Ukratko, normalna mikroflora životinjskog tijela. Mikroflora vazduha i vode. Kvantitativno i kvalitativno određivanje mikroflore vazduha i vode. Uloga normalne mikroflore

IN U poslednje vreme Interes za autohtonu (sopstvenu) mikrofloru domaćih i domaćih životinja i metode njene korekcije značajno je povećan. Pitanje mogućnosti postojanja životinja i ljudi u odsustvu mikroorganizama prvi je pokrenuo Louis Pasteur (cit. od 10). Prema modernim konceptima, u prirodnom staništu neophodna je simbioza makroorganizma sa mikroflorom koja ga naseljava. Životinje (i biljke) bez klica mogu živjeti i razvijati se samo u uvjetima umjetne izolacije (sterilno okruženje). Normalna mikroflora životinja i ljudi stalno opstaje u tijelu zdravog domaćina i stupa u interakciju s njim po principu simbioze. Autohtonu floru predstavljaju mikrobiocenoza (određene zajednice mikroorganizama) koje se formiraju u prirodnim nišama (biotopima) fizioloških sistema makroorganizma (probavni trakt, respiratorni i urogenitalni aparat, koža i dr.) u kontaktu sa spoljašnje okruženje. U svakoj mikrobiocenozi pravi se razlika između mikroflore karakteristične za datu vrstu (obavezna, rezidentna) i slučajne (fakultativne, privremene, prolazne) mikroflore. Svaki biotop razvija svoje uslove, različite od drugih, za postojanje i interakciju mikroorganizama koji ga nastanjuju. Stoga se vrsta i kvantitativni sastav flore u različitim biocenozama značajno razlikuju. U tom smislu postoje koncepti kao što su mikroekologija crijeva, kože, genitalija, gornjih disajnih puteva, usne šupljine, itd. Živo tijelo sadrži ogroman broj ćelija simbiontskih mikroorganizama (dostiže 1014). Njihova vrsta (preko 400 vrsta) osigurava učešće normalne mikroflore u širokom spektru fizioloških funkcija makroorganizma (13, 14). Jedna od najvažnijih funkcija normalne mikroflore je osiguranje otpornosti na kolonizaciju (CR) u odnosu na strane mikroorganizme koji prodiru u tijelo domaćina i ograničavanje reprodukcije njegovih pojedinačnih predstavnika izvan njihovog prirodnog staništa. Sa smanjenjem CR dolazi do neravnoteže u kvalitativnom i kvantitativnom sastavu autohtone flore. Zbog povećanja rasta pojedinih populacija mikroorganizama, potonji koloniziraju kožu i sluznicu makroorganizma, a također primjećuju širenje područja distribucije predstavnika oportunističke (oportunističke) mikroflore, uključujući aerobe i anaerobe, i njihova translokacija u unutrašnje organe. To dovodi do gnojno-upalnih procesa i septikemije. Prijenos faktora rezistencije na antibiotike i patogenosti između bakterijskih zajednica se povećava (1, 8, 16). Najsloženije mikrobiocenoze sisara su mikroflora debelog crijeva, usta i nazofarinksa. Kvalitativni i kvantitativni sastav mikroflore površine kože, kao i sluzokože nosne šupljine, genitalija itd. oskudniji. Dakle, autohtona crijevna mikroflora ima značajan utjecaj na stanje mikrobiocenoza drugih biotopa živog organizma. Sastav normalne flore gastrointestinalnog trakta za zdravog odraslog psa (tablica 1) je stabilan i, u nedostatku značajnih promjena u uvjetima ishrane, smještaja, stresnih situacija, kao i bolesti uz primjenu farmakoloških lijekova, neznatno fluktuira. Zbog visoke kiselosti, mikrobiocenoza želuca je prilično loša. Mikroorganizmi koji mogu održavati svoju vitalnu aktivnost u kiseloj sredini i u prisustvu pepsina (bacillus acidophilus i drugi laktobacili, enterokoki, gljivice, bacili, sarcina) lokalizirani su uglavnom u piloričnom dijelu. Specifičan broj mikroorganizama u duodenumu i jejunumu kreće se od 102-105 bakterija na 1 g njihovog sadržaja. Inhibiciju njihovog rasta u ovom dijelu tankog crijeva osigurava više kisela sredina, koji se održava unosom himusa (želudačnog sadržaja) i oslobađanjem žučne kiseline. Aktivna peristaltika, sekretorni imunoglobulini (IgA, IgE) i enzimi su direktno uključeni u regulaciju broja mikroorganizama. Glavni stanovnici su laktobacili, enterokoki, enterobakterije, steptococci, po svojoj kvantitativnoj zastupljenosti malo su inferiorni u odnosu na bifidobakterije, a ponekad se nalaze i kandida. Slična situacija je u kranijalnom dijelu ileuma, dok je u kaudalnom dijelu mikrobiocenoza znatno raznovrsnija i često uključuje vrste koje prvenstveno žive u debelom crijevu (bacteroides, clostridia, eubacteria, fusobacteria, itd.). Specifični sadržaj mikroorganizama u ovom području može doseći 107 po 1 g crijevnog sadržaja. Treba reći da mikrobiosenosindigena flora debelog crijeva, u odnosu na tanko crijevo, značajno prevladava i kvalitativno i kvantitativno. Pored navedenih u Tabeli 1, gotovo uvijek postoje predstavnici rodova Veiolonella, Peptococcus, Peptostreptococcus, Actinomycetes, Pseudomonas, Alkaligenes i drugih (11). Kako se krećete prema rektumu, specifični sadržaj bakterija se povećava (1010-1012 mikrobnih ćelija po 1g sadržaja). Ovisno o sadržaju vlage u fecesu, postotak bakterijske mase u odnosu na ukupnu masu ispitivanog materijala kreće se od 15-30%. Ovaj članak prije svega nudi rezultate istraživanja crijevne mikroekologije kod pasa u dobi od 2-7 godina, gdje Posebna pažnja dati normalnoj mikroflori. U narednim brojevima planiramo prezentovati materijale o starosnoj dinamici autohtone crijevne flore, a razmotret će se i razlozi za nastanak disbakterioze (smanjenje CR) i metode za njihovu korekciju. Dobijeni rezultati pokazuju da osnovu normalne crijevne mikroflore pasa, kao i drugih životinja, čine obvezni anaerobni mikroorganizmi koji ne stvaraju spore. Omjer predstavnika anaerobno-aerobne crijevne flore je normalno približno 1000:1. Najvažniji predstavnici rezidentne flore gastrointestinalnog trakta su bifidobakterije i laktobacili, bakteroidi, enterokoki, ešerihije i gljivice slične kvascu (9). Bifidobakterije Većinu normalne crijevne flore (od 60 do 90% ili više) kod zdravih pasa, kao i drugih monogastričnih životinja, čine bifidobakterije (slika 1). Normalno, od 1 g sadržaja debelog crijeva pasa (u zavisnosti od starosti, vrste ishrane i sl.), oni su posijani do 1012. Veterinarima treba skrenuti pažnju da se mikroskopskim pregledom fecesa koriste posebne metode bojenja razmaza mogu dati samo približnu predstavu o omjeru glavnih grupa populacija mikroorganizama (prisutnost kokija, gram-pozitivnih i gram-negativnih bakterija, gljivica itd.). Prisustvo ili odsustvo bifidne flore ne može se utvrditi ovom metodom, jer ima morfološke sličnosti sa nizom drugih bakterija - obveznih crijevnih mikroorganizama (Prilog 1). Određivanje kvantitativnog sadržaja bifidne flore vrši se setvom uzastopnih desetostrukih razblaženja ispitivanog materijala u elektivne (specijalne) polutečne hranljive podloge, koje se sipaju u visoku (najmanje dve trećine visine epruvete). ) kolone i regeneriše (zagreje) pre setve. Materijal koji se podvrgne bakteriološkoj analizi pažljivo se unosi u donji dio epruvete, čiji se sadržaj lagano miješa, poštujući uslove anaerobioze, a zatim inkubira na optimalnoj temperaturi 1 do 3 dana. Ova vrsta istraživanja zahtijeva visoke kvalifikacije i praktične vještine bakteriologa. Uzimajući u obzir dominantan položaj bifidobakterija u crijevima zdravih osoba, kao i podatke kliničkih i mikrobioloških istraživanja, mnogi autori su došli do zaključka da su predstavnici roda Bifidobacteria glavna taksonomska grupa mikroflore gastrointestinalnog trakta, tj. pokazatelj zdravlja (4). Zaista, sa smanjenjem CR, bifidna flora prva nestaje iz gastrointestinalnog trakta. Prevladavanje ovih mikroorganizama u crijevima, u pravilu, sprječava proliferaciju patogenih i oportunističkih bakterija, normalizirajući mikrobiocenozu u cjelini. Antagonističko djelovanje bifidobakterija prema patogenima srodnim Enterobacteriaceae (Escherichia, Klebsiella, Salmonella, Proteus, Shigella i dr.), kokama (Srepto-, Staphylococcus), Vibrio, Campylobacter, Clostridia i drugim mikroorganizmima osigurava se stvaranje karbohidrata zahvaljujući acetat i laktat, proizvodnju hlapljivih masnih kiselina (VFA), lizozimskih i drugih supstanci koje imaju antibakterijsko djelovanje, kao i sposobnost suzbijanja stvaranja toksina ili uništavanja toksina patogenih bakterija itd. Posebnu pažnju treba obratiti na njihovo učešće u simbiozi sa makroorganizmom na nivou parijetalne probave, što je određeno dobro definisanim adhezivnim svojstvima. Ovo je jedan od glavnih elemenata konkurentnosti u razvoju prehrambene niše u odnosu na druge predstavnike autohtone flore i patogene. Bifidobakterije su direktno uključene u regulaciju imunoloških funkcija makroorganizma. Oni stimulišu proliferaciju ćelija limfoidno tkivo, pojačavaju fagocitnu aktivnost makrofaga, monocita i granulocita, pojačavaju specifični humoralni imunitet, sintezu citokina (proizvodnja interferona gama, JL-6, TNF, ALPHA), a također stimuliraju imunološke mehanizme na ćelijskom nivou, uključujući antitumornu zaštitu ( 7, 15). Kao i drugi predstavnici autohtone flore, bifidobakterije su sposobne izazvati dekonjugaciju žučnih kiselina. Također su aktivno uključeni u metabolizam vode i soli, proteina, masti, nukleotida, vitamina, održavanju pH i anaerobiozi u crijevima. Sintetiziraju aminokiseline kao što su lizin, arginin, valin, metionin, leucin, tirozin i glutaminska kiselina. Po dionici esencijalne aminokiselinečini oko 40% njihovog ukupnog broja. Intracelularno, bifidobakterije akumuliraju vitamine B1, B2, B6, B12, C, nikotinsku kiselinu, folnu kiselinu i biotin, a proizvode i B6, B12 i folna kiselina. S nedostatkom predstavnika ovog roda, smanjuje se sinteza endogenog vitamina K, što dovodi do poremećaja procesa zgrušavanja krvi. Ukratko navedene karakteristike bifidobakterija ukazuju da one, kao jedna od varijanti normalne flore makroorganizma, dominiraju ne samo kvantitativno, već i kvalitativno (fiziološki). Naša identifikacija vrsta bifidobakterija izolovanih iz izmeta pasa pokazala je da je prevladavala vrsta B. adolescentis (41,7% sojeva), druga najbrojnija vrsta B. globosum (16,7%), treća B. termophilum (8,3). %). Ni u jednom slučaju od pasa nije bilo moguće izolovati bifidobakterije vrste B. bifidum koje su karakteristične za crijeva čovjeka i koje se koriste za proizvodnju probiotičkih preparata u humanitarnoj medicini. LaktobaciliDruga najveća, i očigledno najvažnija, grupa rezidentne flore gastrointestinalnog trakta pasa su bakterije mliječne kiseline, predstavnici roda Lactobacterium (Dodatak 2). Prema našim istraživanjima, broj laktobacila kod zdravih pasa je 106-109/g sadržaja debelog crijeva (Sl. 1). Sa smanjenjem CR (disbakterioza), laktobacili se sije u znatno manjim količinama ili se uopće ne mogu otkriti (slika 2). Bakterije mliječne kiseline, kao obavezni predstavnici gastrointestinalnog trakta, aktivno učestvuju u procesima koji se odvijaju u njemu. Fermentiraju velike količine ugljikohidrata i alkohola; neki predstavnici ovog roda uzrokuju hidrolizu škroba i sintetiziraju proteine. Antagonističko djelovanje bakterija mliječne kiseline prema truležnoj, patogenoj i oportunističkoj mikroflori posljedica je njihove sposobnosti da sintetiziraju brojne antibiotske tvari. Neki od njih su proteini niske molekularne težine. Klasifikovani su kao bakteriocini, slični po svom mehanizmu delovanja antibioticima, ali se od njih razlikuju po niskoj aktivnosti protiv srodnih vrsta mikroorganizama (Dodatak 3). Karakteristično fizička i hemijska svojstva bakteriocini acidofilnih bakterija omogućili su njihovu kombinaciju pod nazivom “Lactacin B”. Osim toga, laktobacili proizvode antimikrobne tvari koje se nazivaju lantabiotici. Manje su osjetljivi na djelovanje amilaza i proteinaza i sadrže aminokiseline koje obično nisu prisutne u bakteriocinima. Pored bakteriocina i lantabiotika, laktobacili sintetiziraju neidentificirane tvari koje imaju učinak sličan bakteriocinu. To su niske molekularne težine organska jedinjenja neproteinske prirode pokazuju svoju aktivnost u prisustvu kiseline ili vodikovog peroksida. Inhibiraju rast i razvoj pseudomanada, salmonele, šigela, streptokoka, stafilokoka, kao i anaerobnih bakterija, uključujući klostridije, bifidobakterije i bakteroide. Jedan od najvažnijih metaboličkih proizvoda bakterija mliječne kiseline je vodikov peroksid. Sposobnost njegove proizvodnje određena je genetski određenom osobinom i ne zavisi od osnovne sredine i kontakta sa kiseonikom. Inhibicijski učinak vodikovog peroksida u crijevima važniji je za kontrolu broja predstavnika aerobne flore nego djelovanje organskih kiselina koje on proizvodi. Baktericidno djelovanje vodikovog peroksida povezano je s njegovim snažnim oksidativnim djelovanjem na bakterijske stanice i uništavanjem osnovne molekularne strukture ćelijskih proteina. Laktobacili igraju važnu ulogu u razvoju imuniteta novorođenčadi koja imaju nisku aktivnost ćelijskog i humoralnog imuniteta i nisku fagocitnu aktivnost mononuklearnih makrofaga. Povećanje fagocitne aktivnosti makrofaga, njihovo hvatanje i katabolizam antigena uočeno je oralnom, potkožnom i intraperitonealnom primjenom živih laktobacila, supernatanata, ubijenih kultura ili fragmenata njihovih zidova. U in vitro i in vivo uslovima, bakterije mlečne kiseline stimulišu proizvodnju interferona i interleukina (3, 7). Pored navedenih svojstava koja daju imunostimulativno i patogeno-antagonističko dejstvo, laktobacili imaju i druge važne fiziološke funkcije. Aktivno su uključeni u metabolizam ugljikohidrata, proteina, lipida, nukleinske kiseline. One, kao i bifidobakterije, igraju važnu ulogu u regulaciji metabolizma vode i soli, održavanju pH i anaerobioze u crijevima, dekonjugaciji žučnih kiselina, sintezi vitamina, amina i drugih biološki aktivnih spojeva. Većina sojeva laktobacila izolovanih iz izmeta pasa koje smo proučavali klasifikovani su kao L.acidophilum (56%), drugi po broju bio je L.plantarum (16%), treći L.helveticum (12%). Escherichia su saprofiti koji su inače dio rezidentne crijevne flore. Smješteni su nasumično i ravnomjerno u cijeloj crijevnoj šupljini, lokalizirani uglavnom u lumenu i samo djelomično uz epitel njegovih resica. Baš kao i bifidobakterije i laktobacili, Escherichia aktivno učestvuje u enzimskim procesima u crijevima, stvarajući organske kiseline, vitamine i druge biološki aktivne supstance. H. Conrad je 1905. ustanovio da se kao rezultat vitalne aktivnosti Escherichia, baktericidne supstance akumuliraju u hranljivom mediju, sprečavajući rast drugih bakterija. Sada je poznato da Escherichia proizvodi do 24 vrste takvih supstanci, zvanih kolicini, i in vitro i in vivo. Možda bi crijevnu floru trebalo nazvati ne saprofitskom, već oportunistički, budući da je u poređenju s drugim predstavnicima koji pripadaju ovoj kategoriji mikroorganizama, najagresivniji: Escherichia je među prvima koji kolonizira tijelo nakon rođenja i češće se nalazi u krvi životinja kada je prirodni imunitet smanjen, npr. nakon zračenja. Tako su prema autorima (2, 5) u više od 50% slučajeva uzrok septikemije kod ozračenih životinja. Treba imati na umu da je veliki broj Escherichia patogeni sa konstantno visokom virulentnošću (Dodatak 4). U različitim dijelovima crijeva zdravih pasa broj Escherichia varira od 102 do 109 jedinica koje formiraju kolonije po 1 g ispitivanog materijala. Naše vlastite studije provedene na zdravim psima pokazuju da broj Escherichia varira između 106-109 u jednom gramu izmeta. Bakteroidi Dio normalne mikroflore gastrointestinalnog trakta, kao i usne duplje, gornjih disajnih puteva, genitourinarni organi, uključuje bakteroide. Rod Bacteroides uključuje više od 20 vrsta, od kojih je većina izolirana od ljudi i životinja. U kiselim uslovima, bakteroidi pokazuju antagonističku aktivnost prema salmoneli, ešerihiji i drugim mikroorganizmima i, po svemu sudeći, igraju značajnu ulogu u otpornosti organizma na infekcije. Međutim, rezultati istraživanja posljednjih godina ukazuju na njihovo učešće u etiologiji mnogih patoloških procesa: enteritisa, nekrotizirajućeg hepatitisa, peritonitisa, meningitisa itd. d. Proučavanje patogenosti predstavnika ovog roda kod životinja ukazuje kako na sinergizam u razvoju infektivnih procesa, što se uočava u odnosu na boreliju, mikoplazmu, streptokoke, stafilokoke, pasterelu, a kod ljudi - Vibrio cholerae (6). U 1 g sadržaja debelog crijeva zdravih pasa njihov broj se kreće od 107-1010. Enterokoki Fekalni streptokoki ili enterokoki su rasprostranjeni u prirodi. Nalaze se u crijevima i izmetu ljudi i životinja, kao iu zemljištu i vodi. Enterokoki su obavezni predstavnici normalne mikroflore gastrointestinalnog trakta i neki od njih (uglavnom Ent. faecium) su uključeni u probiotičke preparate za normalizaciju crevne mikroflore. Antagonističke funkcije ovih mikroorganizama uglavnom su povezane s njihovim svojstvima stvaranja kiseline i sposobnošću proizvodnje bakteriocina. Istovremeno, enterokoki su fakultativni anaerobni oportunistički mikroorganizmi koji mogu izazvati gastroenteritis, upalu pluća, mastitis, endokarditis, meningitis, septikemiju i druge bolesti kod životinja i ljudi. Kao što je tipično za sve oportunističke mikroorganizme, njihovi negativni efekti se manifestiraju kod jedinki sa smanjenjem ukupne otpornosti. Sadržaj predstavnika ovog roda mikroorganizama kod zdravih pasa je 104-108/g fecesa (naše istraživanje). Klostridije U tijelu životinja i ljudi nalazi se do 35 vrsta klostridija. Kvantitativni indikator pojedinačne vrste(Cl. clostridiforme, Cl. innocuum, Cl. ramosum) može dostići 108-109/g fecesa (11). Prema našim istraživanjima, učestalost izolacije klostridija iz crijeva pasa kretala se u rasponu od 75-100% slučajeva. Njihov specifični sadržaj u različitim segmentima kretao se od 0 do 104 /g proučavanog materijala. Karakteristična karakteristika klostridija je njihova sposobnost saprofitskog postojanja u tlu i gastrointestinalnom traktu ljudi i životinja. Uloga predstavnika ovog roda za makroorganizam (isključujući patogene vrste) nije dovoljno proučena. Postoje literaturni podaci koji ukazuju na sintezu vitamina klostridijama: nikotinskih, folnih, pantotenska kiselina i riboflavin (12). Stoga je prirodno pretpostaviti da su klostridije također uključene u održavanje crijevne normobioze svog domaćina. Štaviše, neki autori smatraju da su klostridije, posebno one vrste čiji broj može dostići velike količine, najstariji regulatorni sistem mikroekologije čoveka i životinja, koji obezbeđuje homeostatske odnose između domaćina i njegove mikroflore. Gljive roda Candida Gljive slične kvascu iz roda Candida predstavljaju samostalan rod i broje više od 80 vrsta. Oni su dio normalne flore koja naseljava sluzokože respiratornog sistema i gastrointestinalnog trakta, kao i genitalije i kožu. Iz izmeta zdravih pasa sejemo u količinama do 103, ređe - 104/g. Gljive roda Candida takođe spadaju u oportunističke mikroorganizme, a svi faktori koji smanjuju opštu ili kolonizacionu otpornost makroorganizma i inhibiraju nespecifične imunološka zaštita, stvaraju uslove za aktiviranje njihovog rasta i razvoj specifične bolesti - kandidijaze. Eksperimenti na majmunima i psima pokazali su da ovi mikroorganizmi mogu ući u organizam domaćina kroz sluzokožu crijevnog trakta i ući u krv. Endotoksin, koji uzrokuje oštećenje parenhimskih organa, bitan je u patogenezi bolesti. Gore navedene grupe mikroorganizama čine većinu manje ili više proučavane rezidentne mikroflore za gastrointestinalni trakt životinja. Treba napomenuti da su samo bifidobakterije i laktobacili mikroorganizmi čije učešće u patoloških procesa(i direktni i indirektni) do danas nije uspostavljena. Osim rezidentne mikroflore, u gastrointestinalnom traktu se sporadično nalaze i drugi mikroorganizmi, nazvani prolazni mikroorganizmi, koji se najčešće sije u bolestima gastrointestinalnog trakta životinja, iako se među njima nalaze i saprofitne vrste mikroba. Prije svega, to su Klebsiella, Pseudomonas, Proteus, stafilokoki, spirohete, Citrobacter, Enterobacter, plijesni i drugi. Na kvantitativnu raznovrsnost rezidentne mikroflore pasa, brojčani odnos u mikrobiocenozi određenog biotopa rezidentne i prolazne mikroflore uglavnom utiču starost, vrsta ishrane i različiti faktori sredine, uključujući i upotrebu lekova. Sve dok predstavnici normalne mikroflore prevladavaju u mikrobiocenozama, održava se zdravlje mikroorganizma u cjelini. Ako spoljni uticaji(kemoterapeutski lijekovi, pesticidi i drugi otrovi, stres, virulentni mikroorganizmi itd.) premašuju po intenzitetu kompenzacijskih mehanizama ekološki sistem„makroorganizam je njegova normalna mikroflora“, tada u mikrobiocenozama počinje prevladavati prolazna mikroflora, što dovodi do razvoja lokalnih infektivnih procesa, pa čak i generalizirane infekcije i drugih komplikacija. Dakle, očigledno je da su životinjski organizam i mikroflora koja ga nastanjuje međusobno ovisni i koegzistirajući dijelovi unificirani sistem. Sa ekološke tačke gledišta, interakcija između makro- i mikroorganizama je poseban slučaj univerzalno rasprostranjene simbioze u živom svetu sa svojim razne forme(komensalizam, mutualizam, parazitizam, grabežljivac, itd.). Iz navedenog proizilazi da se interakcija između normalne mikroflore i organizma domaćina pretežno odvija na nivou mutualizma. Crijevni mikroorganizmi, kao dio normalne flore, istovremeno predstavljaju složen samoregulirajući otvoreni sistem, gdje njihove različite populacije imaju različite odnose kako na nivou svojih zajednica tako i sa organizmom domaćina. Najprimjetniju ulogu imaju njihova kompetitivna i antagonistička svojstva, što uglavnom određuje normalno funkcionisanje jedinstveni ekološki sistem: životinjski organizam - njegova okolina

Pošaljite svoj dobar rad u bazu znanja je jednostavno. Koristite obrazac ispod

Studenti, postdiplomci, mladi naučnici koji koriste bazu znanja u svom studiranju i radu biće vam veoma zahvalni.

Objavljeno na http://www.allbest.ru

MINISTARSTVO POLJOPRIVREDE RUJSKE FEDERACIJE

FSBEI HPE "URAL STATE

POLJOPRIVREDNI UNIVERZITET"

SAŽETAK

u disciplini: "Mikrobiologija mesa"

na temu "Mikroflora životinjskog tijela"

Ekaterinburg

WITHposjedovanje

Uvod

1. Definicije, terminologija

2. Vrsni sastav i kvantitativne karakteristike mikroflore najvažnijih dijelova tijela životinje

3. Raspodjela mikroorganizama po dijelovima gastrointestinalnog trakta

4. Razlike u tjelesnoj mikroflori različitih životinjskih vrsta

5. Normalna mikroflora organizma i patogenih mikroorganizama

6. Morfofunkcionalna uloga i metabolička funkcija automikroflore organizma

Bibliografija

INdirigovanje

Mikroflora sisara, uključujući domaće životinje, domaće životinje i ljude, počela je da se proučava zajedno sa razvojem mikrobiologije kao nauke, dolaskom velikih otkrića L. Pasteura, R. Kocha, I. I. Mečnikova, njihovih učenika i saradnici. Tako je 1885. T. Escherich iz fecesa djece izolovao obaveznog predstavnika crijevne mikroflore - E. coli, koji se nalazi u gotovo svim sisarima, pticama, ribama, gmizavcima, vodozemcima, insektima, itd. Nakon 7 godina, prvi podaci o značaju coli za vitalnu aktivnost i zdravlje makroorganizma. S. O. Jensen (1893) je to otkrio različite vrste a sojevi E. coli mogu biti i patogeni za životinje (uzrokujući septičku bolest i dijareju kod teladi) i nepatogeni, odnosno potpuno bezopasni, pa čak i korisni stanovnici crijeva životinja i ljudi. G. Tissier je 1900. godine otkrio bifibakterije u izmetu novorođenčadi i obavezne predstavnike normalne crijevne mikroflore tijela tokom svih perioda njegovog života. Štapići mliječne kiseline (L. acidophilus) izolovao je Moreau 1900. godine.

1. Odefinicije, terminologija

Normalna mikroflora je otvorena biocenoza mikroorganizama koji se nalaze u zdravi ljudi i životinje (V.G. Petrovskaya, O.P. Marko, 1976). Ova biocenoza treba da bude karakteristika potpuno zdravog organizma; fiziološki je, odnosno pomaže u održavanju zdravog statusa makroorganizma, pravilnoj primjeni njegovog normalnog fiziološke funkcije. Čitava mikroflora životinjskog tijela može se nazvati i automikroflora (prema značenju riječi „auto”), odnosno mikroflora bilo kojeg sastava (O. V. Chakhava, 1982) datog organizma u normalnim i patološkim stanjima.

Niz autora normalnu mikrofloru, povezanu samo sa zdravim stanjem organizma, dijeli na dva dijela:

1. obvezni, stalni dio, formiran u filogenezi i ontogenezi u procesu evolucije, koji se naziva i autohtoni (tj. lokalni), autohtoni (autohtoni), rezidentni itd.;

2. opciono, ili prolazno.

Sastav automikroflore može povremeno uključivati patogene mikroorganizme koji slučajno prodiru u makroorganizam.

Sastav tjelesne mikroflore

2. INsastav vrsta i kvantitativne karakteristike mikroflore najvažnijih područja životinjskog tijela

U pravilu, desetine i stotine vrsta raznih mikroorganizama povezane su s tijelom životinje. Oni su, kako pišu V.G. Petrovskaya i O.P. Marko (1976), obavezni za organizam u cjelini. Mnoge vrste mikroorganizama nalaze se u mnogim dijelovima tijela, razlikuju se samo kvantitativno. Moguće su kvantitativne varijacije u istoj mikroflori u zavisnosti od vrste sisara. Većinu životinja karakteriziraju opći prosječni pokazatelji za niz područja njihovog tijela. Na primjer, distalne, donje dijelove gastrointestinalnog trakta karakteriziraju sljedeće mikrobne grupe identificirane u crijevnom sadržaju ili fecesu (Tabela 1).

Tabela 1. Mikroflora donjeg gastrointestinalnog trakta

	Broj mikroba u 1 g crijevnog materijala
Bifidobakterije	107 - 109 (do 1010)
Bacteroides	1010 (do 1011)
Peptococcus
Peptostreptococci
Coprococci
Ruminokok
Fusobacteria
Eubacteria
Clostridia
Vilonella
Anaerobni gram-negativni koki iz roda Megasphaera
Različite grupe spiralno uvijenih (zakrivljenih) bakterija, spirohete
Laktobacili
Escherichia
Enterokoki
Prolaznije se može predstaviti:
Ostali predstavnici enterobakterija (Klebsiella, Proteus, Citrobacter, Enterobacter, itd.)
Pseudomonas
Staphylococcus
Ostali streptokoki
Difteroidi
Aerobni bacili
Gljive, aktinomicete

Na vrhu tabele. 1. Prikazani su samo obavezni anaerobni mikroorganizmi - predstavnici crijevne flore. Sada je utvrđeno da udio strogo anaerobnih vrsta u crijevima iznosi 95-99%, a sve aerobne i fakultativno anaerobne vrste čine preostalih 1-5%. mikroflora tijelo životinjski organizam

Unatoč činjenici da u crijevima živi na desetine i stotine (do 400) poznatih vrsta mikroorganizama, tu mogu postojati i potpuno nepoznati mikroorganizmi.Tako je u slepom i debelom crijevu nekih glodara posljednjih decenija prisutna prisutnost tzv. filamentozne segmentirane bakterije, koje su vrlo intimno povezane s površinom (glikokaliks, četkica) epitelnih stanica crijevne sluznice. Tanki kraj ovih dugih, filamentoznih bakterija uvučen je između mikrovila četkastog ruba epitelnih ćelija i čini se da je tamo fiksiran tako da pritisne ćelijske membrane. Ovih bakterija može biti toliko da, poput trave, prekrivaju površinu sluznice. To su također strogi anaerobi (obavezni predstavnici crijevne mikroflore glodara), korisne vrste za tijelo, koje u velikoj mjeri normaliziraju rad crijeva. Međutim, ove bakterije su otkrivene samo bakterioskopskim metodama (koristeći elektronsku skenirajuću mikroskopiju dijelova crijevnog zida). Filamentne bakterije ne rastu na nama poznatim hranjivim podlogama; mogu preživjeti samo na čvrstim agar podlogama ne duže od jedne sedmice) J. P. Koopman et. al., 1984).

3. Rraspodjela mikroorganizama u dijelovima gastrointestinalnog trakta

Zbog visoke kiselosti želudačni sokželudac sadrži mali broj mikroorganizama; To su uglavnom kiselorezistentne mikroflore - laktobacili, streptokoki, kvasac, sardine itd. Broj mikroba je 10 3 /g sadržaja.

Mikroflora duodenuma i jejunuma

Mikroorganizmi su posvuda u crijevima. Da ih nema ni na jednom odjeljenju, onda ne bi došlo do peritonitisa mikrobne etiologije zbog ozljede crijeva. Samo u proksimalnim dijelovima tankog crijeva ima manje vrsta mikroflore nego u debelom crijevu. To su laktobacili, enterokoki, sardine, pečurke, u donjim dijelovima raste broj bifidobakterija, coli. Kvantitativno, ova mikroflora se može razlikovati kod različitih pojedinaca. Moguć je minimalni stepen kontaminacije (10 1 - 10 3 / g sadržaja), a značajan stepen - 10 3 - 10 4 / g Količina i sastav mikroflore debelog creva prikazani su u tabeli 1.

Mikroflora kože

Glavni predstavnici mikroflore kože su difteroze (korinebakterije, propionske bakterije), plijesni, kvasci, spore aerobni bacili (bacili), stafilokoki (prvenstveno dominira S. epidermidis, ali je i S. aureus prisutan u malim količinama na zdravoj koži).

Mikroflora respiratornog trakta

Na sluznicama respiratornog trakta najviše mikroorganizama ima u nazofarinksu, iza larinksa njihov broj je znatno manji, još manje u velikim bronhima, te u dubini pluća zdravo telo mikroflore uopšte nema.

U nosnim prolazima nalaze se difteroidi, prvenstveno korinebakterije, trajni stafilokoki (rezidentni S. epi dermidis), bakterije Neisseria hemophilus, streptokoke (alfa-hemolitički); u nazofarinksu - korinebakterije, streptokoke (S. mitts, S. salivarius, itd.), stafilokoke, neisseoii, vilonella, bakterije hemofilusa, enterobakterije, bacteroides, gljivice, enterokoke, laktobacile, Pseudomonas, transrobe su više V. subtil je, itd.

Mikroflora dubljih dijelova respiratornog trakta je manje proučavana (A - Halperin - Scottetal., 1982). Kod ljudi je to zbog poteškoća u dobivanju materijala. Kod životinja je materijal pristupačniji za istraživanje (mogu se koristiti ubijene životinje). Proučavali smo mikrofloru srednjeg respiratornog trakta kod zdravih svinja, uključujući njihovu minijaturnu (laboratorijsku) sortu; rezultati su prikazani u tabeli. 2.

Tabela 2. Mikroflora sluzokože dušnika i velikih bronha zdravih svinja

Prva četiri predstavnika identifikovana su konstantno (100%), manje rezidentni (1/2-1/3 slučaja) su identifikovani: laktobacili (10 2 -10 3), Escherichia coli (10 2 -11 3), plesni (10 2 --10 4), kvasac. Drugi autori su zabilježili prolazno nošenje Proteusa, Pseudomonas aeruginosa, klostridija i predstavnika aerobnih bacila. Jednom smo identifikovali Bacteroides melaninoge-nicus u tom istom pogledu.

Mikroflora rođenjax putevi sisara

Istraživanja posljednjih godina, uglavnom stranih autora (Boyd, 1987; A. V. Onderdonketal., 1986; J. M. Milleretal., 1986; A. N. Masfarietal., 1986; H. Knotheua. 1987), pokazala su da mikroflora koja kolonizira sluzokoža porođajnog kanala je vrlo raznolika i bogata vrstama. Komponente normalne mikroflore su široko zastupljene, sadrži mnogo striktno anaerobnih mikroorganizama (tabela 3).

Tabela 3. Mikroflora porođajnog kanala (vagina, grlić materice)

Naziv mikrobnih grupa (rod ili vrsta)	Učestalost pojavljivanja, %
Obavezni anaerobni mikroorganizmi:
Bacteroides
Bifidobakterije
Peptokoki, peptokoki
Vilonella
Eubacteria
Clostridia
Opcioni anaerobni i aerobni mikroorganizmi:
Laktobacili
Escherichia coli i druge enterobakterije
Corynebacteria
Staphylococcus
Streptococci

Ako uporedimo mikrobne vrste porođajnog kanala s mikroflorom drugih dijelova tijela, nalazimo da je mikroflora porođajnog kanala majke u tom pogledu slična glavnim grupama mikrobnih stanovnika tijela. životinja prima budući mladi organizam, odnosno obavezne predstavnike svoje normalne mikroflore prilikom prolaska porođajni kanal majka. Daljnja kolonizacija tijela mlade životinje odvija se iz ovog legla evolucijski zasnovane mikroflore primljene od majke. Treba napomenuti da je kod zdrave žene fetus u maternici sterilan do početka porođaja. Međutim, pravilno formirana (odabrana u procesu evolucije) normalna mikroflora životinjskog tijela ne nastanjuje u potpunosti njeno tijelo odmah, već u roku od nekoliko dana, uspijevajući se umnožavati u određenim razmjerima. V. Brown daje sljedeći redoslijed njegovog formiranja u prva 3 dana života novorođenčeta: bakterije se otkrivaju u prvim uzorcima uzetim iz tijela novorođenčeta odmah nakon rođenja. Tako su na nosnoj sluznici u početku dominirali koagulaza negativni stafilokoki (S. epidermidis); na sluznici ždrijela - isti stafilokoki i streptokoki, kao i mala količina epterobakterija. U rektumu 1. dana već su pronađeni E. coli, enterokoki i isti stafilokoki, a do trećeg dana nakon rođenja ustanovljena je mikrobna biocenoza, uglavnom uobičajena za normalnu mikrofloru debelog crijeva (W. Braun , F. Spenckcr u. a. , 1987).

4. ORazlike u tjelesnoj mikroflori različitih životinjskih vrsta

Navedeni obavezni predstavnici mikroflore karakteristični su za većinu domaćih i poljoprivrednih sisara i ljudski organizam. Ovisno o vrsti životinje, broj mikrobnih grupa se može mijenjati, ali ne i njihov sastav vrsta. Kod pasa je broj E. coli i laktobacila u debelom crijevu isti kao što je prikazano u tabeli. 1. Međutim, bifidobakterije su bile za red veličine niže (10 8 u 1 g), streptokoke (S. lactis, S. mitis, enterokoki) i klostridije su bile za red veličine više. Kod pacova i miševa (laboratorijski) povećan je i broj bacila mliječne kiseline (bakterije mliječne kiseline), a bilo je više streptokoka i klostridija. Ove životinje su imale malo E. coli u crijevnoj mikroflori i smanjen je broj bifidobakterija. Smanjen broj E. coli i zamorci(prema V.I. Orlovsky). U izmetu zamoraca, prema našim istraživanjima, E. coli se nalazio u rasponu od 10 3 -10 4 po 1 g. Kod kunića su preovlađivali bakteroidi (do 10 9 -10 10 po 1 g), broj E. coli je značajno smanjen (često čak i do 10 2 u 1 g) i laktobacila.

Kod zdravih svinja (prema našim podacima) mikroflora dušnika i velikih bronhija nije se značajno razlikovala ni kvantitativno ni kvalitativno od prosječnih pokazatelja i bila je vrlo slična mikroflori čovjeka. Njihovu crijevnu mikrofloru također su karakterizirale određene sličnosti. Mikroflora buraga preživara karakteriziraju specifičnosti. To je uglavnom zbog prisutnosti bakterija koje razgrađuju vlakna. Međutim, celulolitičke bakterije (i fnbrolitičke bakterije općenito), karakteristične za probavni trakt preživača, nikako nisu simbionti samo ovih životinja. Tako u cekumu svinja i mnogih biljojeda važnu ulogu imaju razbijači celuloznih i hemiceluloznih vlakana, uobičajeni za preživače, kao što su Bacteroides succinogenes, Ruminococcus flavefaciens, Bacteroides ruminicola i drugi (V. H. Varel, 1987).

5. Nnormalna tjelesna mikroflora i patogeni mikroorganizmi

Gore navedeni obavezni makroorganizmi su uglavnom predstavnici pepatogene mikroflore. Mnoge vrste uključene u ove grupe nazivaju se čak i simbiontima makroorganizma (laktobakterije, bifldobakterije) i korisne su za to. Određene korisne funkcije identificirane su kod mnogih nepatogenih vrsta klostridija, bacteroides, eubakterija, enterokoka, nepatogene Escherichia coli, itd. Ovi i drugi predstavnici tjelesne mikroflore nazivaju se „normalnom“ mikroflorom. No, s vremena na vrijeme, u mikrobiocenozu koja je fiziološka za makroorganizam uključeni su i manje bezopasni, oportunistički i visoko patogeni mikroorganizmi. U budućnosti, ovi patogeni mogu:

b postoje u tijelu duže ili manje dugo kao dio cjelokupnog kompleksa njegove automikroflore; u takvim slučajevima nastaje prijenos patogenih mikroba, ali kvantitativno još uvijek prevladava normalna mikroflora;

b biti istisnut (brzo ili nešto kasnije) iz makroorganizma od strane korisnih simbiotičkih predstavnika normalne (autohtone) mikroflore i eliminisan;

b da se razmnožavaju, istiskujući normalnu mikrofloru na način da, uz određeni stepen kolonizacije makroorganizma, mogu izazvati odgovarajuću bolest.

U crijevima životinja i ljudi, na primjer, pored određenih vrsta nepatogenih klostridija, C. perfringens živi u malim količinama. U cjelokupnoj mikroflori zdrave životinje količina C. perfringens ne prelazi 10 - 11 5 na 1 g. Međutim, u prisustvu određenih stanja, eventualno povezanih s poremećajima normalne mikroflore, patogena C. perfringens se razmnožava na crevne sluzokože u ogroman broj(10 7 --10 9 ili više), uzrokujući anaerobna infekcija. U tom slučaju čak istiskuje normalnu mikrofloru i može se otkriti u skarifikaciji ilealne sluznice u gotovo čistoj kulturi. Na sličan način Intestinalna koliformna infekcija razvija se u tankom crijevu mladih životinja, samo što se tu jednako brzo razmnožavaju patogeni tipovi E. coli; kod kolere, površina crijevne sluznice je kolonizirana Vibrio cholerae itd.

6. Mortofunkcionalna uloga i metabolička funkcija automikroflore organizma

Automikroflora utječe na makroorganizam nakon njegovog rođenja na način da pod njenim utjecajem sazrijevaju i formiraju se struktura i funkcije niza organa u kontaktu sa vanjskom sredinom. Na taj način poprimaju svoj morfofunkcionalni izgled kod odrasle životinje. gastrointestinalni, respiratorni, genitourinarni trakt i drugi organi. Nova oblast biološke nauke - gnotobiologija, koja se uspješno razvija od vremena L. Pasteura, omogućila je vrlo jasno razumijevanje da se mnoge imunobiološke osobine odraslog, normalno razvijenog životinjskog organizma formiraju pod utjecajem automikroflore. njegovog tela. Dobivene životinje bez klica (gnotobioti). carski rez a potom dugo držane u posebnim sterilnim gnotobiološkim izolatorima bez ikakvog pristupa njima za bilo kakvu održivu mikrofloru, imaju karakteristike embrionalnog stanja sluznice koja komunicira sa spoljašnjim okruženjem organa. Njihov imunobiološki status takođe zadržava embrionalne karakteristike. Hipoplazija limfoidnog tkiva uočava se prvenstveno u ovim organima. Životinje bez klica imaju manje imunokompetentnih ćelijskih elemenata i imunoglobulina. Međutim, karakteristično je da potencijalno organizam takve gnotobiotske životinje ostaje sposoban za razvoj imunobioloških sposobnosti, a samo zbog nedostatka antigenskih stimulansa koji dolaze iz automikroflore kod običnih životinja (počevši od rođenja) nije doživio prirodnu pojavu. razvoj koji utiče na celinu imunološki sistem općenito i lokalne limfoidne akumulacije sluzokože organa kao što su crijeva, respiratorni trakt, oko, nos, uho itd. Tako se u procesu individualni razvoj tijela životinje, iz njene automikroflore slijede efekti, uključujući antigene stimulanse, koji određuju normalno imunomorfofunkcionalno stanje obične odrasle životinje.

Mikroflora životinjskog tijela, posebno mikroflora gastrointestinalnog trakta, obavlja važne metaboličke funkcije za tijelo: utiče na apsorpciju u tankom crijevu, njeni enzimi sudjeluju u razgradnji i metabolizmu žučnih kiselina u crijevima i stvaraju neobične masnih kiselina u digestivnom traktu. Pod uticajem mikroflore dolazi do katabolizma nekih digestivnih enzima makroorganizma u crevima; enterokinaza i alkalna fosfataza se inaktiviraju, raspadaju, u debelom crijevu se raspadaju neki imunoglobulini digestivnog trakta koji su ispunili svoju funkciju itd. Mikroflora gastrointestinalnog trakta je uključena u sintezu mnogih vitamina neophodnih za makroorganizam. Njegovi predstavnici (na primjer, brojne vrste bakteroida, anaerobni streptokoki itd.) svojim enzimima su u stanju razgraditi vlakna i pektinske tvari koje su neprobavljive u životinjskom tijelu.

WITHspisak literature

1. Baltrashevich A.K. et al. Čvrsti medij bez krvi i njegove polutečne i tečne verzije za uzgoj bakteroida / Naučno-istraživačka laboratorija eksperimentalnih bioloških modela Akademije medicinskih nauka SSSR-a. M. 1978 7 str.

2. Goncharova G.I. O načinu uzgoja V. bifidum // Laboratorijski rad. 1968. br. 2. str. 100--102.

3. I. N. Blokhina E, S. Voronin et al. Smjernice o izolaciji i identifikaciji uslovno patogenih enterobakterija i salmonele u akutnim crijevnim bolestima mladih domaćih životinja / M: MBA, 1990. 32 str.

4. Petrovskaya V. G., Marco O. P. Ljudska mikroflora u normalnim i patološkim stanjima. M.: Medicina, 1976. 221 str.

5. Chakhava O. V. i dr. Mikrobiološke i imunološke osnove gnotobiologije. M.: Medicina, 1982. 159 str.

Objavljeno na Allbest.ru

...

Slični dokumenti

Karakteristike glavnih pokazatelja mikroflore tla, vode, zraka, ljudskog tijela i biljnog materijala. Uloga mikroorganizama u kruženju supstanci u prirodi. Utjecaj faktora okoline na mikroorganizme. Ciljevi i zadaci sanitarne mikrobiologije.

sažetak, dodan 06.12.2011

Određivanje i analiza glavnih karakteristika i suštine epifitske mikroflore - mikroorganizama koji žive na površini nadzemnih dijelova biljaka iu zoni njihove rizosfere. Upoznavanje sa karakteristične karakteristike, svojstveno predstavnicima epifitske mikroflore.

teze, dodato 01.02.2018

Sastav i djelatnost Zavoda za mikrobiologiju i imunologiju. Principi rada u mikrobiološkoj laboratoriji. Priprema pribora i alata. Tehnike uzorkovanja, inokulacije i pripreme hranljivih podloga. Metode za identifikaciju mikroorganizama.

izvještaj o praksi, dodan 19.10.2015

Uticaj fizičke aktivnosti na stanje organizma. Težište i raspodjela opterećenja pri kretanju. Fiziološki pokazatelji mišićne kondicije. Regulacija održavanja držanja i kretanja životinje. Uloga malog mozga u regulaciji položaja tijela.

sažetak, dodan 21.12.2013

Glavna svojstva mlijeka i uzroci patogene mikroflore. Suština biohemijskih procesa fermentacije i propadanja. Faze promjena u mikroflori svježeg mlijeka. Karakteristično fermentisani mlečni proizvodi, karakteristike njihove upotrebe od strane ljudi.

kurs, dodan 04.12.2012

Proučavanje glavnih dijelova gastrointestinalnog trakta. Proučavanje mikroflore ljudskog želuca i crijeva. Karakteristike sastava vrsta i prosječne koncentracije bakterija. Uloga enterokoka u osiguravanju kolonizacijske rezistencije sluzokože.

prezentacija, dodano 15.03.2017

test, dodano 27.09.2009

Geografske karakteristike Arktika. Svojstva i uslovi života obveznih psihofila, proučavanje zajednica paleoorganizama permafrost. Broj održive mikroflore u smrznutim stijenama, njeno proučavanje metodom kumulativnog uzgoja.

sažetak, dodan 29.03.2012

Proučavanje pojma fizičke i hemijske termoregulacije. Izotermija - konstantnost tjelesne temperature. Faktori koji utiču na tjelesnu temperaturu. Uzroci i znaci hipotermije i hipertermije. Lokacije za mjerenje temperature. Vrste groznica. Stvrdnjavanje tela.

prezentacija, dodano 21.10.2013

Analitički pregled podataka o raznolikost vrsta predstavnici mikrokosmosa rezervoara. Uslovi života morskih mikroorganizama. Učenje mikrokopiranjem. Grozdovi jednoćelijskih algi. Sastav mikroflore karakterističan za slatkovodno tijelo.

Intizarov Mihail Mihajlovič, akademik Ruske akademije poljoprivrednih nauka, prof..

PREDGOVOR

Kada razmišljate o načinima borbe protiv mnogih zarazne bolesti bakterijski i virusna etiologijačešće se fokusiraju na patogene mikroorganizme - uzročnike ovih bolesti, a rjeđe obraćaju pažnju na prateću normalnu mikrofloru životinjskog tijela. Ali u velikom broju slučajeva upravo obična mikroflora postaje od velike važnosti u nastanku ili razvoju bolesti, pospješujući ili sprječavajući njezino ispoljavanje. Ponekad obična mikroflora postaje izvor onih patogenih ili uslovno patogenih infektivnih agenasa koji izazivaju endogenu infekciju, ispoljavanje sekundarnih infekcija itd. U drugim okolnostima, kompleks obične mikroflore životinjskog organizma blokira puteve i mogućnosti za razvoj bolesti. infektivni proces uzrokovan određenim patogenim mikroorganizmima. Dakle, poznavati sastav, svojstva, kvantitativne karakteristike, biološki značaj različite grupe a predstavnici normalne tjelesne mikroflore (sisari, uključujući domaće životinje, farmske životinje i ljude) trebaju biti liječnici, biolozi, stočarski radnici, univerzitetski nastavnici i naučnici.

Uvod

Mikroflora sisara, uključujući domaće životinje, domaće životinje i ljude, počela je da se proučava zajedno sa razvojem mikrobiologije kao nauke, dolaskom velikih otkrića L. Pasteura, R. Kocha, I. I. Mečnikova, njihovih učenika i saradnici. Tako je T. Escherich 1885. godine iz fecesa djece izolovao obaveznog predstavnika crijevne mikroflore - E. coli, koji se nalazi u gotovo svih sisara, ptica, riba, gmizavaca, vodozemaca, insekata itd. Nakon 7 godina, pojavili su se prvi podaci o važnosti crijevnih štapića za vitalnu aktivnost, zdravlje makroorganizma. S. O. Jensen (1893) je ustanovio da različite vrste i sojevi E. coli mogu biti i patogeni za životinje (uzrokujući septičku bolest i dijareju kod teladi) i nepatogeni, odnosno potpuno bezopasni, pa čak i korisni stanovnici crijeva životinja i čovjeka. G. Tissier je 1900. godine otkrio bifidne bakterije i limete u izmetu novorođenčadi i obavezne predstavnike normalne crijevne mikroflore tijela u svim periodima njegovog života. Štapići mliječne kiseline (L. acidophilus) izolovao je Moreau 1900. godine.

Definicije, terminologija

Normalna mikroflora je otvorena biocenoza mikroorganizama koji se nalaze kod zdravih ljudi i životinja (V.G. Petrovskaya, O.P. Marko, 1976). Ova biocenoza treba da bude karakteristika potpuno zdravog organizma; fiziološka je, odnosno doprinosi održavanju zdravog statusa makroorganizma i pravilnom obavljanju njegovih normalnih fizioloških funkcija. Čitava mikroflora životinjskog tijela može se nazvati i automikroflora (prema značenju riječi „auto”), odnosno mikroflora bilo kojeg sastava (O. V. Chakhava, 1982) datog organizma u normalnim i patološkim stanjima.

Niz autora normalnu mikrofloru, povezanu samo sa zdravim stanjem organizma, dijeli na dva dijela:

1) obavezan, stalni dio, nastao u filogenezi i ontogenezi V proces evolucije, koji se naziva i autohtoni (tj. lokalni), autohtoni (autohtoni), rezidentni, itd.;

2) fakultativni ili prolazni.

Sastav automikroflore može povremeno uključivati patogene mikroorganizme koji slučajno prodiru u makroorganizam.

Sastav vrste i kvantitativne karakteristikemikroflore najvažnijih dijelova tijela životinje

U pravilu, desetine i stotine vrsta raznih mikroorganizama povezane su s tijelom životinje. Oni , kako pišu V.G. Petrovskaya i O.P. Marko (1976), oni su obavezni za organizam u cjelini. Mnoge vrste mikroorganizama nalaze se u mnogim dijelovima tijela, razlikuju se samo kvantitativno. Moguće su kvantitativne varijacije u istoj mikroflori u zavisnosti od vrste sisara. Većinu životinja karakteriziraju opći prosječni pokazatelji za niz područja njihovog tijela. Na primjer, distalne, donje dijelove gastrointestinalnog trakta karakteriziraju sljedeće mikrobne grupe identificirane u crijevnom sadržaju ili fecesu (Tabela 1).

Na vrhu tabele. 1. Prikazani su samo obavezni anaerobni mikroorganizmi - predstavnici crijevne flore. Sada je utvrđeno da strogo anaerobne vrste u crijevima čine 95-99%, a potpuno aerobne i fakultativne anaerobne vrste preostalih 1-5%.

Raspodjela mikroorganizama po dijelovima gastrointestinalnog trakta

Zbog visoke kiselosti želudačnog soka, želudac sadrži mali broj mikroorganizama; To su uglavnom kiselorezistentne mikroflore - laktobacili, streptokoki, kvasac, sardine itd. Broj mikroba je 10 3 /g sadržaja.

Mikroflora duodenuma i jejunuma

U crijevima se nalaze mikroorganizmi. Da ih nema ni na jednom odjeljenju, onda ne bi došlo do peritonitisa mikrobne etiologije zbog ozljede crijeva. Samo u proksimalnim dijelovima tankog crijeva ima manje vrsta mikroflore nego u debelom crijevu. To su laktobacili, enterokoki, sardine, pečurke, u donjim dijelovima raste broj bifidobakterija i E. coli. Kvantitativno, ova mikroflora se može razlikovati kod različitih pojedinaca. Moguć je minimalan stepen kontaminacije (10 1 - 10 3 /g sadržaja), a značajan - 10 3 - 10 4 /g Količina i sastav mikroflore debelog creva prikazani su u tabeli. 1.

Mikroflora kože

Glavni predstavnici mikroflore kože su difteroze (korinebakterije, propionske bakterije), plijesni, kvasci, aerobni bacili (bacili) koji nose spore, stafilokoki (prvenstveno dominira S. epidermidis, ali je i S. aureus prisutan u malim količinama na zdravoj koži ) .

Mikroflora respiratornog trakta

Na sluznicama respiratornog trakta najviše mikroorganizama ima u području nazofarinksa, iza larinksa njihov broj je znatno manji, još manje u velikim bronhima, a u dubini pluća zdravog organizma nema mikroflore na sve.

U nosnim prolazima nalaze se difteroidi, prvenstveno bakterije rožnjače, trajni stafilokoki (rezidentni S. epi dermidis), neisseria, bakterije hemofilusa, streptokoke (alfa-hemolitički); u nazofarinksu - korinebakterije, streptokoke (S. mitts, S. salivarius, itd.), stafilokoke, Neisseoii, ViloNella, bakterije hemofilusa, enterobakterije, bacteroides, gljivice, enterokoke, laktobacile, Pseudomosatils, a više vrsta bakterija B. prolazno pronađeno je, itd.

Mikroflora dubljih dijelova respiratornog trakta je manje proučavana (A - Halperin - Scott et al., 1982). Kod ljudi je to zbog poteškoća u dobivanju materijala. Kod životinja je materijal pristupačniji za istraživanje (mogu se koristiti ubijene životinje). Proučavali smo mikrofloru srednjeg respiratornog trakta kod zdravih svinja, uključujući njihovu minijaturnu (laboratorijsku) sortu; rezultati su prikazani u tabeli. 2.

Prva četiri predstavnika identifikovana su konstantno (100%), manje rezidentni (1/2-1/3 slučaja) su identifikovani: laktobacili (10 2 -10 3), Escherichia coli (10 2 -III 3), plijesni (10 2 -10 4), kvasac. Drugi autori su zabilježili prolazno nošenje Proteusa, Pseudomonas aeruginosa, klostridija i predstavnika aerobnih bacila. S tim u vezi, jednom smo identifikovali Bacteroides melaninoge - nicus.

Mikroflora porođajnog kanala sisara

Istraživanja posljednjih godina, uglavnom stranih autora (Boyd, 1987; A. B. Onderdonk et al., 1986; J. M. Miller et al., 1986; A. N. Masfari i dr., 1986; H. Knothe u. a. 1987), su pokazala da Mikroflora koja kolonizira (tj. naseljava) sluzokožu porođajnog kanala vrlo je raznolika i bogata vrstama. Komponente normalne mikroflore su široko zastupljene, sadrži mnogo striktno anaerobnih mikroorganizama (tabela 3).

Međutim, pravilno formirana (odabrana u procesu evolucije) normalna mikroflora životinjskog tijela ne nastanjuje u potpunosti njeno tijelo odmah, već u roku od nekoliko dana, uspijevajući se umnožavati u određenim razmjerima. V. Brown daje sljedeći redoslijed njegovog formiranja u prva 3 dana života novorođenčeta: bakterije se otkrivaju u prvim uzorcima uzetim iz tijela novorođenčeta odmah nakon rođenja. Tako su na nosnoj sluznici u početku dominirali koagulaza negativni stafilokoki (S. epidermidis); na sluznici ždrijela - isti stafilokoki i streptokoki, kao i mala količina epterobakterija. U rektumu 1. dana već su pronađeni E. coli, enterokoki i isti stafilokoki, a do trećeg dana nakon rođenja ustanovljena je mikrobna biocenoza, uglavnom uobičajena za normalnu mikrofloru debelog crijeva (W. Braun , F. Spenckcr u. a. , 1987).

Razlike u tjelesnoj mikroflori različitih životinjskih vrsta

Navedeni obavezni predstavnici mikroflore karakteristični su za većinu domaćih i poljoprivrednih sisara i ljudski organizam. Ovisno o vrsti životinje, broj mikrobnih grupa se može mijenjati, ali ne i njihov sastav vrsta. Kod pasa je broj E. coli i laktobacila u debelom crijevu isti kao što je prikazano u tabeli. 1. Međutim, bifidobakterije su bile za red veličine niže (10 8 u 1 g), streptokoke (S. lactis, S. mitis, enterokoki) i klostridije su bile za red veličine više. Kod pacova i miševa (laboratorijski) broj bacila mliječne kiseline (bakterije mliječne kiseline) povećan je za istu količinu, a bilo je više streptokoka i klostridija. Ove životinje su imale malo E. coli u crijevnoj mikroflori i smanjen je broj bifidobakterija. Broj E. coli je također smanjen kod zamoraca (prema V.I. Orlovsky). U izmetu zamoraca, prema našim istraživanjima, E. coli se nalazio u granicama od 10 3 -10 4 na 1 g. Kod kunića su preovlađivali bakteroidi (do 10 9 -10 10 na 1 g), broj E. coli je značajno smanjen (često čak i do 10 2 u 1 g) i laktobacila.

Mikroflora buraga preživara karakteriziraju specifičnosti. To je uglavnom zbog prisutnosti bakterija koje razgrađuju vlakna. Međutim, celulolitičke bakterije (i fibrolitičke bakterije općenito), karakteristične za probavni trakt preživača, nikako nisu simbionti samo ovih životinja. Tako u cekumu svinja i mnogih biljojeda važnu ulogu imaju razbijači celuloznih i hemiceluloznih vlakana, uobičajeni za preživače, kao što su Bacteroides succi-nogenes, Ruminococcus flavefaciens, Bacteroides ruminicola i drugi (V. H. Varel, 1987).

Normalna mikroflora organizma i patogeni mikroorganizmi

a) postoje u tijelu duže ili manje dugo
kao dio cjelokupnog kompleksa svoje automikroflore; u takvim slučajevima nastaje prijenos patogenih mikroba, ali kvantitativno još uvijek prevladava normalna mikroflora;

b) biti istisnut (brzo ili nešto kasnije) iz makroorganizma od strane korisnih simbiotskih predstavnika normalne mikroflore i eliminisan;

c) razmnožavaju se, istiskujući normalnu mikrofloru na način da uz određeni stepen kolonizacije makroorganizma mogu izazvati odgovarajuću bolest.

U crijevima životinja i ljudi, na primjer, pored određenih vrsta nepatogenih klostridija, C. perfringens živi u malim količinama. U cjelokupnoj mikroflori zdrave životinje količina C. perfringens ne prelazi 10-15 milijardi po 1 g. Međutim, u prisustvu određenih stanja, eventualno povezanih s poremećajima normalne mikroflore, patogena C. perfringens se razmnožava na crijevnu sluznicu u ogromnim količinama (10 7 -10 9 ili više), uzrokujući anaerobnu infekciju. U tom slučaju čak istiskuje normalnu mikrofloru i može se otkriti u skarifikaciji ilealne sluznice u gotovo čistoj kulturi. Na sličan način, crijevna koinfekcija se razvija u tankom crijevu mladih životinja, samo se patogeni tipovi E. coli tamo jednako brzo razmnožavaju; kod kolere, površina crijevne sluznice je kolonizirana Vibrio cholerae itd.

Biološka uloga (funkcionalni značaj) normalne mikroflore

Tijekom života životinje, patogeni i uvjetno patogeni mikroorganizmi povremeno dolaze u kontakt i prodiru u njeno tijelo, postajući dio općeg kompleksa mikroflore. Ako ovi mikroorganizmi ne mogu odmah izazvati bolest, onda neko vrijeme koegzistiraju s drugom mikroflorom tijela, ali su češće prolazni. Tako su za usnu šupljinu, među patogenim i uslovno patogenim fakultativnim prolaznim mikroorganizmima, predstavnici P, aeruginosa, C. perfringens, C. albicans (rodova Esoherichia, Klebsiella, Proteus; za crijeva su i još patogenije enterobakterije, kao i B fragilis, C. tetani, C. sporogenes, Fusobacterium necrophorum, neki predstavnici roda Campylobacter, crijevne spirohete (uključujući patogene, oportunističke) i mnoge druge. S. aureus je karakterističan za kožu i sluzokožu; trakt - poznati i kao pneumokoki itd.

Međutim, uloga i značaj korisne, simbiotske normalne mikroflore organizma je u tome što ove patogene fakultativno-prolazne mikroorganizme ne pušta lako u svoju okolinu, u prostorne ekološke niše koje već zauzima. Navedeni predstavnici autohtonog dijela normalne mikroflore prvi su, još za vrijeme prolaska novorođenčeta kroz rodni kanal majke, zauzeli svoje mjesto u tijelu životinje, odnosno kolonizirali njenu kožu, gastrointestinalni i respiratorni trakt, genitalijama i drugim dijelovima tijela.

Mehanizmi koji sprječavaju kolonizaciju (invaziju) životinjskog tijela od strane patogene mikroflore

Utvrđeno je da najveće populacije autohtonog, obaveznog dijela normalne mikroflore zauzimaju karakteristična mjesta u crijevima, svojevrsnoj teritoriji u crijevnoj mikrosredini (D. Savage, 1970). Proučavali smo ovu ekološku osobinu bifidobakterija i bakteroida i otkrili da one nisu ravnomjerno raspoređene u himusu po cijeloj šupljini crijevne cijevi, već su raspoređene u prugama i slojevima sluzi (mucina) koji prate sve krivine površine. sluzokože tankog crijeva. Djelomično su uz površinu epitelnih stanica sluznice. Budući da bifidobakterije, bakteroidi i drugi prvo koloniziraju ove podregije crijevnog mikrookruženja, one stvaraju prepreke mnogim patogenim mikroorganizmima koji kasnije prodiru u crijevo kako bi se približili i fiksirali (adheziju) na sluznici. A to je jedan od vodećih faktora, budući da je utvrđeno da za ostvarivanje svoje patogenosti (sposobnosti izazivanja bolesti) svi patogeni mikroorganizmi, uključujući i one koji izazivaju crijevne infekcije, moraju se zalijepiti na površinu crijevnih epitelnih stanica, zatim se na njoj razmnožavati, ili, prodirući dublje, kolonizirati ove iste ili slične podregije, na čijem području su ogromne populacije već razvile, na primjer, bifidobakterije. Ispostavilo se da u ovom slučaju bifidna flora zdravog tijela štiti crijevnu sluznicu od nekih patogena, ograničavajući njihov pristup površini epitelnih staničnih membrana i receptorima na epitelnim stanicama na koje se patogeni mikrobi trebaju fiksirati.

Za mnoge predstavnike autohtonog dijela normalne mikroflore poznat je i niz drugih mehanizama antagonizma prema patogenoj i oportunističkoj mikroflori:

Proizvodnja hlapljivih masnih kiselina sa kratkim lancem atoma ugljika (formira ih striktno anaerobni dio normalne mikroflore);

Formiranje slobodnih metabolita žuči (laktobakterije, bifidobakterije, bakteroidi, enterokoki i mnogi drugi mogu ih formirati dekonjugacijom žučnih soli);

Proizvodnja lizozima (karakteristična za laktobacile, bifidobakterije);

Zakiseljavanje okoline tokom proizvodnje organskih kiselina;

Proizvodnja kolicina i bakteriocina (streptokoki, stafilokoki, Escherichia coli, Neisseria, propaonske bakterije itd.);

Sinteza različitih supstanci sličnih antibioticima od strane mnogih mikroorganizama mliječne kiseline - Streptococcus lactis, L. acidofil, L. fermentum, L. brevis, L. helveticus, L. pjantarum, itd.;

Konkurencija nepatogenih mikroorganizama srodnih patogenim vrstama sa patogenim vrstama za iste receptore na ćelijama makroorganizma, za koje se moraju vezati i njihovi patogeni srodnici;

Apsorpcija simbiotskih mikroba iz normalne mikroflore nekih važne komponente i elemente nutritivnih resursa (na primjer željezo) neophodnih za život patogenih mikroba.

Mnogi od ovih mehanizama i čimbenika prisutnih u predstavnicima mikroflore životinjskog tijela, kada se kombiniraju i međusobno djeluju, stvaraju svojevrsni učinak barijere - prepreku proliferaciji oportunističkih i patogenih mikroorganizama u određenim dijelovima tijela životinje. Otpornost makroorganizma na kolonizaciju patogena, koju stvara njegova uobičajena mikroflora, naziva se kolonizacijska rezistencija. Ovu otpornost na kolonizaciju patogenom mikroflorom uglavnom stvara kompleks korisne vrste strogo anaerobni mikroorganizmi koji su dio normalne mikroflore: razni predstavnici rodova - Bifidobacterium, Bacteroides, Eubacterium, Fusobacterium, Clostridium (nepatogeni), kao i fakultativni anaerobi, na primjer, rod Lactobacill - non-pathogenic E. coli, S. faecalis, S. faecium i drugi. Upravo ovaj dio striktno anaerobnih predstavnika normalne mikroflore tijela dominira u veličini populacije u cjelokupnoj crijevnoj mikroflori u rasponu od 95-99%. Iz tih razloga se normalna mikroflora tijela često smatra dodatnim faktorom nespecifične otpornosti tijela zdrave životinje i čovjeka.

Veoma je važno stvoriti i održavati uslove pod kojima se direktno ili indirektno formira kolonizacija novorođenčeta normalnom mikroflorom. Veterinari, administrativni i ekonomski radnici i stočari moraju na odgovarajući način pripremiti majke za porođaj, voditi porođaj i osigurati hranjenje novorođenčadi kolostrumom i mlijekom. Moramo voditi računa o stanju normalne mikroflore porođajnog kanala.

Veterinari trebaju imati na umu da je normalna mikroflora porođajnog kanala zdravih ženki ono fiziološki utemeljeno uzgoj korisnih mikroorganizama, koji će odrediti pravilan razvoj cjelokupne mikroflore tijela buduće životinje. Ako je porođaj nekompliciran, onda mikroflora ne bi trebala biti poremećena neopravdanim terapijskim, preventivnim i drugim utjecajima; ne ubacivati u porođajni kanal bez dovoljno uvjerljivih indikacija antiseptici, antibiotike koristite razumno.

KonceptOdisbakterioza

Postoje slučajevi kada je evolucijski utvrđen omjer vrsta u normalnoj mikroflori narušen ili kvantitativni odnosi između najvažnijih grupa mikroorganizama automikroflore organizma, ili se mijenja kvaliteta samih mikrobnih predstavnika. U ovom slučaju dolazi do disbioze. A to otvara put patogenim i uslovno patogenim predstavnicima automikroflore, koji mogu da invaziju ili se razmnožavaju u organizmu i uzrokuju bolesti, disfunkcije itd. Ispravan dizajn normalne mikroflore koja se razvila u procesu evolucije, njeno eubiotičko stanje , sputava uslovno patogeni dio u određenim granicama automikroflore životinjskog tijela.

Morfofunkcionalna uloga i metabolička funkcija automikroflore organizma

Automikroflora utječe na makroorganizam nakon njegovog rođenja na način da pod njenim utjecajem sazrijevaju i formiraju se struktura i funkcije niza organa u kontaktu sa vanjskom sredinom. Na taj način gastrointestinalni, respiratorni, genitourinarni i drugi organi dobijaju svoj morfofunkcionalni izgled kod odrasle životinje. Nova oblast biološke nauke - gnotobiologija, koja se uspješno razvija od vremena L. Pasteura, omogućila je vrlo jasno razumijevanje da se mnoge imunobiološke osobine odraslog, normalno razvijenog životinjskog organizma formiraju pod utjecajem automikroflore. njegovog tela. Životinje bez klica (gnotobioti), dobijene carskim rezom i potom držane duže vrijeme u posebnim sterilnim gnotobiološkim izolatorima bez ikakvog pristupa bilo kakvoj održivoj mikroflori, imaju karakteristike embrionalnog stanja sluznice koja komunicira sa vanjskom okolinom. organi. Njihov imunobiološki status takođe zadržava embrionalne karakteristike. Hipoplazija limfoidnog tkiva uočava se prvenstveno u ovim organima. Životinje bez klica imaju manje imunokompetentnih ćelijskih elemenata i imunoglobulina. Međutim, karakteristično je da potencijalno organizam takve gnotobiotske životinje ostaje sposoban za razvoj imunobioloških sposobnosti, a samo zbog nedostatka antigenskih stimulansa koji dolaze iz automikroflore kod običnih životinja (počevši od rođenja) nije doživio prirodnu pojavu. razvoj koji utiče na ceo imuni sistem uopšte, i lokalne limfoidne akumulacije sluzokože organa kao što su creva, respiratorni trakt, oko, nos, uho itd. Dakle, u procesu individualnog razvoja organizma životinje, upravo iz njegove automikroflore dolazi do utjecaja, uključujući antigene stimuluse, koji uzrokuju normalno imunomorfofunkcionalno stanje obične odrasle životinje.

Neke metode za praćenje stanja mikroflore životinjskog tijela

Praćenje stanja mikroflore kod pojedinih životinja ili njihovih grupa omogućit će pravovremeno ispravljanje neželjenih promjena u važnom autohtonom dijelu normalne mikroflore, ispravljanje poremećaja umjetnim unošenjem korisnih bakterijskih predstavnika, na primjer bifidobakterija ili laktobacila, itd. , te spriječiti razvoj disbioze u vrlo teški oblici. Takva kontrola se može postići ako se u pravom trenutku mikrobiološke studije sastav vrsta i kvantitativni odnosi, prvenstveno u autohtonoj strogo anaerobnoj mikroflori pojedinih dijelova tijela životinje. Za bakteriološko istraživanje uzimaju sluz iz sluzokože, sadržaja organa, pa čak i samog tkiva organa.

Uzimanje materijala. Za pregled debelog crijeva može se koristiti izmet, posebno sakupljen sterilnim epruvetama - kateterima - ili drugim metodama u sterilne posude. Ponekad je potrebno uzeti sadržaj različitim odjelima gastrointestinalnog trakta ili drugih organa. To je moguće uglavnom nakon klanja životinja. Na ovaj način je moguće dobiti materijal iz jejunuma, dvanaestopalačnog creva, želuca itd. Uzimanje preseka creva sa njihovim sadržajem omogućava određivanje mikroflore kako šupljine probavnog kanala tako i crevnog zida preparacijom. strugotine, homogenati sluzokože ili crijevnog zida. Uzimanje materijala od životinja nakon klanja također omogućava potpunije i sveobuhvatnije određivanje normalne mikroflore gornjeg i srednjeg respiratornog trakta porođaja (dušnik, bronhi, itd.).

Kvantitativno istraživanje. Za određivanje količine različitih mikroorganizama, materijal uzet od životinje na ovaj ili onaj način koristi se za pripremu 9-10 deseterostrukih razrjeđenja (od 10 1 do 10 10) u sterilnom fiziološkom rastvoru ili nekolicini (odgovarajući vrsti mikrob) sterilna tečna hranljiva podloga. Zatim se iz svakog razrjeđivanja, počevši od manjeg do više koncentriranog, siju na odgovarajuće hranljive podloge.

Budući da su ispitivani uzorci biološki supstrati sa mješovitom mikroflorom, potrebno je odabrati podloge na način da svaki zadovolji potrebe rasta željenog mikrobnog roda ili vrste i istovremeno inhibira rast druge prateće mikroflore. Stoga je poželjno da mediji budu selektivni. By biološka uloga a značaj u normalnoj mikroflori, važniji je njen autohtoni strogo anaerobni dio. Tehnike za njegovo otkrivanje zasnivaju se na upotrebi odgovarajućih hranljivih podloga i posebnih metoda anaerobnog uzgoja; Većina gore navedenih strogo anaerobnih mikroorganizama može se uzgajati na novom, obogaćenom i univerzalnom hranljivom mediju br. 105 A.K. Baltrashevich et al. (1978). Ovaj medij ima složen sastav i stoga može zadovoljiti potrebe rasta širokog spektra mikroflore. Opis ovog okruženja može se naći u priručniku „Teorijske i praktične osnove gnotobiologije“ (M.: Kolos, 1983). Razne opcije Ova podloga (bez dodatka sterilne krvi, sa krvlju, gusta, polutečna itd.) omogućava uzgoj mnogih obaveznih anaerobnih vrsta, u anaerostatima u mješavini plina bez kisika i van anaerostata, koristeći polutečnu verziju medijuma br. 105 u epruvetama.

Bifidobakterije također rastu na ovoj podlozi ako joj se doda 1% laktoze. Međutim, zbog izuzetno velika količina komponente koje nisu uvijek dostupne i složeni sastav medijuma br. 105 može uzrokovati poteškoće u njegovoj proizvodnji. Stoga je preporučljivije koristiti Blaurockov medij, koji nije ništa manje efikasan u radu s bifidobakterijama, ali jednostavniji i pristupačniji za proizvodnju (Goncharova G.I., 1968). Njegov sastav i priprema: odvar od jetre - 1000 ml, agar-agar - 0,75 g, pepton - 10 g, laktoza - 10 g, cistin - 0,1 g, kuhinjska so (hemijska so) - 5 g. Prvo pripremite dekokciju od jetre : 500 g svježe goveđe džigerice, narezane na sitno, dodati 1 litar destilovane vode i kuhati 1 sat; istaložiti i filtrirati kroz filter od pamučne gaze, dodati destilovanu vodu do prvobitne zapremine. Ovom odvaru se dodaju rastopljeni agar-agar, pepton i cistin; postavite pH = 8,1-8,2 koristeći 20% natrijum hidroksida i kuhajte 15 minuta; ostavite da odstoji 30 minuta I filtriran. Filtrat se dovede do 1 litre destilovanom vodom i doda mu laktozu. Zatim sipajte 10-15 ml u epruvete i parno sterilizirajte tekućom parom (Blokhina I.N., Voronin E.S. et al., 1990).'

Da bi se ovim podlogama dala selektivna svojstva, potrebno je uvesti odgovarajuća sredstva koja inhibiraju rast druge mikroflore. Za identifikaciju bakteroida, to su neomicin, kanamicin; za spiralno zakrivljene bakterije (na primjer, crijevne spirohete) - spektinomicin; za anaerobne koke iz roda Veillonella - vankomicin. Za izolaciju bifidobakterija i drugih gram-pozitivnih anaeroba iz mješovitih populacija mikroflore, u podlogu se dodaje natrijum-azid.

Za određivanje kvantitativnog sadržaja laktobacila u materijalu preporučljivo je koristiti Rogosa slani agar. Selektivna svojstva mu daje dodatak octene kiseline, koja stvara pH = 5,4 u ovoj sredini.

Neselektivni medij za laktobacile može biti hidrolizat mlijeka sa kredom: u litar pasteriziranog, obranog mlijeka (pH -7,4-7,6), koje ne sadrži antibiotske nečistoće, dodati 1 g pankreatina u prahu i 5 ml hloroforma; periodično protresite; stavite u termostat na 40° C 72 sata, zatim filtrirajte, postavite pH = 7,0-7,2 i sterilizirajte na 1 atm. 10 min. Dobijeni hidrolizat se razblaži vodom 1:2, doda se 45 g praha krede sterilisanog zagrevanjem i 1,5-2% agar-agara, zagreva se dok se agar ne otopi i ponovo steriliše u autoklavu. Prije upotrebe medij se pokosi. Po želji, bilo koji agens za selekciju može se uvesti u medijum.

Možete identificirati i odrediti nivo stafilokoka na prilično jednostavnom hranljivom mediju - mesno pepton agar sa soli glukoze (MPA sa 10% kuhinjska so i 1-2% glukoze); enterobakterije - na Endo mediju i drugim podlogama, recepti za koje se mogu naći u bilo kojim mikrobiološkim priručnicima; kvasac i gljive - na Sabouraudovu mediju. Preporučljivo je identificirati aktinomicete na Krasilnikovovoj podlozi CP-1, koja se sastoji od 0,5 disupstituiranog kalijevog fosfata. 0,5 g magnezijum sulfata, 0,5 g natrijum hlorida, 1,0 g kalijum nitrata, 0,01 g gvožđe sulfata, 2 g kalcijum karbonata, 20 g skroba, 15-20 g agar-agara i do 1 litra destilovane vode. Sve sastojke otopiti, promiješati, zagrijati dok se agar ne otopi, postaviti pH = 7, filtrirati, sipati u epruvete, sterilizirati u autoklavu na 0,5 atm. 15 minuta, pokositi prije sjetve.

Za identifikaciju enterokoka poželjna je selektivna podloga (agar-M) u pojednostavljenoj verziji sljedećeg sastava: u 1 litru rastopljene sterilne MPA dodati 4 g disupstituiranog fosfata, rastvorenog u minimalnoj količini sterilne destilovane vode, 400 mg takođe rastvorenog natrijum aeida; 2 g otopljene glukoze (ili gotova sterilna otopina 40% glukoze - 5 ml). Pomeri sve. Nakon što se smeša ohladi na približno 50°C, dodati TTX (2,3,5-trifeniltetrazolijum hlorid) - 100 mg, rastvorenog u sterilnoj destilovanoj vodi. Promiješati, ne sterilizirati podlogu, odmah sipati u sterilne Petrijeve zdjelice ili epruvete. Entero koki rastu na ovoj podlozi u obliku malih, sivo-bijelih kolonija. Ali češće, zbog primjesa TTX-a, kolonije euterokoka dobivaju tamnu boju trešnje (cijela kolonija ili njeno središte).

Aerobni bacili koji nose spore (B. subtilis i drugi) se lako identifikuju nakon zagrijavanja ispitnog materijala na 80°C u trajanju od 30 minuta. Zatim se zagrijani materijal inokulira sa MPA ili 1MPB i nakon normalne inkubacije (37°C sa pristupom kiseoniku), prisustvo ovih bacila se utvrđuje njihovim rastom na površini podloge u obliku filma (na MPB). ).

Broj korinebakterija u materijalima iz različitih dijelova tijela životinje može se odrediti pomoću Buchinovog medija (proizveden u gotovom obliku od strane Dagestanskog instituta za suhe hranjive podloge). Može se obogatiti dodavanjem 5% sterilne krvi. Neisseria se otkriva na Bergeinoj podlozi sa ristomicinom: u 1 litru rastopljenog Hottinger agara (manje poželjan MPA) dodati 1% maltoze, sterilno rastvorenu u destilovanoj vodi (10 g maltoze možete rastvoriti u minimalnoj količini vode i prokuvati u vodeno kupatilo), 15 ml 2% - rastvora u vodi rastvorljivog plavog (anilinsko plavo rastvorljivo u vodi), rastvora ristomicina iz; obračun 6,25 jedinica. po 1 ml medijuma. Promiješati, ne sterilizirati, sipati u sterilne Petrijeve zdjelice ili epruvete. Gram-negativne koke iz roda Neisseria rastu u obliku malih do srednje velikih kolonija plave ili plave boje. Bakterije Haemophilus influenzae mogu se izolovati na podlozi koja se sastoji od čokoladnog agara (iz konjske krvi) sa bacitracinom kao selektivnim agensom. .

Metode identifikacije oportunističkih mikroorganizama (Pseudomonas aeruginosa, Proteus, Klebsiella, itd.). Dobro poznat ili se može naći u većini bakterioloških priručnika.

BIBLIOGRAFSKI LIST

Basic

Baltrashevich A.K. et al. Čvrsti medij bez krvi i njegove polutečne i tečne verzije za uzgoj bakteroida / Naučno-istraživačka laboratorija eksperimentalnih bioloških modela Akademije medicinskih nauka SSSR-a. M. 1978 7 str. Bibliografija 7 naslova Dep. u VNIIMI 7.10.78, br. D. 1823.

Goncharova G.I. O načinu uzgoja V. bifidum // Laboratorijski rad. 1968. № 2. P. 100-1 D 2.

Metodološke preporuke za izolaciju i identifikaciju oportunističkih enterobakterija i salmonele kod akutnih crijevnih bolesti mladih domaćih životinja / I. N. Blokhina E., S. Voronin et al. KhM: MBA, 1990. 32 str.

Petrovskaya V. G., Marko O. P. Ljudska mikroflora u normalnim i patološkim stanjima. M.: Medicina, 1976. 221 str.

Chakhava O. V. i dr. Mikrobiološke i imunološke osnove gnotobiologije. M.: Medicina, 1982. 159 str.

Knothe N. u. a. Vaginales Keimspektrum//FAC: Fortschr. antimlkrob, u. antirieoplastischen Chemotherapie. 1987. Bd. 6-2. S. 233-236.

Koopman Y. P. et al. Povezivanje štakora bez klica s različitim rnikroflorama // Zeitschrift fur Versuchstierkunde. 1984. Bd. 26, N 2. S. 49-55.

Varel V. H. Aktivnost mikroorganizama koji razgrađuju vlakna u debelom crijevu svinje //J. Anim. Nauka. 1987. V. 65, N 2. P. 488-496.

Dodatno

Boyd M. E. Postoperativne ginekološke infekcije//Can. J. Surg. 1987.

V. 30,’N 1. str. 7-9.

Masfari A. N., Duerden B, L, Kirighorn G. R. Kvantitativne studije vaginalnih bakterija // Genitourin. Med. 1986. V. 62, N 4. P. 256-263.

Metode kvantitativne i kvalitativne procjene vaginalne mikrofiore tokom menstruacije / A. B. Onderdonk, G. A. Zamarchi, Y. A. Walsh et al. //Appl. i Environ. Mikrobiologija. 1936. V. 51, N 2. P. 333-339.

Miller J. M., Pastorek J. G. Mikrobiologija prijevremene rupture membrana // Clin. Obstet. i Gyriecol. 1986. V. 29, N 4. P. 739-757.

rjeđe izolirani od zdravog tijela.

Tijelo životinje obično sadrži stotine vrsta mikroorganizama; među njima dominiraju bakterije. Virusi i protozoe su zastupljeni znatno manjim brojem vrsta. Često je nemoguće povući jasnu granicu između saprofita i patogenih mikroba koji su dio normalne mikroflore. Krv i unutrašnji organi životinja su praktično sterilni. Neke šupljine u kontaktu s vanjskim okruženjem - maternica i mjehur - također ne sadrže mikrobe. Mikrobi u plućima se brzo uništavaju. Ali u usnoj šupljini, u nosu, u crijevima, u vagini postoji stalna normalna mikroflora, karakteristična za svako područje tijela (autohtona). U prenatalnom periodu organizam se razvija u sterilnim uslovima šupljine materice, a njegova primarna kontaminacija nastaje tokom prolaska kroz porođajni kanal i prvog dana kontakta sa okolinom. Zatim, tokom niza godina nakon rođenja, formira se mikrobni “pejzaž” karakterističan za određene biotope njegovog tijela. Među normalnom mikroflorom postoje rezidentna (stalna) obavezna mikroflora i prolazna (nestalna) mikroflora, koje nisu sposobne za dugotrajno postojanje u organizmu.

Normalna mikroflora je skup mikroorganizama koji se nalaze kod zdravih ljudi i životinja; pomaže u održavanju fizioloških funkcija i zdravog statusa makroorganizma. Normalna mikroflora, povezana samo sa zdravim stanjem organizma, dijeli se na dva dijela: 1) obvezni, stalni dio, nastao u procesu evolucije i 2) fakultativni, odnosno prolazni.

3) patogeni mikroorganizmi koji slučajno prodru u makroorganizam mogu povremeno biti uključeni u automikrofloru.

U pravilu, desetine i stotine vrsta raznih mikroorganizama su povezane s tijelom životinje. Mnoge vrste mikroorganizama se nalaze u raznim oblastima tijela, mijenjajući se samo kvantitativno. Većina organizama ima zajedničke prosječne vrijednosti za brojne dijelove svog tijela.

Dakle, mikrofloru kože predstavljaju korinebakterije, propionske bakterije, kalupi, kvasac, spore aerobne bacile, stafilokoke sa dominacijom S. epidermidis, iu malim količinama S. aureus (isti onaj koji se stalno luči tokom otitisa).

Zbog visoke kiselosti želudac sadrži mali broj mikroorganizama; U osnovi, to su mikroflora otporna na kiseline - laktobacili, streptokoki, kvasac, sardine itd. Broj mikroba tamo je 10*3/g sadržaja. Crijeva su mnogo obilnije naseljena; u proksimalnim dijelovima tankog crijeva ima manje vrsta mikroflore - razgradnja hrane se događa zbog vlastitih enzima - u debelom crijevu ih je mnogo više. To su laktobacili, enterokoki, sardine, pečurke, au donjim dijelovima raste broj bifidobakterija i E. coli. Kod pasa je količina bifidobakterija 10*8 po 1 g, za red veličine veća (tabelarni podaci) od streptokoka (S. lactis, S. mitis, enterokoka) i klostridija. Kvantitativno, ova mikroflora se može razlikovati kod različitih pojedinaca.

Ova tabela daje listu glavnih mikroorganizama koji naseljavaju gastrointestinalni trakt.

Mikroflora koja naseljava sluzokožu porođajnog kanala vrlo je raznolika i bogata vrstama. U procentima je predstavljeno: Bacteroides – 17%; Bifidobakterije do 80%; peptokoke i peptokoke 20%; Klostridija 1%.

Ako uporedimo mikrofloru porođajnog kanala s mikroflorom drugih dijelova tijela, nalazimo da je mikropejzaž majke u tom pogledu sličan glavnim grupama mikrobnih stanovnika tijela budućeg organizma. Mora se uzeti u obzir da je kod zdrave žene fetus sterilan do početka porođaja.

Normalna mikroflora životinjskog tijela potpuno naseli njeno tijelo u roku od nekoliko dana nakon rođenja, uspijevajući se razmnožavati u određenim omjerima. Dakle, u rektumu 1. dana već se otkrivaju E. coli, enterokoki i stafilokoki, a do trećeg dana nakon rođenja ustanovljena je normalna mikrobna biocenoza.

Na sluznicama respiratornog trakta najviše mikroorganizama je u području nazofarinksa, dalje uz uzlazne puteve njihov broj značajno opada; u dubini pluća zdravog organizma uopće nema mikroflore.

U nosnim prolazima nalaze se difteroidi, prvenstveno kornebakterije, trajni stafilokoki (rezidentni S. epidermidis), neisseria, bakterije hemofilusa, streptokoke (alfa-hemolitički); u nazofarinksu - korinebakterije, streptokoke (S. mitts, S. salivarius, itd.), stafilokoke, Neisseria, Vilonella, bakterije hemofilusa, enterobakterije, bacteroides, gljivice, enterokoke, laktobacili, Pseudomonas aerrobacile su tipovi sub. B. prolazno pronađeno i sl.

tab. iz rada akademika Ruske akademije poljoprivrednih nauka, prof. Intizarova M.M.

Obavezni mikroorganizmi su uglavnom predstavnici nepatogene mikroflore. Mnoge vrste uključene u ove grupe su esencijalne (laktobakterije, bifidobakterije). Određene korisne funkcije su identificirane kod mnogih nepatogenih vrsta klostridija, bacteroides, eubakterija, enterokoka, nepatogene Escherichia coli, itd. Stoga se nazivaju „normalnom“ mikroflorom. Ali fiziološka mikrobiocenoza za makroorganizam također uključuje s vremena na vrijeme manje bezopasne, oportunističke i patogene mikroorganizme. U budućnosti, ovi patogeni mogu:

a) postoje duže ili manje dugo u takvim slučajevima, formira se nosilac patogenih mikroba, ali kvantitativno prevladava normalna mikroflora;

b) biti istisnut iz makroorganizma od strane korisnih simbiotičkih predstavnika normalne mikroflore i eliminisan;

c) razmnožavaju se, istiskujući normalnu mikrofloru i izazivajući odgovarajuću bolest.

Na primjer, patogena C. perfrtngens može se razmnožavati na crijevnoj sluznici u količinama (10 * 7 -10 * 9 ili više), uzrokujući anaerobnu infekciju. U tom slučaju čak istiskuje normalnu mikrofloru i može se otkriti u skarifikaciji ilealne sluznice. Na sličan način se crijevna koinfekcija razvija u tankom crijevu mladih životinja, samo se u njemu razmnožavaju patogeni tipovi E. coli.

Prolazni mikroorganizmi gastrointestinalnog trakta

Naziv mikrobnih grupa	Broj mikroba u 1g. materijal
Enterobacteria Klebsiela, Proteus, Enterobacter, Citrobacter	0 – 10*6
Pseudomonas	0 – 10*4
Staphylococci incl. Epidermidis, S. aureus	103 – 104
Streptococci	Do 10*7
Difteroidi	0 – 10*4
Aerobni bacili subtilis	103 – 104
Gljive, aktinomicete	10*3

tab. iz rada akademika Ruske akademije poljoprivrednih nauka, prof. Intizarova M.M.

Tijekom života životinje, patogeni i uvjetno patogeni mikroorganizmi povremeno dolaze u kontakt i prodiru u njeno tijelo, postajući dio općeg kompleksa mikroflore. Tako za usnu šupljinu, među patogenim i oportunističkim fakultativno-prolaznim mikroorganizmima, mogu biti tipični P, aeruginosa, C. perfringens, C. albicans, predstavnici (rodova Esoherichia, Klebsiela, Proteus), a za crijeva su čak i patogene enterobakterije, kao i B. fragilis, C. tetani, C. sporogenes, Fusobacterium necrophorum, neki predstavnici roda Campylobacter, crijevne spirohete. trakt, itd.

Fakultativna mikroflora porođajnog kanala najčešće je predstavljena sljedećim varijantama.

tab. iz rada akademika Ruske akademije poljoprivrednih nauka, prof. Intizarova M.M.

Veterinarski stručnjaci i uzgajivači trebaju imati na umu da normalna mikroflora porođajnog kanala zdravih ženki određuje pravilan razvoj cjelokupne mikroflore tijela buduće životinje. Stoga ga ne treba narušavati neopravdanim terapijskim, preventivnim i drugim uticajima; ne unosite antiseptike u porođajni kanal bez dovoljno uvjerljivih indikacija.

Veterinarska ambulanta “VetLiga” vrši prikupljanje materijala sa naknadnim prenosom u infektivnu bolnicu radnim danima, uz prethodnu prijavu putem telefona. 2 300-440