Kan perisinusoidale celler være regionale stamceller i leveren? Studie av levercellers påvirkning på stamceller Stellatceller

Gener og celler: bind V, nr. 1, 2010, s.: 33-40

Forfattere

Gumerova A., Kiyasov A.P.

Regenerativ medisin er et av de raskest utviklende og lovende områdene innen medisin, som er basert på en fundamentalt ny tilnærming til å gjenopprette et skadet organ ved å stimulere og (eller) bruke stamceller (stamceller) for å akselerere regenereringen. For å implementere denne tilnærmingen er det nødvendig å vite hva stamceller er, og spesielt regionale stamceller, hva deres fenotype og styrke er. For en rekke vev og organer, som epidermis og skjelettmuskulatur, er stamceller allerede identifisert og deres nisjer beskrevet. Imidlertid har leveren, et organ hvis regenerative evner har vært kjent siden antikken, ennå ikke avslørt hovedhemmeligheten - stamcellens hemmelighet. I denne gjennomgangen, basert på våre egne og litteraturdata, diskuterer vi hypotesen om at perisinusoidale stellatceller kan gjøre krav på rollen til leverstamceller.

Perisinusoidale leverceller (Ito-celler, stellatceller, lipocytter, fettlagrende celler, vitamin A-lagrende celler) er en av de mest mystiske celletypene i leveren. Historien om å studere disse cellene går tilbake mer enn 130 år, og det er fortsatt mange flere spørsmål angående deres fenotype og funksjoner enn svar. Cellene ble beskrevet i 1876 av Kupffer, som han kalte stjerneceller og klassifisert som makrofager. Senere fikk ekte stillesittende makrofager i leveren navnet Kupffer.

Det er generelt akseptert at Ito-celler er lokalisert i rommet til Disse i direkte kontakt med hepatocytter, akkumulerer vitamin A og er i stand til å produsere makromolekyler av intercellulær substans, og også, med kontraktil aktivitet, regulere blodstrømmen i sinusformede kapillærer som pericytter. Gullstandarden for identifisering av Ito-celler hos dyr er å identifisere det mellomliggende filamentproteinet i cytoskelett som er karakteristisk for muskelvev, desmin. Andre ganske vanlige markører for disse cellene er markører for nevronal differensiering - glial fibrillært syreprotein (GFAP) og nestin.

Lange år Ito-celler ble kun vurdert ut fra deres deltakelse i utviklingen av leverfibrose og cirrhose. Dette skyldes det faktum at når leveren er skadet, skjer det alltid aktivering av disse cellene, som består av økt ekspresjon av desmin, proliferasjon og transdifferensiering til myofibroblaster-lignende celletransformasjon som uttrykker --glattmuskelaktin (--SMA) og syntetiserer betydelige mengder intercellulær substans, spesielt type I kollagen. Det er aktiviteten til slike aktiverte Ito-celler som ifølge mange forskere fører til utvikling av leverfibrose og skrumplever.

På den annen side akkumuleres det gradvis fakta som lar oss se på Ito-celler fra helt uventede posisjoner, nemlig som den viktigste komponenten i mikromiljøet for utvikling av hepatocytter, kolangiocytter og blodceller under leverstadiet av hematopoiesis, og , dessuten som mulige stamceller ( progenitorceller i leveren. Hensikten med denne gjennomgangen er å analysere moderne data og synspunkter på arten og funksjonelle betydningen av disse cellene med en vurdering av deres mulige medlemskap i populasjonen av leverstamceller (progenitorceller).

Ito-celler er den viktigste deltakeren i restaureringen av parenkym under leverregenerering på grunn av makromolekylene i den intercellulære matrisen de produserer og dens remodellering, samt produksjonen av vekstfaktorer. De første tvilene om sannheten til den etablerte teorien, som anser Ito-celler utelukkende som hovedskyldige i leverfibrose, oppsto da det ble funnet at disse cellene produserer et betydelig antall morfogene cytokiner. Blant dem består en betydelig gruppe av cytokiner, som er potensielle mitogener for hepatocytter.

Den viktigste i denne gruppen er hepatocytt-vekstfaktor - hepatocytt-mitogen, nødvendig for spredning, overlevelse og cellemotilitet (det er også kjent som scatter-faktor. En defekt i denne vekstfaktoren og (eller) dens reseptor C-met hos mus fører til leverhypoplasi og ødeleggelse av dets parenkym som et resultat av undertrykkelse av hepatoblastproliferasjon, økt apoptose og utilstrekkelig celleadhesjon.

I tillegg til hepatocyttvekstfaktor, produserer Ito-celler stamcellefaktor. Dette ble vist i en modell for leverregenerering etter delvis hepatektomi og eksponering for 2-acetoaminofluoren. Det er også fastslått at Ito-celler skiller ut transformerende vekstfaktor og epidermal vekstfaktor, som spiller en viktig rolle både i spredningen av hepatocytter under regenerering og stimulerer mitose av selve Ito-cellene. Spredningen av hepatocytter utløses også av det mesenkymale morfogene proteinet epimorfin uttrykt av Ito-celler, som vises i dem etter delvis hepatektomi, og pleiotrofin.

I tillegg til parakrine mekanismer for interaksjon mellom hepatocytter og Ito-celler, spiller direkte intercellulære kontakter av disse cellene med hepatocytter også en viss rolle. Betydningen av celle-til-celle-kontakter mellom Ito-celler og epitel-progenitorceller ble demonstrert in vitro når blandet kultur viste seg å være mer effektiv for å differensiere sistnevnte til albuminproduserende hepatocytter enn kultur av membranseparerte celler, der de bare kunne utveksle løselige faktorer. gjennom kulturmedier. Isolert fra fosterleveren til mus på dag 13.5. svangerskap, mesenkymale celler med Thy-1+/С049!±/vimentin+/desmin+/ --GMA+-fenotypen, etter etablering av direkte intercellulære kontakter, stimulerte differensieringen av en populasjon av primitive leverendodermale celler - til hepatocytter (inneholdende glykogen, som uttrykker m -RNA-tyrosinaminotransferaser og tryptofan oksygen-navn). Populasjonen av Thy-1+/desmin+ mesenkymale celler uttrykte ikke markører for hepatocytter, endotel og Kupffer-celler, og ble tilsynelatende representert spesifikt av Ito-celler. Høye tettheter av desmin-positive Ito-celler og deres arrangement i nær kontakt med differensierende hepatocytter er blitt observert in vivo i rotte og human prenatal lever. Dermed lar alle disse fakta oss konkludere med at denne celletypen er den viktigste komponenten i mikromiljøet som er nødvendig for normal utvikling hepatocytter i ontogenese og deres restaurering i prosessen med reparativ regenerering.

I i fjor Data ble innhentet som indikerer en betydelig påvirkning av Ito-celler på differensieringen av hematopoietiske stamceller. Dermed produserer Ito-celler erytropoietin og nevrotrofin, som påvirker differensieringen av ikke bare leverenepitelceller, men også hematopoietiske stamceller. En studie av føtal hematopoiesis hos rotter og mennesker viste at det er disse cellene som utgjør mikromiljøet til hematopoietiske øyer i leveren. Ito-celler uttrykker vaskulær celleadhesjonsmolekyl-1 (VCAM-1), et nøkkelmolekyl for å opprettholde adhesjonen av hematopoetiske stamceller til benmargsstromaceller. I tillegg uttrykker de også stromal avledet faktor-1 - (SDF-1 -) - en potensiell kjemoattraktant for hematopoietiske stamceller, og stimulerer deres migrasjon til stedet for hematopoiesis på grunn av interaksjon med den spesifikke reseptoren Cystein-X-Cystein reseptor 4 ( CXR4), så vel som homeobox-proteinet Hlx, hvis det er defekt, blir både utviklingen av selve leveren og hepatisk hematopoiesis forstyrret. Mest sannsynlig er det ekspresjonen av VCAM-1 og SDF-1a på føtale Ito-celler som er triggeren for tiltrekning av hematopoetiske stamceller til fosterleveren for ytterligere differensiering. Retinoider akkumulert av Ito-celler er også en viktig morfogenesefaktor for hematopoietiske celler og epitel. Man kan ikke unngå å nevne påvirkningen av Ito-celler på mesenkymale stamceller. Ito-celler, isolert fra rottelever og fullt aktivert, modulerer differensieringen av benmargsmesenkymale stamceller (multipotente mesenkymale stromale celler) til hepatocyttlignende celler (akkumulerer glykogen og uttrykker thetase og fosfoenolpyruvat karboksykinase) etter 2 weekkinase. samdyrking.

Dermed lar de akkumulerte vitenskapelige bevisene oss konkludere med at Ito-celler er en av de viktigste celletypene som er nødvendige for utvikling og regenerering av leveren. Det er disse cellene som skaper mikromiljøet både for føtal hepatisk hematopoiesis og for differensiering av hepatocytter under prenatal utvikling, samt for differensiering av epitel- og mesenkymale stamceller til hepatocytter in vitro. Foreløpig er disse dataene hevet over tvil og er akseptert av alle leverforskere. Hva fungerte da som utgangspunkt for fremveksten av hypotesen som ble fremsatt i artikkelens tittel?

Først av alt ble utseendet lettet ved identifisering i leveren av celler som uttrykker både epitelmarkører for hepatocytter og mesenkymale markører av Ito-celler. Det første arbeidet på dette området ble utført i studiet av prenatal histo- og organogenese av pattedyrlever. Det er utviklingsprosessen som er nøkkelbegivenheten, og studiet av denne lar oss spore naturlige forhold dynamikken til den primære dannelsen av den definitive fenotypen til ulike celletyper av et organ ved bruk av spesifikke markører. For øyeblikket er utvalget av slike markører ganske bredt. I arbeider viet til studiet av dette problemet ble forskjellige markører for mesenkymale og epitelceller, individuelle cellepopulasjoner i leveren og stamceller (inkludert hematopoietiske) celler brukt.

I studiene som ble utført, ble det funnet at desmin-positive Ito-celler fra rottefostre forbigående på dag 14-15. svangerskap uttrykker epitelmarkører som er karakteristiske for hepatoblaster, slik som cytokeratin 8 og 18. På den annen side uttrykker hepatoblaster samtidig med utviklingen Ito-cellemarkøren desmin. Dette er det som tillot oss å anta at i leveren under intrauterin utvikling er det celler med en overgangsfenotype som uttrykker både mesenkymale og epiteliale markører, og derfor vurdere muligheten for utvikling av Ito-celler og hepatocytter fra én kilde og (eller) å betrakte disse cellene som én og samme celletype på forskjellige utviklingsstadier. Ytterligere studier av histogenese utført på humant embryonalt levermateriale viste det ved 4-8 uker. intrauterin utvikling av human lever, Ito-celler uttrykte cytokeratin 18 og 19, noe som ble bekreftet av dobbel immunhistokjemisk farging, og svak positiv farging for desmin ble notert i hepatoblaster.

I en studie publisert i 2000 klarte imidlertid ikke forfatterne å oppdage uttrykket av desmin i hepatoblaster i leveren til musefoster, og E-cadherin og cytokeratiner i Ito-celler. Forfatterne oppnådde positiv farging for cytokeratiner i Ito-celler bare i en liten andel av tilfellene, som de assosierte med uspesifikk kryssreaksjon av primære antistoffer. Valget av disse antistoffene er noe forvirrende - antistoffer mot kyllingdesmin og bovine cytokeratiner 8 og 18 ble brukt i arbeidet.

I tillegg til desmin og cytokeratiner, er en vanlig markør for Ito-celler og føtale hepatoblaster hos mus og rotter en annen mesenkymal markør - det vaskulære celleadhesjonsmolekylet VCAM-1. VCAM-1 er en unik overflatemarkør som skiller Ito-celler fra myofibroblaster i den voksne rotteleveren og er også tilstede på flere andre leverceller av mesenkymal opprinnelse, som endotelceller eller myogene celler.

Et annet bevis til fordel for hypotesen under vurdering er muligheten for mesenkymal-epitelial transdifferensiering (konvertering) av Ito-celler isolert fra leveren til voksne rotter. Det skal bemerkes at litteraturen hovedsakelig diskuterer epitel-mesenkymal snarere enn mesenkymal-epitelial transdifferensiering, selv om begge retninger er anerkjent som mulig, og ofte brukes begrepet "epitelial-mesenkymal transdifferensiering" i seg selv for å referere til transdifferensiering i begge retninger. Etter å ha analysert ekspresjonsprofilen til m-RNA og tilsvarende proteiner i Ito-celler isolert fra leveren til voksne rotter etter eksponering for karbontetraklorid (CTC), fant forfatterne både mesenkymale og epiteliale markører i dem. Blant de mesenkymale markørene ble nestin, --GMA og matrisemetalloproteinase-2 (MMP-2) identifisert, og blant de epiteliale, muskelpyruvatkinase (MPK), karakteristisk for ovale celler, cytokeratin 19, α-FP, E -cadherin, samt transkripsjonsfaktoren Hepatocyte nuclear factor 4- (HNF-4-), spesifikk for celler som er bestemt til å bli hepatocytter. Det ble også funnet at i den primære kulturen av humane epiteliale leverprogenitorceller forekommer m-RNA-ekspresjon av Ito-cellemarkører - nestin, GFAP - epiteliale progenitorer co-uttrykker både epiteliale og mesenkymale markører. Muligheten for mesenkymal-epitelial transdifferensiering bekreftes av opptreden i Ito-celler av Integrin-linked kinase (ILK), et enzym som er nødvendig for slik transdifferensiering.

Mesenkymal-epitelial transdifferensiering ble også avslørt i våre in vitro-eksperimenter, hvor en original tilnærming ble tatt for å dyrke en ren populasjon av Ito-celler isolert fra rottelever inntil et tett monolag av celler ble dannet. Etter dette sluttet cellene å uttrykke desmin og andre mesenkymale markører, skaffet seg morfologien til epitelceller og begynte å uttrykke markører som er karakteristiske for hepatocytter, spesielt cytokeratin 8 og 18. Lignende resultater ble oppnådd under organotypisk dyrking av rotteføtallever.

I løpet av det siste året har det blitt publisert to artikler som anser Ito-celler som en undertype av ovale celler, eller som deres derivater. Ovale celler er små ovale celler med en smal kant av cytoplasma som vises i leveren i noen modeller av giftig leverskade og anses for tiden for å være bi-potente stamceller som er i stand til å differensiere til både hepatocytter og kolangiocytter. Basert på det faktum at genene som uttrykkes av isolerte Ito-celler faller sammen med genene som uttrykkes av ovale celler, og under visse dyrkingsbetingelser av Ito-celler, hepatocytter og gallegangceller, testet forfatterne hypotesen som Ito-celler er basert på. en type ovale celler som er i stand til å generere hepatocytter for å regenerere skadet lever. Transgene GFAP-Cre/GFP (grønt fluorescerende protein) mus ble matet med en metionin-kolin-mangelfull/etionin-anriket diett for å aktivere Ito-celler og ovale celler. Stillegående Ito-celler hadde en GFAP+-fenotype. Etter aktivering av Ito-celler ved skade eller kultur, reduserte deres GFAP-uttrykk og de begynte å uttrykke markører for ovale og mesenkymale celler. De ovale cellene forsvant da GFP+-hepatocytter dukket opp, og begynte å uttrykke albumin og erstattet til slutt store områder med leverparenkym. Basert på funnene deres, antok forfatterne at Ito-celler er en undertype av ovale celler som differensierer til hepatocytter gjennom en "mesenkymal" fase.

I eksperimenter utført på samme modell for aktivering av ovale celler, da sistnevnte ble isolert fra leveren til rotter, ble det funnet at ovale celler in vitro uttrykker ikke bare de tradisjonelle markørene 0V-6, BD-1/BD-2 og M2RK og markører trær i den ekstracellulære matrisen, inkludert kollagener, matrisemetalloproteinaser og vevsinhibitorer av metalloproteinaser - markørtrekk ved Ito-celler. Etter eksponering av celler for TGF-pl, i tillegg til undertrykkelse av vekst og morfologiske endringer, en økning i ekspresjonen av disse genene, samt desmin- og GFAP-gener, utseendet av ekspresjon av transkripsjonsfaktoren Snail, ansvarlig for epitel- mesenkymal transdifferensiering og opphør av uttrykket av E-cadherin ble notert, noe som indikerer muligheten for "omvendt" transdifferensiering av ovale celler til Ito-celler.

Siden ovale celler tradisjonelt betraktes som bipotente forløpere for både hepatocytter og kolangiocytter, er det gjort forsøk på å etablere muligheten for eksistensen av overgangsformer mellom epitelcellene i de intrahepatiske gallegangene og Ito-celler. Dermed ble det vist at i normal og skadet lever ble små strukturer av den duktale typen farget positivt for Ito-cellemarkøren - GMA, men i fotografiene presentert i artikkelen, som gjenspeiler resultatene av immunfluorescerende farging, er det mulig å finne ut hva disse - GMA+ ductal strukturer - galleveier eller blodårer - ikke er mulig. Imidlertid har andre resultater blitt publisert som indikerer uttrykket av Ito-cellemarkører i kolangiocytter. I det allerede nevnte arbeidet av L. Yang ble ekspresjon av Ito-cellemarkøren GFAP av gallegangceller vist. Det cytoskeletale intermediære filamentproteinet synemin, tilstede i normal lever i Ito-celler og vaskulære celler, dukket opp i kanalcellene som var involvert under utviklingen av den ductulære reaksjonen; det ble også uttrykt i kolangiokarsinomceller. Så hvis det er ganske mange forskjellige bevis angående muligheten for gjensidig transdifferensiering av Ito-celler og hepatocytter, er slike observasjoner fortsatt sporadiske og ikke alltid entydige med kolangiocytter.

For å oppsummere kan vi si at uttrykksmønstrene for mesenkymale og epiteliale markører både under histo- og organogenese av leveren, og under en rekke eksperimentelle forhold, både in vivo og in vitro, indikerer muligheten for både mesenkymal-epitel og epitel-mesenkymale små overganger mellom Ito-celler/ovale celler/hepatocytter, og lar derfor Ito-celler betraktes som en av kildene til hepatocyttutvikling. Faktaene ovenfor indikerer utvilsomt en uløselig forbindelse mellom disse celletypene, og indikerer også betydelig fenotypisk plastisitet til Ito-celler. Den fenomenale plastisiteten til disse cellene er bevist ved deres uttrykk for en rekke nevrale proteiner, slik som allerede nevnte GFAP, nestin, nevrotrofiner og deres reseptorer, det nevrale celleadhesjonsmolekylet (N-CAM), synaptophysin, nervevekstfaktor (nevral) vekstfaktor, NGF), hjerneavledet nevrotrofisk faktor (BDNF), på grunnlag av hvilken en rekke forfattere diskuterer muligheten for utvikling av Ito-celler fra nevralkammen. Men i løpet av det siste tiåret har en annen versjon tiltrukket seg enorm oppmerksomhet fra forskere – nemlig muligheten for utvikling av hepatocytter og Ito-celler fra hematopoietiske og mesenkymale stamceller.

Det første verket der denne muligheten ble bevist ble utgitt av V.E. Petersen et al., som viste at hepatocytter er i stand til å utvikle seg fra en hematopoetisk stamcelle. Deretter ble dette faktum gjentatte ganger bekreftet i arbeidene til andre forskere, og litt senere ble muligheten for differensiering til hepatocytter vist for mesenkymale stamceller. Hvordan dette skjer - ved fusjon av donorceller med mottakerleverceller, eller ved deres transdifferensiering - er fortsatt ikke klart. Imidlertid fant vi også at humane navlestrengsblod hematopoietiske stamceller, når de transplanteres inn i milten til partielle hepatektomirotter, koloniserer leveren og er i stand til å differensiere til hepatocytter og leversinusoidceller, noe som fremgår av tilstedeværelsen av menneskelige cellemarkører i disse cellen typer. I tillegg var vi de første som viste at foreløpig genetisk modifisering av navlestrengsblodceller ikke har en signifikant effekt på deres distribusjons- og differensieringsevne i mottakerens lever etter transplantasjon. Når det gjelder muligheten for utvikling av hepatocytter fra hematopoietiske stamceller under prenatal histogenese, selv om denne muligheten ikke helt kan utelukkes, virker det likevel usannsynlig, siden morfologien, lokaliseringen og fenotypen til disse cellene skiller seg betydelig fra lignende indikatorer for leverceller. Tilsynelatende, hvis en slik bane eksisterer, spiller den ikke en betydelig rolle i dannelsen av epitel- og sinusformede celler under ontogenese. Resultatene fra nyere studier, utført både in vivo og in vitro, har sådd tvil om den etablerte teorien om utviklingen av hepatocytter kun fra det endodermale epitelet i fortarmen, og derfor oppsto naturlig nok antagelsen om at den regionale stamcellen i leveren kan være plassert blant dens mesenkymale celler. Kan slike celler være Ito-celler?

Med tanke på de unike egenskapene til disse cellene, deres fenomenale plastisitet og eksistensen av celler med en overgangsfenotype fra Ito-celler til hepatocytter, antar vi at disse cellene er hovedkandidatene for denne rollen. Ytterligere argumenter for denne muligheten er at disse cellene, som hepatocytter, kan dannes fra hematopoietiske stamceller, og de er de eneste sinusformede cellene i leveren som er i stand til å uttrykke markører for stamceller (stamceller).

I 2004 ble det bestemt at Ito-celler også kan utvikle seg fra en hematopoetisk stamcelle. Etter transplantasjon av benmargsceller fra GFP-mus, dukket GFP+-celler som uttrykker Ito-cellemarkøren GFAP opp i leveren til mottakermus, og prosesser av disse cellene penetrerte mellom hepatocytter. Hvis mottakerens lever ble skadet av CCU, uttrykte de transplanterte cellene også Ito blast-lignende celler. Når fraksjonen av ikke-parenkymale celler ble isolert fra leveren til mottakermus, utgjorde GFP+-celler med lipiddråper 33,4+2,3 % av de isolerte cellene; de uttrykte desmin og GFAP, og etter 7 dager. dyrking

På den annen side fører transplantasjon av benmargsceller til dannelsen av ikke bare Ito-celler, men også type I-kollagengenet, på grunnlag av hvilket det ble konkludert med at slik transplantasjon bidrar til utviklingen av fibrose. Imidlertid er det også arbeider som har vist en reduksjon i leverfibrose på grunn av migrering av transplanterte celler inn i fibrøse skillevegger og produksjon av matrise metalloproteinase-9 (Matrix Metalloproteinase-9, MMP-9) av disse cellene, som er en av de viktigste egenskapene til Ito-celler. Våre foreløpige data viste også en nedgang i antall myofibroblaster og en nedgang i nivået av fibrose etter autotransplantasjon av en brøkdel av perifere mononukleære blodceller hos pasienter med kronisk hepatitt med alvorlig leverfibrose. I tillegg, som et resultat av hematopoetisk stamcelletransplantasjon, kan andre celletyper som er i stand til å produsere ekstracellulær matrise vises i mottakerens lever. Ved leverskade indusert av gallekanalligering er de transplanterte cellene differensierte fibrocytter som uttrykker kollagen, og bare når de dyrkes i nærvær av TGF-pl er de differensierte myofibroblaster, som potensielt fremmer fibrose. Dermed assosierte forfatterne faren for leverfibrose etter benmargscelletransplantasjon ikke med Ito-celler, men med en "unik populasjon av fibrocytter." På grunn av inkonsistensen i dataene som ble innhentet, oppsto det en diskusjon om et annet spørsmål - om Ito-celler, som dukket opp som et resultat av differensiering av transplanterte hematopoietiske stamceller, vil bidra til utviklingen av fibrose, eller vil de sikre fullstendig regenerering av levervev og reduksjon av fibrose. De siste årene har det blitt åpenbart (inkludert fra dataene ovenfor) at opprinnelsen til myofibroblaster i leveren kan være forskjellig - fra Ito-celler, fra portalkanalfibroblaster og til og med fra hepatocytter. Det er også fastslått at myofibroblaster av ulik opprinnelse er forskjellige i en rekke egenskaper. Dermed skiller aktiverte Ito-celler seg fra myofibroblaster i portalkanalen i vitamininnhold, kontraktil aktivitet, respons på cytokiner, spesielt TGF-p, og evnen til å gjennomgå spontan apoptose. I tillegg er disse cellepopulasjonene forskjellige og kan uttrykke det vaskulære celleadhesjonsmolekylet VCAM-1, som er tilstede på Ito-celler og fraværende på myofibroblaster. Det skal også bemerkes at i tillegg til produksjonen av proteiner i den intercellulære matrisen, produserer aktiverte Ito-celler også matrisemetalloproteinaser, som ødelegger denne matrisen. Dermed er rollen til Ito-celler, inkludert de som er dannet fra hematopoietiske stamceller, i utviklingen av fibrose langt fra så tydelig som tidligere antatt. Tilsynelatende fremmer de ikke så mye fibrose som omformer den intercellulære matrisen under prosessen med leverrestaurering etter skade, og gir dermed et bindevevsrammeverk for regenerering av parenkymale leverceller.

normal og skadet rottelever. Rotte Ito-celler uttrykker også en annen markør for stamceller - CD133, og demonstrerer egenskapene til stamceller, i stand til, avhengig av forhold, å differensiere i forskjellige - 2) med tillegg av cytokiner som letter differensiering til endotelceller, form forgrenede rørformede strukturer med induksjon av markørekspresjon endotelceller - endotel NO-syntase og vaskulær endotelial cadherin; 3) ved bruk av cytokiner som fremmer differensiering av stamceller til hepatocytter - til runde celler som uttrykker hepatocyttmarkører - FP og albumin. Rotte Ito-celler uttrykker også 0ct4, en egenskap ved pluripotente stamceller. Interessant nok kunne bare en del av Ito-cellepopulasjonen isoleres ved magnetisk sortering ved bruk av anti-CD133-antistoffer, men etter standard (pronase/kollagenase) isolasjon uttrykte alle plast-adherente celler CD133 og 0kt4. En annen markør for progenitorceller, Bcl-2, uttrykkes av desmin+-celler under prenatal utvikling av den menneskelige leveren.

Dermed har forskjellige forskere vist muligheten for at Ito-celler uttrykker visse markører for stamceller (stamceller). Dessuten ble det nylig publisert en artikkel der hypotesen først ble fremsatt om at Disse-rommet, dannet av basalmembranproteiner, endotelceller og hepatocytter, der Ito-celler er lokalisert, kan utgjøre et mikromiljø for sistnevnte, og fungere som et " nisje" av stamceller. celler. Dette er bevist av flere funksjoner som er karakteristiske for bordcellenisjen og identifisert i komponentene i mikromiljøet til Ito-celler. Celler som ligger i umiddelbar nærhet til stamcellen må produsere løselige faktorer, samt utføre direkte interaksjoner som holder stamcellen i en udifferensiert tilstand og fanger den i en nisje, ofte plassert på basalmembranen. Faktisk syntetiserer endotelceller i leversinusformede kapillærer løselig SDF-1, som binder seg spesifikt til Ito-cellereseptoren CXR4 og stimulerer migrasjonen av disse cellene in vitro. Denne interaksjonen spiller en nøkkelrolle i migreringen av hematopoietiske stamceller til og permanent opphold i deres endelige nisje i benmargen under ontogenese, samt i mobiliseringen av dem i benmargen. Perifert blod. Det er logisk å anta at en slik interaksjon kan spille en lignende rolle i leveren, og holde Ito-celler i Disse-rommet. I de tidlige stadiene av leverregenerering kan økt ekspresjon av SDF-1 også bidra til rekruttering av flere stamcelle-rom i kroppen. Innerveringen av nisjeceller må involvere det sympatiske nervesystemet, som er involvert i å regulere rekrutteringen av hematopoietiske stamceller. Noradrenerge signaler fra det sympatiske nervesystemet spiller en kritisk rolle i GCSF (Granulocyttkolonistimulerende faktorl-indusert mobilisering av hematopoietiske stamceller fra benmargen. Plasseringen av nerveender i umiddelbar nærhet til Ito-celler er bekreftet i flere studier. har også blitt funnet at som respons på sympatisk stimulering utskiller Ito-celler prostaglandiner F2a og D, som aktiverer glykogenolyse i nærliggende parenkymceller. Disse fakta tyder på at det sympatiske nervesystemet kan ha en innflytelse på Ito-cellenisjen. En annen funksjon av stamcellen nisje er opprettholdelsen av en "langsom" cellesyklus og en udifferensiert tilstand av stamceller. Vedlikeholdet av den udifferensierte tilstanden til Ito-celler in vitro forenkles av parenkymale leverceller - når man dyrker disse to cellepopulasjonene atskilt av en membran, Ito-celler beholder uttrykket av stamcellemarkørene CD133 og 0kt4, mens i fravær av hepatocytter, får Ito-celler myofibroblast-fenotypen og mister stamcellemarkører. Dermed er uttrykket av stamcellemarkører helt klart et kjennetegn på hvilende Ito-celler. Det er også fastslått at påvirkningen av parenkymceller på Ito-celler kan være basert på interaksjonen mellom de parakrine faktorene Wnt og Jag1 syntetisert av hepatocytter med de tilsvarende reseptorene (Myc, Notchl) på overflaten av Ito-celler. Wnt/b-catenin og Notch signalveier støtter stamcellenes evne til å fornye seg selv gjennom langsom symmetrisk deling uten påfølgende differensiering. En til en viktig komponent Nisjene er basalmembranproteinene, laminin og kollagen IV, som opprettholder den rolige tilstanden til Ito-celler og undertrykker deres differensiering. En lignende situasjon oppstår i muskelfibre og kronglete sædrør, der henholdsvis satellittceller (muskelstamceller) og udifferensiert spermatogoni er i nær kontakt med basalmembranen til muskelfiberen eller "spermatogent epitel". Det er åpenbart at interaksjonen mellom stamceller og ekstracellulære matriseproteiner undertrykker initieringen av deres endelige differensiering. Dataene som er oppnådd gjør det dermed mulig å betrakte Ito-celler som stamceller, hvor nisjen kan være Disse-plassen.

Våre data om stampotensialet til Ito-celler og muligheten for dannelse av hepatocytter fra disse cellene ble bekreftet i eksperimenter som studerer leverregenerering in vivo ved bruk av modeller for delvis hepatektomi og giftig leverskade av blynitrat. Det er tradisjonelt antatt at i disse modellene for leverregenerering er det ingen aktivering av stammerommet og det er ingen ovale celler. Vi var imidlertid i stand til å fastslå at man i begge tilfeller ikke bare kan observere aktiveringen av Ito-celler, men også uttrykket i dem av en annen stamcellemarkør, nemlig reseptoren for stamcellefaktor C-settet. Siden C-kit-ekspresjon også ble observert i enkelthepatocytter (i dem var det mindre intenst), hovedsakelig lokalisert i kontakt med C-kit-positive Ito-celler, kan det antas at disse hepatocyttene differensierte fra C-kit+ Ito-celler. Det er åpenbart at denne celletypen ikke bare skaper betingelser for restaurering av hepatocyttpopulasjonen, men også okkuperer nisjen til stamceller. regionale celler lever.

Dermed er det nå fastslått at Ito-celler uttrykker minst fem stamcellemarkører under ulike utviklings-, regenerative- og kulturbetingelser. Alle data akkumulert til dags dato tyder på at Ito-celler kan fungere som regionale stamceller i leveren, og er en av kildene til utviklingen av hepatocytter (og muligens kolangiocytter), og er også den viktigste komponenten i mikromiljøet for levermorfogenese og hepatisk hematopoiesis. Det er imidlertid tilsynelatende noe prematurt å trekke definitive konklusjoner om hvorvidt disse cellene tilhører populasjonen av leverstamceller (stamceller). Det er imidlertid et åpenbart behov for ny forskning i denne retningen, som, dersom den lykkes, vil åpne for muligheter for utvikling av effektive metoder for behandling av leversykdommer basert på stamcelletransplantasjon.

I dette tilfellet reagerer disse cellene ved å multiplisere påvirkningen av cytokiner, vekstfaktorer og kjemokiner (pro-inflammatoriske cytokiner) produsert av den skadede leveren. Kronisk aktivering av stellatceller som svar på replikasjonsindusert oksidativt stress HBV-virus og HCV, kan bidra til fibrogenese og økt spredning av hepatocytter kronisk infisert med HBV og HCV.

Stjerneceller deltar således i reguleringen av vekst, differensiering og omsetning av hepatocytter, som sammen med aktivering av MAP-kinaser kan føre til utvikling av leverkreft [Block, 2003].

Linker:

Tilfeldig tegning

Merk følgende! Informasjon på nettsiden

kun beregnet for utdanningsformål

Studerer påvirkningen av Ito-leverceller på stamceller

Intercellulær kommunikasjon kan realiseres ved parakrin sekresjon og direkte celle-til-celle-kontakter. Det er kjent at hepatiske perisinusoidale celler (HPC) etablerer regionale stamcellers nisje og bestemmer deres differensiering. Samtidig forblir HPC dårlig karakterisert på molekylært og cellulært nivå.

Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kiyasov A.P.

Statens utdanningsinstitusjon for høyere profesjonsutdanning "Kazan State Medical University of the Federal Agency for Health and Social Development"

Eksperimentell vurdering av osteoinduktivitet av rekombinant benmorfogenetisk protein

Cellulære teknologier i behandling av degenerative sykdommer i bein og ledd

Ito bur

rolig Og aktivert. Aktiverte Ito-celler

rolig tilstand

perisinusoidal(subendotelial) og interhepatocellulært. De første forlater cellekroppen og strekker seg langs overflaten av den sinusformede kapillæren, og dekker den med tynne fingerlignende grener. De perisinusoidale fremspringene er dekket med korte villi og har karakteristiske lange mikroskudd som strekker seg enda lenger langs overflaten av kapillærendotelrøret. Interhepatocellulære projeksjoner, etter å ha overvunnet platen med hepatocytter og nådd den tilstøtende sinusoiden, er delt inn i flere perisinusoidale projeksjoner. I gjennomsnitt dekker altså en Ito-celle litt mer enn to tilstøtende sinusoider.

aktivert tilstand

Leverceller

Den menneskelige leveren består av celler, som alt organisk vev. Naturen har designet det på en slik måte at dette organet utfører de viktigste funksjonene: det renser kroppen, produserer galle, akkumulerer og deponerer glykogen, syntetiserer plasmaproteiner, styrer metabolske prosesser og deltar i normalisering av mengden kolesterol og andre nødvendige komponenter. for kroppens funksjon.

For å oppfylle formålet må leverceller være sunne, ha en stabil struktur, og hver person må beskytte dem mot ødeleggelse.

Om strukturen og typene av leverlobuli

Den cellulære sammensetningen av organet er preget av mangfold. Leverceller danner lobuler, og segmenter er bygd opp av lobuler. Organets struktur er slik at hepatocytter (hovedlevercellene) er plassert rundt den sentrale venen, forgrener seg fra den, forbinder med hverandre, danner sinusoider, det vil si hull fylt med blod. Blod beveger seg gjennom dem som gjennom kapillærer. Leveren forsynes med blod fra portalvenen og arterien som ligger i organet. Leverlobulene produserer galle og slipper den ut i strømningskanalene.

Andre typer leverceller og deres formål

Endotel - celler som fôrer sinusoidene og inneholder fenestrae. Sistnevnte er ment å danne en trinnvis barriere mellom sinusoid og Disse-rommet.
Selve rommet til Disse er fylt med stjerneceller; de sikrer utstrømning av vevsvæske inn i lymfekarene i portalsonene.
Kupffer-celler er assosiert med endotelet, de er festet til det, deres funksjon er å beskytte leveren når en generalisert infeksjon kommer inn i kroppen, eller under skade.
Pit-celler er mordere av hepatocytter påvirket av viruset; i tillegg har de cytotoksisitet til tumorceller.

Den menneskelige leveren består av 60 % hepatocytter og 40 % andre typer cellulære forbindelser. Hepatocytter har en polyederform; det er minst 250 milliarder av dem. Normal operasjon hepatocytter skyldes spekteret av komponenter som skilles ut av sinusformede celler som fyller det sinusformede rommet. Det vil si Kupffer som er oppført ovenfor, stellat og pitceller (intrahepatiske lymfocytter).

Endotelet er et filter mellom blodet i det sinusformede rommet og plasmaet i Disse-rommet. Dette biologiske filteret sorterer ut store forbindelser som er overdrevent rike på retinol og kolesterol og lar dem ikke passere, noe som er gunstig for kroppen. I tillegg er deres funksjon å beskytte leveren (nemlig hepatocytter) mot mekanisk skade fra blodceller.

Vår faste leser anbefalte en effektiv metode! Ny oppdagelse! Novosibirsk-forskere har oppdaget det beste middeletå rense leveren. 5 år med forskning. Selvbehandling hjemme! Etter å ha gjennomgått den nøye, bestemte vi oss for å gi deg oppmerksomhet.

Prosessen med interaksjon av organelementer

Det er en interaksjon mellom alle partikler i organet, som har et ganske komplekst skjema. En sunn lever er preget av stabiliteten til cellulære forbindelser; i patologiske prosesser kan den ekstracellulære matrisen spores under et mikroskop.

Organvev gjennomgår endringer under påvirkning av giftstoffer, for eksempel alkohol, virale midler. De er som følger:

avsetning i organet av produkter dannet på grunn av metabolske forstyrrelser;
celledegenerasjon;
hepatocytt nekrose;
fibrose av levervev;
inflammatorisk prosess i leveren;
kolestase.

Om behandling av organpatologi

Det er nyttig for hver pasient å vite hva endringene som organet gjennomgår betyr. Ikke alle av dem er katastrofale. For eksempel kan dystrofi være mild eller alvorlig. Begge disse prosessene er reversible. For tiden er det medisiner som gjenoppretter celler og hele segmenter av leveren.

Kolestase kan kureres selv med folkemedisiner - avkok og infusjoner. De hjelper til med å normalisere syntesen av bilirubin og eliminere forstyrrelser i utstrømningen av galle inn i tolvfingertarmen.

Med skrumplever i det første stadiet behandling begynner med en diett, deretter er hepatoprotector-terapi foreskrevet. Den mest effektive måten å behandle skrumplever og fibrose på er stamceller, som injiseres i navlestrengen eller intravenøst; de gjenoppretter hepatocytter som er skadet av ulike midler.

De viktigste årsakene til levercelledød er alkoholmisbruk og narkotikaeksponering, inkludert narkotika og medisiner. Ethvert giftstoff som kommer inn i kroppen er en leverødelegger. Derfor bør du gi opp dårlige vaner slik at du får en sunn lever.

Hvem sa at det er umulig å kurere alvorlige leversykdommer?

Mange metoder er prøvd, men ingenting hjelper.
Og nå er du klar til å dra nytte av enhver mulighet som vil gi deg det etterlengtede velværet!

En effektiv behandling for leveren finnes. Følg linken og finn ut hva leger anbefaler!

Les også:

Utdanning: Rostov State Medical University (RostSMU), Institutt for gastroenterologi og endoskopi.

ENDOTELCELLER, KUPFERCELLER OG ITO

Vi skal se på strukturen til endotelceller, Kupffer- og Ito-celler, ved å bruke eksemplet med to tegninger.

Figuren til høyre for teksten viser de sinusformede kapillærene (SC) i leveren - intralobulære kapillærer av sinusformen, økende fra inngangsvenulene til den sentrale venen. Hepatiske sinusformede kapillærer danner et anastomotisk nettverk mellom leverplatene. Slimhinnen til sinusformede kapillærer dannes av endotelceller og Kupffer-celler.

I figuren til venstre for teksten er leverplaten (LP) og de to sinusformede kapillærene (SCs) i leveren kuttet vertikalt og horisontalt for å vise de perisinusoidale Ito-cellene (Ito-celler). De kuttede galle-canaliculi (BC) er også markert på figuren.

ENDOTELCELLER

Endotelceller (EC) er svært flate plateepitelceller med en langstrakt liten kjerne, lite utviklede organeller og et stort antall mikropinocytotiske vesikler. Cytomembranen er prikket med uregelmessige åpninger (O) og fenestrae, ofte gruppert i cribriform plater (RP). Disse hullene lar blodplasma passere gjennom, men ikke blodceller, noe som gir det tilgang til hepatocytter (D). Endotelceller har ikke en basalmembran og utviser ikke fagocytose. De er koblet til hverandre ved hjelp av små forbindelseskomplekser (ikke vist). Sammen med Kupffer-celler danner endotelceller den indre grensen til rommet til Disse (PD); dens ytre kant er dannet av hepatocytter.

KUPFER-CELLER

Kupffer-celler (KC-er) er store, ikke-persisterende stjerneceller innenfor de leversinusformede kapillærene, delvis ved deres bifurkasjoner.

Kupffer-celleprosesser passerer uten noen forbindelsesanordninger mellom endotelceller og krysser ofte lumen i sinusoidene. Kupffer-celler inneholder en oval kjerne, mange mitokondrier, et velutviklet Golgi-kompleks, korte sisterne av granulært endoplasmatisk retikulum, mange lysosomer (L), gjenværende kropper og sjeldne ringformede plater. Kupffer-celler inkluderer også store fagolysosomer (PL), som ofte inneholder foreldede røde blodlegemer og fremmede stoffer. Inneslutninger av hemosiderin eller jern kan også påvises, spesielt ved supravital farging.

Overflaten til Kupffer-celler viser variable, flate cytoplasmatiske folder kalt lamellipodia (LP) - lamellære stilker - så vel som prosesser kalt filopodia (F) og mikrovilli (MV) dekket med glykokalyx. Plasmalemmaet danner vermiforme kropper (VB) med en sentralt plassert tett linje. Disse strukturene kan representere en kondensert glykokalyx.

Kupffer-celler er makrofager, som med stor sannsynlighet danner en uavhengig slekt av celler. De stammer vanligvis fra andre Kupffer-celler på grunn av mitotisk deling av sistnevnte, men kan også stamme fra benmargen. Noen forfattere mener at de er aktiverte endotelceller.

Noen ganger passerer en og annen autonom nervefiber (ANF) gjennom rommet til Disse. I noen tilfeller har fibrene kontakt med hepatocytter. Kantene på hepatocytter er avgrenset av interhepatocytt-utsparinger (MU) prikket med mikrovilli.

ITO-CELLER

Dette er stjerneceller lokalisert i disse (SD)-rommene. Kjernene deres er rike på kondensert kromatin og deformeres vanligvis av store lipiddråper (LD). Sistnevnte er til stede ikke bare i perikaryon, men også i cellens prosesser og er synlige fra utsiden som sfæriske fremspring. Organeller er dårlig utviklet. Perisinusoidale celler viser svak endocytotisk aktivitet, men har ikke fagosomer. Cellene har flere lange prosesser (O) som kommer i kontakt med nabohepatocytter, men som ikke danner forbindelseskomplekser.

Prosessene omslutter de sinusformede kapillærene i leveren og passerer i noen tilfeller gjennom leverplatene og kommer i kontakt med tilstøtende leversinus. Prosessene er ikke konstante, forgrenede og tynne; de kan også flates ut. Ved å samle grupper av lipiddråper, forlenges de og ser ut som en haug med druer.

Det antas at perisinusoidale Ito-celler er dårlig differensierte mesenkymale celler som kan betraktes som hematopoietiske stamceller, siden de kan transformeres til fettceller aktive blodstamceller eller fibroblaster.

Under normale forhold er Ito-celler involvert i akkumulering av fett og vitamin A samt i produksjonen av intralobulære retikulære og kollagenfibre (KB).

Psykologi og psykoterapi

Denne delen vil inneholde artikler om forskningsmetoder, medisiner og andre komponenter relatert til medisinske emner.

En liten del av nettstedet som inneholder artikler om originale gjenstander. Klokker, møbler, dekorative elementer - alt dette finner du i denne seksjonen. Seksjonen er ikke den viktigste for nettstedet, og fungerer snarere som et interessant tillegg til verden av menneskelig anatomi og fysiologi.

Ito leverceller

Universell populærvitenskapelig nettleksikon

LEVER

LEVER, den største kjertelen i kroppen til virveldyr. Hos mennesker utgjør den omtrent 2,5 % av kroppsvekten, i gjennomsnitt 1,5 kg hos voksne menn og 1,2 kg hos kvinner. Leveren ligger i øvre høyre del av bukhulen; den er festet med leddbånd til mellomgulvet, bukveggen, magen og tarmene og er dekket med en tynn fibrøs membran - Glissons kapsel. Leveren er et mykt, men tett organ med en rødbrun farge og består vanligvis av fire lapper: en stor høyrelapp, en mindre venstrelapp og mye mindre kaudat- og kvadratlapper som danner den bakre nedre overflaten av leveren.

Funksjoner.

Leveren er et essensielt organ for livet med mange forskjellige funksjoner. En av de viktigste er dannelsen og sekresjonen av galle, en gjennomsiktig væske av oransje eller gul farge. Galle inneholder syrer, salter, fosfolipider (fett som inneholder en fosfatgruppe), kolesterol og pigmenter. Gallesalter og frie gallesyrer emulgerer fett (dvs. bryter dem i små dråper), noe som gjør dem lettere å fordøye; konvertere fettsyrer til vannløselige former (som er nødvendig for absorpsjon av både fettsyrene selv og fettløselige vitaminer A, D, E og K); har en antibakteriell effekt.

Alle næringsstoffer som tas opp i blodet fra fordøyelseskanalen - produkter fra fordøyelsen av karbohydrater, proteiner og fett, mineraler og vitaminer - passerer gjennom leveren og behandles der. Samtidig omdannes noen aminosyrer (proteinfragmenter) og noe fett til karbohydrater, så leveren er det største "depotet" av glykogen i kroppen. Det syntetiserer blodplasmaproteiner - globuliner og albumin, og gjennomgår også aminosyreomdannelsesreaksjoner (deaminering og transaminering). Deaminering - fjerning av nitrogenholdige aminogrupper fra aminosyrer - gjør at sistnevnte kan brukes for eksempel til syntese av karbohydrater og fett. Transaminering er overføring av en aminogruppe fra en aminosyre til en ketosyre for å danne en annen aminosyre ( cm. METABOLISME). Leveren syntetiserer også ketonlegemer (produkter fra fettsyremetabolismen) og kolesterol.

Leveren er involvert i å regulere glukose (sukker) nivåer i blodet. Hvis dette nivået øker, omdanner leverceller glukose til glykogen (et stoff som ligner på stivelse) og lagrer det. Hvis blodsukkernivået faller under det normale, brytes glykogen ned og glukose kommer inn i blodet. I tillegg er leveren i stand til å syntetisere glukose fra andre stoffer, for eksempel aminosyrer; denne prosessen kalles glukoneogenese.

En annen funksjon av leveren er avgiftning. Medisiner og andre potensielt giftige forbindelser kan omdannes til en vannløselig form i leverceller, som gjør at de kan skilles ut i galle; de kan også ødelegges eller konjugeres (kombineres) med andre stoffer for å danne ufarlige produkter som lett skilles ut fra kroppen. Noen stoffer avsettes midlertidig i Kupffer-celler (spesielle celler som absorberer fremmede partikler) eller i andre leverceller. Kupffer-celler er spesielt effektive til å fjerne og ødelegge bakterier og andre fremmede partikler. Takket være dem spiller leveren en viktig rolle i kroppens immunforsvar. Leveren har et tett nettverk av blodkar, og fungerer også som et blodreservoar (den inneholder hele tiden omtrent 0,5 liter blod) og er involvert i reguleringen av blodvolum og blodstrøm i kroppen.

Generelt utfører leveren mer enn 500 forskjellige funksjoner, og aktiviteten kan ennå ikke reproduseres kunstig. Fjerning av dette organet fører uunngåelig til døden innen 1–5 dager. Imidlertid har leveren en enorm intern reserve, det har den fantastisk evne komme seg etter skade, slik at mennesker og andre pattedyr kan overleve selv etter at 70 % av levervevet er fjernet.

Struktur.

Den komplekse strukturen til leveren er perfekt tilpasset for å utføre sine unike funksjoner. Lobbene består av små strukturelle enheter - lobuler. I den menneskelige leveren er det omtrent hundre tusen av dem, hver 1,5–2 mm lang og 1–1,2 mm bred. Lobulen består av leverceller - hepatocytter, plassert rundt den sentrale venen. Hepatocytter er forent i lag en celle tykk - den såkalte. leverplater. De divergerer radielt fra den sentrale venen, forgrener seg og forbinder med hverandre, og danner et komplekst system av vegger; de smale hullene mellom dem, fylt med blod, er kjent som sinusoider. Sinusoider tilsvarer kapillærer; når de passerer inn i hverandre, danner de en kontinuerlig labyrint. Leverlappene tilføres blod fra grenene til portvenen og leverarterien, og gallen som dannes i lobulene kommer inn i det rørformede systemet, fra dem inn i gallegangene og skilles ut fra leveren.

Den hepatiske portvenen og leverarterien gir leveren en uvanlig, dobbel blodtilførsel. Næringsrikt blod fra kapillærene i magesekken, tarmene og flere andre organer samles i portvenen, som i stedet for å føre blod til hjertet som de fleste andre årer, fører det til leveren. I leverlobuli bryter portvenen opp i et nettverk av kapillærer (sinusoider). Begrepet "portalvene" indikerer en uvanlig retning for blodtransport fra kapillærene til ett organ til kapillærene til et annet (nyrene og hypofysen har et lignende sirkulasjonssystem).

Den andre kilden til blodtilførsel til leveren, leverarterien, fører oksygenrikt blod fra hjertet til de ytre overflatene av lobulene. Portvenen gir 75–80 %, og leverarterien 20–25 % av den totale blodtilførselen til leveren. Generelt passerer ca 1500 ml blod gjennom leveren per minutt, dvs. en fjerdedel av hjertevolum. Blod fra begge kilder kommer til slutt inn i sinusoidene, hvor det blandes og strømmer til den sentrale venen. Fra den sentrale venen begynner utstrømningen av blod til hjertet gjennom lobarvenene inn i levervenen (ikke å forveksle med portvenen i leveren).

Galle skilles ut av leverceller til de minste tubuli mellom cellene - gallekapillærer. Det samles opp gjennom det indre systemet av tubuli og kanaler inn i gallegangen. Noe galle går direkte inn i den vanlige gallegangen og slippes ut i tynntarmen, men det meste går gjennom den cystiske kanalen tilbake for lagring i galleblæren, en liten, muskelvegget sekk festet til leveren. Når maten kommer inn i tarmen, trekker galleblæren seg sammen og frigjør innholdet til den vanlige gallegangen, som åpner seg i tolvfingertarmen. Den menneskelige leveren produserer omtrent 600 ml galle per dag.

Portaltriade og acini.

Grenene til portalvenen, leverarterien og gallegangen er plassert i nærheten, ved den ytre grensen av lobulen og danner portaltriaden. I periferien av hver lobule er det flere slike portaltriader.

Den funksjonelle enheten i leveren er acinus. Dette er den delen av vevet som omgir portaltriaden og inkluderer lymfekar, nervefibre og tilstøtende sektorer av to eller flere lobuler. En acini inneholder omtrent 20 leverceller plassert mellom portaltriaden og den sentrale venen i hver lobule. I et todimensjonalt bilde ser en enkel acinus ut som en gruppe kar omgitt av tilstøtende deler av lobuler, og i et tredimensjonalt bilde ser det ut som et bær (acinus - lat. bær) som henger på en stilk av blod og galle fartøyer. Acinus, hvis mikrovaskulære rammeverk består av de ovennevnte sirkulasjons- og lymfekar, sinusoider og nerver, er den mikrosirkulatoriske enheten i leveren.

Leverceller

(hepatocytter) har form som polyeder, men de har tre hovedfunksjonelle overflater: sinusformet, vendt mot sinuskanalen; rørformet - involvert i dannelsen av veggen til gallekapillæren (den har ikke sin egen vegg); og intercellulær - direkte tilstøtende til naboleverceller.

Ito bur

Ito-celler (synonymer: hepatisk stjernecelle, fettlagrende celle, lipocytt, engelsk. Hepatisk Stellatcelle, HSC, Cell of Ito, Ito-celle) - pericytter inneholdt i det perisinusoidale rommet i leverlappen, i stand til å fungere i to forskjellige tilstander - rolig Og aktivert. Aktiverte Ito-celler spille en stor rolle i fibrogenese - dannelsen av arrvev ved leverskade.

I en intakt lever finnes stjerneceller i rolig tilstand. I denne tilstanden har cellene flere fremspring som dekker den sinusformede kapillæren. En annen særpreg celler er tilstedeværelsen i deres cytoplasma av reserver av vitamin A (retinoid) i form av fettdråper. Stille Ito-celler utgjør 5-8 % av alle leverceller.

Ito-celleutvekster er delt inn i to typer: perisinusoidal(subendotelial) og interhepatocellulært. De første forlater cellekroppen og strekker seg langs overflaten av den sinusformede kapillæren, og dekker den med tynne fingerlignende grener. De perisinusoidale fremspringene er dekket med korte villi og har karakteristiske lange mikroskudd som strekker seg enda lenger langs overflaten av kapillærendotelrøret. Interhepatocellulære projeksjoner, etter å ha overvunnet platen med hepatocytter og nådd den tilstøtende sinusoiden, er delt inn i flere perisinusoidale projeksjoner. I gjennomsnitt dekker altså en Ito-celle litt mer enn to tilstøtende sinusoider.

Når leveren er skadet, blir Ito-celler aktivert tilstand. Den aktiverte fenotypen er preget av proliferasjon, kjemotaksi, kontraktilitet, tap av retinoidlagre og dannelse av myofibroblastlignende celler. Aktiverte hepatiske stellatceller viser også økte nivåer av nye gener som α-SMA, ICAM-1, kjemokiner og cytokiner. Aktivering indikerer begynnelsen av det tidlige stadiet av fibrogenese og går foran den økte produksjonen av ECM-proteiner. Det siste stadiet av leverheling er preget av økt apoptose av aktiverte Ito-celler, som et resultat av at antallet reduseres kraftig.

Gullkloridfarging brukes til å visualisere Ito-celler under mikroskopi. Det har også blitt fastslått at en pålitelig markør for å skille disse cellene fra andre myofibroblaster er deres uttrykk for Reelin-proteinet.

Historie

I 1876 beskrev Karl von Kupfer celler han kalte "Sternzellen" (stellatceller). Når de ble farget med gulloksid, var inneslutninger synlige i cytoplasmaet til cellene. Da han feilaktig anså dem for å være fragmenter av røde blodceller fanget av fagocytose, reviderte Kupfer i 1898 sitt syn på "stellatcellen" som en egen type celle og klassifiserte dem som fagocytter. I de påfølgende årene dukket det imidlertid opp regelmessig beskrivelser av celler som ligner på Kupffers "stellatceller". De ble gitt forskjellige navn: interstitielle celler, parasinusoidceller, lipocytter, pericytter. Rollen til disse cellene forble et mysterium i 75 år, inntil professor Toshio Ito oppdaget visse celler som inneholder fettinneslutninger i det perisinusoidale rommet i den menneskelige leveren. Ito kalte dem "shibo-sesshu saibo" - fettabsorberende celler. Da han innså at inneslutningene var fett produsert av celler fra glykogen, endret han navnet til "shibo-chozo saibo" - fettlagrende celler. I 1971 beviste Kenjiro Wake identiteten til Kupffers Sternzellen og Itos fettlagrende celler. Vake fant også at disse cellene spiller en viktig rolle i lagring av vitamin A (før dette ble det antatt at vitamin A var lagret i Kupffer-celler). Kort tid etter demonstrerte Kent og Popper den nære assosiasjonen mellom Ito-celler og leverfibrose. Disse oppdagelsene startet prosessen med å studere Ito-celler i detalj.

se også

Skriv en anmeldelse av artikkelen "Ito's Cell"

Lenker

Young-O Queon, Zachary D. Goodman, Jules L. Dienstag, Eugene R. Schiff, Nathaniel A. Brown, Elmar Burkhardt, Robert Schoonhoven, David A. Brenner, Michael W. Fried (2001). Journal of Haeothology 35; 749-755. - oversettelse av en artikkel i tidsskriftet "Infections and Antimicrobial Therapy", bind 04/N 3/2002, på nettstedet Consilium-Medicum.
Popper H: Fordeling av vitamin A i vev som avslørt ved fluorescensmikroskopi. Physiol Rev 1944, 24:.

Notater

Geerts A. (2001) Historie, heterogenitet, utviklingsbiologi og funksjoner til hvilende leverstjerneceller. Semin Lever Dis. 21(3):311-35. PMID
Wake, K. (1988) Perivaskulære leverceller avslørt ved gull- og sølvimpregneringsmetode og elektronmikroskopi. I "Biopatologi av leveren. En ultrastrukturell tilnærming" (Motta, P.M., red) s. 23-36, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, Nederland
Stanciu A, Cotutiu C, Amalinei C. (2002) Nye data om ITO-celler. Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi. 107(2):235-9. PMID
John P. Iredale (2001) Hepatisk stellatcelleoppførsel under oppløsning av leverskade. Seminars in Liver Disease, 21(3):PMID- (engelsk) på Medscape.
Kobold D, Grundmann A, Piscaglia F, Eisenbach C, Neubauer K, Steffgen J, Ramadori G, Knittel T. (2002) Uttrykk av reelin i hepatiske stellatceller og under hepatisk vevsreparasjon: en ny markør for differensiering av HSC fra andre levermyofibroblaster. J Hepatol. 36(5):607-13. PMID
Adrian Reuben (2002) Hepatologi. Bind 35, utgave 2, side 503-504 (engelsk)
Suematsu M, Aiso S. (2001) Professor Toshio Ito: en klarsynt i pericyttbiologi. Keio J Med. 50(2):66-71. PMID (engelsk)
Querner F: Der mikroskopiske Nachweis von Vitamin A im animalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung. Klin Wschr 1935, 14:.

Utdrag som karakteriserer Itos celle

En halvtime senere dro Kutuzov til Tatarinova, og Bennigsen og hans følge, inkludert Pierre, gikk langs linjen.

Bennigsen gikk ned fra Gorki høy vei til brua, som betjenten fra haugen pekte ut for Pierre som midtpunktet i stillingen og på bredden av den lå rader med slått gress som luktet høy. De kjørte over broen til landsbyen Borodino, derfra svingte de til venstre og forbi et enormt antall tropper og kanoner kjørte de ut til en høy haug som militsen gravde på. Det var en redutt som ennå ikke hadde noe navn, men som senere fikk navnet Raevsky redutt, eller barrow battery.

Pierre ga ikke mye oppmerksomhet til denne redutten. Han visste ikke at dette stedet ville bli mer minneverdig for ham enn alle stedene i Borodino-feltet. Deretter kjørte de gjennom ravinen til Semenovsky, der soldatene tok bort de siste tømmerstokkene til hyttene og låvene. Så, nedover og oppover, kjørte de framover gjennom knust rug, slått ut som hagl, langs en vei som nylig ble lagt av artilleri langs åsryggene til åkermarken til flushene [en type festningsverk. (Notat av L.N. Tolstoy.) ], også gravd på den tiden.

Bennigsen stoppet ved spylingen og begynte å se framover mot Shevardinsky-redutten (som var vår først i går), hvor flere ryttere kunne ses. Offiserene sa at Napoleon eller Murat var der. Og alle så grådig på denne hestegjengen. Pierre så også dit og prøvde å gjette hvem av disse knapt synlige menneskene som var Napoleon. Til slutt red rytterne av haugen og forsvant.

Bennigsen henvendte seg til generalen som nærmet seg ham og begynte å forklare hele stillingen til våre tropper. Pierre lyttet til Bennigsens ord og anstrengte all sin mentale styrke for å forstå essensen av den kommende kampen, men med sorg følte han at mental kapasitet det var utilstrekkelig for dette. Han skjønte ingenting. Bennigsen sluttet å snakke, og da han la merke til Pierre, som lyttet, sa han plutselig og snudde seg mot ham:

– Jeg tror du ikke er interessert?

"Å, tvert imot, det er veldig interessant," gjentok Pierre, ikke helt sant.

Fra floden kjørte de enda lenger til venstre langs en vei som snirklet seg gjennom en tett lav bjørkeskog. Midt i det

skog, en brun hare med hvite bein hoppet ut på veien foran dem og skremt av klapringen fra et stort antall hester, ble han så forvirret at han hoppet langs veien foran dem lenge, spennende generell oppmerksomhet og latter, og først da flere stemmer ropte til ham, styrtet han til siden og forsvant inn i kratt. Etter å ha kjørt rundt to mil gjennom skogen, kom de til en lysning der troppene til Tuchkovs korps, som skulle beskytte venstre flanke, var stasjonert.

Her, på ytterste venstre flanke, snakket Bennigsen mye og lidenskapelig og gjorde, slik det forekom Pierre, en viktig militær orden. Det var en høyde foran Tuchkovs tropper. Denne bakken var ikke okkupert av tropper. Bennigsen kritiserte høylytt denne feilen og sa at det var galskap å la høyden som kommanderte området være ubesatt og plassere tropper under den. Noen generaler uttrykte samme oppfatning. Spesielt en snakket med militær glød om at de ble lagt her til slakt. Bennigsen beordret i hans navn å flytte troppene til høyden.

Denne ordren på venstre flanke gjorde Pierre enda mer tvilende til sin evne til å forstå militære anliggender. Da han hørte på Bennigsen og generalene som fordømte troppenes stilling under fjellet, forsto Pierre dem fullt ut og delte deres mening; men nettopp derfor kunne han ikke forstå hvordan den som plasserte dem her under fjellet kunne gjøre en så åpenbar og grov feil.

Pierre visste ikke at disse troppene ikke var plassert for å forsvare stillingen, slik Bennigsen mente, men ble plassert på et skjult sted for et bakholdsangrep, det vil si for å bli ubemerket og plutselig angripe den fremrykkende fienden. Dette visste ikke Bennigsen og flyttet troppene frem av spesielle grunner uten å fortelle det til øverstkommanderende.

På denne klare augustkvelden den 25. lå prins Andrei støttet på armen i en ødelagt låve i landsbyen Knyazkova, i utkanten av regimentets beliggenhet. Gjennom hullet i den ødelagte muren så han på en stripe med tretti år gamle bjørketrær med avskårne grener langs gjerdet, på en dyrkbar mark med havrebunker på, og på busker som røyk fra branner - soldatenes kjøkken - kunne sees.

Uansett hvor trangt og ingen trengte og uansett hvor vanskelig livet hans nå virket for prins Andrei, følte han seg, akkurat som for syv år siden i Austerlitz på tampen av slaget, opphisset og irritert.

Ordrer for morgendagens kamp ble gitt og mottatt av ham. Det var ikke noe annet han kunne gjøre. Men de enkleste, klareste tankene og derfor forferdelige tanker lot ham ikke være i fred. Han visste at morgendagens kamp kom til å bli den mest forferdelige av alle de han deltok i, og muligheten for død for første gang i livet hans, uten hensyn til hverdagen, uten hensyn til hvordan det ville påvirke andre, men bare i forhold til ham selv, til hans sjel, med livlighet, nesten med sikkerhet, enkelt og forferdelig, viste det seg for ham. Og fra høyden av denne ideen ble alt som tidligere hadde plaget og opptatt ham plutselig opplyst av et kaldt hvitt lys, uten skygger, uten perspektiv, uten distinksjon av konturer. Hele livet hans virket for ham som en magisk lykt, som han lenge så inn i gjennom glass og under kunstig belysning. Nå så han plutselig, uten glass, i sterkt dagslys, disse dårlig malte bildene. "Ja, ja, dette er de falske bildene som bekymret og gledet og plaget meg," sa han til seg selv, snudde i fantasien hovedbildene av sin magiske livslykt, nå så på dem i dette kalde, hvite dagens lys. - en klar tanke på døden. «Her er de, disse grovt malte figurene som så ut til å være noe vakkert og mystisk. Ære, offentlig beste, kjærlighet til en kvinne, selve fedrelandet - så flotte disse bildene virket for meg, hvilken dyp mening de virket fylt med! Og alt dette er så enkelt, blekt og røft i det kalde, hvite lyset den morgenen, som jeg føler stiger for meg. Spesielt tre store sorger i livet hans opptok hans oppmerksomhet. Hans kjærlighet til en kvinne, farens død og den franske invasjonen som fanget halve Russland. "Kjærlighet. Denne jenta virket for meg full av mystiske krefter. Som jeg elsket henne! Jeg la poetiske planer om kjærlighet, om lykke med den. Å kjære gutt! – sa han høyt sint. - Selvfølgelig! Jeg trodde på en slags ideell kjærlighet, som skulle forbli trofast mot meg hele året jeg var borte! Som den ømme duen i en fabel, skulle hun visne bort fra meg. Og alt dette er mye enklere... Alt dette er fryktelig enkelt, ekkelt!

Målet med prosjektet var å studere interaksjoner mellom rottelever perisinusoidale celler og ulike stamceller som mononukleær cellefraksjon av humant navlestrengsblod (UCB-MC) og rottebenmargsavledede multipotensielle mesenkymale stromaceller (BM-MMSC).

Materialer og metoder. Rotte-BM-MSC og HPC, humane UCB-MC-celler ble avledet ved bruk av standardteknikker. For å studere HPC parakrin regulering samdyrket vi UCB-MC- eller BM-MMSC-celler med HPC ved å bruke Boyden-kamre og kondisjonerte HPC-celler. Differensielt merkede celler ble dyrket sammen og deres interaksjoner ble observert ved fasekontrast fluorescerende mikroskopi og immuncytokjemi.

Resultater. I løpet av den første uken av dyrking var det autofluorescens av vitamin A på grunn av fettlagrende evne til PHC. BM-MMSC viste høy levedyktighet i alle samkulturelle modeller. Etter 2 dagers inkubasjon i kondisjonert media-samkultur av BM-MMSC med HPC observerte vi endringer i morfologien til MMSC - de reduserte i størrelse og spirene deres ble kortere. Uttrykket av α-Smooth Muscle Actin og desmin var lik myofibroblast - en mellomform for Ito-cellekultur in vitro. Disse endringene kan skyldes parakrin stimulering av HPC. Den mest dyptgripende effekten av HPC på UCB-MC-celler ble observert i kontakt-samkultur, og dermed er det viktig for UCB-MC-celler å skape direkte celle-til-celle-kontakter for å opprettholde deres levedyktighet. Vi observerte ingen cellefusjon mellom HPC /UCB og HPC /BM-MMSC-celler i samkulturer. I våre videre eksperimenter planlegger vi å studere vekstfaktorer produsert av HPC for hepatisk differensiering av stamceller.

Introduksjon.

Av spesiell interesse blant mangfoldet av leverceller er lever perisinusoidale celler (Ito-celler). Takket være utskillelsen av vekstfaktorer og komponenter i den intercellulære matrisen, skaper de et mikromiljø av hepatocytter, og en rekke vitenskapelige studier har vist evnen til leverstjerneceller til å danne et mikromiljø for stamceller (inkludert hematopoietiske) og påvirke deres differensiering til hepatocytter. Celle-til-celle-interaksjoner av disse cellepopulasjonene kan forekomme gjennom parakrin sekresjon av vekstfaktorer eller direkte celle-til-celle-kontakter, men det molekylære og cellulære grunnlaget for disse prosessene er fortsatt dårlig forstått.

Hensikten med studien.

Studie av interaksjonsmekanismer Ito-celler med hematopoietiske (HSC) og mesenkymale (MMSC) stamceller under in vitro-forhold.

Materialer og metoder.

Ito-celler fra rottelever ble isolert ved to forskjellige enzymatiske metoder. Samtidig ble stromale MMSC-er hentet fra rottebenmarg. Den mononukleære fraksjonen av hematopoietiske stamceller ble isolert fra humant navlestrengsblod. Den parakrine påvirkningen av Ito-celler ble studert ved å dyrke MMSC-er og HSC-er i mediet som Ito-celler vokste i, og ved å samdyrke celler adskilt av en semipermeabel membran. Påvirkningen av intercellulære kontakter ble studert under samkultur av celler. For bedre visualisering ble hver populasjon merket med en individuell fluorescerende tag. Cellemorfologi ble vurdert ved fasekontrast og fluorescensmikroskopi. Fenotypiske egenskaper til dyrkede celler ble studert ved bruk av immuncytokjemisk analyse.

Resultater.

Innen en uke etter isolering av perisinusoidale celler, bemerket vi deres evne til å autofluorescere på grunn av deres fettakkumulerende evne. Deretter gikk cellene inn i en mellomfase av veksten og fikk en stjerneform. I de innledende stadiene av samdyrking av Ito-celler med rottebenmarg-MMSC-er, ble levedyktigheten til MMSC-er opprettholdt i alle dyrkingsalternativer. På den andre dagen, da MMSC-er ble dyrket i kulturmediet til Ito-celler, skjedde det en endring i morfologien til MMSC-er - de reduserte i størrelse, og prosessene deres ble forkortet. Uttrykket av alfa-glatt muskel-aktin og desmin i MMSC-er økte, noe som indikerer deres fenotypiske likhet med myofibroblaster, et mellomliggende vekststadium av aktiverte Ito-celler in vitro. Dataene våre indikerer påvirkningen av parakrine faktorer utskilt av Ito-celler på egenskapene til MMSC-er i kultur.

Basert på samdyrking av hematopoietiske stamceller med Ito-celler, ble det vist at hematopoietiske stamceller beholder levedyktigheten kun under kontaktsamdyrking med Ito-celler. I følge fluorescensanalysen av blandede kulturer ble fenomenet fusjon av celler fra forskjellige populasjoner ikke oppdaget.

Konklusjoner. For å opprettholde levedyktigheten til hematopoietiske stamceller er tilstedeværelsen av direkte intercellulære kontakter med Ito-celler en avgjørende faktor. Parakrin regulering ble kun observert når MMSC-er ble dyrket i næringsmediet der Ito-celler vokste. Det er planlagt å studere påvirkningen av spesifikke faktorer produsert av Ito-celler på differensieringen av HSC-er og MMSC-er i cellekultur i de følgende studiene.

Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kiyasov A.P.
Statens utdanningsinstitusjon for høyere profesjonsutdanning "Kazan State Medical University of the Federal Agency for Health and Social Development"

Hovedkilden til endotoksin i kroppener en gram-negativ tarmflora. Foreløpig er det ingen tvil om at leveren er hovedorganet utfører endotoksinclearning. Nodotoxin tas først og fremst opp av cellene kami Kupffer (KK), som interagerer med membranreseptoren CD 14. Kan binde seg til reseptoren selv lipopolysakkarid(LPS), og dets kompleks med lipid A-bindende protein com plasma. Interaksjonen mellom LPS og levermakrofager utløser en kaskade av reaksjoner basert på produksjon og frigjøring av reduksjon av cytokiner og andre biologisk aktive formidlere.

Det er mange publikasjoner om makrofens rolleleverkontroll (LC) i opptak og clearance av bakteriell LPS, men interaksjonen av endotelet med andre mesenkymalt celler, spesielt med perisinusoidal Ito-celler er praktisk talt ikke studert.

FORSKNINGSMETODIKK

Hvite hannrotter som veier 200 g intraperitonealt i 1 ml steril saltvannsløsning introdusert sterkt renset lyofilisert LPS E. coli stamme 0111 i doser på 0,5,2,5, 10, 25 og 50 mg/kg. Ved perioder på 0,5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 timer og 1 uke ble indre organer fjernet under anestesi og plassert i bufret 10 % formalin. Materialet ble helt i parafinblokker. Seksjoner 5 µm tykke ble farget immunhistokjemiskstreptavidin-biotin anti-desmin antistoff metode, α - glatt- muskelaktin (A-GMA) og kjernefysisk antigen godt prolifererende celler ( PCNA, " Dako"). Desmin ble brukt som markør perisinusoidalIto-celler, A-GMA - as ve markør myofibroblaster, PCNA - prolifererende celler. For å oppdage endotoksin i leverceller, renset anti-Re-glykolipidantistoffer (Institutet for generell og klinisk patologi KDO, Moskva).

FORSKNINGSRESULTATER

Ved en dose på 25 mg/kg og høyere ble det observert fatalt sjokk 6 timer etter LPS-administrasjon. Akutt eksponering for LPS på levervev forårsaket aktivering av Ito-celler, som ble manifestert ved en økning i antallet. Antall desmin positiv cellene økte fra 6 timer etter LPS-injeksjon og nådde et maksimum ma etter 48–72 timer (fig. 1, a, b).

Ris. 1. Utsnitt av takets lever ugler, behandlet LSAB -meg- verdifulleantistoffer mot des min(et band α - glatt cervical actin (c), x400 (EN, b), x200 (tommer).

a - før administrering av endotoksinpå, singel desminpositivIto-celler i periportalsonen; b- 72 timeretter administrering av endotoksin på: mange desminpositiv Ito celler; V- 120 timer etter administrering av en dotoxin: α - glatt muskel aktivt aktin er kun tilstedetil glatte muskelceller kah fartøyer.

I 1 ukenummer desmin positiv cellene redusert, menvar høyere enn kontrollindikatorene. På I dette tilfellet observerte vi ikke utseendet i noe tilfelle A-GMA-positiv celler i sinus gi leveren. Internt positiv kontroll når farget med antistoffer mot A-GMA tjent til å identifisere glatte muskelceller i blodetvenekar i portalkanalene som inneholder A-GMA (fig. 1, V). Derfor, til tross for økningen i antall Ito-celler, en engangs eksponering for LPS fører ikke til transformasjon ( transdifferensiering) dem til myofibroblaster.

Ris. 2. Leverseksjonerrotter behandlet LSAB -merkede antistoffer mot PCNA. a - før innføringen av en dotoxin: singelprolifererende gener patocytter, x200; b - 72 timer etter endotoksinadministrasjon: tallrike prolifererende hepatocytter, x400.

Økning i mengde desmin positiv celler begynte innenfor portalsonen. Fra 6 timer til 24 timer etter LPS-administrasjon perisinusoidal celler ble funnet bare rundt portalkanalene, dvs. i 1. sone av ACI noosa. Ved 48-72 timer, da valmue ble observertmaksimal mengde desmin positiv lim nåværende, de dukket også opp i andre områder av acinus; likevel var de fleste av Ito-cellene fortsatt lokalisert periportalt.

Kanskje dette skyldes det faktum at periportallokaliserte CC-er er de første som fanger endotoksin som kommer fra tarmen gjennom portvenen eller fra den systemiske sirkulasjonen. Ak aktiverte CC-er produserer et bredt spekter cytokiner, som antas å utløse aktivering av Ito-celler og transdifferensiering dem til myofibroblaster. Dette er åpenbart grunnen til at Ito-celler lokalisert i nærheten av aktiverte levermakrofager (i 1. sone av acinus) er de første som reagerer på frigjøring av cytokiner. Vi observerte dem imidlertid ikke i vår studie. transdifferensiering V myofibroblaster, og dette antyder at cytokiner utskilt av CC og hepatocytter kan tjene som en faktor som støtter prosessen som allerede har begynt transdifferensiering, men de er sannsynligvis ikke i stand til å utløse det med en enkelt eksponering av leveren for LPS.

En økning i den proliferative aktiviteten til celler ble også observert hovedsakelig i 1. sone av acinus. Dette betyr sannsynligvis at alle (eller nesten alle) prosesser siktet ut O- og parakrin regulering av intercellulære interaksjoner skjer i de periportale sonene. En økning i antall prolifererende celler ble observert fra 24 timer etter LPS-administrasjon; antall positive celler økte opp til 72 timer (maksimal proliferativ aktivitet, fig. 2, a, b). Både hepatocytter og sinusoide celler prolifererte. Imidlertid flekker på PCNA gir ikke evnen til å identifisere typen spredning drøvtyggende sinusoide celler. I følge litteraturen fører virkningen av endotoksin til økt avhengig av mengden CC. De tror det handler om kommer både fra spredning av levermakrofager og fra migrasjon av monocytter fra andre organer. Cytokiner frigjort av CK kan øke proliferasjonskapasiteten til Ito-celler. Derfor er det logisk å anta at prolifererende celler er representert perisinusoidal Ito celler. Økningen i antallet som vi registrerte er tilsynelatende nødvendig for å øke syntesen av vekstfaktorer og gjenopprette den intercellulære matrisen under skadeforhold. Dette kan være et av leddene i leverens kompenserende-restorative reaksjoner, siden Ito-celler er hovedkilden til komponenter i den intercellulære matrisen, stamcellefaktoren og hepatocyttvekstfaktoren, som er involvert i reparasjon og differensiering. dannelse av leverepitelceller. Fraværende vie transformasjon av Ito-celler til myofibroblaster indikerer at en episode med endotoksin-aggression ikke er nok for utvikling av leverfibrose.

Dermed de akutte effektene av endotok syna forårsaker en økning i antallet desmin positiv Ito-celler, som er et indirekte tegn på leverskade. Mengde perisinusoidal cellene øker, tilsynelatende som et resultat av deres spredning. En enkelt episode med endotoksin-aggression forårsaker revers min aktivering perisinusoidal Ito celler og fører ikke til dem transdifferensiering inn i myofibroblaster. I denne forbindelse kan det antas at i mekanismene for aktivering og transdifferensiering Ito-celler involverer ikke bare endotoksin og cytokiner, men også noen andre faktorer for intercellulære interaksjoner.

LITTERATUR

1. Mayansky D.N., Wisse E., Decker K. // Nye grenser hepatologi. Novosibirsk, 1992.

2. Salakhov I.M., Ipatov A.I., Konev Yu.V., Yakovlev M.Yu. // Vi vil gjøre fremskritt, biol. 1998. T. 118, Utgave. 1. s. 33-49.

3. Yakovlev M.Yu. // Kazan . m enheter Blad 1988. nr. 5. S. 353-358.

4. Freudenberg N., Piotraschke J., Galanos C. et al. // Virchows Arch. [B]. 1992. Vol. 61.P. 343-349.

5. Gressner EN. M. // Hepatogastronterologi. 1996. Vol. 43. S. 92-103.

6. Schmidt C, Bladt F., Goedecke S. et al. // Natur. 1995. Vol. 373, N 6516. P. 699-702.

7. Wisse E., Braet F., Luo D. et al. // Toxicol. Pathol. 1996. Vol. 24, N 1. S. 100-111.

Nøkkelord

LEVER / STELLATCELLER ITO/ MORFOLOGI / KARAKTERISTIKK / VITAMIN A / FIBROS / LEVER / HEPATISKE STELLATCELLER / MORFOLOGI / KARAKTERISTIKK / VITAMIN A / FIBROS

merknad vitenskapelig artikkel om grunnleggende medisin, forfatter av det vitenskapelige arbeidet - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

Introduksjon. Rollen til Ito stellate celler (ISC) har blitt identifisert som en av de ledende i utviklingen av fibrose i leveren, men intravital visualisering av ISC-strukturen brukes minimalt i klinisk praksis. Formålet med arbeidet: å presentere de strukturelle og funksjonelle egenskapene til PCI basert på resultatene av cytologisk identifikasjon av intravitale leverbiopsier. Materialer og metoder. Klassiske metoder for lys- og elektronmikroskopi av biopsiprøver og originale teknikker ved bruk av ultratynne snitt, fiksering og farging ble brukt. Resultater. Fotoillustrasjoner av lys- og elektronmikroskopi av leverbiopsier fra pasienter med kronisk hepatitt C viser de strukturelle egenskapene til HSC-er på forskjellige stadier (hvile, aktivering) og i prosessen med transformasjon til myofibroblaster. Konklusjoner. Anvendelse av originale metoder for klinisk morfologisk identifikasjon og vurdering funksjonell tilstand ZCI vil forbedre kvaliteten på diagnose og prognose for leverfibrose.

relaterte temaer vitenskapelige arbeider om grunnleggende medisin, forfatter av det vitenskapelige arbeidet - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

Klinisk levercytologi: Kupffer-celler
2017 / Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Prokopchik N.I.
Overvåking av de morfologiske effektene av autologe mesenkymale stamceller transplantert inn i leveren ved viral cirrhose (klinisk observasjon)
2018 / Aukashnk S.P., Alenikova O.V., Tsyrkunov V.M., Isaykina Ya.I., Kravchuk R.I.
Klinisk morfologi av leveren: nekrose
2017 / Tsyrkunov V.M., Prokopchik N.I., Andreev V.P., Kravchuk R.I.
Polymorfisme av leverstjerneceller og deres rolle i fibrogenese
2008 / Aidagulova S.V., Kapustina V.I.
Struktur av leversinusformede celler hos pasienter med HIV/hepatitt C-virus samtidig infeksjon
2013 / Matievskaya N.V., Tsyrkunov V.M., Kravchuk R.I., Andreev V.P.
Mesenkymale stamceller som en lovende metode for behandling av leverfibrose/cirrhose
2013 / Lukashik S. P., Aleynikova O. V., Tsyrkunov V. M., Isaykina Ya. I., Romanova O. N., Shimansky A. T., Kravchuk R. I.
Isolering og dyrking av rottelevermyofibroblaster ved eksplantasjonsmetode
2012 / Miyanovic O., Shafigullina A.K., Rizvanov A.A., Kiyasov A.P.
Patomorfologiske aspekter ved dannelsen av leverfibrose under HCV-infeksjon og andre leverlesjoner: moderne konsepter
2009 / Lukashik S.P., Tsirkunov V.M.
Analyse av rottemyofibroblaster hentet fra strukturene til portalkanalene i leveren ved bruk av eksplantasjonsmetoden
2013 / Miyanovic O., Katina M. N., Rizvanov A. A., Kiyasov A. P.
Transplanterte leverstjerneceller deltar i organregenerering etter delvis hepatektomi uten risiko for å utvikle leverfibrose
2012 / Shafigullina A.K., Gumerova A.A., Trondin A.A., Titova M.A., Gazizov I.M., Burganova G.R., Kaligin M.S., Andreeva D.I., Rizvanov A. A., Mukhamedov A. R., Kiyasov A.

Introduksjon. Rollen til Ito-stellatceller (Hepatic Stellate Cells, HSC) har blitt identifisert som en av de ledende i utviklingen av leverfibrose, men bruken av intravital visualisering av HSC-strukturer i klinisk praksis er minimal. Målet med arbeidet er å presentere de strukturelle og funksjonelle egenskapene til HSC basert på funnene av cytologisk identifikasjon av intravitale leverbiopsiprøver. Materialer og metoder. Klassiske metoder for lys- og elektronmikroskopi av biopsiprøver innenfor den opprinnelige teknikken med bruk av ultratynne snitt, fiksering og farging ble brukt. Resultater. De strukturelle egenskapene til HSC av leverbiopsiprøver fra pasienter med kronisk hepatitt C er presentert på fotoillustrasjoner av lys- og elektronmikroskopi. HSC er avbildet på forskjellige stadier (hvile, aktivering) og under prosessen med transformasjon til myofibroblaster. Konklusjoner. Bruken av originale metoder for klinisk og morfologisk identifikasjon og evaluering av funksjonsstatusen til HSC gjør det mulig å forbedre kvaliteten på diagnose og prognose for leverfibrose.

Tekst av vitenskapelig arbeid om emnet "Klinisk levercytologi: Ito stellate celler"

UDC 616.36-076.5

KLINISK CYTOLOGI AV LEVER: ITO STELLATCELLER

Tsyrkunov V. M. ( [e-postbeskyttet]), Andreev V. P. ( [e-postbeskyttet]), Kravchuk R. I. ( [e-postbeskyttet]), Kondratovich I. A. ( [e-postbeskyttet]) EE "Grodno State Medical University", Grodno, Hviterussland

Formålet med arbeidet: å presentere de strukturelle og funksjonelle egenskapene til PCI basert på resultatene av cytologisk identifikasjon av intravitale leverbiopsier.

Materialer og metoder. Klassiske metoder for lys- og elektronmikroskopi av biopsiprøver og originale teknikker ved bruk av ultratynne snitt, fiksering og farging ble brukt.

Resultater. Fotoillustrasjoner av lys- og elektronmikroskopi av leverbiopsier fra pasienter med kronisk hepatitt C viser de strukturelle egenskapene til PCI-er på forskjellige stadier (hvile, aktivering) og i prosessen med transformasjon til myofibroblaster.

Konklusjoner. Bruk av originale metoder for klinisk morfologisk identifikasjon og vurdering av leverens funksjonstilstand vil forbedre kvaliteten på diagnose og prognose for leverfibrose.

Stikkord: lever, Ito-stjerneceller, morfologi, egenskaper, vitamin A, fibrose.

Introduksjon

Et ugunstig utfall av de fleste kroniske diffuse leverlesjoner av forskjellige etiologier, inkludert kronisk hepatitt C (CHC), er leverfibrose, i utviklingen av hvilke hoveddeltakerne er aktiverte fibroblaster, hvor hovedkilden er aktiverte Ito stellate celler (Ito stellate) celler).

Hepatisk Stellatcelle, HSC, Cell of Ito, Ito-celle. ZCI-er ble først beskrevet i 1876 av K. Kupffer og kalte ham stjerneceller ("Stemzellen"). T. Ito, etter å ha oppdaget fettdråper i dem, betegnet dem først fettabsorberende ("shibo-sesshusaibo"), og deretter, etter å ha fastslått at fett ble produsert av cellene selv fra glykogen, fettlagrende celler ("shibo- chozosaibo"). I 1971 beviste K. Wake identiteten til Kupfffer-stjerneceller og Ito-fettlagrende celler og at disse cellene "lagrer" vitamin A.

Omtrent 80 % av vitamin A i kroppen akkumuleres i leveren, og opptil 80 % av alle leverretinoider avsettes i fettdråper i leveren. Retinolestere i sammensetningen av chylomikroner går inn i hepatocytter, hvor de omdannes til retinol, og danner et kompleks av vitamin A med retinolbindende protein (RBP), som skilles ut i det perisinusoidale rommet, hvorfra det avsettes av cellene.

Den nære forbindelsen mellom PCI og leverfibrose etablert av K. Popper demonstrerte deres ikke statiske, men dynamiske funksjon - evnen til å delta direkte i remodelleringen av den intralobulære perihepatocellulære matrisen.

Hovedmetoden for morfologisk undersøkelse av leveren, utført for å vurdere endringer i intravitale biopsier, er lysmikroskopi, som i klinisk praksis gjør det mulig å bestemme leverens aktivitet.

brenning og kroniskhetsstadiet. Ulempen med metoden er dens lave oppløsning, som ikke tillater en å evaluere de strukturelle egenskapene til celler, intracellulære organeller, inneslutninger og funksjonelle egenskaper. Intravital elektronmikroskopisk undersøkelse av ultrastrukturelle endringer i leveren gjør det mulig å supplere lysmikroskopidata og øke deres diagnostiske verdi.

I denne forbindelse er identifisering av lever-HCIer, studiet av deres fenotype i prosessen med transdifferensiering, og bestemmelsen av intensiteten av deres spredning det viktigste bidraget til å forutsi utfallene av leversykdommer, så vel som til patomorfologien og patofysiologi av fibrogenese.

Målet er å presentere de strukturelle og funksjonelle egenskapene til PCI basert på resultatene av cytologisk identifikasjon av intravitale leverbiopsier.

Materialer og metoder

En intravital leverbiopsi ble tatt av aspirasjonsbiopsi lever hos pasienter med CHC (HCV RNA+), som det ble innhentet skriftlig informert samtykke fra.

For lysmikroskopi av halvtynne seksjoner ble leverbiopsiprøver av pasienter som målte 0,5^2 mm fiksert ved hjelp av en dobbel fikseringsmetode: først, ved bruk av Sato Taizan-metoden, ble vevsprøver i tillegg fiksert i 1 time i 1 % osmiumfiksativ forberedt med 0,1 M fosfat Sorensen-buffer, pH 7,4. For bedre å identifisere intracellulære strukturer og interstitielle stoffer på halvtynne snitt ble kaliumdikromat (K2Cr2O7) eller kromsyreanhydridkrystaller (1 mg/ml) tilsatt 1 % osmiumtetroksid. Etter dehydrering av prøver i en serie alkoholløsningerøkende konsentrasjon og aceton ble de plassert i en prepolymerisert blanding av butylmetakrylat og styren og polymerisert ved 55°C. Halvtynne seksjoner (1 µm tykke) ble sekvensielt farget

asurblå II-grunnleggende fuchsin. Mikrofotografier ble tatt med et digitalt videokamera (Leica FC 320, Tyskland).

Elektronmikroskopisk undersøkelse ble utført i leverbiopsiprøver som målte 0,5x1,0 mm, fiksert med en 1 % løsning av osmiumtetroksid i 0,1 M Milloniga-buffer, pH 7,4, ved +40C i 2 timer. Etter dehydrering i stigende alkoholer og aceton, ble prøvene innebygd i Araldite. Halvtynne seksjoner (400 nm) ble fremstilt fra de resulterende blokkene ved å bruke en Leica EM VC7 ultramikrotom (Tyskland) og farget med metylenblått. Preparatene ble undersøkt under et lysmikroskop og et lignende område ble valgt for videre studier av ultrastrukturelle endringer. Ultratynne seksjoner (35 nm) ble motfarget med 2 % uranylacetat i 50 % metanol og blycitrat ifølge E.S. Reynolds. Elektronmikroskopiske preparater ble studert i et JEM-1011 elektronmikroskop (JEOL, Japan) ved forstørrelser på 10 000-60 000 og en akselererende spenning på 80 kW. For å få bilder ble et kompleks bestående av et Olympus MegaViewIII digitalkamera (Tyskland) og iTEM bildebehandlingsprogramvare (Olympus, Tyskland) brukt.

Resultater og diskusjon

PCI er lokalisert i perisinusoidal space (Disse) i lommer mellom hepatocytter og endotelceller, har lange skudd, penetrerer dypt mellom hepatocytter. De fleste publikasjoner viet denne populasjonen av CCIer gir sin skjematiske representasjon, som bare lar en indikere den "territoriale" tilknytningen til CCIer i leveren og i forhold til de omkringliggende "naboene" (Figur 1).

PCI-er har nær kontakt med endotelceller gjennom komponenter i den ufullstendige basalmembranen og interstitielle kollagenfibre. Nerveender penetrerer mellom PCI og parenkymceller, og det er grunnen til at rommet til Disse er definert som rommet mellom platene til parenkymceller og

kompleks av HCI og endotelceller.

Det antas at PCI-er stammer fra dårlig differensierte mesenkymale celler i den tverrgående skilleveggen i den utviklende leveren. Eksperimentet viste at hematopoietiske stamceller deltar i dannelsen av HCI og at denne prosessen ikke er forårsaket av cellefusjon.

Sinusoidale celler (SC), først og fremst HSC, spiller en ledende rolle i alle typer leverregenerering. Fibroserende leverregenerering oppstår som et resultat av hemming av stamfunksjonene til lever- og benmargsstamceller. I den menneskelige leveren utgjør HSC-er 5-15 %, og er en av 4 typer SC-er som er av mesenkymal opprinnelse: Kupffer-celler, endotelceller, Pd-celler. SC-poolen inneholder også 20-25% leukocytter.

Cytoplasmaet til HCI inneholder fettinneslutninger med retinol, triglyserider, fosfolipider, kolesterol, frie fettsyrer, α-aktin og desmin. Gullkloridfarging brukes for å visualisere PCI. Eksperimentet fastslo at en markør for differensiering av HCI fra andre myofibroblaster er deres uttrykk for Reelin-proteinet.

HSC-er eksisterer i en stille ("inaktiv HSC"), forbigående og langsiktig aktivert tilstand, som hver er preget av genuttrykk og fenotype (α-MA, ICAM-1, kjemokiner og cytokiner).

I en inaktiv tilstand har HCI-er en rund, litt forlenget eller uregelmessig form, en stor kjerne og et tydelig visuelt trekk - lipidinneslutninger (dråper) som inneholder retinol (figur 2).

Antallet lipiddråper i den inaktive HCI når 30 eller mer; de er tett i størrelse, ved siden av hverandre, presser inn i kjernen og skyver den til periferien (Figur 2). Små inneslutninger kan være plassert mellom store dråper. Fargen på dråpene avhenger av fikseringsmidlet og fargen på materialet. I det ene tilfellet er de lyse (Figur 2a), i det andre er de mørkegrønne (Figur 2b).

Figur 1. - Skjema for plassering av PCI (stellatecell, perisinusoidal lipocyte) i det perisinusoidale rommet til Disse (space of Disse), Internett-ressurs

Figur 2. - ZKI i inaktiv tilstand

a - rundformet HCI med et høyt innhold av lipiddråper med lys farge (hvite piler), hepatocytter (Hz) med ødelagt cytoplasma (svart pil); b - HCI med mørkfargede lipiddråper, i nær kontakt med makrofagen (Mph); a-b - halvtynne seksjoner. Fargen på asurblå II er grunnleggende magenta. Mikrofotografier. Økt 1000; c - ZCI med en overflod av lipiddråper (mer enn 30), med en uregelmessig form (størrelse 6000); d-ultrastrukturelle komponenter av ICI: l-lipiddråper, mitokondrier (oransje piler), GRES (grønne piler), Golgi-kompleks (rød pil), uv. 15 000; v-d - elektrondiffraksjonsmønstre

Med elektronmikroskopi dannes en mer osmiofil marginal kant mot bakgrunnen av et lett lipidsubstrat (Figur 5a). I de fleste "hvilende" HCI-er, sammen med store lipidinneslutninger, er det en merkbart liten mengde cytoplasmatisk matrise, fattig på mitokondrier (Mx) og granulært endoplasmatisk retikulum (GRE). I dette tilfellet er avdelingene til et moderat utviklet Golgi-kompleks godt synlige i form av en stabel med 3-4 flate sisterner med litt utvidede ender (Figur 2d).

På visse forhold aktiverende HSC-er får en blandet eller overgangsfenotype, som kombinerer de morfologiske egenskapene til både lipidholdige og fibroblastlignende celler (figur 3).

Overgangsfenotypen til PCI har også sine egne morfologiske egenskaper. Cellen får en langstrakt form, antall lipidinneslutninger avtar, og antall invaginasjoner av nukleolemmaet avtar. Volumet av cytoplasmaet øker, og inneholder mange sisterner av GES med bundne ribosomer og frie ribosomer, Mx. Hyperplasi av komponentene i det lamellære Golgi-komplekset, representert av flere stabler av 3-8 flate sisterner, er observert; antallet lysosomer som er involvert i nedbrytningen øker.

Figur 3. - ZKI-er i en overgangstilstand

a - ZKI (hvite piler). Halvtynn skive. Fargen på asurblå II er grunnleggende magenta. Mikrofotografering. Økt 1000; b - ZCI av en langstrakt form og med et lite antall lipiddråper; uv. 8000; c - ZCI i kontakt med Kupffer-celler (KC) og lymfocytt (Lc), uv. 6 000. (Hz - hepatocytt, l - lipiddråper, E - erytrocytt); d - mitokondrier (oransje piler), GRES (grønne piler), Golgi-celle (rød pil), lysosomer (blå piler), nivå 20 000; b, c, d - elektrondiffraksjonsmønstre

sjon av lipiddråper (figur 3d). Hyperplasi av komponentene i GRES og Golgi-komplekset er assosiert med evnen til fibroblaster til å syntetisere kollagenmolekyler, samt å modellere dem gjennom post-translasjonell hydroksylering og glykosylering i det endoplasmatiske retikulumet og elementer i Golgi-komplekset.

I en uskadet lever dekker PCI, som er i en rolig tilstand, den sinusformede kapillæren med sine prosesser. Prosessene til PCI er delt inn i 2 typer: perisinusoidal (subendotelial) og interhepatocellulær (figur 4).

De første forlater cellekroppen og strekker seg langs overflaten av den sinusformede kapillæren, og dekker den med tynne fingerlignende grener. De er dekket med korte villi og har karakteristiske lange mikro-utkastninger som strekker seg enda lenger langs overflaten av endotelrøret til kapillæren. Interhepatocellulære projeksjoner, etter å ha overvunnet platen med hepatocytter og nådd den tilstøtende sinusoiden, er delt inn i flere perisinusoidale projeksjoner. Dermed dekker ZKI i gjennomsnitt mer enn to tilstøtende sinusoider.

Med leverskade oppstår aktivering av PCI og prosessen med fibrogenese, der 3 faser skilles. De er betegnet initiering, forlengelse og oppløsning (oppløsning av fibrøst vev). Denne prosessen med transformasjon av "hvilende" HSC-er til fibroserende myofibroblaster initieres av cytokiner (^-1,^-6,

Figur 4. - Perisinusoidale (subendoteliale) og interhepatocellulære prosesser (utvekster) av PCI

a - prosessen med PCI (gule piler) som kommer ut av cellekroppen, uv. 30 000; b - forlengelse av ZCI, plassert langs overflaten av den sinusformede kapillæren, som inneholder en lipiddråpe, uv. 30 000; c - subendotel lokaliserte prosesser av PCI. Endotelcelleprosesser (rosa piler); d - interhepatocellulær prosess av PCI; område med ødeleggelse av membranene til HCI og hepatocytt (svarte piler), uv. 10 000. Elektrondiffraksjonsmønstre

TOT-a), underoksiderte metabolske produkter, reaktive oksygenarter, nitrogenoksid, endotelin, blodplateaktiverende faktor (PDGF), plasminogenaktivator, transformerende vekstfaktor (TGF-1), acetaldehyd og mange andre. Direkte aktivatorer er hepatocytter i en tilstand av oksidativt stress, Kupffer-celler, endoteliocytter, leukocytter, blodplater som produserer cytokiner (parakrine signaler) og PCI i seg selv (autokrin stimulering). Aktivering er ledsaget av uttrykk (inkludering i arbeid) av nye gener, syntese av cytokiner og proteiner i den ekstracellulære matrisen (type I, III, U kollagener).

På dette stadiet kan prosessen med aktivering av PCI fullføres ved å stimulere dannelsen av antiinflammatoriske cytokiner i PCI, og hemme produksjonen av TOT-a av makrofager i skadesonen. Som et resultat reduseres antallet HCIer kraftig, de gjennomgår apoptose og fibroseprosesser i leveren utvikles ikke.

I den andre fasen (forlenget), med forlenget konstant parakrin og autokrin eksponering for aktiverende stimuli, "opprettholdes" den aktiverte fenotypen i PCI, karakterisert ved transformasjonen av PCI til kontraktile myofibroblastlignende celler som utfører syntesen av ekstracellulære fibrillært kollagen.

Den aktiverte fenotypen er preget av proliferasjon, kjemotaksi, kontraktilitet, tap av retinoidlagre og dannelse av myofibroblastlignende celler. Aktiverte HSC-er viser også økt overflod av nye gener som a-SMA, ICAM-1, kjemokiner og cytokiner. Celleaktivering indikerer begynnelsen av de tidlige stadiene av fibrogenese og går foran økt produksjon av ECM-proteiner. Dannet fibrøst vev gjennomgår remodellering på grunn av matrisenedbrytning ved hjelp av matrisemetalloproteinaser (MMP). I sin tur reguleres matrisenedbrytning av vevsinhibitorer av matrisemetaloproteinaser (TIMPs). MMP-er og TIMP-er er medlemmer av den sinkavhengige enzymfamilien. MMPs syntetiseres i HCI i form av inaktive proenzymer, som aktiveres ved spaltning av propeptidet, men hemmes ved interaksjon med endogene TIMPs - TIMPs-1 og TIMPs-2. HCI-er produserer 4 typer MMP-er av membrantype, som aktiveres av IL-1β. Blant MMPs er MMPs-9, en nøytral matrisemetalloproteinase som har aktivitet mot kollagen type 4, som er en del av basalmembranen, så vel som mot delvis denaturert kollagen type 1 og 5, spesielt viktig.

Økningen i PCI-populasjonen i ulike typer leverskader bedømmes av aktiviteten til et betydelig antall mitogene faktorer, relaterte tyrosinkinasereseptorer og andre identifiserte mitogener som forårsaker den mest uttalte spredningen av PCI: endotelin-1, trombin, FGF - fibroblastvekstfaktor, PDGF - endotelial vekstfaktor blodkar, IGF - insulinlignende vekstfaktor. Akkumuleringen av HCI i områder med leverskade skjer ikke bare på grunn av spredningen av disse cellene, men også på grunn av deres rettet migrasjon inn i disse områdene gjennom kjemotaksi, med deltakelse av kjemoattraktanter som PDGF og leukocytt kjemoattraktant-MCP (monocytt kjemotaktisk protein). -1).

I aktiverte HSC-er reduseres antall lipiddråper til 1-3 med deres plassering i motsatte poler av cellen (Figur 5).

Aktiverte HSC-er får en langstrakt form, betydelige områder av cytoplasmaet er okkupert av Golgi-komplekset, og ganske mange GRES-sisterner (en indikator på proteinsyntese for eksport) avsløres. Antall andre organeller reduseres: få frie ribosomer og polysomer, enkeltmitokondrier og uregelmessige lysosomer er funnet (Figur 6).

I 2007 ble HSC først kalt leverstamceller, siden de uttrykker en av markørene for hematopoietiske mesenkymale stamceller - CD133.

Figur 5. - ZKI i aktivert tilstand

a, b - HCI (blå piler) med enkelt lipid-inneslutninger lokalisert ved motsatte poler av kjernen. Det perisinusoidale bindevevet (i fig. 6a) og det intercellulære matriselaget rundt hepatocytten (i fig. 6b) er farget rødt. Cytotoksiske lymfocytter (lilla piler). Endotelcelle (hvit pil). Nærkontakt mellom en plasmacelle (rød pil) og en hepatocytt. Halvtynne seksjoner. Fargen på asurblå II er grunnleggende magenta. Mikrofotografier. Økt 1000; c, d - ultrastrukturelle komponenter av HCI: mitokondrier (oransje piler), Golgi-kompleks (rød pil), sisterne på dens mer osmiofile cis-side som vender mot de utvidede elementene i det granulære endoplasmatiske retikulum (grønne piler), lysosom (blå pil) (hhv. størrelsesorden 10 000 og 20 000); c, d - elektrondiffraksjonsmønstre

Myofibroblaster, som er fraværende i den normale leveren, har tre potensielle kilder: for det første, under intrauterin utvikling av leveren, i portalkanalene, omgir myofibroblaster karene og gallegangene under deres modning, og etter full utvikling av leveren, forsvinner de. og erstattes i portalkanalene av portalfibroblaster; for det andre, når leveren er skadet, dannes de på grunn av portale mesenkymale celler og hvilende HCI, sjeldnere på grunn av overgangsepitel-mesenkymale celler. De er preget av tilstedeværelsen av CD45-, CD34-, Desmin+, glialfibrillær-assosiert protein (GFAP)+ og Thy-1+.

Nyere studier har vist at hepatocytter, kolangiocytter og endotelceller kan bli myofibroblaster gjennom epitelial eller endotelial til mesenkymal overgang (EMT). Disse cellene inkluderer markører som CD45-, albumin+ (dvs. hepatocytter), CD45-, CK19+ (dvs. kolangiocytter) eller Tie-2+ (endotelceller).

Figur 6. - Høy fibrotisk aktivitet av HCI

a, b - myofibroblast (MFB), cellen inneholder en stor kjerne, elementer av GRES (røde piler), mange frie ribosomer, polymorfe vesikler og granuler, enkelt mitokondrier og et lyst visualiseringstegn - en bunt av aktinfilamenter i cytoplasmaet (gule piler); tok bort 12 000 og 40 000; c, d, e, f - høy fibrotisk aktivitet av HCI mens retinoidholdige lipiddråper er bevart i cytoplasmaet. Tallrike bunter av kollagenfibriller (hvite piler), beholder (a) og mister (d, e, f) spesifikke tverrstriper; tok bort 25 000, 15 000, 8 000, 15 000. Elektrondiffraksjonsmønstre

I tillegg kan benmargsceller, bestående av fibrocytter og sirkulerende mesenkymale celler, transformeres til myofibroblaster. Dette er CD45+-celler (fibrocytter), CD45+/- (sirkulerende mesenkymale celler), kollagen type 1+, CD11d+ og MHC klasse 11+ (Figur 7).

Litterære data bekrefter ikke bare den nære sammenhengen mellom spredningen av ovale celler og spredningen av sinusformede celler, men også data om mulig differensiering av HCI til hepatisk epitel, som ble kalt mesenchymal-epitelial transformasjon av perisinusoidale celler.

I en tilstand av fibrogen aktivering er myofibroblastlignende PCIer, sammen med en reduksjon i antall og påfølgende forsvinning av lipiddråper, preget av fokal spredning (Figur 8), immunhistokjemisk ekspresjon av fibroblastlignende markører, inkludert glattmuskulatur α-aktin , og dannelsen av pericellulære kollagenfibriller i disse områdene.

Under utviklingsfasen av fibrose blir økende hypoksi i levervevet en faktor for ytterligere overekspresjon av pro-inflammatoriske adhesjonsmolekyler i stamceller - 1CAM-1, 1CAM-2, VEGF, proinflammatorisk

Interaksjon av hepatiske ductale stamceller med levermyofibroblaster

Myofibroblast-lignende HSC-er i en tilstand av fibrogen aktivering.

Figur 7. - Deltakere i myofibroblastisk aktivering av PCI

lytiske kjemoattraktanter - M-CSF, MCP-1 (monocytt kjemotaktisk protein-1) og SGS (cytokin-mediert nøytrofil kjemoattraktant) og andre som stimulerer dannelsen av pro-inflammatoriske cytokiner (TGF-b, PDGF, FGF, PAF, SCF, ET-1) og forsterke prosessene for fibrogenese i leveren, og skape forhold for selvopprettholdende induksjon av kontinuerlig aktivering av PCI og fibrogenese-prosesser.

På mikroskopiske preparater viser perikapillær fibrose seg i form av intens rødfarging av det perisinusoidale bindevevet og det intercellulære matriselaget rundt hepatocytter (ofte døende). På elektronmikroskopiske preparater visualiseres fibrotiske endringer enten i form av dannede store bunter av kollagenfibriller som har beholdt tverrstriper, eller i form av massive

avleiringer i Disse-rommet av fibrøs masse, som er hovne kollagenfibre som har mistet sine periodiske striper (Figur 9).

I følge moderne konsepter er fibrose en dynamisk prosess som kan utvikle seg og gå tilbake (Figur 10).

Nylig har flere spesifikke markører for PCI blitt foreslått: vitamin A (VA) blomstrer til lipiddråper, GFAP, p75 NGF-reseptor og synaptophysin. Det forskes på deltakelsen av lever-HCI i spredning og differensiering av leverstamceller.

Vi studerte innholdet av retinolbindende protein (RSB-4), som danner et kompleks med VA, hvis konsentrasjon i blodplasmaet normalt korrelerer med kroppens tilførsel av VA, hvorav 80 % finnes i PCI.

Det er etablert et forhold mellom innholdet

Figur 8. - Fokal spredning av PCI i en tilstand av fibrogen aktivering

a - hyperplasi av PCI (hvite piler) i lumen av de utvidede sinusoidene; b - spredning av transdifferensiert HSC (hvite piler), endotelcelle (rosa pil). Halvtynne seksjoner. Fargen på asurblå II er grunnleggende magenta. Mikrofotografier. Økt 1000

Figur 9. - Sluttstadium av myofibroblastisk aktivering av PCI

a, b - perisinusoidal fibrose (hvite piler). Peri-sinusformet bindevev og det intercellulære matriselaget rundt hepatocytter (b) er farget med basisk fuksinrødt. HCI-er aktivert og transformert til fibroblaster (blå piler). Hz i fig. a - hepatocytt med ødelagt cytoplasma. Halvtynne seksjoner. Fargen på asurblå II er grunnleggende magenta. Mikrofotografier. Økt 1000; c, d - perisinusoidal og perihepatocellulær fibrose i leverlobuen, økt elektrontetthet av kollagenfibriller; kondensering av mitokondriematrisen i hepatocytten (oransje pil). UV, henholdsvis 8 000 og 15 000. Elektrondiffraksjonsmønstre

Tabell 1. - Indikatorer for RSB-4-innhold hos pasienter med levercirrhose (LC) og kronisk hepatitt (CH) av ulike etiologier, ng/ml (M±t)

Gruppe n M±m р

Levercirrhose 17 23,6±2,29<0,05

CG, AST normal 16 36,9±2,05* >0,05

CG, AST >2 normer 13 33,0±3,04* >0,05

CG, ALT normal 13 37,5±3,02* >0,05

CG, ALT >2 normer 21 35,9±2,25* >0,05

Kontroll 15 31,2±2,82

Merk: p - signifikante forskjeller med kontroll (s<0,05); * - достоверные различия между ЦП и ХГ (р<0,05)

En falsk lobule omgitt av en fibrøs septum. Masseau-farging - sirkel av falsk lobule. Maling etter Nu.Uv.x50 Masson. UV.x200

Figur 10. - Dynamikk av hendelser i den falske lobulen til en pasient med viral cirrhose 6 måneder etter transplantasjon av autologe mesenkymale stamceller i leveren

Vi spiser RSB-4 og 4. stadium av fibrose (cirrhose), i motsetning til kronisk hepatitt, der en slik avhengighet ikke ble observert, uavhengig av biokjemiske markører for inflammatorisk aktivitet i leveren.

Dette faktum må tas i betraktning når man rettferdiggjør erstatningsterapi for å eliminere VA-mangel i kroppen, som kan skyldes utarming av potensialet til PCI forårsaket av progresjon av fibrose i leveren.

1. Den maksimale effektiviteten av å vurdere den strukturelle og funksjonelle tilstanden til PCI sikres ved en morfologisk studie av en intravital biopsi med samtidig bruk av et sett med cellulære visualiseringsteknikker (lys, elektronmikroskopi av ultratynne seksjoner og originale metoder for fiksering og farging).

2. Resultatene av en morfologisk studie av PCI gjør det mulig å forbedre kvaliteten på intravital diagnose av fibrose, overvåke den og forutsi utfallene av kroniske diffuse leverlesjoner på et høyere moderne nivå.

3. Resultatene av morfologiske konklusjoner vil tillate klinikeren å i tillegg inkludere i formuleringen av den endelige diagnosen oppdaterte data om stadium av kronisitet (stabilisering, progresjon eller oppløsning av fibrose) under behandlingen.

Litteratur

1. Ivashkin, V. T. Kliniske symptomer på pre-fibrotiske forandringer: transkripsjon av en forelesning på den all-russiske internettkongressen for internmedisinske spesialister / V. T. Ivashkin, A. O. Bueverov // INTERNIST: National Internet Society of Internal Medicine Specialists. - 2013. - Tilgangsmodus: http://internist. ru/publications/detail/6569/. - Tilgangsdato: 21.11.2016.

2. Kiyasov, A.P. Ovale celler - antatte leverstamceller eller hepatoblaster? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Celletransplantasjon og vevsteknikk. - 2006. - T. 2, nr. 4. - S. 55-58.

1. Ivashkin, V. T. Klinicheskaya simptomatika dofibroticheskih izmenenij: stenogramma lekcii Vserossijskogo Internet-Kongressa specialistov for vnutrennim boleznyam / V. T. Ivashkin, A. O. Bueverov // INTERNIST: National "noe chestvo nniamsh.0 specialist" - Rezhim dostupa: http: //internist.ru/publications/detail/6569/ - Datatilgang: 21.11.2016.

2. Kiyasov, A. P. Oval "nye kletki - predpolagaemye stvolovye kletki lever eller hepatoblasty? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Kletochnaya transplantologiya i tkanevaya inzheneriya. -. 2006, -. 2006 -. - 58.

3. Om rollen til sinusformede leverceller og benmargsceller i å sikre den regenerative strategien for sunn og skadet lever / A. V. Lundup [et al.] // Bulletin of Transplantology and Artificial Organs. -2010. - T. XII, nr. 1. - S. 78-85.

4. Serov, V.V. Morfologiske kriterier for vurdering av etiologi, aktivitetsgrad og stadium av prosessen ved viral kronisk hepatitt B og C/V.V. Serov, L.O. Severgina // Archives of Pathology. - 1996. - Nr. 4. - S. 61-64.

5. Strukturelle og funksjonelle egenskaper av leverstjerneceller i dynamikken til fibrose / O. A. Postnikova [et al.] // Fundamental Research. - 2011. - Nr. 10.

6. Ultrastrukturell og immunhistokjemisk studie av leverstellatceller i dynamikken til fibrose og levercirrhose av infeksiøs viral opprinnelse / G. I. Nepomnyashchikh [et al.] // Bulletin of eksperimentell biologi og medisin. - 2006. - T. 142, nr. 12. - S. 681-686.

7. Shcheglev, A. I. Strukturelle og metabolske egenskaper ved sinusformede leverceller / A. I. Shcheglev, O. D. Mishnev // Fremskritt innen moderne biologi. - 1991. - T. 3, nr. 1. - S. 73-82.

10. Effekter av kostholdsretinoid og triglyserider på lipidsammensetningen av stellatceller fra rottelever og lipiddråper fra stellatceller / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - Vol. 29. - R. 1523-1534.

13. Friedman, S. Hepatisk fibrose 2006: Rapport fra den tredje AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - Vol. 45(1). - R. 242-249.

18. Iredale, J. P. Hepatisk Stellate Cell Behavior Under Resolution of leverskade / J. P. Iredale // Semin. Live Dis. -2001. - Vol. 21(3). - R. 427-436.

19. Kobold, D. Uttrykk av reelin i hepatiske stellatceller og under reparasjon av levervev: en ny markør for differensiering av HSC fra andre levermyofibroblaster / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - Vol. 36(5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Humane levermyofibroblaster under utvikling og sykdommer med fokus på portal (myo)

3. O roli sinusoidal "nyh kletok pecheni i kletok kostnogo mozga v obespechenii regeneratornoj strategii zdorovoj i povrezhdennoj pecheni / A. V. Lyundup // Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov. - 2010. - T. HII, S 78.-5, No. .

4. Serov, V. V. Morfologicheskie kriterii ocenki ehtiologii, stepeni aktivnosti i stadii processa pri virusnyh hronicheskih gepatitah V i S / V. V. Serov, L. O. Severgina // Arhiv patologii.

1996. - nr. 4. - S. 61-64.

5. Strukturno-funkcional "naya harakteristika zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza / O. A. Postnikova // Fundamental"nye issledovaniya. - 2011. - Nr. 10. - S. 359-362.

6. Ul "trastrukturnoe i immunogistohimicheskoe issledovanie zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza i cirroza lever infekcionno-virusnogo geneza / G. I. Nepomnyashchih // Byulleten" ehksperimental "noj -biologii i.0y.2 -biologii, i.0y.2 -biologii, i.06. 681-686.

7. SHCHeglev, A. I. Strukturno-metabolicheskaya harakteristika sinusoidal "nyh kletok pecheni / A. I. SHCHeglev, O. D. Mishnev // Uspekhi sovremennoj biologii. - 1991. - T. 3, nr. 1. - S. 73-82.

8. CD34 hepatiske stellatceller er stamceller / C. Kordes // Biochem., Biophys. Res. Felles. - 2007. -Vol. 352(2). - S. 410-417.

9. Nedbrytning av matriseproteiner i leverfibrose / M. J. Arthur // Pathol. Res. Prak. - 1994. - Vol. 190 (9-10).

11. Fosterlever består av celler i epitel-til-mesenkymal overgang / J. Chagraoni // Blod. - 2003. - Vol. 101. - S. 2973-2982.

12. Fiksering, dehydrering og innstøping av biologiske prøver / A. M. Glauert // Practical Methods in Electron Microscopy. - New York: Am. Elsevier, 1975. - Vol. 3, del 1.

13. Friedman, S. Hepatisk fibrose 2006: Rapport fra den tredje AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - Vol. 45(1). - R. 242-249.

14. Gaga, M. D. Humane og rathepatiske stellatceller produserer stamcellefaktor: en mulig mekanisme for mastcellerekruttering ved leverfibrose / M. D. Gaga // J. Hepatol. - 1999. - Vol. 30, nr. 5. - S. 850-858.

15. Glauert, A. M. Araldite som innleiringsmedium for elektronmikroskopi / A. M. Glauert, R. H. Glauert // J. Biophys. Biochem. Cytol. - 1958. - Vol. 4. - S. 409-414.

16. Hepatiske stellatceller og portalfibroblaster er de viktigste cellulære kildene til kollagener og lysyloksidaser i normal lever og tidlig etter skade / M. Perepelyuk // Am. J. Physiol. Mage-tarm. Lever Physiol. - 2013. - Vol. 304(6). - P. 605614.

17. Hepatitt C-viruskjerne og ikke-strukturelle proteiner induserer fibrogene effekter i hepatiske stellatceller / R. Bataller // Gastroenterology. - 2004. - Vol. 126, iss. 2. - S. 529-540.

18. Iredale, J. P. Hepatisk Stellate Cell Behavior Under Resolution of leverskade / J. P. Iredale // Semin. Live Dis. -2001. - Vol. 21(3). - R. 427-436.

20. Lepreux, S. Humane levermyofibroblaster under utvikling og sykdommer med fokus på portal (myo) fibroblaster / S. Lepreux, A. Desmouliére

fibroblaster / S. Lepreux, A. Desmouliere // Foran. Physiol. - 2015. - Tilgangsmåte: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Dato for tilgang: 31.10.2016.

22. Mesenkymale benmargsavledede stamceller hos pasienter med HCV-relatert levercirrhosis / S. Lukashyk // J. Clin. Overs. Hepatol. - 2014. - Vol. 2, iss. 4. - S. 217-221.

23. Millonig, G. A. Fordeler med en fosfatbuffer for osmiumtetroksidløsninger i fiksering / G. A. Millonig // J. Appl. Fysikk. - 1961. - Vol. 32. - S. 1637-1643.

Vol. 158. - S. 1313-1323.

Vol. 24. - S. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis von Vitamin Aimanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - Vol. 14. - S. 1213-1217.

30. Nylig utvikling innen myofibroblastbiologi: paradigmer for remodellering av bindevev / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180. - S. 1340-1355.

35. Septum transversum-avledet mesothelium gir opphav til hepatiske stellatceller og perivaskulære mesenkymale celler i utvikling av muselever / K. Asahina // Hepatologi. -2011. - Vol. 53. - S. 983-995.

Vol. 50. - S. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatisk angiogenese og sinusoidal remodellering ved kronisk leversykdom: nye mål for behandling av portal hypertensjon? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - Vol. 53. - S. 976-980.

39. Wake, K. Hepatiske stjerneceller: Tredimensjonal struktur, lokalisering, heterogenitet og utvikling / K.

//Front. Physiol. - 2015. - Tilgangsmåte: http://dx.doi. org/10.3389/fphys.2015.00173. - Dato for tilgang: 31.10.2016.

21. Ligander av peroksisomproliferator-aktivert reseptor gamma-modul-ulatprofibrogene og proinflammatoriske virkninger i hepatiske stellatceller / F. Marra // Gastroenterology. -2000. - Vol. 119. - S. 466-478.

22. Mesenkymale benmargsavledede stamceller hos pasienter med HCV-relatert levercirrhosis / S. Lukashyk // J. Clin. Overs. Hepatol. - 2014. - Vol. 2, iss. 4. - R. 217-221.

23. Millonig, G. A. Fordeler med en fosfatbuffer for osmiumtetroksidløsninger i fiksering / G. A. Millonig // J. Appl. Rhysikk. - 1961. - Vol. 32. - S. 1637-1643.

24. Opprinnelse og strukturell utvikling av de tidlig prolifererende ovale cellene i rotteleveren / S. Paku // Am. J. Hepatol. - 2001.

Vol. 158. - S. 1313-1323.

25. Opprinnelse til myofibroblaster i leverfibrose / D. A. Brenner // Fibrogenesis Tissue Repair. - 2012. - Vol. 5, tillegg. 1. - S. 17.

26. Opprinnelse og funksjoner til levermyofibroblaster / S. Lemoinne // Biochim. Biofys. Acta. - 2013. - Vol. 1832 (7). - S. 948-954.

27. Pinzani, M. PDGF og signaltransduksjon i hepatiske stellatceller / M. Pinzani // Front. Biosci. - 2002. - Vol. 7. - P. 1720-1726.

28. Popper, H. Fordeling av vitamin A i vev som avslørt ved fluorescensmikroskopi / H. Popper // Physiol. Rev. - 1944.

Vol. 24. - R. 205-224.

30. Nylig utvikling innen myofibroblastbiologi: paradigmer for remodellering av bindevev / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Vol. 180. - R. 1340-1355.

31. Reynolds, E. S. Bruken av blycitrat ved høy pH som en elektronopak farge i elektronmikroskopi / E. S. Reynolds // J. Cell. Biol. - 1963. - Vol. 17. - S. 208-212.

32. Safadi, R. Immunstimulering av hepatisk fibrogenese av CD8-celler og attenuering av transgene interleukin-10 fra hepatocytter / R. Safadi // Gastroenterology. - 2004. - Vol. 127(3). - S. 870-882.

33. Sato, T. En elektronmikroskopisk studie av prøvefiksert i lengre perioder i fosfatbufret formalin / T. Sato, I. Takagi // J. Electron Microsc. - 1982. - Vol. 31, nr. 4. - S. 423-428.

34. Senoo, H. Vitamin A-lagringsceller (stellatceller) / H. Senoo, N. Kojima, M. Sato // Vitam. Horm. - 2007. - Vol. 75.

36. Stanciu, A. Nye data om ITO-celler / A. Stanciu, C. Cotutiu, C. Amalinei // Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iasi. -2002. - Vol. 107, nr. 2. - S. 235-239.

37. Suematsu, M. Professor Toshio Ito: en klarsynt i pericytebiologi / M. Suematsu, S. Aiso // Keio J. Med. - 2000.

Vol. 50. - R. 66-71.

39. Wake, K. Hepatiske stjerneceller: Tredimensjonal struktur, lokalisering, heterogenitet og utvikling / K. Wake // Proc. Jpn. Acad. Ser. B. Phys. Biol. Sci. - 2006. - Vol.

Våkne // Proc. Jpn. Acad. Ser. B. Phys. Biol. Sci. - 2006. - Vol. 82(4). - S. 155-164.

82(4). - S. 155-164.

40. Wake, K. In Cells of the Hepatic Sinusoid / K. Wake, H. Senoo // Kupffer Cell Foundation (Rijswijk, Nederland). - 1986. - Vol. 1. - S. 215-220.

41. Watson, M. L. Farging av vevssnitt for elektronmikroskopi med tungmetaller / M. L. Watson // J. Biophys. Biochem. Cyt. - 1958. - Vol. 4. - S. 475-478.

KLINISK CYTOLOGI AV LEVEREN: ITO-STELLATCELLER (HEPATISKE STELLATCELLER)

Tsyrkunov V. M., Andreev V. P., Kravchuk R. I., Kandratovich I. A. Educational Establishment "Grodno State Medical University", Grodno, Hviterussland

Målet med arbeidet er å presentere de strukturelle og funksjonelle egenskapene til HSC basert på funnene av cytologisk identifikasjon av intravitale leverbiopsiprøver.

Materialer og metoder. Klassiske metoder for lys- og elektronmikroskopi av biopsiprøver innenfor den opprinnelige teknikken med bruk av ultratynne snitt, fiksering og farging ble brukt.

Resultater. De strukturelle egenskapene til HSC av leverbiopsiprøver fra pasienter med kronisk hepatitt C er presentert på fotoillustrasjoner av lys- og elektronmikroskopi. HSC er avbildet på forskjellige stadier (hvile, aktivering) og under prosessen med transformasjon til myofibroblaster.

Konklusjoner. Bruken av originale metoder for klinisk og morfologisk identifikasjon og evaluering av funksjonsstatusen til HSC gjør det mulig å forbedre kvaliteten på diagnose og prognose for leverfibrose.