Lehetnek-e a perisinusoid sejtek regionális máj őssejtek? A máj itosejtek őssejtekre gyakorolt ​​hatásának vizsgálata Csillagsejtek

Gének és sejtek: V. kötet, 1. szám, 2010, 33-40.

Szerzői

Gumerova A.A., Kiyasov A.P.

A regeneratív medicina az egyik leggyorsabban fejlődő és legígéretesebb orvostudományi terület, amely a sérült szerv helyreállításának alapvetően új megközelítésén alapul az őssejtek (progenitor) regenerációjának serkentésével és/vagy felhasználásával. Ennek a megközelítésnek a gyakorlatba ültetéséhez tudnia kell, mik az őssejtek, és különösen a regionális őssejtek, mi a fenotípusuk és a hatásuk. Számos szövet és szerv esetében, például az epidermisz és a vázizom esetében, már azonosították az őssejteket, és leírták azok réseit. A máj azonban, egy olyan szerv, amelynek regenerációs képességei ősidők óta ismertek, még nem fedte fel fő titkát - az őssejt rejtélyét. Ebben az áttekintésben saját és publikált adataink alapján azt a hipotézist tárgyaljuk, amely szerint a perisinusoidális csillagsejtek a máj őssejt szerepét képviselhetik.

A perisinusoid májsejtek (Ito-sejtek, csillagsejtek, lipociták, zsírtároló sejtek, A-vitamin-tároló sejtek) a májsejtek egyik legtitokzatosabb típusa. E sejtek tanulmányozásának története több mint 130 éves, és még mindig sokkal több kérdés merül fel fenotípusukkal és funkcióikkal kapcsolatban, mint ahány válasz. A sejteket 1876-ban Kupffer írta le, ő nevezte el csillagsejteknek, és makrofágoknak nevezte. Később a Kupffer nevet a máj valódi ülő makrofágjaira adták.

Általánosan elfogadott, hogy az Ito sejtek a Disse térben helyezkednek el, közvetlen érintkezésben a májsejtekkel, felhalmozzák az A-vitamint és képesek az intercelluláris anyag makromolekuláit termelni, valamint kontraktilis aktivitással szabályozzák a véráramlást a szinuszos kapillárisokban, például a pericitákban. Az állatokban az Ito-sejtek azonosításának aranystandardja a citoszkeleton köztes filamentumainak izomszövetre jellemző fehérjéjének, a dezminnek a kimutatása. Ezen sejtek más meglehetősen gyakori markerei a neuronális differenciálódás markerei - a glia fibrilláris savfehérje (GFAP) és a nesztin.

Sok éven át az Ito-sejteket csak a májfibrózis és cirrhosis kialakulásában való részvételük szempontjából vették figyelembe. Ez annak a ténynek köszönhető, hogy amikor a máj károsodik, ezek a sejtek mindig aktiválódnak, ami a dezmin expressziójának fokozódásában, proliferációjában és sejtekké való transzdifferenciálódásában áll, mint például a miofibroblasztok (miofibroblasztszerű sejttranszformáció), amelyek -simaizom aktint expresszálnak. (-SMA) és jelentős mennyiségű intercelluláris anyag szintetizálása, különösen az I. típusú kollagén. Sok kutató szerint az ilyen aktivált Ito-sejtek aktivitása vezet a májfibrózis és cirrhosis kialakulásához.

Másrészt fokozatosan gyűlnek a tények, amelyek lehetővé teszik, hogy az Ito-sejteket teljesen váratlan helyzetekből tekintsük, nevezetesen, mint a mikrokörnyezet legfontosabb összetevőit a hepatociták, cholangiocyták és vérsejtek fejlődésében a hematopoiesis májstádiumában, és ezen túlmenően, mint lehetséges ős (progenitor) májsejtek. Jelen áttekintés célja ezen sejtek természetére és funkcionális jelentőségére vonatkozó jelenlegi adatok és nézetek elemzése, valamint a máj őssejt (progenitor) sejtpopulációhoz való esetleges tartozásának felmérése.

Az Ito sejtek az általuk termelt extracelluláris mátrix makromolekulák és annak átalakulása, valamint a növekedési faktorok termelődése miatt fontos résztvevői a májregeneráció során a parenchyma helyreállításának. Az első kételyek a jól bevált elmélet érvényességét illetően, amely kizárólag az Ito-sejteket tekinti a májfibrózis fő okozóinak, akkor jelentek meg, amikor kiderült, hogy ezek a sejtek jelentős számú morfogén citokint termelnek. Közülük jelentős csoportot alkotnak a citokinek, amelyek potenciális mitogének a hepatociták számára.

Ebben a csoportban a legfontosabb a hepatocita növekedési faktor - hepatocita mitogén, amely szükséges a proliferációhoz, a túléléshez és a sejtmozgáshoz (szórási faktorként is ismert. Ennek a növekedési faktornak és (vagy) C-met receptorának a hibája egerekben máj hypoplasiához és parenchymájának pusztulásához vezet a hepatoblaszt proliferáció elnyomása, fokozott apoptózis és elégtelen sejtadhézió következtében.

A hepatocita növekedési faktoron kívül az Ito sejtek őssejt faktort termelnek. Ezt a részleges hepatektómia és a 2-acetaminofluorén expozíció utáni májregeneráció modelljében mutatták ki. Azt is megállapították, hogy az Ito sejtek transzformáló növekedési faktort - és epidermális növekedési faktort - választanak ki, amelyek fontos szerepet játszanak mind a hepatociták proliferációjában a regeneráció során, mind maguk az Ito-sejtek mitózisában. A májsejtek szaporodását az Ito-sejtek által expresszált mezenchimális morfogén fehérje, epimorfin is kiváltja, amely részleges hepatektómia után jelenik meg bennük, valamint a pleiotropin.

A hepatociták és az Ito sejtek közötti kölcsönhatás parakrin mechanizmusain túl ezeknek a sejteknek a hepatocitákkal való közvetlen intercelluláris érintkezése is szerepet játszik. Az Ito sejtek és az epiteliális progenitor sejtek közötti intercelluláris kontaktusok fontosságát in vitro mutatták be, amikor a vegyes tenyészetben való tenyésztés hatékonyabbnak bizonyult az utóbbiak albumintermelő hepatocitákká történő differenciálódásában, mint a membránnal elválasztott sejtek tenyésztése, amikor csak cserélni tudtak. oldható tényezők kulturális környezeten keresztül. Az egerek magzati májából 13,5 napos korban izoláltuk. terhességi, Thy-1 + / С049 fenotípusú mesenchymalis sejtek ± / vimentin + / dezmin + / --GMA + közvetlen intercelluláris kontaktusok létrehozása után stimulálták a primitív máj endodermális sejtek populációjának differenciálódását - hepatocitákká (glikogén tartalmú) m-RNS tirozin-aminotranszferázt és triptofoszfátot expresszáló -név). A Thy-1 + / desmin + mesenchymalis sejtek populációja nem expresszálta a hepatociták, az endotélium és a Kupffer sejtek markereit, és nagy valószínűséggel Ito sejtek képviselték. A dezmin-pozitív Ito-sejtek nagy sűrűségét és elhelyezkedésüket a differenciálódó hepatocitákkal in vivo észlelték patkány és humán prenatális májban. Mindezek a tények tehát arra engednek következtetni, hogy ez a sejttípus a mikrokörnyezet legfontosabb összetevője, amely szükséges a hepatociták normális fejlődéséhez az ontogenezisben és a reparatív regeneráció folyamatában történő helyreállításához.

Az elmúlt években olyan adatok gyűjtöttek, amelyek arra utalnak, hogy az Ito-sejtek jelentős hatással vannak a vérképző őssejtek differenciálódására. Így az Ito sejtek eritropoetint és neurotropint termelnek, amelyek nemcsak a máj epiteliális sejtek, hanem a vérképző őssejtek differenciálódását is befolyásolják. A magzati vérképzés patkányokon és embereken végzett vizsgálata kimutatta, hogy ezek a sejtek alkotják a májban a vérképző szigetek mikrokörnyezetét. Az Ito-sejtek vaszkuláris sejtadhéziós molekulát-1-et (VCAM-1) expresszálnak, amely kulcsmolekula a hematopoietikus progenitorok csontvelői stromasejtekhez való tapadásának fenntartásához. Ezen túlmenően stromális 1-es faktort is expresszálnak (Stromális eredetű 1-es faktor, SDF-1-) - potenciális kemoattraktáns a vérképző őssejtek számára, stimulálva azok migrációját a vérképzés helyére egy specifikus cisztein-X receptorral való kölcsönhatás révén. - Cisztein receptor 4 (CXR4), valamint a homeobox fehérje Hlx, olyan defektus esetén, amelyben mind a máj fejlődése, mind a máj vérképzése károsodott. Valószínűleg a VCAM-1 és az SDF-1 a expressziója az Ito magzati sejtjein az, amely a hematopoietikus progenitor sejteket vonzza a magzati májhoz további differenciálódás céljából. Az Ito-sejtek által felhalmozott retinoidok szintén fontos morfogenetikai faktorok a hematopoietikus sejtek és a hámsejtek számára. Meg kell említeni az Ito-sejtek mezenchimális őssejtekre gyakorolt ​​hatását. A patkánymájból izolált és teljesen aktivált Ito sejtek 2 hét elteltével modulálják a csontvelő mezenchimális őssejtjeinek (multipotens mezenchimális stromasejtek) olyan sejtekké történő differenciálódását, mint a hepatociták (akkumulálják a glikogént és expresszálják a tetázt és a foszfoenolpiruvát-karboxikinázt). közös termesztés.

A felhalmozott tudományos tények tehát arra engednek következtetni, hogy az Ito-sejtek a máj fejlődéséhez és regenerációjához szükséges egyik legfontosabb sejttípus. Ezek a sejtek teremtik meg a mikrokörnyezetet mind a magzati máj hematopoiesiséhez, mind a hepatociták differenciálódásához a prenatális fejlődés során, valamint a hám- és mesenchymalis progenitor sejtek májsejtekké történő differenciálódásához in vitro. Jelenleg ezek az adatok nem kétségesek, és minden májkutató elismeri őket. Mi szolgált akkor kiindulópontul a cikk címében felvetett hipotézis kialakulásához?

Megjelenését mindenekelőtt az segítette elő, hogy a májban olyan sejteket azonosítottak, amelyek egyszerre expresszálják a hepatocyták epiteliális markereit és az Ito sejtek mezenchimális markereit. Az első munka ezen a területen az emlősök májának prenatális hiszto- és organogenezisének vizsgálata volt. A fejlődési folyamat az a kulcsesemény, amelynek vizsgálata lehetővé teszi, hogy természetes körülmények között, meghatározott markerek segítségével nyomon kövessük egy szerv különböző sejttípusai definitív fenotípusának elsődleges kialakulásának dinamikáját. Jelenleg az ilyen markerek választéka meglehetősen széles. A kérdéskör vizsgálatával foglalkozó munkákban a mesenchymális és hámsejtek, a máj egyedi sejtpopulációi, az őssejtek (beleértve a vérképzőszervek) különböző markereit is felhasználták.

Az elvégzett vizsgálatok során azt találták, hogy a patkánymagzatok dezmin-pozitív Ito-sejtjei 14-15 napig átmenetiek. A terhesség a hepatoblasztokra jellemző epiteliális markereket, például a 8-as és 18-as citokeratinokat expresszálja. Másrészt a hepatoblasztok a fejlődés egyidejűleg expresszálják az Ito desmin sejtmarkert. Ez tette lehetővé annak feltételezését, hogy a méhen belüli fejlődés során olyan átmeneti fenotípusú sejtek léteznek a májban, amelyek mesenchymális és epiteliális markereket egyaránt expresszálnak, és ezért megvizsgáljuk Ito-sejtek és hepatociták kifejlődésének lehetőségét egyből. forrásból és (vagy) ezeket a sejteket egy és ugyanazon sejttípusnak tekinteni a fejlődés különböző szakaszaiban. Az emberi embrionális máj anyagán végzett hisztogenezis vizsgálatára vonatkozó további vizsgálatok azt mutatták, hogy a 4-8. Az emberi máj méhen belüli fejlődésében az Ito-sejtek a 18-as és a 19-es citokeratint expresszálták, amit kettős immunhisztokémiai festés igazolt, és a hepatoblasztokban gyenge pozitív festődést figyeltek meg a dezminre.

Egy 2000-ben publikált munkában azonban a szerzőknek nem sikerült felfedniük a dezmin expresszióját az egérmagzatok májában lévő hepatoblasztokban, illetve az E-cadherin és a citokeratinok expresszióját az Ito sejtekben. A szerzők csak az esetek kis hányadában értek el pozitív festődést a citokeratinokra Ito sejtekben, amit az elsődleges antitestek nem specifikus keresztreaktivitásával hoztak összefüggésbe. Ezen antitestek megválasztása némi megdöbbenést okoz – a munka során csirke dezmin és szarvasmarha citokeratin 8 és 18 elleni antitesteket használtak.

A dezmin és a citokeratinek mellett az Ito-sejtek és az egerek és patkányok magzati hepatoblasztjainak közös markere egy másik mezenchimális marker - a VCAM-1 vaszkuláris sejtadhéziós molekula. A VCAM-1 egy egyedülálló felszíni marker, amely megkülönbözteti az Ito sejteket a myofibroblasztoktól a felnőtt patkánymájban, és számos más mesenchymális eredetű májsejtben is jelen van, mint például az endotheliocytákban vagy a miogén sejtekben.

Egy másik bizonyíték a vizsgált hipotézis mellett a felnőtt patkányok májából izolált Ito-sejtek mezenchimális-epiteliális transzdifferenciálódásának (konverziójának) lehetősége. Megjegyzendő, hogy a szakirodalom elsősorban epiteliális-mezenchimális, nem pedig mesenchymalis-epiteliális transzdifferenciálódásról beszél, bár mindkét irány lehetséges, és az "epiteliális-mezenchimális transzdifferenciáció" kifejezést gyakran használják a transzdifferenciálódás megjelölésére bármelyik irányba. Felnőtt patkányok májából szén-tetraklorid (CTC) expozíció után izolált Ito-sejtekben az mRNS és a megfelelő fehérjék expressziós profiljának elemzése után a szerzők mezenchimális és epiteliális markereket is találtak bennük. A mezenchimális markerek közül a nesztint, a --GMA-t, a mátrix metalloproteináz-2-t (Matrix Metalloproteinase-2, MMP-2), az epiteliális markerek közül pedig az ovális sejtekre jellemző izompiruvát-kinázt (MPK), a citokeratin 19, a. -FP, E-cadherin, valamint a Hepatocyte nukleáris faktor 4- (HNF-4-) transzkripciós faktor, amely specifikus azokra a sejtekre, amelyek hepatocitákká válnak. Azt is megállapították, hogy a humán epiteliális máj progenitor sejtek primer tenyészetében az Ito nestin sejtek mRNS markerei expresszálódnak, a GFAP - epithelialis progenitorok pedig együtt expresszálnak epiteliális és mezenchimális markereket. A mezenchimális-epiteliális transzdifferenciálódás lehetőségét megerősíti az Integrin-linked kinase (ILK), az ilyen transzdifferenciálódáshoz szükséges enzim megjelenése az Ito sejtekben.

In vitro kísérleteink során mesenchymális-epiteliális transzdifferenciációt is feltártunk, ahol eredeti megközelítést alkalmaztunk a patkánymájból izolált tiszta Ito-sejtek populációjának tenyésztésére, amíg egy sűrű, egyrétegű sejt nem keletkezik. Ezt követően a sejtek abbahagyták a dezmin és más mezenchimális markerek expresszióját, megszerezték a hámsejtek morfológiáját, és elkezdték kifejezni a hepatocitákra jellemző markereket, különösen a 8-as és 18-as citokeratinokat. Hasonló eredményeket kaptunk patkány embrionális máj organotípusos tenyésztése során.

Az elmúlt év során két olyan cikk jelent meg, amelyekben az Ito-sejteket az ovális sejtek altípusának, illetve származékainak tekintik. Az ovális sejtek kis ovális sejtek keskeny citoplazmaperemekkel, amelyek a májban jelennek meg a toxikus májkárosodás egyes modelljeinél, és jelenleg biopotens progenitor sejteknek tekintik, amelyek képesek hepatocitákká és kolangiocitákká is differenciálódni. Abból kiindulva, hogy az izolált Ito-sejtek által expresszált gének egybeesnek az ovális sejtek által expresszált génekkel, és az Ito-sejtek tenyésztésének bizonyos körülményei között hepatociták és epeúti sejtek jelennek meg, a szerzők tesztelték azt a hipotézist, amely szerint Ito. A sejtek olyan ovális sejtek, amelyek képesek hepatocitákat generálni a sérült máj regenerálására. A transzgenikus GFAP-Cre/GFP (zöld fluoreszcens fehérje) egereket metionin-kolinhiányos/etioninban dúsított étrenddel etettük, hogy aktiváljuk az Ito-sejteket és az ovális sejteket. Ito nyugalmi sejtjei GFAP+ fenotípusúak voltak. Az Ito sejtek károsodással vagy tenyésztéssel történő aktiválása után a GFAP expressziója csökkent bennük, és elkezdtek ovális és mesenchymális sejtek markereit kifejezni. Az ovális sejtek eltűntek, amikor megjelentek a GFP + hepatociták, elkezdték expresszálni az albumint, és végül a máj parenchyma nagy területeit helyettesítették. A kapott adatok alapján a szerzők azt sugallták, hogy az Ito-sejtek az ovális sejtek egy altípusa, amelyek a "mezenchimális" fázison keresztül hepatocitákká differenciálódnak.

Az ovális sejtaktiváció ugyanazon modelljén végzett kísérletekben, amikor az utóbbiakat patkánymájból izolálták, azt találták, hogy az ovális sejtek in vitro nem csak a hagyományos 0V-6, BD-1 / BD-2 és M2PK markereiket és markereiket fejezik ki. az extracelluláris mátrix fái, beleértve a kollagéneket, a mátrix metalloproteinázokat és a metalloproteinázok szöveti inhibitorait - az Ito-sejtek markereit. A TGF-pl sejtekkel való érintkezést követően a növekedés és a morfológiai változások elnyomása mellett ezen gének, valamint a dezmin és GFAP gének expressziójának fokozódása, az epiteliális-mezenchimális Csiga transzkripciós faktor expressziójának megjelenése. transzdifferenciálódást és az E-cadherin expressziójának megszűnését figyelték meg, ami az ovális sejtek Ito sejtekké történő "fordított" transzdifferenciálódásának lehetőségét jelzi.

Mivel az ovális sejteket hagyományosan a hepatociták és a kolangiociták bipotens prekurzorainak tekintik, kísérletek történtek az intrahepatikus epeutak hámsejtjei és az Ito-sejtek közötti átmeneti formák létezésének lehetőségének megállapítására. Így kimutatták, hogy normál és sérült májban a kis ductus típusú struktúrák pozitívan festődtek az Ito sejtmarkerre - GMA-ra, azonban a cikkben bemutatott fényképeken, amelyek az immunfluoreszcens festés eredményeit tükrözik, megállapítható, hogy ezek - GMA + csatorna szerkezetek - epevezetékek vagy erek - nem lehetségesek. Azonban más eredményeket is publikáltak, amelyek az Ito sejtmarkerek kolangiocitákban való expresszióját jelzik. L. Yang már említett munkájában az Ito sejtmarker GFAP expresszióját mutatták be az epevezeték sejtek által. A citoszkeleton intermedier filamentum fehérje cinemin, amely a normál májban Ito-sejtekben és vaszkuláris sejtekben van jelen, megjelenik a duktuláris reakció kialakulásában részt vevő ductus sejtekben; cholangi-ocarcinoma sejtekben is kifejeződött. Így, ha sok különböző bizonyíték létezik az Ito-sejtek és a hepatociták kölcsönös transzdifferenciálódásának lehetőségére vonatkozóan, akkor a kolangiociták esetében az ilyen megfigyelések még mindig ritkák és nem mindig egyértelműek.

Összegezve elmondható, hogy a mesenchymalis és epitheliális markerek expressziós mintázatai mind a máj hiszto- és organogenezise során, mind különböző kísérleti körülmények között mind in vivo, mind in vitro egyaránt jelzik a mesenchymalis-epiteliális és az epiteliális-mezenchimális minimális átmenetek lehetőségét. Az Ito sejtek / ovális sejtek / hepatociták között, és ezért lehetővé teszik, hogy az Ito sejteket a hepatocita fejlődés egyik forrásaként tekintsük. Ezek a tények kétségtelenül elválaszthatatlan kapcsolatot jeleznek ezen sejttípusok között, és az Ito-sejtek jelentős fenotípusos plaszticitását is jelzik. Ezen sejtek fenomenális plaszticitását számos idegi fehérje expressziója is bizonyítja, mint például a már említett GFAP, nesztin, neurotrofinok és receptoraik, neuronális sejtadhéziós molekula (N-CAM), szinaptofizin, idegnövekedési faktor (Neural). növekedési faktor, NGF), egy agyi eredetű neurotróf faktor (BDNF), amely alapján számos szerző tárgyalja az Ito-sejtek idegi gerincből történő kifejlődésének lehetőségét. Az elmúlt évtizedben azonban egy másik változat is felkeltette a kutatók nagy figyelmét - nevezetesen a hepatociták és Ito-sejtek hematopoetikus és mezenchimális őssejtekből történő kifejlődésének lehetősége.

Az első mű, amelyben egy ilyen lehetőség bebizonyosodott, a V.E. Petersen és munkatársai, akik kimutatták, hogy a hepatociták képesek fejlődni vérképző őssejtből. Ezt a tényt ezt követően más tudósok munkái is többször megerősítették, és egy kicsit később megmutatták a hepatocitákká történő differenciálódás lehetőségét a mezenchimális őssejtek esetében. Hogy ez hogyan történik – a donorsejtek és a recipiens májsejtjei fúziója, vagy azok transzdifferenciálódása révén – még mindig nem világos. Ugyanakkor azt is megállapítottuk, hogy az emberi köldökzsinórvér vérképző őssejtjei részleges hepatektómián átesett patkányok lépébe ültetve kolonizálódnak a májban, és képesek májsejtekké és szinuszos májsejtekké differenciálódni, amint azt a emberi sejtmarkerek ezekben a sejttípusokban. Emellett először mutattuk ki, hogy a köldökzsinórvérsejtek előzetes genetikai módosítása nem befolyásolja jelentősen azok eloszlását és a transzplantáció utáni differenciálódás lehetőségét a recipiens májában. Ami a hepatociták kialakulásának valószínűségét hematopoietikus őssejtekből illeti a prenatális hisztogenezis során, bár ez a lehetőség nem zárható ki teljesen, ennek ellenére valószínűtlennek tűnik, mivel ezeknek a sejteknek a morfológiája, lokalizációja és fenotípusa jelentősen eltér a májsejtekétől. Nyilvánvalóan, még ha létezik is ilyen út, nem játszik jelentős szerepet a hám- és szinuszos sejtek képződésében az ontogenezis során. A közelmúltban végzett in vivo és in vitro vizsgálatok eredményei megkérdőjelezik azt a jól megalapozott elméletet, hogy a májsejtek csak az előbél endodermális hámjából fejlődnek ki, amellyel kapcsolatban természetesen felmerült az a feltételezés, hogy a regionális őssejt a máj a mesenchymalis sejtjei között található. Lehetnek ezek a sejtek Ito-sejtek?

Figyelembe véve e sejtek egyedi tulajdonságait, fenomenális plaszticitását és az Ito-sejtektől a hepatocitákig átmeneti fenotípusú sejtek létezését, feltételezzük, hogy ezek a sejtek a fő jelöltek erre a szerepre. További érvek a lehetőség mellett, hogy ezek a sejtek a hepatocitákhoz hasonlóan hematopoietikus őssejtekből is képződhetnek, és ők az egyetlen szinuszos májsejtek, amelyek képesek őssejt (progenitor) markerek expressziójára.

2004-ben kiderült, hogy az Ito-sejtek vérképző őssejtből is fejlődhetnek. GFP egerekből származó csontvelősejtek transzplantációja után a recipiens egerek májában GFP + sejtek jelentek meg, amelyek a GFAP Ito sejtmarkert expresszálták, és ezen sejtek folyamatai behatoltak a hepatociták közé. Ha a recipiens máját CCU károsította, a transzplantált sejtek is expresszáltak - Ito blastszerű sejtjei. Amikor a nem parenchimális sejtek frakcióját izoláltuk a recipiens egerek májából, a lipidcseppeket tartalmazó GFP + sejtek az izolált sejtek 33,4 + 2,3%-át tették ki; dezmint és GFAP-ot expresszáltak, és 7 nap múlva. termesztés

Másrészt a csontvelősejtek átültetése nemcsak Ito-sejtek, hanem az I-es típusú kollagén gén képződését is eredményezi, amely alapján arra a következtetésre jutottak, hogy az ilyen transzplantáció elősegíti a fibrózis kialakulását. Vannak azonban olyan tanulmányok, amelyek kimutatták a májfibrózis csökkenését a transzplantált sejtek rostos septákba való migrációja és e sejtek által termelt mátrix metalloproteináz-9 (Matrix Metalloproteinase-9, MMP-9) következtében, amely az egyik az Ito-sejtek legfontosabb tulajdonságai. Előzetes adataink a myofibroblasztok számának és a fibrózis szintjének csökkenését is mutatták a perifériás vér mononukleáris sejtjeinek egy részének autotranszplantációja után súlyos májfibrózisban szenvedő krónikus hepatitisben szenvedő betegeknél. Emellett a hematopoietikus őssejtek transzplantációja következtében más, extracelluláris mátrixot termelni képes sejttípusok is megjelenhetnek a recipiens májában. Így az epevezeték elkötése által kiváltott májkárosodásban a differenciált, kollagént expresszáló fibrociták transzplantált sejtjei, és csak TGF-pl jelenlétében tenyésztve, differenciált myofibroblasztok, potenciálisan elősegítve a fibrózist. Így a szerzők a csontvelő-sejtek átültetése utáni májfibrózis veszélyét nem az Ito-sejtekkel, hanem „egy egyedülálló fibrocitapopulációval” hozták összefüggésbe. A kapott adatok inkonzisztenciája miatt a vita még egy kérdésről bontakozott ki - a transzplantált vérképző őssejtek differenciálódásának eredményeként megjelent Ito-sejtek hozzájárulnak-e a fibrózis kialakulásához, vagy biztosítják-e a sejtek teljes regenerálódását. májszövet és a fibrózis csökkentése. Az elmúlt években nyilvánvalóvá vált (beleértve a fenti adatokat is), hogy a májban lévő myofibroblasztok eredete eltérő lehet - Ito sejtektől, portális traktusok fibroblasztjaitól, sőt májsejtektől is. Azt is megállapították, hogy a különböző eredetű miofibroblasztok számos tulajdonságban különböznek egymástól. Így az aktivált Ito-sejtek a portális traktusok miofibroblasztjaitól különböznek a vitamintartalomban, a kontraktilis aktivitásban, a citokinekre, különösen a TGF-p-re adott válaszban és a spontán apoptózis képességében. Ezenkívül ezek a sejtpopulációk különböznek, és ha lehetséges, expresszálják a VCAM-1 vaszkuláris sejtadhéziós molekulát, amely jelen van az Ito-sejteken, és hiányzik a myofibroblasztokon. Azt is el kell mondani, hogy az aktivált Ito sejtek az extracelluláris mátrix fehérjék termelése mellett mátrix metalloproteinázokat is termelnek, amelyek tönkreteszik ezt a mátrixot. Így az Ito-sejtek, köztük a vérképző őssejtekből képződött sejtek szerepe a fibrózis kialakulásában korántsem olyan egyértelmű, mint azt korábban gondolták. Nyilvánvalóan nem annyira a fibrózist segítik elő, mint inkább átalakítják az extracelluláris mátrixot a májkárosodás utáni felépülés folyamatában, így biztosítva a kötőszöveti vázat a máj parenchymás sejtek regenerálódásához.

normál és sérült patkánymáj. A patkány Ito sejtek egy másik őssejtek (progenitor) markert - a CD133-at - expresszálják, és demonstrálják a progenitor sejtek tulajdonságait, amelyek a körülményektől függően különbözőképpen képesek differenciálódni - 2) az endothelsejtekké történő differenciálódást elősegítő citokinek hozzáadásakor elágazó tubuláris struktúrákat alkotnak. az endoteliális sejtek markereinek expressziójának indukálásával - endoteliális NO-szintáz és vaszkuláris endoteliális kadherin; 3) olyan citokinek alkalmazásakor, amelyek elősegítik az őssejtek differenciálódását hepatocitákká - hepatocita markereket expresszáló kerek sejtekké - FP és albumin. Ezenkívül a patkány Ito-sejtek 0ct4-et expresszálnak, ami a pluripotens őssejtekre jellemző. Érdekes módon az Ito-sejtpopulációnak csak egy része izolálható mágneses szortírozóval CD133 elleni antitestek felhasználásával, azonban a standard (pronáz / kollagenáz) izolálás után a műanyaghoz kapcsolt összes sejt expresszálta a CD133-at és a 0kt4-et. A progenitor sejtek másik markere, a Bcl-2, a dezmin + sejtek expresszálódnak az emberi máj prenatális fejlődése során.

Így különböző kutatók kimutatták az őssejtek (progenitor) sejtek bizonyos markereinek Ito-sejtek általi expressziójának lehetőségét. Sőt, a közelmúltban megjelent egy cikk, amelyben először terjesztették elő azt a hipotézist, hogy az alapmembránfehérjékből, endothelsejtekből és hepatocitákból kialakított Disse-tér, amelyben az Ito-sejtek találhatók, mikrokörnyezetet alkothat ez utóbbiak számára. , az őssejtek „résének” szerepét tölti be. Ezt bizonyítja számos, az őssejt-résre jellemző, az Ito sejt mikrokörnyezet összetevőiben azonosított sajátosság. Így az őssejt közvetlen közelében elhelyezkedő sejteknek oldható faktorokat kell kifejleszteniük, valamint olyan közvetlen kölcsönhatásokat kell végrehajtaniuk, amelyek az őssejtet differenciálatlan állapotban tartják, és egy, gyakran az alapmembránon elhelyezkedő niche-ben tartják. Valójában a máj szinuszos kapillárisainak endotélsejtjei oldható SDF-1-et szintetizálnak, amely specifikusan kötődik a CXR4 Ito-sejt receptorhoz, és in vitro stimulálja e sejtek migrációját. Ez a kölcsönhatás kulcsszerepet játszik abban, hogy a vérképző őssejtek az ontogenezis során a csontvelőben a végső niche-be vándorolnak, és ott maradnak állandóan, valamint mobilizálódnak a perifériás vérbe. Logikus feltételezés, hogy egy ilyen kölcsönhatás hasonló szerepet játszhat a májban, az Ito sejteket a Disse térben tartva. A májregeneráció korai szakaszában az SDF-1 expresszió fokozása elősegítheti a szervezet őssejtjeinek további részeinek felhalmozódását is. A niche sejtek beidegzésében részt kell venni a szimpatikus idegrendszerben, amely részt vesz a vérképző őssejtek toborzásának szabályozásában. A szimpatikus idegrendszer noradrenerg jelei kritikus szerepet játszanak a GCSF-ben (Granulocyte colony-stimulating factorl-induced mobilization of hematopoietic stem cell from the bone marrow. Az idegvégződések Ito-sejtek közvetlen közelében való elhelyezkedését több tanulmány is megerősítette.) Azt is megállapították, hogy a szimpatikus stimuláció hatására az Ito-sejtek F2a és D prosztaglandinokat választanak ki, amelyek aktiválják a glikogenolízist a közeli parenchymás sejtekben.Ezek a tények arra utalnak, hogy a szimpatikus idegrendszer hatással lehet az Ito-sejt niche-re. Az őssejt másik funkciója A „lassú” sejtciklus és az őssejtek differenciálatlan állapotának fenntartása. Az Ito sejtek differenciálatlan állapotának fenntartását in vitro körülmények között a parenchymalis májsejtek segítik - e két membránnal elválasztott sejtpopuláció tenyésztése során az Ito sejtekben megmarad a CD133 és 0kt4 őssejtmarkerek expressziója, míg a hepatociták hiánya miatt az Ito-sejtek felveszik a myofibroblast fenotípust és elveszítik az őssejt markereket. Így az őssejt markerek expressziója kétségtelenül alvó Ito-sejtek jele. Azt is megállapították, hogy a parenchymás sejtek Ito sejtekre gyakorolt ​​hatása a hepatociták által szintetizált Wnt és Jag1 parakrin faktorok kölcsönhatásán alapulhat a megfelelő receptorokkal (Myc, Notchl) az Ito sejtek felszínén. A Wnt / b-catenin és a Notch jelátviteli útvonalak támogatják az őssejtek önmegújulási képességét lassú szimmetrikus osztódással, későbbi differenciálódás nélkül. A niche másik fontos alkotóeleme az alapmembrán fehérjék, a laminin és a kollagén IV, amelyek támogatják az Ito sejtek nyugalmi állapotát és elnyomják azok differenciálódását. Hasonló a helyzet az izomrostokban és a kanyargós szemiferus tubulusokban, ahol a szatellitsejtek (izom őssejtek) és a differenciálatlan spermatogóniák szorosan érintkeznek az izomrost alapmembránjával, illetve a "spermatogén epitéliummal". Nyilvánvaló, hogy az őssejtek és az extracelluláris mátrix fehérjék kölcsönhatása gátolja végső differenciálódásuk megindulását. A kapott adatok tehát lehetővé teszik, hogy az Ito-sejteket őssejteknek tekintsük, amelyek számára a Disse-tér résként szolgálhat.

Az Ito sejtek őspotenciájára és az ezekből a sejtekből hepatocita képződés lehetőségére vonatkozó adatainkat a májregeneráció in vivo tanulmányozására irányuló kísérletek igazolták, a részleges hepatektómia és az ólom-nitrát által okozott toxikus májkárosodás modelljei segítségével. Hagyományosan úgy gondolják, hogy a májregeneráció ezen modelljeiben a szárrekesz aktiválása nem történik meg, és hiányoznak az ovális sejtek. Megállapítottuk azonban, hogy mindkét esetben nemcsak az Ito-sejtek aktivációja figyelhető meg, hanem az őssejt egy másik markerének, nevezetesen az őssejt-faktor C-kit receptorának expressziója is. . Mivel a C-kit expressziója egyedi hepatocitákban is megfigyelhető volt (bennük kevésbé volt intenzív), elsősorban a C-kit pozitív Ito sejtekkel érintkezve, ezért feltételezhető, hogy ezek a hepatociták különböztek a C-kit + Ito-tól. sejteket. Nyilvánvaló, hogy ez a sejttípus nemcsak a hepatocitapopuláció helyreállításának feltételeit teremti meg, hanem a máj regionális őssejtjeinek rést is elfoglalja.

Így mára megállapították, hogy az Ito-sejtek legalább öt őssejtmarkert expresszálnak a fejlődés, regeneráció és tenyésztés különböző körülményei között. Az összes eddig felhalmozott adat arra utal, hogy az Ito-sejtek regionális máj őssejtek szerepét tölthetik be, amelyek a hepatociták (és esetleg a kolangiociták) fejlődésének egyik forrásai, valamint a mikrokörnyezet legfontosabb alkotóelemei a máj morfogenezisében, ill. máj hematopoiesis. Ennek ellenére korainak tűnik egyértelmű következtetéseket levonni e sejtek a máj ős- (progenitor) sejtjeinek populációjához való tartozásáról. Nyilvánvalóan szükség van azonban ez irányú új kutatásokra, amelyek sikere esetén távlatokat nyitnak a májbetegségek őssejt-transzplantáción alapuló hatékony kezelési módszereinek kidolgozására.

Ebben az esetben ezek a sejtek a károsodott máj által termelt citokinek, növekedési faktorok és kemokinek (gyulladást elősegítő citokinek) hatására szaporodnak. A csillagsejtek krónikus aktiválása a HBV és HCV replikáció által okozott oxidatív stressz hatására hozzájárulhat a fibrogenezishez és a HBV-vel és HCV-vel krónikusan fertőzött hepatociták fokozott proliferációjához.

Így a csillagsejtek részt vesznek a hepatociták növekedésének, differenciálódásának és keringésének szabályozásában, ami a MAP kinázok aktiválásával együtt májrák kialakulásához vezethet [Block, 2003].

Linkek:

Véletlenszerű rajz

Figyelem! Információ az oldalon

kizárólag oktatási célra szolgál

A máj Ito-sejtek őssejtekre gyakorolt ​​hatásának vizsgálata

Az intercelluláris kommunikáció parakrin szekrécióval és közvetlen sejt-sejt kapcsolattal valósulhat meg. Ismeretes, hogy a hepatikus perisinusoid sejtek (HPC) regionális őssejtek rést hoznak létre és meghatározzák azok differenciálódását. Ugyanakkor a HPC molekuláris és sejtszinten továbbra is gyengén jellemezhető.

Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kiyasov A.P.

GOU VPO "Szövetségi Egészségügyi és Szociális Fejlesztési Ügynökség Kazany Állami Orvostudományi Egyeteme"

Rekombináns csontmorfogenetikus fehérje oszteoindukciójának kísérleti értékelése

Sejttechnológiák a csontok és ízületek degeneratív-dystrophiás betegségeinek kezelésében

Ito ketrece

nyugodtés aktív. Aktivált Ito-sejtek

nyugodt állapot

perisinusoidális(subendoteliális) és interhepatocelluláris... Az elsők elhagyják a sejttestet, és a szinuszos kapilláris felületén húzódnak, vékony ujjszerű ágakkal borítva. A perisinusoid kinövéseket rövid bolyhok borítják, és jellegzetes, hosszú mikro-ejekciókkal rendelkeznek, amelyek még tovább nyúlnak a kapilláris endothel cső felületén. Az interhepatocelluláris kinövések, miután legyőzték a hepatociták lemezét, és elérik a szomszédos sinusoidot, több perisinusoidális kinövésre oszlanak. Így Ito sejtje átlagosan valamivel több, mint két szomszédos szinuszoidot takar.

aktivált állapot

Májsejtek

Az emberi máj sejtekből áll, mint minden szerves szövet. A természet úgy van berendezve, hogy ez a szerv látja el a legfontosabb funkciókat, tisztítja a szervezetet, epét termel, felhalmozza és tárolja a glikogént, szintetizálja a plazmafehérjéket, szabályozza az anyagcsere folyamatokat, részt vesz a koleszterin és egyéb, a testhez szükséges komponensek mennyiségének normalizálásában. a szervezet létfontosságú tevékenysége.

Céljuk teljesítéséhez a májsejteknek egészségeseknek, stabil szerkezetűeknek kell lenniük, mindenkinek meg kell védenie őket a pusztulástól.

A májlebenyek felépítéséről és típusairól

A szerv sejtösszetételére a sokféleség jellemző. A májsejtek lebenyeket alkotnak, a szegmensek lebenyekből állnak. A szerv felépítése olyan, hogy a hepatociták (a fő májsejtek) a központi véna körül helyezkednek el, abból elágaznak, összekapcsolódnak, szinuszokat, azaz vérrel teli hézagokat képezve. A vér úgy áramlik át rajtuk, mint a kapillárisokon. A májat a portális vénából és a szervben található artériából látják el vérrel. A májlebenyek epét termelnek és az áramlási csatornákba vezetik.

Más típusú májsejtek és rendeltetésük

1. Endothel - sinusoidokat bélelő és fenestrát tartalmazó sejtek. Ez utóbbiak célja, hogy lépcsőzetes akadályt képezzenek a szinuszoid és a Disse tér között.
2. Maga a Disse-tér csillagsejtekkel van tele, ezek biztosítják a szöveti folyadék kiáramlását a portális zónák nyirokereibe.
3. A Kupffer-sejtek az endotéliumhoz kapcsolódnak, ahhoz kötődnek, funkciójuk a máj védelme, amikor generalizált fertőzés kerül a szervezetbe, sérülés esetén.
4. A gödröcske sejtek a vírus által érintett hepatociták gyilkosai, emellett citotoxikusak a tumorsejtekre.

Az emberi máj 60%-ban hepatocitákból és 40%-ban más típusú sejtvegyületekből áll. A hepatociták poliédernek tűnnek, legalább 250 milliárd van belőlük. A hepatociták normális működése a szinuszos sejtek által kiválasztott komponensek spektrumának köszönhető, amelyek kitöltik a szinuszos rekeszt. Vagyis a fent felsorolt ​​Kupffer-, csillag- és gödörsejtek (intrahepatikus limfociták).

Az endothel egy szűrő a szinuszos térben lévő vér és a Disse térben lévő plazma között. Ez a biológiai szűrő a nagy, retinolban és koleszterinben gazdag vegyületeket kiválogatja és nem engedi át, ami jótékony hatással van a szervezetre. Ezenkívül funkciójuk a máj (nevezetesen a hepatociták) védelme a vérsejtek által okozott mechanikai károsodástól.

Rendszeres olvasónk egy hatékony módszert ajánlott! Új felfedezés! A novoszibirszki tudósok azonosították a legjobb gyógymódot a máj tisztítására. 5 év kutatás. Otthoni önkezelés! Alapos áttekintése után úgy döntöttünk, hogy figyelmébe ajánljuk.

A szervelemek kölcsönhatásának folyamata

Kölcsönhatás történik a szerv összes részecskéje között, amelynek meglehetősen összetett sémája van. Az egészséges májat a sejtkapcsolatok stabilitása jellemzi, a kóros folyamatokban az extracelluláris mátrixot mikroszkóp alatt követik nyomon.

A toxinok, például alkohol, vírusos szerek hatására a szervszövetek megváltoznak. Ezek a következők:

• anyagcserezavarok során keletkező termékek lerakódása a szervben;
• sejtdisztrófia;
• hepatociták nekrózisa;
• a májszövetek fibrózisa;
• a máj gyulladásos folyamata;
• kolesztázis.

A szervpatológiák kezeléséről

Minden beteg számára hasznos tudni, hogy mit jelentenek azok a változások, amelyeknek a szerv ki van téve. Nem mindegyik katasztrofális. Például a dystrophia lehet enyhe vagy súlyos. Mindkét folyamat visszafordítható. Jelenleg vannak olyan gyógyszerek, amelyek helyreállítják a máj sejtjeit és teljes szegmenseit.

A kolesztázist még népi gyógymódokkal is gyógyítható - főzetekkel és infúziókkal. Hozzájárulnak a bilirubin szintézis normalizálásához és kiküszöbölik az epe nyombélbe való kiáramlásának zavarait.

A kezdeti stádiumban lévő cirrhosis esetén a kezelés diétával kezdődik, majd hepatoprotektív terápiát írnak elő. A májzsugor és fibrózis kezelésének leghatékonyabb módja az őssejtek, melyeket a köldökvénába vagy intravénásan injektálva helyreállítják a különböző szerek által károsodott májsejteket.

A májsejtek pusztulásának fő oka az alkoholfogyasztás, a kábítószer-expozíció, beleértve a kábítószereket, gyógyszereket. A szervezetbe jutó toxinok májpusztító hatásúak. Ezért fel kell hagynia a rossz szokásokkal, hogy egészséges legyen a mája.

Ki mondta, hogy lehetetlen gyógyítani a súlyos májbetegséget?

• Sok módszert kipróbáltak, de semmi sem segít.
• És most készen áll arra, hogy kihasználjon minden lehetőséget, amely megadja Önnek a régóta várt jó egészséget!

Létezik hatékony kezelés a máj számára. Kövesse a linket, és megtudja, mit javasolnak az orvosok!

Olvassa el még:

Végzettség: Rosztovi Állami Orvostudományi Egyetem (Rosztovi Állami Orvostudományi Egyetem), Gasztroenterológiai és Endoszkópiai Tanszék.

ENDOTHELIÁLIS SEJTEK, KUPFER SEJTEK ÉS ITO

Az endothel sejtek, a Kupffer és az Ito sejtek szerkezetét két ábra példáján fogjuk megvizsgálni.

A szövegtől jobbra látható ábra a máj szinuszos kapillárisait (SC) mutatja - a szinuszos típusú intralobuláris kapillárisokat, amelyek a bemeneti venuláktól a központi vénáig növekednek. A máj szinuszos kapillárisai anasztomózisos hálózatot alkotnak a májlemezek között. A szinuszos kapillárisok bélését endothel- és Kupffer-sejtek alkotják.

A szövegtől balra lévő ábrán a máj laminája (LF) és két szinuszos kapillárisa (SC) függőlegesen és vízszintesen el van vágva, hogy megmutassák Ito perisinusoid sejtjeit (CI). Az ábrán a vágott epeutak (GC) is láthatók.

ENDOTHELIÁLIS SEJTEK

Az endoteliális sejtek (EC) erősen lapított laphámsejtek, amelyek megnyúlt kis sejtmaggal, fejletlen organellumokkal és nagyszámú mikropinocitás hólyaggal rendelkeznek. A citomembrán szabálytalan nyílásokkal (O) és fenestrákkal foltos, gyakran rácslemezekbe (RP) csoportosulva. Ezek a lyukak átengedik a vérplazmát, de a vérsejteket nem, így hozzáférést biztosítanak a hepatocitákhoz (D). Az endoteliális sejteknek nincs alapmembránja, és nincs fagocitózisuk. Kisméretű csatlakozószerelvényekkel (nincs ábrázolva) vannak egymással összekötve. A Kupffer-sejtekkel együtt az endothel sejtek alkotják a Disse-tér (DP) belső határát; külső határát májsejtek alkotják.

KUPFER SEJTEI

A Kupffer-sejtek (KK) nagyméretű, instabil csillagsejtek a máj szinuszos kapillárisaiban, részben azok bifurkációinál.

A Kupffer-sejtek folyamatai az endothelsejtek közötti összekötő eszközök nélkül haladnak át, és gyakran áthaladnak a sinusoidok lumenén. A Kupffer-sejtek ovális sejtmagot, sok mitokondriumot, jól fejlett Golgi-komplexet, a szemcsés endoplazmatikus retikulum rövid ciszternáit, sok lizoszómát (L), maradéktesteket és ritka gyűrűs lemezeket tartalmaznak. A Kupffer-sejtek közé tartoznak a nagy fagolizoszómák (PL), amelyek gyakran tartalmaznak elavult vörösvértesteket és idegen anyagokat. Kimutatható, különösen szupravitalis festéssel, hemosiderin vagy vas zárványokkal.

A Kupffer-sejtek felszínén szabálytalan, lapított citoplazmatikus ráncok, úgynevezett lamellipodia (LP) - lamellás peduncles, valamint filopodia (F) és mikrobolyhok (MV) nevű folyamatok láthatók, amelyeket glikokalix borít. A plazmomemma vermiform testeket (CT) képez, központi elhelyezkedésű sűrű vonallal. Ezek a struktúrák kondenzált glikokalixot képviselhetnek.

A Kupffer sejtek makrofágok, nagy valószínűséggel független sejtnemzetséget alkotnak. Általában más Kupffer sejtekből származnak, ez utóbbiak mitotikus osztódása miatt, de származhatnak a csontvelőből is. Egyes szerzők úgy vélik, hogy ezek aktivált endotélsejtek.

Időnként egy véletlen autonóm idegrost (NV) halad át a Disse téren. Egyes esetekben a rostok érintkeznek hepatocitákkal. A hepatociták széleit mikrobolyhokkal teleszórt interhepatocyte depressziók (MU) határolják.

ITO CELLS

Ezek a Disse terekben (DP-k) belül lokalizált csillagsejtek. Magjaik kondenzált kromatinban gazdagok, és általában nagy lipidcseppek (LA) deformálják őket. Ez utóbbiak nemcsak a perikarionban, hanem a sejt folyamataiban is jelen vannak, és kívülről gömb alakú kiemelkedésekként láthatók. Az organellumok gyengén fejlettek. A perisinusoid sejtek gyenge endocitotikus aktivitást mutatnak, de nem rendelkeznek fagoszómákkal. A sejtekben számos hosszú folyamat (O) van, amelyek érintkeznek a szomszédos hepatocitákkal, de nem képeznek összekötő komplexeket.

A folyamatok lefedik a máj szinuszos kapillárisait, és bizonyos esetekben áthaladnak a májlemezeken, érintkezve a szomszédos máj sinusoidokkal. A folyamatok nem állandóak, elágazóak és vékonyak; le is lapíthatók. A lipidcseppek felhalmozódó csoportjai megnyúlnak, és szőlőfürt formát öltenek.

Úgy gondolják, hogy az Ito perisinusoid sejtjei gyengén differenciált mezenchimális sejtek, amelyek hematopoetikus őssejteknek tekinthetők, mivel kóros körülmények között zsírsejtekké, aktív vér őssejtekké vagy fibroblasztokká alakulhatnak.

Normál körülmények között az Ito-sejtek részt vesznek a zsír és az A-vitamin felhalmozódásában, valamint az intralobuláris retikuláris és kollagénrostok (KB) termelésében.

Pszichológia és pszichoterápia

Ez a rész a kutatási módszerekről, a gyógyszerekről és az orvosi témákhoz kapcsolódó egyéb összetevőkről szóló cikkeket tartalmaz.

A webhely egy kis része, amely cikkeket tartalmaz az eredeti tételekről. Órák, bútorok, dísztárgyak – mindezt megtalálja ebben a rovatban. Ez a rész nem az oldal fő része, inkább érdekes adalékként szolgál az emberi anatómia és fiziológia világához.

Ito májsejtek

Univerzális népszerű tudományos online enciklopédia

MÁJ

MÁJ, a gerincesek testének legnagyobb mirigye. Emberben ez a testtömeg körülbelül 2,5%-a, átlagosan 1,5 kg felnőtt férfiaknál és 1,2 kg nőknél. A máj a has jobb felső részén található; szalagokkal kapcsolódik a rekeszizomhoz, a hasfalhoz, a gyomorhoz és a belekhez, és vékony rostos membránnal - glisson kapszulával - borítja. A máj puha, de sűrű vörösesbarna szerv, és általában négy lebenyből áll: egy nagy jobboldali lebenyből, egy kisebb bal lebenyből, valamint sokkal kisebb farok- és négyzet alakú lebenyekből, amelyek a máj hátsó alsó felületét alkotják.

Funkciók.

A máj létfontosságú szerv, számos különféle funkcióval. Az egyik fő az epe, egy narancssárga vagy sárga színű átlátszó folyadék képződése és szekréciója. Az epe savakat, sókat, foszfolipideket (foszfátcsoportot tartalmazó zsírokat), koleszterint és pigmenteket tartalmaz. Az epesók és a szabad epesavak emulgeálják a zsírokat (azaz apró cseppekre bomlanak), ezáltal megkönnyítik azok emésztését; a zsírsavakat vízben oldódó formákká alakítja (ami mind a zsírsavak, mind a zsírban oldódó A-, D-, E- és K-vitaminok felszívódásához szükséges); antibakteriális hatásúak.

Az emésztőrendszerből a vérbe felszívódó összes tápanyag - a szénhidrátok, fehérjék és zsírok emésztési termékei, ásványi anyagok és vitaminok - átjut a májon, és abban feldolgozódik. Ilyenkor az aminosavak egy része (fehérjetöredékek), a zsírok egy része pedig szénhidráttá alakul, így a máj a szervezet legnagyobb glikogén „raktára”. Szintetizálja a vérplazmafehérjéket - globulinokat és albumint, valamint az aminosavak átalakítási reakcióit (deamináció és transzamináció). A dezamináció - a nitrogéntartalmú aminocsoportok eltávolítása az aminosavakból - lehetővé teszi az utóbbiak felhasználását például szénhidrátok és zsírok szintézisére. A transzamináció egy aminocsoport átvitele egy aminosavból ketosavvá egy másik aminosav képződésével ( cm. ANYAGCSERE). A máj ketontesteket (a zsírsav-anyagcsere termékeit) és a koleszterint is szintetizálja.

A máj részt vesz a vér glükóz (cukor) szintjének szabályozásában. Ha ez a szint megemelkedik, a májsejtek a glükózt glikogénné (a keményítőhöz hasonló anyaggá) alakítják és lerakják. Ha a vércukorszint a normál alá esik, a glikogén lebomlik, és a glükóz a véráramba kerül. Ezenkívül a máj képes glükózt szintetizálni más anyagokból, például aminosavakból; ezt a folyamatot glükoneogenezisnek nevezik.

A máj másik funkciója a méregtelenítés. A gyógyszerek és más potenciálisan mérgező vegyületek a májsejtekben vízoldható formává alakulhatnak, ami lehetővé teszi, hogy az epével ürüljenek ki; elpusztulhatnak vagy konjugálódhatnak (egyesülhetnek) más anyagokkal ártalmatlan termékekké, amelyek könnyen kiválasztódnak a szervezetből. Egyes anyagok átmenetileg lerakódnak a Kupffer-sejtekben (speciális sejtek, amelyek felszívják az idegen részecskéket) vagy a máj más sejtjeiben. A Kupffer sejtek különösen hatékonyak a baktériumok és egyéb idegen részecskék eltávolításában és elpusztításában. Nekik köszönhetően a máj fontos szerepet játszik a szervezet immunvédelmében. A sűrű véredényhálózattal rendelkező máj vértárolóként is szolgál (állandóan körülbelül 0,5 liter vért tartalmaz), és részt vesz a vértérfogat és a véráramlás szabályozásában a szervezetben.

Általában a máj több mint 500 különböző funkciót lát el, és tevékenységét még nem sikerült mesterségesen reprodukálni. Ennek a szervnek az eltávolítása 1-5 napon belül elkerülhetetlenül halálhoz vezet. A májnak azonban hatalmas belső tartaléka van, elképesztő képessége van a károsodásból való felépülésre, így az ember és más emlősök a májszövet 70%-ának eltávolítása után is életben maradhatnak.

Szerkezet.

A máj összetett szerkezete tökéletesen alkalmazkodik egyedi funkcióinak betöltéséhez. A lebenyek kis szerkezeti egységekből - lebenyekből állnak. Az emberi májban körülbelül százezer van belőlük, egyenként 1,5–2 mm hosszúak és 1–1,2 mm szélesek. A lebeny májsejtekből - hepatocitákból áll, amelyek a központi véna körül helyezkednek el. A hepatociták egy sejt vastagságú rétegekbe egyesülnek - az ún. májlemezek. Radiálisan eltérnek a központi vénától, elágaznak és összekapcsolódnak egymással, komplex falrendszert alkotva; a köztük lévő szűk rések, amelyek vérrel vannak telve, szinuszoidoknak nevezzük. A szinuszok egyenértékűek a kapillárisokkal; egymásba haladva folytonos labirintust alkotnak. A májlebenyek a portális véna és a májartéria ágaiból látják el a vért, a lebenyekben képződő epe pedig bejut a tubulusrendszerbe, azokból az epeutakba és a májból ürül ki.

A májportális véna és a májartéria szokatlan, kettős vérellátást biztosít a máj számára. A tápanyagban gazdag vér a gyomor, a belek és számos más szerv kapillárisaiból a portális vénába gyűlik össze, amely ahelyett, hogy a vért a szívbe szállítaná, mint a legtöbb véna, a májba szállítja azt. A máj lebenyeiben a portális véna kapillárisok hálózatára (sinusoidokra) hasad. A „portális véna” kifejezés a vér szokatlan irányát jelzi az egyik szerv kapillárisaiból a másik kapillárisaiba (a vesék és az agyalapi mirigy hasonló keringési rendszerrel rendelkeznek).

A máj második vérellátási forrása, a májartéria, amely oxigénben gazdag vért szállít a szívből a lebenyek külső felületére. A portális véna biztosítja a máj teljes vérellátásának 75-80%-át, a májartéria 20-25%-át. Általában körülbelül 1500 ml vér halad át a májon percenként, i.e. a perctérfogat negyede. Mindkét forrásból származó vér végül a szinuszoidokban köt ki, ahol összekeveredik és a központi vénába kerül. A központi vénából megindul a vér kiáramlása a szívbe a lebenyes vénákon keresztül a májba (nem tévesztendő össze a máj portális vénájával).

Az epét a májsejtek választják ki a sejtek közötti legkisebb tubulusokba - epekapillárisokba. A tubulusok és csatornák belső rendszerén keresztül az epevezetékben gyűlik össze. Az epe egy része közvetlenül a közös epevezetékbe kerül, és a vékonybélbe kerül, de az epe nagy része visszakerül az epehólyagba, a májhoz kapcsolódó kis izomfalakba, ahol a cisztás vezetéken keresztül tárolódnak. Amikor a táplálék bejut a belekben, az epehólyag összehúzódik, és tartalmát a közös epevezetékbe engedi, amely a nyombélbe nyílik. Az emberi máj körülbelül 600 ml epét termel naponta.

Portál triász és acinus.

A portális véna, a májartéria és az epevezeték ágai egymás mellett, a lebeny külső határán helyezkednek el, és a portális hármast alkotják. Számos ilyen portálhármas található az egyes lebenyek perifériáján.

Az acinust a máj funkcionális egységének tekintik. Ez a szövet azon része, amely körülveszi a portális hármast, és magában foglalja a nyirokereket, idegrostokat és két vagy több lebeny szomszédos szektorait. Egy acinus körülbelül 20 májsejtet tartalmaz, amelyek a portális triád és az egyes lebenyek központi vénája között helyezkednek el. Kétdimenziós képen az egyszerű acinus erek csoportjának tűnik, amelyeket szomszédos lebenyszakaszok vesznek körül, háromdimenziós képen pedig bogyónak (acinus - lat. Berry), amely egy vérszáron lóg és epeerek. Az acinus, melynek mikrovaszkuláris vázát a fent említett vér- és nyirokerek, szinuszoidok és idegek alkotják, a máj mikrokeringési egysége.

Májsejtek

(hepatocyták) poliéder alakúak, de három fő funkcionális felületük van: szinuszos, a szinuszos csatorna felé néző; tubuláris - részt vesz az epekapilláris falának kialakításában (nincs saját fala); és intercelluláris - közvetlenül a szomszédos májsejtekkel határos.

Ito ketrece

Ito sejtek (szinonimák: stellate májsejt, zsírraktározó sejt, lipocita, eng. Máj csillagsejt, HSC, Ito sejt, Ito sejt) - a májlebeny perisinusoid terében található periciták, amelyek két különböző állapotban képesek működni - nyugodtés aktív. Aktivált Ito-sejtek nagy szerepet játszanak a fibrogenezisben - májkárosodásban a hegszövet képződésében.

Az ép májban csillagsejtek találhatók nyugodt állapot... Ebben az állapotban a sejteknek több kinövése van, amelyek a szinuszos kapillárist borítják. A sejtek másik megkülönböztető jellemzője az A-vitamin (retinoid) tartalékok jelenléte citoplazmájukban zsírcseppek formájában. A nyugalomban lévő Ito-sejtek az összes májsejt 5-8%-át teszik ki.

Az Ito sejt kinövéseket két típusra osztják: perisinusoidális(subendoteliális) és interhepatocelluláris... Az elsők elhagyják a sejttestet, és a szinuszos kapilláris felületén húzódnak, vékony ujjszerű ágakkal borítva. A perisinusoid kinövéseket rövid bolyhok borítják, és jellegzetes, hosszú mikro-ejekciókkal rendelkeznek, amelyek még tovább nyúlnak a kapilláris endothel cső felületén. Az interhepatocelluláris kinövések, miután legyőzték a hepatociták lemezét, és elérik a szomszédos sinusoidot, több perisinusoidális kinövésre oszlanak. Így Ito sejtje átlagosan valamivel több, mint két szomszédos szinuszoidot takar.

Ha a máj károsodik, Ito sejtjei bejutnak aktivált állapot... Az aktivált fenotípust proliferáció, kemotaxis, kontraktilitás, retinoidraktárak elvesztése és myofibroblaszt-szerű sejtek képződése jellemzi. Az aktivált májcsillagsejtekben az új gének, például az α-SMA, ICAM-1, kemokinek és citokinek szintje is megnövekedett. Az aktiválás a fibrogenezis korai szakaszának kezdetét jelzi, és megelőzi az ECM fehérjék fokozott termelését. A májgyógyulás végső szakaszát az aktivált Ito-sejtek fokozott apoptózisa jellemzi, aminek következtében számuk meredeken csökken.

Az Ito-sejtek mikroszkópos vizsgálata során történő megjelenítéséhez arany-kloridos festést alkalmaznak. Azt is megállapították, hogy a reelin fehérje expressziójuk megbízható markere ezeknek a sejteknek a többi myofibroblaszttól való differenciálódásában.

Történelem

1876-ban Karl von Kupfer leírta az általa "Sternzellen"-nek (csillagsejteknek) nevezett sejteket. Arany-oxiddal festve a sejtek citoplazmájában zárványok voltak észrevehetők. Kupfer 1898-ban, tévesen fagocitózissal elfogott eritrociták töredékeinek tartotta őket, felülvizsgálta a "csillagsejtekről" mint külön sejttípusról alkotott nézeteit, és a fagociták kategóriájába utalta őket. A következő években azonban rendszeresen megjelentek a Kupffer-féle „csillagsejtekhez” hasonló sejtleírások. Különféle elnevezéseket kaptak: intersticiális sejtek, parasinusoid sejtek, lipociták, periciták. E sejtek szerepe 75 évig rejtély maradt, mígnem Toshio Ito professzor felfedezett bizonyos zsírzárványokat tartalmazó sejteket az emberi máj perisinusoidális terében. Ito "shibo-sesshu saibo"-nak nevezte őket - zsírelnyelő sejteknek. Felismerve, hogy a zárványok glikogénből származó sejtek által termelt zsírok, a nevet "shibo-chozo saibo"-ra változtatta, ami zsírtároló sejtek. 1971-ben Kenjiro Wake bebizonyította Kupffer "Sternzellen" és Ito zsírtároló sejtjeinek azonosságát. Wake azt is megállapította, hogy ezek a sejtek fontos szerepet játszanak az A-vitamin tárolásában (korábban azt hitték, hogy az A-vitamin lerakódott Kupffer sejtjeiben). Röviddel ezután Kent és Popper kimutatta az Ito-sejtek és a májfibrózis közötti erős kapcsolatot. Ezek a felfedezések jelentették az Ito-sejtek részletes tanulmányozásának folyamatának kezdetét.

Lásd még

Írjon véleményt az "Ito ketrece" című cikkről

Linkek

• Young-O Kueon, Zachary D. Goodman, Jules L. Dienstag, Eugene R. Schiff, Nathaniel A Brown, Elmar Burckhardt, Robert Skunkhoven, David A Brenner, Michael W. Fraid (2001). Journal of Haepotology 35.; 749-755. - az "Infections and Antimicrobial Therapy" című folyóirat 04/N 3/2002 számában megjelent cikk fordítása a Consilium-Medicum honlapján.
• Popper H: Az A-vitamin eloszlása ​​a szövetben, amint azt fluoreszcens mikroszkóppal kimutatták. Physiol Rev 1944, 24:.

Jegyzetek (szerkesztés)

1. Geerts A. (2001) A nyugvó májcsillagsejtek története, heterogenitása, fejlődésbiológiája és funkciói. Semin Liver Dis. 21 (3): 311-35. PMID
2. Wake, K. (1988) Máj perivaszkuláris sejtjei arany- és ezüstimpregnálással és elektronmikroszkóppal. In „Biopathology of the Liver. Ultrastrukturális megközelítés” (Motta, P. M., szerk.) pp. 23-36, Kluwer Academic Publishers, Dordrecht, Hollandia
3. Stanciu A., Cotutiu C., Amalinei C. (2002) Új adatok az ITO cellákról. Rev Med Chir Soc Med Nat Iasi. 107 (2): 235-9. PMID
4. John P. Iredale (2001) A májcsillagsejtek viselkedése a májsérülés feloldása során. Seminars in Liver Disease, 21 (3): PMID- on Medscape.
5. Kobold D., Grundmann A., Piscaglia F., Eisenbach C., Neubauer K., Steffgen J., Ramadori G., Knittel T. (2002) A reelin expressziója a máj csillagsejtekben és a májszövet-javítás során: új marker a HSC más májmiofibroblasztoktól való megkülönböztetésére. J Hepatol. 36 (5): 607-13. PMID
6. Adrian Reuben (2002) Hepatológia. 35. évfolyam, 2. szám, 503-504. oldal
7. Suematsu M, Aiso S. (2001) Toshio Ito professzor: tisztánlátó a pericita biológiában. Keio J Med. 50 (2): 66-71. PMID (eng.)
8. Querner F: Der mikroskopische Nachweis von Vitamin A im animalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung. Klin Wschr 1935, 14:.

Részlet Ito ketrecéből

Fél órával később Kutuzov elindult Tatarinovába, és Bennigsen és kísérete, köztük Pierre, végighajtott a vonalon.

Gorkiból Bennigsen a főúton ment le a hídhoz, amelyet a halom tisztje Pierre-nek mutatott meg, mint az állás középpontját, és amelynek partján széna szagú kaszált fű sorakozott. Áthajtottak a hídon Borodino faluba, onnan balra fordultak, és hatalmas számú csapat és ágyú mellett egy magas halomhoz hajtottak, amelyen a milíciák a földet ásták. Ez egy reduut volt, amelynek még nem volt neve, később Raevszkij-reduutnak vagy kurgán-ütegnek nevezték.

Pierre nem sok figyelmet szentelt ennek a redoubnak. Nem tudta, hogy ez a hely emlékezetesebb lesz számára, mint a Borodino mező összes helye. Aztán a szakadékon át Szemjonovszkijhoz hajtottak, ahol a katonák a kunyhók és istállók utolsó fatörzseit húzták. Aztán lefelé és felfelé haladtak előre a jégesőként kiütött törött rozson keresztül, az újonnan lefektetett tüzérségi úton, a szántóföld lökései mentén a vízszintbe [egyfajta erődítmény. (Megjegyzés. Lev Tolsztoj.)], Szintén akkor még ásni.

Bennigsen megállt az öblítéseknél, és elkezdte előre nézni a (tegnap a miénk) Shevardinsky reduutot, amelyen több lovast is lehetett látni. A tisztek azt mondták, hogy Napóleon vagy Murat volt ott. És mindenki mohón nézte ezt a csapat lovasságot. Pierre is odanézett, és megpróbálta kitalálni, hogy ezek közül az alig látható emberek közül melyik Napóleon. Végül a lovasok elhagyták a halmot és eltűntek.

Bennigsen a hozzá forduló tábornokhoz fordult, és elkezdte elmagyarázni csapataink teljes helyzetét. Pierre hallgatta Bennigsen szavait, minden mentális erejét megfeszítve, hogy megértse a közelgő csata lényegét, de szomorúan érezte, hogy szellemi képességei nem elegendőek ehhez. Nem értett semmit. Bennigsen abbahagyta a beszédet, és észrevette Pierre hallgató alakját, és hirtelen így szólt hozzá:

- Gondolom, téged nem érdekel?

– Ó, éppen ellenkezőleg, nagyon érdekes – ismételte Pierre, nem teljesen őszintén.

Öblítéssel még tovább hajtottak balra egy sűrű, alacsony nyírfaerdőben kanyargó úton. Ennek a közepén

erdő, előttük egy fehér lábú barna nyúl ugrott ki az útra, és a nagyszámú ló taposásától megijedve annyira összezavarodott, hogy sokáig ugrott előttük az úton, felkeltve a tábornokot. figyelem és nevetés, és csak amikor több hangon kiabáltak vele, oldalra rohant és eltűnt a sűrűben. Miután két versztnyit áthajtottak az erdőn, behajtottak egy tisztásra, ahol Tucskov hadtestének csapatai állomásoztak, aminek a balszárnyat kellett volna védenie.

Itt, a bal szélső szárnyon Bennigsen sokat és szenvedélyesen beszélt, és – ahogy Pierre-nek tűnt – fontos katonai parancsot adott ki. Tucskov csapatainak helyszíne előtt egy magaslat volt. Ezt a magasságot nem szállták meg csapatok. Bennigsen hangosan kritizálta ezt a hibát, mondván, hogy őrültség a parancsnoki területet foglalatlanul hagyni, és csapatokat helyezni alá. Néhány tábornok ugyanezt a véleményt nyilvánította. Az egyik, különösen katonai hévvel, arról beszélt, hogy ide kerültek levágásra. Bennigsen a saját nevében parancsolta, hogy vigye fel a csapatokat a magasba.

Ez a balszárny parancsa még jobban megkérdőjelezte Pierre-t, hogy képes-e megérteni a katonai ügyeket. Hallgatva Bennigsent és a tábornokokat, akik elítélték a csapatok helyzetét a hegy alatt, Pierre teljesen megértette őket, és osztotta véleményüket; de éppen emiatt nem értette, hogyan követhetett el ilyen nyilvánvaló és durva hibát az, aki ide helyezte őket a hegy alá.

Pierre nem tudta, hogy ezeket a csapatokat nem az állás megvédésére vetették be, ahogy Bennigsen gondolta, hanem egy rejtett helyre helyezték őket lesre, vagyis azért, hogy észrevétlenül csapjanak le az előrenyomuló ellenségre. Bennigsen ezt nem tudta, és különleges okokból előremozdította a csapatokat anélkül, hogy erről szólt volna a főparancsnoknak.

Andrej herceg ezen a tiszta augusztus 25-i estén a karjára támaszkodva feküdt egy törött fészerben Knyazkov faluban, ezredének telephelyének szélén. A letört falban lévő lyukon át a kerítés mentén levágott alsó ágú harmincéves nyírfák csíkjára nézett, a szántóföldre, amelyen zabhalmok zúztak, és a bokrokat, amelyek fölött a a tüzek füstje – a katonák konyhája – látszott.

Bármilyen szűk és senkinek sem kell, és bármennyire is nehéznek tűnt most Andrey hercegnek az élete, ő is, akárcsak hét évvel ezelőtt Austerlitzben, a csata előestéjén, izgatottnak és ingerültnek érezte magát.

Ő adott és kapott parancsot a holnapi csatára. Nem volt több tennivalója. De a gondolatok voltak a legegyszerűbbek, a legvilágosabbak és ezért a szörnyű gondolatok nem hagyták békén. Tudta, hogy a holnapi ütközetnek a legszörnyűbbnek kellett volna lennie mindazok közül, amelyekben részt vett, és életében először a halál lehetőségét, anélkül, hogy bármiféle kapcsolata lenne a mindennapi élettel, és nem kellett volna megfontolni, hogy milyen hatással lesz másokra, de csak mert a hozzá, a lelkéhez való viszonyulás élénken, szinte biztosan, egyszerűen és borzalmasan mutatkozott meg előtte. És ennek az előadásnak a magasságából hirtelen hideg fehér fénnyel világított fel minden, ami korábban gyötörte és foglalkoztatta, árnyékok, perspektíva, körvonalak megkülönböztetése nélkül. Egész élete varázslámpásnak tűnt, amelybe üvegen keresztül és mesterséges megvilágítás mellett sokáig nézett. Most hirtelen meglátta ezeket a rosszul festett képeket, üveg nélkül, erős nappali fényben. „Igen, igen, ezek azok a hamis képek, amelyek izgattak, csodáltak és gyötörtek” – mondta magában, miközben képzeletében végigjárta az élet varázslámpásának főbb képeit, és most a világ e hideg fehér fényében nézte őket. nap - a halál tiszta gondolata. - Itt vannak, ezek a durván megfestett figurák, amelyek valami szépnek és titokzatosnak tűntek. Dicsőség, közjó, nőszeretet, maga a haza – milyen nagyszerűnek tűntek számomra ezek a képek, milyen mély értelmet jelentettek beteljesülésüknek! És mindez olyan egyszerű, sápadt és durva annak a reggelnek a hideg fehér fényében, amely, úgy érzem, felemelkedik számomra." Életének három fő bánata különösen lekötötte a figyelmét. Egy nő iránti szerelme, apja halála és a fél Oroszországot elfoglaló francia invázió. "Szeretet. Ez a lány, akiről úgy tűnt, hogy tele van titokzatos erőkkel. Mennyire szerettem őt! Költői terveket szőttem a szerelemről, a vele való boldogságról. Ó, kedves fiam! – mondta hangosan dühösen. - Hogyan! Hittem valamiféle eszményi szerelemben, aminek hűségesnek kellett lennie hozzám távollétem teljes évében! Mint egy mese gyengéd galambja, el kellett volna hervadnia tőlem. És mindez sokkal egyszerűbb... Mindez rettenetesen egyszerű, undorító!

Az intercelluláris kommunikáció parakrin szekrécióval és közvetlen sejt-sejt kapcsolattal valósulhat meg. Ismeretes, hogy a hepatikus perisinusoid sejtek (HPC) regionális őssejtek rést hoznak létre és meghatározzák azok differenciálódását. Ugyanakkor a HPC molekuláris és sejtszinten továbbra is gyengén jellemezhető.

A projekt célja a patkány hepatikus perisinusoid sejtek és a különböző őssejtek, például a humán köldökzsinórvér mononukleáris sejtfrakciója (UCB-MC) és a patkány csontvelőből származó multipotenciális mezenchimális stromasejtek (BM-MMSC) közötti kölcsönhatások vizsgálata volt.

Anyagok és metódusok. Patkány BM-MSC és HPC, humán UCB-MC sejteket standard technikákkal származtattunk. A HPC parakrin szabályozásának tanulmányozásához UCB-MC vagy BM-MMSC sejteket HPC-vel együtt tenyésztettünk Boyden-kamrák és kondicionált HPC sejttápközeg alkalmazásával. A differenciálisan jelölt sejteket együtt tenyésztettük, és kölcsönhatásaikat fáziskontraszt fluoreszcens mikroszkóppal és immuncitokémiával figyeltük meg.

Eredmények. A tenyésztés első hetében az A-vitamin autofluoreszcenciája volt megfigyelhető a PHC zsírtároló képessége miatt. A BM-MMSC magas életképességet mutatott az összes társtenyésztési modellben. 2 napos inkubálás után kondicionált tápközegben a BM-MMSC és a HPC együttes tenyészetében változásokat figyeltünk meg az MMSC morfológiájában - csökkent a méret, és rövidebbek lettek a csíráik. Az α-Smooth Muscle Actin és a dezmin expressziója hasonló volt a myofibroblaszthoz, amely az Ito sejttenyészet in vitro közbenső formája. Ezeket a változásokat a HPC parakrin stimulációja okozhatja. A HPC UCB-MC sejtekre gyakorolt ​​legmélyebb hatását a kontakt ko-kultúrában figyelték meg, ezért fontos, hogy az UCB-MC sejtek közvetlen sejt-sejt kapcsolatokat hozzanak létre életképességük megőrzése érdekében. Nem figyeltünk meg sejtfúziót a HPC / UCB és a HPC / BM-MMSC sejtek között kotenyészetekben. További kísérleteinkben a HPC által termelt növekedési faktorok tanulmányozását tervezzük az őssejtek májban történő differenciálódásához.

Bevezetés.

A májsejtek sokfélesége közül különösen érdekesek perisinusoid májsejtek (Ito sejtek)... A növekedési faktorok és az extracelluláris mátrix komponenseinek szekréciója révén a hepatociták mikrokörnyezetét hozzák létre, és számos tudományos tanulmány kimutatta, hogy a csillagmájsejtek képesek mikrokörnyezetet kialakítani az őssejtek (beleértve a vérképzősejteket is) számára, és befolyásolják azok működését. differenciálódás hepatocitákká. Ezen sejtpopulációk intercelluláris kölcsönhatásai a növekedési faktorok parakrin szekréciójával vagy közvetlen intercelluláris kontaktusokkal valósulhatnak meg, azonban ezeknek a folyamatoknak a molekuláris és sejtes alapja teljesen feltáratlan.

A tanulmány célja.

Interakciós mechanizmusok tanulmányozása Ito sejtek hematopoietikus (HSC) és mezenchimális (MMSC) őssejtekkel in vitro.

Anyagok és metódusok.

A patkánymáj Ito sejtjeit két különböző enzimatikus módszerrel izoláltuk. Ugyanakkor a stromális MMSC-ket patkány csontvelőből nyertük. A hematopoietikus őssejtek mononukleáris frakcióját emberi köldökzsinórvérből izolálják. Az Ito sejtek parakrin hatásait az MMSC és HSC tenyésztése során vizsgáltuk abban a tápközegben, amelyben az Ito sejtek növekedtek, valamint a féligáteresztő membránnal elválasztott sejtek együttes tenyésztése során. A sejt-sejt kontaktusok hatását ko-sejt kotenyésztésben tanulmányozták. A jobb megjelenítés érdekében minden populációt egyedi fluoreszcens jelöléssel jelöltünk. A sejtek morfológiáját fáziskontraszt és fluoreszcens mikroszkóppal értékeltük. A tenyésztett sejtek fenotípusos jellemzőit immuncitokémiai analízis módszereivel vizsgáltuk.

Eredmények.

A perisinusoid sejtek izolálása után egy héten belül autofluoreszcens képességüket észleltük zsírfelhalmozó képességük miatt. Ezután a sejtek növekedésük közbenső fázisába léptek, és csillag alakúak lettek. Az Ito-sejtek és a patkány csontvelői MMSC-k együttes tenyésztésének kezdeti szakaszában az MMSC-k életképessége minden tenyésztési lehetőségnél megmaradt. A második napon az MMSC-k tenyésztése során Ito sejtek tápközegében az MMSC-k morfológiája megváltozott - méretük csökkent, a folyamatok lerövidültek. Az alfa-simaizom aktin és a dezmin expressziója nőtt az MMSC-ben, ami fenotípusos hasonlóságukat jelezte a miofibroblasztokkal, amelyek az aktivált Ito sejtek in vitro növekedésének köztes stádiuma. Adataink azt mutatják, hogy az Ito sejtek által szekretált parakrin faktorok befolyásolják az MMSC tulajdonságait a tenyészetben.

A hematopoetikus őssejtek Ito sejtekkel történő együttes tenyésztése alapján kimutatták, hogy a vérképző őssejtek csak Ito sejtekkel történő együtttenyésztés esetén tartják meg életképességüket. A vegyes tenyészetek fluoreszcencia analízisének adatai szerint a különböző populációk sejtfúziójának jelensége nem derült ki.

Következtetések. A hematopoietikus őssejtek életképességének megőrzésében a döntő tényező az Ito sejtekkel való közvetlen intercelluláris kontaktus. Parakrin szabályozást csak az MMSC-k tenyésztése során figyeltek meg olyan tápközegben, amelyben Ito-sejtek növekedtek. Az Ito sejtek által termelt specifikus faktorok sejttenyészetben a HSC és MMSC differenciálódásra gyakorolt ​​hatásának vizsgálatát a következő vizsgálatokban tervezzük elvégezni.

Shafigullina A.K., Trondin A.A., Shaikhutdinova A.R., Kaligin M.S., Gazizov I.M., Rizvanov A.A., Gumerova A.A., Kiyasov A.P.
GOU VPO "Szövetségi Egészségügyi és Szociális Fejlesztési Ügynökség Kazany Állami Orvostudományi Egyeteme"

Az endotoxin fő forrása a szervezetbena gram-negatív bélflóra. Jelenleg nem kétséges, hogy a máj a fő szerv, endotoxin-eltávolítás elvégzése. EnA dotoxint elsősorban a sejt veszi fel kami Kupffer (KK), kölcsönhatásba lép a membránreceptorral CD 14. Önmagaként tud kötődni a receptorhoz lipopoliszacharid(LPS), és lipid A-kötő fehérjével alkotott komplexe plazma csomó. Az LPS és a máj makrofágok kölcsönhatása reakciók kaszkádját váltja ki, amely a máj termelésén és felszabadulásakor citokinek és más biológiailag aktív anyagok közvetítők.

Számos publikáció született a makrofó szerepéről.májfluxus (CC) a bakteriális LPS befogásában és eltávolításában, azonban az endotélium kölcsönhatása más mesenchymális sejtekkel, különösen perisinusoidális Ito sejtek, gyakorlatilag nem vizsgálták.

KUTATÁSI TECHNIKA

200 g tömegű fehér hím patkányokat intraperitoneálisan 1 ml steril sóoldatban injektáltunk. erősen tisztított liofilizálva LPS E. coli 0111-es törzs 0,5-es adagokban,2,5, 10, 25 és 50 mg/kg. 0,5, 1, 3, 6, 12, 24, 72 óra és 1 hét elteltével a belső szerveket altatásban eltávolítottuk, és pufferolt 10%-os formalinba helyeztük. Az anyagot paraffin tömbökbe ágyazták. 5 μm vastag metszeteket festettek immunhisztokémiaisztreptavidin-biotin dezmin elleni antitestek által, α - sima izom aktin (A-GMA) és nukleáris antigén jól szaporodó sejtek ( PCNA, " Dako"). Desmint használták markerként perisinusoidálisIto sejtek, A-GMA - as ve marker myofibroblasztok, PCNA - szaporodó sejtek. Az endotoxin májsejtekben történő kimutatására tisztított anti-Re-glikolipidantitestek (KDO Általános és Klinikai Patológiai Intézete, Moszkva).

A VIZSGÁLAT EREDMÉNYEI

25 mg/ttkg és nagyobb dózisok esetén az LPS beadása után 6 órával halálos kimenetelű sokkot figyeltek meg. Az LPS májszövetre gyakorolt ​​akut hatása az Ito sejtek aktivációját okozta, ami számuk növekedésében nyilvánult meg. Szám desmin-pozitív 6 órával az LPS injekció után növekedett, és elérte a maximumot ma 48-72 órával (1. ábra, a, b).

Rizs. 1. A patkánymáj metszete vkit feldolgozott LSAB -nekem- chennyellenanyagok dec enyém(zenekar α - sima shechnomu aktin (v), x400 (a, b), x200 (c).

a - az endotoxi bevezetése előttbe, szingli desmin-pozitívIto sejtek a periportális zónában; b- 72 óraendotox bevezetése után to: számos desmin-pozitív Ito sejtek; v- en bevezetése után 120 órával Dotoxin: α - simaizom csak aktin van jelena simaizomsejtekhez kah edények.

1-ben heti szám desmin-pozitív sejtek csökkentek, de volta benchmark felett volt. Nál nél ennek megjelenését semmi esetre sem figyeltük meg A-GMA-pozitív sejtek a szinuszoidokban dah a máj. Belső pozitív kontroll az A-GMA elleni antitestekkel történő festéskor vér simaizomsejtek azonosítására szolgálta portális traktusok A-GMA-t tartalmazó vénás erei (1. ábra, v) Következésképpen az Ito-sejtek számának növekedése ellenére egy alkalommal az L PS új hatása nem vezet átalakuláshoz ( transzdifferenciálódás) miofibroblasztokká.

Rizs. 2. A máj metszetekezelt patkányok LSAB - jelölt antitestek PCNA. a - az en bevezetése előtt dotoxin: egyetlenszaporodó ő patociták, x200; b - 72 órával az endotoxin beadása után: számos proliferáló hepatocita, x400.

Számának növelése desmin-pozitív a sejtek a portálzónán belül kezdődtek. 6 órától 24 óráig az LPS beadása után perisinusoidális sejteket csak a portális traktusok környékén találtak, i.e. aci 1. zónájában nousa... 48-72 óra között, amikor mákot figyeltek megmaximális összeget desmin-pozitív ragasztó jelenlegi, az acin más területein jelentek meg; ennek ellenére Ito sejtjeinek nagy része mégis periportálisan helyezkedett el.

Talán ez annak köszönhető, hogy periportálisantalálható KK-k az elsők, amelyek elfogják a bélből a portális vénán keresztül vagy a szisztémás keringésből származó endotoxin. Ak a titált minőségellenőrzők széles skáláját állítják elő citokinek, amelyekről úgy gondolják, hogy kiváltják az Ito sejtek aktiválódását és transzdifferenciálódás miofibroblasztokká. Nyilvánvalóan ezért a máj aktivált makrofágjai közelében (az 1. acinus zónában) elhelyezkedő Ito sejtek reagálnak elsőként a citokinek felszabadulására. Vizsgálatunk során azonban nem figyeltük meg őket. transzdifferenciálódás v myofibroblasztok, és ez arra utal, hogy a CC és a hepatociták által kiválasztott citokinek a már megkezdett folyamatot támogató tényezőként szolgálhatnak. transzdifferenciálódás de valószínűleg nem tudják kiváltani egyetlen májterheléssel LPS-sel.

A sejtek proliferációs aktivitásának növekedését szintén főként az acinus 1. zónájában figyelték meg. Ez valószínűleg azt jelenti, hogy minden (vagy majdnem minden) folyamat kifelé irányul O- és az intercelluláris interakciók parakrin szabályozása, a periportális zónákban haladjon tovább. Az LPS beadása után 24 órával a proliferáló sejtek számának növekedését figyelték meg; a pozitív sejtek száma 72 órára nőtt (maximális proliferációs aktivitás, 2. ábra, a, b). Mind a hepatociták, mind a szinuszos sejtek szaporodtak. Azonban festés tovább PCNA nem ad a proliferáció típusának azonosításának képessége szinuszos sejtek. A szakirodalom szerint az endotoxin hatása fokozott a CC összege. Úgy tartják, hogy ez kb Mind a máj makrofágok szaporodása, mind a monociták más szervekből történő migrációja miatt jön létre. A CK által kibocsátott citokinek növelhetik az Ito sejtek proliferációs kapacitását. Ezért logikus azt feltételezni, hogy a proliferáló sejtek képviselve vannak perisinusoidális Ito sejtek. Számuk általunk rögzített növekedése láthatóan szükséges a növekedési faktorok szintézisének fokozásához és az extracelluláris mátrix helyreállításához károsodás esetén. Ez lehet az egyik láncszem a máj kompenzáló-helyreállító reakcióiban, hiszen az Ito-sejtek a fő forrásai az extracelluláris mátrix, az őssejt-faktor és a hepatocita növekedési faktor komponenseinek, amelyek a javításban és a differenciálódásban vesznek részt. a máj epiteliális sejtjeinek elváltozása. Hiányzó az Ito-sejtek ugyanazt az átalakulását myofibroblasztok azt jelzi, hogy egy endotoxin agressziós epizód nem elegendő a májfibrózis kialakulásához.

Így az endotox akut hatása sina számának növekedését okozza desmin-pozitív Ito sejtek, ami a májkárosodás közvetett jele. Mennyiség perisinusoidális sejtek növekszik, nyilvánvalóan szaporodásuk eredményeként. Az endotoxin-agresszió egyetlen epizódja visszafordulást okoz az én aktiválásom perisinusoidális Ito sejtekés nem vezet hozzájuk transzdifferenciálódás miofibroblasztokba. Ezzel kapcsolatban feltételezhető, hogy az aktiválási mechanizmusokban és transzdifferenciálódás Az Ito sejtek nemcsak az endotoxint és a citokineket, hanem az intercelluláris kölcsönhatások néhány egyéb tényezőjét is bevonták.

IRODALOM

1. Mayansky D.N., Visse E., Decker K. // Új határok hepatológia... Novoszibirszk, 1992.

2. Szalahov I.M., Ipatov A.I., Konev Yu.V., Yakovlev M.Yu. // A sikerek hazudnak, biol. 1998. T. 118. sz. 1.S. 33-49.

3. Yakovlev M. Yu. // Kazan ... m egység zhurn. 1988. No. 5. S. 353-358.

4. Freudenberg N., Piotraschke J., Galanos C. et al. // Virchows Boltív. [B]. 1992. Vol... 61. P. 343-349.

5. Gressner A. M. // Hepatogastronterológia... 1996. évf. 43. P. 92-103.

6. Schmidt C, Bladt F., Goedecke S. et al. // Természet. 1995. évf. 373., 6516. sz., 699-702.

7. Wisse E., Braet F., Luo D. et al. // Toxicol. Pathol. 1996. Vol. 24., 1. sz. P. 100-111.

Kulcsszavak

MÁJ / ITO STAR CELLS/ MORFOLÓGIA / JELLEMZŐK / A-VITAMIN / FIBRÓZIS / MÁJ / MÁJ CSILLAGSEJTEK / MORFOLÓGIA / JELLEMZŐK / A-VITAMIN / FIBRÓZIS

annotáció tudományos cikk az alapvető orvoslásról, a tudományos munka szerzője - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

Bevezetés. Az Ito-csillagsejtek (Ito stellate sejtek) szerepét a májfibrózis kialakulásában az egyik vezető szerepként azonosították, azonban az Ito-struktúra intravitális megjelenítését a klinikai gyakorlatban minimálisan használják. A munka célja: a PCI szerkezeti és funkcionális jellemzőinek bemutatása az intravitális májbiopsziák citológiai azonosításának eredményei alapján. Anyagok és metódusok. A biopsziás minták fény- és elektronmikroszkópiájának klasszikus módszereit és az eredeti technikákat ultravékony metszetekkel, rögzítéssel és festéssel alkalmaztam. Eredmények. Krónikus hepatitis C-ben szenvedő betegek májbiopsziáinak fény- és elektronmikroszkópos képei a PCI-k szerkezeti jellemzőit mutatják be különböző stádiumokban (nyugalom, aktiválás) és a myofibroblasztokká való átalakulás folyamatában. Következtetések. A klinikai morfológiai azonosítás és a PCI funkcionális állapotának felmérése eredeti módszereinek alkalmazása javítja a májfibrózis diagnosztikájának és előrejelzésének minőségét.

Kapcsolódó témák tudományos munkák az alapvető orvostudományról, a tudományos munka szerzője - Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Kondratovich I.A.

• A máj klinikai citológiája: Kupffer-sejtek

  2017 / Tsyrkunov V.M., Andreev V.P., Kravchuk R.I., Prokopchik N.I.

• Májba transzplantált autológ mezenchimális őssejtek morfológiai hatásainak monitorozása vírusos cirrhosisban (klinikai eset)

  2018 / Aukashnk S.P., Alenikova O.V., Tsyrkunov V.M., Isaykina Ya.I., Kravchuk R.I.

• Klinikai májmorfológia: nekrózis

  2017 / Tsyrkunov V.M., Prokopchik N.I., Andreev V.P., Kravchuk R.I.

• A májcsillagsejtek polimorfizmusa és szerepük a fibrogenezisben

  2008 / Aydagulova S.V., Kapustina V.I.

• A szinuszos májsejtek szerkezete HIV / hepatitis C vírus együttes fertőzésben szenvedő betegeknél

  2013 / Matievskaya N.V., Tsyrkunov V.M., Kravchuk R.I., Andreev V.P.

• A mesenchymális őssejtek, mint ígéretes módszer a májfibrózis/cirrhosis kezelésében

  2013 / Lukashik S.P., Aleinikova O.V., Tsyrkunov V.M., Isaykina Ya.I., Romanova O.N., Shimansky A.T., Kravchuk R.I.

• Patkánymáj myofibroblasztok izolálása és tenyésztése explantációval

  2012 / Miyanovich O., Shafigullina A.K., Rizvanov A.A., Kiyasov A.P.

• A májfibrózis kialakulásának patomorfológiai vonatkozásai HCV-fertőzésben és egyéb májkárosodásban: modern fogalmak

  2009 / Lukashik S.P., Tsyrkunov V.M.

• A májportális traktusok struktúráiból explantációval nyert patkány myofibroblasztok elemzése

  2013 / Miyanovich O., Katina M.N., Rizvanov A.A., Kiyasov A.P.

• Az átültetett májcsillagsejtek részt vesznek a részleges hepatektómia utáni szervregenerációban anélkül, hogy fennállna a májfibrózis kialakulásának veszélye

  2012 / Shafigullina A.K., Gumerova A.A., Trondin A.A., Titova M.A., Gazizov I.M., Burganova G.R., Kaligin M.S., Andreeva D.I., Rizvanov A.A., Mukhammedov A.R., Kiyasov A.P.

Bevezetés. Az Ito stellate sejtek (Hepatic Stellate Cells, HSC) szerepét a májfibrózis kialakulásában az egyik vezető szerepként azonosították, de a HSC struktúrák intravitális vizualizációjának alkalmazása a klinikai gyakorlatban minimális. A munka célja a HSC szerkezeti és funkcionális jellemzőinek bemutatása az intravitális májbiopsziás minták citológiai azonosításának eredményei alapján. Anyagok és metódusok. A biopsziás minták fény- és elektronmikroszkópiájának klasszikus módszereit alkalmaztam az eredeti ultravékony metszet, fixálás és festés technikáján belül. Eredmények. A krónikus hepatitis C-ben szenvedő betegek májbiopsziás mintáinak HSC szerkezeti jellemzőit fény- és elektronmikroszkópos fotóillusztrációk mutatják be. A HSC-k különböző szakaszaiban (pihenés, aktiválás) és a miofibroblasztokká való átalakulás folyamatában jelennek meg. Következtetések. A HSC funkcionális állapotának klinikai és morfológiai azonosítására és értékelésére szolgáló eredeti módszerek alkalmazása lehetővé teszi a májfibrózis diagnózisának és prognózisának minőségének javítását.

A tudományos munka szövege a "Máj klinikai citológiája: Ito csillagsejtek" témában

UDC 616.36-076.5

KLINIKAI MÁJCITOLÓGIA: CSILLAGSEJTEK ITO

Cirkunov V. M. ( [e-mail védett]), Andrejev V.P. ( [e-mail védett]), Kravchuk R.I. ( [e-mail védett]), Kondratovich I. A. ( [e-mail védett]) EE "Grodno State Medical University", Grodno, Fehéroroszország

Bevezetés. Az Ito-csillagsejtek (Ito stellate sejtek) szerepét a májfibrózis kialakulásában az egyik vezető szerepként azonosították, azonban az Ito-struktúra intravitális megjelenítését a klinikai gyakorlatban minimálisan használják.

A munka célja: a PCI szerkezeti és funkcionális jellemzőinek bemutatása az intravitális májbiopsziák citológiai azonosításának eredményei alapján.

Anyagok és metódusok. A biopsziás minták fény- és elektronmikroszkópiájának klasszikus módszereit és az eredeti technikákat ultravékony metszetekkel, rögzítéssel és festéssel alkalmaztam.

Eredmények. Krónikus hepatitis C-ben szenvedő betegek májbiopsziájának fény- és elektronmikroszkópos fotói a PCI-k szerkezeti jellemzőit mutatják be különböző stádiumokban (nyugalom, aktiválás) és a myofibroblasztokká való átalakulás folyamatában.

Következtetések. A klinikai morfológiai azonosítás és a PCI funkcionális állapotának felmérése eredeti módszereinek alkalmazása javítja a májfibrózis diagnosztikájának és előrejelzésének minőségét.

Kulcsszavak: máj, Ito-csillagsejtek, morfológia, jellemzők, A-vitamin, fibrózis.

Bevezetés

A legtöbb különböző etiológiájú krónikus diffúz májelváltozás, köztük a krónikus hepatitis C (CHC) kedvezőtlen kimenetele a májfibrózis, amelynek kialakulásában az aktivált fibroblasztok a fő résztvevői, amelyek fő forrásai az aktivált Ito stellate sejtek (IOCI) .

ZKI, szinonimája - máj csillagsejtek, zsírtároló sejtek, perisinusoid lipociták, csillagsejtek (angol Hepatic Stellate Cell, HSC, Cell of Ito, Ito cell). A ZKI-t először K. Kupffer írta le 1876-ban, és ő nevezte el csillagsejteknek ("Stemzellen"). T. Ito, miután zsírcseppeket talált bennük, először zsírelnyelőnek ("shibo-sesshusaibo") nevezte, majd miután megállapította, hogy a zsírt maguk a sejtek állítják elő glikogénből, - zsírtároló sejteknek (" shibo-chososaibo") ... 1971-ben K. Wake bebizonyította a Kupfffer-csillagsejtek és az Ito-féle zsírtároló sejt azonosságát, és azt, hogy ezek a sejtek „raktározzák” az A-vitamint.

A szervezetben jelenlévő A-vitamin körülbelül 80%-a a májban halmozódik fel, és az összes májretinoid akár 80%-a ZKI zsíros cseppekben rakódik le. A chilomikronokban lévő retinol-észterek bejutnak a májsejtekbe, ahol retinollá alakulnak, és A-vitamin komplexet képeznek retinol-kötő fehérjével (RBP), amely a perisinusoidális térbe szekretálódik, ahonnan a sejtek lerakják.

A PCI és a májfibrózis K. Popper által megállapított szoros kapcsolata inkább dinamikus, mint statikus funkciót mutatott be – azt a képességet, hogy közvetlenül részt vesznek az intralobuláris perihepatocelluláris mátrix remodellációjában.

A máj morfológiai vizsgálatának fő módszere, amelyet az intravitális biopsziák változásainak felmérésére végeznek, a fénymikroszkópia, amely a klinikai gyakorlatban lehetővé teszi a máj aktivitásának megállapítását.

égés és a krónikusság stádiuma. A módszer hátránya az alacsony felbontás, amely nem teszi lehetővé a sejtek szerkezeti jellemzőinek, intracelluláris organellumoknak, zárványoknak és funkcionális jellemzőknek a felmérését. A máj ultrastrukturális elváltozásainak élethosszig tartó elektronmikroszkópos vizsgálata lehetővé teszi a fénymikroszkópos adatok kiegészítését, diagnosztikai értékük növelését.

Ebből a szempontból a máj PCI-k azonosítása, fenotípusuk vizsgálata transzdifferenciálódási folyamatban, szaporodásuk intenzitásának meghatározása a legfontosabb hozzájárulás a májbetegségek kimenetelének előrejelzéséhez, valamint a patomorfológiához, ill. a fibrogenezis patofiziológiája.

Cél - a PCI szerkezeti és funkcionális jellemzőinek bemutatása az intravitális májbiopsziák citológiai azonosításának eredményei alapján.

Anyagok és metódusok

Az intravitális májbiopsziát aspirációs májbiopsziával végezték olyan CHC-s (HCV RNS +) betegeknél, akiktől írásos beleegyezést kaptak.

A félvékony metszetek fénymikroszkópos vizsgálatához a betegek 0,5 ^ 2 mm méretű májbiopsziás mintáit kettős rögzítési módszerrel rögzítettük: először a Sato Taizan módszerrel, majd a szövetmintákat 1 órán keresztül fixáltuk. % ozmium fixáló 0,1 M foszfát Serensen pufferben, pH 7,4. Az intracelluláris struktúrák és az intersticiális anyagok jobb azonosítása érdekében félvékony metszeteken 1%-os ozmium-tetroxidban kálium-dikromátot (K2Cr207) vagy króm-anhidrid kristályokat (1 mg/ml) adtunk hozzá. A mintákat növekvő koncentrációjú alkoholos és acetonos oldatsorozatban dehidratáltuk, majd butil-metakrilát és sztirol előpolimerizált keverékébe helyeztük, és 55 °C-on polimerizáltuk. A félvékony metszeteket (1 μm vastag) egymás után megfestettük

azúrkék II-alap fukszin. A mikrofelvételeket digitális videokamerával (Leica FC 320, Németország) készítettük.

Elektronmikroszkópos vizsgálatot végeztünk 0,5x1,0 mm méretű, 1%-os ozmium-tetroxid oldattal 0,1 M Milloni-ha pufferben (pH 7,4) +40 C-on 2 órán át fixált májbiopsziás mintákon. Növekvő koncentrációjú alkoholos és acetonos dehidratálás után a mintákat aralditba öntöttük. A kapott blokkokból félvékony metszeteket (400 nm) készítettünk Leica EM VC7 ultramikrotomon (Németország), és metilénkékkel megfestettük. A preparátumokat fénymikroszkóp alatt megvizsgáltuk, és az ultrastrukturális változások további vizsgálatára azonos típusú helyet választottunk ki. Az ultravékony metszeteket (35 nm) 2%-os uranil-acetátos 50%-os metanolos és ólom-citrátos oldattal kontrasztáltuk E. S. Reynolds szerint. Az elektronmikroszkópos preparátumokat JEM-1011 elektronmikroszkóppal (JEOL, Japán) vizsgálták 10 000-60 000-es nagyítással, 80 kW gyorsítófeszültség mellett. A képek készítéséhez egy Olympus MegaViewIII digitális fényképezőgépből (Németország) és egy iTEM képfeldolgozó szoftverből (Olympus, Németország) álló komplexumot használtak.

Eredmények és vita

A ZKI a perisinusoidális térben (Disse) a hepatociták és az endothelsejtek közötti zsebekben található, hosszú folyamatokkal rendelkezik, amelyek mélyen behatolnak a hepatociták közé. A legtöbb publikációban, amely a PCI-k e populációjával foglalkozik, sematikus ábrázolásuk van megadva, ami csak a PCI-k "területi" hovatartozásának jelzését teszi lehetővé a májban és a környező "szomszédokhoz" (1. ábra).

A PCI-k szoros kapcsolatban állnak az endothel sejtekkel a nem teljes alapmembrán-komponensek és az intersticiális kollagénrostok révén. Az idegvégződések behatolnak a PCI és a parenchymás sejtek közé, ezért a Disse-teret a parenchymalis sejtek lemezei közötti térként definiálják.

PCI és endoteliális sejtek komplexe.

Úgy gondolják, hogy a PCB-k a fejlődő máj keresztirányú septumának rosszul differenciált mezenchimális sejtjeiből származnak. A kísérlet megállapította, hogy a hematopoietikus őssejtek részt vesznek a PCI kialakulásában, és ez a folyamat nem a sejtfúziónak köszönhető.

A szinuszos sejtek (SC), elsősorban a ZKI, vezető szerepet töltenek be a májregeneráció minden típusában. A fibrózisos májregeneráció a PCI és a csontvelői őssejtek ősfunkcióinak gátlása eredményeként következik be. A humán májban a ZKI 5-15%-ot tesz ki, egyike a 4 mesenchymalis eredetű SC típusnak: Kupffer-sejtek, endoteliociták, Pd-sejtek. Az SC pool 20-25% leukocitát is tartalmaz.

A PCA citoplazmájában zsírzárványok találhatók retinollal, trigliceridekkel, foszfolipidekkel, koleszterinnel, szabad zsírsavakkal, a-aktinnal és dezminnel. A ZKI megjelenítéséhez arany-kloridos festést használnak. Kísérletileg megállapították, hogy a PCI más miofibroblasztoktól való megkülönböztetésének markere a reelin fehérje expressziója.

A PCI-k csendes („inaktív PCI”), átmeneti és hosszú távú aktivált állapotban léteznek, amelyek mindegyikét génexpresszió és fenotípus jellemez (aNMA, ICAM-1, kemokinek és citokinek).

Az inaktív állapotban lévő ZKI lekerekített, enyhén megnyúlt vagy szabálytalan alakú, nagy maggal és fényes vizualizációs jellel rendelkezik - retinolt tartalmazó lipidzárványok (cseppek) (2. ábra).

Az inaktív PCI-ben a lipidcseppek száma eléri a 30-at vagy annál többet, méretükben közel vannak egymáshoz, egymáshoz illeszkednek, benyomódnak a sejtmagba és a perifériára nyomják azt (2. ábra). A kis zárványok nagy cseppek között helyezkedhetnek el. A cseppek színe a fixálószertől és az anyag színétől függ. Az egyik esetben világosak (2a. ábra), a másikban sötétzöldek (2b. ábra).

1. ábra - A PCI (stellatecell, perisinusoid lipocyte) elhelyezkedésének vázlata Disse perisinusoidális terében (Disse space), internetes forrás

2. ábra - ZKI inaktív állapotban

a - ZKI lekerekített, magas lipidcsepp-tartalommal világos színű (fehér nyilak), hepatociták (Hz) kimerült citoplazmával (fekete nyíl); b - ZKI sötét színű lipidcseppekkel, szorosan érintkezik egy makrofággal (Mf); a-b - félvékony szeletek. Az Azur II szín a fő fukszin. Mikrográfok. elvittem. 1000; c - ZKI bőséges lipidcseppekkel (több mint 30), szabálytalan alakú (magn. 6000); A ZKI r-ultrastrukturális komponensei: l-lipidcseppek, mitokondriumok (narancssárga nyilak), GRES (zöld nyilak), Golgi komplex (piros nyíl), uv. 15 000; c-d - elektrondiffrakciós minták

Elektronmikroszkóppal egy ozmiofilebb perem képződik a könnyű lipid szubsztrát hátterében (5a. ábra). A nagy lipidzárványok mellett a „pihenő” PCI-k többségében észrevehetően kis mennyiségű citoplazmatikus mátrix található, amely szegény mitokondriumban (Mx) és granuláris endoplazmatikus retikulumban (GRES). Ugyanakkor a közepesen fejlett Golgi-komplexum rekeszei jól láthatóak egy 3-4 lapított, kissé kiszélesedett végű ciszterna köteg formájában (2d. ábra).

Bizonyos körülmények között az aktivált PCI-k vegyes vagy átmeneti fenotípust kapnak, kombinálva a lipidtartalmú és a fibroblasztszerű sejtek morfológiai jellemzőit (3. ábra).

Az átmeneti PCV fenotípusnak is megvannak a maga morfológiai jellemzői. A sejt megnyúlt alakot kap, csökken a lipidzárványok száma, csökken a nukleolemma invaginációinak száma. A számos kötött riboszómával és szabad riboszómával rendelkező GRES-ciszternát tartalmazó citoplazma térfogata, Mx, megnő. A lamelláris Golgi-komplexum komponenseinek hiperpláziája, amelyet több, 3-8 lapított ciszternából álló halom képvisel, megnő a lebomlásban részt vevő lizoszómák száma.

3. ábra - ZKI tranziens állapotban

a - ZKI (fehér nyilak). Félvékony szelet. Az Azur II szín a fő fukszin. Mikrográfia. elvittem. 1000; b - ZKI megnyúlt és kis mennyiségű lipidcseppekkel; sw. 8000; c - Kupfffer sejtekkel (KK) és limfocitákkal (Lc) érintkező ZKI, uv. 6 000. (Hz - hepatocita, l - lipidcseppek, E - eritrocita); d - mitokondriumok (narancssárga nyilak), GRES (zöld nyilak), Gold-ji (piros nyíl), lizoszómák (kék nyilak), magn. 20 000; b, c, d - elektrondiffrakciós minták

lipidcseppek képződését (3d. ábra). A GRES és a Golgi-komplex komponenseinek hiperpláziája a fibroblasztok kollagénmolekulákat szintetizáló, valamint az endoplazmatikus retikulumban és a Golgi-komplex elemeiben történő poszttranszlációs hidroxilációval és glikozilációval történő modellezési képességével függ össze.

A sértetlen májban a ZKI nyugodt állapotban lefedi folyamataival a szinuszos kapillárist. A PCI folyamatai két típusra oszthatók: perisinusoidális (subendoteliális) és interhepatocelluláris (4. ábra).

Az elsők elhagyják a sejttestet, és a szinuszos kapilláris felületén húzódnak, vékony ujjszerű ágakkal borítva. Rövid bolyhok borítják őket, és jellegzetes hosszú mikro-ejekciókkal rendelkeznek, amelyek még tovább nyúlnak a kapilláris endothel cső felületén. Az interhepatocelluláris kinövések, miután legyőzték a hepatociták lemezét, és elérik a szomszédos sinusoidot, több perisinusoidális kinövésre oszlanak. Így a PCR átlagosan több mint két szomszédos szinuszoidot fed le.

Májkárosodás esetén a PCI és a fibrogenezis folyamata aktiválódik, melyben 3 fázist különböztetnek meg. Ezeket iniciációnak, meghosszabbításnak és feloldódásnak (a rostos szövet feloldódásának) nevezik. A „pihenő” PCI fibrózisos miofibroblasztokká történő átalakulásának ezt a folyamatát citokinek indítják be (^ -1, ^ -6,

4. ábra - Perisinusoidális (subendoteliális) és interhepatocelluláris folyamatok (kinövések) PCI

a - a sejttestből kilépő PCI (sárga nyilak) folyamata, uv. 30 000; b - a PCI folyamata, amely a szinuszos kapilláris felszíne mentén helyezkedik el, és lipidcseppet tartalmaz, uv. 30 000; c - a PCI szubendoteliálisan elhelyezkedő folyamatai. Endothel sejtfolyamatok (rózsaszín nyilak); d - a PCI interhepatocelluláris folyamata; a PCI és a hepatocita membránjainak pusztulási területe (fekete nyilak), uv. 10 000. Elektrondiffrakciós minták

TOT-a), aluloxidált anyagcseretermékek, reaktív oxigénfajták, nitrogén-monoxid, endotelin, vérlemezke-aktiváló faktor (PDGF), plazminogén aktivátor, transzformáló növekedési faktor (TGF-1), acetaldehid és még sokan mások. A közvetlen aktivátorok az oxidatív stressz állapotában lévő hepatociták, a Kupffer-sejtek, az endotélsejtek, a leukociták, a citokineket termelő vérlemezkék (parakrin jelek) és maguk a PCI-k (autokrin stimuláció). Az aktiválást új gének expressziója (aktiválása), az extracelluláris mátrix citokinek és fehérjéinek szintézise (I, III, U típusú kollagén) kíséri.

Ebben a szakaszban a PCA aktiválási folyamat befejezhető a PCA-ban lévő gyulladásgátló citokinek képződésének stimulálásával, amelyek gátolják a makrofágok TOT termelését a sérült területen. Ennek eredményeként a ZKI mennyisége meredeken csökken, apoptózison mennek keresztül, és nem alakulnak ki a máj fibrózisos folyamatai.

A második fázisban (elnyújtott), az aktiváló ingerek hosszan tartó állandó parakrin és autokrin hatásával a PCI-ben egy aktivált fenotípus „fenntartott”, amelyet a PCI kontraktilis myofibroblaszt-szerű sejtekké való átalakulása jellemez, amelyek extracelluláris fibrilláris kollagént szintetizálnak.

Az aktivált fenotípust proliferáció, kemotaxis, kontraktilitás, retinoidraktárak elvesztése és myofibroblaszt-szerű sejtek képződése jellemzi. Az aktivált PCR-ek az új gének, például az a-SMA, ICAM-1, kemokinek és citokinek fokozott szintjét is mutatják. A sejtaktiváció a fibrogenezis korai szakaszának kezdetét jelzi, és megelőzi az ECM fehérjék fokozott termelését. A létrejövő rostos szövet a mátrix mátrix metaloproteinázok (MMP-k) segítségével történő hasítása következtében átalakul. A mátrix lebontását viszont a mátrix metaloproteinázok (TIMP) szöveti inhibitorai szabályozzák. Az MMP-k és a TIMP-k a cinkfüggő enzimek családjának tagjai. Az MMP-k PCA-ban inaktív zimogén enzimek formájában szintetizálódnak, amelyek a propeptid hasításakor aktiválódnak, de gátolják az endogén TIMP-kkel, TIMP-1-gyel és TIMP-2-vel való kölcsönhatást. A PCI-k 4 féle membrán típusú MMP-t termelnek, amelyeket az IL-1 p aktivál. Az MMP-k közül kiemelt jelentőséget tulajdonítanak az MMPs-9-nek, egy semleges mátrix metalloproteináznak, amely aktív az alapmembrán részét képező 4-es típusú kollagénnel, valamint a részlegesen denaturált 1-es és 5-ös típusú kollagénekkel szemben.

A különböző típusú májkárosodással járó PCI populáció növekedését számos mitogén faktor, a kapcsolódó tirozin kináz receptorok és más azonosított mitogének aktivitása alapján ítélik meg, amelyek a legkifejezettebb PCI proliferációt okozzák: endotelin-1, trombin, FGF - fibroblaszt növekedési faktor, PDGF - endoteliális növekedési faktor erek, IGF - inzulinszerű növekedési faktor. A PCI felhalmozódása a májkárosodás területein nemcsak e sejtek proliferációja miatt következik be, hanem a kemotaxis által ezekre a területekre irányuló irányított migrációjuk miatt is, olyan kemoattraktánsok részvételével, mint a PDGF és a leukocita kemoattraktáns-MCP (monocita kemotaktikus). fehérje-1).

Az aktivált PCI-ben a lipidcseppek száma 1-3-ra csökken azzal, hogy a sejt ellentétes pólusain helyezkednek el (5. ábra).

Az aktivált PCI-k megnyúlt alakot kapnak, a citoplazma jelentős területeit a Golgi-komplex foglalja el, és a GRES számos ciszternája feltárul (a fehérjeszintézis indikátora exportra). A többi organellum száma csökken: kevés a szabad riboszóma és poliszóma, egyetlen mitokondrium, szabálytalanul - lizoszómák (6. ábra).

2007-ben a ZKI-t először máj őssejteknek nevezték el, mivel a hematopoietikus mezenchimális őssejtek egyik markerét, a CD133-at expresszálják.

5. ábra - ZKI, amelyek aktivált állapotban vannak

a, b - PCI (kék nyilak), egyetlen lipid zárványokkal, amelyek a sejtmag ellentétes pólusain lokalizálódnak. A perisinusoidális kötőszövet (6a. ábra) és a hepatocita körüli intercelluláris mátrixréteg (6b. ábra) vörös színű. Citotoxikus limfociták (lila nyilak). Endothel sejt (fehér nyíl). Szoros érintkezés a plazmasejt (piros nyíl) és a hepatocita között. Félvékony szeletekre. Az Azur II szín a fő fukszin. Mikrográfok. elvittem. 1000; c, d - a PCR ultrastrukturális komponensei: mitokondriumok (narancssárga nyilak), Golgi komplexum (piros nyíl), ozmiofilebb cisz-oldalának ciszternái, amelyek a szemcsés endoplazmatikus retikulum kitágult elemei felé néznek (zöld nyilak), lizoszóma (kék nyíl) ( nagyítás 10 000 és 20 000); c, d - elektrondiffrakciós minták

A normál májban hiányzó myofibroblasztoknak három lehetséges forrásuk van: először is a méhen belüli májfejlődés során a portális traktusokban a myofibroblasztok érésük során körülveszik az ereket és az epevezetékeket, majd miután a máj teljesen kifejlődött, eltűnnek és a portális pályákban portális fibroblasztok helyettesítik; a második - májkárosodás esetén a portális mesenchymalis sejtek és a nyugalmi PCI, ritkábban az átmeneti epiteliális-mezenchimális sejtek miatt képződnek. Jellemzőjük a CD45-, CD34-, Desmin +, a (GFAP) + és Thy-1 + gliafibrilláris fehérje jelenléte.

A legújabb tanulmányok kimutatták, hogy a hepatociták, kolangiociták és endoteliális sejtek miofibroblasztokká válhatnak a hámsejteken vagy az endothel-mesenchymális sejt átmeneten (EMT) keresztül. Ezek a sejtek közé tartoznak az olyan markerek, mint a CD45-, albumin+ (azaz hepatociták), CD45-, CK19+ (azaz kolangiociták) vagy Tie-2+ (endothelsejtek).

6. ábra - A PCI magas fibrotikus aktivitása

a, b - myofibroblast (Mfb), a sejt tartalmaz egy nagy sejtmagot, a GRES elemeit (piros nyilak), számos szabad riboszómát, polimorf vezikulákat és granulátumokat, egyetlen mitokondriumot és egy fényes vizualizációs jelet - egy köteg aktin filamentumot a citoplazmában (sárga nyilak); elvette. 12 000 és 40 000; c, d, e, f - a PCI magas fibrotikus aktivitása, miközben megtartja a retinoid tartalmú lipidcseppeket a citoplazmában. Számos kollagénszál köteg (fehér nyilak), amelyek megtartották (a) és elvesztették (d, e, f) specifikus keresztcsíkozást; elvette. 25 000, 15 000, 8 000, 15 000. Elektrondiffrakciós minták

Ezenkívül a fibrocitákból és a keringő mezenchimális sejtekből álló csontvelősejtek miofibroblasztokká alakulhatnak át. Ezek a CD45 + sejtek (fibrociták), CD45 +/- (keringő mezenchimális sejtek), 1+ típusú kollagén, CD11d + és MHC 11+ osztály (7. ábra).

A szakirodalmi adatok nemcsak az ovális sejtek proliferációja és a szinuszos sejtek proliferációja közötti szoros kapcsolatot igazolják, hanem a PCI májhámba való lehetséges differenciálódására vonatkozó adatok is, amelyet a perisinusoid sejtek mezenchimális-epiteliális transzformációjának neveztek.

Fibrogén aktiváció állapotában a myofibroblaszt-szerű PCI-ket a lipidcseppek számának csökkenésével és ezt követő eltűnésével együtt fokális proliferáció (8. ábra), fibroblaszt-szerű markerek immunhisztokémiai expressziója jellemzi, beleértve a simaizom a-aktint is. , és a rostokban a pericelluláris kollagén rostok képződése.

A fibrózis kialakulásának szakaszában a májszövet fokozódó hipoxiája a proinflammatorikus adhéziós molekulák - 1CAM-1, 1CAM-2, VEGF, gyulladást előidéző ​​- őssejtek további túlzott expressziójának tényezőjévé válik.

A duktális máj progenitor sejtek kölcsönhatása a máj myofibroblasztjaival

Miofibroblaszt-szerű PCB-k fibrogén aktiválás állapotában.

7. ábra - A PCI myofibroblasztos aktiválásában résztvevők

terápiás kemoattraktánsok - M-CSF, MCP-1 (monocita kemotaktikus fehérje-1) és SGS (citokin-közvetített neutrofil kemoattraktáns) és mások, amelyek stimulálják a gyulladást elősegítő citokinek képződését (TGF-b, PDGF, FGF, PAF, SCF, ET-1) és fokozza a fibrogenezis folyamatait a májban, megteremtve a feltételeket a PCI és a fibrogenezis folyamatok folyamatos aktiválásának önfenntartó indukciójához.

Mikroszkópos készítményeken a perikapilláris fibrózis a perisinusoidális kötőszövet intenzív színe és a hepatociták körüli (gyakran elhaló) intercelluláris mátrixréteg formájában nyilvánul meg. Az elektronmikroszkópos preparátumokon a fibrotikus változások vagy kollagénrostok nagy kötegei formájában láthatók, amelyek megőrizték keresztirányú csíkozásukat, vagy masszív szálak formájában.

lerakódik a Disse térben egy rostos tömeg, amely duzzadt és a kollagénrostok, amelyek elvesztették a periodikus csíkozást (9. ábra).

A modern fogalmak szerint a fibrózis egy dinamikus folyamat, amely előrehaladhat és visszafejlődik (10. ábra).

A közelmúltban a PCI számos specifikus markerét javasolták: az A-vitamin (BA) virágzása lipidcseppekké, GFAP, a p75 NGF receptor és a szinaptofizin. Vizsgálatok folynak a máj PCI-nek a máj őssejtek proliferációjában és differenciálódásában való részvételével kapcsolatban.

Vizsgáltuk a VA-val komplexet képező retinol-kötő fehérje (RSB-4) tartalmát, amelynek a vérplazmában lévő koncentrációja normálisan korrelál a szervezet VA-ellátásával, melynek 80%-a a PCI-ben található.

A tartalom kapcsolata

8. ábra - PCI fokális proliferációja fibrogén aktiváció állapotában

a - PCI hiperplázia (fehér nyilak) a kitágult sinusoidok lumenében; b - transzdifferenciált PCI (fehér nyilak), endoteliális sejt (rózsaszín nyíl) proliferációja. Félvékony szeletekre. Az Azur II szín a fő fukszin. Mikrográfok. elvittem. 1000

9. ábra - A PCI myofibroblastos aktiválásának végső szakasza

a, b - perisinusoidális fibrózis (fehér nyilak). A peri-szinuszos kötőszövet és a hepatociták körüli intercelluláris mátrixréteg (b) bázikus fukszinnal vörösre színeződik. PCI aktiválva és fibroblasztokká alakulva (kék nyilak). Hz az ábrán. a - kimerült citoplazmával rendelkező májsejtek. Félvékony szeletekre. Az Azur II szín a fő fukszin. Mikrográfok. elvittem. 1000; c, d - perisinusoidális és perihepatocelluláris fibrózis a májlebenyben, a kollagénszálak megnövekedett elektronsűrűsége; a mitokondriális mátrix kondenzációja a hepatocitában (narancssárga nyíl). Uv. 8000, illetve 15000. Elektrondiffrakciós minták

1. táblázat - Az RSB-4 tartalom mutatói különböző etiológiájú májcirrhosisban (LC) és krónikus hepatitisben (CG) szenvedő betegeknél, ng / ml (M ± m)

n csoport M ± m p

Májcirrhosis 17 23,6 ± 2,29<0,05

CG, AsAT norm 16 36,9 ± 2,05 *> 0,05

CG, ASAT> 2 norma 13 33,0 ± 3,04 *> 0,05

CG, ALAT norma 13 37,5 ± 3,02 *> 0,05

CG, ALAT> 2 norma 21 35,9 ± 2,25 *> 0,05

Kontroll 15 31,2 ± 2,82

Megjegyzés: p - jelentős különbségek a kontrollhoz képest (o<0,05); * - достоверные различия между ЦП и ХГ (р<0,05)

Pszeudo-lebeny, amelyet rostos septum felbontás veszi körül rostos septummal. Színezés a hamis lebeny tömegkörének megfelelően. Színezés nu.Uv.x50 Masson szerint. UV.x200

10. ábra - Vírusos cirrhosisban szenvedő beteg hamis lebenyében bekövetkezett események dinamikája 6 hónappal autológ mezenchimális őssejtek májba történő transzplantációja után

RSB-4-et és 4-es stádiumú fibrózist (cirrhosis) eszünk, ellentétben a krónikus hepatitisszel, amelyben ilyen függőséget nem lehetett kimutatni, függetlenül a máj gyulladásos aktivitásának biokémiai markereitől.

Ezt a tényt figyelembe kell venni a szervezet VA-hiányának megszüntetésére irányuló szubsztitúciós terápia indokolásakor, ami a májfibrózis előrehaladása miatti PCI-potenciál kimerüléséből fakadhat.

1. A PCI szerkezeti és funkcionális állapotának felmérésének maximális hatékonyságát az intravitális biopszia morfológiai vizsgálata biztosítja egy komplex sejtvizualizációs technikák (fény-, ultravékony metszetek elektronmikroszkópos vizsgálata és eredeti rögzítési és rögzítési módszerek) egyidejű alkalmazásával. festés).

2. A PCI morfológiai vizsgálatainak eredményei lehetővé teszik a fibrózis intravitális diagnosztikájának minőségének javítását, monitorozását és a krónikus diffúz májelváltozások kimenetelének korszerűbb színvonalú előrejelzését.

3. A morfológiai következtetések eredményei lehetővé teszik a klinikus számára, hogy a végső diagnózis megfogalmazásába a terápia során frissített adatokat is beépítsen a krónikusság stádiumára (a fibrózis stabilizálása, progressziója vagy megszűnése).

Irodalom

1. Ivashkin, VT A prefibrotikus elváltozások klinikai tünetei: az All-Russian Internet Congress of Internal Medicine Specialists előadásának átirata / VT Ivashkin, AO Bueverov // BELSŐNÖK: National Internet Society of Internal Medicine Specialists. - 2013. - Hozzáférési mód: http:// belgyógyász. ru / kiadványok / részlet / 6569 /. - Hozzáférés időpontja: 2016.11.21.

2. Kiyasov, AP Ovális sejtek – feltételezett máj őssejtek vagy hepatoblasztok? / A. P. Kiyasov, A. A. Gumerova, M. A. Titova // Sejttranszplantáció és szövetsebészet. - 2006. - T. 2., 4. sz. - S. 55-58.

1. Ivashkin, VT Klinicheskaya simptomatika dofibroticheskih izmenenij: stenogramma lekcii Vserossijskogo Internet-Kongressa specialistov po vnutrennim boleznyam / VT Ivashkin, AO Bueverov // INTERNIST: Nacional "noe Internet-special - Adatok dosztupa: 2016.11.21.

2. Kiyasov, AP Oval "nye kletki - predpolagaemye stvolovye kletki pecheni ili gepatoblasty? / AP Kiyasov, AA Gumerova, MA Titova // Kletochnaya transplantologiya i tkanevaya inzheneriya. - 2006. - T. 5. 2. - S. 5. - 58.

3. A szinuszos májsejtek és a csontvelősejtek szerepéről az egészséges és sérült máj regenerációs stratégiájában / A. V. Lundup [et al.] // Bulletin of transplantology and mesterséges organs. -2010. - XII T., 1. sz. - S. 78-85.

4. Serov, VV Morfológiai kritériumok az etiológiának, az aktivitás mértékének és a folyamat stádiumának értékelésére vírusos krónikus hepatitis B és C esetén / VV Serov, LO Severgina // A patológia archívuma. - 1996. - 4. sz. - S. 61-64.

5. A stellate májsejtek szerkezeti és funkcionális jellemzői a fibrózis dinamikájában / OA Postnikova [et al.] // Fundamental research. - 2011. - 10. sz.

6. Májcsillagsejtek ultrastrukturális és immunhisztokémiai vizsgálata a májfibrózis és fertőző virális genezis cirrhosisának dinamikájában / GI Nepomnyashikh [et al.] // Bulletin of Experimental Biology and Medicine. - 2006. - T. 142., 12. sz. - S. 681-686.

7. Shcheglev, AI A szinuszos májsejtek szerkezeti és metabolikus jellemzői / AI Shcheglev, OD Mishnev // Advances in modern biology. - 1991. - T. 3., 1. sz. - S. 73-82.

10. Az étrendi retinoid és a triglicerid hatása patkánymáj csillagsejtek lipidösszetételére és a csillagsejtek lipidcseppjeire / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - 1. évf. 29 .-- R. 1523-1534.

13. Friedman, S. Hepatic fibrosis 2006: Report of the Third AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - 20. évf. 45 (1). - R. 242-249.

18. Iredale, J. P. Hepatic Stellate Cell Behavior during Resolution of Liver Injury / J. P. Iredale // Semin. Liver Dis. -2001. - Vol. 21. (3) bekezdése alapján. - R. 427-436.

19. Kobold, D. Reelin expressziója májcsillagsejtekben és a májszövet javítása során: új marker a HSC más májmiofibroblasztoktól való megkülönböztetésére / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - 20. évf. 36. (5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Humán máj myofibroblasztjai a fejlődés során és a portálra (myo) összpontosító betegségek

3. O roli sinusoid "nyh kletok pecheni i kletok kostnogo mozga v obespechenii regeneratornoj strategii zdorovoj i povrezhdennoj pecheni / A. V. Lyundup // Vestnik transplantologii i iskusstvennyh organov. - 2010. S. HII-8.

4. Serov, V. V. Morfologicheskie kriterii ocenki ehtiologii, stepeni aktivnosti i stadii processa pri virusnyh hronicheskih gepatitah V i S / V. V. Serov, L. O. Severgina // Arhiv patologii.

1996. - 4. sz. - S. 61-64.

5. Strukturno-functional "naya harakteristika zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza / O. A. Postnikova // Fundamental" nye issledovaniya. - 2011. - 10. szám - C. 359-362.

6. Ul "trastrukturnoe i immunogistohimicheskoe issledovanie zvezdchatyh kletok pecheni v dinamike fibroza i cirroza pecheni infekcionno-virusnogo geneza / GI Nepomnyashchih // Byulleten" ehksperimental "12. -686.

7. SHCHeglev, A. I. Strukturno-metabolicheskaya harakteristika sinusoid "nyh kletok pecheni / A. I. SHCHeglev, O. D. Mishnev // Uspekhi sovremennoj biologii. - 1991. - T. 3, No. 1. - S. 8.

8. A CD34 májcsillagsejtek progenitorsejtek / C. Kordes // Biochem., Biophys. Res. Gyakori. - 2007. -Kt. 352 (2). - P. 410-417.

9. Mátrixfehérjék lebontása májfibrózisban / M. J. Arthur // Pathol. Res. Gyakorlat. - 1994. - 1. évf. 190 (9-10).

10. Az étrendi retinoid és a triglicerid hatása patkánymáj csillagsejtek lipidösszetételére és a csillagsejtek lipidcseppjeire / H. Moriwaki // J. Lipid. Res. - 1988. - 1. évf. 29. - R. 1523-1534.

11. A magzati máj epiteliális-mezenchimális átmenetben lévő sejtekből áll / J. Chagraoni // Blood. - 2003. - 1. évf. 101. - P. 2973-2982.

12. Biológiai minták rögzítése, dehidratálása és beágyazása / A. M. Glauert // Practical Methods in Electron Microscopy. - New York: Am. Elsevier, 1975. – 1. évf. 3, 1. rész.

13. Friedman, S. Hepatic fibrosis 2006: Report of the Third AASLD Single Topic Conference / S. Friedman, D. Rockey, B. Montgomery // Hepatology. - 2006. - 20. évf. 45 (1). - R. 242-249.

14. Gaga, M. D. A humán és rathepatikus csillagsejtek őssejtfaktort termelnek: lehetséges mechanizmus a hízósejtek toborzásához májfibrózisban / M. D. Gaga // J. Hepatol. - 1999. - Vol. 30., 5. sz. - 850-858.

15. Glauert, A. M. Araldite as beágyazó közeg elektronmikroszkópiához / A. M. Glauert, R. H. Glauert // J. Biophys. Biochem. Cytol. - 1958. - 1. évf. 4. - P. 409-414.

16. A májcsillagsejtek és a portális fibroblasztok a kollagén és lizil-oxidáz fő sejtforrásai normál májban és korai sérülés után / M. Perepelyuk // Am. J. Physiol. Gasztrointeszt. Liver Physiol. - 2013. - Kt. 304 (6). - P. 605614.

17. A hepatitis C vírus mag- és nem szerkezeti fehérjéi fibrogén hatást váltanak ki a máj csillagsejtekben / R. Bataller // Gasztroenterológia. - 2004. - 1. évf. 126, iss. 2. - P. 529-540.

18. Iredale, J. P. Hepatic Stellate Cell Behavior during Resolution of Liver Injury / J. P. Iredale // Semin. Liver Dis. -2001. - Vol. 21. (3) bekezdése alapján. - R. 427-436.

19. Kobold, D. Reelin expressziója májcsillagsejtekben és a májszövet javítása során: új marker a HSC más májmiofibroblasztoktól való megkülönböztetésére / D. Kobold // J. Hepatol. - 2002. - 20. évf. 36. (5). - R. 607-613.

20. Lepreux, S. Humán máj myofibroblasztjai a fejlődés során és betegségek a portális (myo) fibroblasztokra fókuszálva / S. Lepreux, A. Desmouliére

fibroblasztok / S. Lepreux, A. Desmouliere // Front. Physiol. - 2015. - Hozzáférés módja: http://dx.doi. org / 10.3389 / fphys.2015.00173. - Hozzáférés időpontja: 2016.10.31.

22. Mezenchimális csontvelő-eredetű őssejt-transzplantáció HCV-vel kapcsolatos májcirrhosisban szenvedő betegeknél / S. Lukashyk // J. Clin. Ford. Hepatol. - 2014. - Kt. 2, iss. 4. - P. 217-221.

23. Millonig, G. A. Advantages of a phosphate puffer for osmium tetroxide solutions in fixation / G. A. Millonig // J. Appl. Fizika. - 1961. - 1. évf. 32. - P. 1637-1643.

Vol. 158. - P. 1313-1323.

Vol. 24. - P. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis von Vitamin Aimamanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - 1. évf. 14. - P. 1213-1217.

30. A myofibroblast biológia legújabb fejleményei: paradigmák a kötőszöveti remodellinghez / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Kt. 180. - P. 1340-1355.

35. A Septum transversum eredetű mesothelium májcsillagsejteket és perivascularis mesenchymalis sejteket eredményez fejlődő egérmájban / K. Asahina // Hepatology. -2011. - Vol. 53. - P. 983-995.

Vol. 50. - P. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatikus angiogenezis és szinuszos remodelling krónikus májbetegségben: új célok a portális hipertónia kezelésében? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - 1. évf. 53. - P. 976-980.

39. Wake, K. Hepatic stellate sejtek: Háromdimenziós szerkezet, lokalizáció, heterogenitás és fejlődés / K.

// Elülső. Physiol. - 2015. - Hozzáférés módja: http://dx.doi. org / 10.3389 / fphys.2015.00173. - Hozzáférés időpontja: 2016.10.31.

21. Peroxiszóma proliferátor által aktivált receptor gamma-modulációs ligandjai Profibrogén és proinflammatorikus hatások máj csillagsejtekben / F. Marra // Gasztroenterológia. -2000. - Vol. 119. - P. 466-478.

22. Mezenchimális csontvelő-eredetű őssejt-transzplantáció HCV-vel kapcsolatos májcirrhosisban szenvedő betegeknél / S. Lukashyk // J. Clin. Ford. Hepatol. - 2014. - Kt. 2, iss. 4. - R. 217-221.

23. Millonig, G. A. Advantages of a phosphate puffer for osmium tetroxide solutions in fixation / G. A. Millonig // J. Appl. Rizika. - 1961. - 1. évf. 32. - P. 1637-1643.

24. A korai proliferáló ovális sejtek eredete és szerkezeti fejlődése patkánymájban / S. Paku // Am. J. Hepatol. - 2001.

Vol. 158. - P. 1313-1323.

25. A myofibroblasztok eredete májfibrózisban / D. A. Brenner // Fibrogenesis Tissue Repair. - 2012. - Kt. 5, suppl. 1. - S. 17.

26. A máj myofibroblasztjainak eredete és funkciói / S. Lemoinne // Biochim. Biophys. Acta. - 2013. - Kt. 1832 (7). - P. 948-954.

27. Pinzani, M. PDGF és jelátvitel májcsillagsejtekben / M. Pinzani // Front. Biosci. - 2002. - 20. évf. 7. - P. 1720-1726.

28. Popper, H. Az A-vitamin megoszlása ​​a szövetben fluoreszcens mikroszkóppal kimutatva / H. Popper // Physiol. Fordulat. - 1944.

Vol. 24. - R. 205-224.

29. Querner, F. Der mikroskopische Nachweis von Vitamin Aimamanimalen Gewebe. Zur Kenntnis der paraplasmatischen Leberzellen-einschlüsse. Dritte Mitteilung / F. Querner // Klin. Wschr. - 1935. - 1. évf. 14. - R. 1213-1217.

30. A myofibroblast biológia legújabb fejleményei: paradigmák a kötőszöveti remodellinghez / B. Hinz // Am. J. Pathol. - 2012. - Kt. 180. - R. 1340-1355.

31. Reynolds, E. S. Az ólom-citrát használata magas pH-n elektronopátlan foltként elektronmikroszkópiában / E. S. Reynolds // J. Cell. Biol. - 1963. - 1. évf. 17. - P. 208-212.

32. Safadi, R. A máj fibrogenezisének immunstimulációja CD8 sejtekkel és hepatocitákból származó transzgenikus interleukin-10 általi gyengítése / R. Safadi // Gastroenterology. - 2004. - 1. évf. 127 (3). - P. 870-882.

33. Sato, T. Fosphate buffered formalinban hosszabb ideig fixált minta elektronmikroszkópos vizsgálata / T. Sato, I. Takagi // J. Electron Microsc. - 1982. - 1. évf. 31., 4. sz. - P. 423-428.

34. Senoo, H. A-vitamin-tároló sejtek (csillagsejtek) / H. Senoo, N. Kojima, M. Sato // Vitam. Horm. - 2007. - 20. évf. 75.

35. A Septum transversum eredetű mesothelium májcsillagsejteket és perivascularis mesenchymalis sejteket eredményez fejlődő egérmájban / K. Asahina // Hepatology. -2011. - Vol. 53. - R. 983-995.

36. Stanciu, A. Új adatok az ITO cellákról / A. Stanciu, C. Cotutiu, C. Amalinei // Rev. Med. Chir. Soc. Med. Nat. Iasi. -2002. - Vol. 107., 2. sz. - P. 235-239.

37. Suematsu, M. Professor Toshio Ito: a clairvoyant in pericyte biology / M. Suematsu, S. Aiso // Keio J. Med. - 2000.

Vol. 50. - R. 66-71.

38. Thabut, D. Intrahepatikus angiogenezis és szinuszos remodelling krónikus májbetegségben: új célok a portális hipertónia kezelésében? / D. Thabut, V. Shah // J. Hepatol. - 2010. - 1. évf. 53. - R. 976-980.

39. Wake, K. Hepatic stellate sejtek: Háromdimenziós szerkezet, lokalizáció, heterogenitás és fejlődés / K. Wake // Proc. Jpn. Acad. Ser. B, Phys. Biol. Sci. - 2006. - 20. évf.

Wake // Proc. Jpn. Acad. Ser. B, Phys. Biol. Sci. - 2006. - 20. évf. 82. (4). - P. 155-164.

82. (4). - P. 155-164.

40. Wake, K. In Cells of the Hepatic Sinusoid / K. Wake, H. Senoo // Kupffer Cell Foundation (Rijswijk, Hollandia). - 1986. - 1. évf. 1. - P. 215-220.

41. Watson, M. L. Szövetmetszetek elektronmikroszkópos festése nehézfémekkel / M. L. Watson // J. Biophys. Biochem. Cyt. - 1958. - 1. évf. 4. - P. 475-478.

A MÁJ KLINIKAI CITOLÓGIÁJA: ITO CSILLAGSEJTEK (MÁJCSILLAGSEJTEK)

Tsyrkunov V. M, Andreev V. P., Kravchuk R. I., Kandratovich I. A. Oktatási intézmény "Grodói Állami Orvosi Egyetem", Grodno, Fehéroroszország

Bevezetés. Az Ito stellate sejtek (Hepatic Stellate Cells, HSC) szerepét a májfibrózis kialakulásában az egyik vezető szerepként azonosították, de a HSC struktúrák intravitális vizualizációjának alkalmazása a klinikai gyakorlatban minimális.

A munka célja a HSC szerkezeti és funkcionális jellemzőinek bemutatása az intravitális májbiopsziás minták citológiai azonosításának eredményei alapján.

Anyagok és metódusok. A biopsziás minták fény- és elektronmikroszkópiájának klasszikus módszereit alkalmaztam az eredeti ultravékony metszet, fixálás és festés technikáján belül.

Eredmények. A krónikus hepatitis C-ben szenvedő betegek májbiopsziás mintáinak HSC szerkezeti jellemzőit fény- és elektronmikroszkópos fotóillusztrációk mutatják be. A HSC-k különböző szakaszaiban (pihenés, aktiválás) és a miofibroblasztokká való átalakulás folyamatában jelennek meg.

Következtetések. A HSC funkcionális állapotának klinikai és morfológiai azonosítására és értékelésére szolgáló eredeti módszerek alkalmazása lehetővé teszi a májfibrózis diagnózisának és prognózisának minőségének javítását.