфопролиферативных, аутоиммунных, гематологических, инфекционных заболеваний. При исследовании могут быть выявлены следующие нарушения функции иммунной системы: ее недостаточность или иммунодефицит, гиперреактивность, аутоиммунные реакции.

Пониженная активность развивается в результате снижения количества составляющих иммунной системы или их недостаточной активности. Гиперактивность иммунной системы может привести к тяжелому течению заболевания, которое ее вызвало. При аутоиммунных реакциях иммунитет атакует собственные ткани. Такой процесс наблюдается в результате срыва толерантности к антигенам тканей организма.

Отклонения от нормы в иммунограмме характеризуют приобретенный или врожденный дефект отдельных звеньев иммунной системы.

Иммунологический статус позволяет уточнить диагноз, определить необходимую лечебную тактику. При выявленных отклонениях в работе иммунитета пациенту назначаются специальные препараты (иммуностимуляторы, иммуносупрессоры, иммуномодуляторы) Может быть проведена заместительная терапия (введение сывороток, лейкоцитарной массы, иммуноглобулинов, интерферонов).

Иммунный статус человека - это всесторонние характеристики состояния иммунной системы (ИС), точнее говоря это колическтвенные и качественные показатели активности всех органив ИС и некоторых других механизмов защиты организма (пртивовирусной и противомикробной).
Когда ИС дает сбой, то сразу же возникает необходимость исследования иммунного статуса человека чтобы определить все звенья, которые дают сбой и выработать план ее коррекции. Важность этого шага настолько высока, что можно вести речь о спасении человеческой жизни.
Для того чтобы определить иммунный статус человека необходимо провести иммуннограмму. И нужно так же отметить, что иммунный статус ребенка или взрослого зависит от клеточного и гуморального иммунитетов, именно их состояние отражает и состояние иммунного статуса человека.

Для нашего организма разные звенья ИС одинаково важны и только их совместные усилия могут обеспечить полную его защиту от вторжения инородных тел из вне.

Гуморальное звено иммунного статуса человека борется с возбудителем вирусных и бактериальных инфекций сразу же после их проникновения в организм. Все реакции данного вида иммунитета обеспечиваются В-лимфоцитами и проходят в сыворотке крови. И этот механизм настолько прост насколько и эффективен: когда В-лимфоциты идентифицируют "чужого", то тут же синтезируются в плазматические клетки, которые производят антитела - иммуноглобулины. Далее эти иммуноглобулины блокируют активность "чужих" (антигенов) и удаляют их из организма.
Кроме всего прочего иммуноглобулины выступают в качестве катализатора для других реакций иммунологического толка и этим самым тоже поддерживают иммунный статус человека на должном уровне.

Иногда диагностируя иммунный статус человека делают биопсиювилочковой железы, костного мозга, лимфатических узлов. Это делается для определения структуры лимфоидных фолликулов при подозрении на злокачественные новообразования.

Важнейшим фактором, который определяет иммунный статус ребенка является наследственность. У нас имеются и так называемые "вредные" гены, которые провоцируют развитие различных онкологических заболеваний. Так вот, определяя иммунный статус ребенка необходимо это учитывать, именно поэтому берясь за лечение детей необходимо знать и состояние ИС их родителей, чем они болели, какие у них хронические заболевания и ток далее. Так же необходимо знать, что иммунный статус ребенка во многом зависит от возраста, ведь ребенок растет и формируется в половом отношении до 16-17 лет и все это не может не сказаться на его иммунном статусе. Кстати, о периодах формированиф ИС у детей вы можете прочесть более подробно на других страницах нашего сайта. Просто важно знать, что иммунный статус ребенка во многом зависит от здоровья его родителей (и это должны знать молодые мамы и папы беря на себя ответственность рождения детей) а так же от периода роста и формирования его организма.

Сегодня появился изумительный препарат - Трансфер фактор , который просто не имеет себе аналогов в мире. Это универсальный иммунокорректор, который совершенно не имеет побочных эффектов и который рекомендован для применения людям абсолютно всех возрастов и состояний: и детям младенческого возраста, и глубоким старикам, и кормящим матерям, и беременным. Если у вас уже есть этот препарат, то за иммунный статус ребенка своего можете быть спокойны. Сравнивая множество иммуномодулятров и иммуностимуляторов между собой безоговорчно мы можем посоветовать только Трансфер фактор.

Иммунный статус человека, методы оценки
Основные вопросы
1.Иммунный статус и его нарушения.
2.Иммунопатологические синдромы.
3.Иммунологические тесты 1 и 2 уровней.
4.Правила оценки иммунограмм.
5.Методы оценки лимфоцитов.
1

Иммунный статус

Иммунный статус - это количественная и
качественная характеристика состояния
функциональной активности органов
иммунной системы и некоторых
неспецифических механизмов
противомикробной защиты.
2

Иммунный статус определяется эффективностью
и согласованностью работы всех систем и
звеньев иммунитета - макрофагов,
комплемента, цитокинов, Т- и В- лимфоцитов,
главной системы гистосовместимости.
Раздел медицины, изучающий патологию
человека в аспекте нарушений функций
иммунной системы, называется клинической
иммунологией.
3

Исследование иммунного статуса включает в себя:

1) определение группы крови и резус-фактора;
2) общий анализ крови с развернутой лейкограммой или
формулой;
3) определение количества иммуноглобулинов;
4) исследование лимфоцитов;
5) исследование фагоцитарной активности нейтрофилов.
Для постановки диагноза иммунопатологического
состояния проводят: сбор иммунологического анамнеза,
постановку клинико-лабораторных, инструментальных и
иммунологических тестов.
4

Сбор анамнеза
При опросе определяют вероятный
иммунопатологический синдром, основными
являются:
- инфекционный синдром;
- аллергический и аутоиммунный синдромы;
- первичный иммунодефицит;
- вторичный иммунодефицит;
- иммунопролиферативный синдром.
5

- учет возможных индивидуальных
особенностей (возраст, сопутствующие
заболевания) и колебаний показателей
(физиологических и патологических- прием
пищи, физические нагрузки, время суток,
действие стрессоров и т.д.);
- учет региональных норм;
6

Общие правила при оценке иммунограмм:
- комплексный анализ, а не оценка одного
показателя;
- анализ в комплексе с клиническими и
анамнестическими данными;
- оценка резких сдвигов показателей (не
менее 20% от нормы);
- анализ в динамике;
- анализ не только (и не столько)
абсолютных данных, а соотношений
показателей (особо- индекс Th/Ts);
7

Петров Р.В. с соавт. создали двухэтапный подход к
оценке иммунного статуса, в соответствии с которым
иммунологические тесты разделены на тесты
первого и второго уровня.
На первом этапе с помощью простых методов
выявляют “грубые” дефекты фагоцитоза, клеточного
и гуморального иммунитета.
К тестам первого уровня относят:
- определение кол-ва лимфоцитов в крови (абс., отн.);
- определение кол-ва Т- и В- лимфоцитов;
- определение уровня Ig классов IgG, IgM, IgA;
- определение фагоцитарной активности лейкоцитов;
- определение титра комплемента.
С учетом анализа результатов определяют
дальнейшую тактику исследования.
8

Лейкоциты

Норма – 3,5–8,8 4 109/л. Повышение числа лейкоцитов –
это лейкоцитоз, снижение – лейкопения. Лейкоцитоз
делится на физиологический и патологический.
физиологического лейкоцитоза могут быть прием пищи,
физическая работа, прием горячих и холодных ванн,
беременность, роды, предменструальный период.
Патологический лейкоцитоз бывает при инфекционных
заболеваниях (пневмонии, менингите, общем сепсисе и
др.), инфекционных заболеваниях с поражением клеток
иммунной системы. Но имеются и исключения. Например,
некоторые инфекционные заболевания протекают с
лейкопенией (брюшной тиф, бруцеллез, малярия,
краснуха, корь, грипп, вирусный гепатит в острой фазе).
9

Лимфоциты

Норма: абсолютное содержание – 1,2–3,0 109/л, но чаще
в клиническом анализе крови указывается процентное
содержание лимфоцитов.
Этот показатель составляет 19–37 %.
Лимфоцитоз обнаруживается при хроническом
лимфолейкозе, хронической лучевой болезни,
бронхиальной астме, тиреотоксикозе, некоторых
инфекционных заболеваниях (коклюше, туберкулезе),
при удалении селезенки.
К лимфопении приводят аномалии развития
лимфоидной системы, вирусные инфекции,
ионизирующее излучение, аутоиммунные заболевания
(системная красная волчанка), эндокринные заболевания
(болезнь Кушинга, прием гормональных препаратов),
СПИД.
10

Т-лимфоциты

Норма: относительное содержание 50–
90 %, абсолютное – 0,8–2,5 109/л.
Количество Т-лимфоцитов повышается при
аллергических заболеваниях, в период
выздоровления, при туберкулезе. Снижение
содержания Т-лимфоцитов происходит при
хронических инфекциях, иммунодефицитах,
опухолях, стрессах, травмах, ожогах,
некоторых формах аллергии, инфаркте.
11

Т-хелперы

Норма: относительное содержание – 30–
50 %, абсолютное – 0,6–1,6 109/л.
Содержание Т-хелперов повышается при
инфекциях, аллергических заболеваниях,
аутоиммунных заболеваниях
(ревматоидном артрите и др.). Снижение
содержания Т-хелперов происходит при
иммунодефицитных состояниях, СПИДе,
цито-мегаловирусной инфекции.
12

В-лимфоциты

Норма: относительное содержание – 10–
30 %, абсолютное – 0,1–0,9 в 109/л.
Повышенное содержание бывает при
инфекциях, аутоиммунных заболеваниях,
аллергиях, лимфолейкозах.
Снижение количества В-лимфоцитов
обнаруживается при иммунодефицитах,
опухолях.
13

Фагоциты (нейтрофилы)

Их активность оценивают с помощью методов, которые
определяют часть клеток, способных формировать внутри себя
фагосому.
Для оценки пищеварительной способности нейтрофилов
используют НСТ-тест (НСТ – это краситель нитросиний
тетразолий).
Норма НСТ-теста – 10–30 %. Фагоцитарная активность
лейкоцитов повышается при острых бактериальных инфекциях,
снижается при врожденных иммунодефицитах, хронических
инфекциях, аутоиммунных заболеваниях, аллергиях, вирусных
инфекциях, СПИДе.
Активность работы фагоцитов, оценивается так называемым
фагоцитарным числом (в норме клетка поглощает 5-10
микробных частиц), количеством активных фагоцитов, индексом
завершенности фагоцитоза (должен быть больше 1,0).
14

Методы исследования лимфоцитов

Изучение поверхностных CD антигенов
основывается на:
методах розеткообразования;
методе проточной цитометрии;
методах иммунофлюоресценции;
иммуноферментном анализе.
К функциональным тестам относят методы оценки
пролиферативной активности лимфоцитов на Т- и
В- митогены (РБТЛ- реакция бластной
трансформации лимфоцитов), синтеза
мононуклеарами цитокинов.
15

Для определения количества Т- клеток используют
метод розеткообразования с эритроцитами
барана.
Метод основан на родстве рецептора CD2 с
белками мембраны эритроцитов барана. При
смешивании лимфоцитов с эритроцитами барана
образуются фигуры в виде розеток.
Количество розеткообразующих клеток (Е- РОК)
соответствует количеству Т- лимфоцитов (CD2+
клеток).
Для определения количества В- клеток используют
EAC- розетки. Лимфоциты смешивают с
эритроцитами быка, обработанными
комплементом и антителами к эритроцитам.
Современный метод – проточная цитометрия.
16

Важнейшее значение имеет
вычисление иммунорегуляторного
индекса CD4/CD8 (хелперносупрессорного отношения).
CD8+ несут Т- супрессоры и Ткиллеры, часть NK- клеток.
CD4+ несут Т- хелперы и Тиндукторы, моноциты, Т- клетки ГЗТ.
17

18

Основной принцип иммуноцитометрии:

Меченная флюоресцентными МКА
исследуемая клетка проходит с
потоком жидкости по капилляру.
Поток пересекается лучом лазера.
Прибор фиксирует отраженный от
поверхности клетки сигнал по
принципу «да/нет».
По изменению проходящей лазерной
волны определяются параметры и
размеры клетки (прямое и боковое
светорассеивание).
Лазерный луч индуцирует
флюоресценцию МКА на поверхности
клеток, что дает информацию о
наличии определенных рецепторных
структур.
В результате суммирования
информации по всей популяции
клеток прибор выдает точный
количественный и качественный
анализ состояния клеточных
популяций.
19

Стандартная панель МКА позволяет определять
следующие СД-маркеры: СД3 (Т-клетки), СД4 (Тхелперы), СД8 (Т-цитотоксические), СД20 (В-клетки),
СД16 (NK-клетки), СД14 (моноциты/макрофаги), СД25
(рецептор ИЛ-2).
20

Методы исследования главных
компонентов иммунной системы принято
делить также на скрининговые и
развернутые.
При оценке В- системы иммунитета к
скрининговым тестам относят определение
кол-ва CD19+ и CD20+ клеток, IgG, IgM и IgA,
к развернутым - бласттрансформацию
(РБТЛ) на митоген лаконоса и S.aureus,
поверхностных маркеров В- лимфоцитов.
21

Иммуноглобулины Jg

Иммуноглобулин А. Норма: 0,6–4,5 г/л.
JgА повышается при острых инфекциях, аутоиммунных
заболеваниях (чаще в легких или в кишечнике), нефропатиях.
Снижение JgА бывает при хронических заболеваниях (особенно
дыхательной системы и желудочно-кишечного тракта), гнойных
процессах, туберкулезе, опухоли, иммунодефицитах.
Иммуноглобулин Е. Норма: 0-0,38 мг/л. Повышается количество
JgЕ при наследственно обусловленных аллергических реакциях,
аллергических поражениях органов дыхания грибком
Аспергиллусом, глистной инвазии
Снижение JgЕ происходит при хронических инфекциях, приеме
лекарств, которые угнетают деление клеток, врожденных
иммунодефицитных заболеваниях.
22

Иммуноглобулин М. Норма: 0,6–3,4 г/л.
Содержание JgМ повышается при
бронхиальной астме, инфекциях (острых и
хронических), при обострениях, аутоиммунных
заболеваниях (особенно при ревматоидном
артрите). Понижается JgМ при первичных и
вторичных иммунодефицитах.
Иммуноглобулин G. Норма: 6,0-17,6 г/л.
Количество JgG повышается в крови при
аллергиях, аутоиммунных заболеваниях,
перенесенных в прошлом инфекциях.
Снижение содержания JgG происходит при
первичных и вторичных иммунодефицитах.
23

Тесты второго уровня – более глубокий анализ состояния иммунной системы
проводят с помощью аналитических методов: методы оценки
функциональной активности Т- и В- лимфоцитов, фагоцитов,
вспомогательных клеток, естественных киллеров, компонентов системы
комплемента и др.
тесты иммунофенотипирования для определения относительного и
абсолютного количества популяций и субпопуляций Т-, В-, NK-лимфоцитов;
активационные маркеры лимфоцитов;
оценка различных этапов фагоцитоза и рецепторного аппарата
фагоцитарных клеток;
определение основных классов и подклассов иммуноглобулинов;
циркулирующие иммунные комплексы;
определение концентрации компонентов комплемента в сыворотке крови
(С3, С4, С5, С1-ингибитор);
функциональная активность различных субпопуляций лимфоцитов;
оценка пролиферативной активности Т- и В-лимфоцитов;
исследование интерферонового статуса;
кожные пробы и т.д.
24

Все выше перечисленные нормы
показателей иммунного статуса могут
несколько отличаться в разных
иммунологических лабораториях. Это
зависит от методики диагностики и
используемых реактивов. Но иммунная
система, как и любая другая система
организма, может иметь расстройства в
любых звеньях. Так возникают
иммунодефициты.
25

Следует особо подчеркнуть, что полноценный анализ
иммунограммы возможен только в комплексе с клиническим
состоянием и анамнезом пациента.
Отсутствие характерных сдвигов в иммунограмме при
выраженных клинических симптомах следует считать
атипичной реакцией иммунной системы, что является
отягощающим признаком заболевания.
Полученные данные пациента сравниваются со средними
значениями для данного аналита, полученными в регионе
проживания пациента. Среднестатистические показатели
различаются в зависимости от региона и подчиняются
климатогеографическим условиям, экологической обстановке,
условиям жизни.
Необходимо также учитывать возраст пациента и циркадные
ритмы.

Глава 16. Частная бактериология 327

Глава 17. Частная вирусология520

Глава 18. Частная микология 616

Глава 19. Частная протозоология

Глава 20. Клиническая микробиология

Часть I.

Глава 1. Введение в микробиологию и иммунологию

1.2. Представители мира микробов

1.3. Распространенность микробов

1.4. Роль микробов в патологии человека

1.5. Микробиология - наука о микробах

1.6. Иммунология - сущность и задачи

1.7. Связь микробиологии с иммунологией

1.8. История развития микробиологии и иммунологии

1.9. Вклад отечественных ученых в разви­тие микробиологии и иммунологии

1.10. Зачем нужны знания микробиологии и иммунологии врачу

Глава 2. Морфология и классификация микробов

2.1. Систематика и номенклатура микробов

2.2. Классификация и морфология бактерий

2.3. Строение и классификация грибов

2.4. Строение и классификация простейших

2.5. Строение и классификация вирусов

Глава 3. Физиология микробов

3.2. Особенности физиологии грибов и простейших

3.3. Физиология вирусов

3.4. Культивирование вирусов

3.5. Бактериофаги (вирусы бактерий)

Глава 4. Экология микробов - микроэкология

4.1. Распространение микробов в окружающей среде

4.3. Влияние факторов окружающей среды на микробы

4.4 Уничтожение микробов в окружающей среде

4.5. Санитарная микробиология

Глава 5. Генетика микробов

5.1. Строение генома бактерий

5.2. Мутации у бактерий

5.3. Рекомбинация у бактерий

5.4. Передача генетической информации у бактерий

5.5. Особенности генетики вирусов

Глава 6. Биотехнология. Генетическая инженерия

6.1. Сущность биотехнологии. Цели и задачи

6.2. Краткая история развития биотехнологии

6.3. Микроорганизмы и процессы, приме­няемые в биотехнологии

6.4. Генетическая инженерия и область ее применения в биотехнологии

Глава 7. Противомикробные препараты

7.1. Химиотерапевтические препараты

7.2. Механизмы действия противомикроб-ных химиопрепаратов

7.3. Осложнения при антимикробной химиотерапии

7.4. Лекарственная устойчивость бактерий

7.5. Основы рациональной антибиотикотерапии

7.6. Противовирусные средства

7.7. Антисептические и дезинфицирующие вещества

Глава 8. Учение об инфекции

8.1. Инфекционный процесс и инфекционная болезнь

8.2. Свойства микробов - возбудителей инфекционного процесса

8.3. Свойства патогенных микробов

8.4. Влияние факторов окружающей среды на реактивность организма

8.5. Характерные особенности инфекционных болезней

8.6. Формы инфекционного процесса

8.7. Особенности формирования патоген-ности у вирусов. Формы взаимодействия вирусов с клеткой. Особенности вирусных инфекций

8.8. Понятие об эпидемическом процессе

ЧаСть II.

Глава 9. Учение об иммунитете и факторы неспецифической резистентности

9.1. Введение в иммунологию

9.2. Факторы неспецифической резистентности организма

Глава 10. Антигены и иммунная система человека

10.2. Иммунная система человека

Глава 11. Основные формы иммунного реагирования

11.1. Антитела и антителообразование

11.2. Иммунный фагоцитоз

11.4. Реакции гиперчувствительности

11.5. Иммунологическая память

Глава 12. Особенности иммунитета

12.1. Особенности местного иммунитета

12.2. Особенности иммунитета при различ­ных состояниях

12.3. Иммунный статус и его оценка

12.4. Патология иммунной системы

12.5. Иммунокоррекция

Глава 13. Иммунодиагностические реакции и их применение

13.1. Реакции антиген-антитело

13.2. Реакции агглютинации

13.3. Реакции преципитации

13.4. Реакции с участием комплемента

13.5. Реакция нейтрализации

13.6. Реакции с использованием меченых антител или антигенов

13.6.2. Иммуноферментный метод, или анализ (ифа)

Глава 14. Иммунопрофилактика и иммунотерапия

14.1. Сущность и место иммунопрофилактики и иммунотерапии в медицинской практике

14.2. Иммунобиологические препараты

Часть III

Глава 15. Микробиологическая и иммунологическая диагностика

15.1. Организация микробиологической и иммунологической лабораторий

15.2. Оснащение микробиологической и иммунологической лабораторий

15.3. Правила работы

15.4. Принципы микробиологической диагностики инфекционных болезней

15.5. Методы микробиологической диагностики бактериальных инфекций

15.6. Методы микробиологической диагностики вирусных инфекций

15.7. Особенности микробиологической диагностики микозов

15.9. Принципы иммунологической диагностики болезней человека

Глава 16. Частная бактериология

16.1. Кокки

16.2. Палочки грамотрицательные факультативно-анаэробные

16.3.6.5. Ацинетобактер (род Acinetobacter)

16.4. Палочки грамотрицательные анаэробные

16.5. Палочки спорообразующие грамположительные

16.6. Палочки грамположительные правильной формы

16.7. Палочки грамположительные неправильной формы, ветвящиеся бактерии

16.8. Спирохеты и другие спиральные, изогнутые бактерии

16.12. Микоплазмы

16.13. Общая характеристика бактериальных зоонозных инфекций

Глава 17. Частная вирусология

17.3. Медленные вирусные инфекции и прионные болезни

17.5. Возбудители вирусных острых кишечных инфекций

17.6. Возбудители парентеральных вирус­ных гепатитов в, d, с, g

17.7. Онкогенные вирусы

Глава 18. Частная микология

18.1. Возбудители поверхностных микозов

18.2. Возбудители эпидермофитии

18.3. Возбудители подкожных, или субкутанных, микозов

18.4. Возбудители системных, или глубо­ких, микозов

18.5. Возбудители оппортунистических микозов

18.6. Возбудители микотоксикозов

18.7. Неклассифицированные патогенные грибы

Глава 19. Частная протозоология

19.1. Саркодовые (амебы)

19.2. Жгутиконосцы

19.3. Споровики

19.4. Ресничные

19.5. Микроспоридии (тип Microspora)

19.6. Бластоцисты (род Blastocystis)

Глава 20. Клиническая микробиология

20.1. Понятие о внутрибольничной инфекции

20.2. Понятие о клинической микробиологии

20.3. Этиология вби

20.4. Эпидемиология вби

20.7. Микробиологическая диагностика вби

20.8. Лечение

20.9. Профилактика

20.10. Диагностика бактериемии и сепсиса

20.11. Диагностика инфекций мочевыводящих путей

20.12. Диагностика инфекций нижних дыхательных путей

20.13. Диагностика инфекций верхних дыхательных путей

20.14. Диагностика менингитов

20.15. Диагностика воспалительных забо­леваний женских половых органов

20.16. Диагностика острых кишечных инфекций и пищевых отравлений

20.17. Диагностика раневой инфекции

20.18. Диагностика воспалений глаз и ушей

20.19. Микрофлора полости рта и ее роль в патологии человека

20.19.1. Роль микроорганизмов при заболеваниях челюстно-лицевой области

12.3. Иммунный статус и его оценка

Иммунный статус - это структурное и функциональное состояние иммунной сис­темы индивидуума, определяемое комплек­сом клинических и лабораторных иммуно­логических показателей.

Таким образом, иммунный статус (син. им­мунный профиль, иммунореактивность) ха­рактеризует анатомо-функциональное состо­яние иммунной системы, т. е. ее способность к иммунному ответу на определенный анти­ген в данный момент времени.

Наличие у человека иммунной системы ав­томатически подразумевает его способность к иммунному ответу, но сила и форма им­мунного ответа на один и тот же антиген у разных людей могут варьировать в широких пределах. Поступление антигена в организм у одного человека вызывает преимущественно антителообразование, у другого - развитие гиперчувствительности, у третьего - в основ­ном формирование иммунологической толе­рантности, и т. д. Иммунный ответ на один и тот же антиген у разных лиц может варьиро­вать не только по форме, но и по силе, т. е. по степени выраженности, например, по уровню антител, устойчивости к инфекции и др.

По иммунореактивности различаются не только отдельные индивидуумы, но у одно­го и того же человека иммунореактивность может колебаться в различные периоды его жизни. Так, иммунный статус взрослого и ребенка, особенно новорожденного или пер­вого года жизни, когда иммунная система еще функционально незрелая, существенно различается. У детей легче индуцировать им­мунологическую толерантность, у них ниже титры сывороточных антител при иммуниза­ции. Иммунный статус молодого и пожилого человека также различен. Это частично связа­но с состоянием тимуса, который рассматри­вается как «биологические часы» иммунной системы. Возрастная инволюция тимуса ведет к медленному угасанию Т-клеточных реакций по мере старения, снижению способности к распознаванию «своего» и «чужого», поэ­тому в старости, в частности, выше частота злокачественных новообразований. С воз-

растом нарастает также частота обнаружения аутоантител, в связи с чем старение иногда рассматривается как хронически текущая ау-тоагрессия.

Иммунный статус подвержен не только воз­растным, но и суточным колебаниям в зависи­мости от биоритма. Эти колебания обусловле­ны изменениями гормонального фона и дру­гими причинами. Таким образом, при оценке иммунного статуса следует учитывать значи­тельную индивидуальную вариабельность им­мунологических показателей даже в норме.

Иммунная система филогенетически отно­сится к числу молодых (наряду с нервной и эндокринной) и очень лабильных к различ­ным внешним воздействиям. Практически любое, даже самое незначительное, внешнее воздействие на организм человека ведет к изменению состояния его иммунной систе­мы. На иммунный статус оказывают влияние следующие факторы:

климато-географические;

социальные;

экологические (физические, химические и биологические);

«медицинские» (влияние лекарственных веществ, оперативные вмешательства, стресс и т. д.).

Среди климато-географических факторов на иммунный статус оказывают влияние тем­пература, влажность, солнечная радиация, длина светового дня и др. Например, фагоци­тарная реакция и кожные аллергические про­бы менее выражены у жителей северных ре­гионов, чем у южан. Вирус Эпштейна-Барр у людей белой расы вызывает инфекционное за­болевание - мононуклеоз, у лиц негроидной расы - онкопатологию (лимфома Беркитта), а у лиц желтой расы - совсем другую онко­патологию (назофарингеальная карцинома), причем только у мужчин. Жители Африки менее подвержены заболеванию дифтерией, чем европейское население.

К социальным факторам, оказывающим влияние на иммунный статус, относятся пи­тание, жилищно-бытовые условия, профес­сиональные вредности и т. п. Важное значе­ние имеет сбалансированное и рациональное питание, поскольку с пищей в организм пос­тупают вещества, необходимые для синтеза

иммуноглобулинов, для построения имму-нокомпетентных клеток и их функциони­рования. Особенно важно, чтобы в рационе присутствовали незаменимые аминокислоты и витамины, особенно А и С.

Значительное влияние на иммунный ста­тус организма оказывают жилищно-бытовые условия. Проживание в плохих жилищных условиях ведет к снижению общей физиоло­гической реактивности, соответственно им-мунореактивности, что нередко сопровож­дается повышением уровня инфекционной заболеваемости.

Большое влияние на иммунный статус ока­зывают профессиональные вредности, пос­кольку человек проводит на работе значи­тельную часть своей жизни. К производс­твенным факторам, которые могут оказывать неблагоприятное воздействие на организм и снижать иммунореактивность, относят иони­зирующую радиацию, химические вещества, микробы и продукты их жизнедеятельности, температуру, шум, вибрацию и т. д. Источники радиации получили в настоящее время очень широкое распространение в различных от­раслях промышленности (энергетика, горно­химическая, аэрокосмическая и др.).

Неблагоприятное влияние на иммунный статус оказывают соли тяжелых металлов, аро­матические, алкилирующие соединения и дру­гие химические вещества, в том числе моющие средства, дезинфектанты, пестициды, ядохи­микаты, широко применяемые в практике. Таким профессиональным вредностям подвер­жены работники химических, нефтехимичес­ких, металлургических производств и др.

Неблагоприятное влияние на иммунный статус организма оказывают микробы и про­дукты их жизнедеятельности (чаще всего бел­ки и их комплексы) у работников биотехно­логических производств, связанных с произ­водством антибиотиков, вакцин, ферментов, гормонов, кормового белка и др.

Такие факторы, как низкая или высокая температура, шум, вибрация, недостаточная освещенность, могут снижать иммунореак­тивность, оказывая опосредованное действие на иммунную систему через нервную и эндок­ринную системы, которые находятся в тесной взаимосвязи с иммунной системой.

Глобальное действие на иммунный статус человека оказывают экологические факторы, в первую очередь, загрязнение окружающей среды радиоактивными веществами (отра­ботанным топливом из ядерных реакторов, утечка радионуклидов из реакторов при ава­риях), широкое применение пестицидов в сельском хозяйстве, выбросами химических предприятий и автотранспорта, биотехноло­гических производств.

На иммунный статус оказывают влияние различные диагностические и лечебные ме­дицинские манипуляции, лекарственная те­рапия, стресс. Необоснованное и частое при­менение рентгенографии, радиоизотопного сканирования может влиять на иммунную систему. Иммунореактивность изменяет­ся после травм и хирургических операций. Многие лекарственные препараты, в том чис­ле антибиотики, способны оказывать побоч­ное иммунодепрессивное действие, особенно при длительном приеме. Стресс приводит к нарушениям в работе Т-системы иммунитета, действуя, в первую очередь, через ЦНС.

Несмотря на вариабельность иммуноло­гических показателей в норме, иммунный статус можно определить путем постановки комплекса лабораторных тестов, включаю­щих оценку состояния факторов неспецифи­ческой резистентности, гуморального (В-сис-тема) и клеточного (Т-система) иммунитета.

Оценка иммунного статуса проводится в кли­нике при трансплантации органов и тканей, аутоиммунных заболеваниях, аллергиях, для выявления иммунологической недостаточнос­ти при различных инфекционных и сомати­ческих заболеваниях, для контроля эффектив­ности лечения болезней, связанных с наруше­ниями иммунной системы. В зависимости от возможностей лаборатории оценка иммунного статуса чаще всего базируется на определении комплекса следующих показателей:

общего клинического обследования;

состояния факторов естественной резис­тентности;

гуморального иммунитета;

клеточного иммунитета;

дополнительных тестов.

При общем клиническом обследовании учи­тывают жалобы пациента, анамнез, клини-

ческие симптомы, результаты общего анализа крови (включая абсолютное число лимфоци­тов), данные биохимического исследования.

Знакомство врача с пациентом начинается, как правило, с ознакомления с его паспортными данны­ми (возраст) и предъявляемыми жалобами. Уже на этом этапе врач может узнать о профессии и стаже работы пациента (наличие профессиональных вред­ностей). Из высказываемых жалоб следует обратить внимание на рецидивирующую оппортунистическую инфекцию, аллергию.

При осмотре больного обращают внимание на чистоту кожных покровов и слизистых, на которых можно обнаружить проявления оппортунистических инфекций, аллергии.

При пальпации и перкуссии уделяют внимание состоянию центральных (тимус) и периферических (лимфатические узлы, селезенка) органов иммунной системы, их размерам, спаянности с окружающими тканями, болезненности при пальпации.

В процессе перкуссии и аускультации фиксируют симптомы, характерные для оппортунистических ин­фекций при поражении внутренних органов.

Заканчивается клинический раздел обследования общим анализом крови, который дает представление о состоянии иммунокомпетентных клеток (абсолют­ное число лимфоцитов, фагоцитов).

При оценке состояния факторов естественной ре­ зистентности определяют фагоцитоз, комплемент, интерфероновый статус, колонизационную резистен­тность. Функциональную активность фагоцитов оп­ределяют по их подвижности, адгезии, поглощению, дегрануляции клеток, внутриклеточному киллингу и расщеплению захваченных частиц, образованию ак­тивных форм кислорода. С этой целью используют такие тесты, как определение фагоцитарного индекса, НСТ-тест (нитросиний тетразолий), хемилюминис-ценцию и др. Состояние системы комплемента опре­деляют в реакции гемолиза (результат учитывают по 50%-му гемолизу). Интерфероновый статус выявляют путем титрования на культуре клеток уровня интер-

ферона в сыворотке крови. Колонизационную резис­тентность определяют по степени дисбиоза различных биотопов организма (чаще всего толстой кишки).

Гуморальный иммунитет определяют по уров­ню иммуноглобулинов классов G, M, A, D, Е в сыворотке крови, количеству специфических антител, катаболизму иммуноглобулинов, ги­перчувствительности немедленного типа, пока­зателю В-лимфоцитов в периферической крови, бластгрансформации В-лимфоцитов под дейс­твием В-клеточных митогенов и другим тестам.

Для определения концентрации иммуноглобулинов разных классов в сыворотке крови обычно использу­ют радиальную иммунодиффузию по Манчини. Титр специфических антител (изогемагглютинины групп крови, антитела, образующиеся после вакцинации, естественные антитела) в сыворотке определяют в различных иммунологических реакциях (агглютина­ция, РПГА, ИФА и другие тесты). Для определения катаболизма иммуноглобулинов используют радио­изотопные метки. Число В-лимфоцитов в перифе­рической крови устанавливают путем определения специфических рецепторов на клетках с помощью моноклональных антител (кластерный анализ) или в реакции розеткообразования (ЕАС-РОК эритроциты в присутствии антител и комплемента образуют ро­зетки с В-лимфоцитами). Функциональное состоя­ние В-лимфоцитов определяют в реакции бластгран­сформации путем стимуляции клеток митогенами, такими как туберкулин, лаконас и др. При опти­мальных условиях культивирования В-лимфоцитов с митогенами показатель трансформации в бласты может достигать 80%. Подсчет бластов проводятпод микроскопом, с использованием специальных гистохимических методов окраски или же с помощью радиоактивной метки - по включению в ДНК клетки тимидина, меченного тритием.

Состояние клеточного иммунитета оцени­вают по количеству Т-лимфоцитов, а также субпопуляций Т-лимфоцитов в периферичес­кой крови, бласттрансформации Т-лимфоци­тов под действием Т-клеточных митогенов, определению гормонов тимуса, уровню сек-ретируемых цитокинов, а также постанов­кой кожных проб с аллергенами, контактной сенсибилизацией динитрохлорбензолом. Для постановки кожных аллергических проб ис­пользуются антигены, к которым в норме должна быть сенсибилизация, например про­ба Манту с туберкулином. Способность орга-

низма к индукции первичного иммунного от­вета может дать контактная сенсибилизация динитрохлорбензолом.

Для определения числа Т-лимфоцитов в перифери­ческой крови используют реакцию розеткообразова­ния Е-РОК, поскольку эритроциты барана образуют с Т-лимфоцитами спонтанные розетки, а для опреде­ления числа субпопуляций Т-лимфоцитов - реакцию розеткообразования ЕА-РОК. Реакции розеткообра­зования используют в связи с тем, что на мембране Т-хелпера имеется рецептор к Fc-фрагменту иммуног­лобулина М, а на мембране Т-супрессора - рецептор к Fc-фрагменту иммуноглобулина G, поэтому Т-хел-перы образуют розетки с эритроцитами, связанными с антиэритроцитарными антителами класса IgM, a супрессоры образуют розетки с эритроцитами, связан­ными с антиэритроцитарными антителами класса IgG. Однако реакции розеткообразования для дифферен­циации Т-лимфоцитов уступили место более точному и современному методу определения популяций и субпопуляций Т-лимфоцитов - кластерному анализу, основанному на использовании моноклональных ан­тител к рецепторам лимфоцитов. После определения числа субпопуляций Т-лимфоцитов рассчитывают со­отношение хелперов и супрессоров, т. е. Т4/Т8 лимфо­цитов, которое в норме составляет примерно 2.

Бласттрансформацию Т-лимфоцитов, т. е. их фун­кциональную активность, определяют путем стиму­ляции Т-клеточными митогенами, такими как кон-канавалин А или фитогемагглютинин. Под влиянием митогенов зрелые лимфоциты трансформируются в лимфобласты, которые можно подсчитать под мик­роскопом или обнаружить по радиоактивной метке.

Для оценки состояния функции тимуса чаще всего применяют определение уровней al1-тимозина и ти-мулина, являющихся отражением функции эпители­альных клеток стромы тимуса.

Для определения уровня секретируемых иммуноци-токинов (интерлейкины, миелопептиды и др.) исполь­зуют иммуноферментные методы, основанные на при­менении моноклональных антител к двум различным эпитопам цитокина. С этой целью можно также приме­нять реакцию торможения миграции лейкоцитов.

В качестве дополнительных тестов для оценки иммунного статуса можно использовать такие тесты, как определение бактерицидности сыво­ротки крови, титрование С3-, С4-компонентов комплемента, определение содержания С-реак-тивного белка в сыворотке крови, определение ревматоидных факторов и других аутоантител.

Таблица 12.1. Тесты для оценки иммунного статуса

Тесты 1-го уровня	Тесты 2-го уровня
1. Определение количества, морфологии Т- и В-лимфоцитов в периферической крови (абс. и %)	1. Гистохимический анализ лимфоидных органов
2. Кластерный анализ или ЕАС-розеткообразование	2. Анализ поверхностных маркеров мононукле-арных клеток с использованием моноклональных антител
3. Определение сывороточных иммуноглобулинов классов М. (J,A,D, Е	3. Бластгрансформаиия В и Т-лимфопитов
4. Определение фагоцитарной активности лейко­цитов	4. Определение цитотоксичности
5. Кожные аллергические гесты	5. Определение активности ферментов, ассоцииро­ванных с иммунной недостаточностью
6. Рентгенография и рентгеноскопия лимфоидных органов, а также других внутренних органов (пре­жде всего легких) в зависимости от клинических показаний	6. Определение синтеза и секреции цитокинов
	7. Определение гормонов тимуса
	8. Анализ респираторного взрыва фагоцитов
	9. Определение компонентов комплемента
	10. Анализ смешанных клеточных культур

Таким образом, оценка иммунного статуса про­водится на основании постановки большого чис­ла лабораторных тестов, позволяющих оценить состояние как гуморального и клеточного звеньев иммунной системы, так и факторов неспецифи­ческой резистентности. Очевидно, что некоторые из применяемых тестов сложны в исполнении, требуют дорогостоящих иммунохимических реа­гентов, современного лабораторного оборудова­ния, а также высокой квалификации персонала, в связи с чем они выполнимы ограниченным числом лабораторий. Поэтому по рекомендации Р. В. Петрова все тесты разделены на две группы: тесты 1-го и 2-го уровня. Тесты 1-го уровня могут быть выполнены в любой клинической иммуно­логической лаборатории первичного звена здра­воохранения, они используются для первичного выявления лиц с явно выраженной иммунопато­логией. Для более точной диагностики использу­ются тесты 2-го уровня. Перечень тестов 1-го и 2-го уровня представлен в табл. 12.1.

"