ELŐKÉSZÜLETEK
AZ ÚJ ELISA TESZT RENDSZER ÉRTÉKELÉSE
"Rotavírus-antigén-ELISA-BEST"
12Zhirakovskaya E.V., 3Ignatiev G.M., 3Indikova I.N., 12Tikunova N.V.
1 FGUN SSC VB "Vector", Roszpotrebnadzor, Koltsovo település, Novoszibirszk régió;
2 Kémiai Biológiai és Alapvető Orvostudományi Intézet, Novoszibirszk;
3 Orvosi Biológiai Termékek Szabványosítási és Ellenőrzési Állami Intézete L.A. Tarasevicag Moszkva
Bemutatják a CJSC "Vector-Best" (Novoszibirszk) által kifejlesztett új "Rotavirus-antigen-IFA-BEST" reagenskészlet érzékenységének, specifitásának és reprodukálhatóságának vizsgálatának eredményeit. A kapott adatok lehetővé teszik az eredmények diagnosztikai megbízhatóságának előrejelzését, ha ezt a tesztrendszert alkalmazzuk az A csoportú rotavírus antigénjének kimutatására klinikai anyagokban.
Kulcsszavak: ELISA tesztrendszer, hatékonyság, rotavírus A
Az A csoportú rotavírusok (Reoviridae család, Rotavirus nemzetség) a kisgyermekek súlyos gyomor-bélhurutának leggyakoribb okozói világszerte. A legyengült immunrendszerű felnőttek gyakran megbetegednek. A rotavírus-fertőzés (RVI) egy nagyon fertőző betegség, amely többféle módon terjed. A fertőzés forrása a betegség nyilvánvaló vagy tünetmentes formájával rendelkező személy, valamint vírushordozó. A gyermekek és felnőttek körében az RVI szórványos esetek, helyi csoportos betegségek, járványok formájában nyilvánulhat meg, és széles körben elterjedt. A fertőzés széklet-orális átviteli mechanizmusa élelmiszerrel (tej és tejtermékek, bébiétel), vízzel és kontakt-háztartási útvonalakkal valósul meg.
A rotavírus gasztroenteritisz klinikai kép alapján történő diagnosztizálása, különösen szórványos morbiditással, némi nehézséget okoz, mivel az erre a fertőzésre jellemző tünetek kevéssé különböznek a különböző etiológiájú akut bélfertőzések (AEI) tüneteitől. A rotavírus-gasztroenteritisben szenvedő betegek differenciáldiagnózisát mind élelmiszer-toxikus fertőzésekkel, mind egyéb vírusos AEI-vel (norovírusok, astrovírusok, adenovírusok, koronavírusok, Coxsackie enterovírusok és ECHO) és bakteriális (szalmonellózis, vérhas, kolera mikroorganizmusok) etiológiájával végzik. Sajnos az Orosz Föderáció nem minden speciális egészségügyi intézménye végzi a rotavírus fertőzés diagnosztikáját.
Az RVI diagnosztikai módszerei teljes virionok, vírusantigén vagy vírusspecifikus RNS kimutatására irányulnak a székletben. Ígéretes megközelítés a vírusok közvetlen kimutatására mind klinikai anyagokban, mind környezeti objektumokban a reverz transzkripciós módszer - polimeráz láncreakció (RT-PCR). Az elmúlt években a modern tudományos fejlesztéseken alapuló tesztrendszereket hoztak létre a rotavírusok kimutatására szolgáló különféle módszerek kombinációjával: multiplex PCR az amplifikációs termékek hibridizációs-fluoreszcens kimutatásával "a végponton"; végpont alapú immun-PCR (IPCR) valós idejű kimutatással; kvantitatív RT-PCR valós idejű detektálással. A kutatólaboratóriumok elektronmikroszkópiát használnak a rotavírusok gyors kimutatására. Azonban a fenti módszerek mindegyike meglehetősen fáradságos, és drága műszereket és magasan képzett személyzetet igényel. Ezért a kórházakban és ambulánsan végzett laboratóriumi diagnosztika során előnyben részesítik azokat a módszereket, amelyek a vírusantigén székletben történő kimutatásán alapulnak, enzimhez kötött immunszorbens vizsgálattal (ELISA) a rotavírusok elleni mono- és polikonális antitestekkel. Ez a módszer a gyakorlati laboratóriumok számára elérhető, könnyen beállítható, és lehetővé teszi a gyors eredmény elérését.
Ennek a munkának az a célja, hogy tanulmányozza a novoszibirszki "Vector-Best" JSC-nél kifejlesztett új "Rotavirus-antigen-IFA-BEST" reagenskészlet diagnosztikai hatékonyságát.
^ Szeptember-december
Anyagok és metódusok
A vizsgálat anyaga a Novoszibirszk 3. számú Gyermekvárosi Klinikai Kórház bélfertőzések és légúti fertőzések osztályán kórházba került, AEI-vel diagnosztizált és a bélfertőzés klinikai megnyilvánulásaival nem rendelkező kisgyermekek ürülékmintái voltak. A székletmintákat 2-3 ml térfogatú eldobható, steril műanyag edényekbe gyűjtöttük a betegek kórházi osztályra történő felvételekor, és -20 ° C-on 15 napig tároltuk. Az anyagot hosszabb ideig -70 °C-on tároltuk.
Egy 104 székletmintából álló panelt előzetesen megvizsgáltak OCI kórokozók jelenlétére. Tőlük:
30 olyan minta, amelyekben ELISA és RT-PCR csak A csoportú rotavírusokat mutatott ki; Az RT-PCR-rel végzett genotipizálás kimutatta, hogy a székletminták PG1 (18 minta), PG2 (4 minta), PG3 (3 minta), PG4 (2 minta), PG4 (1 minta), PG9 (1 minta) genotípusú rotavírusokat tartalmaztak, PG3 (1 minta);
14 minta, amelyekben csak a második genotípusú norovírusokat mutatták ki RT-PCR-rel, amit a nukleotidszekvencia meghatározása igazolt 5 "- a kapszid gén régiója, amely a norovírusok genomján található az 5085-5485 h régióban. .;
15 minta, amelyekben RT-PCR-rel csak Astrovirusokat mutattak ki, amit a nukleotidszekvencia meghatározása igazolt 5 "- a kapszid gén régiója, amely az Astroviruses genomján található a 4526-4955 n. régióban; 15 minta amelyekben PCR-rel csak adenovírusokat mutattak ki;
30 székletminta (kontroll) a bélfertőzés klinikai megnyilvánulásaival nem rendelkező gyermekektől, akik kórházba kerültek a kórház légzési osztályán; az előzetes elemzés nem tárta fel a fenti víruskórokozókat ezekben a mintákban.
A mintákat rothadás-, noro-, asztro- és adenovírusok jelenlétére vagy hiányára tesztelték RT-PCR-rel, kereskedelmi forgalomban lévő "AmpliSens No go virus 1, 2 genotypes - 306/322", "AmpliSens Astrovirus -165" készletek felhasználásával. Orosz Föderáció, "AmpliSense Adenovirus - 462", "AmpliSense Rotavirus - 290" (gyártó: FGUN Központi Epidemiológiai Kutatóintézet, RF). A mintákat a megfelelő reagenskészletek használati utasításának megfelelően vizsgálták meg az eltarthatósági idő alatt. A rotavírus jelenlétére pozitív mintákat RT-PCR-rel genotipizáltuk. A rotavírus antigén jelenlétének vagy hiányának meghatározását ELISA-val is elvégeztük egy kereskedelmi forgalomban lévő IDEIA™ Rotavirus tesztrendszer (DakoCytomation, Egyesült Királyság) alkalmazásával, a kit utasításai szerint.
A Rota-vírus-antigén-ELISA-BEST reagenskészlet tesztelésekor a fenti minták mindegyikét (104) titkosították, és háromszor tesztelték a tesztkészlettel. A tesztek befejezése után a mintákat dekódolták és az eredményeket elemezték.
Eredmények és vita
A "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" reagenskészlet érzékenységét a vizsgált minták pozitív eredményeinek egybeesésének számával (%-ban) értékelték a tesztelt tesztrendszer és referenciagyógyszerek használatával. Ugyanakkor kiderült, hogy a "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" reagenskészlet használatakor mind a 30 minta pozitív volt, amelyekben a rotavírus A jelenlétét igazolták (1. táblázat). Következésképpen a rotavírus A kimutatására szolgáló tesztkészlet érzékenysége 100% volt. Megjegyzendő, hogy a panel hét különböző rotavírus genotípusú mintát tartalmazott, és mindegyik sikeresen kimutatható a "Rotavírus - antigén - I FAB EST" reagenskészlettel.
A tesztrendszer specifitását a minták negatív eredményének egybeesésének számával (%-ban) értékeltük a tesztelt tesztrendszerrel a benyújtott előtanulmányokkal. A specifitás felmérésére a felhasznált panel 30 olyan mintát tartalmazott, amelyekben nem mutattak ki vírusos kórokozót, valamint 14 olyan mintát, amelyekben csak a második genotípusú norovírusokat mutatták ki RT-PCR módszerrel, 15 olyan mintát, amelyekben RT-PCR módszert alkalmaztak. csak asztrovírusokat mutattak ki; 15 minta, amelyekben PCR-rel csak adenovírusokat mutattak ki. Megállapítást nyert, hogy 74 negatív minta közül 69-ben a Rotavírus-antigén-ELISA-BEST reagenskészlettel végzett rotavírus A jelenlétére vonatkozó detektálás során az optikai sűrűség értékek nem haladták meg a háttérértékeket, azaz az értékeket. a kontroll negatív minták optikai sűrűségének mérése eredményeként kapott eredményt. Két astrovírust tartalmazó minta, egy minta a második genotípusú norovírus, egy minta - adenovírus, valamint két olyan minta, amelyekben a fenti vírusos kórokozók egyikét sem mutatták ki, pozitív optikai sűrűségi indexet mutatott. Megjegyzendő, hogy azokban a mintákban, amelyekben korábban egyik vírusos kórokozó sem volt kimutatható, csak az egyik megismételt vizsgálatban rögzítettek pozitív szignálokat (2. táblázat). Így a Rotavirus-Antigen-ELISA-BEST reagenskészlet specificitása 93,2% volt.
A tesztek során értékelték a "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" reagenseket tartalmazó tesztkészlet klinikai anyagokon történő felhasználásával kapott eredmények reprodukálhatóságát - minden mintát háromszor megvizsgáltak különböző kísérletekben, hogy meghatározzák az eredmények eltérését. Szinte minden esetben hasonló eredmények születtek: a tesztrendszer minden negatív és pozitív mintát azonos módon detektált. Kivételt képezett két minta, amelyben korábban egyik vírusos kórokozó sem volt kimutatható: mindkét minta egyik ismétlésében az optikai sűrűségértékek meghaladták az ODcrit értéket. Meg kell jegyezni, hogy a többlet jelentéktelen volt (2. táblázat). Így az eredmények reprodukálhatósága 98,8% volt.
A tesztek eredményei azt mutatták, hogy a "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" reagensek tesztkészlete diagnosztikai hatékonyságát – specifitását, érzékenységét és reprodukálhatóságát – tekintve összevethető az Orosz Föderációban elérhető diagnosztikával.
a "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" tesztelt reagenskészlettel az A csoport rotavírus antigénjének kimutatására klinikai anyagokban.
Irodalom
1. Bogomolov B.P. // "Fertőző betegségek: sürgősségi diagnosztika, kezelés, megelőzés". - M., Új átmérőjű. - 2007.
2. Vasziljev B.Ya., Vasziljeva R.I., Lobzin Yu.V. // „Akut bélbetegségek. Rotavírusok és rotavírusfertőzés”. - S.-Pb., Lan. - 2000.
3. Zhirakovskaya EV, Tikunov A.Yu., Bodnev O.A. et al. // "BIOPreparations". - 2008 - 2. sz. - p. 15-18.
4. Zhirakovskaya E.V., Maleev V.V., Bodnev A.C. és mások. // ZhMEI - 2008 - 4. sz. - val vel. 12-16.
5. Ignatyuk TE, Golutvin IA, Nasikan NS et al. // "A virológia kérdései". - 2003. - v. 48. - No. 6. - p. 1721.
6. Novikova N.A., Fedorova O.F., Epifanova N.V., Chuprova A.B. // "A virológia kérdései". - 2007 .-- 52. v. -№ 3 - p. 19-23.
7. Podkolzin A.T., Mukhina A.A., Shipulin G.A. és társai //
"Fertőző betegségek". - 2004. - v. 2. - No. 4. - p. 85-91.
8. Podkolzin AT, Fenske EB, Abramycheva N.Yu. et al. // "Terápiás archívum". - 2007. - v. 79. - No. 11. -p. 10-16.
9. Sergevnin VI, Woldschmidt NB, Sarmometov EV et al. // Járványtan és fertőző betegségek. -2004.-№ 6.-p. 17-20.
10.Sergevnin V.I., Woldschmidt N.B., Sarmometov E.V. et al. // Higiénia és higiénia. - 2007. - 1. sz. - p. 56-58.
11. Arcangeletti MC, De Conto E, Pinardi F. és mtsai. // Acta Biomed. Ateneo. Parmense. - 2005. -V. 76 (3). - P. 165 -170.
12. Gladstone B. P., Iturriza-Gomara M., Ramani S., és mtsai. // Epidemiol. Megfertőzni. - 2008. V. 136. (3). - P. 399-405.
13. Min B. S., NohYJ., Shin J. H., atal. // J. Virol. Mód. -2006. - V. 137. (2). - 280 - 286. o.
14. Santos N., Honma S., Timetsky Mdo C., et al. // J. Clin. Microbiol. - 2008. V. 46. (2). - 462-469.
15 Schets F. M., van Wijnen J. H., Schijven J. F. és mtsai. // Appl. Environ. Microbiol. - 2008. - V. 74 (7). - 2069 - 2078 o.
16. Stockman L. J., Staat M. A., Holloway M., et al. // J. Clin. Microbiol. - 2008. - V. 46 (5). - 1842 - 1843 o.
A "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" reagenskészlet érzékenységének és specificitásának értékelése
Asztal 1
Minták száma Minták száma Kimutatási eredmények referencia készítményekkel IDEIA Rotavirus Astro-PCR Hopo 2-PCR Adeno-PCR Kimutatási eredmények a "Rotavirus-antigen-ELISA-BEST" kittel
1. 30 30 0 0 0 30
2. 15 0 15 0 0 2
3. 14 0 0 14 0 1
4. 15 0 0 0 15 1
A "Rotavírus-antigén-ELISA-BEST" reagenskészlet specifitásának értékelése -
2. táblázat
PCR AmpliSens
rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus
0,443 1,306 0,676 0,418
Rotavírus-antigén-IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000 > 4,000 3,926 > 4,000 3,939
> 4,000 > 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 > 4,000
£ szeptember
2009. december
AmpliSens
rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus rotavírus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPKrit = 0,150
0,401 0,322 1,659 0,566 0,518 1,278 1,285 0,809 1,160 0,407 0,218 0,703 1,889 1,069 1,302 0,879 1,842 0,747 0,793 1,013 1,124 0,670 0,726 0,683 0,814 0,997 0,206 0,052 0,050 0,034 0,040 0,048 0,040
Rotavírus
OPKrit 0,250
> 4,000 3,933 3,987 3,918 3,853 3,972
> 4,000 3,864 3,879 3,897 3,800
> 4,000 3,981
> 4,000 3,713
> 4,000 4.000
> 4,000 3,989
> 4,000 3,872 0,088 0,103 0,230 0,240 0,268 1,819 0,062
antigén-ELISA-LEGJOBB "Vector-Best"
OPKrit OPKrit 0,263 0,251
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,821 3,899
> 4,000 3,964 3,845 3,923 3,962 3,871
> 4,000 3,929
> 4,000 3,881 3,884 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,800 3,851 3,818 >4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,995
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000 3,837 3,839
> 4,000 > 4,000
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,986
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,998
> 4,000 > 4,000
> 4,000 3,823 0,063 0,073 0,054 0,061 0,255 0,250 0,256 0,244 0,278 0,560 1,117 1,235 0,052 0,052
astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus astrovirus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OIIKpHT = 0,150
0,043 0,043 0,041 0,052 0,040 0,046 0,041 0,040 0,037 0,039 0,030 0,045 0,032 0,030 0,037 0,042 0,034 0,039 0,043 0,043 0,045 0,039 0,050 0,034 0,050 0,043 0,050 0,042 0,041 0,042 0,038 0,047 0,039
PoTaBHpyc-aHTHreH-HOA-EECT 3AO "BeKTop-EecT"
OnKpHT OnKpHT OIIKpHT
0,250 0,263 0,251
0,115 0,075 0,082
0,053 0,046 0,058
0,233 0,198 0,189
0,144 0,105 0,128
0,243 0,062 0,073
0,043 0,040 0,046
0,069 0,043 0,041
0,143 0,044 0,058
0,220 0,206 0,230
3,475 2,577 2,405
0,223 0,247 0,240
0,232 0,236 0,231
0,048 0,042 0,041
0,121 0,085 0,093
0,132 0,111 0,174
0,122 0,052 0,063
0,061 0,044 0,054
0,073 0,035 0,048
0,089 0,046 0,046
0,047 0,043 0,044
0,041 0,039 0,044
0,083 0,046 0,038
0,168 0,074 0,097
0,247 0,118 0,099
0,248 0,251 0,242
0,243 0,259 0,250
0,054 0,048 0,055
0,048 0,040 0,037
0,058 0,045 0,046
0,053 0,045 0,049
0,069 0,058 0,065
0,912 0,344 0,379
0,089 0,037 0,042
2009. december
PCR AmpliSens
adenovírus adenovírus adenovírus adenovírus otnat otrt otrj otrj otrj otr neglig negatív negat otr otr otr otr neglig negatív neglig
IDEIA Rotavirus DakoCytomation OPKrit = 0,150
0,040 0,044 0,039 0,041 0,260 0,044 0,046 0,042 0,047 0,041 0,039 0,048 0,055 0,035 0,039 0,040 0,041 0,033 0,046 0,049 0,048 0,038 0,039 0,029 0,037 0,036 0,043 0,043 0,039 0,042 0,034 0,037 0,041 0,036
Rotavírus - antigén - IFA-BEST CJSC "Vector-Best"
OPKrit OPKrit OPKrit
0,250 0,263 0,251
0,105 0,042 0,043
0,046 0,143 0,133
0,227 0,045 0,042
0,065 0,068 0,054
0,125 0,039 0,042
0,196 0,191 0,182
0,209 0,170 0,154
0,316 0,071 0,073
0,058 0,043 0,049
0,171 0,056 0,061
0,049 0,060 0,064
0,047 0,062 0,065
0,058 0,047 0,066
0,073 0,072 0,066
0,188 0,120 0,109
0,180 0,074 0,072
0,057 0,063 0,058
0,047 0,060 0,047
0,162 0,146 0,143
0,248 0,248 0,260
0,063 0,066 0,104
0,247 0,223 0,251
0,054 0,053 0,070
0,242 0,240 0,248
0,073 0,061 0,103
0,066 0,065 0,064
0,108 0,123 0,192
0,072 0,067 0,071
0,079 0,079 0,087
0,104 0,079 0,164
0,169 0,150 0,162
0,140 0,166 0,146
0,114 0,133 0,131
A helminthiasis kezelése gyermekeknél rendkívül fontos, mivel ennek következménye lehet a testi-lelki fejlődési elmaradás, a belső szervek és rendszerek kóros folyamatai, sőt akár halál is. Ráadásul a helmintikus fertőzések nagyon fertőzőek, ezért is terjednek olyan könnyen az óvodai és iskolai intézményekben. Ennek alapján egyértelmű, hogy mennyire fontos a gyermekek helminthiasisának időben történő kezelése.
A helminták első jelei gyermekeknél
A férgek az emberi test opportunista ágensei, amelyeknek egy személy a végső tulajdonosa. Ezenkívül ebben a kérdésben a tulajdonos életkora nem játszik szerepet, különböző típusú helminthiasis figyelhető meg mind gyermekeknél, mind felnőtt betegeknél.
Miért veszélyes a helminthiasis a gyermek számára?
Mint korábban említettük, a gyermekeknél a helminták súlyos betegségeket és patológiákat okozhatnak, amelyek következtében lelassul a szellemi és fizikai fejlődés. A helminthiasis egyes típusainak lehetséges szövődményei teljesen eltérőek lehetnek, például:
Ezért a gyermekek helminthiasisa még nagyobb odafigyelést, időben történő orvosi segítséget, hosszú távú szakorvosi nyomon követést és megelőzést igényel.
A fő tünetek gyermekeknél
A gyermek helminthiasisának tünetei a férgek típusától függően eltérőek lehetnek:
1. A orsóférgek azonnal allergiás reakcióval, lázzal és hányingerrel jelentkeznek a gyermekben. Az első megjelenések általában fényesek, de gyorsan alábbhagynak. Ezt követően a következő tünetek figyelhetők meg: 
- kólika és dysbiosis és újszülöttek;
- 1 évesnél fiatalabb csecsemőknél köldökfájdalom, székletproblémák, allergia és diathesis;
- az idősebb gyermekeknek alvászavarai, nyugtalan viselkedése, rémálmai vannak;
- a 3-7 éves gyermekeket hányinger, láz, köhögés és hasi fájdalom, bőrkiütés jellemzi.
2. Az enterobiasis, amelynek kórokozója a pinworms, törölt klinikai képként nyilvánul meg. És csak 1 hónap elteltével a következő tünetek észlelhetők:
- újszülötteknél a végbélnyílás gyulladása, duzzanata és vörössége, evés megtagadása, éjszakai sírás, étvágytalanság;
- egy év alatti gyermekeket ugyanazok a tünetek jellemzik, valamint a végbélnyílás erős viszketése éjszaka (23.00 és 1.00 óra között), a lányok a nemi szervek gyulladásától szenvednek;
- idősebb gyermekeknél hasi fájdalom a köldök közelében, alvászavar, viszketés a fenékben.
3. A toxocariasis tüneteit nehéz felismerni, kivéve az alacsony testhőmérsékletet és az allergiás reakciókat (kiütés, csalánkiütés, viszketés és duzzanat). Fertőzést követően köhögés léphet fel, amely különösen a legkisebb betegeknél tovább okoz tüdőgyulladást vagy hörghurutot. 
A trichinózis enyhe tüneteket jelez újszülötteknél, ellenkező esetben a következő tünetek figyelhetők meg:
- lázas állapot;
- az arc duzzanata;
- izom fájdalom;
- allergiás reakciók;
- 5 éves és idősebb gyermekeknél megnagyobbodott mandulák, lép, bőrkiütés és torokfájás jelentkezhet.
A legnehezebb a helminthiasis tüneteinek diagnosztizálása 2 éves vagy annál fiatalabb gyermekeknél, mivel a gyermek nem tudja megmagyarázni viselkedését és állapotát. Ezért a gyermek bármilyen atipikus megnyilvánulása és viselkedése esetén jobb, ha megmutatja az orvosnak.
Mi az első dolga?
A gyermek székletében talált férgek a betegség legfontosabb tünete, amely után azonnal orvoshoz kell fordulni. A bélféreg kezelés nem lehet sikeres megfelelő diagnózis nélkül. Ebben az esetben a felmérési módszereknek összetettnek kell lenniük, beleértve a következő eljárásokat: 
- kaparás vétele a végbélnyílásból;
- a gyermek ürülékének tanulmányozása;
- vérvizsgálat;
- izombiopszia ritka esetekben trichinosis gyanújával;
- szerológiai vérvizsgálat;
- röntgen, ultrahang, tomográfia;
- ELISA az antitestek kimutatására a vérben.
Kezelési módszerek
A gyermekeknél a helminthiasis kezelésének átfogónak, jól átgondoltnak kell lennie, pontos adagokkal és a gyógyszeradagolás gyakoriságával kell előírni. Ennek oka az a tény, hogy toxikus összetevőket tartalmazó gyógyszereket használnak az anthelmintikus hatás érdekében, ami azt jelenti, hogy az irracionális használat mellékhatásokhoz vezethet. Ezenkívül otthon a gyógynövényekkel történő alternatív kezelés megfelelő.
Népi gyógymódok
A gyermekek ilyen betegségeinek népi gyógymódokkal történő modern kezelése 4 hatékony módszert tartalmaz: 
Bármely otthoni kezelési módszert előzetesen meg kell beszélni kezelőorvosával. Emlékeztetni kell arra, hogy a gyógynövények és a népi gyógymódok ellenjavallatai vannak egyéni intolerancia formájában.
Gyógyszeres kezelés
- Enterobiasis és ascariasis esetén általában olyan gyógyszereket használnak, mint a Pirantel és a Mebendazol. A Pirantel bevétele megfelelő 10 mg-os dózisban minden egyes testtömeg-kilogrammban gombócok esetében, és 5 mg / kg ascaris esetén. A mebendazolt naponta kétszer 50 mg-os adagban kell bevenni 2-3 éves gyermekeknek három egymást követő napon, kétszer 100 mg-ot egymás után három napon át 3 évesnél idősebb gyermekeknél, majd 3 hét elteltével a terápia megismétlődik.
- Toxocariasis esetén a Mebendazolt más dózisban írják fel - 2 éves és idősebb gyermekek számára, naponta kétszer, 100 mg 14-10 napig.
- A trichinózis kezelésére testtömeg-kilogrammonként 5 mg mebendazolt alkalmaznak, majd az adagot napi három adagra osztják. A kezelés időtartama 1 hét, szigorú orvosi felügyelet mellett.
A helminthiasis megelőzése
- kézmosás azonnal az állatokkal való érintkezés után, az utca és a homokozó után, a WC-be járás és étkezés előtt;
- csak tiszta ételek fogyasztása;
- hús- és haltermékek megfelelő hőkezelése;
- forralt vizet inni;
- a személyes higiénia és higiénia betartása;
- háziállatok rendszeres féregtelenítése;
- megelőző féregtelenítés 2 éves és idősebb gyermekeknél.
Vérvizsgálat toxocarok kimutatására
Az emberi toxocariasis fertőzés jellemzői
A fertőzés hordozói a kutyák, ritkábban a macskák. A toxocara tojásokat a kóbor kutyák ürülékével osztják szét. A földön, vízben vagy egy állat bundáján elidőzve különféle módokon bekerülnek az egészséges testbe.
Reakció a behatolásra
Az orvosi statisztikákból ismert, hogy a felnőttek kisebb valószínűséggel kapnak el toxocariasist, kivéve, ha foglalkozásuk veszélyben van. A gyermekek sokkal nagyobb valószínűséggel kapnak el fertőzést.
A toxocariasis leggyakoribb tünetei:
- Láz betegség nélkül.
- Hőmérséklet emelkedés.
- Fájdalmak fokozódása és csökkenése a fejben vagy a hasban.
- Bőrkiütés megjelenése, amelyet nem lehet megszüntetni.
- Az arc puffadása.
- Az eozinofilek szintjének emelkedése a vérben, amelyet általános elemzés mutatott ki.
A pontos diagnózis felállításához a toxocarok immunológiai vizsgálatát írják elő. A fehérjevegyületek jelenléte a vérben, amely a helmint (antigének) genetikai információit hordozza, immunitást vált ki az igg osztályú antitestek termelésével szemben. Ez a toxocariasis fertőzés első jele.
Előzetes diagnosztika
A páciens anamnézisének kezdeti szakasza kollektív. Mielőtt elküldené a beteget a toxocariasis vérvizsgálatára, tanulmányoznia kell a betegség történetét és előzetes vizsgálatot kell végezni.
Elsődleges diagnózis:
- A fertőzést kiváltó súlyosbító körülmények tanulmányozása - specifikus munka állatokkal vagy házi kedvenc jelenléte, földmunkák potenciálisan veszélyes helyeken, gyerekek játszanak olyan helyeken, ahol kutyák sétálnak.
- A beteg fizikális vizsgálata. A bőr szubkután inváziójának vizsgálata toxocarok, szemhéjak és szemgolyók által, tapintás.
- Részletes vérvizsgálat kinevezése. A toxocariasis fertőzés során néhány indikátor jelentős növekedése jellemző - eozinofilek (70-80%), limfociták, ESR. Míg a hemoglobin szintje jelentősen csökken.
- Májminta vétele. Súlyos invázió esetén a máj terhelése befolyásolja, ami a bilirubin erős ugrásában nyilvánul meg.
A Toxocar invázió közvetlen megerősítése rutin tesztekkel (vér, koprogram, kenet) lehetetlen. Ezenkívül a nyombélvizsgálat nem informatív, mivel a lárvák nehezen vándorolnak.
Miután megkapta az előzetes vizsgálat eredményét, amely jelzi a lehetséges toxocaras fertőzést, és megkülönbözteti az állítólagos diagnózist a hasonló tünetekkel járó betegségektől, a beteget ELISA-vizsgálatra osztják ki toxocariasis kimutatására.
Kapcsolt immunszorbens vizsgálat
A tanulmány fő célja a toxocarok emberi szervezetben való jelenlétének megerősítése. Ezeknek a helmintáknak az antitestei a vérplazmában találhatók, ezért a vérplazmát a vénából veszik.
A toxocarok elemzése némi előkészületet igényel:
- Az eljárás előtti napon ne egyen zsíros vagy nehéz ételeket.
- Ne igyon cukros, szénsavas vagy alkoholos italokat a laborlátogatás előtti nap folyamán.
- Vegyen mintát éhgyomorra.
- Ne vegyen be gyógyszereket az előző napon és azon a napon, amelyen a vizsgálatot tervezték.
Meg kell jegyezni, hogy az invázió észlelésének ezt a nagyon informatív módját bizonyos körülmények befolyásolhatják. Hamis pozitív eredmény fordulhat elő, ha a beteg:
- Onkológiai betegségek.
- Tüdő tuberkulózis.
- Súlyos májpatológiák.
- Autoimmun szindróma.
- Antifoszfolipid szindróma.
- Terhesség.
Ebben az esetben nem lesz lehetőség 100%-os megerősítő elemzésre, mivel a felsorolt körülmények között a védekező rendszer immunglobulinokat (antitesteket) is termel. Szükséges további diagnosztika elvégzése és a toxocariasis megkülönböztetése a felsorolt tényezők közül.
Az IgG osztályba tartozó immunglobulinok koncentrációja (titer) az invázió kezdetétől számított 2-3 hónap elteltével éri el a lehetséges maximális értéket. Minél súlyosabb a fertőzés, annál magasabb ez a szám.
ELISA eredmények
A diagnózis felállításához alaposan tanulmányozzák az enzim immunoassayt, a kapott eredményeket összehasonlítják a referenciaértékekkel. A norma 1:100 antitesttiter, 0,9-nél kisebb pozitivitási index mellett.
A címek számértékei
A kapott eredmények lehetnek negatívak, pozitívak, gyengén pozitívak vagy megkérdőjelezhetőek. Az AT titerek száma az invázió súlyosságától és előfordulásának korától függ.
Elemzés dekódolás:
- AT titer 1:100-ig - az eredmény negatív. A beteg szervezetében nem találtak toxocara lárvát.
- 1:400-ig terjedő titernél az eredmény gyengén pozitív. A beteg inváziója gyenge, vagy a toxocariasis okuláris formája alakul ki. Egyes esetekben a mutató a közelmúltban történt fertőzésről beszél.
- 1: 600-ig terjedő titernél az eredmény pozitív. Egy személy a helminthiasis klinikai formájában szenved, ha észlelik, azonnali terápia szükséges.
- 1:800-ig terjedő titernél az eredmény pozitív. Progresszív jellegű súlyos invázióról és a belső szervek kóros folyamatának kialakulásának valószínűségének nagy arányáról beszél.
Ritka kivételektől eltekintve az ELISA-vizsgálatok az invázió elhanyagolt formáját tárják fel, eltérő eredetű helmintiázisok keverékével. Ebben az esetben az összes antitest 1:800-nál magasabb lehet.
Pozitivitási együttható
Az 1:400-1:600 titerű toxocariasis enzimhez kötött immunszorbens vizsgálatában az invázió és a mellékfaktorok megkülönböztetésére a kapott mutatókat összehasonlítják a referenciaértékkel. A számok közötti különbséget általában indexnek vagy pozitivitási együtthatónak nevezik.
Általában az ELISA-vizsgálat formájában az egyik indikátor a másikkal szemben áll. Az első a norma, a második jelentheti:
- 0,9-ig - az eredmény negatív. Toxocara lárvát nem találtak.
- 0,9-1,1 - az eredmény kétséges. Ebben az esetben ismételt diagnosztikát rendelnek hozzá.
- 1,1-2,2 - az eredmény gyengén pozitív. Az ember gyenge inváziójú hordozó.
- 2,2-4,2 - az eredmény pozitív. A mérsékelt toxocariasis régóta fejlődik.
- 4,4 felett - az eredmény a helminthic invázió csúcsát vagy a közelmúltban fellépő helminthiasist jelzi.
A KP 4,4-es eredménnyel és az eosinophilia 10%-os észlelt növekedésével jelezheti a toxocariasis okuláris formájának kialakulását és a keresztinváziókkal szembeni antitestek jelenlétét, összesen a toxocariasis ellen.
Az immunválasz és az antitestek optikai sűrűsége (pozitivitási együttható) a toxocar fertőzés mértékétől és elhelyezkedésétől függ. A legkisebb titer és CP indikátor csak feltételezi a helminták hiányát, de nem állítja ezt.
A bemutatott információk nem szolgálhatnak öndiagnózis vagy öngyógyítás forrásaként. Az ELISA eredmények előzetes vizsgálattal kombinálva csak a probléma jelenlétéről árulkodnak a szakembernek. Az Invitro laboratóriumban a vérdiagnosztikát nagy pontossággal végzik, az elemzés eredményét a pozitivitási együtthatóval kapcsolatos szakemberek megjegyzései kísérik. Ez nagyban segíti az orvost a pontosabb diagnózis felállításában.
Meghatározások száma 96 (48 párhuzamosan)
Működőképes tabletta formátum: 12x8 lecsupaszított, 1 lyuk törése.
Érzékenység: 1,5 U / ml.
Mérési tartomány: 0-400 U / ml.
A vizsgálati minta térfogata nem haladja meg a 25 μl-t.
A kromogénnel végzett enzimatikus reakció feltételeinek szabványosítása termosztált rázógépben 37 ° C-on.
A készlet tartalma:
1. Csíkos lemez 12 x 8 üreges, használatra kész - 1 db.
2. Használatra kész kalibrációs minták (0-400 U/ml), koncentrációtól függően változó intenzitással színezve - 6 fiola.
3. Kontrollminta - 1 palack.
4. Egykomponensű konjugátum, használatra kész, hígítást nem igényel - 1 üveg.
5. Szérum hígító oldat - 1 üveg.
6. Egykomponensű kromogén szubsztrát - tetrametilbezidin plusz (TMB +) oldat, használatra kész, hígítást nem igényel - 1 palack.
7. Foszfát-sóoldat pufferoldat tween-nel - 2 fiola.
8. Leállító reagens, használatra kész – 1 palack.
9. Fólia a tabletta lezárásához - 1 db.
10. Stencil kalibrációs grafikon készítéséhez - 1 db.
11. Reagensfürdő - 2 db.
12. Pipettahegyek 5-200 µl-hez - 16 db.
Tabletta csomagolás - cipzáras teak táska.
Az FST-T munkaoldat stabilitása legalább 5 napig +2 ... 8 ° C hőmérsékleten.
A készletet +2 ... 8 °C hőmérsékleten tárolja. Lejárati idő - a gyártástól számított 1 év.
Regisztrálva a Roszdravnadzornál.
Vezető orosz gyártók A fertőzések diagnosztikájára szolgáló reagenskészletek szegmensében: - CJSC Vector-Best, Novoszibirszk; - LLC NPO Diagnostic Systems, N. Novgorod; - CJSC "Ecolab", Electrogorsk, Moszkva régió. A nem fertőző betegségek és élettani állapotok diagnosztizálására szolgáló reagenskészletek területén: - LLC "Alkor-Bio", Szentpétervár; - CJSC "Vector-Best", Novoszibirszk; - LLC "Hema-Medica", Moszkva. Az allergia laboratóriumi diagnosztikájára szolgáló reagensek szegmensében: - LLC "Alkor-Bio", Szentpétervár; - CJSC "Vector-Best", Novoszibirszk; - LLC NPO Immunotex, Sztavropol. Laboratóriumi berendezések gyártása: - LLC "Pikon, Moszkva
A lehetséges importhelyettesítés mértékének értékelése a vizsgálatok nómenklatúrájával Analitok, mértékegységek nómenklatúrája Engedélyezett rádiófrekvenciás használathoz RF-ben gyártva Lehetséges importhelyettesítés mértéke Fertőző betegségek markerei% Nem fertőző betegségek markerei és élettani állapotok indikátorai% Allergia markerei% Összesen:%
Az import helyettesíthetőség mértékének értékelése a táblagépekhez készült ELISA termékek piacának volumene alapján Piaci szegmensek Piaci mennyiség az Orosz Föderációban, millió. A hazai gyártók értékesítési volumene, millió rubel. Importhelyettesítés aránya Fertőző betegségek jelzői% Nem fertőző betegségek markerei és élettani állapotok mutatói% Allergia markerei% Felszerelés 50051% Összesen:%
Az importhelyettesítés mértékének értékelése az immunkémiai módszerekhez használt termékek piacának volumene alapján Piaci szegmensek Piac volumene az Orosz Föderációban, millió. A hazai gyártók értékesítési volumene, millió rubel. Importhelyettesítés aránya Fertőző betegségek jelzői% Nem fertőző betegségek markerei és élettani állapotok mutatói% Allergia markerei% Felszerelés% Összesen:%
A hazai gyártók problémái az iparban: Az ELISA módszer elavulttá válik. A belföldi IF-reagenseket fokozatosan helyettesítik az importált kemilumineszcens reagensekkel; A meglévő közbeszerzési rendszer vagy a legolcsóbb áruk, vagy egyedi tulajdonságokkal rendelkező importtermékek beszerzését ösztönzi; Az automata berendezések hazai gyártóinak fejletlenségének és az importtermékek gyártásának lokalizációjának egyik fő oka a vámigazgatási akadály; Az utóbbi idők fő problémája az új termékek RZN-ben történő állami regisztrációs rendszerének összeomlása. Gyakorlatilag megszűnt az új termékek piacra kerülése, és továbbra is előnyben vannak azok a külföldi gyártók, akik korábban hosszú listákkal regisztráltak, a hazaiakkal szemben; A technológiai elmaradottság fő oka az, hogy képtelenség megszerezni a jogot a modern berendezésekhez kompatibilis termékek előállítására; A hazai termelők alacsony szintű konszolidációja és az egymás közötti folyamatos árháborúk lehetetlenné teszik a fejlett termékek fejlesztését és a vezető szereplőkkel való egyenlő versenyt, így a külföldi piacokon is.
Javaslatok: Az FCC keretein belül az orvostechnikai eszközök közbeszerzési eljárásának nem versenyeztetési eljárásának bevezetése, majd ezt követően pozicionális közzététel. A finanszírozási korlátok piaci átlagáron alapuló meghatározása bizonyos előnyöket biztosít a hazai termelőknek, lehetővé teszi a drága import reagensek felhasználásának korlátozását és a költségvetési források felhasználásának hatékonyabb ellenőrzését; A hazai gyártók bővítésének és konszolidációjának elősegítése annak érdekében, hogy az erőforrásokat a modern termékek fejlesztésére összpontosítsák és a nemzetközi piacra lépjenek. A nem kompetitív közbeszerzési eljárás gyorsan csak igazán versenyképes vállalkozásokat hagy majd a piacon; Állami források elkülönítése a köz-magán partnerség elvei alapján az ország biológiai biztonságának biztosításához elegendő számú vizsgálat kidolgozásának ösztönzésére; A vámjogosultságoknak az alkatrészekre kell vonatkozniuk, nem a késztermékekre; A regisztrációs rendszer harmonizálása az európaival, ahol az alacsony potenciális kockázatú orvostechnikai eszközöket megfelelőségi nyilatkozat alapján regisztrálják.
Betöltés ...